1.一種聯(lián)合檢測(cè)H5亞型禽流感病毒與新城疫強(qiáng)毒的一步法實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒，包括引物、探針、及PCR試劑，其特征在于，所述引物及探針包括：
(1)檢測(cè)H5亞型禽流感病毒的引物及探針：
HA-FP：CTTGCGACTGGGCTCAGAAAT
HA-RP:TTTGGGTGGATTCTYTGTCTGC
HA-probe:VIC-CATTCCYTGCCATCC-MGB
(2)檢測(cè)新城疫強(qiáng)毒的引物及探針：
F-FP:GGTCAATCATAGTCAAGTTGCTCC
F-RP:AACCCCAAGAGCTACACTGCC
F-probe:FAM-AAGCGTTTYTGTCTCCTTCCTCC-BHQ1。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒的組成包括：
(1)A液：12.5x酶Mix：包括1U/uL的熱啟動(dòng)TaqDNA聚合酶、7.5U/uL的RNase抑制劑、95U/uL的反轉(zhuǎn)錄酶；
(2)50x ROX I/ROX II reference dye；
(3)B液：2.5xPCR緩沖液：包括2.5mMdNTP、6.25mMMgCl2、TaqBuffer等；
(4)C液：10x引物Mix：包括3.5uM HA-FP、3.5uM HA-RP、3.5uM F-FP、3uM F-RP、3.5uMHA-Probe、3uM F-Probe；
(5)陽(yáng)性對(duì)照：H5-HA與NDV-F模板質(zhì)粒混合液作為反應(yīng)的陽(yáng)性對(duì)照；
(6)陰性對(duì)照：RNase-free H2O作為反應(yīng)的陰性對(duì)照。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于使用時(shí)體系如下所示：
A液：12.5x酶Mix1.6uL；
50x ROX I/ROX II reference dye：0.4uL；
B液：2.5xPCR緩沖液8uL；
C液：10x引物Mix 2uL；
模板樣品：5-8uL或?qū)φ掌?uL；
加RNase-free H2O補(bǔ)至20uL體系。