1.一種凍存外周血單個核細胞的復蘇溶液,其組分包括AIM-V培養(yǎng)基、血清、Nuclease ultrapure,所述復蘇溶液中血清的體積分數為5-20%,Nuclease ultrapure的含量為0.1-1U/mL;余量為AIM-V培養(yǎng)基。
2.根據權利要求1所述的復蘇溶液,其特征在于,所述復蘇溶液中血清的體積分數為10%,和/或,所述復蘇溶液中Nuclease ultrapure的含量為0.2U/mL。
3.根據權利要求1或2所述的復蘇溶液,其特征在于,所述血清選自自體血清、胎牛血清、AB血清、血清替代物、中的一種。
4.權利要求1-3任一項所述的復蘇溶液在凍存外周血單個核細胞的復蘇中的應用。
5.一種凍存外周血單個核細胞的復蘇方法,其特征在于,包括以下步驟:
1)將凍存的外周血單個核細胞轉移至-80℃的凍存盒中,平衡0.5-5min后,再轉入金屬浴中融化細胞,所述金屬浴溫度為37-42℃;
2)將融化后的細胞轉移至權利要求1-3任一項所述復蘇溶液中洗滌至少2次,離心收集細胞。
6.根據權利要求5所述的方法,其特征在于,所述凍存的外周血單個核細胞的制備方法,包括以下步驟:
1)對獲得的外周血單個核細胞進行清洗,純化;
2)用凍存液重懸外周血單個核細胞,獲得細胞懸液,使細胞含量達到2~3×107個/mL;
3)將步驟2)所得細胞懸液分裝;
4)將分裝后的細胞懸液留樣待檢,將分裝后的其余細胞懸液放入4℃預溫的程序降溫盒中,轉移到-80℃冰箱暫時儲存;
5)待留樣的細胞懸液檢測合格后,將步驟4)暫時儲存的細胞懸液凍存入庫,長期保存。