本發(fā)明涉及微生物學(xué)和植物病害生防技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，涉及一株糞產(chǎn)堿菌Y1及其在防治作物土傳病害中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

隨著作物產(chǎn)量水平的提高和設(shè)施農(nóng)業(yè)發(fā)展，土傳病害與連作障礙問題日趨突出，土壤病原微生物不斷增加，引發(fā)作物減產(chǎn)甚至絕收。土傳病害與連作障礙已經(jīng)成為農(nóng)業(yè)安全生產(chǎn)發(fā)展的瓶頸。作物連作3年，產(chǎn)量降低10％～20％,連作4～5年作物減產(chǎn)40～50％。設(shè)施蔬菜、馬鈴薯、大蒜、向日葵、油菜、棉花、大豆、水稻、小麥、甜菜土傳病害時(shí)常發(fā)生，減產(chǎn)日益嚴(yán)重，影響農(nóng)民增產(chǎn)增收。我國(guó)遭受嚴(yán)重土傳病害、連作障礙危害的面積高達(dá)5億畝。

由于土傳病害加重，我國(guó)每年使用的農(nóng)藥量超過130萬噸，農(nóng)藥使用量普遍超標(biāo)，平均每畝施用931.3g，比發(fā)達(dá)國(guó)家高出一倍。全國(guó)受農(nóng)藥污染的農(nóng)田約1600萬公頃，主要農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留超標(biāo)率高達(dá)20％。土傳病害防治技術(shù)沒有得到有效的解決，生物防治土傳病害是替代化學(xué)農(nóng)藥的最佳選擇。

土傳病害生物防治的菌種多為木霉菌、鏈霉菌、寡雄腐霉菌、芽孢菌等為佳。防治土傳病害的微生物菌劑產(chǎn)品，己商品化的產(chǎn)品如澳大利亞的K84，放射形龍桿菌菌株K84在1973年就被大規(guī)模生產(chǎn)，用來防治根癌??；1988年Gustafson公司在美國(guó)注冊(cè)生產(chǎn)A13產(chǎn)品Kodiak，成為作物生防菌商業(yè)化生產(chǎn)的拓疆者。利用熒光假單胞菌(P.fluorescens CHA0)生產(chǎn)的殺真菌制劑Yield能夠防治土壤真菌病害。普利茅斯沙雷氏菌(Serratia plymuthica HRO-C48)生產(chǎn)的產(chǎn)品和放線菌(Streptomyces sp.HRO-71)生產(chǎn)的防治草莓和土豆生物黃萎病(Verticillium dahliae)。Trichoderma reesei G1和Trichoderma viride G3防治立枯病效果顯著。

美國(guó)研制的Topshield(哈茨木霉T22)和以色列研制的Trichodex(哈茨木霉T39)均是用于防治真菌病害如灰霉病以及以色列Mycontrol公司開發(fā)的商品制劑Trichoderma2000主要用于防治立枯絲核菌、齊整小核菌、疫霉等；盾殼霉也是研究較多的一種生防菌，盾殼霉對(duì)核盤菌屬及蔥白腐小菌核菌引起的多種植物病害均有很強(qiáng)的抑制作用?，F(xiàn)在國(guó)外已有商品化產(chǎn)品出現(xiàn)，如前蘇聯(lián)開發(fā)的商品制劑Coniothyrin可以用于防治向日葵的菌核病，德國(guó)開發(fā)的商品制劑ntansWG可用于防治萵苣的核盤菌菌核病等。此外還有針對(duì)粘帚霉(Gliocladium virens)，由美國(guó)研制成功的SoilGard，用于防治猝倒病和根腐等，意大利研制的BiofoxC專用于防治鐮刀菌屬病害等。我國(guó)商品化的木霉菌殺菌劑(生菌消，又名滅菌靈)，主要用于防治各種作物的霜霉病，我國(guó)開發(fā)的5406抗生菌為鏈霉菌屬，定名為涇陽鏈霉菌，對(duì)黃萎病菌、枯萎病菌、立枯病菌、猝倒病菌等多種植物病害具有抗性，并且可促進(jìn)植物生長(zhǎng)。拮抗細(xì)菌(Bacillus subtilis)大面積示范推廣試驗(yàn)證明，拮抗菌在水稻植株上定植能力較強(qiáng)，繁殖較快，對(duì)紋枯病防效達(dá)75％～85％，對(duì)稻曲病防效達(dá)63.8％～85.7％。拮抗木霉菌和拮抗細(xì)菌混合發(fā)酵制成粉劑，成功地防治了保護(hù)地蔬菜和甜瓜的苗期病害。其它報(bào)道的細(xì)菌殺菌劑用來防治黃瓜及煙草炭疽病菌的地衣芽孢桿菌，枯草芽孢桿菌防治甘蔗黑腐病，放射假單孢桿菌防治小麥全蝕病等。木霉菌厚垣孢子制劑對(duì)新疆棉花黃萎病大面積試驗(yàn)防效達(dá)到60％，增產(chǎn)50％，棉絨長(zhǎng)度增加10％，表現(xiàn)出了良好的應(yīng)用前景。

向日葵具有耐鹽堿、耐瘠薄、抗干旱適應(yīng)性強(qiáng)等特性,籽實(shí)含油率高,油質(zhì)優(yōu)良,現(xiàn)已成為世界第4大油料作物。2002年全球向日葵種植面積為2600萬hm²，葵花籽產(chǎn)量為2400萬t。據(jù)報(bào)道，2014、2015年度全球葵花籽產(chǎn)量1551.9萬t。2004年我國(guó)向日葵面積為113.1萬hm²，總產(chǎn)為194.6萬t，2007年我國(guó)向日葵播種面積102萬hm²，總產(chǎn)量為192.8萬t，單產(chǎn)1889.3kg/ha。

向日葵連作導(dǎo)致土壤養(yǎng)分特別是鉀元素過度消耗，地力難以恢復(fù)。向日葵病害如菌核病、銹病、褐斑病、霜霉病、葉枯病，以及葵螟、蠐螬、小地老虎等，都會(huì)因連作而危害加劇。向日葵菌核病，又稱白腐病、爛盤病，對(duì)向日葵的產(chǎn)量和品質(zhì)影響很大。

向日葵菌核病發(fā)生很廣泛，發(fā)病較重，可造成向日葵莖折、花盤及種仁腐爛，對(duì)向日葵生產(chǎn)造成嚴(yán)重威脅。常見的有根腐型、莖腐型、葉腐型、花腐型4種類型，其中根腐型、花腐型受害重?；ǜ筒『Ρ憩F(xiàn)為花盤受害后，盤背面出現(xiàn)水浸狀病斑。

目前主要是藥劑防治:①用40％紋枯利800～1000倍液；②用50％托布津可濕性粉劑1000倍液；③用50％速克靈500～1000倍液。防治效果并不十分理想，防治效果僅為80％左右，因此，研發(fā)防治土傳病害與連作障礙的生物肥料非常重要。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是針對(duì)我國(guó)向日葵連作導(dǎo)致菌核病和銹病頻繁發(fā)生、減產(chǎn)嚴(yán)重甚至絕收的生產(chǎn)問題，提供一株高效防治向日葵菌核病和銹病的糞產(chǎn)堿菌Y1及其制備的微生物菌劑。

本發(fā)明的另一目的是提供所述糞產(chǎn)堿菌Y1在防治作物土傳病害中的應(yīng)用。

為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的，本發(fā)明從我國(guó)黑龍江省雙城市農(nóng)田土壤中分離并純化獲得一株高效防治向日葵菌核病和銹病的糞產(chǎn)堿菌(Alcaligenes faecalis)Y1，現(xiàn)已保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，地址北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所，郵編100101，保藏編號(hào)CGMCC NO.13510，保藏日期2016年12月28日。

根據(jù)菌株Y1的菌學(xué)特征及16S rDNA測(cè)序結(jié)果(SEQ ID NO:1)，確定菌株Y1為糞產(chǎn)堿菌。

本發(fā)明還提供含有所述糞產(chǎn)堿菌Y1的微生物菌劑。

本發(fā)明所述菌劑中還含有添加劑和保護(hù)劑。

其中，所述添加劑為二氧化硅、輕質(zhì)碳酸鈣、高嶺土、膨潤(rùn)土、稻殼粉、麥殼粉、秸稈粉等中的至少一種。

所述保護(hù)劑為甘油、脫脂奶、植物油、海藻酸鈉、殼聚糖等中的至少一種。

本發(fā)明提供的菌劑由如下重量份的組分組成：

糞產(chǎn)堿菌Y1發(fā)酵液 1份；

添加劑 0.5-3份；

保護(hù)劑 0.01-0.05份；

所述菌劑中糞產(chǎn)堿菌Y1活菌數(shù)為2×10⁸-5×10⁹cfu/g，優(yōu)選5×10⁸cfu/g。

本發(fā)明還提供所述糞產(chǎn)堿菌Y1或所述菌劑在防治作物土傳病害(向日葵菌核菌病、向日葵銹病、大棚蔬菜連作障礙)中的應(yīng)用。

所述土傳病害的病原菌包括核盤菌、向日葵柄銹菌、尖鐮孢菌等。

本發(fā)明還提供所述糞產(chǎn)堿菌Y1或所述菌劑在提高作物產(chǎn)量中的應(yīng)用。

所述作物包括大棚蔬菜。優(yōu)選地，所述作物包括向日葵、大蒜、甜瓜、西紅柿等。

本發(fā)明還提供所述糞產(chǎn)堿菌Y1或所述菌劑在制備農(nóng)用復(fù)混肥中的應(yīng)用。

本發(fā)明還提供一種農(nóng)用復(fù)混肥，由有效成分為糞產(chǎn)堿菌Y1的菌劑與氮肥、磷肥、鉀肥或復(fù)合肥組成。

本發(fā)明提供的有效成分為糞產(chǎn)堿菌Y1的微生物菌劑對(duì)于田間向日葵的促生增產(chǎn)效果明顯，且其作用效果不受田間土壤條件、化肥使用的抑制，可以在輕度鹽堿農(nóng)田中，與化肥一起施用。該菌劑對(duì)向日葵核盤引發(fā)的爛盤病防治效果達(dá)到95％以上，銹病防治效果達(dá)100％，向日葵增產(chǎn)16％-30％，大棚蔬菜增產(chǎn)30％以上。該微生物菌劑對(duì)我國(guó)農(nóng)田土傳病害和連作障礙防治，糧食持續(xù)增產(chǎn)和保護(hù)農(nóng)田生態(tài)環(huán)境具有重要意義。

附圖說明

圖1為本發(fā)明實(shí)施例5中Y1菌株平板抑制尖鐮孢菌的效果。

具體實(shí)施方式

以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。若未特別指明，實(shí)施例中所用的技術(shù)手段為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的常規(guī)手段，所用原料均為市售商品。

實(shí)施例1糞產(chǎn)堿菌Y1菌劑的制備

1.糞產(chǎn)堿菌Y1的分離及純化

從我國(guó)黑龍江省雙城市農(nóng)田土壤中分離并純化獲得一株高效防治向日葵菌核病和銹病的菌株Y1。

根據(jù)菌株Y1的菌學(xué)特征及16S rDNA測(cè)序結(jié)果(SEQ ID NO:1)，確定菌株Y1為糞產(chǎn)堿菌。

2.糞產(chǎn)堿菌Y1的培養(yǎng)

(1)培養(yǎng)基的組成(kg/t發(fā)酵液)

可溶性淀粉10kg，黃豆餅粉10kg，玉米粉5kg，葡萄糖1kg，蔗糖10kg，酵母粉5kg，(NH₄)₂SO₄ 3kg，K₂HPO₄ 0.2kg，NaCl 2.5kg，MgSO₄·7H₂O 0.1kg，CaCO₃ 0.5kg，F(xiàn)eSO₄0.001kg，硼酸(1％)1L，pH7.0，以水配制。

(2)發(fā)酵培養(yǎng)過程

將糞產(chǎn)堿菌Y1接種于土豆蔗糖(PDA)培養(yǎng)基上，25～28℃培養(yǎng)3d。將糞產(chǎn)堿菌Y1轉(zhuǎn)接入1000mL三角瓶，26-28℃，220r/min下液體發(fā)酵培養(yǎng)36h。然后按1％接種量接入50L種子罐，在200r/min、pH7.0、通氣量0.7vvm條件下，培養(yǎng)36h后，再按10v/v％接種量轉(zhuǎn)入500L發(fā)酵罐，在220r/min，pH7.0，通氣量0.7～1.0vvm下，培養(yǎng)3d。

3.糞產(chǎn)堿菌Y1菌劑的制備

發(fā)酵后加入保護(hù)劑海藻酸鈉，糞產(chǎn)堿菌Y1以輕質(zhì)碳酸鈣吸附。

4.糞產(chǎn)堿菌Y1菌劑造粒

向以上吸附、混合好的菌劑中加入適量稻殼粉、秸稈粉和膨潤(rùn)土粘結(jié)造粒，根據(jù)生產(chǎn)需要造粒形成適合向日葵的顆粒菌劑(活菌數(shù)為5×10⁸cfu/g)，與向日葵種子播種機(jī)一起施入土壤；或者利用造粒機(jī)形成與尿素、磷酸二銨、鉀肥、復(fù)合肥粒徑近似的顆粒生物肥料，其生物肥料與尿素、磷酸二銨、鉀肥、復(fù)合肥一起機(jī)械施入土壤。

實(shí)施例2糞產(chǎn)堿菌Y1菌劑對(duì)盆栽向日葵促生效果的影響

1.Y1菌劑對(duì)非鹽堿土壤盆栽向日葵的促生效果

在溫室條件下進(jìn)行了糞產(chǎn)堿菌Y1菌劑的接種試驗(yàn)，盆栽條件下種植向日葵，分別接種2種生物肥料菌劑。試驗(yàn)結(jié)果顯示，接種微生物菌劑都能夠提高向日葵的生物量(表1)。Y1菌劑生物量最高，比對(duì)照(不施用微生物菌劑)提高46.0％；接種糞產(chǎn)堿菌CC1d(本實(shí)驗(yàn)室分離)菌劑的向日葵生物量顯著低于Y1，仍比對(duì)照提高30.1％。試驗(yàn)結(jié)果表明Y1菌劑促進(jìn)向日葵生長(zhǎng)效果顯著(表1)。

表1生物肥料對(duì)非鹽堿土盆栽向日葵生物量的影響

注：a、b、c表示處理組之間差異顯著。

2.Y1菌劑對(duì)輕度鹽堿土盆栽向日葵的促生效果

在溫室條件下進(jìn)行了Y1菌劑的接種試驗(yàn)，試驗(yàn)土壤來自于內(nèi)蒙烏拉特古前期，輕度鹽堿，連年種植向日葵，菌核病和銹病異常嚴(yán)重，2014年絕收。盆栽條件下向日葵分別接種2種生物肥料菌劑，CCla菌株是由本實(shí)驗(yàn)室分離自吉省公主嶺土壤，鑒定為糞產(chǎn)堿菌(Alcaligenes faecalis)，與Y1一起進(jìn)行抗病增產(chǎn)效果研究。試驗(yàn)結(jié)果顯示，所有微生物菌劑都能夠提高向日葵的生物量，Y1菌劑生物量最高，比對(duì)照提高21.57％；糞產(chǎn)堿菌CCla菌劑的向日葵生物量略低于Y1菌劑，但是仍比對(duì)照提高14.71％。表明Y1菌劑在促進(jìn)向日葵生長(zhǎng)方面作用顯著(表2)。

表2盆栽條件下生物肥料對(duì)輕度鹽堿土向日葵生物量的影響

注：a、b表示處理組之間差異顯著。

實(shí)施例3 Y1菌劑大棚西紅柿產(chǎn)量的作用效果

在化肥、有機(jī)肥大量使用條件下，對(duì)4種生物肥料的作用效果進(jìn)行了研究。氮磷鉀復(fù)合肥(15:15:15)用量83kg/畝，有機(jī)肥(雞糞)用量7t/畝。菌株J15(本實(shí)驗(yàn)室分離，鑒定為嗜麥芽窄食單胞菌屬Stenotrophomonas sp.)、JK24(本實(shí)驗(yàn)室分離，鑒定為巨大芽孢桿菌Bacillus megaterium)、JK8(本實(shí)驗(yàn)室分離，鑒定為中間短波單胞菌Brevundimonas intermedia)三個(gè)菌株均由本實(shí)驗(yàn)室分離自吉林省公主嶺農(nóng)田土壤，與菌株Y1一起進(jìn)行田間試驗(yàn)。產(chǎn)量結(jié)果顯示，大棚西紅柿接種4種生物肥料顯著增產(chǎn)，以生物肥料Y1、J15的西紅柿增產(chǎn)效果顯著，比對(duì)照分別增產(chǎn)866.4kg/畝和741.6kg/畝，分別提高35.0％和30.0％，JK8菌劑僅增產(chǎn)212.9kg/畝比對(duì)照提高8.6％。所有處理中，Y1菌劑的增產(chǎn)效果最好(表3)。

表3不同生物肥料菌劑對(duì)西紅柿產(chǎn)量的影響(第2次收獲)

注：a、b、c表示處理組之間差異顯著。

實(shí)施例4糞產(chǎn)堿菌Y1菌劑對(duì)田間向日葵的作用效果

在內(nèi)蒙古巴彥淖爾盟的烏拉特前旗進(jìn)行了不同微生物菌劑防治向日葵治菌核病、柄銹菌病害的試驗(yàn)研究。土壤為鹽堿土，向日葵品種為L(zhǎng)DS009，氮磷鉀復(fù)合肥(15:15:15)用量為40kg/畝。以黑曲霉C2(CGMCC NO.7511)、Wu5(由本實(shí)驗(yàn)室分離自山東省金鄉(xiāng)縣大蒜土壤，鑒定為黑曲霉)制備生物菌劑，生物菌劑用量為60kg/畝。結(jié)果表明，整個(gè)生長(zhǎng)期間向日葵沒有任何病害發(fā)生，既沒有菌核菌病害，也沒有柄銹菌病害發(fā)生，而周圍農(nóng)田向日葵菌核菌、柄銹菌導(dǎo)致的病害嚴(yán)重，絕大多數(shù)農(nóng)田絕收。田間實(shí)驗(yàn)產(chǎn)量結(jié)果顯示，菌株Y1的向日葵產(chǎn)量最高為216.1公斤，增產(chǎn)率16.8％；黑曲霉Wu5產(chǎn)量次之，畝產(chǎn)量209.2公斤，增產(chǎn)率13％；黑曲霉C2增產(chǎn)率略低于菌株Wu5，畝產(chǎn)量達(dá)到205.7公斤，增產(chǎn)11.1％。表明Y1具有良好的增產(chǎn)效果以及應(yīng)用潛力(表4)。

表4不同生物肥料菌劑對(duì)向日葵產(chǎn)量影響

注：a、b表示處理組之間差異顯著。

實(shí)施例5 Y1菌劑對(duì)田間向日葵的增產(chǎn)作用

田間試驗(yàn)主要研究生物肥料與常用磷酸二銨的最佳配合效果，充分發(fā)揮生物肥料和化肥的最大作用。利用菌株放2(ACCC40120，灰色鏈霉菌)、QQ6(本實(shí)驗(yàn)室分離自內(nèi)蒙古烏拉特前旗鹽堿土，鑒定為黑曲霉)、Y1菌株制備3種生物肥料。生物肥料設(shè)置4水平，分別是0、50、100和150kg/畝；磷酸二銨用量40kg/畝，所有處理重復(fù)三次。結(jié)果顯示，所有化肥用量條件下，使用糞產(chǎn)堿菌Y1生物肥料的4個(gè)水平都能夠提高向日葵的產(chǎn)量(表5)。使用磷酸二銨40kg/畝條件下，三個(gè)生物肥料用量都表現(xiàn)出明顯的增產(chǎn)效果，隨著生物肥料用量增加，向日葵產(chǎn)量不斷提高。接種生物肥料50kg/畝，菌株放2、QQ6和Y1比對(duì)照分別增產(chǎn)12.7％、27.5％和29.1％；接種生物肥料100kg/畝，菌株放2、QQ6和Y1比對(duì)照分別增產(chǎn)26.8％、27.0％和31.0％；接種生物肥料最大量，達(dá)到150kg/畝，菌株放2、QQ6和Y1比對(duì)照分別增產(chǎn)28.3％、32.0％和32.8％。接種50kg/畝時(shí)，向日葵產(chǎn)量已與100kg/畝差異不大，使用磷酸二銨40kg/畝配合50kg/畝生物肥料比較合適(表5)。

表5糞產(chǎn)堿菌Y1生物肥料對(duì)田間向日葵產(chǎn)量的影響

注：a、b、c表示處理組之間差異顯著。

實(shí)施例6 Y1菌株平板抑制尖鐮孢菌的效果

為了驗(yàn)證Y1拮抗病原真菌的能力，將尖鐮孢病原真菌(ACCC36241)接種在PDYA培養(yǎng)基平板中央，在病原菌周圍均勻劃分為4個(gè)點(diǎn)，其中3個(gè)點(diǎn)接種Y1菌，另一點(diǎn)不接種Y1，作為對(duì)照。結(jié)果顯示，接種Y1的3個(gè)點(diǎn)病原菌受到抑制，而不接種Y1的尖鐮孢菌菌落生長(zhǎng)較快。證明Y1具有抑制絲狀病原真菌生長(zhǎng)的能力。(圖1)

本發(fā)明對(duì)拮抗向日葵菌核病和銹病、防治大棚蔬菜連作障礙的高效拮抗菌Y1及其微生物菌劑進(jìn)行了多方面研究，該菌劑能夠防治向日葵菌核病和銹病、防治大棚蔬菜連作障礙，提高作物產(chǎn)量。開發(fā)的抗病增產(chǎn)的Y1微生物菌劑，展示出巨大的應(yīng)用前景。

雖然，上文中已經(jīng)用一般性說明及具體實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對(duì)之作一些修改或改進(jìn)，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。

序列表

<110> 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)資源與農(nóng)業(yè)區(qū)劃研究所

<120> 糞產(chǎn)堿菌Y1及其在防治作物土傳病害中的應(yīng)用

<130> KHP161119321.4Q

<160> 1

<170> PatentIn version 3.3

<210> 1

<211> 1051

<212> DNA

<213> 糞產(chǎn)堿菌(Alcaligenes faecalis)

<400> 1

ggcctattac ggggagcttt cacatgcaag tcgaacggca gcgcgagaga gcttgctctc 60

ttggcggcga gtggcggacg ggtgagtaat atatcggaac gtgcccagta gcgggggata 120

actactcgaa agagtggcta ataccgcata cgccctacgg gggaaagggg gggatcgcaa 180

gacctctcac tattggagcg gccgatatcg gattagctag ttggtggggt aaaggctcac 240

caaggcaacg atccgtagct ggtttgagag gacgaccagc cacactggga ctgagacacg 300

gcccagactc ctacgggagg cagcagtggg gaattttgga caatggggga aaccctgatc 360

cagccatccc gcgtgtatga tgaaggcctt cgggttgtaa agtacttttg gcagagaaga 420

aaaggtatct cctaatacga gatactgctg acggtatctg cagaataagc accggctaac 480

tacgtgccag cagccgcggt aatacgtagg gtgcaagcgt taatcggaat tactgggcgt 540

aaagcgtgtg taggcggttc ggaaagaaag atgtgaaatc ccagggctca accttggaac 600

tgcattttta actgccgagc tagagtatgt cagagggggg tagaattcca cgtgtagcag 660

tgaaatgcgt agatatgtgg aggaataccg atggcgaagg cagccccctg ggataatact 720

gacgctcaga cacgaaagcg tggggagcaa acaggattag ataccctggt agtccacgcc 780

ctaaacgatg tcaactagct gttggggccg ttaggcctta gtagcgcagc taacgcgtga 840

agttgaccgc ctggggagta cggtcgcaag attaaaactc aaaggaattg acggggaccc 900

gcacaagcgg tggatgatgt ggattaattc gatgcaacgc gaaaaacctt acctaccctt 960

gacatgtctg gaaagccgaa gagatttggc cgtgctcgca agagaaccgg aacacaggtg 1020

ctgcatggct gtcgtcagct cgtgtcgtga a 1051