亚洲成年人黄色一级片,日本香港三级亚洲三级,黄色成人小视频,国产青草视频,国产一区二区久久精品,91在线免费公开视频,成年轻人网站色直接看

猴嗜T淋巴細(xì)胞病毒I型的RT?LAMP檢測引物組、試劑盒及檢測方法與流程

文檔序號:12457603閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種猴嗜T淋巴細(xì)胞病毒I型的RT-LAMP檢測引物組,包括一對外引物、一對內(nèi)引物和一對環(huán)引物,其核苷酸序列分別如下所示:

外引物:

STLV-F3:5’-GTGCCAATCATGGACCTG-3’(SEQ ID NO:1);

STLV-B3:5’-GAGGATGTGGTCTAGGTTAGA-3’(SEQ ID NO:2);

內(nèi)引物:

STLV-FIP:5’-AGTGAGGCGTGAAACTTCCTGCTATACAGGAGCCATCTCCA-3’(SEQ ID NO:3);

STLV-BIP:5’-ATGCGGTTTTCCCTTCTCCCTTCGGTATTAAGGAACCAGATG-3’(SEQ ID NO:4);

環(huán)引物:

STLV-LF:5’-TTGCTGAAATTTCCAGTAAGGG-3’(SEQ ID NO:5)

STLV-LB:5’-CGACGCTCCAGGATATGAC-3’(SEQ ID NO:6)。

2.一種猴嗜T淋巴細(xì)胞病毒I型的RT-LAMP檢測試劑盒,其特征在于:該檢測試劑盒包括權(quán)利要求1所述的檢測引物組。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的猴嗜T淋巴細(xì)胞病毒I型的RT-LAMP檢測試劑盒,其特征在于:該檢測試劑盒還包含DNA聚合酶、逆轉(zhuǎn)錄酶、RT-LAMP反應(yīng)液、陽性對照和陰性對照。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的猴嗜T淋巴細(xì)胞病毒I型的RT-LAMP檢測試劑盒,其特征在于:外引物、環(huán)引物、內(nèi)引物的摩爾比為1:4:8。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的猴嗜T淋巴細(xì)胞病毒I型的RT-LAMP檢測試劑盒,其特征在于:所述DNA聚合酶為Bst DNA聚合酶,所述逆轉(zhuǎn)錄酶為AMV逆轉(zhuǎn)錄酶。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的猴嗜T淋巴細(xì)胞病毒I型的RT-LAMP檢測試劑盒,其特征在于:所述RT-LAMP反應(yīng)液含有10mM dNTP、10×ThermoPol反應(yīng)緩沖液、150mM MgSO4水溶液。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的猴嗜T淋巴細(xì)胞病毒I型的RT-LAMP檢測試劑盒,其特征在于:所述陽性對照為含有目的基因片段的質(zhì)粒DNA,陰性對照為DEPC水。

8.一種猴嗜T淋巴細(xì)胞病毒I型的RT-LAMP檢測方法,包括如下步驟:

1)提取待檢樣品RNA;

2)反轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng):配制25μl反應(yīng)體系,含有STLV-F3 0.2μM,STLV-B3 0.2μM,STLV-FIP 1.6μM,STLV-BIP 1.6μM,STLV-LF 0.8μM,STLV-LB 0.8μM,RT-LAMP反應(yīng)液12.5μl,DNA聚合酶8U,逆轉(zhuǎn)錄酶2.5U,待檢RNA 1~100ng,用DEPC水補(bǔ)齊到25μl;然后于63~65℃反應(yīng)45~60min;

3)結(jié)果分析:通過肉眼觀察反應(yīng)管中溶液是否變渾濁或通過瓊脂糖凝膠電泳分析是否出現(xiàn)梯狀條帶判定結(jié)果;如反應(yīng)管中溶液變渾濁或電泳出現(xiàn)梯狀條帶即為陽性,否則,為陰性;

上述檢測方法所用的檢測試劑盒為權(quán)利要求2~7任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的檢測試劑盒。

當(dāng)前第2頁1 2 3 
網(wǎng)友詢問留言 已有0條留言
  • 還沒有人留言評論。精彩留言會獲得點(diǎn)贊!
1