本發(fā)明涉及一鍋法制備親水性植物甾醇/甾烷醇衍生物的方法，屬于食品、化妝品、醫(yī)藥和化工等技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

植物甾醇是一類以環(huán)戊烷全氫菲為主體骨架的甾體化合物，廣泛存在于各類植物組織中。植物甾醇主要包括β-谷甾醇、豆甾醇、菜籽甾醇、菜油甾醇四種，目前工業(yè)上主要從植物油精煉過程產(chǎn)生的脫臭餾出物中植物甾醇。植物甾醇中的碳碳雙鍵被氫化飽和后即為植物甾烷醇，主要包括谷甾烷醇和菜籽甾烷醇兩種。

自從上個世紀(jì)五十年代以來，科研人員先后對植物甾醇/甾烷醇的生理活性及應(yīng)用展開了廣泛研究。研究證實，植物甾醇/甾烷醇具有降膽固醇、消炎、抗癌、提高免疫力等眾多功效。植物甾醇/甾烷醇的母體結(jié)構(gòu)是三個六元環(huán)和一個五元環(huán)組成的甾核，并連接一個由九到十個碳原子組成的疏水側(cè)鏈。植物甾醇/甾烷醇常以游離的結(jié)晶形式存在，其獨特的化學(xué)結(jié)構(gòu)和晶體形式?jīng)Q定了它具有溶解性差(表現(xiàn)為脂溶性低、水不溶)、生物利用率低等特點，極大地限制了它的實際應(yīng)用。

因植物甾醇的脂溶性較低，近十幾年以來國內(nèi)外繞改善植物甾醇/甾烷醇脂溶性(或油溶性)的研究較多，主要有以下一些專利：

CN 1982326公開了一種多不飽和脂肪酸植物甾醇酯的制備方法。該法使用常見的對甲苯磺酸，濃硫酸、碳酸氫鈉，二乙胺、三乙胺、甲醇鈉、乙醇鈉等作為催化劑合成了多不飽和脂肪酸植物甾醇酯。CN 101235067公開了一種植物甾醇酯的制備方法。該法使用一些金屬氧化物如氧化鈣，氧化鎂等作為催化劑在無溶劑體系合成植物甾醇酯。CN 1458918公開了一種制備脂肪族酯的方法。該法所用的醇為甾醇，甾烷醇，4-甲基甾醇以及它們的氫化同系物，選用鑭系元素氧化物以及這些氧化物的混合物作為固體催化劑合成脂肪酸甾醇酯。

US 6413571公開了一種共軛亞油酸甾醇酯的制備方法。該法以共軛亞油酸甲酯和甾醇或甾烷醇為原料，以甲醇鈉為催化劑；或以共軛亞油酸和甾醇或甾烷醇為原料，以硫酸或氯化錫為催化劑，在真空加熱條件下制備甾醇酯。US 6855837公開了一種植物甾烷醇酯的制備方法。該法將植物甾醇在氫化催化劑的作用下合成植物甾烷醇，然后過濾除去催化劑，再將脂肪酸酯和酯交換所用催化劑加入反應(yīng)混合物并加熱，制備植物甾烷醇脂肪酸酯。US 5892068公開了一種無溶劑體系里植物甾(烷)醇脂肪酸酯的制備方法。該法首先將脂肪酸熔融，熔化后的脂肪酸既是反應(yīng)物又充當(dāng)溶劑，與植物甾(烷)醇在加熱的條件下直接酯化制備植物甾(烷)醇脂肪酸酯。US 2005027179公開了一種不飽和脂肪酸植物甾醇酯的制備方法。該法以植物甾醇和富含ω-3不飽和脂肪酸的物質(zhì)如魚油為原料，在堿性催化劑的作用下，真空加熱制備不飽和脂肪酸植物甾醇酯。

通過這些化學(xué)催化、酶催化等方法將植物甾醇/甾烷醇與脂肪酸、脂肪酸酯反應(yīng)制得的植物甾醇/甾烷醇脂肪酸酯，可以不同程度地改善植物甾醇/甾烷醇的脂溶性(或油溶性)，極大地拓寬了植物甾醇/甾烷醇的實際應(yīng)用范圍。

因植物甾醇/甾烷醇具有水不溶等特點，故植物甾醇/甾烷醇在含水體系中的應(yīng)用幾乎為一片空白。近幾年來，陸續(xù)有人利用包埋、微乳化等方法改善植物甾醇/甾烷醇溶解性、水分散性的研究，主要有以下一些專利：

CN 101991160A公開了一種包含植物甾醇的水性飲料及其制備方法。該法利用水包油乳化技術(shù)將植物甾醇直接添加到水性飲料中，得到具有較穩(wěn)定的包含植物甾醇的水性飲料。CN 1599560公開了一種含有植物甾醇的水包油型乳液的制備方法。該發(fā)明涉及一種水包油型乳液，該乳液中包含占油相1.5-50％的酯型植物甾醇和0.01-1.0％的游離型植物甾醇。CN 101103813A公開了一種植物甾醇-環(huán)糊精包合物的制備方法。該法以β-環(huán)糊精、β-環(huán)糊精的修飾物、β-羥丙基環(huán)糊精與β-環(huán)糊精任意比例的混合物為增溶劑制備植物甾醇-環(huán)糊精包合物。

盡管利用包埋、微乳化等方法可以在一定程度上改善植物甾醇/甾烷醇類化合物的溶解性或水分散性，但通過這些方法制備的植物甾醇/甾烷醇類產(chǎn)品，具有穩(wěn)定性較差，產(chǎn)品的貨架期短等缺點。通過分子修飾方法將植物甾醇/甾烷醇與一些具有良好水溶性的成分通過化學(xué)反應(yīng)合成相應(yīng)的植物甾醇/甾烷醇衍生物，既可以改善植物甾醇/甾烷醇在水中的溶解性，又可以克服應(yīng)用于相關(guān)產(chǎn)品時出現(xiàn)的穩(wěn)定性差、貨架期短等缺點。

植物甾醇/甾烷醇的分子結(jié)構(gòu)中含有一個游離羥基，而具有良好水溶性的化合物大多為富含羥基，這些化合物與植物甾醇/甾烷醇可以通過糖苷化、醚化等反應(yīng)合成相應(yīng)衍生物。但植物甾醇/甾烷醇由于所含羥基受到立體結(jié)構(gòu)、空間位阻等因素影響，通過糖苷化、醚化等反應(yīng)合成相應(yīng)衍生物的難度很大；而酯化反應(yīng)受空間位阻的影響相對較小，較糖苷化、醚化等更容易發(fā)生反應(yīng)。二元酸或二元酸酐含兩個羧基，可以在植物甾醇/甾烷醇與多羥基水溶性化合物之間起到一個橋連作用，即可以通過兩步酯化反應(yīng)即可合成親水性植物甾醇/甾烷醇衍生物。

CN 102978272 B公開了一種通過化學(xué)-酶兩步催化反應(yīng)合成植物甾烷醇衍生物的方法。該方法分兩步，第一步以十二烷基硫酸鈉、十二烷基硫酸銅或吡啶為催化劑合成中間產(chǎn)物植物甾烷醇二元酸單酯；經(jīng)過柱層析分離得植物甾烷醇二元酸單酯純品；第二步以植物甾烷醇二元酸單酯純品和親水修飾劑為原料，以固定化脂肪酶、游離脂肪酶為生物催化劑，在非水相體系反應(yīng)84h，親水性植物甾烷醇衍生物最高轉(zhuǎn)化率為68％。該方法中，第一步中間產(chǎn)物合成所需時間長(12～14h)，得到中間產(chǎn)物粗產(chǎn)品后需經(jīng)旋蒸去除溶劑，并經(jīng)過柱層析才能得到植物甾烷醇二元酸單酯純品；第二步親水性植物甾烷醇衍生物的合成所需時間更長(72～84h)，目標(biāo)產(chǎn)物產(chǎn)率低(65～68％)。

CN 103965278 B公開了一種水溶性植物甾醇有機二元酸糖酯的制備方法。該方法分兩步進(jìn)行，第一步使用4-二甲氨基吡啶催化植物甾醇與有機二元酸或酸酐，110℃下反應(yīng)6小時，生成中間產(chǎn)物植物甾醇有機二元酸單酯；第二步以分離純化后的植物甾醇有機二元酸單酯為底物，利用4-二甲氨基吡啶、N，N’-二環(huán)己基碳酰亞胺和對甲基苯磺酸為復(fù)合催化劑，在二甲基亞砜中反應(yīng)10小時，最高產(chǎn)率為89.2％。該方法中，第一步中間產(chǎn)物合成所需時間較長，而且需要經(jīng)過硅膠柱層析分離后才能用于第二步反應(yīng)；第二步反應(yīng)所需時間較長，涉及催化劑較多，不利于后續(xù)分離純化。

總體而言，目前通過分子修飾途徑合成親水性植物甾醇/甾烷醇衍生物的方法較少。僅有的幾種方法大多涉及到中間產(chǎn)物分離、溶劑去除等繁瑣環(huán)節(jié)，具有反應(yīng)時間長、產(chǎn)物轉(zhuǎn)化率低等缺點。因此，開發(fā)一種簡單、高效的植物甾醇/甾烷醇衍生物的合成方法，有助于拓寬其在含水體系中的應(yīng)用，具有十分重要的意義。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一種一鍋法制備親水性植物甾醇/甾烷醇衍生物的方法。本發(fā)明方法以離子液體為催化劑，先合成中間產(chǎn)物植物甾醇/甾烷醇二元酸單酯；該中間產(chǎn)物不經(jīng)過分離，直接和親水修飾劑一鍋法反應(yīng)制備親水性植物甾醇/甾烷醇衍生物。該方法工藝操作簡單，減少了溶劑的使用和分離，工藝流程短，能耗低。所得親水性植物甾醇/甾烷醇衍生物產(chǎn)品純度高，收率高，成本低，利于工業(yè)化生產(chǎn)。

本發(fā)明技術(shù)方案包括以下步驟：

a)中間產(chǎn)物植物甾醇/甾烷醇二元酸單酯的制備：分別稱取一定量的植物甾醇/甾烷醇、二元酸/二元酸酐、離子液體于反應(yīng)容器中，加入反應(yīng)溶劑，固定好回流裝置，開啟攪拌并調(diào)整至所需溫度，開始反應(yīng)；

b)親水性植物甾醇/甾烷醇衍生物的制備及精制：反應(yīng)一段時間后，直接在反應(yīng)體系中加入親水修飾劑，補充一定量離子液體，繼續(xù)反應(yīng)一段時間即生成親水性植物甾醇/甾烷醇衍生物，經(jīng)萃取即得親水性植物甾醇/甾烷醇衍生物純品。

在本發(fā)明的一種實施方式中，步驟a)：將一定量的植物甾醇/甾烷醇、二元有機酸或酸酐、離子液體分別加入配有攪拌、油浴控溫的回流反應(yīng)裝置，加入反應(yīng)溶劑，控制反應(yīng)溫度，定期取樣實時監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)程，反應(yīng)一段時間后停止加熱反應(yīng)。

在本發(fā)明的一種實施方式中，步驟a)所述的植物甾醇為β-谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇、菜籽甾醇、麥角甾醇、蒲公英甾醇中的一種或一種以上以任意比例的混合物；步驟a)所述的植物甾烷醇為谷甾烷醇、菜籽甾烷醇中的一種或兩種。

在本發(fā)明的一種實施方式中，步驟a)所述的二元酸或二元酸酐為蘋果酸、酒石酸、丁烯二酸、草酸、丙二酸、丁二酸、戊二酸、己二酸、庚二酸、辛二酸及其對應(yīng)酸酐中的一種。

在本發(fā)明的一種實施方式中，步驟a)所述的反應(yīng)溶劑為甲苯、石油醚、異辛烷、正辛烷、正庚烷、叔戊醇、叔丁醇或環(huán)己酮。

在本發(fā)明的一種實施方式中，步驟a)所述的離子液體為1-丙基磺酸-3-甲基咪唑硫酸氫鹽、1-丙基磺酸-3-甲基咪唑?qū)妆交撬猁}、1-丁基磺酸-3-甲基咪唑三氟甲磺酸鹽、1-丙基磺酸-3-甲基咪唑三氟甲磺酸鹽、1-丁基磺酸-3-甲基咪唑硫酸氫鹽或1-丁基磺酸-3-甲基咪唑?qū)妆交撬猁}，離子液體用量為植物甾醇/甾烷醇用量的2％～8％(w/w)，植物甾醇/甾烷醇與二元酸或二元酸酐的摩爾比為1:1～1:5，反應(yīng)溫度為80℃～130℃，反應(yīng)時間為0.5h～3h。

在本發(fā)明的一種實施方式中，步驟b)：步驟a)停止加熱后，迅速向反應(yīng)體系中加入親水修飾劑，補充一定量離子液體，調(diào)整好溫度，繼續(xù)反應(yīng)一段時間即得親水性植物甾醇/甾烷醇衍生物粗品，經(jīng)萃取即得親水性植物甾醇/甾烷醇衍生物純品。

在本發(fā)明的一種實施方式中，步驟b)所述的親水修飾劑為葡萄糖、果糖、甘露糖、蔗糖、山梨糖、木糖、乳糖、麥芽糖、山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇、麥芽糖醇、異麥芽糖醇、乳糖醇、半乳糖醇、赤蘚糖醇、茶多酚、聚乙二醇或單甲氧基聚乙二醇。

在本發(fā)明的一種實施方式中，步驟b)所述親水修飾劑的摩爾量為植物甾醇/甾烷醇摩爾量的1～3倍，離子液體補充量為植物甾醇/甾烷醇用量的0％～6％(w/w)，反應(yīng)溫度為80℃～130℃，加入親水修飾劑后反應(yīng)時間為1h～6h。

在本發(fā)明的一種實施方式中，步驟b)所述萃取的步驟為：反應(yīng)完畢，停止加熱，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去反應(yīng)溶劑得親水性植物甾醇/甾烷醇衍生物粗品。以乙酸乙酯和飽和食鹽水為溶劑，萃取數(shù)次，收集乙酸乙酯層，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑即得親水性植物甾醇/甾烷醇衍生物。

本發(fā)明的有益效果：

本發(fā)明以離子液體為催化劑，利用兩步酯化反應(yīng)所需條件類似，不分離中間產(chǎn)物植物甾醇/甾烷醇二元酸單酯，直接和親水修飾劑一鍋法制備親水性植物甾醇/甾烷醇衍生物。該方法將兩步酯化反應(yīng)合并在一鍋內(nèi)進(jìn)行，工藝操作簡單，減少了溶劑的使用和分離，避免了中間產(chǎn)物的分離純化，工藝流程縮短，降低了能耗。以離子液體為催化劑的該一鍋法制備的親水性植物甾醇/甾烷醇衍生物產(chǎn)品純度高，HPLC純度可達(dá)97.3-99.1％，收率可達(dá)90％以上，兩步總時間不足10h，成本低，利于工業(yè)化生產(chǎn)，對提高我國親水植物甾醇/甾烷醇衍生物的工業(yè)生產(chǎn)水平有重要意義。

附圖說明

圖1是實施例1的¹H核磁共振波譜圖。

圖2是實施例1中間產(chǎn)物的高效液相色譜圖。

圖3是實施例1最終產(chǎn)物的高效液相色譜圖。

具體實施方式

采用高效液相色譜(HPLC)-蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD)測定植物甾醇/甾烷醇二元酸單酯和親水性植物甾醇/甾烷醇衍生物的純度和產(chǎn)率。HPLC-ELSD分析系統(tǒng)包括Agilent 1100高效液相色譜儀、ZAM 4000蒸發(fā)光散射檢測器和N 2000數(shù)據(jù)處理軟件。色譜柱為Waters symmetry C18反相柱(4.6×150mm，5μm)，柱溫35℃，流動相：甲醇/甲酸(1000/1)，流速：1mL/min，等度洗脫，進(jìn)樣量10μL；ELSD參數(shù)：溫度60℃，載氣為高純氮氣，壓力為0.3MPa。

中間產(chǎn)物和最終產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化率計算均按歸一化法，具體公式如下：

中間產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化率(％)＝中間產(chǎn)物峰面積/(中間產(chǎn)物峰面積+植物甾醇/甾烷醇峰面積)×100

最終產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化率(％)＝親水性植物甾醇/甾烷醇衍生物峰面積/(親水性植物甾醇/甾烷醇衍生物峰面積+中間產(chǎn)物峰面積)×100

采用傅里葉變換紅外光譜(FT-IR)、質(zhì)譜(MS)和核磁共振波譜(NMR)鑒定植物甾醇/甾烷醇二元酸單酯和親水性植物甾醇/甾烷醇衍生物的化學(xué)結(jié)構(gòu)。FT-IR分析采用Nicolet is50傅里葉變換紅外光譜儀，選用ATR法，掃描次數(shù)：32次，分辨率4cm-1。質(zhì)譜分析采用Waters Maldi Synapt Q-Tof質(zhì)譜儀，直接進(jìn)樣。質(zhì)譜儀參數(shù)為：離子源為電噴霧(ESI)離子源；離子源溫度為100℃；毛細(xì)管電壓為3kV；錐孔電壓為30V；脫溶劑氣溫度為400℃，流量為500L/H，質(zhì)量范圍為200～2000m/z。NMR分析采用AvanceⅡ400MHz核磁共振波譜儀，將純化的產(chǎn)物溶于氘代氯仿，以四甲基硅烷為內(nèi)標(biāo)，¹H譜NMR頻率為400MHz。

實施例1植物甾醇聚乙二醇丁二酸二酯

1、植物甾醇丁二酸單酯的制備

制備方法：分別將12.4g植物甾醇、3.0g丁二酸酐，0.25g離子液體1-丁基磺酸-3-甲基咪唑硫酸氫鹽，依次加入配有攪拌、油浴控溫的回流反應(yīng)裝置，加入100mL石油醚，開啟攪拌調(diào)整溫度至100～110℃，反應(yīng)1～1.5h。經(jīng)HPLC檢測植物甾醇丁二酸單酯的轉(zhuǎn)化率可達(dá)98.7％。向反應(yīng)液中加入10mL蒸餾水，萃取，收集有機相層并旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑即可得到14.9g植物甾醇丁二酸單酯。

結(jié)構(gòu)鑒定：植物甾醇丁二酸單酯FT-IR：2370-3700cm^-1之間的寬峰為羧基-COOH中羥基-OH的伸縮振動吸收(ν_O-H)，3030cm^-1為-C＝C-H-的非對稱伸縮振動吸收(ν_-C＝C-H-)，2956cm^-1為-CH₃的非對稱伸縮振動吸收(ν_-CH3)，2933cm^-1為-CH₂-的非對稱伸縮振動吸收(ν_-CH2-)，2867cm^-1為-CH₂-的對稱伸縮振動吸收(ν_-CH2-)，1729和1712cm^-1強的吸收峰分別為酯鍵-COO-和羧基-COOH中羰基C＝O的伸縮振動吸收(ν_C＝O)，1384cm^-1為-CH₃的彎曲振動吸收(δ_-CH3)，1176和1000cm^-1為C-O的伸縮振動吸收(γ_C-O)。

MS：植物甾醇主要包括四種，分別為β-谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇和菜籽甾醇，四者的相對分子質(zhì)量分別為414、412、400和398。植物甾醇丁二酸單酯包括谷甾醇丁二酸單酯、豆甾醇丁二酸單酯、菜油甾醇丁二酸單酯和菜籽甾醇丁二酸單酯，四者的相對分子質(zhì)量分別為514、512、500和498。植物甾醇丁二酸單酯在ES+電離下，存在β-谷甾醇丁二酸單酯、豆甾醇丁二酸單酯和菜油甾醇丁二酸單酯的[M+Na]+分子離子峰，它們分別為537(即514+23)、535(即512+23)和523(即500+23)。NMR：植物甾醇丁二酸單酯的NMR譜圖如附圖1(a)所示。

根據(jù)FT-IR、MS和NMR結(jié)果證實中間產(chǎn)物為植物甾醇丁二酸單酯。

2、植物甾醇聚乙二醇丁二酸二酯的制備

制備方法：

(1)分別將12.4g植物甾醇、3.0g丁二酸酐，0.25g離子液體1-丙基磺酸-3-甲基咪唑硫酸氫鹽，依次加入配有攪拌、油浴控溫的回流反應(yīng)裝置，加入100mL異辛烷，開啟攪拌調(diào)整溫度至120℃～130℃，反應(yīng)0.5h～1h。停止加熱，取樣100μL用于HPLC分析。經(jīng)檢測中間產(chǎn)物植物甾醇丁二酸單酯的轉(zhuǎn)化率可達(dá)95.2％。圖2為植物甾醇丁二酸單酯的高效液相色譜圖。

(2)取樣后加入30.0g親水修飾劑聚乙二醇(Mw 1000)，并補充0.75g離子液體1-丙基磺酸-3-甲基咪唑硫酸氫鹽，調(diào)整溫度至120℃～130℃，繼續(xù)反應(yīng)1h～1.5h。停止加熱，取樣100μL用于HPLC分析。經(jīng)檢測最終產(chǎn)物植物甾醇聚乙二醇丁二酸二酯的轉(zhuǎn)化率可達(dá)96.1％。圖3為植物甾醇聚乙二醇丁二酸二酯的高效液相色譜圖。

(3)停止加熱后，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去異辛烷即得43.8g親水性植物甾醇衍生物粗品。將粗品溶于200mL乙酸乙酯，超聲溶解后，分三次加入600mL飽和食鹽水萃取3次，收集乙酸乙酯層，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙酸乙酯即得39.8g植物甾醇聚乙二醇丁二酸二酯純品。當(dāng)選用平均相對分子量為1000的聚乙二醇做親水修飾劑，所得植物甾醇聚乙二醇丁二酸二酯在30℃水中的溶解度為25.7g/100mL。

結(jié)構(gòu)鑒定：

植物甾醇聚乙二醇丁二酸二酯FT-IR：3439cm^-1之間的寬峰為羥基-OH的伸縮振動吸收(ν_O-H)，2931cm^-1為-CH₂-的非對稱伸縮振動吸收(ν_-CH2-)，2868cm^-1為-CH₂-的對稱伸縮振動吸收(ν_-CH2-)，1731cm^-1強的吸收峰分別為酯鍵-COO-中羰基C＝O的伸縮振動吸收(ν_C＝O)，1456cm^-1為-CH₂-的彎曲振動吸收(δ_-CH2-)，1093cm^-1為C-O的伸縮振動吸收(γ_C-O)。

MS：聚乙二醇是一類化合物的混合物，隨著聚合度n值不同，其分子量也不同。聚乙二醇相對分子量的計算公式為M＝44n+18。植物甾醇丁二酸單酯中以β-谷甾醇丁二酸單酯含量最多，相對分子量為514，則親水性植物甾醇化合物(β-谷甾醇聚乙二醇丁二酸二酯)相對分子量的計算公式為M＝44n+514。植物甾醇聚乙二醇丁二酸二酯在ES+電離下，存在β-谷甾醇聚乙二醇丁二酸二酯的分子離子峰，它們分別為1373(n＝19)，1417(n＝20)，1461(n＝21)。NMR：植物甾醇聚乙二醇丁二酸二酯的NMR譜圖如附圖1(b)所示。

根據(jù)FT-IR、MS和NMR結(jié)果證實產(chǎn)物為植物甾醇聚乙二醇丁二酸二酯。HPLC純度為99.1％，計算得到收率為92.2％。

對照實施例

分別將12.4g植物甾醇、3.0g丁二酸酐，0.25g離子液體1-丙基磺酸-3-甲基咪唑三氟乙酸鹽，依次加入配有攪拌、油浴控溫的回流反應(yīng)裝置，加入100mL異辛烷，開啟攪拌調(diào)整溫度至120℃～130℃，反應(yīng)0.5h～1h。停止加熱，取樣100μL用于HPLC分析。經(jīng)檢測中間產(chǎn)物植物甾醇丁二酸單酯的轉(zhuǎn)化率可達(dá)29.2％。

取樣后加入30.0g親水修飾劑聚乙二醇(Mw 1000)，并補充0.75g離子液體1-丙基磺酸-3-甲基咪唑三氟乙酸鹽，調(diào)整溫度至120℃～130℃，繼續(xù)反應(yīng)1h～1.5h。停止加熱，取樣100μL用于HPLC分析。經(jīng)檢測最終產(chǎn)物植物甾醇聚乙二醇丁二酸二酯的轉(zhuǎn)化率可達(dá)13.8％。

實施例2植物甾烷醇茶多酚己二酸二酯

分別將12.5g植物甾烷醇、21.9g己二酸，1.0g離子液體1-丙基磺酸-3-甲基咪唑?qū)妆交撬猁}，依次加入配有攪拌、油浴控溫的回流反應(yīng)裝置，加入200mL叔丁醇，開啟攪拌調(diào)整溫度至80℃～85℃，反應(yīng)2.5h～3h。停止加熱，取樣100μL用于HPLC分析。經(jīng)檢測中間產(chǎn)物植物甾烷醇己二酸單酯的轉(zhuǎn)化率可達(dá)95.3％。

取樣后加入41.2g親水修飾劑茶多酚，補充0g離子液體1-丙基磺酸-3-甲基咪唑?qū)妆交撬猁}，調(diào)整溫度至80℃～85℃，繼續(xù)反應(yīng)5h～6h。停止加熱，取樣100μL用于HPLC分析。經(jīng)檢測最終產(chǎn)物植物甾烷醇茶多酚己二酸二酯的轉(zhuǎn)化率可達(dá)92.9％。

停止加熱后，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去叔丁醇即得70.8g親水性植物甾烷醇衍生物粗品。將粗品溶于200mL乙酸乙酯，超聲溶解后，分三次加入500mL飽和食鹽水萃取5次，收集乙酸乙酯層，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙酸乙酯即得25.1g植物甾烷醇茶多酚己二酸二酯純品，HPLC純度為98.1％，收率為91.5％。所得植物甾醇茶多酚己二酸二酯在30℃水中的溶解度為4.9g/100mL。

實施例3植物甾醇麥芽糖醇辛二酸二酯

分別將12.4g植物甾醇、7.8g辛二酸，0.36g離子液體1-丁基磺酸-3-甲基咪唑三氟甲磺酸鹽，依次加入配有攪拌、油浴控溫的回流反應(yīng)裝置，加入100mL叔戊醇，開啟攪拌調(diào)整溫度至100℃～105℃，反應(yīng)1h～1.5h。停止加熱，取樣100μL用于HPLC分析。經(jīng)檢測中間產(chǎn)物植物甾醇辛二酸單酯的轉(zhuǎn)化率可達(dá)97.1％。

取樣后加入20.6g親水修飾劑麥芽糖醇，并補充0.24g離子液體1-丁基磺酸-3-甲基咪唑三氟甲磺酸鹽，調(diào)整溫度至100℃～105℃，繼續(xù)反應(yīng)2h～3h。停止加熱，取樣100μL用于HPLC分析。經(jīng)檢測最終產(chǎn)物植物甾醇麥芽糖醇辛二酸二酯的轉(zhuǎn)化率可達(dá)98.2％。

停止加熱后，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去叔戊醇即得37.9g親水性植物甾醇衍生物粗品。將粗品溶于100mL乙酸乙酯，超聲溶解后，分三次加入300mL飽和食鹽水萃取3次，收集乙酸乙酯層，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙酸乙酯即得24.5g植物甾醇麥芽糖醇辛二酸二酯純品，HPLC純度為98.9％，收率為92.8％。所得植物甾醇麥芽糖醇辛二酸二酯在30℃水中的溶解度為3.6g/100mL。

實施例4植物甾烷醇單甲氧基聚乙二醇庚二酸二酯

分別將12.5g植物甾烷醇、5.1g戊二酸酐，0.5g離子液體1-丙基磺酸-3-甲基咪唑三氟甲磺酸鹽，依次加入配有攪拌、油浴控溫的回流反應(yīng)裝置，加入200mL石油醚，開啟攪拌調(diào)整溫度至100℃～110℃，反應(yīng)2h～2.5h。停止加熱，取樣100μL用于HPLC分析。經(jīng)檢測中間產(chǎn)物植物甾烷醇丁二酸單酯的轉(zhuǎn)化率可達(dá)97.4％。

取樣后加入60g親水修飾劑單甲氧基聚乙二醇(Mw 1000)，補充0.5g離子液體1-丙基磺酸-3-甲基咪唑三氟甲磺酸鹽，調(diào)整溫度至100℃～110℃，繼續(xù)反應(yīng)3.5h～4h。停止加熱，取樣100μL用于HPLC分析。經(jīng)檢測最終產(chǎn)物植物甾烷醇單甲氧基聚乙二醇戊二酸二酯的轉(zhuǎn)化率可達(dá)96.1％。

停止加熱后，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去叔丁醇即得70.9g親水性植物甾烷醇衍生物粗品。將粗品溶于200mL乙酸乙酯，超聲溶解后，分三次加入600mL飽和食鹽水萃取6次，收集乙酸乙酯層，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙酸乙酯即得39.1g植物甾烷醇單甲氧基聚乙二醇庚二酸二酯純品，HPLC純度為97.3％，收率為90.8％。當(dāng)選用平均相對分子量為1000的單甲氧基聚乙二醇做親水修飾劑，所得植物甾烷醇單甲氧基聚乙二醇庚二酸二酯在30℃水中的溶解度為21.3g/100mL。

雖然本發(fā)明已以較佳實施例公開如上，但其并非用以限定本發(fā)明，任何熟悉此技術(shù)的人，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)，都可做各種的改動與修飾，因此本發(fā)明的保護范圍應(yīng)該以權(quán)利要求書所界定的為準(zhǔn)。