1.一種利用雙重PCR技術(shù)篩選產(chǎn)發(fā)菜多糖重組酵母菌株的方法，其特征在于，該篩選方法具體按以下步驟進(jìn)行：
步驟1：利用酵母DNA提取試劑盒提取發(fā)菜酵母重組菌株，提取重組菌株基因組DNA；
步驟2：設(shè)計(jì)引物序列為5’-3’ 的引物1和引物序列為5’-3’ 的引物2；
步驟3： PCR總體積為25μL，其中包括2×Taq PCRMaster Mix 10.5μL，上游引物 1.0μL，下游引物1.0μL，模板 DNA 1.5μL，其余用水補(bǔ)足；反應(yīng)程序：94 ℃變性2 min；94 ℃20 s ，52 ℃ 25 s ，72 ℃ 30 s，18個(gè)循環(huán)；72 ℃延伸2 min；進(jìn)行單重PCR擴(kuò)增：
步驟4：模板 DNA 3μl，雙重引物上下游各加1.5μl，2×Taq PCRMaster Mix 10.5μL，加 ddH2O 至25μl；擴(kuò)增PCR 反應(yīng)程序?yàn)?94℃變性 2min；然后 94℃，20sec、52℃，25sec、72℃，30sec，進(jìn)行 20 個(gè)循環(huán)；最后 72℃延伸 2min，4℃保溫，進(jìn)行雙重PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物在 -20℃保存；
步驟5：對Pho1 F/R和Pho2 F/R兩對引物進(jìn)行引物配比，雙重PCR擴(kuò)增體系為：模板 DNA 3μl，2×Taq PCRMaster Mix 10.5μL，引物濃度分別為1.5μl，加 ddH2O 至25μl，擴(kuò)增PCR 反應(yīng)程序?yàn)椋?4℃變性 2min；然后 94℃，20sec、52℃，25sec、72℃，30sec，進(jìn)行 20 個(gè)循環(huán)；最后 72℃延伸 2min，4℃保溫；
步驟6：用步驟5得到的雙重PCR擴(kuò)增體系，對產(chǎn)發(fā)菜多糖重組酵母菌株進(jìn)行篩選。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用雙重PCR技術(shù)篩選產(chǎn)發(fā)菜多糖重組酵母菌株的方法，其特征在于，步驟2中引物1的F：ACCACCTTCGTCACCTCT， R：GGATACCCTCGTTCAGCA。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用雙重PCR技術(shù)篩選產(chǎn)發(fā)菜多糖重組酵母菌株的方法，其特征在于，步驟2中引物2的F：TAGGAAGAAGCGAAAGCG，R：CAGTTGATGGAATGGGTG。