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特異性微波合成制備醋酸戈那瑞林的方法與流程

文檔序號:12242540閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.特異性微波合成制備醋酸戈那瑞林的方法,其特征在于:包括以下步驟:

步驟一:以Fmoc-D-Ala-Wang Resin氨基樹脂為起始樹脂載體,依次與活化的保護氨基酸溶液于恒溫震蕩器中反應,通過固相合成法的縮合反應接入相對應的保護氨基酸,得到戈那瑞林前體肽Ⅰ-氨基樹脂:

步驟二:對戈那瑞林前體肽Ⅰ-氨基樹脂脫掉D-Nal保護基,進行N端的乙酰化反應,得到戈那瑞林中間體肽Ⅱ-氨基樹脂:

步驟三:對戈那瑞林中間體肽Ⅱ-氨基樹脂進行脫保護并洗滌,進行切割反應,沉降后,得到戈那瑞林粗肽Ⅲ:

步驟四:將戈那瑞林粗品Ⅲ溶解并過濾,采用反相高效液相色譜法制備純化,收集目標樣品并凍干得到戈那瑞林多肽;將戈那瑞林多肽用醋酸溶解,室溫下加入到強陰離子交換樹脂中攪拌吸附,取出吸附液補加醋酸,凍干后得醋酸戈那瑞林。

2.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的特異性微波合成制備醋酸戈那瑞林的方法,其特征在于:所述步驟一中的縮合反應時間為20-30min,縮合反應后加入0.5mlDIEA,再利用微波進行戈那瑞林粗品Ⅰ-氨基樹脂的合成反應,微波合成反應時間為20-30s。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的特異性微波合成制備醋酸戈那瑞林的方法,其特征在于:將保護氨基酸依次和HOBT放入離心管中,并加入20%Pip或DMF試劑,得到混合試液;向混合試液溶液中滴加DIEA,混合均勻后即得到所述的活化的保護氨基酸溶液;其中,HBTU為縮合劑,DIEA為活化試劑,20%Pip或DMF溶液為脫保護試劑,進行與氨基樹脂的連續(xù)縮合反應。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的特異性微波合成制備醋酸戈那瑞林的方法,其特征在于:所述的Fmoc-D-Ala-Wang Resin氨基樹脂的取代度為0.3mmol/g。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的特異性微波合成制備醋酸戈那瑞林的方法,其特征在于:反相高效液相色譜法制備純化的條件為:5um C18制備柱,流動相為A:0.1%乙酸/水,B:0.1%乙酸/乙腈,流速9ml/min,檢測波長214nm,洗脫梯度為B.Cone/%:2-55,時間梯度為0.01-30min。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的特異性微波合成制備醋酸戈那瑞林的方法,其特征在于:步驟二中的乙?;磻脑噭┦且泽w積比為醋酐:DIEA:DMF=1:1:4配置的混合溶液,反應液體積為反應器容積的1/3-1/2。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的特異性微波合成制備醋酸戈那瑞林的方法,其特征在于:切割反應的切割試劑為TFA、茴香硫醚、EDT和水的混合液,反應溫度為20℃,切割反應的用量為1g樹脂8ml切割試劑,樹脂切割兩次,對反應后含有戈那瑞林粗肽Ⅲ的溶液用-20℃低溫預冷的無水乙醚進行離心沉降。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的特異性微波合成制備醋酸戈那瑞林的方法,其特征在于:對步驟一中的Fmoc-D-Ala-Wang Resin氨基樹脂以及步驟三中戈那瑞林中間體肽Ⅱ-氨基樹脂均進行脫保護并洗滌。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的特異性微波合成制備醋酸戈那瑞林的方法,其特征在于:脫保護并洗滌步驟如下:用真空泵將反應器中的脫保護溶液抽干,然后加入1/3-1/2反應器體積的DMF溶液,置于30r/min的脫色搖床上搖1min,抽干反應器中溶液再加入DMF洗滌,重復操作3次。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的特異性微波合成制備醋酸戈那瑞林的方法,其特征在于:步驟一中的保護氨基酸為:Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-D-Cit-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-D-Ala(3-pyridyl)-OH、Fmoc-D-Phe(4-Cl)-OH、Fmoc-D-2-Nal-OH。

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