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一種降解煙堿的解淀粉芽孢桿菌DGY18及其應(yīng)用方法與流程

文檔序號:11837437閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種降解煙堿的解淀粉芽孢桿菌DGY18(Bacillus amyloliquefaciens DGY18),保藏編號為CGMCC NO.11900。

2.權(quán)利要求1所述的解淀粉芽孢桿菌DGY18的應(yīng)用方法,其特征在于:將解淀粉芽孢桿菌DGY18配制成菌懸液,接種至煙絲浸提液,或者直接在健康煙株葉面噴灑。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用方法,其特征在于:應(yīng)用于煙絲浸提液接種的解淀粉芽孢桿菌DGY18菌懸液的制備方法為:純菌株接入5mL液體煙堿培養(yǎng)基中,30℃,200r/min搖床震蕩培養(yǎng)2d,然后將培養(yǎng)液10000r/min離心10min,收集菌體,用0.9%生理鹽水將離心后的菌體配制成菌體濃度為107-108CFU/mL的菌懸液。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用方法,其特征在于:所述的煙堿培養(yǎng)基配方:K2HPO413.3g,KH2PO4 4g,MgSO4·7H2O 0.2g,微量元素溶液0.5mL,調(diào)pH至7.0,定容至1000mL,滅菌后以濾菌法加入1g純煙堿,混勻;所述的微量元素溶液是用0.1mol/L鹽酸將MnSO4·7H2O 0.4g,CaCl2·2H2O 0.2g,F(xiàn)eSO4·7H2O 0.2g溶解并定容至100mL。

5.根據(jù)權(quán)利要求2或3或4所述的應(yīng)用方法,其特征在于,按煙絲浸提液體積5-10%接種解淀粉芽孢桿菌DGY18后,在30℃條件下120r/min搖床培養(yǎng)4-8天。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用方法,其特征在于:所述的煙絲浸提液配方:稱取10g煙絲粉,13.3g K2HPO4·3H2O,4g KH2PO4·3H2O,0.2g MgSO4·7H2O,1g麥芽糖,1g蛋白胨,量取0.5mL微量元素溶液入到500mL的蒸餾水中,用蒸餾水定容至1000mL,分裝,殺菌;所述的微量元素溶液是用0.1mol/L鹽酸將MnSO4·7H2O 0.4g,CaCl2·2H2O 0.2g,F(xiàn)eSO4·7H2O 0.2g溶解并定容至100mL。

7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用方法,其特征在于:應(yīng)用于煙株葉面噴灑的解淀粉芽孢桿菌DGY18菌懸液的制備方法為:純菌株接入100mL液體營養(yǎng)培養(yǎng)基30℃,120r/min的搖床振蕩培養(yǎng)過夜,按體積百分比取5%-10%培養(yǎng)液加入到2.5L的液體營養(yǎng)培養(yǎng)基培養(yǎng)48小時。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用方法,其特征在于:所述的液體營養(yǎng)基配方:牛肉膏5g,蛋白胨10g,氯化鈉5g,水1000mL,調(diào)節(jié)pH為7.0-7.2。

9.根據(jù)權(quán)利要求2或7或8所述的應(yīng)用方法,其特征在于:每株健康煙株噴灑25mL菌懸液。

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