堿性-酸性蛋白酶聯(lián)合酶解制備富鉻酵母自溶粉的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種酵母衍生物的制備方法，具體的說涉及堿性-酸性蛋白酶聯(lián)合酶 解制備富鉻酵母自溶粉的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 酵母廣泛應(yīng)用于面包發(fā)酵、啤酒發(fā)酵等領(lǐng)域，酵母的種類繁多，包括面包酵母、啤 酒酵母、藥用酵母，酵母中含有豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸等物質(zhì)，通過對酵母水解，能夠獲得酵 母的蛋白質(zhì)或氨基酸等物質(zhì)。
[0003] 自溶酵母粉選用特異鮮酵母為原料，采用高效破壁和多聯(lián)酶解等高新技術(shù)，經(jīng)提 純精制而成，產(chǎn)品富含核苷酸，營養(yǎng)小肽、谷胱甘肽及酵母細(xì)胞壁多糖等多種營養(yǎng)成分，不 含載體，耐高溫、可制粒，對動物具有極佳的誘食性、免疫性和促生長性。適用于水產(chǎn)、畜禽 及寵物飼料。
[0004] 富谷胱甘肽酵母用于發(fā)酵獲得谷胱甘肽，傳統(tǒng)的成本最低的提取方法是銅鹽法， 含有GSH的酵母提取液與氧化亞銅反應(yīng)生成沉淀GSCu，然后還原獲得GSH，但去除沉淀后的 母液中仍含有大量的谷胱甘肽及氨基酸、多肽，而現(xiàn)有技術(shù)中母液大多被排入污水處理池 做廢水處理，沒有回收綜合利用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于解決現(xiàn)有的不足，提供堿性-酸性蛋白酶聯(lián)合酶解制備富鉻酵 母自溶粉的方法，將谷胱甘肽提取母液變廢為寶，獲得谷胱甘肽含量高、營養(yǎng)價值高的富鉻 酵母粉。
[0006] 本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是： 堿性-酸性蛋白酶聯(lián)合酶解制備富鉻酵母自溶粉的方法，所述富鉻酵母自溶粉富含有 機(jī)硒和谷胱甘肽，所述富鉻酵母自溶粉的制備方法按如下步驟進(jìn)行： (1) 谷胱甘肽提取母液預(yù)處理:按0.5-0.81^/噸母液添加硫化鈉，于常溫攪拌反應(yīng)10-15min，然后用氫氧化鋇調(diào)母液pH至5.6-5.8，攪拌3〇-45min，保證氫氧化鋇與母液充分反 應(yīng)，所述谷胱甘肽提取母液的pH值為1.8-2.5，谷胱甘肽含量0.5-0.6g/L，固形物質(zhì)量含量 為5-5.5%; (2) 母液沉降：步驟（1)反應(yīng)好的母液送至沉降槽自然沉降20-24h以上，然后上清液或 抽濾或板框壓濾，充分去除雜質(zhì)待用； (3) 收集新鮮的含濕量40-50%的富鉻酵母泥，加入步驟(2)的母液，升溫至55-60°C，充 分?jǐn)嚢杈鶆?，然后采用高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)1-2遍； (4) 一次酶解，高壓均質(zhì)后的酵母液用氫氧化鈉調(diào)pH至7.20-7.5,然后調(diào)整溫度為50-55°C，按體積分?jǐn)?shù)10-12%。添加10-20萬單位的堿性蛋白酶進(jìn)行一次酶解，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝?開始計(jì)時酶解5-8小時，過程溫度維持50-55°C，pH讓其自然下降，當(dāng)pH到6.0-6.1左右時一 次酶解結(jié)束； (5) 二次酶解:一次酶解后，用稀硫酸調(diào)pH至5.4，溫度50-55°C，然后按體積分?jǐn)?shù)0.8-1%〇加80-100萬單位的菠蘿蛋白酶，酶解0.5-1.5小時，過程pH讓其自然下降； (6) 干燥:二次酶解結(jié)束后，升溫至80-82°C，維持5-10min滅活酶，然后經(jīng)噴霧干燥獲得 富谷胱甘肽核酸酵母粉。
[0007] 步驟(1)中硫化鈉現(xiàn)用水溶解，然后以流加的方式加入待預(yù)處理的母液中，邊流加 邊攪拌。
[0008] 步驟（3)中母液與酵母泥的質(zhì)量比為1:1，富鉻酵母的有機(jī)硒含量以干基計(jì)為 0.15-0.2%〇
[0009] 本發(fā)明的有益效果是：（1)通過合理的方式回收提取谷胱甘肽后的母液，變廢為 寶，避免了母液中的谷胱甘肽和氨基酸多肽成分的浪費(fèi)，降低了污水處理成本；（2)采用合 理的酶解工藝，獲得的富鉻酵母粉總氮、氨基酸態(tài)氮含量高，營養(yǎng)價值高，灰分低，產(chǎn)品品質(zhì) 好。
【具體實(shí)施方式】
[0010] 下面通過具體實(shí)施例，對本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的具體說明。
[0011] 實(shí)施例1: 堿性-酸性蛋白酶聯(lián)合酶解制備富鉻酵母自溶粉的方法，所述富鉻酵母自溶粉富含有 機(jī)硒和谷胱甘肽，所述富鉻酵母自溶粉的制備方法按如下步驟進(jìn)行： (1) 谷胱甘肽提取母液預(yù)處理:按0.5Kg/噸母液添加硫化鈉，于常溫攪拌反應(yīng)lOmin，然 后用氫氧化鋇調(diào)母液pH至5.6,攪拌30min，保證氫氧化鋇與母液充分反應(yīng)，所述谷胱甘肽提 取母液的pH值為1.8，谷胱甘肽含量0.5g/L，固形物質(zhì)量含量為5%; (2) 母液沉降：步驟(1)反應(yīng)好的母液送至沉降槽自然沉降20h以上，然后上清液或抽濾 或板框壓濾，充分去除雜質(zhì)待用； (3) 收集新鮮的含濕量40%的富鉻酵母泥，加入步驟(2)的母液，升溫至55°C，充分?jǐn)嚢?均勻，然后采用高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)1遍； (4) 一次酶解，高壓均質(zhì)后的酵母液用氫氧化鈉調(diào)pH至7.20,然后調(diào)整溫度為50°C，按 體積分?jǐn)?shù)10%。添加20萬單位的堿性蛋白酶進(jìn)行一次酶解，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝箝_始計(jì)時酶解5 小時，過程溫度維持50°C，pH讓其自然下降，當(dāng)pH到6.0左右時一次酶解結(jié)束； (5) 二次酶解:一次酶解后，用稀硫酸調(diào)pH至5.4，溫度50°C，然后按體積分?jǐn)?shù)0.8%〇加 100萬單位的菠蘿蛋白酶，酶解0.5小時，過程pH讓其自然下降； (6) 干燥:二次酶解結(jié)束后，升溫至80°C，維持5min滅活酶，然后經(jīng)噴霧干燥獲得富谷胱 甘肽核酸酵母粉。
[0012] 步驟(1沖硫化鈉現(xiàn)用水溶解，然后以流加的方式加入待預(yù)處理的母液中，邊流加 邊攪拌。
[0013] 步驟（3)中母液與酵母泥的質(zhì)量比為1:1，富鉻酵母的有機(jī)硒含量以干基計(jì)為 0.15%〇
[0014] 實(shí)施例2: 堿性-酸性蛋白酶聯(lián)合酶解制備富鉻酵母自溶粉的方法，所述富鉻酵母自溶粉富含有 機(jī)硒和谷胱甘肽，所述富鉻酵母自溶粉的制備方法按如下步驟進(jìn)行： (1) 谷胱甘肽提取母液預(yù)處理:按0.8Kg/噸母液添加硫化鈉，于常溫攪拌反應(yīng)15min，然 后用氫氧化鋇調(diào)母液pH至5.8,攪拌45min，保證氫氧化鋇與母液充分反應(yīng)，所述谷胱甘肽提 取母液的pH值為2.5，谷胱甘肽含量0.6g/L，固形物質(zhì)量含量為5.5%; (2) 母液沉降：步驟(1)反應(yīng)好的母液送至沉降槽自然沉降24h以上，然后上清液或抽濾 或板框壓濾，充分去除雜質(zhì)待用； (3) 收集新鮮的含濕量50%的富鉻酵母泥，加入步驟(2)的母液，升溫至60°C，充分?jǐn)嚢?均勻，然后采用高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)2遍； (4) 一次酶解，高壓均質(zhì)后的酵母液用氫氧化鈉調(diào)pH至7.5，然后調(diào)整溫度為55°C，按體 積分?jǐn)?shù)12%。添加20萬單位的堿性蛋白酶進(jìn)行一次酶解，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝箝_始計(jì)時酶解8小 時，過程溫度維持55°C，pH讓其自然下降，當(dāng)pH到6.1左右時一次酶解結(jié)束； (5) 二次酶解:一次酶解后，用稀硫酸調(diào)pH至5.4，溫度55°C，然后按體積分?jǐn)?shù)1%。加80 萬單位的菠蘿蛋白酶，酶解1.5小時，過程pH讓其自然下降； (6) 干燥:二次酶解結(jié)束后，升溫至82°C，維持lOmin滅活酶，然后經(jīng)噴霧干燥獲得富谷 胱甘肽核酸酵母粉。
[0015] 步驟(1沖硫化鈉現(xiàn)用水溶解，然后以流加的方式加入待預(yù)處理的母液中，邊流加 邊攪拌。
[0016] 步驟（3)中母液與酵母泥的質(zhì)量比為1:1，富鉻酵母的有機(jī)硒含量以干基計(jì)為 0.2%〇
[0017] 步驟(3)中母液與酵母泥的質(zhì)量比為1:1。
[0018] 實(shí)施例1-2制備得到的硒酵母自溶粉的質(zhì)量指標(biāo)如下：
以上所述的實(shí)施例只是本發(fā)明的一種較佳的方案，并非對本發(fā)明作任何形式上的限 制，在不超出權(quán)利要求所記載的技術(shù)方案的前提下還有其它的變體及改型。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 堿性-酸性蛋白酶聯(lián)合酶解制備富鉻酵母自溶粉的方法，其特征在于:所述富鉻酵母 自溶粉富含有機(jī)鉻和谷胱甘肽，所述富鉻酵母自溶粉的制備方法按如下步驟進(jìn)行： (1) 谷胱甘肽提取母液預(yù)處理：按0.5-0.8私/噸母液添加硫化鈉，于常溫攪拌反應(yīng)10-15min，然后用氫氧化鋇調(diào)母液pH至5.6-5.8，攪拌3〇-45min，保證氫氧化鋇與母液充分反 應(yīng)，所述谷胱甘肽提取母液的pH值為1.8-2.5，谷胱甘肽含量0.5-0.6g/L，固形物質(zhì)量含量 為5-5.5%; (2) 母液沉降：步驟（1)反應(yīng)好的母液送至沉降槽自然沉降20-24h以上，然后上清液或 抽濾或板框壓濾，充分去除雜質(zhì)待用； (3) 收集新鮮的含濕量40-50%的富鉻酵母泥，加入步驟(2)的母液，升溫至55-60 °C，充 分?jǐn)嚢杈鶆?，然后采用高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)1-2遍； (4) 一次酶解，高壓均質(zhì)后的酵母液用氫氧化鈉調(diào)pH至7.20-7.5,然后調(diào)整溫度為50-55°C，按體積分?jǐn)?shù)10-12%。添加10-20萬單位的堿性蛋白酶進(jìn)行一次酶解，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝?開始計(jì)時酶解5-8小時，過程溫度維持50-55°C，pH讓其自然下降，當(dāng)pH到6.0-6.1左右時一 次酶解結(jié)束； (5) 二次酶解:一次酶解后，用稀硫酸調(diào)pH至5.4，溫度50-55°C，然后按體積分?jǐn)?shù)0.8-1%〇加80-100萬單位的菠蘿蛋白酶，酶解0.5-1.5小時，過程pH讓其自然下降； (6) 干燥:二次酶解結(jié)束后，升溫至80-82°C，維持5-10min滅活酶，然后經(jīng)噴霧干燥獲得 富谷胱甘肽核酸酵母粉。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的堿性-酸性蛋白酶聯(lián)合酶解制備富鉻酵母自溶粉的方法，其特 征在于:步驟（1)中硫化鈉現(xiàn)用水溶解，然后以流加的方式加入待預(yù)處理的母液中，邊流加 邊攪拌。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的堿性-酸性蛋白酶聯(lián)合酶解制備富鉻酵母自溶粉的方法，其特 征在于:步驟(3)中母液與酵母泥的質(zhì)量比為1:1，富鉻酵母的有機(jī)鉻含量以干基計(jì)為0.15-0.2%〇
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種雙酶法制備富鉻酵母自溶粉的方法,所述酵母自溶粉富含谷胱甘肽和有機(jī)鉻，由提取谷胱甘肽后的母液經(jīng)過預(yù)處理，然后與鮮酵母混合，經(jīng)過酶解、干燥獲得，具體步驟如下:（1）谷胱甘肽提取母液預(yù)處理，（2）母液沉降，（3）均質(zhì)破壁，（4）一次酶解，（5）二次酶解，（6）二次酶解結(jié)束后經(jīng)噴霧干燥獲得富鉻酵母自溶粉。本發(fā)明的有益效果是：（1）通過合理的方式回收提取谷胱甘肽后的母液，變廢為寶，避免了母液中的谷胱甘肽和氨基酸多肽成分的浪費(fèi)；（2）獲得的自溶粉總氮、氨基酸態(tài)氮含量高，營養(yǎng)價值高，灰分低，產(chǎn)品品質(zhì)好。
【IPC分類】A23K10/16, A23L31/10, C07K5/093, C12N1/16, A23L33/14, A23L33/145, C12P21/06, A23L33/18, A23K20/147, A23L31/15
【公開號】CN105614895
【申請?zhí)枴緾N201510965662
【發(fā)明人】厲政軒
【申請人】厲政軒
【公開日】2016年6月1日
【申請日】2015年12月22日