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用來源于埃希氏菌的果糖激酶基因轉(zhuǎn)化的棒桿菌及使用該棒桿菌制備L?氨基酸的方法與流程

文檔序號:12696923閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.用于生產(chǎn)L-氨基酸的棒桿菌(Corynebacterium sp.),其包含可操作地連接至基因表達(dá)單元的埃希氏菌(Escherichia sp.)來源的果糖激酶基因。

2.如權(quán)利要求1所述的用于生產(chǎn)L-氨基酸的棒桿菌(Corynebacterium sp.),其中所述果糖激酶基因?yàn)閏scK或mak。

3.如權(quán)利要求1所述的用于生產(chǎn)L-氨基酸的棒桿菌(Corynebacterium sp.),其中所述果糖激酶基因具有SEQ ID NO.17或SEQ ID NO.18的核苷酸序列。

4.如權(quán)利要求1所述的用于生產(chǎn)L-氨基酸的棒桿菌(Corynebacterium sp.),其中所述基因表達(dá)單元被可操作地連接至載體,并通過轉(zhuǎn)化被包含在棒桿菌內(nèi),或通過插入棒桿菌的染色體中被包含在棒桿菌內(nèi)。

5.如權(quán)利要求1所述的用于生產(chǎn)L-氨基酸的棒桿菌(Corynebacterium sp.),其中所述基因通過基因表達(dá)調(diào)控區(qū)的修飾而過表達(dá)。

6.如權(quán)利要求5所述的用于生產(chǎn)L-氨基酸的棒桿菌(Corynebacterium sp.),其中所述調(diào)控區(qū)為選自以下的啟動(dòng)子:cscK啟動(dòng)子、mak啟動(dòng)子、pcj7啟動(dòng)子、lysCP1啟動(dòng)子、EF-Tu啟動(dòng)子、groEL啟動(dòng)子和aceAB啟動(dòng)子。

7.如權(quán)利要求1所述的用于生產(chǎn)L-氨基酸的棒桿菌(Corynebacterium sp.),其中所述L-氨基酸為L-賴氨酸、L-蘇氨酸或L-谷氨酸。

8.如權(quán)利要求1所述的用于生產(chǎn)L-氨基酸的棒桿菌(Corynebacterium sp.),其中所述棒桿菌被用包含蘇氨酸生物合成相關(guān)基因和輸出相關(guān)基因的載體進(jìn)一步轉(zhuǎn)化。

9.如權(quán)利要求8所述的用于生產(chǎn)L-氨基酸的棒桿菌(Corynebacterium sp.),其中所述蘇氨酸生物合成相關(guān)基因?yàn)閔om-thrB或hom-thrC,且所述蘇氨酸輸出相關(guān)基因?yàn)閔om-thrE。

10.如權(quán)利要求1所述的用于生產(chǎn)L-氨基酸的棒桿菌(Corynebacterium sp.),其中所述棒桿菌選自:谷氨酸棒桿菌(Corynebacterium glutamicum)、熱產(chǎn)氨棒桿菌(Corynebacterium thermoaminogenes)、黃色短桿菌(Brevibacterium flavum)和發(fā)酵短桿菌(Brevibacterium fermentum)。

11.如權(quán)利要求10所述的用于生產(chǎn)L-氨基酸的棒桿菌(Corynebacterium sp.),其中所述棒桿菌為L-賴氨酸生產(chǎn)菌株——谷氨酸棒桿菌(Corynebacterium glutamicum)KFCC10881。

12.如權(quán)利要求10所述的用于生產(chǎn)L-氨基酸的棒桿菌(Corynebacterium sp.),其中所述棒桿菌為谷氨酸生產(chǎn)菌株——谷氨酸棒桿菌(Corynebacterium glutamicum)KTCC10774。

13.生產(chǎn)L-氨基酸的方法,包括以下步驟:

(i)培養(yǎng)權(quán)利要求1至12中任一項(xiàng)所述的棒桿菌(Corynebacterium sp.);和

(ii)從培養(yǎng)物中收集L-氨基酸。

14.如權(quán)利要求13所述的方法,其中所述L-氨基酸為L-賴氨酸、L-蘇氨酸或L-谷氨酸。

15.生產(chǎn)L-氨基酸的方法,包括以下步驟:

(i)在包含蔗糖作為碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)權(quán)利要求1至12中任一項(xiàng)所述的棒桿菌(Corynebacterium sp.);和

(ii)從培養(yǎng)物中收集L-氨基酸。

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