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一種流感病毒疫苗的生產(chǎn)方法與流程

文檔序號(hào):12108668閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種用vero細(xì)胞生產(chǎn)流感病毒的方法,其特征在于其培養(yǎng)基包含新橙皮苷二氫查爾酮。

2.權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:

所述培養(yǎng)基中新橙皮苷二氫查爾酮的濃度為0.8-1.5毫克/升。

3.一種流感病毒疫苗的生產(chǎn)方法,其步驟如下:

制備培養(yǎng)基:

以下含量以毫克/升計(jì)為:

新橙皮苷二氫查爾酮 0.8-1.5

L-色氨酸 10

L-半胱氨酸 100

L-異亮氨酸 225

L-亮氨酸 80-100

L-纈氨酸 100

L-精氨酸鹽酸鹽 650-800

L-賴氨酸 320-350

L-蛋氨酸 60

L-谷氨酸 50-82

L-苯丙氨酸 216

L-天冬酰胺 800-1000

甘氨酸 15

L-脯氨酸 180

L-丙氨酸 55

L-天冬氨酸 65-68

L-絲氨酸 290

L-蘇氨酸 50~300

L-谷氨酰胺 650-690

維生素C 60-99

煙酰胺 8

核黃素 0.6

鹽酸硫胺素 3.5

氯化膽堿 9

D-泛酸鈣 0.3

葉酸 3.8

六水氯化鎂 50

無水硫酸鎂 55

無水氯化鈣 100

氯化鉀 450

氯化鈉 5000

一水磷酸二氫鈉 200

磷酸氫二鈉 150

甘氨酸鐵 0.01

五水硫酸銅 0.0001~0.002;

酵母浸膏 8000;

亞油酸 0.01~0.1

亞麻酸 0.08-0.1;

碳酸氫鈉 3000

D-葡萄糖 3000~6000

次黃嘌呤鈉鹽 6

硫辛酸 0.1~0.4;

(2)使用上述培養(yǎng)基,將Vero細(xì)胞以0.3×106細(xì)胞數(shù)/毫升密度接種于5升攪拌式生物反應(yīng)器中,cytodex-1微載體濃度為4克/升,在細(xì)胞密度達(dá)到10.8*106細(xì)胞數(shù)/毫升直接按照M.O.I為0.01接種流感病毒,維持70小時(shí)即收獲。

4.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的方法,其特征在于:

所述新橙皮苷二氫查爾酮的結(jié)構(gòu)式為:

。

5.權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的方法,其特征在于:病毒的血凝效價(jià)為1:640以上。

6.權(quán)利要求3所述的方法,其特征在于:

所述培養(yǎng)基成分如下,以下含量以毫克/升計(jì)為

新橙皮苷二氫查爾酮 1.0

L-色氨酸 10

L-半胱氨酸 100

L-異亮氨酸 225

L-亮氨酸 90

L-纈氨酸 100

L-精氨酸鹽酸鹽 750

L-賴氨酸 340

L-蛋氨酸 60

L-谷氨酸 70

L-苯丙氨酸 216

L-天冬酰胺 900

甘氨酸 15

L-脯氨酸 180

L-丙氨酸 55

L-天冬氨酸 67

L-絲氨酸 290

L-蘇氨酸 145

L-谷氨酰胺 670

維生素C 83

煙酰胺 8

核黃素 0.6

鹽酸硫胺素 3.5

氯化膽堿 9

D-泛酸鈣 0.3

葉酸 3.8

六水氯化鎂 50

無水硫酸鎂 55

無水氯化鈣 100

氯化鉀 450

氯化鈉 5000

一水磷酸二氫鈉 200

磷酸氫二鈉 150

甘氨酸鐵 0.01

五水硫酸銅 0.001;

酵母浸膏 8000;

亞油酸 0.02

亞麻酸 0.09;

碳酸氫鈉 3000

D-葡萄糖 4000

次黃嘌呤鈉鹽 6

硫辛酸 0.3。

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