技術特征：

1.一種熒光探針PMPA，特征在于，其結(jié)構(gòu)式為：

2.如權(quán)利要求1所述的一種熒光探針PMPA的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)按摩爾比3:3-5將1-乙酰芘、6-甲氧基-吡啶-二甲醛溶解于無水乙醇中，并且在室溫下攪拌至反應物完全溶解，呈淡黃色溶液；

(2)然后加入氫氧化鈉溶液,常溫下繼續(xù)攪拌32小時，TLC跟蹤反應；

(3)最后加入無水乙醇，生成黃色的絮狀沉淀；靜置，抽濾，干燥，即得到黃色固體PMPA。

3.一種定量熒光檢測酸性條件下pH的方法，其特征在于，步驟為：

(1)用DMSO配制1mM的熒光探針PMPA儲備液；

(2)將2.0mL蒸餾水以及30.0μL熒光探針PMPA儲備液加入熒光比色皿中，在熒光分光光度儀上檢測，隨著待測樣的加入，527nm處的熒光強度逐漸減弱，417nm處的熒光強度逐漸增強；

(3)以pH為橫坐標，以相對熒光強度I_417nm/I_527nm為縱坐標繪制圖并進行Sigmoidal擬合，求得pK_a＝2.70；通過線性擬合得到熒光探針的最佳線性響應范圍為pH1.26-3.97，回歸方程為：I_417nm/I_527nm＝-4.64×pH+19.87，線性相關系數(shù)為R²＝0.9906。

4.一種定量熒光檢測堿性條件下pH的方法，其特征在于，步驟為：

(1)用DMSO配制1mM的熒光探針PMPA儲備液；

(2)將2.0mL蒸餾水以及30.0μL熒光探針PMPA儲備液加入熒光比色皿中，在熒光分光光度儀上檢測，隨著待測樣的加入，527nm處的熒光強度逐漸減弱，460nm處的熒光強度逐漸增強；

(3)以pH為橫坐標，以相對熒光強度I_527nm/I_460nm為縱坐標繪制圖并進行Sigmoidal擬合，求得pK_a＝9.32；通過線性擬合得到熒光探針的最佳線性響應范圍為pH8.50-10.35，回歸方程為：I_527nm/I_460nm＝-1.15×pH+12.46，線性相關系數(shù)為R²＝0.9904。

5.一種定量熒光檢測HSO₃^-的方法，其特征在于，步驟為:

(1)用DMSO配制1mM的熒光探針PMPA儲備液；

(2)將2.0mL pH＝4.00的PBS緩沖溶液以及30.0μL熒光探針PMPA儲備液加入熒光比色皿中，在熒光分光光度儀上檢測，隨著待測樣的加入，527nm處的熒光強度逐漸減弱；

(3)以HSO₃^-濃度為橫坐標，以相對熒光強度△F為縱坐標繪制圖，得到HSO₃^-濃度的工作曲線，線性回歸方程為：△F＝63.53[HSO₃^-]+21.69，HSO₃^-濃度的單位為10^-6mol/L；線性相關系數(shù)為R²＝0.9943，最佳線性響應范圍為0μM-6.5μM，檢出限(LOD)為0.32μM。

6.如權(quán)利要求1所述的一種熒光探針PMPA在動物或微生物樣品中pH檢測中的應用。

7.如權(quán)利要求1所述的一種熒光探針PMPA在動物或微生物樣品中HSO₃^-檢測中的應用。

8.如權(quán)利要求1所述的一種熒光探針PMPA在動物或微生物細胞成像中的應用。