本發(fā)明屬于真菌栽培領(lǐng)域，特別涉及一種黑耳中伴生菌炭角菌的栽培方法。

背景技術(shù)：

西藏一種黑耳Exidia sp.真菌是木耳科Auriculariaceae中的一種珍惜可食用的野生物種。因其風(fēng)味獨(dú)特，營(yíng)養(yǎng)豐富而廣受當(dāng)?shù)匕傩障矏?ài)，目前在西藏，此種珍惜黑耳每公斤售價(jià)達(dá)到3800元/公斤，且供不應(yīng)求。因此研究此種黑耳的人工栽培成為一個(gè)亟需的熱門(mén)研究工作。

目前研究發(fā)現(xiàn)炭角菌是黑耳中的一種伴生菌，因此，如何通過(guò)炭角菌的栽培更好的栽培黑耳成為了一個(gè)新的課題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種黑耳中伴生菌炭角菌的栽培方法，該方法具有出菇無(wú)污染、可工廠化和規(guī)?；a(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)，栽培效果良好，具有良好的應(yīng)用前景。

本發(fā)明的一種黑耳中伴生菌炭角菌的栽培方法，包括：

(1)將野生黑耳子實(shí)體進(jìn)行組織分離，接種于滅菌后的PDA試管培養(yǎng)基中，放置于18℃的室內(nèi)，無(wú)光照培養(yǎng)8-12d，待菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)試管，進(jìn)行轉(zhuǎn)接，得到炭角菌菌種；

(2)制備母種培養(yǎng)料，滅菌，接入步驟(1)得到的炭角菌菌種，進(jìn)行培養(yǎng)得到母種菌絲；

(3)將一級(jí)菌種培養(yǎng)料攪拌均勻，然后加入水進(jìn)行濕潤(rùn)，至混合料含水量達(dá)50～60％，然后裝入菌包中進(jìn)行滅菌，得到一級(jí)菌包；接入步驟(2)得到的母種菌絲進(jìn)行培養(yǎng)，得到一級(jí)菌種；二級(jí)菌種培養(yǎng)料制備二級(jí)菌包與一級(jí)菌包相同，將得到的一級(jí)菌種接入二級(jí)菌包進(jìn)行培養(yǎng)，得到二級(jí)菌種；

(4)將栽培種培養(yǎng)料攪拌均勻，然后加入水進(jìn)行濕潤(rùn)，至混合料含水量達(dá)55～60％，然后裝入菌包中進(jìn)行滅菌，再接入步驟(3)得到的二級(jí)菌種，放于23℃培養(yǎng)房中進(jìn)行避光養(yǎng)菌，15～20d后菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)菌包；

(5)將步驟(4)得到的長(zhǎng)滿(mǎn)菌絲的菌包從培養(yǎng)房中轉(zhuǎn)移至出菇房中，出菇房溫度18-23℃，濕度85％以上，弱光培養(yǎng)，直至出現(xiàn)原基；

10-15d后原基出現(xiàn)，把原基部位菌包袋割破，使原基接觸空氣，出菇房濕度調(diào)至90％以上；3-5d后第一潮菇長(zhǎng)成，進(jìn)行采收。

所述步驟(1)中的PDA試管培養(yǎng)基的組成為：馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂20g，加水至1000mL。

所述步驟(2)中的母種培養(yǎng)料的組成為：瓊脂20g、鮮馬鈴薯煮液200g、葡萄糖10g、KH₂PO₄ 0.5g、VB_l 10mg、CaCl₂·2H₂O 0.05g、MgSO₄·7H₂O 0.15g，加蒸餾水至1000rnL。

所述步驟(2)中的培養(yǎng)條件為：溫度20-23℃，濕度60-65％，無(wú)光照培養(yǎng)。

所述步驟(3)中的一級(jí)和二級(jí)菌種培養(yǎng)料的組成為：78％木屑、20％麩皮、1％蔗糖和1％石膏粉。

所述步驟(3)中的培養(yǎng)條件為：溫度20-23℃，濕度60-65％，無(wú)光照培養(yǎng)。

所述步驟(4)中的栽培種培養(yǎng)料的組成為：75％木屑、20％麩皮、1％蔗糖和1％石膏粉。

有益效果

本發(fā)明具有出菇無(wú)污染、可工廠化和規(guī)模化生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)，栽培效果良好，具有良好的應(yīng)用前景。

附圖說(shuō)明

圖1為炭角菌栽培子實(shí)體照片。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書(shū)所限定的范圍。

實(shí)施例1

(1)菌種獲得和培養(yǎng)

將野生黑耳Exidia sp.子實(shí)體進(jìn)行組織分離，接種于滅菌后的PDA試管培養(yǎng)基中，放置于18℃室內(nèi)，無(wú)光照培養(yǎng)8-12d，待菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)試管，進(jìn)行轉(zhuǎn)接，得到炭角菌菌種；

PDA試管培養(yǎng)基的組成為：馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂20g，加水至1000mL；

(2)制備母種

母種培養(yǎng)料的組成為：瓊脂20g、鮮馬鈴薯煮液200g、葡萄糖10g、KH₂PO₄ 0.5g、VB_l10mg、CaCl₂·2H₂O 0.05g、MgSO₄·7H₂O 0.15g，加蒸餾水至1000rnL；

先用水把切好的馬鈴薯煮好，后濾掉溶液中的馬鈴薯，后加入瓊脂進(jìn)行融化，融化后加入母種培養(yǎng)料中的其余藥品，并調(diào)整溶液至1L，倒入試管中滅菌，接入步驟(1)得到的炭角菌菌種，進(jìn)行培養(yǎng)得到母種菌絲；培養(yǎng)條件為：溫度20-23℃，濕度60-65％，無(wú)光照培養(yǎng)；

(3)制備一、二級(jí)菌種

將一級(jí)菌種培養(yǎng)料裝入拌料機(jī)攪拌均勻，后緩緩加入水進(jìn)行濕潤(rùn)，至混合料含水量達(dá)50～60％，然后裝入菌包中進(jìn)行滅菌，得到一級(jí)菌包；接入步驟(2)得到的母種菌絲進(jìn)行培養(yǎng)，得到一級(jí)菌種；二級(jí)菌種培養(yǎng)料制備二級(jí)菌包與一級(jí)菌包相同，將得到的一級(jí)菌種接入二級(jí)菌包進(jìn)行培養(yǎng)，得到二級(jí)菌種；

一級(jí)和二級(jí)菌種培養(yǎng)料的組成為：78％木屑、20％麩皮、1％蔗糖和1％石膏粉；培養(yǎng)條件為：溫度20-23℃，濕度60-65％，無(wú)光照培養(yǎng)。

(4)菌包養(yǎng)菌

將栽培種培養(yǎng)料裝入拌料機(jī)攪拌均勻，后緩緩加入水進(jìn)行濕潤(rùn)，至混合料含水量達(dá)55～60％，然后裝入菌包中進(jìn)行滅菌，再接入步驟(3)得到的二級(jí)菌種，每個(gè)菌包中接入0.5×1.0cm的二級(jí)菌種塊，放于23℃培養(yǎng)房中進(jìn)行避光養(yǎng)菌，養(yǎng)菌15～20d后菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)菌包；

栽培種培養(yǎng)料的組成為：75％木屑、20％麩皮、1％蔗糖和1％石膏粉；

(5)出菇和管理

將步驟(4)得到的長(zhǎng)滿(mǎn)菌絲的菌包從培養(yǎng)房中轉(zhuǎn)移至出菇房中，出菇房溫度要求18-23℃，濕度85％以上，弱光培養(yǎng)，直至出現(xiàn)原基；

10-15d后原基出現(xiàn)，把原基部位菌包袋割破，使其接觸空氣，出菇房濕度調(diào)至90％以上；3-5d后第一潮菇長(zhǎng)成，進(jìn)行采收。

得到的炭角菌菌種號(hào)為L(zhǎng)CHYDHE0001，采用的栽培方式是袋料栽培。