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一種二肽酶突變體及其編碼基因和應(yīng)用的制作方法

文檔序號:12577456閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種二肽酶突變體,其特征在于,其為二肽酶突變體D45W、H226G、Y292F/L366F、D45W/H226G、D45W/Y292F/L366F、D45W/H226G/Y292F/L366F、H343I、L225Y/H226L或L225Y/H226L/H343I;

所述的二肽酶突變體D45W,與SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列相比,其是將SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的第45位天冬氨酸替換為色氨酸,其它與SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列相同;

所述的二肽酶突變體H226G,與SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列相比,其是將SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的第226位組氨酸替換為甘氨酸,其它與SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列相同;

所述的二肽酶突變體Y292F/L366F,與SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列相比,其是將SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的第292位酪氨酸和第366位亮氨酸同時替換為苯丙氨酸,其它與SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列相同;

所述的二肽酶突變體D45W/H226G,與SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列相比,其是將SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的第45位天冬氨酸替換為色氨酸,同時第226位組氨酸替換為甘氨酸,其它與SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列相同;

所述的二肽酶突變體D45W/Y292F/L366F,與SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列相比,其是將SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的第45位天冬氨酸替換為色氨酸,同時第292位酪氨酸替換為苯丙氨酸,同時第366位亮氨酸替換為苯丙氨酸,其它與SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列相同;

所述的二肽酶突變體D45W/H226G/Y292F/L366F,與SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列相比,其是將SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的第45位天冬氨酸替換為色氨酸,同時第226位組氨酸替換為甘氨酸,同時第292位酪氨酸替換為苯丙氨酸,同時第366位亮氨酸替換為苯丙氨酸,其它與SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列相同;

所述的二肽酶突變體H343I,與SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列相比,其是將SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的第343位組氨酸替換為異亮氨酸,其它與SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列相同;

所述的二肽酶突變體L225Y/H226L,與SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列相比,其是將SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的第225位亮氨酸替換為酪氨酸,同時第226位組氨酸替換為亮氨酸,其它與SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列相同;

所述的二肽酶突變體L225Y/H226L/H343I,與SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列相比,其是將SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的第225位亮氨酸替換為酪氨酸,同時第226位組氨酸替換為亮氨酸,同時第343為組氨酸替換為異亮氨酸,其它與SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列相同。

2.一種權(quán)利要求1所述的二肽酶突變體的編碼基因。

3.一種含有權(quán)利要求2所述的二肽酶突變體的編碼基因的重組表達載體。

4.一種含有權(quán)利要求3所述的重組表達載體的重組菌。

5.權(quán)利要求1所述的二肽酶突變體在水解有機磷化合物中的應(yīng)用。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用,其特征在于,權(quán)利要求1所述的二肽酶突變體D45W、H226G、Y292F/L366F、D45W/H226G、D45W/Y292F/L366F、D45W/H226G/Y292F/L366F在水解對氧磷中的應(yīng)用。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用,其特征在于,權(quán)利要求1所述的二肽酶突變體H343I、L225Y/H226L、L225Y/H226L/H343I在水解甲基對硫磷中的應(yīng)用。

8.權(quán)利要求1所述的二肽酶突變體在有機磷化合物污染修復(fù)中的應(yīng)用。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用,其特征在于,權(quán)利要求1所述的二肽酶突變體D45W、H226G、Y292F/L366F、D45W/H226G、D45W/Y292F/L366F、D45W/H226G/Y292F/L366F在對氧磷污染修復(fù)中的應(yīng)用。

10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用,其特征在于,權(quán)利要求1所述的二肽酶突變體H343I、L225Y/H226L、L225Y/H226L/H343I在甲基對硫磷污染修復(fù)中的應(yīng)用。

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