本發(fā)明涉及新型乳酸菌、以該新型乳酸菌的活菌、死菌或處理物作為有效成分的天然免疫活化劑、以該新型乳酸菌的肽聚糖作為有效成分的感染癥預(yù)防治療劑、以及含有這些物質(zhì)的飲食品。

背景技術(shù)：

乳酸菌從很早開始就被用于發(fā)酵食品，用于飲食品、藥品、益生菌等的生產(chǎn)。乳酸菌具有革蘭氏陽(yáng)性、過(guò)氧化氫酶陰性、不形成芽孢、無(wú)運(yùn)動(dòng)性等特征。

已知類植物乳桿菌(l.paraplantarum)是與植物乳桿菌(l.plantarum)具有近緣關(guān)系的乳酸菌，類植物乳桿菌、植物乳桿菌均為非病原性的革蘭氏陽(yáng)性乳酸菌，進(jìn)行異質(zhì)乳酸發(fā)酵(非專利文獻(xiàn)6)。

另外，一部分種、亞種的全基因組已被解讀(非專利文獻(xiàn)1、2)，除此之外，最近重組植物乳桿菌被用于透過(guò)動(dòng)物腸表皮的特異性抗原的提呈，作為能夠口服攝取的活的感染癥預(yù)防劑而受到關(guān)注(非專利文獻(xiàn)3、4)。

另一方面，已知在天然免疫反應(yīng)中，樹突細(xì)胞、巨噬細(xì)胞這樣的免疫細(xì)胞對(duì)來(lái)源于細(xì)菌或病毒的天然免疫活化物質(zhì)發(fā)生應(yīng)答而產(chǎn)生細(xì)胞因子，引起之后的免疫反應(yīng)。天然免疫機(jī)制是生物所共有的感染防御機(jī)制，通常為非特異性的，因而具有反應(yīng)迅速、并且對(duì)多種感染源有效地發(fā)揮功能的特征。

迄今為止，本發(fā)明人已開發(fā)出在僅具有天然免疫機(jī)制的蠶中能夠簡(jiǎn)便地測(cè)定天然免疫活化反應(yīng)的評(píng)價(jià)方法(篩選方法)(專利文獻(xiàn)1、非專利文獻(xiàn)5)。此外，確認(rèn)了利用該方法能夠進(jìn)行對(duì)人等脊椎動(dòng)物具有天然免疫活化作用的天然免疫活化劑的評(píng)價(jià)(篩選方法)(專利文獻(xiàn)1等)。

另外，本發(fā)明人確認(rèn)了蠶作為對(duì)微生物感染癥的抵抗性評(píng)價(jià)的模型動(dòng)物是有用的(專利文獻(xiàn)2、3等)。

免疫機(jī)制的異常成為引起各種疾病的原因。因此，期待可根據(jù)希望對(duì)這樣的免疫機(jī)制進(jìn)行調(diào)節(jié)的優(yōu)異的天然免疫活化劑或感染癥預(yù)防治療劑。另外，還期待開發(fā)出含有乳酸菌來(lái)源物或上述制劑的飲食品、利用了上述性能優(yōu)異的乳酸菌的飲食品。

現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)1：國(guó)際公開wo2008/126905號(hào)

專利文獻(xiàn)2：日本特開2007-327964號(hào)公報(bào)

專利文獻(xiàn)3：日本特開2012-006917號(hào)公報(bào)

非專利文獻(xiàn)

非專利文獻(xiàn)1：kleerebezemm,boekhorstj,vankranenburgr,molenaard,kuipersop,leerr,tarchinir,peterssa,sandbrinkhm,fiersmw,stiekemaw,lankhorstrm,bronpa,hoffersm,grootmn,kerkhovenr,devriesm,ursingb,devoswm,siezenrj.completegenomesequenceoflactobacillusplantarumwcfs1.procnatlacadsciusa.2003feb18；100(4):1990-5

非專利文獻(xiàn)2：siezenrj,franckec,renckensb,boekhorstj,welsm,kleerebezemm,vanhijumsa.completeresequencingandreannotationofthelactobacillusplantarumwcfs1genome.jbacteriol.2012jan；194(1):195-6.

非專利文獻(xiàn)3：grangettec,muller-aloufh,goudercourtd,geoffroymc,turneerm,merceniera.mucosalimmuneresponsesandprotectionagainsttetanustoxinafterintranasalimmunizationwithrecombinantlactobacillusplantarum.infectimmun.2001mar；69(3):1547-53.

非專利文獻(xiàn)4：seegersjf.lactobacilliaslivevaccinedeliveryvectors:progressandprospects.trendsbiotechnol.2002dec；20(12):508-15.

非專利文獻(xiàn)5：ishiik,hamamotoh,kamimuram,sekimizuk.activationofthesilkwormcytokinebybacterialandfungalcellwallcomponentsviaareactiveoxygenspecies-triggeredmechanism.jbiolchem.2008jan25；283(4):2185-91.

非專利文獻(xiàn)6：curkmc,hubertjc,bringelf.lactobacillusparaplantarumsp.now.,anewspeciesrelatedtolactobacillusplantarum.intjsystbacteriol.1996apr；46(2):595-8.

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

發(fā)明所要解決的課題

本發(fā)明的課題在于提供一種具有高的天然免疫活化能力的新型乳酸菌，此外在于提供以該乳酸菌或者該乳酸菌的死菌或處理物作為有效成分的天然免疫活化劑、含有該乳酸菌或來(lái)源于該乳酸菌的天然免疫活化劑的飲食品。

另外，在于提供以來(lái)源于新型乳酸菌的物質(zhì)作為有效成分的感染癥預(yù)防治療劑及飲食品。

用于解決課題的手段

本發(fā)明人為了解決上述課題反復(fù)進(jìn)行了深入研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，特定的(亞種的)乳酸菌株具有比通常據(jù)稱具有天然免疫活化能力的各種物質(zhì)、或迄今為止作為屬于乳桿菌屬等的其他乳酸菌而為人所知的乳酸菌更高的天然免疫活化能力。

此外，對(duì)上述的具有天然免疫活化能力的乳酸菌進(jìn)行了其性狀分析和16srrna堿基序列等的分析，結(jié)果明確了其為屬于乳桿菌(lactobacillus)屬的新型乳酸菌株(下文中有時(shí)簡(jiǎn)稱為“#11-1”)。

另外發(fā)現(xiàn)，食用了該乳酸菌的肽聚糖組分的蠶盡管不具有獲得性免疫機(jī)制，但令人意外的是感染綠膿桿菌后的存活時(shí)間延長(zhǎng)，被賦予了對(duì)感染綠膿桿菌的抵抗性，從而完成了本發(fā)明。

即，本發(fā)明提供一種乳酸菌，其屬于乳桿菌(lactobacillus)屬，其在獨(dú)立行政法人日本國(guó)家技術(shù)評(píng)估學(xué)會(huì)(nite)的專利微生物保藏中心(npmd)的保藏號(hào)為nitebp-02005。

此外，提供上述乳酸菌經(jīng)分離或純化而得到的乳酸菌。

另外，本發(fā)明提供一種乳酸菌，其為上述乳酸菌或者該乳酸菌經(jīng)天然或人工變異而得到的乳酸菌，其具有天然免疫活化能力。

另外，本發(fā)明提供具有序列表的序列號(hào)1所表示的16srdna區(qū)域的堿基序列的上述乳酸菌。

此外，提供上述乳酸菌經(jīng)分離或純化而得到的乳酸菌。

另外，本發(fā)明提供一種天然免疫活化劑，其是以上述乳酸菌、該乳酸菌的死菌或該乳酸菌的處理物作為有效成分的天然免疫活化劑，其特征在于，

上述乳酸菌的處理物為選自由乳酸菌的培養(yǎng)物；濃縮物；糊化物；噴霧干燥物、冷凍干燥物、真空干燥物、滾筒干燥物等干燥物；液化物；稀釋物；破碎物；殺菌加工物；以及來(lái)自該培養(yǎng)物的提取物組成的組中的至少一種處理物。

另外，本發(fā)明提供一種感染癥預(yù)防治療劑，其特征在于，含有上述乳酸菌的肽聚糖作為有效成分。

另外，本發(fā)明提供一種感染癥預(yù)防治療劑，其特征在于，含有上述天然免疫活化劑作為有效成分。

另外，本發(fā)明提供一種感染癥預(yù)防治療劑，其特征在于，含有上述乳酸菌的肽聚糖作為有效成分。

另外，本發(fā)明提供一種飲食品，其含有上述乳酸菌、上述天然免疫活化劑或上述感染癥預(yù)防治療劑。

另外，本發(fā)明提供一種飲食品，其是采用使用上述乳酸菌進(jìn)行發(fā)酵的工序而制造的，并提供上述飲食品為發(fā)酵乳的飲食品。

發(fā)明的效果

根據(jù)本發(fā)明，能夠提供一種具有極高的天然免疫活化能力的新型乳酸菌。

此外，能夠提供以該新型乳酸菌、該乳酸菌的死菌或該乳酸菌的處理物作為有效成分的具有極高的天然免疫活化能力的新型天然免疫活化劑，能夠提供含有(來(lái)源于)該乳酸菌或該天然免疫活化劑的天然免疫活化能力優(yōu)異的飲食品。

此外，根據(jù)本發(fā)明，能夠提供含有該新型乳酸菌的肽聚糖作為有效成分的感染癥預(yù)防治療劑，該感染癥預(yù)防治療劑能夠通過(guò)口服給藥而預(yù)防細(xì)菌等引起的感染癥。因此，含有該感染癥預(yù)防治療劑的飲食品對(duì)于感染癥預(yù)防是有效的。

使本發(fā)明的新型乳酸菌及新型天然免疫活化劑得以發(fā)現(xiàn)的篩選方法利用了對(duì)天然免疫活化物質(zhì)發(fā)生應(yīng)答而引起蠶標(biāo)本的肌收縮的現(xiàn)象，由lps導(dǎo)致的假陽(yáng)性的天然免疫活化能力的檢出得到抑制，另外，由于是使用了蠶個(gè)體的測(cè)定，因而可得到還考慮了樣品的adme(吸收、分布、代謝及排泄)、pk(藥代動(dòng)力學(xué))的測(cè)定結(jié)果，并且能夠排除具有毒性的化合物。

因此，本發(fā)明的天然免疫活化劑、感染癥預(yù)防治療劑和飲食品具有通過(guò)了上述檢測(cè)的優(yōu)異效果。

本發(fā)明的乳酸菌不僅能夠用于一般飲食品、健康食品、藥劑、發(fā)酵飲食品、益生菌的生產(chǎn)等，還被用于利用天然免疫活化的疾病的預(yù)防和治療。作為發(fā)酵飲食品，特別適合于作為發(fā)酵乳、乳酸菌飲料、酸奶、醬菜、醬菜制造用乳酸菌發(fā)酵劑等的用途。另外，由于耐酸性強(qiáng)，因而還具有在胃中不被分解而可到達(dá)至小腸的特點(diǎn)。

附圖說(shuō)明

圖1是示出本發(fā)明的乳酸菌類植物乳桿菌#11-1的16srdna和近緣的類植物乳桿菌dsm10667的16srdna(nr-025447.1)的利用了blast的同源性分析的結(jié)果的圖。

圖2是圖1的續(xù)圖。

圖3是示出食用了乳酸菌植物乳桿菌pgn的肽聚糖組分的蠶與未食用的蠶在感染綠膿桿菌后的存活期間的圖。

具體實(shí)施方式

下面對(duì)本發(fā)明進(jìn)行說(shuō)明，但本發(fā)明并不限于以下的具體方式，可以在技術(shù)構(gòu)思的范圍內(nèi)任意進(jìn)行變形。

<乳酸菌>

本發(fā)明涉及一種乳酸菌，其屬于乳桿菌(lactobacillus)屬，其在獨(dú)立行政法人日本國(guó)家技術(shù)評(píng)估學(xué)會(huì)(nite)的專利微生物保藏中心(npmd)的保藏號(hào)為nitebp-02005。

下面，對(duì)該屬于乳桿菌(lactobacillus)屬的新型乳酸菌株(#11-1)進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。

形態(tài)：本發(fā)明的#11-1是以米糠醬菜作為分離源而首次分離出的。

在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)狀況：

(1)在gam和mrs瓊脂培養(yǎng)基上形成白色菌落。未觀察到擴(kuò)散性色素。

(2)在加入有碳酸鈣的mrs瓊脂培養(yǎng)基上，伴隨著乳酸的生成，觀察到透明帶的形成。

生理學(xué)性質(zhì)：本發(fā)明的#11-1的生理學(xué)、化學(xué)分類學(xué)性質(zhì)如下。

(1)對(duì)氧的態(tài)度：厭氧

(2)過(guò)氧化氫酶：-

(3)堿性磷酸酶：-

(4)酯酶：-

(5)酯酶脂肪酶：-

(6)脂肪酶：-

(7)亮氨酸芳基酰胺酶：+

(8)纈氨酸芳基酰胺酶：+

(9)胱氨酸芳基酰胺酶：-

(10)胰蛋白酶：-

(11)α-胰凝乳蛋白酶：-

(12)酸性磷酸酶：+

(13)萘酚-as-bi-磷酸水解酶：+

(14)α-半乳糖苷酶：-

(15)β-半乳糖苷酶：-

(16)β-葡糖醛酸苷酶：-

(17)α-葡糖苷酶：-

(18)β-葡糖苷酶：-

(19)n-乙?；?β-氨基葡糖苷酶：-

(20)α-甘露糖苷酶：-

(21)α-巖藻糖苷酶：-

(22)由下述糖類等生成酸和氣體的能力

甘油(glycerol)：-

赤蘚糖醇(erythritol)：-

d-阿拉伯糖(d-arabinose)：-

l-阿拉伯糖(l-arabinose)：-

d-核糖(d-ribose)：±

d-木糖(d-xylose)：-

l-木糖(l-xylose)：-

d-核糖醇(d-adonitol)：-

甲基-β-d-吡喃木糖(methyl-β-d-xylopyranoside)：-

d-半乳糖(d-galactose)：+

d-葡萄糖(d-glucose)：+

d-果糖(d-fructose)：+

d-甘露糖(d-mannose)：+

l-山梨糖(d-sorbose)：-

l-鼠李糖(l-rhamnose)：-

半乳糖醇(dulcitol)：-

肌醇(inositol)：-

d-甘露醇(d-mannitol)：+

d-山梨糖醇(d-sorbitol)：-

甲基-α-d-吡喃甘露糖苷(methyl-α-d-mannopyranoside)：-

甲基-α-d-吡喃葡萄糖苷(methyl-α-d-glucopyranoside)：+

n-乙?；咸前?n-acetylglucosamine)：+

扁桃苷(amygdalin)：±

熊果苷(arbutin)：+

七葉苷(esculin)：+

水楊苷(salicin)：+

d-纖維二糖(d-cellobiose)：+

d-麥芽糖(d-maltose)：+

d-乳糖(d-lactose)：-

d-蜜二糖(d-melibiose)：-

d-蔗糖(d-sucrose)：+

d-海藻糖(d-trehalose)：+

胰島素(insulin)：-

d-松三糖(d-melezitose)：-

d-棉子糖(d-raffinose)：-

淀粉(starch)：-

糖原(glycogen)：-

木糖醇(xylitol)：-

龍膽二糖(gentiobiose)：+

d-松二糖(d-turanose)：-

d-來(lái)蘇糖(d-lyxose)：-

d-塔格糖(d-tagatose)：-

d-巖藻糖(d-fucose)：-

l-巖藻糖(l-fucose)：-

d-阿拉伯糖醇(d-arabitol)：-

l-阿拉伯糖醇(l-arabitol)：-

葡糖酸鹽(gluconate)：±

2-酮基-葡糖酸鹽(2-keto-gluconate)：-

5-酮基-葡糖酸鹽(5-keto-gluconate)：-

分子生物學(xué)分析結(jié)果：與作為分子生物學(xué)系統(tǒng)分類指標(biāo)使用的16srrna相關(guān)的#11-1的分析結(jié)果如下。

即，利用pcr由#11-1的基因組dna擴(kuò)增出16srrna區(qū)域的堿基序列，利用測(cè)序儀進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)了相當(dāng)于16srrna的大致全長(zhǎng)的堿基序列。

利用ncbi的blast分析對(duì)該堿基序列進(jìn)行同源性檢索的結(jié)果是，#11-1的16srdna區(qū)域的堿基序列與乳桿菌屬的類植物乳桿菌dsm10667株的堿基序列(登記號(hào)：nr_025447.1)顯示出98％的相同率，因此#11-1屬于l.plantarumparaplantarum種。

但是，并不完全一致，因而本發(fā)明的#11-1是與上述菌株不同的乳酸菌株(亞種)。

將上述#11-1的生理學(xué)、化學(xué)分類學(xué)性質(zhì)與基于伯杰氏系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊(cè)(bergey’smanualofsystematicbacteriology,vol.31989)的分類及其他文獻(xiàn)的記載內(nèi)容對(duì)照，進(jìn)而考慮上述16srdna分析的結(jié)果來(lái)進(jìn)行判斷的結(jié)果是，本發(fā)明的#11-1是屬于乳桿菌(lactobacillus)屬的新型微生物。

與屬于乳桿菌屬的已知菌株等相比，#11-1顯示出最高的天然免疫活化能力，將上述特征等包括在內(nèi)進(jìn)行綜合研究的結(jié)果是，判斷#11-1為分離出的新型微生物菌株。

#11-1在千葉縣木更津市上總鐮足2-5-8122號(hào)室、獨(dú)立行政法人日本國(guó)家技術(shù)評(píng)估學(xué)會(huì)(naturalinstituteoftechnologyandevaluation；下文簡(jiǎn)稱為“nite”)的專利微生物保藏中心(npmd)進(jìn)行了日本國(guó)內(nèi)保藏，是以保藏號(hào)：nitep-02005(保藏日：2015年2月5日)進(jìn)行了保藏的微生物。

關(guān)于#11-1，之后向千葉縣木更津市上總鐮足2-5-8122號(hào)室、獨(dú)立行政法人日本國(guó)家技術(shù)評(píng)估學(xué)會(huì)(nite)的專利微生物保藏中心(npmd)提交了原保藏申請(qǐng)書，進(jìn)行了由日本國(guó)內(nèi)保藏(原保藏日：2015年2月5日)轉(zhuǎn)移為基于布達(dá)佩斯條約的保藏的轉(zhuǎn)移請(qǐng)求((轉(zhuǎn)移日(國(guó)際保藏日)：2016年1月28日)，其存活得到證明，向基于布達(dá)佩斯條約的保藏(國(guó)際保藏)的轉(zhuǎn)移請(qǐng)求被受理，結(jié)果獲得了保藏號(hào)“nitebp-02005”。

關(guān)于細(xì)菌的一般性狀，由于其作為菌株的性質(zhì)容易發(fā)生變異，因而#11-1也可能不限于前面所示的生理學(xué)性狀的范圍內(nèi)。另外，該“變異”當(dāng)然包括天然變異和人工變異這兩種情況。

下面對(duì)#11-1的培養(yǎng)方法進(jìn)行記載。#11-1的培養(yǎng)方法按照對(duì)乳桿菌屬的微生物進(jìn)行的一般培養(yǎng)方法來(lái)進(jìn)行即可。

培養(yǎng)優(yōu)選在厭氧條件下進(jìn)行。作為培養(yǎng)基中的碳源，例如可以使用d-核糖、d-半乳糖、d-葡萄糖、d-果糖、d-甘露糖、d-甘露醇、n-乙酰基葡糖胺、扁桃苷、熊果苷、七葉苷、水楊苷、d-纖維二糖、d-麥芽糖、蔗糖、d-海藻糖、龍膽二糖、糖蜜、水飴、油脂類等有機(jī)碳化合物，作為氮源，可以使用肉提取物、酪蛋白、蛋白胨、酵母提取物、干燥酵母、胚芽、大豆粉、尿素、氨基酸、銨鹽等有機(jī)/無(wú)機(jī)氮化合物。

另外，關(guān)于鹽類，可以根據(jù)需要適當(dāng)添加鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽、磷酸鹽、鐵鹽、銅鹽、鋅鹽、鈷鹽等無(wú)機(jī)鹽類。此外，從增加目標(biāo)物的產(chǎn)生量的方面考慮，優(yōu)選添加生物素、維生素b1、胱氨酸、油酸甲酯、豬油等生長(zhǎng)促進(jìn)物質(zhì)。

另外，可以添加硅油、表面活性劑等消泡劑。作為制備好的培養(yǎng)基，優(yōu)選使用例如mrs培養(yǎng)基、gam培養(yǎng)基等。

關(guān)于培養(yǎng)條件，如上文所述，按照對(duì)乳桿菌屬微生物進(jìn)行的一般培養(yǎng)條件來(lái)進(jìn)行即可。若為液體培養(yǎng)法，則優(yōu)選靜置培養(yǎng)。若為小規(guī)模培養(yǎng)，則可以使用利用帶蓋玻璃瓶的靜置培養(yǎng)法。

培養(yǎng)溫度優(yōu)選保持在25℃～37℃之間，更優(yōu)選在32℃～37℃進(jìn)行。關(guān)于培養(yǎng)ph，優(yōu)選在ph7附近進(jìn)行。培養(yǎng)時(shí)間是根據(jù)所使用的培養(yǎng)基組成、培養(yǎng)溫度等而變動(dòng)的因素，在#11-1的情況下，在優(yōu)選12～72小時(shí)、更優(yōu)選24～48小時(shí)的情況下能夠確保充分量的目標(biāo)物。

還優(yōu)選挑取培養(yǎng)得到的菌落，再次在培養(yǎng)基上進(jìn)行單菌落形成。

<天然免疫活化劑>

本發(fā)明的新型乳酸菌“#11-1”作為該乳酸菌本身、另外作為該乳酸菌經(jīng)天然或人工變異而得到的乳酸菌具有天然免疫活化能力。

即，本發(fā)明涉及一種具有天然免疫活化能力的乳酸菌，其是保藏號(hào)為nitebp-02005的屬于乳桿菌(lactobacillus)屬的乳酸菌或該乳酸菌經(jīng)天然或人工變異而得到的乳酸菌。

天然免疫活化能力的測(cè)定通過(guò)實(shí)施例中具體記載的方法、即在ishiik.,hamamotoh.,kamimuram.,sekimizuk.,j.biol.chem.jan.25；283(4)：2185-91(2008)中也有詳細(xì)記載的蠶的緩慢性肌收縮(緩行性筋収縮)來(lái)測(cè)定。

“#11-1或其經(jīng)天然或人工變異而得到的乳酸菌”、“該乳酸菌的死菌”、“該乳酸菌的處理物”均具有天然免疫活化能力。

此處，作為“乳酸菌的處理物”，可以舉出選自由乳酸菌的培養(yǎng)物、濃縮物、糊化物、干燥物、液化物、稀釋物、破碎物、殺菌加工物以及來(lái)自培養(yǎng)物的提取物組成的組中的至少一種處理物。此處，作為“干燥物”，可以舉出噴霧干燥物、冷凍干燥物、真空干燥物、滾筒干燥物等。

本發(fā)明的另一方式為“一種天然免疫活化劑，其是以上述本發(fā)明的乳酸菌(#11-1或其經(jīng)天然或人工變異而得到的乳酸菌)、該乳酸菌的死菌或該乳酸菌的處理物作為有效成分的天然免疫活化劑，其特征在于，上述乳酸菌的處理物為選自由乳酸菌的培養(yǎng)物、濃縮物、糊化物、干燥物、液化物、稀釋物、破碎物、殺菌加工物以及來(lái)自培養(yǎng)物的提取物組成的組中的至少一種處理物”。

本發(fā)明的天然免疫活化劑可以以各種狀態(tài)含有上述本發(fā)明的乳酸菌、該乳酸菌的死菌或該乳酸菌的處理物。例如可以舉出懸浮液、乳酸菌體、培養(yǎng)上清液、包含培養(yǎng)基成分的狀態(tài)等。

作為乳酸菌，可以適當(dāng)使用活菌體、濕菌、干燥菌等。另外，也可以是實(shí)施了殺菌即加熱殺菌處理、放射線殺菌處理、破碎處理等而得到的死菌。

作為本發(fā)明的天然免疫活化劑中的有效成分的乳酸菌、該乳酸菌的死菌、該乳酸菌的處理物相對(duì)于天然免疫活化劑整體的含量沒有特別限制，可以根據(jù)目的適當(dāng)選擇，在將天然免疫活化劑整體設(shè)為100質(zhì)量份時(shí)，以“乳酸菌、該乳酸菌的死菌、該乳酸菌的處理物的總量”計(jì)，優(yōu)選含有0.001質(zhì)量份～100質(zhì)量份、更優(yōu)選含有0.01質(zhì)量份～99質(zhì)量份、特別優(yōu)選含有0.1質(zhì)量份～95質(zhì)量份、進(jìn)一步優(yōu)選含有1質(zhì)量份～90質(zhì)量份。

另外，上述有效成分可以單獨(dú)使用任意1種，也可以合用2種以上。在合用2種以上的情況下，對(duì)于上述天然免疫活化劑中的各有效成分的含有比也沒有特別限制，可以根據(jù)目的適當(dāng)選擇。

本發(fā)明的天然免疫活化劑含有上述乳酸菌、上述乳酸菌的死菌或上述乳酸菌的處理物作為有效成分，但除了這些有效成分以外，還可以含有“其他成分”。

作為上述天然免疫活化劑中的上述“其他成分”，沒有特別限制，可以在不損害本發(fā)明效果的范圍內(nèi)根據(jù)目的適當(dāng)選擇，例如可以舉出藥學(xué)上可接受的載體等。

作為該載體，沒有特別限制，例如可以根據(jù)后述的劑型等適當(dāng)選擇。另外，作為天然免疫活化劑中的“其他成分”的含量，也沒有特別限制，可以根據(jù)目的適當(dāng)選擇。

<感染癥預(yù)防治療劑>

上述本發(fā)明的乳酸菌、該乳酸菌的死菌、該乳酸菌的處理物在具有天然免疫活化能力的同時(shí)，或者由于具有天然免疫活化能力，因而作為感染癥預(yù)防治療劑有用，特別是作為口服給藥用的感染癥預(yù)防治療劑有用。

本發(fā)明人確認(rèn)了，本發(fā)明的乳酸菌的肽聚糖的口服給藥對(duì)于感染了綠膿桿菌的蠶發(fā)揮延長(zhǎng)壽命的效果。需要說(shuō)明的是，已經(jīng)確認(rèn)：感染了細(xì)菌等的蠶的抵抗性與人等哺乳類的抵抗性具有相關(guān)性(例如，專利文獻(xiàn)2、3等)。

具體而言，確認(rèn)了植物乳桿菌乳酸菌的肽聚糖對(duì)蠶賦予針對(duì)綠膿桿菌感染的抵抗性。

認(rèn)為這是由于，蠶沒有獲得性免疫機(jī)制，無(wú)法對(duì)抗原產(chǎn)生抗體。因此，口服給藥的植物乳桿菌的肽聚糖在腸內(nèi)等將蠶的天然免疫機(jī)制活化，其結(jié)果，對(duì)感染控制起到了效果。

對(duì)于小鼠等具有獲得性免疫機(jī)制的動(dòng)物來(lái)說(shuō)，已知口服給藥細(xì)菌的肽聚糖時(shí)可被賦予免疫力。

但是，本發(fā)明中，在不具有獲得性免疫機(jī)制而僅具有天然免疫機(jī)制的蠶中，乳酸菌的肽聚糖賦予了對(duì)于綠膿桿菌感染的抵抗性。認(rèn)為肽聚糖將蠶的天然免疫機(jī)制活化，對(duì)感染產(chǎn)生了抵抗，這表明對(duì)于同樣具有天然免疫機(jī)制的哺乳類等動(dòng)物來(lái)說(shuō)，含有本發(fā)明的乳酸菌、該乳酸菌的死菌或該乳酸菌的處理物的天然免疫活化劑具有作為感染癥預(yù)防治療劑的效果。

含有植物乳桿菌、類植物乳桿菌等乳桿菌屬的乳酸菌的肽聚糖作為有效成分的制劑對(duì)于人等哺乳類也作為感染癥預(yù)防治療劑有用。

因此，本發(fā)明的其他方式為一種感染癥預(yù)防治療劑，其特征在于，含有上述天然免疫活化劑作為有效成分；進(jìn)而為一種感染癥預(yù)防治療劑，其特征在于，含有上述乳酸菌的肽聚糖作為有效成分。

<藥品；飲食品；健康食品等>

本發(fā)明的乳酸菌及來(lái)源于該乳酸菌的本發(fā)明的天然免疫活化劑能夠混配于藥品、準(zhǔn)藥品、一般飲食品、健康食品、奶粉等具有標(biāo)準(zhǔn)的飲食品等中，可以不受它們的形態(tài)的限制而應(yīng)用于各種藥品、飲食品等中。

其中，采用使用上述本發(fā)明的乳酸菌進(jìn)行發(fā)酵的工序而制造的飲食品、以及其中的發(fā)酵乳容易發(fā)揮出乳酸菌的通常的效果及本發(fā)明特有的上述效果，因而優(yōu)選。

作為本發(fā)明的天然免疫活化劑、感染癥預(yù)防治療劑的劑型，沒有特別限制，例如可以根據(jù)后述的期望的給藥方法適當(dāng)選擇。

具體而言，例如可以舉出口服固形劑(片劑、包覆片劑、顆粒劑、散劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑等)、口服液劑(內(nèi)服液劑、糖漿劑、酏劑等)、注射劑(溶劑、混懸劑等)、軟膏劑、貼劑、凝膠劑、乳膏劑、外用散劑、噴霧劑、吸入散布劑等。

作為上述口服固形劑，例如可以在上述有效成分中加入賦形劑，進(jìn)一步根據(jù)需要加入粘結(jié)劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、著色劑、矯味/矯臭劑等添加劑，通過(guò)常規(guī)方法進(jìn)行制造。

作為該賦形劑，例如可以舉出乳糖、白糖、氯化鈉、葡萄糖、淀粉、碳酸鈣、高嶺土、微晶纖維素、硅酸等。

作為上述粘結(jié)劑，例如可以舉出水、乙醇、丙醇、單糖漿、葡萄糖液、淀粉液、明膠液、羧甲基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基淀粉、甲基纖維素、乙基纖維素、蟲膠、磷酸鈣、聚乙烯基吡咯烷酮等。

作為該崩解劑，例如可以舉出干燥淀粉、藻酸鈉、瓊脂粉末、碳酸氫鈉、碳酸鈣、十二烷基硫酸鈉、硬脂酸單甘油酯、乳糖等。

作為該潤(rùn)滑劑，例如可以舉出精制滑石、硬脂酸鹽、硼砂、聚乙二醇等。

作為該著色劑，例如可以舉出二氧化鈦、氧化鐵等。

作為該矯味/矯臭劑，例如可以舉出白糖、橙皮、檸檬酸、酒石酸等。

作為上述口服液劑，例如可以在上述有效成分中加入矯味/矯臭劑、緩沖劑、穩(wěn)定劑等添加劑，通過(guò)常規(guī)方法進(jìn)行制造。

作為該矯味/矯臭劑，例如可以舉出白糖、橙皮、檸檬酸、酒石酸等。作為上述緩沖劑，例如可以舉出檸檬酸鈉等。作為上述穩(wěn)定劑，例如可以舉出黃芪膠、阿拉伯膠、明膠等。

作為上述注射劑，例如可以在上述有效成分中添加ph調(diào)節(jié)劑、緩沖劑、穩(wěn)定劑、等滲劑、局部麻醉劑等，通過(guò)常規(guī)方法制造皮下用、肌肉內(nèi)用、靜脈內(nèi)用等的注射劑。

作為該ph調(diào)節(jié)劑和該緩沖劑，例如可以舉出檸檬酸鈉、乙酸鈉、磷酸鈉等。作為上述穩(wěn)定劑，例如可以舉出焦亞硫酸鈉、edta、巰基乙酸、硫代乳酸等。作為上述等滲劑，例如可以舉出氯化鈉、葡萄糖等。作為上述局部麻醉劑，例如可以舉出鹽酸普魯卡因、鹽酸利多卡因等。

作為上述軟膏劑，例如可以在上述有效成分中混配公知的基劑、穩(wěn)定劑、濕潤(rùn)劑、防腐劑等，通過(guò)常規(guī)方法混合來(lái)進(jìn)行制造。

作為該基劑，例如可以舉出液體石蠟、白色凡士林、白蜂蠟、辛基十二烷醇、石蠟等。作為上述防腐劑，例如可以舉出對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸乙酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯等。

作為上述貼劑，例如可以將作為上述軟膏劑的乳膏劑、凝膠劑、糊劑等通過(guò)常規(guī)方法涂布到公知的支撐體上來(lái)進(jìn)行制造。作為上述支撐體，例如可以舉出由棉、人造纖維、化學(xué)纖維構(gòu)成的機(jī)織布、無(wú)紡布、軟質(zhì)氯乙烯、聚乙烯、聚丙烯、聚氨酯等的膜、發(fā)泡體片等。

本發(fā)明的天然免疫活化劑、感染癥預(yù)防治療劑例如可以適合用于需要活化天然免疫機(jī)制的個(gè)體、對(duì)于細(xì)菌等希望得到獲得性免疫的個(gè)體等。

具體而言，例如可以通過(guò)對(duì)需要進(jìn)行健康維持或疲勞恢復(fù)的個(gè)體；需要進(jìn)行癌或生活習(xí)慣病的預(yù)防或治療的個(gè)體；感染了細(xì)菌、真菌、病毒等的個(gè)體；等等進(jìn)行給藥來(lái)使用。

作為本發(fā)明的天然免疫活化劑、感染癥預(yù)防治療劑的給藥對(duì)象動(dòng)物，沒有特別限制，例如可以舉出：人；小鼠、大鼠等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物；猴；馬；牛、豬、山羊、雞等家畜；貓、狗等寵物；等等。

另外，作為上述天然免疫活化劑的給藥方法，沒有特別限制，例如可以根據(jù)上述劑型等適當(dāng)選擇，可以舉出口服給藥、腹腔內(nèi)給藥、向血液中注射、向腸內(nèi)注入等。其中，從簡(jiǎn)便地發(fā)揮出上述效果的方面考慮，優(yōu)選口服給藥。

作為上述天然免疫活化劑或上述感染癥預(yù)防治療劑的給藥量，沒有特別限制，可以根據(jù)作為給藥對(duì)象的個(gè)體的年齡、體重、所期望的效果的程度等來(lái)適當(dāng)選擇，例如，成人1天的給藥量以有效成分的量計(jì)優(yōu)選為1mg～30g、更優(yōu)選為10mg～10g、特別優(yōu)選為100mg～3g。

另外，作為給藥時(shí)期，也沒有特別限制，可以根據(jù)目的適當(dāng)選擇，例如，可以預(yù)防性地給藥，也可以治療性地給藥。

含有本發(fā)明的上述乳酸菌、該乳酸菌的死菌或處理物、天然免疫活化劑、或者感染癥預(yù)防治療劑的飲食品(下文中有時(shí)簡(jiǎn)稱為“本發(fā)明的飲食品”)中的乳酸菌、天然免疫活化劑或感染癥預(yù)防治療劑的含量沒有特別限制，可以根據(jù)目的、飲食品的方式(種類)來(lái)適當(dāng)選擇，在將飲食品整體設(shè)為100質(zhì)量份時(shí)，以上述的總量計(jì)優(yōu)選含有0.001質(zhì)量份～100質(zhì)量份，更優(yōu)選為0.01質(zhì)量份～100質(zhì)量份，特別優(yōu)選為0.1質(zhì)量份～100質(zhì)量份的含量。

另外，可以單獨(dú)使用上述中的任意1種，也可以合用2種以上。在合用2種以上的情況下，對(duì)于上述飲食品中的各物質(zhì)的含量比沒有特別限制，可以根據(jù)目的適當(dāng)選擇。

本發(fā)明的飲食品具有天然免疫活化能力和/或感染癥預(yù)防治療能力。

本發(fā)明的飲食品除了含有上述本發(fā)明的天然免疫活化劑、感染癥預(yù)防治療劑以外，還可以進(jìn)一步含有“其他成分”。

作為上述“其他成分”，沒有特別限制，可以在不損害本發(fā)明效果的范圍內(nèi)根據(jù)目的適當(dāng)選擇，例如可以舉出各種食品原料等。另外，“其他成分”的含量沒有特別限制，可以根據(jù)目的適當(dāng)選擇。

本發(fā)明的乳酸菌可以用于一般飲食品、健康食品、藥劑、發(fā)酵飲食品、益生菌的生產(chǎn)等。作為發(fā)酵飲食品，特別適合于作為發(fā)酵乳、乳酸菌飲料、酸奶、醬菜、醬菜制造用乳酸菌發(fā)酵劑等的用途。

作為上述食品的種類，沒有特別限制，可以根據(jù)目的適當(dāng)選擇，例如可以舉出：果凍、糖果、巧克力、餅干、橡皮糖等點(diǎn)心類；綠茶、紅茶、咖啡、軟飲等嗜好飲料；發(fā)酵乳、酸奶、冰激凌、非乳脂冰激凌(lactoice)等乳制品；蔬菜飲料、果實(shí)飲料、果醬類等蔬菜/果實(shí)加工品；湯等液體食品；面包類、面類等谷物加工品；各種調(diào)味料；等等。其中，優(yōu)選酸奶、發(fā)酵乳等乳制品。

作為這些食品的制造方法，沒有特別限制，例如可以根據(jù)通常的各種食品的制造方法適當(dāng)?shù)刂圃臁?/p>

另外，上述食品例如可以以片劑、顆粒劑、膠囊劑等口服固形劑或內(nèi)服液劑、糖漿劑等口服液劑的形式來(lái)制造。上述口服固形劑、口服液劑的制造方法沒有特別限制，可以根據(jù)目的適當(dāng)選擇，例如可以模仿上述藥劑的口服固形劑、口服液劑的制造方法進(jìn)行制造。

本發(fā)明的飲食品作為以活化天然免疫機(jī)制、賦予對(duì)感染癥的抵抗力等為目的的功能性食品、健康食品等特別有用。

在將本發(fā)明的乳酸菌、其死菌或處理物等用于飲食品的制造的情況下，制造方法可以利用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法來(lái)進(jìn)行。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以將使本發(fā)明的乳酸菌的(死)菌體或處理物與其他成分混合的工序、成形工序、殺菌工序、發(fā)酵工序、燒制工序、干燥工序、冷卻工序、造粒工序、包裝工序等適當(dāng)組合來(lái)制作目標(biāo)飲食品。

另外，在將本發(fā)明的乳酸菌用于各種發(fā)酵乳的制造的情況下，可以使用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法進(jìn)行制造。例如可以舉出采用在發(fā)酵乳中以死菌形式添加需要量的本發(fā)明的乳酸菌的工序而制造的飲食品、采用使用本發(fā)明的乳酸菌作為乳酸菌發(fā)酵劑進(jìn)行發(fā)酵的工序而制造的飲食品。

在使用本發(fā)明的乳酸菌作為乳酸菌發(fā)酵劑進(jìn)行發(fā)酵的情況下，可以利用與本發(fā)明的乳酸菌的培養(yǎng)條件同樣的條件等來(lái)進(jìn)行。

實(shí)施例

下面，基于實(shí)施例和研究例更詳細(xì)地說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明并不限定于下述實(shí)施例等的具體范圍。

<材料>

<<培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件>>

gam培養(yǎng)基、mrs瓊脂培養(yǎng)基分別由nissui公司、bd(bectondickinson)公司獲得，必要時(shí)添加了碳酸鈣(caco3)。

厭氧培養(yǎng)中使用了anaeropak(注冊(cè)商標(biāo))(mitsubishigaschemicals公司制造)。

<<乳酸菌的分離>>

使用米糠醬菜作為發(fā)酵食品。將懸浮于生理鹽水(0.9質(zhì)量％的nacl)中而成的液體涂布至mrs培養(yǎng)基上，在37℃下進(jìn)行2天厭氧培養(yǎng)。

挑取菌落，在caco3-mrs培養(yǎng)基上進(jìn)行單菌落形成。

從其中利用后述的方法測(cè)定天然免疫活化能力，得到天然免疫活化能力優(yōu)異的乳酸菌株(#11-1)。分離出乳酸菌株(#11-1)。

通過(guò)caco3-mrs培養(yǎng)基上的白色菌落形成和透明帶的形成確認(rèn)了乳酸發(fā)酵，確認(rèn)#11-1為乳酸菌。另外，對(duì)菌落進(jìn)行革蘭氏染色，確認(rèn)了#11-1的革蘭氏陽(yáng)性。

<<乳酸菌的鑒定>>

通過(guò)使用pcr酶kodfxneo(toyobo)、引物9f、1541r的菌落pcr，獲得了16srdna片段。

通過(guò)利用bigdye(注冊(cè)商標(biāo))terminatorv3.1循環(huán)測(cè)序試劑盒、abiprism(注冊(cè)商標(biāo))3100遺傳分析儀的直接測(cè)序，確定了序列。

序列信息使用ncbiblastn2.2.27+(8)由16s核糖體rna序列數(shù)據(jù)庫(kù)(細(xì)菌和古細(xì)菌(bacteriaandarchaea)，7545序列)進(jìn)行分析。

將#11-1的16srdna區(qū)域的堿基序列示于序列表的序列號(hào)1。

確定16srdna的堿基序列，通過(guò)blast分析對(duì)同源性進(jìn)行了檢索，結(jié)果表明，與圖1和圖2所示的乳酸菌的同源性高。

如圖1和圖2所示，該堿基序列與類植物乳桿菌dsm10667株(堿基序列：nr_025447.1)近緣，但不完全一致，因而可知是新型的“類植物乳桿菌”。

<<保藏>>

如上所述，實(shí)施例中使用的本發(fā)明的“#11-1”是從米糠醬菜中分離出的，其作為屬于乳桿菌(lactobacillus)屬的乳酸菌#11-1被保藏在作為基于專利法實(shí)施規(guī)則的保藏機(jī)構(gòu)、并且作為基于與專利手續(xù)上的微生物保藏的國(guó)際認(rèn)可有關(guān)的布達(dá)佩斯條約的國(guó)際保藏當(dāng)局得到認(rèn)可的獨(dú)立行政法人日本國(guó)家技術(shù)評(píng)估學(xué)會(huì)專利微生物保藏中心(npmd)(千葉縣木更津市上總鐮足2-5-8122號(hào)室)(保藏號(hào)：nitep-02005、保藏日2015年2月5日)。

關(guān)于#11-1，之后向千葉縣木更津市上總鐮足2-5-8122號(hào)室、獨(dú)立行政法人日本國(guó)家技術(shù)評(píng)估學(xué)會(huì)(nite)的專利微生物保藏中心(npmd)提交了原保藏申請(qǐng)書，進(jìn)行了由日本國(guó)內(nèi)保藏(原保藏日：2015年2月5日)轉(zhuǎn)移為基于布達(dá)佩斯條約的保藏的轉(zhuǎn)移請(qǐng)求((轉(zhuǎn)移日(國(guó)際保藏日)：2016年1月28日)，其存活得到證明，向基于布達(dá)佩斯條約的保藏(國(guó)際保藏)的轉(zhuǎn)移請(qǐng)求被受理，結(jié)果獲得了保藏號(hào)“nitebp-02005”。

實(shí)施例1

<天然免疫活化能力的測(cè)定>

將在mrs培養(yǎng)基中培養(yǎng)了一夜的類植物乳桿菌#11-1(l.paraplantarum#11-1)株在121℃下滅菌處理20分鐘后，將50μl注射至5齡蠶的斷頭肌肉標(biāo)本中，通過(guò)緩慢性肌收縮測(cè)定天然免疫活化能力。

基于緩慢性肌收縮的天然免疫活化能力的測(cè)定按照ishiik.,hamamotoh.,kamimuram.,sekimizuk.,j.biol.chem.jan.25；283(4)：2185-91(2008)中記載的方法來(lái)進(jìn)行。

即，將測(cè)定物質(zhì)的濃度的分成多個(gè)階段而得到的試樣0.05ml分別向5齡蠶的斷頭肌肉標(biāo)本中進(jìn)行血液內(nèi)給藥，在收縮的長(zhǎng)度達(dá)到最大時(shí)(約10分鐘后)分別測(cè)定體長(zhǎng)。

從注射前的體長(zhǎng)減去注射后的體長(zhǎng)，用其值除以注射前的體長(zhǎng)，將所得到的值作為“c值(收縮值，contractionvalue)”，將c值＝0.15定義為1u(unit(單位))。

用0.9％生理鹽水將試樣連續(xù)稀釋成1/1、1/4、1/16、1/64、1/256，用所得到的液體分別測(cè)定c值，將橫軸作為測(cè)定物質(zhì)的濃度、縱軸作為c值進(jìn)行作圖，由所得到的圖求出提供1u(c值＝0.15)的“測(cè)定物質(zhì)對(duì)蠶的給藥質(zhì)量(mg)”，求出每單位質(zhì)量(mg)顯示出幾個(gè)u(單位)，對(duì)測(cè)定物質(zhì)的天然免疫活化能力的大小進(jìn)行了評(píng)價(jià)。

另外，將生理鹽水0.05ml作為陰性對(duì)照(允許c值為0.05以下)，將空氣0.2ml作為陽(yáng)性對(duì)照(允許c值限制在0.2～0.4內(nèi)的情況)，同時(shí)進(jìn)行測(cè)定。

比較例1～3

在實(shí)施例1中，代替類植物乳桿菌#11-1(l.paraplantarum#11-1)株，使用了表1所示的革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌#4、#11-2和a，除此以外，與實(shí)施例1同樣地通過(guò)蠶的肌收縮測(cè)定了天然免疫活化能力。

將實(shí)施例1和比較例1～3的來(lái)源、性狀示于下述表1。另外，作為參考，將近緣菌株的名稱和“測(cè)定菌株與該菌株的同源性測(cè)定結(jié)果”一并示于表1。

將天然免疫活化能力的測(cè)定結(jié)果示于下述表2。

[表1]

[表2]

對(duì)本發(fā)明的乳酸菌的天然免疫活化能力進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果如表2所示，實(shí)施例1的類植物乳桿菌#11-1的天然免疫活化能力極高，為165u/mg。

另外，由表2中的實(shí)施例1與比較例1、2的“天然免疫活化能力(u/mg)”的測(cè)定結(jié)果的比較也可知，與從米糠醬菜得到的其他菌株相比，本發(fā)明的類植物乳桿菌#11-1顯示出極高的天然免疫活化能力。

另外，作為所謂“植物性乳酸菌”而為人所知的檸檬明串珠菌(leuconostoccitreum)km20的天然免疫活化能力為43u/mg，低于本發(fā)明的類植物乳桿菌#11-1(比較例3)。

比較例4

在實(shí)施例1中，代替類植物乳桿菌#11-1(l.paraplantarum#11-1)株，使用了保加利亞乳桿菌oll1073株，除此以外，與實(shí)施例1同樣地通過(guò)蠶的肌收縮測(cè)定了天然免疫活化能力。

比較例5

在實(shí)施例1中，代替類植物乳桿菌#11-1(l.paraplantarum#11-1)株，使用了干酪乳桿菌yit9029株，除此以外，與實(shí)施例1同樣地通過(guò)蠶的肌收縮測(cè)定了天然免疫活化能力。

比較例6

在實(shí)施例1中，代替類植物乳桿菌#11-1(l.paraplantarum#11-1)株，使用了乳酸乳球菌jcm5805株，除此以外，與實(shí)施例1同樣地通過(guò)蠶的肌收縮測(cè)定了天然免疫活化能力。

將比較例4～6的結(jié)果示于表3。

[表3]

比較例4～6的乳酸菌是實(shí)際在市售的發(fā)酵乳的制造中使用的乳酸菌。

如表3所示，可知實(shí)施例1的本發(fā)明的乳酸菌#11-1與比較例4～6的乳酸菌相比具有更高的天然免疫活化能力。

在將本發(fā)明的類植物乳桿菌#11-1的滅菌處理物作為測(cè)定物質(zhì)時(shí)，天然免疫活化能力極高，因此，本發(fā)明的乳酸菌、本發(fā)明的乳酸菌的死菌、或本發(fā)明的乳酸菌的處理物(培養(yǎng)物；濃縮物；糊化物；噴霧干燥物、冷凍干燥物、真空干燥物、滾筒干燥物等干燥物；液化物；稀釋物；破碎物；殺菌加工物；來(lái)自培養(yǎng)物的提取物；等等)作為天然免疫活化劑是優(yōu)異的。

另外，類植物乳桿菌作為屬、種已確認(rèn)了作為發(fā)酵食品的安全性。

利用本發(fā)明的類植物乳桿菌#11-1使乳發(fā)酵而得到的飲食品具有天然免疫活化能力。

實(shí)施例2

<對(duì)于細(xì)菌感染的效果實(shí)驗(yàn)>

按照常規(guī)方法從獲得自獨(dú)立行政法人理化學(xué)研究所的屬于植物乳桿菌的“l(fā)actobacillusplantarumsubsp.plantarumjcm1057”(以下，在圖3中也簡(jiǎn)稱為“植物乳桿菌pgn”)制備肽聚糖組分，將其以2.7質(zhì)量％混合至蠶的人工飼料中，連續(xù)供給2天。注射前以總量計(jì)供給了0.041g。

之后，如下考察了植物乳桿菌乳酸菌的肽聚糖對(duì)于綠膿桿菌感染的效果。

將綠膿桿菌(pao1)在30℃下培養(yǎng)整晚。將其菌液用生理鹽水稀釋1000倍，將該稀釋液50μl注射至蠶的體液中。

注射后，中止向蠶供給肽聚糖的食餌，在27℃下進(jìn)行飼養(yǎng)，經(jīng)時(shí)地計(jì)測(cè)存活數(shù)(存活比例)。

如圖3所示，可知食用了植物乳桿菌的肽聚糖組分的蠶與未食用的蠶相比，綠膿桿菌感染后的存活時(shí)間延長(zhǎng)。

可知，通過(guò)植物乳桿菌的肽聚糖組分，賦予了蠶對(duì)于綠膿桿菌感染的抵抗性。

認(rèn)為該結(jié)果是由于，口服給藥的植物乳桿菌的肽聚糖在腸內(nèi)將蠶的天然免疫活化，結(jié)果對(duì)感染控制顯示出效果。

可知，含有乳酸菌植物乳桿菌的肽聚糖作為有效成分的制劑對(duì)于人等哺乳類也作為感染癥預(yù)防治療劑有用。

另外，植物乳桿菌已確認(rèn)了作為發(fā)酵食品的安全性。因此，含有乳酸菌植物乳桿菌的肽聚糖作為有效成分的感染癥預(yù)防治療劑作為人等哺乳類的飲食品有用。

實(shí)施例3

<天然免疫活化劑和感染癥預(yù)防治療劑的制造>

<<片劑>>

將培養(yǎng)后的#11-1在121℃下滅菌處理20分鐘后，進(jìn)行濃縮。將該濃縮后的#11-1的培養(yǎng)液20.0mg、乳糖40mg、淀粉20mg以及低取代度羥丙基纖維素5mg均勻混合后，以羥丙基甲基纖維素8質(zhì)量％水溶液作為粘結(jié)劑，利用濕式造粒法制造壓片用顆粒。向其中加入提供潤(rùn)滑性所需要的硬脂酸鎂0.5mg～1mg后，使用壓片機(jī)進(jìn)行壓片，制成片劑。

<<液劑>>

將上述濃縮后的#11-1的培養(yǎng)液10.0mg溶解在2質(zhì)量％的2-羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液10ml中，制成注射用液劑。

工業(yè)實(shí)用性

本發(fā)明的新型乳酸菌及其處理物具有高的天然免疫活化能力，進(jìn)而還具有感染癥預(yù)防治療效果。因此，能夠提供含有利用了本發(fā)明的乳酸菌的活化天然免疫的天然免疫活化劑或感染癥預(yù)防治療劑的藥劑或飲食品，能夠在藥品業(yè)界、食品業(yè)界等中廣泛使用。

本申請(qǐng)基于2015年2月6日提交的日本專利申請(qǐng)?zhí)卦?015-022567，將該申請(qǐng)的全部?jī)?nèi)容引用至此，作為本發(fā)明說(shuō)明書的公開內(nèi)容并入本文中。

保藏號(hào)

nitebp-02005

序列表自由文本

序列號(hào)1是與屬于乳桿菌(lactobacillus)屬的未知菌株的16srdna的大致全長(zhǎng)相當(dāng)?shù)膲A基序列。

序列表

<110>株式公司染色體創(chuàng)藥研究所(genomepharmaceuticalsinstituteco.,ltd.)

株式公司安添納(antennaco.,ltd.)

國(guó)立大學(xué)法人東京大學(xué)(theuniversityoftokyo)

<120>乳酸菌、來(lái)源于該乳酸菌的天然免疫活化劑、感染癥預(yù)防治療劑和飲食品(lacticacidbacterium,innateimmunityactivatorderived

therefrom,agentforpreventingortreatinginfection,andfoodanddrink)

<130>pf-061059-wo

<160>1

<170>patentinversion3.5

<210>1

<211>1480

<212>dna

<213>類植物乳桿菌(lactobacillusparaplantarum)

<220>

<221>misc_feature

<222>(4)..(6)

<223>nisa,c,g,ort

<220>

<221>misc_feature

<222>(1473)..(1473)

<223>nisa,c,g,ort

<400>1

ctannntgcaagtcgaacgaactctggttaatgattgaaggtgcttgcacctgattgatt60

taacatttgagtgagtggcgaactggtgagtaacacgtgggaaacctgcccagaagtggg120

ggataacacctggaaacagatgctaataccgcataacaactcggaccgcatggtctgagt180

ttaaaagatggcttcggctatcacttttggatggtcccgcggcgtattagctagatggtg240

aggtaacggctcaccatggcaatgatacgtagccgacctgagagggtaatcggccacatt300

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gttgttaaagaagaacatatctgagagtaactgttcaggtattgacggtatttaaccaga480

aagccacggctaactacgtgccagcagccgcggtaatacgtaggtggcaagcgttatccg540

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tctggtctgtaactgacgctgaggctcgaaagtatgggtagcaaacaggattagataccc780

tggtagtccataccgtaaacgatgaatgctaagtgttggagggtttccgcccttcagtgc840

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