技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種利用雙重PCR技術(shù)篩選產(chǎn)發(fā)菜多糖重組酵母菌株的方法,利用酵母DNA提取試劑盒提取發(fā)菜酵母重組菌株,提取重組菌株基因組DNA;設(shè)計引物序列為5’?3’的引物1和引物序列為5’?3’的引物2,引物1;進(jìn)行單重PCR擴(kuò)增,再進(jìn)行雙重PCR擴(kuò)增;對Pho1?F/R和Pho2?F/R兩對引物進(jìn)行引物配比,擴(kuò)增PCR;用雙重PCR擴(kuò)增體系,對產(chǎn)發(fā)菜多糖重組酵母菌株進(jìn)行篩選。該篩選方法可以一次性擴(kuò)增和篩選96個重組菌株,大大縮短篩選時間,節(jié)省篩選成本,提高篩選效率,實現(xiàn)高通量篩選;可以短時間完成整個實驗篩選過程,防止長時間篩選過程對菌種的污染,減少污染率和菌種的儲藏成本。
技術(shù)研發(fā)人員:趙煜;彭濤;馬文錦;王博;陳興葉;殷欣;路宏科;張輝;張小燕;金紅;楊旭星
受保護(hù)的技術(shù)使用者:甘肅省輕工研究院
文檔號碼:201611183112
技術(shù)研發(fā)日:2016.12.20
技術(shù)公布日:2017.03.15