1.一種基于手性自組裝納米傳感器實(shí)現(xiàn)胞內(nèi)端粒酶活性檢測的方法，其特征在于步驟為：
（1）端粒酶引物序列組裝構(gòu)建的手性大小金二聚體傳感器：檸檬酸還原法合成的25nm金納米粒子GNP離心重懸后修飾巰基TE primer序列；15nm金納米粒子GNP修飾與linker DNA部分互補(bǔ)的巰基TE CS1序列；將得到的GNP-primer及GNP- CS1復(fù)合體混勻，通過linker DNA1組裝得到適配體序列組裝的手性大小金二聚體primer-dimer；
（2）端粒酶引物錯(cuò)配序列組裝構(gòu)建的手性大小金二聚體傳感器：檸檬酸還原法合成的25nm金納米粒子GNP離心重懸后修飾巰基TE mismatch序列；15nm金納米粒子GNP修飾與linker DNA部分互補(bǔ)的巰基TE CS2序列；將得到的GNP-mismatch及GNP-CS2復(fù)合體混勻，通過linker DNA2組裝得到錯(cuò)配序列組裝的手性大小金二聚體mismatch-dimer；
（3）兩種大小金二聚體修飾穿膜肽：將步驟（1）及（2）所得大小金二聚體分別與SH-PEG-5000和穿膜肽TAT混勻，偶聯(lián)12h分別得到表面修飾有穿膜肽的手性大小金二聚體TAT-primer-dimer及 TAT-mismatch-dimer；
（4）兩種大小金二聚體傳感器在細(xì)胞內(nèi)手性信號隨時(shí)間的變化：分別將步驟（3）得到的兩種穿膜肽修飾的手性大小金二聚體與一定數(shù)量的細(xì)胞共同培養(yǎng)不同時(shí)間點(diǎn)后，用胰蛋白酶消化細(xì)胞，分別得到細(xì)胞內(nèi)含有不同量的手性primer-dimer及 mismatch-dimer的細(xì)胞懸液；將細(xì)胞懸液進(jìn)行圓二色性表征，記錄不同時(shí)間點(diǎn)的手性信號，繪制散點(diǎn)圖，得到胞內(nèi)最佳檢測時(shí)間；
（5）基于大小金二聚體的手性信號實(shí)現(xiàn)胞內(nèi)ATP實(shí)時(shí)檢測：將步驟（3）得到穿膜肽修飾的手性TAT-primer-dimer與添加不同抑制劑和促進(jìn)劑的細(xì)胞及未處理的細(xì)胞共同孵育，當(dāng)存在待測物端粒酶時(shí)，傳感器組裝體逐漸解散，導(dǎo)致手性信號的變化，進(jìn)而進(jìn)行檢測，建立胞內(nèi)端粒酶活性與手性信號的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述基于手性自組裝納米傳感器實(shí)現(xiàn)胞內(nèi)端粒酶活性檢測的方法，其特征在于具體步驟如下：
（1）端粒酶引物序列組裝構(gòu)建的手性大小金二聚體傳感器：
檸檬酸還原法合成的25nm金納米粒子GNP離心重懸于5mM pH 7.4的PB緩沖液中，取100μL 2nM 25nm金納米粒子將其與巰基TE primer序列以摩爾濃度1︰5的比例混勻；15nm金納米粒子GNP離心重懸于5mM pH 7.4的PB緩沖液中，取100μL 2nM 15nm金納米粒子與適配體部分互補(bǔ)的巰基TE CS1序列以摩爾濃度1︰5的比例混勻，分別加入終濃度為50mM的NaCl溶液，充分混合后，室溫孵育過夜后，離心3次除去溶液中未反應(yīng)的DNA，分別重懸于100μL的5mM PB緩沖液中；
取100μL GNP-primer及50μL GNP-CS1復(fù)合體混勻，加入5μL 10μM linker DNA1組裝得到端粒酶引物序列組裝的手性大小金二聚體primer-dimer，再加入終濃度為50mM NaCl溶液進(jìn)行老化，室溫下孵育12h，再將組裝體通過梯度離心純化；
（2）端粒酶引物錯(cuò)配序列組裝構(gòu)建的手性大小金二聚體傳感器：
檸檬酸還原法合成的25nm金納米粒子GNP離心重懸于5mM pH 7.4的PB緩沖液中，取100μL 2nM 25nm金納米粒子將其與巰基TE mismatch序列以摩爾濃度1︰5的比例混勻；檸檬酸還原法合成的15nm金納米粒子GNP離心重懸于5mM pH 7.4的PB緩沖液中，取100μL 2nM 15nm金納米粒子與適配體部分互補(bǔ)的巰基TE CS2序列以摩爾濃度1︰5的比例混勻，分別加入終濃度為50 mM的NaCl溶液，充分混合后，室溫孵育過夜后，離心3次除去溶液中未反應(yīng)的DNA，分別重懸于100μL的5mM PB緩沖液中；
取100μL GNP-mismatch及50μL GNP-CS2復(fù)合體混勻，加入5μL 10μM linker DNA2組裝得到端粒酶引物錯(cuò)配序列組裝的手性大小金二聚體mismatch-dimer，再加入終濃度為50mM的NaCl溶液進(jìn)行老化，室溫下孵育12 h，再將組裝體通過梯度離心純化；
（3）兩種大小金二聚體修飾穿膜肽：將步驟（1）及（2）得到大小金二聚體分別與SH-PEG5000和穿膜肽TAT以1︰1000︰100的摩爾濃度混勻，室溫孵育12h后，7500rpm離心20min，去除上清液，沉淀重懸于細(xì)胞培養(yǎng)液中，得到穩(wěn)定的表面修飾有穿膜肽的手性TAT-primer-dimer及 TAT-mismatch-dimer；
（4）兩種大小金二聚體傳感器在細(xì)胞內(nèi)手性信號隨時(shí)間的變化：
將細(xì)胞接種于24孔培養(yǎng)板中，使每孔中的細(xì)胞數(shù)量為104個(gè)，培養(yǎng)24h后去掉培養(yǎng)液，取8個(gè)孔加入終濃度為5nM的穿膜肽修飾的手性TAT-primer-dimer分別與104個(gè)細(xì)胞共同培養(yǎng)0h、2h、4h、6h、8h、12h、16h、24h；
取8個(gè)孔加入終濃度為5nM的穿膜肽修飾的手性TAT-mismatch-dimer分別與104個(gè)細(xì)胞共同培養(yǎng)0h、2h、4h、6h、8h、12h、16h、24h；
之后分別用胰蛋白酶消化細(xì)胞，分別得到細(xì)胞內(nèi)含有不同量的手性primer-dimer及 mismatch-dimer的細(xì)胞懸液；將細(xì)胞懸液進(jìn)行圓二色性表征，記錄不同時(shí)間點(diǎn)的手性信號，繪制散點(diǎn)圖，得到胞內(nèi)最佳檢測時(shí)間；
（5）基于大小金二聚體的手性信號實(shí)現(xiàn)胞內(nèi)端粒酶實(shí)時(shí)檢測：將步驟（3）得到穿膜肽修飾的手性TAT-primer-dimer與不同量EGCG抑制端粒酶活性后的細(xì)胞及未經(jīng)抑制的細(xì)胞分別共孵育6h后，當(dāng)存在待測物端粒酶時(shí)，組裝體逐漸解散，導(dǎo)致手性信號的變化，進(jìn)而進(jìn)行檢測；然后用胰蛋白酶消化細(xì)胞，分別得到細(xì)胞內(nèi)含有不同解離程度的手性primer-dimer的細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液進(jìn)行圓二色性表征，并建立胞內(nèi)端粒酶與手性信號的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述基于手性自組裝納米傳感器實(shí)現(xiàn)胞內(nèi)端粒酶活性檢測的方法，其特征在于所述TE primer序列如SEQ ID NO. 1所示，TE CS1序列如SEQ ID NO. 2所示，linker DNA1序列如SEQ ID NO. 3所示，TE mismatch序列如SEQ ID NO. 4所示，TE CS2序列如SEQ ID NO. 5所示，linker DNA2序列如SEQ ID NO. 6所示，TAT 多肽序列如SEQ ID NO. 7所示。