專利名稱：6,7-位修飾的紅豆杉醇的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明給出的化合物具有抗腫瘤活性。
紅豆杉醇(paclitaxel)首次從短葉紅豆杉(紅豆杉科)的樹皮中分離出來，它具有如下的結(jié)構(gòu)(標(biāo)明了(C)2′-6-，7-和12-位)。
近來證實(shí)了它能治療卵巢癌;對乳腺癌、結(jié)腸癌和肺癌也有顯著的作用，見D.K.，and Donehower，R.C.Ann.Int.Med.，1989，111，P273。
在抗腫瘤藥中，紅豆杉醇的獨(dú)特之處在于它能在其它不利的條件下促使微管蛋白組合成微管。此藥與微管結(jié)合，穩(wěn)定微管，防止其解聚，進(jìn)而破壞了微管蛋白與微管之間的平衡，所以抑制了有絲分裂。紅豆杉醇的作用機(jī)理、毒理、臨床功效等有許多文章進(jìn)行了綜述，如由Rowinsky等著的文章中，關(guān)于紅豆杉醇A Novel Investigational Antimicrotubule Agent，J.Natl Caneer.Inst，82pp1247-1259(1990)。
自從發(fā)現(xiàn)了紅豆杉醇在癌癥治療方面有顯著的療效，為了尋找藥理活性更好的化合物，許多實(shí)驗(yàn)室開始了設(shè)計(jì)紅豆杉醇類似物的計(jì)劃。例如，從中發(fā)現(xiàn)了通式如下的Taxotere
見，Biologically Active Taxol Analogues with Deleted A-Ring Side Chain Substititutents and Variable C-Z′Configurations，J.Med.Chem.34，pp1176-1184(1991);Relationships between the structure of Taxol Analogues and their Antimitotic Activity，J.Med.Chem.，34 pp992-998(1991)。
本發(fā)明涉及具有抗腫瘤活性的結(jié)構(gòu)新穎的紅豆杉醇類衍生物。
本發(fā)明給出了通式Ⅰ的紅豆杉醇衍生物
其中R1為-CORz，其中的Rz為RO-或R;
R2為C1-6烷基，C2-6烯基，C2-6炔基，C3-6環(huán)烷基，或?yàn)橥ㄊ绞?W-Rx的基團(tuán)，其中W為一鍵，C2-6鏈烯二基，或-(CH2)t-，其中t為1到6;Rx為萘基，苯基或雜芳基，而且Rx還可被1-3個(gè)相同或不同的C1-6烷氧基、鹵素或-CF3基團(tuán)任意取代;
Ra為-OCOR，H，OH，-OR，-OSO2R，-OCONR0R，-O-CONHR，-OCOO(CH2)tR或-OCOOR;
Rb和Rc均為羥基，或者通過碳原子共同形成鍵而連結(jié)起來;且R和R0獨(dú)立是C1-6烷基、C2-6烯基、C3-6環(huán)烷基、C2-6炔基，或苯基，還可被1到3個(gè)相同或不同的C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵素或-CF3基團(tuán)任意取代。
本發(fā)明還給出藥物組合物以及用通式Ⅰ的化合物治療哺乳動物腫瘤的方法。
本發(fā)明給出了通式Ⅰ的紅豆杉醇衍生物
其中R1為-CORz，Rz為RO-或R;
R2為C1-6烷基，C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6環(huán)烷基、或者為通式是-W-Rx的基團(tuán)，其中W可為鍵，C2-6鏈烯二基，或-(CH2)t，t為1-6;Rx為萘基、苯基、或雜芳基，而且Rx還可被1-3個(gè)相同或不同的C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵素或-CF3基團(tuán)任意取代。
Ra為-OCOR，H，OH，-OR，-OSO2R，-OCONR0R，-O-CONHR，-OCOO(CH2)tR或-OCOOR;
Rb和Rc均為羥基，或者通過碳原子共同形成鍵而連結(jié)起來;且R和R0獨(dú)立是C1-6烷基、C2-6烯基、C3-6環(huán)烷基、C2-6炔基，或苯基，還可被1到3個(gè)相同或不同的C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵素或-CF3基團(tuán)任意取代。
在本申請中，“C”符號后下標(biāo)的數(shù)字表示每個(gè)特定基團(tuán)所含碳原子的數(shù)目。例如，C1-6烷基指的是含有1到6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、正戊基、正己基、3-甲基戊基及類似烷基;C2-6烯基指的是直鏈或支鏈烯基基團(tuán)，如乙烯基，烯丙基，1-丙烯基，異丙烯基，1-丁烯基，2-丁烯基，3-丁烯基，甲代烯丙基，1，1-二甲基烯丙基，1-己烯基，2-己烯基或類似基團(tuán);C3-6環(huán)烷基指的是環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己烯;C3-6炔基指的是直鏈或支鏈的炔基，如乙炔基炔丙基(2-丙炔基)，1-丙炔基，1-丁炔基，2-丁炔基，3-丁炔基，1-己炔基，4-甲基-2-戊炔基或類似基團(tuán);鏈烯二基指的是乙烯-1，2-二基(1，2-乙烯基)，2-甲基-2-丁烯-1，4-二基，2-己烯-1，6-二基或類似基團(tuán);C1-6烷基氧基(烷氧基)指的是直鏈或支鏈的烷氧基，如甲氧基，乙氧基，正丙氧基，異丙氧基，正丁氧基，叔丁氧基，正戊氧基，正己氧基，或3-甲基戊氧基等等;雜芳基指的是至少含有氧、硫、氮中的一個(gè)雜原子的五員芳環(huán)，但至多含有一個(gè)硫、一個(gè)氧或4個(gè)氮原子;雜芳基還可為含有1-4個(gè)氮原子的六員芳香環(huán);鹵原子指的是氟、氯、溴、碘;雜芳基例子包括噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、異噻唑基，噁唑基、異噁唑基、三唑基、噻三唑基、噁二唑基、四唑基、噻三唑基、噁三唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基、三嗪基、四嗪基及類似基團(tuán)。氮雜環(huán)丁酮為氮雜環(huán)丁烷-2-酮，在本申請中同一符號除非重新說明表示相同的含義。
通式Ⅰ的化合物可經(jīng)多種方法進(jìn)行合成。下面的合成方法，敘述和具體的實(shí)施例僅僅是為了說明的目的，而不解釋為用任何方法的限制，如用任何其他方法合成本發(fā)明化合物的限制。在此公開的方法能夠很容易地修改用來合成沒有具體公開的通式Ⅰ的其它化合物。
在一種實(shí)施中，通式Ⅰa的化合物可經(jīng)圖Ⅰ的路線合成。在圖中，通式Ⅱa的化合物與DAST反應(yīng)，得到了通式Ⅲa的化合物，DAST反應(yīng)可在多種溶劑中進(jìn)行，如二氯甲烷，四氫呋喃(THF)，乙醚，甲苯及其它混合溶劑，除了化合物Ⅲa外，通式Ⅳa和Ⅴa的化合物在DAST反應(yīng)中可作為付產(chǎn)物得到。觀察到當(dāng)反應(yīng)在四氫呋喃和乙醚的混合溶劑中進(jìn)行時(shí)，得到了化合物Ⅲa，相對于化合物Ⅵa和Ⅴa來說有較高的收率。脫去化合物Ⅲa中的cbz，得到了通式Ⅰa的化合物。
在圖Ⅱ的更普通的實(shí)施中，當(dāng)通式Ⅰa的化合物與酯還原劑如四丁基氫硼化氨反應(yīng)，C-13側(cè)鏈被還原除去，得到了通式Ⅵa的化合物。以圖Ⅳ中(a)步(見下)基本相同的方法，將通式Ⅵa的化合物與通式Ⅶ的氨雜環(huán)丁酮連結(jié)起來，得到通式Ⅷ的化合物，除去其羥基保護(hù)基R3，得到通式Ⅰ1的化合物。
象這里所用的，羥基保護(hù)基是用于阻止或保護(hù)羥基功能基的部分且它們對本技術(shù)領(lǐng)域人員來說是熟知的，上述的保護(hù)基最好是那些能通過不引起被保護(hù)分子明顯破壞的方法除去的基團(tuán)。這種易除去的羥基保護(hù)基例如包括氯乙?；?、甲氧基甲基、2，2，2-三氯乙氧基甲基，2，2，2-三氯乙氧基羰基、四氫吡喃基、四氫呋喃基、叔丁基、芐基、對硝基芐基、對甲氧基芐基、二苯基甲基、三C1-6烷基硅甲烷基，三苯基硅甲烷基，1-乙氧基乙基等。對于紅豆杉醇及其衍生物的2′-羥基，優(yōu)選的保護(hù)基有1-乙氧基乙基，三乙基甲硅烷基，2，2，2-三氯乙氧基羰基和芐氧基羰基;更優(yōu)選的基團(tuán)是芐氧基羰基，其可容易地用催化氫解的方法除去。其它能應(yīng)用的適宜的保護(hù)基見Theodora W.Greene and Peter，G.M.Wuts著《Protecting G roups in Organic Synthesis》第二版動第2章(1991，John Wiley &Sons)，其公開說明書通過參考并入本文。
在另一種一般實(shí)施方案中，象按圖Ⅰ(a)步的方法，通式Ⅱ的化合物能與DAST反應(yīng)，得到圖Ⅲ中通式Ⅲ的化合物。這里所用的，Rj為-OCOR，H，-OR，-OR3，-OSO2R，-OCONR0R，-O-CONHR，-OCOO(CH2)tR或-OCOOR。除去其羥基保護(hù)基R3，得到通式Ⅰ2的化合物。
通式Ⅱ表示的許多化合物在已有技術(shù)中是公知的或可用已知的方法(有或沒有小的修改)容易地制得，例如，通式Ⅱ中Rj為H的化合物，可按1993.4.1公開PCT申請，WO 93/06093中的一般方法制得，此方法全部通過參考并入本文。
又如，通式Ⅱ的化合物可容易地由圖Ⅳ的方法制備。在此圖中的步驟a中，氮雜環(huán)丁酮Ⅶ與通式Ⅹ的一種化合物(漿果赤霉素Ⅲ的衍生物)反應(yīng)，其中R4為羥基保護(hù)基，一般通式Ⅶ的氮雜環(huán)丁酮類化合物是已知的，它們及其前體的合成已有報(bào)道。如Halton的European Patent Application 0.400，971，A2，公開于1990.12.5;Holton的European Patent Application 0，534，709A1;0，534，708A1;and 0534，707A1，所有這三篇報(bào)道公開于1993，3，31;另外，Hotton在PCT申請，WO.93/06079公開于1993，4，1;Ojima等，Tefrahedron，48，No.34，pp6985-7012(1992);Journal of Organic Chemistny，56，pp1681-1683(1991);Tetrahedrrn Letters，33，No.39，pp5737-5740(1992);Brieva等，J.Org Chem，58，pp1068-1075;Palomo等，Tetrahedron Letters，31.No.44，pp6429-6432(1990);European Application552041，公開于1993，7，21，及我們美國專利申請No.092，170，于1993，7，14申請。所有十二篇公開說明全部通過參考并入本文。這些方法易被修改，用來合成Ⅶ范圍內(nèi)的其他的氮雜環(huán)丁酮類化合物，而且在此處或上述12篇參考文獻(xiàn)或別入沒有具體公開，對本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見的。
European Patcnt Apptication 0，400，971，A2，0，534，709A1，0，534，708A1，ey 0，534，707A1;和Tetrahedron，48，No34，pp6985-7012(1992)和Tetrahedron Letters34，No.26，pp4149-4152(1993)也報(bào)道了由通式Ⅶ的氮雜環(huán)丁酮類化合物和漿果赤霉素Ⅲ衍生物的C13羥基或其金屬烷氧化物反應(yīng)得到(C)-13位上有不同側(cè)鏈的紅豆杉醇類似物，在圖Ⅳ的(a)步中，成鍵前先將(C)13位C上的羥基轉(zhuǎn)變?yōu)榇冀饘冫}是有利的，上述的醇金屬鹽的金屬陽離子最好選自Ⅰa或Ⅱa族金屬。通式Ⅱ的化合物與強(qiáng)金屬堿反應(yīng)，得到需要的醇金屬鹽。如二異丙基酰胺鋰，C1-6烷基鋰，雙(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰，苯基鋰，氫化鈉，氫化鉀、氫化鋰等類似的堿。例如，在惰性溶劑如四氫呋喃中，通式Ⅱ的化合物與正丁基鋰反應(yīng)，得到希望的醇鋰鹽。
通式Ⅹ的化合物或者是在先有技術(shù)中已知的，或者由已知的方法(有或沒有改變)而容易制得。例如，Denis等1990年5月8日申請的U.S.Patent.No.4，924，011，報(bào)道于通式Ⅹ的化合物，其中R4為三乙基甲硅烷基，Rj為乙酰氧基。另外，在圖Ⅴ中，通式Ⅸ的化合物與RL，RC(＝O)L，R(CH2)tO(C＝O)L，ROC(＝O)L，LSO2R，LCONR0R，LCO2HR，O＝C＝N-R及其酸酐衍生物反應(yīng)，其中L是典型的離去基如氯、溴、甲磺?；⑷谆酋；凹妆交酋；?，得到通式為Ⅹ1的化合物，此化合物在通式Ⅹ的范圍內(nèi)。此處Rm為-OR，-OCOR，-OSO2R，-OCONR0R，-OCONHR，-COCC(CH2)tR，或-OCOOR。在圖Ⅴ的過程中，要求用堿引發(fā)脫去C10位羥基上的一個(gè)質(zhì)子。步驟(a)中較有用的是強(qiáng)堿，如C1-6烷基鋰。雙(三甲基硅烷基)酰胺鋰或其約1.1當(dāng)量的類似堿，堿脫質(zhì)子的反應(yīng)最好在非質(zhì)子溶劑中，如四氫呋喃，低溫下，通常為-40℃至0℃的范圍內(nèi)，Denis等1990，5，8申請的U.S.Patent No.4，924，011說明了通式Ⅸ化合物的合成，其中R4為三乙基甲硅烷基，通式Ⅸ的化合物，其中R4不是三烷基甲硅烷基，或者是已知的，或者能很容易地由本技術(shù)領(lǐng)域熟練人員熟悉的方法合成得到。
圖4說明了通式ⅩⅢ化合物與四氧化鋨及4-甲基嗎啡-N-氧化物(NMO)反應(yīng)，接著脫去通式Ⅻ化合物中的羥基保護(hù)基，得到通式Ⅰ3的化合物。
圖Ⅰ
圖Ⅱ
圖Ⅱ(續(xù))
圖Ⅲ
圖Ⅳ
圖Ⅴ
圖Ⅵ
在本申請中列出的結(jié)構(gòu)式想必最好地表示了本發(fā)明的化合物的結(jié)構(gòu)，但是，在本發(fā)明范圍內(nèi)的一些化合物可以其它互變異構(gòu)體的形式存在，其中氫原子轉(zhuǎn)移到分子中的其它部位，結(jié)果導(dǎo)致了分子中原子之間化學(xué)鍵重排。應(yīng)該知道，結(jié)構(gòu)式表示它們可能存在的所有互變異構(gòu)體。
下面講到的具體實(shí)施例用以說明本發(fā)明中典型化合物的合成，不能理解成對本發(fā)明的范圍限制。這些方法可加以改變，用來合成包括在本發(fā)明范圍內(nèi)而沒有具體列出的化合物，而且，能用不同的方法，以稍微不同的方式產(chǎn)生同一化合物，對本技術(shù)領(lǐng)域熟練人員是顯而易見的。
除非注明，所有的溫度指的是攝氏溫度(C)，核磁共振譜特征用化學(xué)位移(δ)表示，以ppm為單位，四甲基硅烷為內(nèi)標(biāo)，在質(zhì)子NMR譜數(shù)據(jù)中，不同位移時(shí)的相對面積，對應(yīng)于分子中某一特定功能基的氫原子數(shù)目。復(fù)雜位移的特征用寬單峰(bs)，寬雙峰(bd)，寬三峰(bt)，寬四峰(bq)，單峰(s)，多重峰(m)，雙峰(d)，四重峰(q)，三重峰(t)，雙兩峰(dd)，雙三峰(dt)，雙四峰(dq)表示;測定NMR所用的溶劑為DMSO-D6(全氟代二甲基亞砜)，D2O(氘代水)，CDCl3(氘代氯仿)及其它一些常用的氯代溶劑，紅外(IR)圖譜僅僅給出了那些具有鑒別官能團(tuán)價(jià)值的吸收峰的波數(shù)(cm-1)。
Celite是Johns-Manville商品公司生產(chǎn)硅澡土注冊商標(biāo)。
此處的縮寫是那些廣泛應(yīng)用的縮寫，其中一些為MS質(zhì)譜，HRMS高分辨質(zhì)譜，DAST二乙胺基三氟化硫，AC乙?；?
PH苯基;
Ar芳基;
DCI解吸化學(xué)電離Y產(chǎn)率;
V/V體積/體積;
FAB快速原子轟擊;
NOBA間-硝基芐醇;
min分鐘h小時(shí)tBu叔丁基CbZ芐氧基羰基Bz苯甲?；鵗ES三乙基甲硅烷基實(shí)施例12′-O-(芐氧基羰基)紅豆杉醇(Ⅱa)
室溫?cái)嚢柘?，向紅豆杉醇(150mg，0.176mmol)與N，N-二異丙基乙酸(93μL，0.534mmol，3eq.)的4ml無水CH2Cl2混合液中加入氯甲酸芐酯(75μL，0.525mmol，3eq.)，此反應(yīng)液室溫?cái)嚢?h，濃縮至體積為2ml，產(chǎn)物過硅膠柱純化，用1∶1的乙酸乙酯/己烷為洗脫劑，得到150mg(0.152mmol，收率86%)化合物Ⅱa，為白色粉末，mp.140-150℃，(分解);〔d〕20D-53.5°(C＝0.2，95%乙醇);
1H-NMR(300MHz，acetone-d6)δ ppm1.18(3H，s，17-H3)，1.92(3H，s，16-H3)，1.66(3H，s，19-H3)，1.96(3H，s，18-H3)，2.16(3H，s，10-OAc)，2.5(3H，s，4-OAc)，3.53(1H，d，J＝5.89Hz，7-OH，exchanged with D2O)，3.85(1H，d，J＝7.19Hz，3-H)，3.9(1H，s，1-OH，exchanged with D2O)，4.17(2H，ABq，20-H2)，4.25(1H，m，7-H)，4.97(1H，d;J＝9.56Hz，5-H)，5.19(2H，ABq，OCH2C6H5)，5.54(1H，d，J＝5.5Hz，2′-H)，5.68(1H，d，J＝7.13Hz，2-H)，6.01(1H，dd，J＝5.5，9.05Hz，3′-H)，6.17(1H，bt，J＝9.0Hz，13-H)，6.42(1H，s，10-H)，7.28-7.69(16H，m)，7.87(2H，“d”，J＝8Hz，3′-NHCOPh)，8.14(2H，“d”，J＝8Hz，2-CO2Ph)，8.55(1H，d，J＝9.06Hz，NH，exchanged with D2O);MS(FAB-NOBA/NaI+KI)m/e988(M+H)+，1010(M+Na)+，1026(M+K)+;IR(KBr) ν max3448，1748(C＝O)，1726(CONH)，1250(C-O)cm-1;UV(MeOH∶H2O，1∶1) λ max198(ε 7.3 x104)，230nm(ε 2.7 x 104);HRMS calcd for C55H58NO16(MH+)988.3756，found988.3766.
Anal.calcd for C55H57NO16·H2OC，65.67;H，5.92;N，1.40.FoundC，65.99;H，5.64;N，1.33.
實(shí)施例22′-O-芐氧基羰基-6，7-脫氫紅豆杉醇(Ⅲa)
2′-O-(芐氧基羰基)紅豆杉醇(Ⅱa)(514mg，0.521mmol)溶于3ml四氫呋喃和6ml乙醚中。此溶液冷至-78℃，滴加DAST(0.134ml，1.040mmol)。反應(yīng)液于-78℃下攪拌3h，然后放置室溫過夜。反應(yīng)完全后，減壓濃縮，蒸除部分溶劑，殘留物用色譜法分離，以含有30-40%乙酸乙酯的正己烷為洗脫劑，得到73mg(收率14.5%)所需化合物。
1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ ppm8.15(d，J＝7.1Hz，2H)，7.71(d，J＝7.1Hz，2H)7.63-7.24(m，16H)6.90(d，exch，J＝9.3Hz，1H)6.25(bt，1H)6.21(s，1H)6.05(dd，J1＝9.9Hz，J2＝5.6Hz，1H)5.96(dd，J1＝9.9Hz，J2＝2.7Hz，1H)5.86-5.82(m，2H)5.42(d，J＝2.5Hz，1H)5.18-5.09(m，3H)4.37(AB q，J＝8.2Hz，2H)4.00(d，J＝6.6Hz，1H)2.48-1.12(m，21H，includings at 2.44，3H;2.18，3H;1.86，3H;1.84，3H;1.23 3H;1.13，3H);13C-NMR(CDCl3，75MHz)δ ppm205.5，169.5，169.1，167.8，167.1，167.0，154.1，141.9，139.9，136.8，134.3，133.7，133.5，132.0，130.2，129.2，129.1，128.9，128.7，128.4，127.2，126.6，126.2，81.2，81.1，78.8，76.9，76.3，75.9，75.7，71.9，70.7，55.4，52.7，43.1，41.4，35.8，26.4，22.8，22.1，21.0，20.8，20.5，14.5.
實(shí)施例36，7-脫氫紅豆杉醇(Ⅰa)
2′-O-芐氧基羰基-6，7-脫氫紅豆杉醇(Ⅲa)(19.6mg，0.020mmol)溶于0.5ml乙酸乙酯中，催化量的Pd/c(6.4mg，10%，0.006mmol)加入到上面的反應(yīng)液中，在大氣壓下發(fā)生氫解反應(yīng)。4h后，過濾，濾液蒸發(fā)劑，粗品以色譜法純化(洗脫劑為含60%乙酸乙酯的正己烷)，得16.7mg(收率98.8%)所需化合物Ⅰa。
1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ ppm8.14(d，J＝8.7Hz，2H)，7.73(d，J＝8.7Hz，2H)，7.71-7.24(m，11H)，7.00(d，exch，J＝9.0Hz，1H)，6.18(m，2H)，6.04(dd，J1＝9.9Hz，J2＝5.6Hz，1H)，5.86-5.76(m，3H)，5.07(d，J＝5.6Hz 1H)，4.75(m，1H)，4.35(ABq，J＝8.2Hz，2H)，3.97(d，J＝6.4Hz，1H)，3.53(d，J＝4.8Hz，1H)，2.37-1.12(m，21H，including s at 1.36，3H;2.21，3H;1.85，3H;1.71，3H;1.22，3H;1.13，3H);13C-NMR(CDCl3，75MHz)δ ppm205.3，172.5，169.7，169.6，167.9，141.1，139.9，138.0，133.9，133.8，133.7，132.0，130.2，129.2，129.0，128.7，2，128.7，128.3，127.0，126.9，126.3，81.2，78.6，77.2，76.4，75.8，75.5，73.2，72.2，55.5，54.8，43.0，41.6，35.9，26.4，22.7，21.6，20.8，20.3，14.6;MS(FAB)836(MH).
實(shí)施例46，7-脫氫漿果赤霉素Ⅲ(Ⅵa)
向6，7-脫氫紅豆杉醇(1.13g，1.35mmol)的60ml二氯甲烷/2%甲醇溶液中加入四丁基氫硼化胺(694mg，2.7mmol)，反應(yīng)液室溫?cái)嚢?h，加入10ml飽和的氯化銨水溶液使反應(yīng)停止。有機(jī)層用硫酸鎂干燥，濃縮。粗品以硅膠柱分離(洗脫劑為含10%乙酸乙酯的正己烷)，再從甲醇中重結(jié)晶，得白色固體(630mg，收率82%)，mp.224-230℃(分解);
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ 8.15-8.09(m，2H)，7.64-7.58(m，1H)，7.51-7.45(m，2H)，6.46(s，1H)，6.05(dd，1H，J＝6.0，9.0Hz)，5.86(d，1H，12.0Hz)，5.79(d，1H，J＝6.0Hz)，5.11(d，1H，J＝6.0Hz)，4.89-4.82(m，1H)，4.35(ABq，2H，J＝6.0，36.0Hz)，4.09(d，1H，J＝6.0Hz)，2.35-2.18(m，10H，including singlets at 2.26，2.21)，2.01(s，3H)，1.83(s，3H)，1.10-1.07(m，6H);13C-NMR(75.6MHz，CDCl3)δ 205.4，170.2，169.5，166.8，145.3，139.7，133.5，132.4，129.9，129.2，128.5，126.1，81.1，80.9，78.9，78.6，76.3，76.2，75.3，67.7，55.4，44.1，42.5，41.6，38.9，26.2，22.6，20.9，20.7，20.1，14.8，14.5.
實(shí)施例56，7-脫氫-2′-O-三乙基甲硅烷基-3′-(2-呋喃基)-3′-N-脫苯甲酰基-N-叔-丁氧基羰基紅豆杉醇(Ⅷa)
6，7-脫氫漿果赤霉素Ⅲ(42mg，0.074mmol)溶于5ml干燥的四氫呋喃中，用惰性氣體洗，于干冰/丙酮中冷至-55℃，用注射器向上述溶液中加入六甲基二硅氮烷基鋰(溶于四氫呋喃的0.5M溶液，0.24ml，0.8mmol)，得到淺黃色反應(yīng)液，攪拌5min。然后，在5min內(nèi)加入外消旋的N-叔丁氧基羰基-4-(2-呋喃基)-氮雜環(huán)丁酮(Ⅶa)(130.8mg，0.35mmol)的2ml四氫呋喃溶液。用冰水浴代替上面的冷浴，使反應(yīng)液于0°攪拌1h，加入飽和NH4Cl浴液(2ml)使反應(yīng)停止。然后再加入25乙酸乙酯稀釋，水洗(2×10ml)，有機(jī)層干燥(MgSO4)，濃縮，得到所需化合物粗品，為一無色油狀物粗品。該粗品用硅膠柱純化，己烷/乙酸乙酯(7∶3)為洗脫劑，得所需化合物，為無色玻璃狀物(59.5mg，收率86%)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ 8.14(d，2H，J＝9.0Hz)，7.60-7.37(m，3H)，6.35-6.33(m，1H)，6.24-6.20(m，3H)，6.06(dd，1H，J＝6.0，9.0Hz)，5.87-5.84(m，2H)，5.30(d，2H，J＝6.0Hz)，5.11(d，1H，J＝3.0Hz)，4.75(s，1H)，4.36(ABq，2H，J＝6.0，39.0Hz)，4.04(d，1H，J＝6.0Hz)，2.47(s，3H)，2.45-2.25(m，2H)，2.22(s，3H)，1.90-1.14(m，23H，including singlets at 1.86，1.82，1.34，1.25，1.14)，0.87-0.73(m，9H)，0.55-0.37(m，6H);13C-NMR(75.6MHz，CDCl3)δ 2.5.5，171.1，169.5，166.9，155.3，152.0，142.0，141.8，139.9，133.6，133.4，130.1，129.1，128.6，126.1，110.6，107.2，81.2，80.9，80.1，78.6，76.5，76.3，75.9，75.6，72.3，71.9，55.4，52.7，43.0，41.3，35.6，28.1，26.0，22.8，21.9，20.7，20.3，14.5，6.4，4.2.
實(shí)施例66，7-脫氫-3′-(2-呋喃基)-3′-N-脫苯甲?；?N-叔丁氧基羰基紅豆杉醇(Ⅰb)
2′-O-甲硅烷基保護(hù)的底物Ⅷa(59.5mg，0.063mmol)的2ml乙腈溶液，于冰水浴中冷至0℃，加入1NHCl(0.05ml，6eq.)，此反應(yīng)液在此溫度下攪拌1h，減壓蒸除部分溶劑，殘留物用乙酸乙酯(25ml)和水(10ml)萃取，干燥(MgSO4)有機(jī)層，濃縮，得到白色泡沫狀物。粗品用硅膠柱層析化，洗脫劑為含10%CH3CN的CH2Cl2溶液。分離得到所需產(chǎn)品，為一白色泡沫狀物(46mg，收率88%)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ 8.14(d，2H，J＝6.0Hz)，7.62-7.46(m，3H)，6.37-6.30(m，2H)，6.31-6.20(m，2H)，6.06(dd，1H，J＝6.0，12.0Hz)，5.87-5.83(m，2H)，5-35-5.23(m，2H)，5.10(d，1H，J＝6.0Hz)，4.70(s，1H)，4.37(ABq，2H，J＝9.0，42.0Hz)，4.02(d，1H，J＝6.0Hz)，3.31(bs，1H)，2.40-1.15(m，31H，including singlets at 2.40，2.23，1.85，1.79，1.35，1.25，1.15);13C-NMR(75.6MHz，CDCl3)δ 205.2，169.4，166.9，142.3，141.3，139.7，133.5，130.0，129.0，128.5，126.1，110.5，107.2，81.1，80.9，78.5，76.2，75.7，75.4，72.2，71.6，55.3，51.5，42.9，41.4，35.5，28.0，26.0，2.5，21.6，20.6，20.1，14.4;HRMS Calcd for MH+C43H52NO15822.3337;Found822.3364
實(shí)施例76，7-脫氫-3′-(2-呋喃基)紅豆杉醇(Ⅰc)
6，7-脫氫漿果赤霉素Ⅲ(Ⅵa)(191.4mg，0.33mmol)于5mL干燥的四氫呋喃溶液中，用惰性氣體洗，用干冰/丙酮浴冷至-55℃。用注射器向上述液中滴加六甲基二硅氮烷基鋰(在己烷中的1M溶液，0.4ml，0.4mmol)，得到淺黃色溶液，攪拌5min，然后在5min內(nèi)加入(3R，4S)-N-苯甲?；?4-(2-呋喃基)氮雜環(huán)丁酮(Ⅶ′a)(150.0mg，0.4mmol)的2ml四氫呋喃溶液。用冰水浴代替上面的冷卻浴，使反應(yīng)液于0℃攪拌1h。加入2ml飽和NH4Cl溶液使反應(yīng)停止，然后再加入25ml乙酸乙酯稀釋，水洗(2×10ml)，干燥有機(jī)相(MgSO4)濃縮，得到6，7-脫氫-2′-O-三乙基硅烷基-3′-(2-呋喃基)紅豆杉醇的粗品，為一無色油狀物。
6，7-脫氫-2′-O-三乙基硅烷基-3′(2-呋喃基)紅豆杉醇的粗品(189mg)溶于2ml乙腈中，用冰水浴冷至0℃，加入1NHCl(0.5ml)，反應(yīng)液在此溫度下攪拌1h，減壓濃縮蒸除溶劑，殘留物用乙酸乙酯(25ml)和水(10ml)萃取。干燥有機(jī)層(MgSO4)，濃縮，得到白色泡沫狀物，粗品用硅酸柱層析純化，洗脫劑為含20%CH3CN的CH2Cl2溶液，分離，得所需化合物，為一白色泡沫狀物(140mg，收率51%)1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ 8.15(d，2H，J＝9.0Hz)，7.73(d，2H，J＝9.0Hz)，7.61-7.37(m，6H)，6.92(d，1H，J＝9.0Hz)，6.38(d，2H，J＝1.3Hz)，6.21(s，2H)，6.06(dd，1H，J＝6.0，9.0Hz)，5.89-5.84(m，2H)，5.10(d，1H，J＝6.0Hz)，4.80(dd，1H，J＝3.0，6.0Hz)，4.36(ABq，2H，J＝9.0，36.0Hz)，4.01(d，1H，J＝6.0Hz)，3.58(d，1H，J＝6.0Hz)，2.43-1.74(m，17H，including singlets at 2.42，2.22，1.99，1.86，1.76)，1.23-1.10(m，6H，including singlets at 1.23，1.14);13C-NMR(75.6MHz，CDCl3)δ 205.1，172.0，169.6，169.4，166.9，166.8，150.7，142.5，141.0，139.7，133.8，133.6，133.2，131.9，130.0，129.1，128.5，126.9，126.1，110.6，107.8，81.1，81.0，78.4，76.3，75.7，75.4，72.1，71.5，55.3，50.0，42.9，41.5，35.7，26.9，26.2，22.5，21.5，20.6，20.2，14.4.
實(shí)施例86，7-脫氫-2′-O-三乙基甲硅烷基-3′-(2-噻吩基)-3′-N-脫苯甲?；?N-叔丁氧基羰基紅豆杉醇(Ⅷb)
此主題化合物可按照實(shí)施例5中化合物Ⅷa的類似方法來制備1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ 8.14(d，2H，J＝9.0Hz)，7.63-7.58(m，1H)，7.49(t，2H，J＝9.0Hz)，7.26-7.23(m，1H)，6.99-6.93(m，2H)，6.23-6.19(m，2H)，6.06(dd，1H，J＝3.0，9.0Hz)，5.87-5.84(m，2H)，5.52-5.40(m，2H)，5.10(d，1H，J＝6.0Hz)，4.55(d，1H，J＝1.8Hz)，4.38(ABq，2H，J＝9.0，42.0Hz)，4.03(d，1H，J＝6.0Hz)，2.47-2.20(m，8H，including singlets at 2.42，2.22)，1.88-1.73(m，7H，including singlets at 1.86，1.81)，1.43-1.14(m，15H，including singlets at 1.32，1.26，1.14)，0.90-0.81(m，9H)，0.59-0.42(m，6H);13C-NMR(75.6MHz，CDCl3)δ 205.4，171.0，169.5，169.2，166.9，141.9，139.9，133.6，133.4，130.1，129.1，128.6，126.8，126.1，124.6，124.5，81.2，81.0，80.1，78.7，76.2，75.8，75.7，75.2，71.2，55.3，53.7，43.0，41.3，35.7，28.1，26.1，22.9，22.0，20.7，20.4，14.5，6.5，4.4.
實(shí)施例96，7-脫氫-3′-(2-噻吩基)-3′-N-脫苯甲酰基-N-叔丁氧基羰基紅豆杉醇(Ⅰd)
此化合物可采用像在實(shí)施例6中化合物Ⅰb的類似方法得到1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ 8.13(d，2H，J＝6.0Hz)，7.63-7.58(m，1H)，7.49(t，2H，J＝6.0Hz)，7.26-7.24(m，1H)，7.06(d，1H，J＝6.0Hz)，6.99-6.96(m，1H)，6.22-6.19(m，2H)，6.04(dd，1H，J＝3.0，10.0Hz)，5.86-5.81(m，2H)，5.47-5.37(m，2H)，5.08(d，1H，J＝6.0Hz)，4.61(dd，1H，J＝2.1，5.4Hz)，4.35(ABq，2H，J＝8.1，39.0Hz)，4.00(d，1H，J＝6.0Hz)，3.56-3.53(m，1H)，2.37-2.20(m，8H，including singlets at 2.37，2.22)，1.98-1.72(m，7H，including singlets at 1.96，1.86，1.75)，1.39-1.14(m，15H，including singlets at 1.33，1.24，1.14);13C-NMR(75.6MHz，CDCl3)δ 205.2，169.5，169.4，166.9，154.9，141.3，139.8，133.7，133.6，133.5，130.1，129.9，129.1，128.6，126.9，126.2，125.3，125.2，81.1，81.0，80.3，78.5，76.3，75.8，75.5，73.3，72.3，55.4，52.7，43.0，41.5，35.6，28.1，26.2，22.6，21.6，20.7，20.2，14.4.
實(shí)施例10三苯甲醛縮二氨phCH(-N＝CHph)2的制備在裝有一個(gè)機(jī)械攪拌器和一個(gè)溫度計(jì)的3升的三口圓底燒瓶中，加入1升濃氨水(大約30%)(14.8moles)，一次加入苯甲醛(265g，2.5mol)的500ml 2-丙醇溶液?；旌弦河诩s22℃劇烈攪拌43h。得漿狀液，過濾，用1升水洗濾出的塊狀物。真空干燥，得242.4g三苯甲醛縮二氨，為白色固體(mp.100-102℃)，收率97.4%。
上述步驟可用來制備通式為R2CH(-N＝CHR2)2的二亞胺如二氨縮三糠醛(R2＝2-呋喃基)三噻吩甲醛縮二氨(R2＝2-呋喃基)實(shí)施例11(±)Cis-3-乙酰氧基-1-〔(苯基)(苯亞甲基亞胺基)甲基〕4-苯基氮雜環(huán)丁烷-2-酮(ⅩⅣa)
在一個(gè)裝有溫度計(jì)，電磁攪拌、滴液漏斗的1000ml的三頸圓底燒瓶中，加入三苯甲醛縮二氨(30.00g，100.5mmol)和150ml乙酸乙酯，在通氬氣下攪拌，反應(yīng)液冷至-5℃，加入三乙胺(16.8ml，121mmol)。然后在90min內(nèi)逐滴加入乙酸乙酰氯(124ml，116mmol)的300ml乙酸乙酯溶液，在此溫度下反應(yīng)16h，將混合液溫度升至20℃(1.5h)，并轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，有機(jī)層連續(xù)用飽和NH4Cl水溶液(150ml，100ml)，飽和NaHCO3水溶液(120ml)和鹽水(120ml)洗，為了表示特性，用MgSO4干燥有機(jī)層，過濾，減壓蒸去溶劑，目的化學(xué)物可在此階段分離，這時(shí)可得到目的化合物，此法可得到定量的所需化合物粗品，為紅色玻璃狀物HPLC純(面積)87.9%(1∶1非對映異構(gòu)體混合物)1H-NMR(CDCl3，200MHz)δ 8.45(s，1H，N＝CH)，7.80-7.85(m，1H，Ph)，7.60-7.65(m，1H，Ph)，7.26-7.50(m，9H，Ph)，7.00-7.10(m，4H，Ph)，6.28(s，0.5H，NCHN)，6.23(s，0.5H，NCHN)，5.81(d，J＝4.8Hz，0.5H，H-3)，5.76(d，J＝4.8Hz，0.5H，H-3)，5.30(d，J＝4.8Hz，0.5H，H-4)，4.75(d，J＝4.8Hz，0.5H，H-4)，1.63(s，3H，CH3CO);IR(KBr)ν(cm-1)＝1763(C＝O)，1641(C＝N);UV(methanol)λ max(nm)＝216，252.
實(shí)施例12(±)-Cis-3-乙酰氧基-4-苯基氮雜環(huán)丁烷-2-酮(ⅩⅤa)
將上述實(shí)施例11中的化合物的500ml乙酸乙酯溶液在通氬氣下小心轉(zhuǎn)移到2.0升的Parr燒瓶中，其中含有10%Pa/c(6.00g)。此混合液通氫氣(4atm)反應(yīng)20h，催化劑用硅藻土填塞過濾除去。濾塊與200ml乙酸乙酯混合成泥漿，攪拌(10min)然后過濾濾塊用100ml乙酸乙酯洗，合并濾液，有機(jī)層用10%HCl洗(300ml)，兩層通過熔融玻璃漏斗除去白色沉淀(二芐基胺鹽酸鹽)，并用乙酸乙酯(100ml)洗沉淀，分壓，有機(jī)層用另外10%HCl(200ml)洗，合并10HCl洗液，用乙酸乙酯(200ml)再萃取，合并有機(jī)層，用飽和NaHCO3水溶液(300ml)，鹽水(250ml)洗，用MgSO4干燥有機(jī)層，過濾，濃縮至最后體積為75ml。將此混合物冷至-4℃，過濾得沉淀物，用200ml己烷洗，得所需化合物16.12g(從三苯甲醛縮二胺算，總收率為78.1%)，為白色針狀結(jié)晶，mp.150-151℃，HPLC純(面積)99.8%1H-NMR(CDCl3，200MHz)δ＝7.30-7.38(m，5H，Ph)，6.54(bs，exchangeable，1H，NH)，5.87(dd，J＝2.7，4.7Hz，1H，H-3)，5.04(d，J＝4.7Hz，1H，H-4)，1.67(s，3H，CH3CO);IR(KBr)ν(cm-1)＝3210(N-H)，1755，1720(C＝O);KF0.17%.
Anal.Calcd.for C11H11NO3C，64.38;H，5.40;N，6.83.FoundC，64.07;H，5.34;N，6.77.
實(shí)施例13(±)-Cis-3-乙酰氧基-1-〔(2-呋喃基)(2-呋喃亞甲基亞氨基)甲基〕-4-(2-呋喃基)氮雜環(huán)丁烷-2-酮(ⅩⅣb)
除將二氨縮三糠醛代替三苯甲醛縮二胺，該主題化合物可按照實(shí)施例11中的步驟來制備。反應(yīng)可按18.6mmol(相對于100mmol)的量進(jìn)行。因而，二氨縮三糠醛(5.00g，18.6mmol)，三乙胺(3.11ml，22.3mol)和乙酸乙酰氯(2.30ml，21.4mmol)給出6.192g(收率90.4%)的所需化合物。為一淺紅色糖漿，得到的產(chǎn)物為1∶1的非對映體的混合物
1H-NMR(CDCl3;200MHz)δ 8.211(s，0.5H，N＝CH)，8.208(s，0.5H，N＝CH)，7.14-7.59(m，3H，furyl)，6.90(d，J＝3.5Hz，0.5H，furyl)，6.83(d，J＝3.5Hz，0.5H，furyl)，6.10-6.53(m，6H，furyl，NCHN)，5.90(d，J＝4.9Hz，0.5H，H-3)，5.86(d，J＝4.8Hz，0.5H，H-3)，5.35(d，J＝4.8Hz，0.5H，H-4)，4.90(d，J＝4.9Hz，0.5H，H-4)，1.91(s，1.5H，CH3CO)，1.88(s，1.5H，CH3CO);IR(film)ν(cm-1)＝1778，1753(C＝O)，1642(C＝N);UV(methanol)λmax(nm)＝220，278.
實(shí)施例14(±)-Cis-3-(乙酰氧基)-4-(2-呋喃基)氮雜環(huán)丁烷-2-酮(ⅩⅤb)
該標(biāo)題化合物按照實(shí)施例12中的步驟來制備，除非產(chǎn)物用制備性薄層色譜分離。反應(yīng)以二氨縮三糠醛最初量為2.7mmol的量進(jìn)行。因而，實(shí)施例13的化合物粗品(1.00g)重新溶解在50ml乙酸乙酯中，加入10%Pd/c(150mg)，以制備性薄層色譜(2mm硅膠，洗脫劑如乙酸乙酯/己烷1∶1)純化固體粗品，得到386mg的該標(biāo)題化合物(以二氨縮三糖醛算，為65.8%校正的總收率)，為一黃色固體，從乙酸乙酯/己烷中重結(jié)晶，mp.118-119℃，HPLC純(面積)99.4%1H-NMR(CDCl3，200MHz)δ 7.44(t，J＝1.3Hz，2H，furyl)，6.39(d，J＝1.3Hz，1H，furyl)，6.21(bs，exchangeable，1H，NH)，5.88(dd，J＝2.2，4.6Hz，1H，H-3)，5.05(d，J＝4.6Hz，1H，H-4)，1.92(s，3H，CH3CO);IR(KBr)ν(cm-1)＝3203(N-H)，1756，1726(C＝O);UV(methanol)λmax(nm)＝222.
實(shí)施例15(±)-Cis-3-乙酰氧基-1-〔(2-噻吩基)(2-噻吩基亞甲基亞氨基)甲基)-4-(2-噻吩基)氮雜環(huán)丁烷-2-酮(ⅩⅣc)
除以三噻吩甲醛縮二氨代替三苯甲醛基縮二氨，該標(biāo)題化合物可按實(shí)施例11中描述的方法制備，因而，用三噻吩甲醛縮二氨(30g，94.7mmol)，三乙胺(15.84ml，11.4mmol)及乙酸乙酯氯(1.6ml，108mmol)反應(yīng)，得到該標(biāo)題化合物，為粘稠狀油狀物。所得產(chǎn)品為含有作對映體的混合物。
1H-NMR(CDCl3)δ 8.52(s，1H)，8.502(s，1H)，7.51(d，J＝4.9Hz，1H)，7.45(d，J＝4.4Hz，1H)，7.41(d，J＝3.1Hz，1H)，7.37(d，1H)，7.30(m，3H)，7.16(m，1H)，7.16(m，3H)，7.09(m，2H)，6.94(m，1H)，6.89(m，1H)，6.81-6.74(m，4H)，6.48(s，1H)，6.43(s，1H)，5.85(m，2H)，5.59(d，J＝4.8Hz，1H)，5.17(d，J＝4.8Hz，1H)，1.87(s，3H)，1.86(s，3H).
實(shí)施例16(±)-Cis-3-(乙酰氧基)-4-(2-噻吩基)氮雜環(huán)丁烷-2-酮(ⅩⅤc)
于25℃攪拌下，向化合物ⅩⅣc(0.431g，1.03mmol)的2.93ml CH2Cl2溶液中一次加入70%冰醋酸水溶液(0.35mL冰醋酸和0.15ml水)。反應(yīng)液同流攪2.5h，加入50ml CH2Cl2稀釋，然后用兩份75ml飽和NaHCO3洗兩次，50ml飽和鹽水洗一次，有機(jī)層真空濃縮，得棕色油狀物，溶于少量CH2Cl2中，過硅膠柱，每隔0.5″測一次，共測4″，用含10-60%乙酸乙酯的己烷進(jìn)行梯廢洗脫，得到少量的極性付產(chǎn)物而且得到了該標(biāo)題化合物(0.154g，收率75%，為白色固體。
1H-NMR(CDCl3)δ 7.32(dd，J＝4.7，1.5Hz，1H)，7.03(m，2H)，6.75(bs，1H)，5.86(dd，J＝4.6，2.7Hz，1H)，5.27(d，J＝5.3Hz，1H)，1.83(s，3H);13C-NMR(CDCl3)δ 169.3，165.5，138.4，127.1，127.07，126.2，78.3，54.0，20.0.
實(shí)施例17(±)-Cis-3-三乙基甲硅烷氧基-4-(2-呋喃基)氮雜環(huán)丁烷-2-酮(ⅩⅥa)
乙酰氧基內(nèi)酰胺ⅩⅤb(3.78g，19.4mmol)的60ml甲醇溶液與K2CO3(20mg，0.14mmol)攪拌反應(yīng)90min，用Dowex 50W-Ⅹ8中和反應(yīng)液，過濾，濾液濃縮，殘留物溶于80ml無水四氫呋喃中，在0℃下與咪唑(1.44g，21.2mmol)及TEScl(氯代三甲基硅烷3.4ml，20.2mmol)攪拌反應(yīng)30min。反應(yīng)液用乙酸乙酯稀釋，用鹽水洗，MgSO4干燥，濃縮，殘留物用硅膠層析分離(洗脫劑為3∶1己烷/乙酸乙酯)，得4.47g(收率86%)的該標(biāo)題化合物，為一無色油狀物。
IR(film)3276(broad)，1768，1184，732cm-1;1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ 7.38(s，1H)，6.39(bs，1H)，6.35(s，2H)，5.05(dd，J＝4.6，2.3Hz，1H)，4.78(d，J＝4.6Hz，1H)，0.82(t，J＝8.5Hz，6H)，0.50(dq，J＝8.5，1.8Hz，9H);13C-NMR(CDCl3，75.5Hz)δ 169.6，150.4，142.6，110.5，109.1，79.6，53.2，6.4，4.4;FABMS(DCI)M+H calcd for C13H21NO3Si268，F(xiàn)ound268.
實(shí)施例18(±)-Cis-3-三乙基甲硅烷氧基-4-(2-呋喃基)-N-叔丁氧基羰基氮雜環(huán)丁烷-2-酮(Ⅶa)
氮雜環(huán)丁酮ⅩⅥa(2.05g，7.7mmol)的30ml二氯甲烷溶液與二異丙基乙胺(1.5mL，8.6mmol)和甲酸二叔丁酯(2.0g，9.2mmol)及催化量的二甲基氨基吡啶(DMAP)于0℃攪拌反應(yīng)，加入CH2Cl2稀釋，鹽水洗，用MgSO4干燥，濃縮，殘留物用硅膠柱層析分離(洗脫劑為己烷/乙酸乙酯8∶1)，得2.0g(收率70%)該標(biāo)題化合物，為蠟狀固體IR(KBr)1822，1806，1712，1370，1348，1016 cm-1;1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ 7.38(m，1H)，6.34(m，2H)，5.04(ABq，J＝12.4，5.5Hz，2H)，1.39(s，9H)，0.82(t，9H)，0.50(m，6H);13C-NMR(CDCl3，75.5Hz)δ 165.7，148.0，147.7，142.8，110.5，109.7，83.4，77.4，56.0，27.8，6.3，4.4;DCIMS M+H calcd for C18H29NO5Si368，F(xiàn)ound368.
實(shí)施例19(±)-Cis-3-三乙基甲硅烷氧基-4-(2-噻吩基)-氮雜環(huán)丁烷-2-酮(ⅩⅥb)
3-乙酰氧基內(nèi)酰胺ⅩⅤc(2.5g，11.8mmol)溶于10ml甲醇中，加入10ml飽和NaHCO3水溶液，得一漿狀溶液，室溫?cái)嚢?h，加入20ml乙酸乙酯稀釋，水洗(15ml)，水層用乙酸乙酯萃到幾次，合并有機(jī)層，干燥(MgSO4)，濃縮，得黃色固體(產(chǎn)量1.7g)、粗品溶于20ml無水四氫呋喃中，用冰/水浴冷至5℃，加入咪唑(752mg，1.1eq)，攪拌5min后，逐滴加入三乙基氯硅烷(1.85ml，1.1eq)，懸浮液于5℃攪拌反應(yīng)3h，然后過濾除去固體，有機(jī)層用水洗(2×20ml)，干燥(MgSO4)，濃縮。粗品通過硅膠柱色譜純化(洗脫劑己烷/乙酸乙酯7∶3);得所需化合物(1.5g，收率45%)，為一無色固體。 m.p.70-71℃;1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ 7.32-7.30(m，1H);7.05-6.98(m，2H)，5.06-5.05(m，2H)，0.82(t，9H，J＝8Hz)，0.55-0.46(m，6H);13C-NMR(75.6MHz，CDCl3)δ 169.1，139.7，126.5，126.4，125.8，79.4，55.1，6.3，4.4.
另一種方法乙酰氧基內(nèi)酰胺ⅩⅤc(2.0g，9.37mmol)的40ml甲醇溶液與K2CO3(60mg，0.43mmol)攪拌30min，用Dowex 50W-X8中和反應(yīng)液，過濾，濾液濃縮。殘留物溶于50ml無水四氫呋喃中，在0℃下與咪唑(0.85g，11.3mmol)和TEScl(1.9ml，12，5mmol)攪拌30min。加入乙酸乙酸稀釋，用鹽水洗，用MgSO4干燥，濃縮。殘留物用硅膠層析分離，(洗脫劑為己烷/乙酸乙酯3∶1)，得所需化合物2.13g(收率86%)，為無色油狀物。
實(shí)施例20(±)-Cis-3-三乙基甲硅烷氧基-4-(2-噻吩基)-N-叔丁氧基羰基氮雜環(huán)丁烷-2-酮(Ⅶb)
甲硅烷基氮雜環(huán)丁酮ⅩⅥb(425.7mg，1.48mmol)，溶于10ml CH2Cl2中，于冰水浴冷至5℃。向反應(yīng)液中加入催化量的DMAP，TEScl(0.025ml，1.0eq)，然后再加入甲酸二叔丁酯(388.4mg，1.2eq)。于此溫度下攪拌2h。加入飽和NaHCO3水溶液(5ml)使反應(yīng)停止，有機(jī)相用5ml水洗，干燥(MgSO4)，通過一根短的硅膠柱，濃縮，得到所需化合物(525.3mg，收率93%)，為一無色油狀物。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ 7.31-7.29(m，1H)，7.08-7.07(m 1H)，7.00-6.58(m，1H)，5.31(d，1H，J＝6Hz)，5.03(d，1H，J＝6Hz)，1.40(s，9H)，0.83(t，9H，J＝8Hz)，0.56-0.47(m，6H);13C-NMR(75.6MHz，CDCl3)δ 165.5，147.5，136.4，127.6，126.2，126.1，83.3，77.3，57.9，27.7，6.2，4.3.
實(shí)施例21代表實(shí)施例用來選擇性合成10-脫乙酰基漿果赤霉素Ⅲ的C-10位衍生物10-苯甲?；?10-脫乙酰基-7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ(Ⅹ′a)通氬氣下，通式Ⅸ的漿果赤霉素的衍生物，其中R4為SiEt3(43.5mg，0.066mmol)溶于1.0mL干燥的四氫呋喃中，冷至-40℃，緩緩加入正丁基鋰(0.050mL，0.82mmol，1.6M溶液)。攪拌5min后，加入苯甲酰氯(0.030ml，0.26mmol)。將反應(yīng)液升溫至0℃，攪拌反應(yīng)1.5h，加入飽和NH4Cl水溶液(2ml)使反應(yīng)停止。用乙酸乙酯(2×5mL)萃取水相，干燥(MgSO4)，濃縮得到油狀物，以閃式硅膠層析分離(洗脫劑50%乙酸乙酯的己烷液)，得該標(biāo)題化合物(30mg，收率60%，通式Ⅹ′的化合物，其中R4為Si(Et)3，Rm為OCOC6H5)，為一泡沫狀物1H-NMR(CDCl3)δ 8.17-8.05(m，4H)，7.64-7.42(m，6H)，6.67(s，1H)，5.67(d，1H)，4.95(d，1H)，4.81(m，1H)，4.56(dd，1H)，4.30(d，1H)，4.14(d，1H)，3.92(d，1H)，2.50(m，1H)，2.30-2.0(m，18H)，1.92-1.80(m，1H)，1.72-1.62(bs，4H)，1.30(s，3H)，1.00(s，3H)，0.89(t，3H)，0.56(q，6H);HRMS(FAB/NOBA)Calculated for C42H54O11Si(MH+)762.3435.Found 762.3427.
應(yīng)用此方法，可制得C10為甲酸酯，磺酸酯，氨基甲酸酯，醚等化合物。當(dāng)用六甲基二硅烷鋰進(jìn)行反應(yīng)，收率較好。
實(shí)施例222′-O-芐氧基羰基-6a-羥基-7a-羥基紅豆杉醇(Ⅻa)
2′-O-芐氧基羰基-6，7-脫氫紅豆杉醇(100mg，0.1mmol)溶于3ml干燥的四氫呋喃中，用冰/水浴冷卻至5℃，加入吡啶(24μl，0.3mmol)和4-甲基嗎啡啉-N-氧化物(12mg，0.1mmol)，當(dāng)固體完全溶解后，加入催化量的四氧化鋨(2.5mg，0.01mmol)，得黃色溶液，于冰箱中放置96h，加入10ml乙酸乙酯稀釋，用飽和NaHCO3(5ml)，水(10ml)洗，有機(jī)層用MgSO4干燥，濃縮，得到無色泡沫狀粗品，由硅膠層析純化(洗脫劑為含20%CH3CN的CH2Cl2溶液)，得到所需產(chǎn)品，為白色泡沫狀物(47mg，收率47%)。
1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ 8.12(d，2H，J＝6.0Hz)，7.68(d，2H，J＝6.0Hz)，7.60-7.29(m，16H)，6.93(d，1H，J＝9.0Hz)，6.80(s，1H)，6.24(t，1H，J＝9.0Hz)，5.99(dd，1H，J＝3.0，9.0Hz)，5.71(d，1H，J＝6.0Hz)，5.45(d，1H，J＝3.0Hz)，5.27-5.13(m，2H)，4.67-4.63(m，2H)，4.33(s，2H)，4.16-4.12(m，1H)，3.85(d，1H，J＝6.0Hz)，3.65(dd，1H，J＝3.0，12.0Hz)，2.87-2.84(m，1H)，2.52(s，3H)，2.42-2.33(m，1H)，2.20-2.12(m，4H)，2.01(s，1H)，1.89(s，3H)，1.61(s，3H)，1.16(s，3H)，1.11(s，3H);13C-NMR(CDCl3，75.6MHz)δ 205.9，172.3，169.3，167.6，167.1，166.9，154.0，140.5，136.6，134.2，133.7，133.4，132.9，132.0，130.2，129.1，128.9，128.8，128.7，128.6，128.5，128.4，127.1，126.4，91.5，84.1，79.1，77.9，77.7，77.6，76.8，76.6，74.8，72.0，71.8，70.7，60.4，57.6，52.6，42.6，39.7，36.0，25.9，22.5，21.4，21.0，20.8，15.4，14.7，14.1;HRMS calcd for C55H58NO171004.3705，found1004.3691.
實(shí)施例236a-羥基-7a-羥基紅豆杉醇(Ⅰe)
通氬氣下，將2′-O-芐氧基羰基-6a-羥基-7a-羥基紅豆杉醇(47mg，0.047mmol)的3ml乙酸乙酯溶液置于Parn燒瓶中，加入Pd/c(20mg)，此懸浮液通40Psi的氫氣，振搖，3h后，放氣，將懸浮液過一個(gè)短的硅膠塞過濾，濃縮，粗品以硅膠層析法純化(洗脫劑為含20%CH3CN的CH2Cl2溶液)，得到所需化合物，為一白色泡沫狀物(20.2mg按所得支的原料計(jì)算收率99%)1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ 8.15(dd，2H，J＝0.9，8.0Hz)，7.72(dd，2H，J＝0.9，9.0Hz)，7.76-7.26(m，11H)，7.02(d，1H，J＝9Hz)，6.79(s，1H)，6.23(t，1H，J＝9.0Hz)，5.80(dd，1H，J＝2.1，8.7Hz)，5.73(d，1H，J＝7.2Hz)，4.82-4.79(m，1H)，4.68-4.64(m，2H)，4.34(s，2H)，4.15(apparentt，1H，J＝5.4Hz)，3.85(d，1H，J＝9.0Hz)，3.69-3.60(m，2H)，2.83(d，1H，J＝8.1Hz)，2.50(s，3H)，2.43-2.35(m，1H)，2.28-2.23(m，1H)，2.19(s，3H)，2.00(s，1H)，1.80(s，3H)，1.63(s，3H)，1.19(s，3H)，1.13(s，3H);13C-NMR(CDCl3，75.6MHz)δ 205.6，172.6，172.5，139.9，137.8，133.6，133.1，131.8，130.1，128.9，128.7，128.5，128.2，126.9，126.7，91.4，83.9;78.9，77.7，77.5，74.6，73.0，72.0，71.8，57.5，54.7，42.5，39.5，36.0，25.9，22.4，21.1，20.7，15.2，14.6.
實(shí)施例24按照本發(fā)明所講述的方法和實(shí)施例，可合成下述通式Ⅰ2的特定紅豆杉醇衍生物
實(shí)施例25按照本申請所講述的方法和實(shí)施例，可合成下述通式Ⅰ3的特定紅豆杉醇衍生物
實(shí)施例26生物數(shù)據(jù)小鼠M109模型象由Willam Rose在評價(jià)Madison109肺癌作為篩選抗癌藥模型中所講述的Cancer Treatment Reports，65，No.3-4(1981)，用0.5ml的2%(W/V)的M109肺癌漿對Balb/c XDBA/2F1雜種小鼠進(jìn)行腹膜內(nèi)移植。
植玫腫瘤后1，5，9天或5，8天，給小鼠腹腔注射不同劑量的待測化合物，每天觀察小鼠存活狀況，直到植入腫瘤后大約75-90天。每次實(shí)驗(yàn)時(shí)，留有一組小鼠不給藥，作為對照組。
給藥組小鼠的平均存活時(shí)間(T)與對照組小鼠的平均存活時(shí)間(C)相比較，小鼠的每個(gè)給藥組的這兩個(gè)數(shù)字的比值乘以100%，以百分?jǐn)?shù)表示，(即%T/C)，表1列出了一個(gè)代表化合物表Ⅰ(IP M109 data)
本發(fā)明的化合物對哺乳動物的腫瘤具有抑制作用，因此，本發(fā)明涉及的另一個(gè)方面是抑制對通式Ⅰ化合物敏感的哺乳動物腫瘤的方法。
本發(fā)明還給出了包含式Ⅰ的化合物在內(nèi)的藥物組合物，它能與一個(gè)或多個(gè)可藥用的惰性或生理活性的載體，賦形劑、稀釋劑或輔料組合，組合紅豆杉醇及其相關(guān)衍生物(包括可能的劑量)的例子在許多文獻(xiàn)中有過報(bào)道。下列如美國專利Nos.4，960，790及4，814，470，可遵循從這些例子組合本發(fā)明的化合物。例如，新化合物的片劑，丸劑，乳劑，分散劑，fooel premix以及其它適宜的形式給藥，含有本發(fā)明化合物的藥物制劑可容易地與無毒的有機(jī)藥物載體或無毒的無機(jī)藥物載體混合，通常藥物含量為0.01mg-2500mg或更高劑量單位，最好50-500mg。典型的藥用載體是，例如甘露糖醇manitol)，脲、葡聚糖，乳糖，馬鈴薯和玉米淀粉，硬脂酸鎂，滑石粉，植物油，聚二醇，乙基纖維素，聚乙烯吡咯烷酮，碳酸鈣，油酸乙酯，肉豆冠酸異丙酯、苯甲酸芐酯、碳酸鈉、明膠、碳酸鉀、硅酸及其它一些常用的載體藥物制劑，也可含有無毒的輔助物質(zhì)，如乳化劑，防腐劑，潤溫劑以及如單月桂酸脫水山梨醇酯，三乙醇胺油酸鹽，聚氧乙烯單硬脂酸酯，三棕櫚酸甘油酸，二辛基硫代琥珀酸鈉等等類似物。
本發(fā)明的化合物可冷凍干燥，如果需要的話，它們與另外的藥用賦形劑結(jié)合制成適于非腸道給藥，注射給藥的組合物。對這種給藥方式，藥物可重新溶解在水中(標(biāo)準(zhǔn)水，生理鹽水)，或有機(jī)溶劑如丙二醇，乙醇等與水的混合物。
本發(fā)明的化合物作為紅豆杉醇類可用于治療哺乳動物腫瘤，紅豆杉治醇治療癌癥病人給藥方式，劑量及計(jì)劃已得到廣泛的研究。例如，見Ann.Int Med.111，pp272-279(1989);對于本發(fā)明的化合物，給藥劑量，不管是單一劑量，多劑量還是每日劑量，當(dāng)然都將隨著所用的具體化合物的不同而改變，因?yàn)榛衔锊煌男r(jià)，給藥途徑、受體的大小及病人的健康狀況不同，給藥的劑量沒有明確的范圍，但它通常將是一個(gè)有效量，或者從劑型產(chǎn)生的藥理活性游離形式的摩爾當(dāng)量，在代謝釋放出活性藥物時(shí)達(dá)到其理想的藥理及生理效果。給藥的劑量通常為體重的0.8-8mg/kg之間或病人的約50-275mg/m2，一個(gè)在腫瘤治療方面熟練的腫瘤學(xué)家，不用憑過多的經(jīng)驗(yàn)，如通過參考紅豆杉醇及其衍生物的早期研究，將能查明關(guān)于本發(fā)明的化合物的有效給藥方法的適當(dāng)?shù)脑加涗洸牧稀?br> 權(quán)利要求
1.通式Ⅰ的化合物
其中R1為CORZ，其中RZ為RO或R；R2為C1-6烷基，C2-6烯基，C2-6炔基，C3-6環(huán)烷基，或通式是-W-RX的基團(tuán)，其中W可為鍵，C2-6鏈烯二基，或-(CH2)-基，其中t為1-6；Rx為萘基、苯基，或雜芳基，而且Rx還可被1-3個(gè)相同或不同的C1-6烷基，C1-6烷氧基，鹵素或-CF3基團(tuán)任意取代。Ra為-OCOR，H，OH，-OR，-OSO2R，-OCONR0R，-O-CONHR，-OCOO(CH2)tR，或-OCOOR；Rb和Rc均為羥基，或者通過碳原子共同形成而連結(jié)起來。R和R0獨(dú)立為C1-6烷基，C2-6烯基，C3-6環(huán)烷基，C2-6炔基，或苯基，還可被1-3個(gè)相同或不同的C1-6烷基，C1-6烷氧基、鹵素或-CF3基團(tuán)任意取代。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1為苯甲?；蚴宥⊙趸驶?R2為苯基，呋喃基或噻吩基;Ra為乙酰氧基;Rb和Rc通過碳原子形成鍵而相互連結(jié)。
3.權(quán)利要求2的化合物，其為6，7-脫氫紅豆杉醇。
4.權(quán)利要求2的化合物，其為6，7-脫氫-3′-(2-呋喃基)-3′-N-脫苯甲?；?N-叔丁氧基羰基紅豆杉醇。
5.權(quán)利要求2的化合物，其為6，7-脫氫-3′-(2-呋喃基)紅豆杉醇。
6.權(quán)利要求2的化合物，其為6，7-脫氫-3′-(2-噻吩基)-3′-N-脫苯甲?；?N-叔丁氧基羰基紅豆杉醇。
7.權(quán)利要求1的化合物，其中R1為苯甲?；蚴宥⊙趸驶?R2為苯基，呋喃基，或噻吩基;Ra為乙酰氧基;Rb和Rc為羥基。
8.權(quán)利要求7的化合物，其為6a-羥基-7a-羥基紅豆杉醇。
9.一種藥物組合物，其包括包含權(quán)利要求1-8任何一個(gè)中要求的一種化合物或其藥用鹽作為活性成份，以及有關(guān)的一種或多種藥用的載體、賦形劑或稀釋劑。
10.一種治療哺乳動物腫瘤的方法，其包括以權(quán)利要求1-8任何一個(gè)中要求的化合物的腫瘤敏感劑量對哺乳動物給藥。
11.通式如下的化合物
全文摘要
本發(fā)明涉及式Ⅰ的紅豆杉醇衍生物，其中，R
文檔編號C07D305/14GK1094041SQ93120068
公開日1994年10月26日 申請日期1993年12月3日 優(yōu)先權(quán)日1992年12月4日
發(fā)明者陳淑惠, V·法里納, G·羅思, J·卡多 申請人:布里斯托爾·米爾斯·斯奎布公司