1.一種用于聯(lián)合檢測禽流感H7N9和H9N2的熒光定量PCR引物組，其包括用于檢測禽流感H7N9亞型的H7基因的引物對及熒光探針、用于檢測禽流感H7N9亞型的N9基因的引物對及熒光探針、用于檢測禽流感H9N2亞型的H9基因的引物對及熒光探針、用于檢測禽流感H9N2亞型的N2基因的引物對及熒光探針，用于檢測H7、N9、H9、N2基因的熒光探針報(bào)告基團(tuán)不相同。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的熒光定量PCR引物組，其特征在于，所述用于檢測禽流感H7N9亞型的H7基因的引物對及熒光探針的核苷酸序列如下所示：
H7-F：5’- TGCACTGCATGTTTCCATTCTT-3’（SEQ ID NO.1）；
H7-R：5’- GGCTACAAAGATGTGATACTTTGGTTTAG-3’（SEQ ID NO.2）；
H7-P：5’- ATGAAAACAAGGCCCATTGCAATGGC-3’（SEQ ID NO.3）。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的熒光定量PCR引物組，其特征在于，所述用于檢測禽流感H7N9亞型的N9基因的引物對及熒光探針的核苷酸序列如下所示：
N9-F：5’- TCGCGCCCTGATAAGCT-3’（SEQ ID NO.4）；
N9-R：5’- GCATTCCACCCTGCTGTTG-3’（SEQ ID NO.5）；
N9-P：5’- CCACTATCATCACCGCCCACAGTGT-3’（SEQ ID NO.6）。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的熒光定量PCR引物組，其特征在于，所述用于檢測禽流感H9N2亞型的H9基因的引物對及熒光探針的核苷酸序列如下所示：
H9-F：5’- CAATGGGGTTTGCTGCCT-3’（SEQ ID NO.7）；
H9-R：5’- TTATATACAAATGTTGCATCTGC-3’（SEQ ID NO.8）；
H9-P：5’- TTCTGGGCCATGTCCAATGGTTCT-3’（SEQ ID NO.9）。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的熒光定量PCR引物組，其特征在于，所述用于檢測禽流感H9N2亞型的N2基因的引物對及熒光探針的核苷酸序列如下所示：
N2-F：5’- TGACACTGCACTTCAAGCAA -3’（SEQ ID NO.10）；
N2-R：5’- TTGGTTCACATGTCACTACTTGAT -3’（SEQ ID NO.11）；
N2-P：5’- ATGAATGCAGCATCCCCTCGAAC -3’（SEQ ID NO.12）。
6.一種用于聯(lián)合檢測禽流感H7N9和H9N2的熒光定量PCR試劑盒，其包含權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的熒光定量PCR引物組。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的熒光定量PCR試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包含病毒RNA提取液、Tth DNA聚合酶、四通道熒光定量PCR Mix、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品，所述四通道熒光定量PCR Mix中含有2×四通道熒光定量PCR buffer、dNTPs。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的熒光定量PCR試劑盒，其特征在于，所述2×四通道熒光定量PCR buffer中含有以下成分：Tricine pH8.7、Mg(OAc)2、KOAc、甘油、DMSO、N,N,N-三甲基甘氨酸。
9.一種聯(lián)合檢測禽流感H7N9和H9N2的四通道熒光定量PCR檢測方法，包括如下步驟：
1）提取待測樣品中的病毒RNA；
2）以得到的總RNA為模板，使用權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的熒光定量PCR引物組進(jìn)行四通道熒光定量PCR檢測；
3）反應(yīng)結(jié)束后，根據(jù)待測樣品的熒光Ct值判斷，待測樣品是否為禽流感病毒H7基因、N9基因、H9基因、N2基因陽性。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的四通道熒光定量PCR檢測方法，其特征在于，四通道熒光定量PCR反應(yīng)條件為：
95℃ 1分鐘；58℃ 20分鐘；95℃ 1分鐘；
95℃ 10秒，58℃ 70秒，68℃ 10s，采集熒光信號，40個(gè)循環(huán)。