本發(fā)明涉及含酒精飲料，更具體的說(shuō)，涉及一種富硒白藜蘆醇葡萄酒的制備方法。
背景技術(shù)：
雖然人們已經(jīng)普遍知曉白藜蘆醇是一種生物性很強(qiáng)的天然多酚類(lèi)物質(zhì)，是腫瘤的化學(xué)預(yù)防劑，也是對(duì)降低血小板聚集，預(yù)防和治療動(dòng)脈粥樣硬化、心腦血管疾病的化學(xué)預(yù)防劑。然而目前國(guó)內(nèi)葡萄酒中白藜蘆醇的含量微乎其微，一般白葡萄酒中含量在0.2mg/L，紅葡萄酒為0.3‐2.1mg/L，而其他酒類(lèi)不含白藜蘆醇。
硒同樣具有抗氧化作用，是最好的抗衰老物質(zhì)，如果人體缺少了硒就會(huì)“不再年輕”，會(huì)導(dǎo)致未老先衰。硒能夠增強(qiáng)人體免疫力。缺硒使人體的免疫能力下降。硒有拮抗有害重金屬的作用。缺硒易引發(fā)鉛、砷、鎘等重金屬中毒癥狀。而且硒還具有抗癌作用。人體缺硒易患肝癌、肺癌、胃癌、食管癌、腎癌、前列腺癌、膀胱癌、宮頸癌、白血病等。硒能夠調(diào)節(jié)維生素A、維生素C、維生素E、維生素K的吸收與利用。缺硒能引發(fā)近視、白內(nèi)障、視網(wǎng)膜病、眼底疾病、老年黃斑變性等疾病。硒有調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的合成的功能。缺硒能引發(fā)蛋白質(zhì)能量缺乏性營(yíng)養(yǎng)不良，染色體損害等。硒能夠增強(qiáng)生殖功能。缺硒能引發(fā)射精受阻，精子活力低下、發(fā)生畸形，受胎率降低，子宮炎發(fā)病率升高等等癥狀。硒元素是精漿中過(guò)氧化物酶的必需組成成份，當(dāng)精液中硒含量減低時(shí)，這個(gè)酶的活性降低，不能抑制精子細(xì)胞膜質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，造成精子損傷，死精增多，活力下降。硒是肌肉的功能的重要成分，缺硒會(huì)使骨骼肌萎縮和呈灰白色條紋，發(fā)生心肌受損，心肌細(xì)胞致密性變化，脂質(zhì)增多，鈣質(zhì)沉積，導(dǎo)致疾病發(fā)生。但硒在人體內(nèi)無(wú)法合成，所以要滿足人體對(duì)硒的需求，就需要每天補(bǔ)充硒。按世界衛(wèi)生組織要求：人體膳食中每日最低需求量為40微克硒，而營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充在50‐‐250微克硒為宜。
申請(qǐng)人在試驗(yàn)中偶然發(fā)現(xiàn)，白藜蘆醇和硒在抗氧化作用方面具有協(xié)同作用，在富硒條件下，白藜蘆醇的抗氧化性能大幅度提高，正常水平的葡萄酒的0.3mg/L的白藜蘆醇的含量可達(dá)到20mg/L白藜蘆醇的含量的功效，增效達(dá)6倍以上，但具體協(xié)同增效機(jī)理尚不清楚。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明目的在于基于申請(qǐng)人發(fā)現(xiàn)的白藜蘆醇和硒在抗氧化作用的協(xié)同增效作用，提供一種富硒白藜蘆醇葡萄酒的制備方法，包括如下步驟：
⑴將葡萄果粒從枝梗上取下來(lái)，清洗、晾干；
⑵將晾干的葡萄果粒進(jìn)行破碎形成發(fā)酵漿，注意葡萄果皮、果肉、葡萄籽無(wú)需分離；
⑷測(cè)定葡萄酒原液中白藜蘆醇的含量，無(wú)論是白葡萄酒還是紅葡萄酒發(fā)酵漿，只要其中白藜蘆醇含量在0.1mg/L以上即為合格品；
⑸在每升水中加入6g碳酸氫鈉，作為緩沖劑防止pH值劇烈變化，用檸檬酸將水體的pH調(diào)整到3.4，然后在每升水中加入500mg亞硒酸鈉；硒元素的生物吸收對(duì)pH的要求很?chē)?yán)格，pH過(guò)高會(huì)使其生物吸收率降低。
⑹用步驟⑸的溶液浸泡大麥種子5小時(shí)后瀝干，然后在26℃～28℃的溫度下催芽，每天早晚各一次用步驟⑸的溶液噴霧、翻拌，促使發(fā)芽均勻，防止麥層結(jié)氈，并用木掀揚(yáng)起降溫，接觸新鮮空氣，排出代謝的二氧化碳；
⑺3-5天后當(dāng)大麥種子長(zhǎng)出1cm左右的麥芽后，用清水漂洗2-3遍后在65℃的溫度下風(fēng)干、滅活、碾壓成麥片；大麥芽本身就是釀酒原料(啤酒)，因此添加該物質(zhì)后不會(huì)對(duì)酒體產(chǎn)生不良的影響，實(shí)踐證明反而使得酒體香氣更加濃郁，形成特殊的風(fēng)味。
⑻將步驟⑺的大麥芽和步驟⑷的白葡萄酒或紅葡萄酒發(fā)酵漿按照重量比為1:6的比例混合置于發(fā)酵罐中，除了引種傳統(tǒng)釀酒酵母外，還接種保藏編號(hào)為CCTCC M 205124的富硒釀酒酵母Z1.2(Saccharomyces cerevisiae Hansen Z1.2)按傳統(tǒng)方法進(jìn)行發(fā)酵、澄清、過(guò)濾、滅菌，得到富硒白藜蘆醇葡萄酒；
⑼步驟⑻得到富硒白藜蘆醇葡萄酒置于橡木桶內(nèi)熟化即可灌裝出售。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明通過(guò)大麥發(fā)芽過(guò)程的吸收轉(zhuǎn)化作用，使硒富集在麥芽所含的氨基酸、蛋白質(zhì)等分子上，從而獲得的一種富含天然有機(jī)硒的葡萄酒。與亞硒酸鈉等無(wú)機(jī)硒相比，具有食用安全、無(wú)毒副作用、吸收利用率高(95％以上)、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高(如高水平的維生素，高質(zhì)量的蛋白等)等優(yōu)點(diǎn)，而且在發(fā)酵過(guò)程中，在酒體中游離的部分無(wú)機(jī)硒也被富硒釀酒酵母轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒酵母，進(jìn)一步提高了酒體的有機(jī)硒含量和安全性，同時(shí)與酒體中白藜蘆醇產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)，大大提高了其抗氧化性。
具體實(shí)施方式
⑴將葡萄果粒從枝梗上取下來(lái)，清洗、晾干；
⑵將晾干的葡萄果粒進(jìn)行破碎形成發(fā)酵漿，注意葡萄果皮、果肉、葡萄籽無(wú)需分離；
⑷測(cè)定葡萄酒原液中白藜蘆醇的含量，無(wú)論是白葡萄酒還是紅葡萄酒發(fā)酵漿，只要其中白藜蘆醇含量在0.1mg/L以上即為合格品；
⑸在每升水中加入6g碳酸氫鈉，作為緩沖劑防止pH值劇烈變化，用檸檬酸將水體的pH調(diào)整到3.4，然后在每升水中加入500mg亞硒酸鈉；
⑹用步驟⑸的溶液浸泡大麥種子5小時(shí)后瀝干，然后在26℃～28℃的溫度下催芽，每天早晚各一次用步驟⑸的溶液噴霧、翻拌，促使發(fā)芽均勻，防止麥層結(jié)氈，并用木掀揚(yáng)起降溫，接觸新鮮空氣，排出代謝的二氧化碳；
⑺3-5天后當(dāng)大麥種子長(zhǎng)出1cm左右的麥芽后，用清水漂洗2-3遍后在65℃的溫度下風(fēng)干、滅活、碾壓成麥片；
⑻將步驟⑺的大麥芽和步驟⑷的白葡萄酒或紅葡萄酒發(fā)酵漿按照重量比為1:6的比例混合置于發(fā)酵罐中，除了引種傳統(tǒng)釀酒酵母外，還接種保藏編號(hào)為CCTCC M 205124的富硒釀酒酵母Z1.2(Saccharomyces cerevisiae Hansen Z1.2)按傳統(tǒng)方法進(jìn)行發(fā)酵、澄清、過(guò)濾、滅菌，得到富硒白藜蘆醇葡萄酒；
⑼步驟⑻得到富硒白藜蘆醇葡萄酒置于橡木桶內(nèi)熟化即可灌裝出售。
協(xié)同作用原本為一種物理化學(xué)現(xiàn)象，又稱增效作用，是指兩種或兩種以上的組分相加或調(diào)配在一起，所產(chǎn)生的作用大于各種組分單獨(dú)應(yīng)用時(shí)作用的總和。而其中對(duì)混合物產(chǎn)生這種效果的物質(zhì)稱為增效劑(synergist)。協(xié)同效應(yīng)常用于指導(dǎo)化工產(chǎn)品各組分組合，以求得最終產(chǎn)品性能增強(qiáng)。
試驗(yàn)：對(duì)小鼠細(xì)胞免疫功能的影響
樣品：實(shí)施例1制備的富硒白藜蘆醇葡萄酒
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小白鼠40只，共分4組，每組10只，體重20-22g。
試驗(yàn)方法：取羊血，生理鹽水洗滌3次，每只鼠經(jīng)腹腔注射2％(v/v，用生理鹽水配制)壓積SRBC(2000r/min，10min)0.2mL，致敏后4天，測(cè)量左后足跖部厚度，同一部位測(cè)定三次，取平均值。然后在測(cè)定部位皮下注射20％(v/v，用生理鹽水配制)壓積SRBC 20μL，于注射后24小時(shí)測(cè)量左后足跖部厚度，以攻擊前后足跖厚度的差值來(lái)表示DTH的程度。受試樣品組的差值顯著高于對(duì)照組的差值，可判定該項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果陽(yáng)性。
表1富硒白藜蘆醇葡萄酒對(duì)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(DTH)的影響
注：*代表與0g/kg BW組比較有顯著差異性。
由表1可見(jiàn)，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的富硒白藜蘆醇葡萄酒34天后，0.3g/kg BW組與0g/kg BW組比較，小鼠足跖腫脹度有顯著差異(P<0.05)，0.5g/kg BW組與0g/kg BW組比較，小鼠足跖腫脹度有顯著差異(P<0.05)即在0.3g/kg BW、0.5g/kg BW組能提高小鼠足跖腫脹度。說(shuō)明硒與白藜蘆醇增效作用明顯。