本實(shí)用新型涉及一種試劑盒，具體涉及一種神經(jīng)氨酸酶檢測(cè)試劑盒，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

神經(jīng)氨酸酶又稱唾液酸酶是分布于流感病毒被膜上的一種糖蛋白，它具有抗原性，可以催化唾液酸水解，協(xié)助成熟流感病毒脫離宿主細(xì)胞感染新的細(xì)胞，在流感病毒的生活周期中扮演了重要的角色。在甲型流感病毒中，神經(jīng)氨酸酶的抗原性會(huì)發(fā)生變異，這成為劃分甲型流感病毒亞型的依據(jù)，在目前已知的甲型流感病毒中共有9種不同的神經(jīng)氨酸酶抗原型，神經(jīng)氨酸酶檢測(cè)試劑盒(Neuraminidase Assay Kit)是一種用熒光法快速高靈敏檢測(cè)神經(jīng)氨酸酶活性的試劑盒，現(xiàn)有的檢測(cè)試劑盒只具有包裝試劑的功能，并不能為檢測(cè)實(shí)驗(yàn)帶來(lái)幫助，但現(xiàn)有的很難克服上述問(wèn)題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本實(shí)用新型要解決的技術(shù)問(wèn)題是克服的現(xiàn)有的現(xiàn)有的檢測(cè)試劑盒只具有包裝試劑的功能的問(wèn)題，提供一種神經(jīng)氨酸酶檢測(cè)試劑盒。

為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本實(shí)用新型提供了如下的技術(shù)方案：

本實(shí)用新型提供了一種神經(jīng)氨酸酶檢測(cè)試劑盒，包括試劑盒、盒蓋、96孔熒光酶標(biāo)板、第一試管、第二試管、第三試管、第四試管、鉸鏈、鎖簧和鎖孔，所述試劑盒的頂部設(shè)置有所述盒蓋，所述盒蓋與所述試劑盒通過(guò)所述鉸鏈連接，所述試劑盒的底部設(shè)置有所述96孔熒光酶標(biāo)板，所述96孔熒光酶標(biāo)板的一側(cè)設(shè)置有所述第一試管，所述第一試管的一側(cè)設(shè)置有所述第二試管，所述第二試管的一側(cè)設(shè)置有所述第三試管，所述第三試管的一側(cè)設(shè)置有所述第四試管，所述盒蓋的表面設(shè)置有所述鎖簧，所述試劑盒的表面設(shè)置有所述鎖孔。

作為本實(shí)用新型的一種優(yōu)選技術(shù)方案，所述第一試管內(nèi)裝有神經(jīng)氨酸酶檢測(cè)緩沖液，所述第二試管內(nèi)裝有神經(jīng)氨酸酶，所述第三試管內(nèi)裝有神經(jīng)氨酸酶熒光底物，所述第四試管內(nèi)裝有Milli-Q水。

作為本實(shí)用新型的一種優(yōu)選技術(shù)方案，所述96孔熒光酶標(biāo)板表面有96個(gè)同樣規(guī)格均勻大小的小孔。

本實(shí)用新型所達(dá)到的有益效果是：該裝置是一種神經(jīng)氨酸酶檢測(cè)試劑盒，本試劑盒可以檢測(cè)來(lái)源于不同物種的神經(jīng)氨酸酶的酶活力，包括禽流感病毒的神經(jīng)氨酸酶的酶活力。試劑盒中提供了純化的神經(jīng)氨酸酶作為陽(yáng)性對(duì)照，便于檢測(cè)體系的建立。試劑盒中提供了可以被神經(jīng)氨酸酶催化產(chǎn)生熒光的底物，該底物被神經(jīng)氨酸酶催化后可以產(chǎn)生較強(qiáng)的熒光，從而實(shí)現(xiàn)了對(duì)神經(jīng)氨酸酶的快速高靈敏檢測(cè)。所產(chǎn)生的熒光物質(zhì)的最大激發(fā)波長(zhǎng)為322nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)為450nm。激發(fā)波長(zhǎng)在310-335nm，發(fā)射波長(zhǎng)在430-470nm有良好的檢測(cè)效果。用96孔板檢測(cè)時(shí)，一個(gè)包裝的本試劑盒可以檢測(cè)100個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品，整個(gè)裝置設(shè)計(jì)合理，使用方便，提供了一種神經(jīng)氨酸酶檢測(cè)試劑盒。

附圖說(shuō)明

附圖用來(lái)提供對(duì)本實(shí)用新型的進(jìn)一步理解，并且構(gòu)成說(shuō)明書(shū)的一部分，與本實(shí)用新型的實(shí)施例一起用于解釋本實(shí)用新型，并不構(gòu)成對(duì)本實(shí)用新型的限制。在附圖中：

圖1是本實(shí)用新型的結(jié)構(gòu)示意圖；

圖中：1、試劑盒；2、盒蓋；3、96孔熒光酶標(biāo)板；4、第一試管；5、第二試管；6、第三試管；7、第四試管；8、鉸鏈；9、鎖簧；10、鎖孔。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合附圖對(duì)本實(shí)用新型的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行說(shuō)明，應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的優(yōu)選實(shí)施例僅用于說(shuō)明和解釋本實(shí)用新型，并不用于限定本實(shí)用新型。

實(shí)施例1

如圖1所示，本實(shí)用新型提供一種神經(jīng)氨酸酶檢測(cè)試劑盒，包括試劑盒1、盒蓋2、96孔熒光酶標(biāo)板3、第一試管4、第二試管5、第三試管6、第四試管7、鉸鏈8、鎖簧9和鎖孔10,試劑盒1的頂部設(shè)置有盒蓋2，盒蓋2與試劑盒1通過(guò)鉸鏈8連接，試劑盒1的底部設(shè)置有96孔熒光酶標(biāo)板3，96孔熒光酶標(biāo)板3的一側(cè)設(shè)置有第一試管4，第一試管4的一側(cè)設(shè)置有第二試管5，第二試管5的一側(cè)設(shè)置有第三試管6，第三試管6的一側(cè)設(shè)置有第四試管7，盒蓋2的表面設(shè)置有鎖簧9，試劑盒1的表面設(shè)置有鎖孔10。

第一試管4內(nèi)裝有神經(jīng)氨酸酶檢測(cè)緩沖液，第二試管5內(nèi)裝有神經(jīng)氨酸酶，第三試管6內(nèi)裝有神經(jīng)氨酸酶熒光底物，第四試管7內(nèi)裝有Milli-Q水，便于盛集本實(shí)驗(yàn)所需的各種試劑。

96孔熒光酶標(biāo)板3表面有96個(gè)同樣規(guī)格均勻大小的小孔，用96孔板檢測(cè)時(shí)，一個(gè)包裝的本試劑盒可以檢測(cè)100個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品。

該裝置是一種神經(jīng)氨酸酶檢測(cè)試劑盒，當(dāng)需要用該裝置時(shí)，1.陽(yáng)性和陰性對(duì)照檢測(cè)的準(zhǔn)備：

a.在96孔熒光酶標(biāo)板內(nèi)每孔加入70微升神經(jīng)氨酸酶檢測(cè)緩沖液。

b.每孔再分別加入10或0微升神經(jīng)氨酸酶。

c.每孔再加入10微升溶解神經(jīng)氨酸酶的溶液。例如神經(jīng)氨酸酶在RIPA溶液中，則加10微升RIPA溶液。

d.每孔再加入0或10微升Milli-Q水使每孔總體積為90微升。

2.樣品檢測(cè)的準(zhǔn)備：

a.在96孔熒光酶標(biāo)板內(nèi)每孔加入70微升神經(jīng)氨酸酶檢測(cè)緩沖液。

b.每孔再加入10微升神經(jīng)氨酸酶樣品。

c.每孔再加入10微升Milli-Q水使每孔總體積為90微升。

3.檢測(cè)：

a.振動(dòng)混勻約1分鐘。

b.每孔加入10微升神經(jīng)氨酸酶熒光底物。

c.再振動(dòng)混勻約1分鐘。

d.37℃孵育30分鐘后進(jìn)行熒光測(cè)定。激發(fā)波長(zhǎng)為322nm，發(fā)射波長(zhǎng)為450nm。

4.計(jì)算：

根據(jù)檢測(cè)出來(lái)的熒光強(qiáng)度可以計(jì)算出樣品間神經(jīng)氨酸酶的相對(duì)活力。

如果受儀器所限，不能設(shè)置前述波長(zhǎng)，激發(fā)波長(zhǎng)在310-335nm，發(fā)射波長(zhǎng)在430-470nm也有良好的檢測(cè)效果。孵育時(shí)間可根據(jù)樣品中的酶活力適當(dāng)調(diào)整。在酶活力低或樣品量少時(shí)，可以延長(zhǎng)孵育時(shí)間(例如延長(zhǎng)時(shí)間至1、2或4小時(shí))，以提高檢測(cè)靈敏度。但當(dāng)酶活力很高時(shí)，孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)使反應(yīng)達(dá)到平臺(tái)期，此時(shí)宜縮短孵育時(shí)間。首次測(cè)定時(shí)，建議在孵育10、20、30、60、120分鐘后分別測(cè)定一次熒光強(qiáng)度，以確定比較理想的孵育時(shí)間。

最后應(yīng)說(shuō)明的是：以上所述僅為本實(shí)用新型的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本實(shí)用新型，盡管參照前述實(shí)施例對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)行了詳細(xì)的說(shuō)明，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，其依然可以對(duì)前述各實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對(duì)其中部分技術(shù)特征進(jìn)行等同替換。凡在本實(shí)用新型的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本實(shí)用新型的保護(hù)范圍之內(nèi)。