本發(fā)明是關(guān)于式(i)的新穎(r)-2-甲基-哌嗪衍生物及其作為醫(yī)藥的用途。本發(fā)明亦是關(guān)于相關(guān)方面，包括制備該等化合物的方法、含有一或多種式(i)化合物的醫(yī)藥組合物及尤其其作為cxcr3受體調(diào)節(jié)劑的用途。趨化因子受體是一組以高親和力結(jié)合肽趨化因子配體的g蛋白偶聯(lián)受體(gpcr)。趨化因子受體的主要功能是在休眠條件下以及在發(fā)炎期間引導(dǎo)白血球運(yùn)動至淋巴器官及組織，但亦已識別某些趨化因子受體對非造血細(xì)胞及其祖先的作用。趨化因子受體cxcr3是結(jié)合至發(fā)炎性趨化因子cxcl9的g蛋白偶聯(lián)受體(初始稱為mig、干擾素-γ[inf-γ]誘導(dǎo)的單核因子)、cxcl10(ip-10，inf-γ-誘導(dǎo)蛋白10)及cxcl11(i-tac，inf-γ-誘導(dǎo)的t細(xì)胞α化學(xué)引誘劑)。cxcr3主要表現(xiàn)于活化t輔助細(xì)胞1型(th1)淋巴球，但亦存在于天然殺傷細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突細(xì)胞及b淋巴球的子組上。三種cxcr3配體主要在發(fā)炎性條件下表現(xiàn)，極少在健康組織中表現(xiàn)。例如暴露于發(fā)炎性細(xì)胞因子(例如干擾素-γ或tnf-α)后可表現(xiàn)cxcr3配體的細(xì)胞包括各種各樣的基質(zhì)細(xì)胞(例如內(nèi)皮細(xì)胞、纖維母細(xì)胞、上皮細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞)，且亦包括造血細(xì)胞(例如巨噬細(xì)胞及單核球)。cxcr3與其配體(在下文中稱為cxcr3軸)的相互作用涉及引導(dǎo)受體攜載細(xì)胞至體內(nèi)的特定位置、具體地至發(fā)炎、免疫損傷及免疫功能失調(diào)的位點(diǎn)且亦與組織損害、細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)、細(xì)胞生長及血管生成抑制相關(guān)聯(lián)。cxcr3及其配體上調(diào)且高度表現(xiàn)于各種各樣的病理情況中，包括自體免疫病癥、發(fā)炎、感染、移植排斥、纖維化、神經(jīng)變性及癌癥。cxcr3軸在自體免疫病癥中的作用已由若干臨床前及臨床觀察結(jié)果證實(shí)。其中發(fā)炎性病變的組織學(xué)分析或患者的血清含量揭示cxcr3配體含量升高或cxcr3陽性細(xì)胞的數(shù)量增加的自體免疫病癥包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(ra)、全身性紅斑狼瘡(sle)、狼瘡性腎炎、多發(fā)性硬化(ms)、發(fā)炎性腸病(ibd；包含克羅恩氏病(crohn’sdisease)及潰瘍性結(jié)腸炎)及i型糖尿病(groom,j.r.及l(fā)uster,a.d.immunolcellbiol2011,89,207；groom,j.r.及l(fā)uster,a.d.expcellres2011,317,620；lacotte,s.、brun,s.、muller,s.及dumortier,h.annnyacadsci2009,1173,310)。由于cxcr3配體的表現(xiàn)在健康組織中極低，因此上文所列舉的相關(guān)證據(jù)強(qiáng)烈地表明cxcr3在人類自體免疫疾病中的作用。利用cxcr3缺陷小鼠(缺乏cxcr3配體中的一者或使用阻斷cxcr3或其配體中的一者的功能的抗體的小鼠)的臨床前疾病模型進(jìn)一步證實(shí)cxcr3軸在免疫病理學(xué)中的作用。例如，已顯示缺乏cxcr3或cxcr3配體cxcl9的小鼠在狼瘡性腎炎的模型中顯示降低的病理學(xué)(menke,j.等人，jamsocnephrol2008,19,1177)。在腎炎的另一形式間質(zhì)性膀胱炎的動物模型中，施用阻斷cxcl10功能的抗體顯示降低環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的膀胱炎的病理學(xué)(sakthivel,s.k.等人，jimmunebasedthervaccines2008,6,6)。類似地，在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的大鼠模型中利用抗體阻斷cxcl10降低病理學(xué)(mohan,k.及issekutz,t.b.jimmunol2007,179,8463)。類似地，在發(fā)炎性腸病的鼠科動物模型中，針對cxcl10的阻斷抗體將在治療性環(huán)境中防止病理學(xué)(singh,u.p.等人，jinterferoncytokineres2008,28,31)。此外，利用來自cxcr3缺陷小鼠的組織實(shí)施的實(shí)驗(yàn)表明cxcr3在乳糜瀉(另一種自體免疫型病癥)中的作用(lammers,k.m.等人，gastroenterology2008,135,194)。與cxcr3軸的升高表現(xiàn)相關(guān)聯(lián)的發(fā)炎疾病包括慢性阻塞性肺病(copd)、氣喘、類肉瘤病、動脈粥樣硬化及心肌炎(groom,j.r.及l(fā)uster,a.d.immunolcellbiol2011,89,207；groom,j.r.及l(fā)uster,a.d.expcellres2011,317,620)。一個(gè)研究已顯示，在患有copd的吸煙者的肺中與健康個(gè)體相比cxcr3陽性細(xì)胞增加，且在患有copd的吸煙者的支氣管上皮呈現(xiàn)cxcr3-配體cxcl10的免疫反應(yīng)性，但在吸煙及不吸煙對照個(gè)體的支氣管上皮中未呈現(xiàn)(saetta,m.等人，amjrespircritcaremed2002,165,1404)。該等發(fā)現(xiàn)表明，cxcr3軸可涉及患有copd的吸煙者的外周氣道中發(fā)生的免疫細(xì)胞募集。與該等觀察結(jié)果一致，copd的臨床前研究揭露在cxcr3缺陷小鼠中香煙煙霧誘導(dǎo)的急性肺炎衰減(nie,l.等人，respirres2008,9,82)。在動脈粥樣硬化的一個(gè)研究中，在動脈粥樣硬化病變內(nèi)在所有t細(xì)胞上皆發(fā)現(xiàn)cxcr3表現(xiàn)。cxcr3配體cxcl9、cxcl10及cxcl11皆在與該等病變相關(guān)的內(nèi)皮細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)，此表明該等涉及在動脈粥樣硬化形成期間在血管壁病變內(nèi)觀察到的cxcr3陽性細(xì)胞、具體地活化t淋巴球的募集及滯留(mach,f.等人，jclininvest1999,104,1041)。臨床前研究進(jìn)一步支持cxcr3在動脈粥樣硬化發(fā)展中的作用。在缺乏apoe的小鼠中cxcr3遺傳缺失在腹部大動脈內(nèi)產(chǎn)生顯著降低的動脈粥樣硬化病變發(fā)展(veillard,n.r.等人，circulation2005,112,870)。cxcr3軸的關(guān)鍵作用亦已在器官移植后的排斥反應(yīng)及骨髓移植相關(guān)毒性中表明(groom,j.r.及l(fā)uster,a.d.expcellres2011,317,620)。臨床前，cxcr3缺陷小鼠顯示顯著耐同種異體移植物排斥性(hancock,w.w.等人，jexpmed2000,192,1515)。cxcr3配體血漿濃度亦與各種各樣的肝臟病理(包括人類的肝硬化及纖維化)正相關(guān)(tacke,f.,等人，liverint2011,31,840)。在腫瘤學(xué)領(lǐng)域中，已建議阻斷cxcr3軸幫助限制癌癥細(xì)胞轉(zhuǎn)移擴(kuò)散。例如，施用小分子cxcr3受體拮抗劑amg487可限制腫瘤細(xì)胞至肺的轉(zhuǎn)移(pradelli,e.等人，intjcancer2009,125,2586)。cxcr3在調(diào)控b細(xì)胞慢性淋巴球性白血病(cll)中的作用的功能證據(jù)已由trentin及合作者報(bào)導(dǎo)(trentin,l.等人，jclininvest1999,104,115)。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中，阻斷cxcr3軸可具有有益作用且防止神經(jīng)變性。cxcl10在cns中的表現(xiàn)增加已在局部缺血、阿茲海默氏病(alzheimer’sdisease)、多發(fā)性硬化(ms)及人類免疫缺陷病毒(hiv)-腦炎中證明。例如，離體實(shí)驗(yàn)已顯示與源自野生型小鼠的組織相比，源自cxcr3或cxcl10缺陷小鼠的組織的神經(jīng)元細(xì)胞死亡在神經(jīng)毒性nmda治療之后減少(vanweering,h.r.等人，hippocampus2011,21,220)。在期望鑒別在亨廷頓氏病(huntington’sdisease)模型中提供對抗htt片段誘導(dǎo)的神經(jīng)變性的神經(jīng)保護(hù)的藥物類分子的研究，鑒別出兩種cxcr3受體拮抗劑(reinhart,p.h.等人，neurobioldis2011,43,248)。作為cxcr3受體調(diào)節(jié)劑的4-噻唑基-六氫吡啶衍生物已在wo2007/064553及wo2007/070433中揭示。作為cxcr3受體調(diào)節(jié)劑的不同1-(哌嗪-1-基)-2-雜芳基-乙酮衍生物已在wo2007/100610、wo2010/126811、wo2013/114332、wo2015/011099、wo2015/145322中及在海報(bào)展示上(a.prokopowicz等人，optimizationofabiarylseriesofcxcr3antagonists,第244屆acs國際會議,philadelphia,us,2012年8月19日至23日)揭示?，F(xiàn)已在hergq-patch分析中發(fā)現(xiàn)式(i)的(r)-2-甲基-哌嗪衍生物是具有驚奇地改良的性質(zhì)的有效cxcr3調(diào)節(jié)劑，該分析指示qt延長的風(fēng)險(xiǎn)有所降低。該等衍生物可用于治療經(jīng)由cxcr3軸介導(dǎo)或維持的疾病，包括自體免疫病癥(例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、發(fā)炎性腸病、全身性紅斑狼瘡、狼瘡性腎炎、間質(zhì)性膀胱炎、乳糜瀉)、發(fā)炎性病癥(例如氣喘、copd、動脈粥樣硬化、心肌炎、類肉瘤病)、移植排斥、纖維化(例如肝硬化)、神經(jīng)變性及涉及神經(jīng)元死亡的病況(例如阿茲海默氏病、亨廷頓氏癥)及癌癥。1)在第一實(shí)施例中，本發(fā)明是關(guān)于式(i)的化合物其中r1表示(c1-4)烷基、(c1-2)烷氧基-(c1-2)烷基、羥基-(c1-4)烷基或-c(o)nh2；且r2表示(c3-6)環(huán)烷基、(c1-4)烷氧基、(c3-6)環(huán)烷氧基或(c1-2)氟烷基；且是關(guān)于該等化合物的鹽(具體而言醫(yī)藥上可接受的鹽)。為避免任何疑問，式(i)化合物是在哌嗪環(huán)的不對稱碳原子處(r)-構(gòu)形的。除非另有明確闡釋的定義提供更廣或更窄的定義，否則本文所提供的定義意在統(tǒng)一適用于如實(shí)施例1)至23)中任一者所定義的式(i)化合物及經(jīng)適當(dāng)變通后的整個(gè)說明書及申請專利范圍。應(yīng)充分了解，術(shù)語的定義或較佳定義是獨(dú)立于(及加以組合)如本文所定義任一或所有其他術(shù)語的任一定義或較佳定義來定義且可代替相應(yīng)術(shù)語。如實(shí)施例1)至23)中任一者所定義的式(i)的化合物可含有一或多個(gè)立體或異構(gòu)不對稱中心，例如一或多個(gè)不對稱碳原子。因此，式(i)的化合物可以立體異構(gòu)物的混合物或以立體異構(gòu)物富集形式、較佳作為純立體異構(gòu)物存在。可以本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方式分離立體異構(gòu)物的混合物。應(yīng)了解，在(例如)鏡像異構(gòu)物的上下文中使用的術(shù)語“經(jīng)富集”在本發(fā)明的上下文中尤其意指，相應(yīng)鏡像異構(gòu)物是以相對于相應(yīng)其他鏡像異構(gòu)物至少70:30的比率(經(jīng)適當(dāng)變通后：純度)、且特別地至少90:10的比率(經(jīng)適當(dāng)變通后：70％/90％的純度)存在。優(yōu)選，該術(shù)語是指相應(yīng)基本上純的鏡像異構(gòu)物。應(yīng)了解，在(例如)諸如“基本上純”等術(shù)語中使用的術(shù)語“基本上”在本發(fā)明的上下文中尤其意指，相應(yīng)立體異構(gòu)物/組合物/化合物等中至少90重量％、尤其至少95重量％且特別地至少99重量％的量是由相應(yīng)純立體異構(gòu)物/組合物/化合物等組成。術(shù)語“烷基”單獨(dú)或組合使用時(shí)是指含有1至4個(gè)碳原子的直鏈或具支鏈飽和烴鏈。術(shù)語“(cx-y)烷基”(x及y各自是整數(shù))是指如前文所定義含有x至y個(gè)碳原子的烷基。例如，(c1-4)烷基含有1至4個(gè)碳原子。(c1-4)烷基的實(shí)例是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基及叔丁基。(c1-2)烷基的實(shí)例是甲基及乙基。在r1表示“(c1-4)烷基”的情形下，該術(shù)語意指甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基及叔丁基；優(yōu)選指甲基、乙基、正丙基、異丙基及叔丁基；且更優(yōu)選乙基及異丙基。術(shù)語“烷氧基”單獨(dú)或組合使用時(shí)是指其中烷基是如前文所定義的烷基-o-基團(tuán)。術(shù)語“(cx-y)烷氧基”(x及y各自是整數(shù))是指如前文所定義含有x至y個(gè)碳原子的烷氧基。例如，(c1-4)烷氧基意指其中術(shù)語“(c1-4)烷基”具有先前給定意義的式(c1-4)烷基-o-的基團(tuán)。(c1-4)烷氧基的實(shí)例是甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基及叔丁氧基。(c1-2)烷氧基的實(shí)例是甲氧基及乙氧基。在r2表示“(c1-4)烷氧基”的情形下，該術(shù)語意指甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基及叔丁氧基且優(yōu)選乙氧基。術(shù)語“羥基-(c1-4)烷基”單獨(dú)或組合使用時(shí)是指如前文所定義含有1至4個(gè)碳原子的烷基，其中一個(gè)氫原子經(jīng)羥基代替。該等基團(tuán)的實(shí)例是羥基-甲基、1-羥基-乙基、2-羥基-乙基、1-羥基-丙-1-基、2-羥基-丙-1-基、3-羥基-丙-1-基、1-羥基-丙-2-基、2-羥基-丙-2-基、1-羥基-丁-1-基、2-羥基-丁-1-基、3-羥基-丁-1-基、4-羥基-丁-1-基、1-羥基-丁-2-基、2-羥基-丁-2-基、3-羥基-丁-2-基、4-羥基-丁-2-基、1-羥基-2-甲基-丙-1-基、2-羥基-2-甲基-丙-1-基、3-羥基-2-甲基-丙-1-基,及2-羥基-1,1-二甲基-乙-1-基。在“r1”表示“羥基-(c1-4)烷基”的情形下，該術(shù)語意指羥基-甲基、1-羥基-乙基、2-羥基-乙基、1-羥基-丙-1-基、2-羥基-丙-1-基、3-羥基-丙-1-基、1-羥基-丙-2-基、2-羥基-丙-2-基、1-羥基-丁-1-基、2-羥基-丁-1-基、3-羥基-丁-1-基、4-羥基-丁-1-基、1-羥基-丁-2-基、2-羥基-丁-2-基、3-羥基-丁-2-基、4-羥基-丁-2-基、1-羥基-2-甲基-丙-1-基、2-羥基-2-甲基-丙-1-基、3-羥基-2-甲基-丙-1-基，及2-羥基-1,1-二甲基-乙-1-基。優(yōu)選是羥基-甲基、1-羥基-乙基及2-羥基-丙-2-基且更優(yōu)選是1-羥基-乙基。術(shù)語“(cxa-ya)烷氧基-(cx-y)烷氧基”(x、xa、y及ya各自為整數(shù))是指如前文所定義含有x至y個(gè)碳原子的烷氧基，其中一個(gè)氫原子經(jīng)如前文所定義含有xa至ya個(gè)碳原子的(cxa-ya)烷氧基代替。例如，“(c1-2)烷氧基-(c1-2)烷基”是指如前文所定義含有一或兩個(gè)碳原子的(c1-2)烷基，其中一個(gè)氫原子經(jīng)如前文所定義含有一或兩個(gè)碳原子的(c1-2)烷氧基代替。(c1-2)烷氧基-(c1-2)烷基的實(shí)例是甲氧基-甲基、1-甲氧基-乙基、2-甲氧基-乙基、乙氧基-甲基、1-乙氧基-乙基及2-乙氧基-乙基。在“r1”表示“(c1-2)烷氧基-(c1-2)烷基”的情形下，該術(shù)語意指甲氧基-甲基、1-甲氧基-乙基、2-甲氧基-乙基、乙氧基-甲基、1-乙氧基-乙基及2-乙氧基-乙基且優(yōu)選甲氧基-甲基。術(shù)語“氟烷基”是指如前文所定義含有一或兩個(gè)碳原子的烷基，其中一或多個(gè)(且可能所有)氫原子經(jīng)氟代替。術(shù)語“(cx-y)氟烷基”(x及y各自是整數(shù))是指如前文所定義含有x至y個(gè)碳原子的氟烷基。例如，(c1-2)氟烷基含有一或兩個(gè)碳原子，其中1至5個(gè)氫原子經(jīng)氟代替。(c1-2)氟烷基的代表性實(shí)例包括氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、1-氟乙基、1,1-二氟乙基、2-氟乙基、2,2-二氟乙基及2,2,2-三氟乙基。在r2表示“(c1-2)氟烷基”的情形下，該術(shù)語優(yōu)選意指氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、1-氟乙基、1,1-二氟乙基、2-氟乙基、2,2-二氟乙基及2,2,2-三氟乙基，且更優(yōu)選三氟甲基。術(shù)語“環(huán)烷基”單獨(dú)或組合使用時(shí)是指含有3至6個(gè)碳原子的飽和碳環(huán)。術(shù)語“(cx-y)環(huán)烷基”(x及y各自是整數(shù))是指如前文所定義含有x至y個(gè)碳原子的環(huán)烷基。例如，(c3-6)環(huán)烷基含有3至6個(gè)碳原子。(c3-6)環(huán)烷基的實(shí)例是環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基及環(huán)己基。在“r2”表示“(c3-6)環(huán)烷基”的情形下，該術(shù)語意指環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基及環(huán)己基且優(yōu)選環(huán)丙基。術(shù)語“環(huán)烷氧基”單獨(dú)或組合使用時(shí)是指環(huán)烷基-o-基團(tuán)，其中環(huán)烷基是如前文所定義。術(shù)語“(cx-y)環(huán)烷氧基”(x及y各自是整數(shù))是指如前文所定義含有x至y個(gè)碳原子的環(huán)烷氧基。例如，(c3-6)環(huán)烷氧基意指式(c3-6)環(huán)烷基-o-基團(tuán)，其中術(shù)語“(c3-6)環(huán)烷基”具有先前給定的意義。(c3-6)環(huán)烷氧基的實(shí)例是環(huán)丙基氧基、環(huán)丁基氧基、環(huán)戊基氧基及環(huán)己基氧基。在r2表示“(c3-6)環(huán)烷氧基”的情形下，該術(shù)語意指環(huán)丙基氧基、環(huán)丁基氧基、環(huán)戊基氧基及環(huán)己基氧基且優(yōu)選環(huán)丁基氧基。2)本發(fā)明的另一實(shí)施例是關(guān)于根據(jù)實(shí)施例1)的式(i)化合物，其中r1表示(c1-4)烷基、(c1-2)烷氧基-(c1-2)烷基或羥基-(c1-4)烷基；且r2表示(c3-6)環(huán)烷基、(c1-4)烷氧基或(c1-2)氟烷基；且是關(guān)于該等化合物的鹽(具體而言醫(yī)藥上可接受的鹽)。3)本發(fā)明的另一實(shí)施例是關(guān)于根據(jù)實(shí)施例1)的式(i)化合物，其中r1表示(c1-4)烷基；且r2表示(c3-6)環(huán)烷基、(c1-4)烷氧基或(c1-2)氟烷基；且是關(guān)于該等化合物的鹽(具體而言醫(yī)藥上可接受的鹽)。4)本發(fā)明的另一實(shí)施例是關(guān)于根據(jù)實(shí)施例1)的式(i)化合物，其中r1表示甲基、乙基、正丙基、異丙基、叔丁基、甲氧基-甲基、羥基-甲基、1-羥基-乙基、2-羥基-丙-2-基或-c(o)nh2；且r2表示環(huán)丙基、乙氧基、環(huán)丁基氧基或三氟甲基；且是關(guān)于該等化合物的鹽(具體而言醫(yī)藥上可接受的鹽)。5)本發(fā)明的另一實(shí)施例是關(guān)于根據(jù)實(shí)施例1)的式(i)化合物，其中r1表示乙基、正丙基、異丙基、叔丁基、甲氧基-甲基或1-羥基-乙基；且r2表示環(huán)丙基、乙氧基或三氟甲基；且是關(guān)于該等化合物的鹽(具體而言醫(yī)藥上可接受的鹽)。6)本發(fā)明的另一實(shí)施例是關(guān)于根據(jù)實(shí)施例1)的式(i)化合物，其中r1表示乙基、正丙基、異丙基或叔丁基；且r2表示環(huán)丙基、乙氧基或三氟甲基；且是關(guān)于該等化合物的鹽(具體而言醫(yī)藥上可接受的鹽)。7)本發(fā)明的另一實(shí)施例是關(guān)于根據(jù)實(shí)施例1)的式(i)化合物，其中r1表示(c1-4)烷基或(c1-2)烷氧基-(c1-2)烷基；且r2表示(c3-6)環(huán)烷基；且是關(guān)于該等化合物的鹽(具體而言醫(yī)藥上可接受的鹽)。8)本發(fā)明的另一實(shí)施例是關(guān)于根據(jù)實(shí)施例1)的式(i)化合物，其中r1表示乙基、異丙基或叔丁基；且r2表示環(huán)丙基；且是關(guān)于該等化合物的鹽(具體而言醫(yī)藥上可接受的鹽)。9)本發(fā)明的另一實(shí)施例是關(guān)于根據(jù)實(shí)施例1)的式(i)化合物，其中r1表示(c1-4)烷基或(c1-2)烷氧基-(c1-2)烷基；且r2表示(c1-4)烷氧基；且是關(guān)于該等化合物的鹽(具體而言醫(yī)藥上可接受的鹽)。10)本發(fā)明的另一實(shí)施例是關(guān)于根據(jù)實(shí)施例1)的式(i)化合物，其中r1表示乙基、異丙基或叔丁基；且r2表示乙氧基；且是關(guān)于該等化合物的鹽(具體而言醫(yī)藥上可接受的鹽)。11)本發(fā)明的另一實(shí)施例是關(guān)于根據(jù)實(shí)施例1)的式(i)化合物，其中r1表示(c1-4)烷基、(c1-2)烷氧基-(c1-2)烷基、羥基-(c1-4)烷基或-c(o)nh2；且r2表示(c1-2)氟烷基；且是關(guān)于該等化合物的鹽(具體而言醫(yī)藥上可接受的鹽)。12)本發(fā)明的另一實(shí)施例是關(guān)于根據(jù)實(shí)施例1)的式(i)化合物，其中r1表示甲基、乙基、正丙基、異丙基、叔丁基、甲氧基-甲基、羥基-甲基、1-羥基-乙基、2-羥基-丙-2-基或-c(o)nh2；且r2表示三氟甲基；且是關(guān)于該等化合物的鹽(具體而言醫(yī)藥上可接受的鹽)。13)本發(fā)明的另一實(shí)施例是關(guān)于根據(jù)實(shí)施例1)的式(i)化合物，其中r1表示乙基、正丙基、異丙基、叔丁基、甲氧基-甲基或1-羥基-乙基；且r2表示三氟甲基；且是關(guān)于該等化合物的鹽(具體而言醫(yī)藥上可接受的鹽)。14)本發(fā)明的另一實(shí)施例是關(guān)于根據(jù)實(shí)施例1)、2)、7)、9)或11)中任一者的式(i)化合物，其中r1表示(c1-4)烷基；且是關(guān)于該等化合物的鹽(具體而言醫(yī)藥上可接受的鹽)。15)本發(fā)明的另一實(shí)施例是關(guān)于根據(jù)實(shí)施例1)至5)、7)、9)或11)至13)中任一者的式(i)化合物，其中r1表示乙基、正丙基、異丙基或叔丁基；且是關(guān)于該等化合物的鹽(具體而言醫(yī)藥上可接受的鹽)。16)本發(fā)明的另一實(shí)施例是關(guān)于根據(jù)實(shí)施例1)、2)、7)、9)或11)中任一者的式(i)化合物，其中r1表示(c1-2)烷氧基-(c1-2)烷基；且是關(guān)于該等化合物的鹽(具體而言醫(yī)藥上可接受的鹽)。17)本發(fā)明的另一實(shí)施例是關(guān)于根據(jù)實(shí)施例1)、2)或11)中任一者的式(i)化合物，其中r1表示羥基-(c1-4)烷基；且是關(guān)于該等化合物的鹽(具體而言醫(yī)藥上可接受的鹽)。18)本發(fā)明的另一實(shí)施例是關(guān)于根據(jù)實(shí)施例1)、2)、3)或14)至17)中任一者的式(i)化合物，其中r2表示(c3-6)環(huán)烷基；且是關(guān)于該等化合物的鹽(具體而言醫(yī)藥上可接受的鹽)。19)本發(fā)明的另一實(shí)施例是關(guān)于根據(jù)實(shí)施例1)、2)、3)或14)至17)中任一者的式(i)化合物，其中r2表示(c1-4)烷氧基；且是關(guān)于該等化合物的鹽(具體而言醫(yī)藥上可接受的鹽)。20)本發(fā)明的另一實(shí)施例是關(guān)于根據(jù)實(shí)施例1)或14)至17)中任一者的式(i)化合物，其中r2表示(c3-6)環(huán)烷氧基；且是關(guān)于該等化合物的鹽(具體而言醫(yī)藥上可接受的鹽)。21)本發(fā)明的另一實(shí)施例是關(guān)于根據(jù)實(shí)施例1)、2)、3)或14)至17)中任一者的式(i)化合物，其中r2表示(c1-2)氟烷基；且是關(guān)于該等化合物的鹽(具體而言醫(yī)藥上可接受的鹽)。22)如實(shí)施例1)中所定義的式(i)化合物的實(shí)例是選自由以下各項(xiàng)組成的群：1-{(r)-4-[4-(2-乙氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；1-{(r)-4-[4-(2-乙氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；2-(3-叔丁基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-4-[4-(2-乙氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-乙酮；1-{(r)-4-[4-(2-乙氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-甲氧基甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；1-(2-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-氧代-乙基)-1h-[1,2,4]三唑-3-甲酰胺；2-(3-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；2-(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；2-(3-叔丁基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；2-(3-甲氧基甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；2-(3-羥甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；1-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；2-[3-(1-羥基-乙基)-[1,2,4]三唑-1-基]-1-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；2-[3-(1-羥基-1-甲基-乙基)-[1,2,4]三唑-1-基]-1-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；1-{(r)-4-[4-(2-環(huán)丁氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；1-{(r)-4-[4-(2-環(huán)丙基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；1-{(r)-4-[4-(2-環(huán)丙基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；2-(3-叔丁基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-4-[4-(2-環(huán)丙基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-乙酮；1-{(r)-4-[4-(2-環(huán)丙基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-甲氧基甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；1-{(r)-4-[4-(2-乙氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；2-(3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；及1-{(r)-4-[4-(2-環(huán)丙基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；或該等化合物的鹽(具體而言醫(yī)藥上可接受的鹽)。23)因此，本發(fā)明是關(guān)于如實(shí)施例1)中所定義的式(i)化合物，及進(jìn)一步受實(shí)施例2)至22)中的任一者的特征限制的該等化合物，其皆在對其相應(yīng)依賴性的考慮下；是關(guān)于其醫(yī)藥上可接受的鹽；且是關(guān)于該等化合物作為藥劑的用途，其尤其用于治療與cxcr3受體的功能失調(diào)或藉助cxcr3進(jìn)行信號傳導(dǎo)的配體的功能失調(diào)的病癥，尤其例如自體免疫病癥、發(fā)炎疾病、傳染病、移植排斥、纖維化、神經(jīng)變性病癥及癌癥。因此，尤其地以下與式(i)化合物相關(guān)的實(shí)施例是可能的且意欲以個(gè)別化形式且以個(gè)別化形式具體揭示于此：1、2+1、3+1、4+1、5+1、6+1、7+1、8+1、9+1、10+1、11+1、12+1、13+1、14+1、14+2+1、14+7+1、14+9+1、14+11+1、15+1、15+2+1、15+3+1、15+4+1、15+5+1、15+7+1、15+9+1、15+11+1、15+12+1、15+13+1、16+1、16+2+1、16+7+1、16+9+1、16+11+1、17+1、17+2+1、17+11+1、18+1、18+2+1、18+3+1、18+14+1、18+14+2+1、18+14+7+1、18+14+9+1、18+14+11+1、18+15+1、18+15+2+1、18+15+3+1、18+15+4+1、18+15+5+1、18+15+7+1、18+15+9+1、18+15+11+1、18+15+12+1、18+15+13+1、18+16+1、18+16+2+1、18+16+7+1、18+16+9+1、18+16+11+1、18+17+1、18+17+2+1、18+17+11+1、19+1、19+2+1、19+3+1、19+14+1、19+14+2+1、19+14+7+1、19+14+9+1、19+14+11+1、19+15+1、19+15+2+1、19+15+3+1、19+15+4+1、19+15+5+1、19+15+7+1、19+15+9+1、19+15+11+1、19+15+12+1、19+15+13+1、19+16+1、19+16+2+1、19+16+7+1、19+16+9+1、19+16+11+1、19+17+1、19+17+2+1、19+17+11+1、20+1、20+14+1、20+14+2+1、20+14+7+1、20+14+9+1、20+14+11+1、20+15+1、20+15+2+1、20+15+3+1、20+15+4+1、20+15+5+1、20+15+7+1、20+15+9+1、20+15+11+1、20+15+12+1、20+15+13+1、20+16+1、20+16+2+1、20+16+7+1、20+16+9+1、20+16+11+1、20+17+1、20+17+2+1、20+17+11+1、21+1、21+2+1、21+3+1、21+14+1、21+14+2+1、21+14+7+1、21+14+9+1、21+14+11+1、21+15+1、21+15+2+1、21+15+3+1、21+15+4+1、21+15+5+1、21+15+7+1、21+15+9+1、21+15+11+1、21+15+12+1、21+15+13+1、21+16+1、21+16+2+1、21+16+7+1、21+16+9+1、21+16+11+1、21+17+1、21+17+2+1、21+17+11+1、22+1及23+1；在以上列表中，數(shù)字是指根據(jù)其上文所提供編號的實(shí)施例，而“+”指示依賴于另一實(shí)施例。不同的個(gè)別實(shí)施例由逗號分開。換言的，例如，“14+2+1”是指依賴于實(shí)施例2)、依賴于實(shí)施例1)的實(shí)施例14)，即實(shí)施例“14+2+1”對應(yīng)于進(jìn)一步受實(shí)施例2)及14)的特征限制的實(shí)施例1)的化合物。倘若使用化合物、鹽、醫(yī)藥組合物、疾病或諸如此類的復(fù)數(shù)形式，則此亦欲指單一化合物、鹽、醫(yī)藥組合物、疾病或諸如此類。若適當(dāng)且方便，如在實(shí)施例1)至23)中任一者中所定義對式(i)的化合物的任何提及均應(yīng)理解為亦提及該等化合物的鹽(且尤其醫(yī)藥上可接受的鹽)。術(shù)語“醫(yī)藥上可接受的鹽”是指保留目標(biāo)化合物的期望生物活性且展現(xiàn)最小不期望毒物學(xué)效應(yīng)的鹽。該等鹽包括無機(jī)或有機(jī)酸及/或堿加成鹽，此取決于目標(biāo)化合物中的存在的堿性及/或酸性基團(tuán)。對于參考文獻(xiàn)，例如參見“handbookofpharmaceuticalsalts.properties,selectionanduse.”,p.heinrichstahl、camilleg.wermuth(編輯),wiley-vch,2008；及“pharmaceuticalsaltsandco-crystals”,johanwouters及l(fā)ucquéré(編輯),rscpublishing,2012。本發(fā)明亦包括經(jīng)同位素標(biāo)記、尤其2h(氘)標(biāo)記的式(i)化合物，該等化合物與式(i)化合物相同，只是一或多個(gè)原子已各自由具有相同原子數(shù)但具有與在自然界中通常發(fā)現(xiàn)的原子量不同的原子量的原子代替。經(jīng)同位素標(biāo)記、尤其經(jīng)2h(氘)標(biāo)記的式(i)的化合物及其鹽在屬本發(fā)明的范圍內(nèi)。用較重同位素2h(氘)取代氫可使得代謝穩(wěn)定性提高，從而使得(例如)活體內(nèi)半衰期延長或劑量要求降低，或可使得對細(xì)胞色素p450酶的抑制降低，從而使得(例如)安全特性改良。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，式(i)的化合物未經(jīng)同位素標(biāo)記，或其僅經(jīng)一或多個(gè)氘原子標(biāo)記。在子實(shí)施例中，式(i)的化合物完全未經(jīng)經(jīng)同位素標(biāo)記?？梢灶愃朴谙挛闹兴龅姆椒ā⒌褂眠m宜試劑或起始材料的適當(dāng)同位素變化形式來制備經(jīng)同位素標(biāo)記的式(i)的化合物。當(dāng)使用詞語“介于……之間”闡述數(shù)值范圍時(shí)，應(yīng)了解所指示范圍的端點(diǎn)明確地包括在該范圍中。例如：若將溫度范圍闡述為介于40℃與80℃之間，則此意指端點(diǎn)40℃及80℃包含在該范圍中；或若將變量定義為介于1與4之間的整數(shù)，則此意指變量為整數(shù)1、2、3或4。除非所用關(guān)于溫度，否則置于數(shù)值“x”前的術(shù)語“約”(或“大約”)在本申請案中是指自x-10％x延伸至x+10％x的區(qū)間，且較佳是指自x-5％x延伸至x+5％x的區(qū)間。在溫度的特定情形下，置于溫度“y”前的術(shù)語“約”(或“大約”)在本申請案中是指自溫度y-10℃延伸至y+10℃的區(qū)間，且較佳是指自y-5℃延伸至y+5℃的區(qū)間。此外，本文所用術(shù)語“室溫”是指約25℃的溫度。實(shí)施例1)至23)中任一者所定義的式(i)化合物及其醫(yī)藥上可接受的鹽可用作藥劑，例如呈經(jīng)腸(例如尤其口服)或非經(jīng)腸(包括局部施加或吸入)施用的醫(yī)藥組合物形式。醫(yī)藥組合物的產(chǎn)生可以任一本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟悉的方式(參見例如remington,thescienceandpracticeofpharmacy，第21版(2005)，第5部分，“pharmaceuticalmanufacturing”[由lippincottwilliams&wilkins出版])藉由所述式(i)化合物或其醫(yī)藥上可接受的鹽(視情況與其他有治療價(jià)值的物質(zhì)組合)連同適宜的無毒、惰性、治療上兼容性固體或液體載劑物質(zhì)及(若需要)常用醫(yī)藥佐劑制成蓋侖(galenical)施用形式來實(shí)現(xiàn)。本發(fā)明亦關(guān)于預(yù)防或治療本文所提及疾病或病癥的方法，其包含向個(gè)體施用醫(yī)藥活性量的如實(shí)施例1)至23)中任一者所定義的式(i)化合物。在本發(fā)明的一個(gè)較佳實(shí)施例中，所施用量包含介于每天1mg與1000mg之間、特別介于每天5mg與500mg之間、更特別介于每天25mg與400mg之間、尤其介于每天50mg與200mg之間。為避免任何疑問，若將化合物闡述為可用于預(yù)防或治療某些疾病，則該等化合物同樣適用于制備用來預(yù)防或治療該等疾病的藥劑。本發(fā)明的另一方面是關(guān)于預(yù)防或治療患者中下文所提及疾病或病癥的方法，其包含向該患者施用醫(yī)藥活性量的如實(shí)施例1)至23)中任一者所定義的式(i)化合物或其醫(yī)藥上可接受的鹽。如實(shí)施例1)至23)中任一者所定義的式(i)化合物或其醫(yī)藥上可接受的鹽可用于預(yù)防或治療與cxcr3受體的功能失調(diào)或藉助cxcr3進(jìn)行信號傳導(dǎo)的配體的功能失調(diào)相關(guān)的病癥。該等與cxcr3受體或其配體的功能失調(diào)相關(guān)的病癥是需要cxcr3受體調(diào)節(jié)劑的疾病或病癥。以上所提及的病癥尤其可定義為包含自體免疫病癥、發(fā)炎疾病、傳染病、移植排斥、纖維化、神經(jīng)變性病癥及癌癥。自體免疫病癥可定義為包含類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(ra)；多發(fā)性硬化(ms)；發(fā)炎性腸病(ibd；包含克羅恩氏病及潰瘍性結(jié)腸炎)；全身性紅斑狼瘡(sle)；牛皮癬；牛皮癬性關(guān)節(jié)炎；狼瘡性腎炎；間質(zhì)性膀胱炎；乳糜瀉；抗磷脂綜合征；甲狀腺炎，例如橋本氏甲狀腺炎(hashimoto’sthyroiditis)；淋巴球性甲狀腺炎；重癥肌無力；i型糖尿病；葡萄膜炎；上鞏膜炎；鞏膜炎；川崎病(kawasaki'sdisease)、葡萄膜視網(wǎng)膜炎；后葡萄膜炎；與貝塞特氏病(behcet'sdisease)相關(guān)聯(lián)的葡萄膜炎；葡萄膜腦膜炎綜合征；變應(yīng)性腦脊髓炎；異位性疾病，例如鼻炎、結(jié)膜炎、皮膚炎；及感染后自體免疫性疾病，包括風(fēng)濕熱及感染后腎小球腎炎。發(fā)炎疾病可定義為包含氣喘；copd；動脈粥樣硬化；心肌炎；干眼綜合征(包含修格連氏干眼綜合征(dryeyesyndrome))；肌病變(包含發(fā)炎性肌病變)；類肉瘤?。挥绕渑c類肉瘤病相關(guān)聯(lián)的肺動脈高血壓；及肥胖癥。傳染病可定義為包含由各種感染物介導(dǎo)的疾病及由其產(chǎn)生的并發(fā)癥；例如瘧疾、腦型瘧、麻瘋、結(jié)核病、流行性感冒、弓蟲病、登革熱(dengue)、b型及c型肝炎、單純性皰疹、利什曼原蟲病(leishmania)、砂眼衣原體、萊姆病(lymedisease)、西尼羅河病毒(westnilevirus)。移植排斥可定義為包含移植器官(例如腎臟、肝臟、心臟、肺、胰臟、角膜及皮膚)的排斥；移植物對抗宿主疾??；及慢性同種異體移植血管病變。纖維化可定義為包含肝硬化(包含原發(fā)性膽汁性肝硬化(pbc)及自體免疫性肝炎)、特發(fā)性肺纖維化、腎纖維化、心肌內(nèi)膜纖維化、全身性硬化癥及關(guān)節(jié)纖維化。神經(jīng)變性病癥可定義為包含神經(jīng)變性及涉及神經(jīng)元死亡的病況，例如多發(fā)性硬化(包括復(fù)發(fā)緩解型多發(fā)性硬化及進(jìn)行性多發(fā)性硬化)、阿茲海默氏病、帕金森氏病(parkinson'sdisease)、亨廷頓氏舞蹈癥、hiv相關(guān)癡呆、朊病毒介導(dǎo)的神經(jīng)變性、癲癇、中風(fēng)、大腦局部缺血、大腦性麻痹、視神經(jīng)脊髓炎、臨床孤立綜合征、阿爾珀氏病(alpers'disease)、肌肉萎縮性脊髓側(cè)索硬化癥(als)、老年性癡呆、路易體(lewybodies)癡呆、雷特氏綜合征(rettsyndrome)、脊髓創(chuàng)傷、創(chuàng)傷性腦損傷、三叉神經(jīng)痛、慢性發(fā)炎去髓鞘型多發(fā)性神經(jīng)病變、格-巴二氏綜合征(guillain-barrésyndrome)、嗜睡病、舌咽神經(jīng)痛、輕度認(rèn)知功能減退、認(rèn)知功能減退、脊髓性肌肉萎縮癥及腦型瘧。癌癥可定義為包含所有種類的癌癥，例如大腸癌、直腸癌、乳癌、肺癌、非小細(xì)胞肺癌、前列腺癌、食管癌、胃癌、肝癌、膽管癌、脾臟癌、腎癌、膀胱癌、子宮癌、卵巢癌、子宮頸癌、睪丸癌、甲狀腺癌、胰腺癌、腦腫瘤、血液腫瘤、嗜堿性腺癌、催乳素瘤、高乳促素血癥、腺瘤、子宮內(nèi)膜癌、結(jié)腸癌；慢性淋巴球性白血病(cll)；且尤其彼等癌癥的轉(zhuǎn)移擴(kuò)散。特定而言，根據(jù)實(shí)施例1)至23)中任一者的式(i)的化合物或其醫(yī)藥上可接受的鹽適用于預(yù)防或治療選自以下疾病及病癥的群中的一者、若干或所有的疾?。?)選自以下的自體免疫病癥：類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(ra)；多發(fā)性硬化(ms)；發(fā)炎性腸病(ibd；包含克羅恩氏病及潰瘍性結(jié)腸炎)；全身性紅斑狼瘡(sle)；牛皮癬；狼瘡性腎炎；及i型糖尿?。?)選自以下的發(fā)炎疾?。篶opd；干眼綜合征(包含修格連氏干眼綜合征)；肌病變(包含發(fā)炎性肌病變)；及類肉瘤病；3)選自移植物抗宿主疾病的移植排斥；4)選自肝硬化(包含原發(fā)性膽汁性肝硬化(pbc)及自體免疫性肝炎)的纖維化；及5)選自格-巴二氏綜合征的神經(jīng)變性病癥。式(i)化合物的制備本發(fā)明的另一方面是制備式(i)化合物的方法。本發(fā)明的式(i)化合物可自市售或熟知起始材料根據(jù)實(shí)驗(yàn)部分中所闡述的方法；藉由類似方法；或根據(jù)下文所列示反應(yīng)的一般順序來制備，其中r1及r2是如針對式(i)所定義。本文所用的其他縮寫經(jīng)明確地定義，或者如實(shí)驗(yàn)章節(jié)中所定義。在一些情況中，一般基團(tuán)r1及r2可能與闡釋于下述方案中的裝配不兼容，且因此將需要使用保護(hù)基團(tuán)(pg)。保護(hù)基團(tuán)的使用為業(yè)內(nèi)所熟知(例如，參見“protectivegroupsinorganicsynthesis”,t.w.greene,p.g.m.wuts,wiley-interscience,1999)。出于本討論的目的，將假設(shè)該等保護(hù)基團(tuán)視需要處于適當(dāng)位置。所獲得的化合物亦可以本身已知的方式轉(zhuǎn)化成鹽、尤其其醫(yī)藥上可接受的鹽。一般制備途徑：方案1式(i)化合物可自中間體(1)開始來制備，將該中間體在標(biāo)準(zhǔn)條件下(例如，naoh水溶液于meoh中)皂化，以得到結(jié)構(gòu)(2)的化合物(方案1)。在rt下使用于thf中的(二乙酰氧基碘)苯及l(fā)ibr將結(jié)構(gòu)(2)的化合物中的羧酸基團(tuán)轉(zhuǎn)化為相應(yīng)溴(3)?？墒褂媒Y(jié)構(gòu)(4)(其中r表示氫或(c1-4)烷基)的偶合配體使用用于鈴木反應(yīng)(suzukireaction)的標(biāo)準(zhǔn)條件、如使用適宜堿(例如na2co3水溶液)、適宜鈀催化劑(例如pd(pph3)2cl2)及適宜溶劑(例如mecn)、優(yōu)選在大約80℃的溫度下加熱實(shí)施鈴木偶合。隨后可在適宜溶劑(例如二噁烷)中并在約rt的溫度下在酸性條件下、優(yōu)選使用hcl裂解所獲得中間體(5)的boc保護(hù)基團(tuán)，從而得到結(jié)構(gòu)(6)的化合物?？稍谧詈蟛襟E中藉由使用標(biāo)準(zhǔn)肽偶合方法(例如hatu)優(yōu)選在約rt的溫度下在適宜堿(例如dipea或net3)存在下及在適宜溶劑(例如dcm或dmf)中與羧酸衍生物(7)進(jìn)行酰胺偶合獲得式(i)化合物。方案2結(jié)構(gòu)(1)的化合物可遵循方案2中所列示的反應(yīng)順序來合成。在大約-78℃的溫度下利用于thf中的正丁基鋰及溴處理市售2-(三氟甲基)噻唑-4-甲酸。所得溴化化合物可使用于meoh中的硫酸并在大約70℃的溫度下加熱進(jìn)行酯化。使用市售哌嗪衍生物(8)在適宜堿(例如dipea)存在下在適宜溶劑(例如mecn)中且在大約80℃的溫度下進(jìn)行的親核芳香族取代提供結(jié)構(gòu)(1)的化合物。式(7)化合物是市售的或可遵循方案3中顯示的途徑來合成。方案3可在諸如mecn等適宜溶劑中及在約rt的溫度下在諸如cs2co3等堿存在下使用式x-ch2-coo(pg)的乙酸衍生物(其中x是離去基團(tuán)(例如溴)且pg是適于酸官能基的保護(hù)基團(tuán)(例如芐基))烷基化結(jié)構(gòu)(9)的三唑。中間體(10)在h2下使用pd/c作為催化劑且etoh作為溶劑在大約rt的溫度下的去保護(hù)(例如芐基去保護(hù))產(chǎn)生結(jié)構(gòu)(7)的化合物。其他適宜酸官能基保護(hù)基團(tuán)及保護(hù)以及去保護(hù)方法已為本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知(特別地參見“protectivegroupsinorganicsynthesis”,greenet.w.及wutsp.g.m.,wiley-interscience,1999)。結(jié)構(gòu)(4)的化合物是市售的或可以與本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法類似的方法(例如相應(yīng)5-溴-嘧啶衍生物與硼酸三異丙酯及n-buli在thf及甲苯中在約-78℃的溫度下的反應(yīng))來制備。式(i)化合物可自其他式(i)化合物或其類似物藉由r1位的取代基至另一取代基r1的互相轉(zhuǎn)化獲得。例如，可藉由以下將其中r1表示溴的式(i)類似物轉(zhuǎn)變?yōu)槠渲衦1表示(c2-4)烷基的式(i)化合物：(i)使用相應(yīng)(c2-4)烯基硼酸酯衍生物(例如異丙烯基硼酸頻哪醇酯)在諸如pd(pph3)2cl2等鈀催化劑存在下進(jìn)行鈴木反應(yīng)，及(ii)在pd/c存在下在諸如meoh等溶劑中使用例如氫進(jìn)行氫化?？山逵稍谥T如dcm等溶劑中使用濃h2so4水解相應(yīng)腈制備其中r1表示-c(o)nh2的式(i)化合物。此外，可藉由在諸如dcm等溶劑中使用bbr3進(jìn)行去甲基化自其中r1表示甲氧基-(c1-4)烷基的相應(yīng)化合物或藉由利用nabh4進(jìn)行還原自其中r1表示-c(o)-(c1-3)烷基的相應(yīng)酮獲得其中r1表示羥基-(c1-4)烷基的式(i)化合物。每當(dāng)以鏡像異構(gòu)物的混合物獲得式(i)化合物時(shí)，可使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法來分離鏡像異構(gòu)物：例如藉由形成并分離非鏡像異構(gòu)物鹽或藉由在手性固定相(例如daicelchiralpakic(5μm)管柱)上進(jìn)行hplc。手性hplc的典型條件是洗脫劑a(etoh或iproh，在諸如net3或dea等胺存在或不存在下)及洗脫劑b(己烷或mecn)的等梯度混合物、以0.8ml/min至16ml/min的流速。實(shí)驗(yàn)部分：縮寫(此處及上文說明中所用)：aq.水性boc叔丁氧基羰基bsa牛血清白蛋白bu丁基cc硅膠上管柱層析cho中國倉鼠卵巢cv管柱體積dcm二氯甲烷dea二乙胺dipean-乙基二異丙基胺dmf二甲基甲酰胺dmso二甲亞砜ea乙酸乙酯edta乙二胺四乙酸egta乙二醇四乙酸et乙基fbs胎牛血清flipr熒光成像板讀取器fluo-4-am2-{[2-(2-{5-[雙(羧基甲基)氨基]-2-甲基苯氧基}乙氧基)-4-(2,7-二氟-6-羥基-3-氧代-3h-呫噸-9-基)苯基](羧基甲基)氨基}乙酸g418(2r,3s,4r,5r,6s)-5-氨基-6-[(1r,2s,3s,4r,6s)-4,6-二氨基-3-[(2r,3r,4r,5r)-3,5-二羥基-5-甲基-4-甲基氨基噁烷-2-基]氧基-2-羥基環(huán)己基]氧基-2-(1-羥基乙基)噁烷-3,4-二醇h小時(shí)hatu2-(7-氮雜-1h-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓hep庚烷hepes4-(2-羥基乙基)-哌嗪-1-乙烷磺酸hv高真空hplc高效液相層析ipr異丙基lc液相層析法m多重峰m摩爾濃度[moll-1]me甲基ms質(zhì)譜法min分鐘nmr核磁共振譜org.有機(jī)pbs磷酸鹽緩沖鹽水pd/c碳載鈀pg保護(hù)基團(tuán)ph苯基prep制備型rpm每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)rt室溫s單峰sat.飽和tfa三氟乙酸t(yī)hf四氫呋喃tlc薄層層析tr保留時(shí)間uplc超高效液相層析法i.化學(xué)以下實(shí)例說明本發(fā)明生物活性化合物的制備，但完全不限制其范圍。通常：所有溫度皆以攝氏度(℃)陳述。除非另有說明，否則反應(yīng)于rt下在氬氣氛下實(shí)施且在配備有磁力攪拌棒的火焰干燥的圓底燒瓶中進(jìn)行。所用的表征方法：使用以下洗脫條件獲得lc-ms保留時(shí)間：i)lc-ms(a)：zorbaxsb-aq,3.5μm,4.6×50mm管柱于40℃下恒溫。兩種洗脫溶劑是如下：溶劑a＝水+0.04％tfa；溶劑b＝mecn。洗脫劑流速為4.5ml/min且洗脫混合物比例隨自洗脫開始的時(shí)間t而變的特性曲線匯總于下表中(在兩個(gè)連續(xù)時(shí)間點(diǎn)之間使用線性梯度)：t(min)01.01.451.55溶劑a(％)955595溶劑b(％)595955ii)lc-ms(b):使用來自waters且于acquityuplc管柱管理器(管柱manager)(60℃)中恒溫的acquityuplcbehc181.7μm2.1×50mmid管柱。兩種洗脫溶劑如下：溶劑a＝水+0.05％甲酸；溶劑b＝mecn+0.045％甲酸。洗脫劑流速為1ml/min且洗脫混合物比例隨自洗脫開始的時(shí)間t而變的特性曲線匯總于下表中(在兩個(gè)連續(xù)時(shí)間點(diǎn)之間使用線性梯度)：t(min)01.41.81.92.0溶劑a(％)9852298溶劑b(％)29598982藉由nmr光譜(brukeravanceii400mhzultrashieldtm或brukerascendtm500，配備有5mmdch冷凍器)、1h(400mhz或500mhz)、19f(376mhz)進(jìn)一步證實(shí)化合物純度及一致性?；瘜W(xué)位移是以相對于四甲基硅烷(tms)或三氯氟甲烷的百萬分率(ppm)報(bào)告，且多重性是以s(單峰)或m(多重峰)給出。使用下文所述的條件實(shí)施藉由制備型lc-ms的純化。i)制備型lc-ms(i)：使用x-bridge管柱(watersc18,10μmobd,30×75mm)。兩種洗脫溶劑如下：溶劑a＝水+0.5％nh4oh(25％)；溶劑b＝mecn。洗脫劑流速為75ml/min且洗脫混合物比例隨自洗脫開始的時(shí)間t而變的特性曲線匯總于下表中(在兩個(gè)連續(xù)時(shí)間點(diǎn)之間使用線性梯度)：ii)制備型lc-ms(ii)：使用x-bridge管柱(watersc18,10μmobd,30×75mm)。兩種洗脫溶劑如下：溶劑a＝水+0.5％nh4oh(25％)；溶劑b＝mecn。洗脫劑流速為75ml/min且洗脫混合物比例隨自洗脫開始的時(shí)間t而變的特性曲線匯總于下表中(在兩個(gè)連續(xù)時(shí)間點(diǎn)之間使用線性梯度)：t(min)00.013.56.06.26.6溶劑a(％)7070557070溶劑b(％)303095953030iii)制備型lc-ms(iii)：使用x-bridge管柱(watersc18,10μmobd,30×75mm)。兩種洗脫溶劑如下：溶劑a＝水+0.5％甲酸；溶劑b＝mecn。洗脫劑流速為75ml/min且洗脫混合物比例隨自洗脫開始的時(shí)間t而變的特性曲線匯總于下表中(在兩個(gè)連續(xù)時(shí)間點(diǎn)之間使用線性梯度)：t(min)00.014.06.06.26.6溶劑a(％)8080558080溶劑b(％)202095952020iv)制備型lc-ms(iv)：使用atlantis管柱(waterst3,10μmobd,30×75mm)。兩種洗脫溶劑如下：溶劑a＝水+0.5％甲酸；溶劑b＝mecn。洗脫劑流速為75ml/min且洗脫混合物比例隨自洗脫開始的時(shí)間t而變的特性曲線匯總于下表中(在兩個(gè)連續(xù)時(shí)間點(diǎn)之間使用線性梯度)：t(min)00.014.06.06.26.6溶劑a(％)8080558080溶劑b(％)202095952020v)制備型lc-ms(v)：使用x-bridge管柱(watersc18,10μmobd,30×75mm)。兩種洗脫溶劑如下：溶劑a＝水+0.5％nh4oh(25％)；溶劑b＝mecn。洗脫劑流速為75ml/min且洗脫混合物比例隨自洗脫開始的時(shí)間t而變的特性曲線匯總于下表中(在兩個(gè)連續(xù)時(shí)間點(diǎn)之間使用線性梯度)：t(min)00.014.06.06.26.6溶劑a(％)9090559090溶劑b(％)101095951010所用制備型手性hplc方法：藉由制備型手性hplc的純化是使用下文所闡述的條件實(shí)施。i)制備型手性hplc(i)：使用chiralpakib管柱(5μm,30×250mm)。洗脫溶劑為hep/etoh60/40，運(yùn)行9min且流速為40ml/min。ii)制備型手性hplc(ii)：使用(r,r)whelk-01管柱(10μm,50×250mm)。洗脫溶劑為hep/etoh70/30，運(yùn)行16.3min且流速為100ml/min。iii)制備型手性hplc(iii)：使用chiralpakib管柱(5μm,30×250mm)。洗脫溶劑為hep/etoh50/50，運(yùn)行8min且流速為34ml/min。iv)制備型手性hplc(iv)：使用chiralpakib管柱(5μm,20×250mm)。洗脫溶劑為hep/etoh50/50,0.1％dea，運(yùn)行18.7min且流速為16ml/min。v)制備型手性hplc(v)：使用chiralpakib管柱(5μm,30×250mm)。洗脫溶劑為hep/etoh70/30，運(yùn)行11.8min且流速為34ml/min。vi)制備型手性hplc(vi)：使用chiralpakoz-h管柱(5μm,20×250mm)。洗脫溶劑是hep/etoh50/50,0.1％dea，運(yùn)行11min且流速為19ml/min。實(shí)例1：1-{(r)-4-[4-(2-乙氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-乙基-5-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮1.1.5-溴-2-三氟甲基-噻唑-4-甲酸經(jīng)15分鐘在氬下向冷卻至-78℃的2-(三氟甲基)噻唑-4-甲酸(3.2g)于無水thf(60ml)中的溶液中逐滴添加n-buli(1.6m于己烷中，21.3ml)，以使得內(nèi)部溫度不會升高超過-60℃。然后逐滴添加br2(0.92ml)于環(huán)己烷(8ml)中的溶液，以保持內(nèi)部溫度低于-60℃。將所得混合物于-78℃下攪拌2h并藉由添加水(50ml)小心驟冷。添加檸檬酸(10％)直至ph＝2為止且用ea萃取混合物。用鹽水洗滌有機(jī)層，干燥(mgso4)，過濾并蒸發(fā)至干燥，以獲得4.15g褐色固體，其未經(jīng)進(jìn)一步純化即使用。lc-ms(a)：tr＝0.67min。f-nmr(cd3od)：-63.57ppm(s)。1.2.5-溴-2-三氟甲基-噻唑-4-甲酸甲酯向中間體1.1(12g)于meoh(130ml)中的溶液中添加h2so4(96％,6.5ml)并將混合物于70℃下攪拌3h。冷卻后，用na2co3飽和水溶液驟冷反應(yīng)混合物并部分地蒸發(fā)掉溶劑。用dcm稀釋殘余物并用飽和水溶液na2co3(1×)、水(1×)及鹽水(1×)洗滌，且用dcm(2×)萃取水相。將合并的有機(jī)層經(jīng)mgso4干燥，過濾，蒸發(fā)并在hv下干燥，以獲得12g褐色樹脂狀物。lc-ms(a)：tr＝0.83min。f-nmr(cd3od)：-63.59ppm(s)。1.3.(r)-4-(4-甲氧基羰基-2-三氟甲基-噻唑-5-基)-2-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁基酯于rt下向中間體1.2(10g)于mecn(250ml)中的溶液中添加(r)-1-n-boc-2-甲基哌嗪(7.19g)及dipea(8.85ml)。在80℃下將反應(yīng)混合物攪拌43h。冷卻后，用ea稀釋反應(yīng)混合物并用水及鹽水洗滌。用ea萃取水層。將合并的有機(jī)層經(jīng)mgso4干燥，過濾并蒸發(fā)至干燥。藉由cc(biotage,snap340g,溶劑a：hep；溶劑b：ea；b％的梯度：10超過5cv，10至30超過5cv，30超過5cv)純化粗制物，以獲得9.14g黃色樹脂狀物。lc-ms(a)：tr＝0.97min；[m+h]+：410.0。1.4.(r)-4-(4-羧基-2-三氟甲基-噻唑-5-基)-2-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁基酯于rt下向中間體1.3(4.25g)于etoh(40ml)中的溶液中添加1mnaoh(40ml)并將反應(yīng)混合物攪拌1h20。將溶劑蒸發(fā)并藉由添加檸檬酸水溶液(10％)將殘余物酸化至ph2。將水層用dcm(3×)萃取且合并的有機(jī)層經(jīng)na2so4干燥并濃縮至干燥，以獲得4.1g橙色固體。lc-ms(a)：tr＝0.88min；[m+h]+：395.9。1.5.(r)-4-(4-溴-2-三氟甲基-噻唑-5-基)-2-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁基酯于rt下向中間體1.4(10.17g)于thf(210ml)中的溶液中添加libr(2.26g)及(二乙酰氧基碘)苯(8.45g)。將所得懸浮液于rt下攪拌1h30。用h2o稀釋反應(yīng)混合物并用dcm(3×)萃取。將合并的有機(jī)層經(jīng)mgso4干燥，過濾并蒸發(fā)至干燥。藉由cc(biotage,snap340g筒，溶劑a：hep；溶劑b：ea；b％的梯度：5于5cv，5至10超過3cv)純化粗制物，以獲得9.63g黃色固體。lc-ms(a)：tr＝1.04min；[m+h]+：429.2。1.6.(r)-4-[4-(2-乙氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁基酯將中間體1.5(1.63g)、2-乙氧基嘧啶-5-硼酸(778mg)、pd(pph3)2cl2(152mg)、1mna2co3(12ml)于mecn(12ml)中的混合物于80℃下在氬下劇烈攪拌過夜。使反應(yīng)混合物冷卻至rt，用h2o稀釋并用dcm(3×)萃取。將合并的有機(jī)層經(jīng)mgso4干燥，過濾并蒸發(fā)至干燥。藉由cc(biotage,snap50g筒，溶劑a：hep；溶劑b：ea；％b的梯度：10于5cv，10至30超過5cv，30于3cv)純化粗制物，以獲得1.35g淺黃色樹脂狀物。lc-ms(a)：tr＝1.04min；[m+h]+:473.9。1.7.2-乙氧基-5-[5-((r)-3-甲基-哌嗪-1-基)-2-三氟甲基-噻唑-4-基]-嘧啶于rt下向中間體1.6(1.32g)于dcm(45ml)中的溶液中添加tfa(4.28ml)。將所得混合物于rt下攪拌過夜。將反應(yīng)混合物用1mnaoh處理至ph＝14并用dcm(3×)萃取。將合并的有機(jī)層經(jīng)mgso4干燥，過濾，蒸發(fā)并在hv下干燥，以獲得1.01g淺褐色固體。lc-ms(a)：tr＝0.64min；[m+h]+：374.0。1.8.(3-溴-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸鋰鹽向(3-溴-1h-1,2,4-三唑-1-基)乙酸乙酯(200mg)于thf(0.75ml)及etoh(0.75ml)中的溶液中添加h2o(0.5ml)，隨后2mlioh(0.47ml)。將反應(yīng)混合物在rt下攪拌過夜，蒸發(fā)掉并在hv下干燥殘余物，從而得到201mg白色固體。lc-ms(a)：tr＝0.29min；[m+h]+：205.9。1.9.2-(3-溴-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-4-[4-(2-乙氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-乙酮將中間體1.7(120mg)、中間體1.8(76mg)、hatu(159mg)及dipea(82μl)于dcm(4ml)及dmf(1ml)中的混合物在rt下攪拌過夜。藉由蒸發(fā)去除dcm并藉由制備型lc-ms(iv)純化粗制物，從而得到102mg白色固體。lc-ms(a)：tr＝0.9min；[m+h]+：561.0。1.10.1-{(r)-4-[4-(2-乙氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-異丙烯基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮將中間體1.9(40mg)、異丙烯基硼酸頻哪醇酯(15.1mg)、pd(pph3)2cl2(2.8mg)、1mna2co3(1ml)于mecn(1ml)中的混合物在80℃下在氬下劇烈攪拌2h。使反應(yīng)混合物冷卻至rt并蒸發(fā)至干燥。藉由制備型lc-ms(i)純化粗制物。lc-ms(a)：tr＝0.9min；[m+h]+：523.2。1.11.1-{(r)-4-[4-(2-乙氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮將于meoh(1ml)中含有中間體1.10(g)、pd/c(1.5mg)的燒瓶抽真空并用氬(3×)回填，之后抽真空并用h2(3×)回填并將反應(yīng)混合物于rt下攪拌過夜。經(jīng)注射器過濾器過濾反應(yīng)混合物并將濾液蒸發(fā)至干燥。藉由制備型lc-ms(iv)純化粗制物，從而獲得7mg白色固體。lc-ms(b)：tr＝1.11min；[m+h]+：525.2。實(shí)例2：1-{(r)-4-[4-(2-乙氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮2.1.(3-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯向3-乙基-1h-1,2,4-三唑(2g)于mecn(125ml)中的溶液中添加cs2co3(6.37g)，隨后溴乙酸芐基酯(3.23ml)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌過夜并蒸發(fā)至干燥。將殘余物吸收于ea中并用水洗滌。用ea(2×)萃取水層，將合并的有機(jī)層經(jīng)na2so4干燥，過濾并蒸發(fā)至干燥。藉由cc(biotage,snap100g筒，溶劑a：dcm；溶劑b：dcm/meoh8:2；b％的梯度：15于4cv，15至100超過4cv，100于1cv)純化殘余物，從而得到3.89g作為第一洗脫成分(兩種三唑區(qū)域異構(gòu)物的混合物)及309mg作為第二洗脫成分((3-乙基-[1,2,4]三唑-4-基)-乙酸芐基酯)。藉由制備型手性hplc(i)純化區(qū)域異構(gòu)物的混合物。第一洗脫成分：(5-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯：1.39g黃色油狀物。lc-ms(a)：tr＝0.72min；[m+h]+:246.2。在2.72ppm處的ch2ch3與4.93ppm處的ch2co2之間觀察到roesy信號。第二洗脫成分：(3-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯：2.08g黃色固體。lc-ms(a)：tr＝0.71min；[m+h]+：246.2。在8.08ppm處的ch(三唑)與4.96ppm處的ch2co2之間觀察到roesy信號。2.2.(3-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸將于etoh(20ml)中含有步驟2.1的(3-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯(2.06g)、pd/c(445mg)的燒瓶抽真空并利用氬(3×)回填，之后抽真空并利用h2(3×)回填并將反應(yīng)混合物在rt下攪拌9h。經(jīng)硅藻土塞過濾反應(yīng)混合物并將濾液蒸發(fā)至干燥，以得到1.27g白色固體。lc-ms(a)：tr＝0.25min；[m+h]+:156.2。2.3.1-{(r)-4-[4-(2-乙氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮于rt下將中間體1.7(50mg)、中間體2.2(21mg)、hatu(66mg)及net3(28μl)于dcm(1.5ml)中的混合物攪拌過夜。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干燥并藉由制備型lc-ms(i)純化粗制物，以獲得15mg白色固體。lc-ms(b)：tr＝1.05min；[m+h]+：511.2。實(shí)例3：2-(3-叔丁基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-4-[4-(2-乙氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-乙酮3.1.(3-叔丁基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯此化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.1的方法且用3-叔丁基-1h-1,2,4-三唑代替3-乙基-1h-1,2,4-三唑來制備。在cc后獲得期望化合物，呈單一區(qū)域異構(gòu)物。lc-ms(a)：tr＝0.73min；[m+h]+：274.1。3.2.(3-叔丁基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸此化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.2的方法且用中間體3.1代替(3-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯來制備。lc-ms(a)：tr＝0.36min；[m+h]+：184.3。3.3.2-(3-叔丁基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-4-[4-(2-乙氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-乙酮此化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.3的方法且用中間體3.2代替中間體2.2來制備。藉由制備型lc-ms(iv)純化期望化合物。lc-ms(a)：tr＝0.84min；[m+h]+：539.1。實(shí)例4：1-{(r)-4-[4-(2-乙氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-甲氧基甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮4.1.(3-甲氧基甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯此化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.1的方法且用3-(甲氧基甲基)-1h-1,2,4-三唑代替3-乙基-1h-1,2,4-三唑來制備。粗制物藉由兩種cc(1.biotage,snap10g筒，溶劑a：dcm；溶劑b：dcm/meoh8:2；b％的梯度：5于7cv，5至15超過3cv，15于3cv；2.biotage,snap10g筒，溶劑a：dcm；溶劑b：dcm/meoh8:2；b％的梯度：5于5cv，5至10超過3cv，10于3cv，10至15于3cv)純化，得到兩種區(qū)域異構(gòu)物：第一洗脫成分：(5-甲氧基甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯：無色油狀物。lc-ms(a)：tr＝0.71min；[m+h]+：262.2。第二洗脫成分：(3-甲氧基甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯：無色油狀物。lc-ms(a)：tr＝0.67min；[m+h]+：262.1。在8.17ppm的ch(三唑)與5.01ppm的nch2co2之間觀察到roesy信號。4.2.(3-甲氧基甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸此化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.2的方法且用步驟4.1的(3-甲氧基甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯代替(3-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯來制備。lc-ms(a)：tr＝0.24min；[m+h]+:172.0。4.3.1-{(r)-4-[4-(2-乙氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-甲氧基甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮此化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.3的方法且用中間體4.2代替中間體2.2來制備。藉由制備型lc-ms(iv)純化期望化合物。lc-ms(b)：tr＝1.02min；[m+h]+：527.2。實(shí)例5：1-(2-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-氧代-乙基)-1h-[1,2,4]三唑-3-甲酰胺5.1.(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-甲酸叔丁基酯此化合物是使用類似于實(shí)例1步驟1.6的方法且用2-(三氟甲基)嘧啶-5-基-硼酸代替2-乙氧基嘧啶-5-硼酸來制備。lc-ms(a)：tr＝1.06min；[m+h]+：497.9。5.2.5-[5-((r)-3-甲基-哌嗪-1-基)-2-三氟甲基-噻唑-4-基]-2-三氟甲基-嘧啶鹽酸鹽將中間體5.1(2.3g)于hcl(10.2ml,4m于二噁烷中)中的混合物在rt下攪拌3h。過濾白色懸浮液，用et2o洗滌濾液并在hv下干燥，從而得到1.6g白色固體。lc-ms(a)：tr＝0.72min；[m+h++ch3cn]+：438.9。5.3.1-(2-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-氧代-乙基)-1h-[1,2,4]三唑-3-甲腈此化合物是使用實(shí)例2步驟2.3類似于的方法且用2-(3-氰基-1h-1,2,4-三唑-1-基)乙酸代替中間體2.2且用中間體5.2代替中間體1.7來制備。藉由制備型lc-ms(iv)純化期望化合物。lc-ms(b)：tr＝1.19min；[m+h]+：532.1。5.4.1-(2-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-氧代-乙基)-1h-[1,2,4]三唑-3-甲酰胺向中間體5.3(18mg)于dcm(0.1ml)中的溶液中添加濃h2so4(0.1ml)，并將所得乳液劇烈攪拌4h15。將反應(yīng)混合物逐滴添加至nh4oh(25％)及冰中的混合物，并用dcm(5×)萃取水層。用鹽水洗滌合并的有機(jī)層，經(jīng)mgso4干燥，蒸發(fā)并在hv下干燥。藉由制備型tlc(dcm/meoh95:5)純化，得到9mg白色固體。lc-ms(a)：tr＝0.82min；[m+h]+：550.0。實(shí)例6：2-(3-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮此化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.3的方法且用中間體5.2代替中間體1.7來制備。藉由制備型lc-ms(iv)純化期望化合物。lc-ms(a)：tr＝0.89min；[m+h]+：535.0。實(shí)例7：2-(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮7.1.(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯及(5-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯該等化合物是使用類似于實(shí)例3步驟3.1的方法且用3-異丙基-1h-1,2,4-三唑代替3-乙基-1h-1,2,4-三唑來制備。藉由制備型手性hplc(ii)純化區(qū)域異構(gòu)物的混合物。第一洗脫成分：(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯。lc-ms(a)：tr＝0.76min；[m+h]+：260.2。在4.96ppm處的ch2與8.08ppm處的ch(三唑)之間觀察到roesy信號。第二洗脫成分：(5-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯。lc-ms(a)：tr＝0.76min；[m+h]+：260.2。在4.96ppm處的ch2與2.97ppm處的ch(異丙基)之間觀察到roesy信號。7.2.(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸及(5-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸是使用類似實(shí)例2步驟2.2的方法且用步驟7.1的(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯代替中間體2.1來制備。lc-ms(a)：tr＝0.30min；[m+h]+：170.2。或者，使用步驟7.1的區(qū)域異構(gòu)物的混合物得到(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸及(5-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸的混合物。7.3.2-(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮此化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.3的方法且用中間體5.2代替中間體1.7且用步驟7.2中區(qū)域異構(gòu)物的混合物代替中間體2.2來制備。藉由制備型lc-ms(iv)、隨后制備型手性hplc(vi)純化期望的化合物。制備型手性hplc的第一洗脫成分：2-(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮。lc-ms(b)：tr＝1.17min；[m+h]+：549.2。實(shí)例8：2-(3-叔丁基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮此化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.3的方法且用中間體5.2代替中間體1.7且用中間體3.2代替中間體2.2來制備。藉由制備型lc-ms(ii)純化期望化合物。lc-ms(b)：tr＝1.23min；[m+h]+：563.2。實(shí)例9：2-(3-甲氧基甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮此化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.3的方法且用中間體5.2代替中間體1.7且用中間體4.2代替中間體2.2來制備。藉由制備型lc-ms(i)純化期望化合物。lc-ms(b)：tr＝1.09min；[m+h]+：551.2。實(shí)例10：2-(3-羥甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮在-30℃下在氬下向?qū)嵗?(25mg)于dcm(1ml)中的溶液中添加bbr3(58μl；1mindcm)并將所得懸浮液在0℃下攪拌3h。用h2o驟冷反應(yīng)混合物，用飽和nahco3水溶液稀釋并用ea(3×)萃取。用鹽水洗滌合并的有機(jī)層，經(jīng)mgso4干燥，過濾并蒸發(fā)至干燥。制備型lc-ms(iv)得到5mg白色粉末狀物。lc-ms(a)：tr＝0.81min；[m+h]+：537.1。實(shí)例11：1-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮11.1.(3-丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯該等化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.1且用3-丙基-1h-1,2,4-三唑代替3-乙基-1h-1,2,4-三唑的方法來制備。藉由制備型手性hplc(iii)純化區(qū)域異構(gòu)物的混合物。第一洗脫成分：(5-丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯。lc-ms(a)：tr＝0.77min；[m+h]+：260.1。在4.95ppm處的ch2co2與2.65ppm處的ch2ch2ch3之間觀察到roesy信號。第二洗脫成分：(3-丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯。lc-ms(a)：tr＝0.76min；[m+h]+：260.1。在4.96ppm處的ch2co2與8.08ppm處的ch(三唑)之間觀察到roesy信號。11.2.(3-丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸該等化合物是使用類似于實(shí)例2步驟的方法2.2且用步驟11.1的(3-丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯代替中間體2.1來制備。lc-ms(a)：tr＝0.35min；[m+h]+：170.4。11.3.1-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮此化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.3的方法且用中間體5.2代替中間體1.7且用中間體11.2代替中間體2.2來制備。藉由制備型lc-ms(i)純化期望化合物。lc-ms(b)：tr＝1.17min；[m+h]+：548.9。實(shí)例12：2-[3-(1-羥基-1-乙基)-[1,2,4]三唑-1-基]-1-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮12.1.(3-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯此化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.1的方法且用1-(1h-1,2,4-三唑-5-基)乙酮代替3-乙基-1h-1,2,4-三唑來制備。藉由cc(biotage,snap10g筒，溶劑a：hep；溶劑b：ea；b％的梯度：30于4cv，30至70超過4cv，70于2cv，70至100超過2cv，100于2cv)純化粗制物，從而得到期望三唑區(qū)域異構(gòu)物作為第二份。lc-ms(a)：tr＝0.7min；[m+h]+：260.1。在8.28ppm處的ch(三唑)與5.1ppm處的ch2之間觀察到roesy信號。12.2.(3-乙酰基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸此化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.2的方法且用中間體12.1代替中間體2.1來制備。lc-ms(a)：tr＝0.25min；[m+h]+:170.0。12.3.2-(3-乙酰基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮此化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.3的方法且用中間體5.2代替中間體1.7且用中間體12.2代替中間體2.2來制備。藉由制備型lc-ms(i)純化期望化合物。lc-ms(a)：tr＝0.89min；[m+h]+：549.0。12.4.2-[3-(1-羥基-乙基)-[1,2,4]三唑-1-基]-1-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮在0℃下在氬下向中間體12.3(40mg)于thf(0.75ml)及etoh(0.25ml)中的淺黃色溶液中添加nabh4(1.4mg)并將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌1h30。然后，添加第二排nabh4(0.7mg)并將混合物再攪拌2h20。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干燥，將殘余物懸浮于ea中并添加飽和nh4cl水溶液并在rt下允許攪拌30min。分離各層并用1×鹽水洗滌有機(jī)層。用ea(2×)再萃取水層。將合并的有機(jī)層經(jīng)mgso4干燥，過濾并蒸發(fā)至干燥。藉由制備型tlc(dcm/meoh95/5)純化，得到10mg白色固體。lc-ms(a)：tr＝0.82min；[m+h]+：551.1。實(shí)例13：2-[3-(1-羥基-1-甲基-乙基)-[1,2,4]三唑-1-基]-1-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮在-20℃下向中間體12.3(40mg)于et2o(0.75ml)中的懸浮液中添加memgbr(48μl；3m于et2o中)并將所得懸浮液在rt下攪拌1h30。藉由添加飽和nh4cl水溶液驟冷反應(yīng)混合物并用ea(3×)萃取水層。將合并的有機(jī)層經(jīng)mgso4干燥，過濾并蒸發(fā)至干燥。藉由制備型lc-ms(iv)純化，得到7mg白色粉末狀物。lc-ms(a)：tr＝0.84min；[m+h]+：565.1。實(shí)例14：1-{(r)-4-[4-(2-環(huán)丁氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮14.1.(r)-4-[4-(2-環(huán)丁氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁基酯此化合物是使用類似于實(shí)例1步驟1.6的方法且用2-(環(huán)丁氧基)嘧啶-5-硼酸代替2-乙氧基嘧啶-5-硼酸來制備。藉由制備型lc-ms(ii)代替cc純化粗制物。lc-ms(a)：tr＝1.08min；[m+h]+：500.1。14.2.作為鹽酸鹽的2-環(huán)丁氧基-5-[5-((r)-3-甲基-哌嗪-1-基)-2-三氟甲基-噻唑-4-基]-嘧啶此化合物是使用類似于實(shí)例5步驟5.2的方法且用中間體14.1代替中間體5.1來制備。lc-ms(a)：tr＝0.71min；[m+h]+：400.1。14.3.1-{(r)-4-[4-(2-環(huán)丁氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-二甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮此化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.3的方法且用中間體14.2代替中間體1.7且用步驟7.2中的區(qū)域異構(gòu)物混合物代替中間體2.2來制備。藉由cc(dcm/meoh97:3)隨后制備型lc-ms(i)及制備型手性hplc(iv)純化粗制物。第二洗脫成分(制備型手性hplc)：1-{(r)-4-[4-(2-環(huán)丁氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮：lc-ms(b)：tr＝1.21min；[m+h]+：551.3。在5.14-5.37ppm處的ch2與8.36ppm處的ch(三唑)之間觀察到roesy信號。實(shí)例15：1-{(r)-4-[4-(2-環(huán)丙基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮15.1.(r)-4-[4-(2-環(huán)丙基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁基酯此化合物是使用類似于實(shí)例1步驟1.6的方法且用2-環(huán)丙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)嘧啶代替2-乙氧基嘧啶-5-硼酸來制備。lc-ms(a)：tr＝1.06min；[m+h]+：470.3。15.2.作為鹽酸鹽的2-環(huán)丙基-5-[5-((r)-3-甲基-哌嗪-1-基)-2-三氟甲基-噻唑-4-基]-嘧啶此化合物是使用類似于實(shí)例5步驟5.2的方法且用中間體15.1代替中間體5.1來制備。lc-ms(a)：tr＝0.6min；[m+h]+：370.1。15.3.1-{(r)-4-[4-(2-環(huán)丙基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮此化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.3的方法且用中間體15.2代替中間體1.7來制備。藉由制備型lc-ms(iv)純化粗制物。lc-ms(b)：tr＝1.07min；[m+h]+：507.2。實(shí)例16：1-{(r)-4-[4-(2-環(huán)丙基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮此化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.3的方法且用中間體15.2代替中間體1.7且用步驟7.2的(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸代替中間體2.2來制備。藉由制備型lc-ms(iv)純化粗制物。lc-ms(a)：tr＝0.8min；[m+h]+：521.2。實(shí)例17：2-(3-叔丁基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-4-[4-(2-環(huán)丙基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-乙酮此化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.3的方法且用中間體15.2代替中間體1.7且用中間體3.2代替中間體2.2來制備。藉由制備型lc-ms(iv)純化粗制物。lc-ms(b)：tr＝1.18min；[m+h]+：535.2。實(shí)例18：1-{(r)-4-[4-(2-環(huán)丙基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-甲氧基甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；此化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.3的方法且用中間體15.2代替中間體1.7且用中間體4.2代替中間體2.2來制備。藉由制備型lc-ms(iv)純化粗制物。lc-ms(a)：tr＝0.75min；[m+h]+：523.2。實(shí)例19：1-{(r)-4-[4-(2-乙氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮19.1.(3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯此化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.1的方法且用3-甲基-1h-1,2,4-三唑代替3-乙基-1h-1,2,4-三唑來制備。藉由制備型手性hplc(v)純化區(qū)域異構(gòu)物的混合物。第一洗脫成分：(5-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯。lc-ms(a)：tr＝0.68min；[m+h]+：232.16。1h-nmr(cdcl3)：7.83(s,1h)；7.40-7.33(m,5h)；5.23(s,2h)；4.93(s,2h)；2.43(s,3h)。在4.93ppm處的ch2co2與2.43ppm處的ch3之間觀察到roesy信號。第二洗脫成分：(3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯。lc-ms(a)：tr＝0.67min；[m+h]+：232.16。1h-nmr(cdcl3)：8.05(s,1h)；7.40-7.30(m,5h)；5.23(s,0.95h,ch2)；4.93-4.88(3s,2h)；2.42(s,3h)。在8.05ppm處的ch(三唑)與4.93-4.88ppm處的ch2co2之間觀察到roesy信號。19.2.(3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸此化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.2的方法且用步驟19.1的(3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸芐基酯代替中間體2.1來制備。lc-ms(a)：tr＝0.18min；[m+h]+：142.22。19.3.1-{(r)-4-[4-(2-乙氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮此化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.3的方法且用中間體19.2代替中間體2.2來制備。藉由制備型lc-ms(v)純化粗制物。lc-ms(a)：tr＝0.81min；[m+h]+：497.1。實(shí)例20：2-(3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮此化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.3的方法且用中間體5.2代替中間體1.7且用中間體19.2代替中間體2.2來制備。使用dipea代替net3。藉由制備型lc-ms(iii)純化粗制物。lc-ms(a)：tr＝0.87min；[m+h]+：521.0。實(shí)例21：1-{(r)-4-[4-(2-環(huán)丙基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮此化合物是使用類似于實(shí)例2步驟2.3的方法且用中間體15.2代替中間體1.7且用中間體19.2代替中間體2.2來制備。藉由制備型lc-ms(v)純化粗制物。lc-ms(a)：tr＝0.81min；[m+h]+：493.1。ii.生物學(xué)分析a)flipr分析：在熒光成像板讀取器(flipr：moleculardevices)中使用表現(xiàn)偶合至g蛋白(galpha(16))的人類cxcr3a(基因庫：ay242128)的經(jīng)改造cho-k1細(xì)胞測試化合物的生物活性。在生物分析的前一天將細(xì)胞平鋪于補(bǔ)充有10％fbs以及g418及潮霉素(hygromycin)抗生素的f12培養(yǎng)基中以維持重組選擇。在生物分析當(dāng)天，將細(xì)胞洗滌并用于經(jīng)20mmph7.4的hepes及碳酸氫鈉(0.038％)緩沖且含有5mm丙磺舒(probenecid)的漢克氏平衡鹽溶液(hanksbalancedsaltsolution)(invitrogen)中的fluo-4-am(invitrogen)將染料加載1小時(shí)。此不含有染料且含有濃度為2.5mm的丙磺舒的緩沖液亦用于洗滌步驟(洗滌緩沖液)；或不含染料及丙磺舒但補(bǔ)充有0.1％bsa的緩沖液用于化合物稀釋步驟(稀釋緩沖液)。細(xì)胞經(jīng)洗滌不含過量染料并添加60微升洗滌緩沖液。測試化合物的原液是由10mm于dmso中的濃度構(gòu)成，且在稀釋緩沖液中連續(xù)稀釋至為抑制劑量反應(yīng)曲線所需的濃度。在37℃下的10分鐘培育時(shí)段后，根據(jù)制造商的說明書在flipr儀器中將10微升每一化合物稀釋液自化合物板轉(zhuǎn)移至含有重組細(xì)胞的板。在基礎(chǔ)讀取之后，再次使用flipr儀器添加10微升濃度為20nm的cxcl10拮抗劑(來自peprotech)。監(jiān)測在添加測試化合物之前及之后的熒光變化。在基線減除之后輸出cxcl10添加之后超過基線位準(zhǔn)的發(fā)射峰值。b)受體內(nèi)化分析(ria)：測試化合物的原液是由10mm于dmso中的濃度構(gòu)成，且在含有0.5％bsa的pbs中連續(xù)稀釋至為抑制劑量反應(yīng)曲線所需的濃度。然后，將經(jīng)稀釋化合物與等體積的在pbs中稀釋的cxcl10(peprotech)混合?？鼓o脈人類全血添加至混合物中，然后將其在co2培育箱中在37℃下培育以允許配體介導(dǎo)的受體內(nèi)化(最終cxcl10濃度為9nm)。30min后，將血液與熒光標(biāo)記的cxcr3及cd4特異性抗體(bectondickinson)混合并在冰上培育10分鐘。然后，將試樣與bdfacs溶解溶液(bectondickinson)混合以便消除紅血球。在用含有0.5％bsa的pbs洗滌細(xì)胞之后，然后在流式細(xì)胞計(jì)數(shù)器(facscantoii,bectondickinson)中分析試樣。為使用facsdiva軟件(bectondickinson)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，對cd4陽性細(xì)胞測定對應(yīng)于cxcr3細(xì)胞表面表現(xiàn)的平均熒光。所計(jì)算ic50值可端視每天分析性能而波動。本領(lǐng)域技術(shù)人員已知此類波動。在已針對同一化合物測定ic50值若干次的情形下，給出平均值。flipr分析的數(shù)據(jù)顯示于表1中且受體內(nèi)化分析(ria)的數(shù)據(jù)顯示于表2中。表1實(shí)例編號flipr：ic50(nm)實(shí)例編號flipr：ic50(nm)12.3120.921.6133.231.0141.2413152.5512160.762.0174.671.3183.181.6191.892.7201.6105.2215.2114.4表2c)hergq-patch分析：使用穩(wěn)定表現(xiàn)herg基因(登錄號u04270,bsys,witterswil,瑞士)的cho細(xì)胞及qpatch機(jī)器人平臺(sophion,ballerup,denmark)以單細(xì)胞模式在室溫下評估化合物對hergk通道的阻斷。使細(xì)胞在培養(yǎng)燒瓶中于37℃下在5％co2中在補(bǔ)充有9％(v/v)胎牛血清、0.9％青霉素/鏈霉素(penicillin/streptomycin)(10,000u/ml,invitrogen15140148)、100μg/ml潮霉素b(invitrogen10687010)的培養(yǎng)基(ham的f-12營養(yǎng)混合物，invitrogen21765-029)中生長。當(dāng)細(xì)胞約80％鋪滿(每2-3天)時(shí)，將其分裂用于進(jìn)一步培養(yǎng)或用于電生理學(xué)分析。對于進(jìn)一步培養(yǎng)，將細(xì)胞用0.25％胰蛋白酶edta溶液(invitrogen25200-056)分離并將一部分細(xì)胞(10-30％)重新接種于培養(yǎng)基中。對于電生理學(xué)，在實(shí)驗(yàn)當(dāng)天，用0.25％胰蛋白酶edta溶液分離細(xì)胞并將所有細(xì)胞皆懸浮于補(bǔ)充有20mmhepes及0.04mg/ml胰蛋白酶抑制劑的懸浮培養(yǎng)基(293sfmii,invitrogen11686-029)中。將細(xì)胞于32-35℃下在qpatch機(jī)器人中保持于懸浮培養(yǎng)基中直至使用，使用時(shí)將等份試樣轉(zhuǎn)移至含有0.3％v/vdmso的細(xì)胞外溶液(以mm計(jì)：nacl150；kcl4；cacl21.2；mgcl21；hepes10；ph7.4，含有naoh)并施加至測試板。利用膜片電壓鉗技術(shù)以全細(xì)胞構(gòu)形利用內(nèi)部溶液(以mm計(jì)：kcl,140；nacl,10；mgcl2,1；hepes,10；egta,5；ph＝7.2，含有koh)量測k+電流。使用qpatch機(jī)器人的內(nèi)部bessel濾波器以2khz的截止頻率低通過濾電流并在10khz下進(jìn)行數(shù)字化。自-80mv的保持電壓藉由500-ms去極化至+20mv、隨后500-ms重新極化至-40mv產(chǎn)生k+尾電流；在重新極化至-40mv結(jié)束時(shí)量測尾電流幅值。脈沖模式是在實(shí)驗(yàn)期間每10sec重復(fù)，在細(xì)胞外溶液中3min之后量測基線k+電流，然后施加含化合物的測試溶液，并在施加至細(xì)胞3分鐘后量測在化合物存在下的k+電流。相應(yīng)測試溶液是藉由以下制備：(1)將測試化合物溶解于純凈dmso中，(2)于細(xì)胞外溶液中稀釋此dmso溶液，及(3)進(jìn)一步添加dmso，使得最終測試溶液的濃度為300nm或3000nm測試化合物且含有0.3％v/vdmso。藉由在化合物存在下的電流除以基線電流將化合物效應(yīng)量化為阻斷％；每一化合物實(shí)施兩次或三次實(shí)驗(yàn)且最終值表示每一實(shí)驗(yàn)結(jié)果的平均值。當(dāng)前第1頁12