本發(fā)明涉及他達(dá)拉非的雜質(zhì)對(duì)照品及其制備方法。

背景技術(shù)：

他達(dá)拉非(tadalafil，1)，化學(xué)名為(6R,12aR)-6-(1,3-苯并二氧戊環(huán)-5-基)-2-甲基-2,3,6,7,12,12a-六氫吡嗪并[1′,2′:1,6]吡啶并[3,4-b]吲哚-1,4-二酮，是由美國(guó)禮來公司(Eli Lilly and Company)研發(fā)的一種磷酸二酯酶V(PED-5)抑制劑，作為治療性功能障礙的藥物于2003年在美國(guó)上市，2009年報(bào)道該藥物也可用于治療肺動(dòng)脈高壓。

目前國(guó)內(nèi)外研發(fā)、生產(chǎn)該藥物的廠家較多，生產(chǎn)工藝大同小異，對(duì)其質(zhì)量研究、控制的程度各不相同，主要采用的合成路線為世界專利WO2004011463、Tetrahedron:Asymmetry,2008,19(4):435-442上的路線，如下所示，該原料藥的質(zhì)量研究主要參考標(biāo)準(zhǔn)為歐洲藥典標(biāo)準(zhǔn)(EP)。考慮到在質(zhì)量研究中單一、死板的參照一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)是不全面、不科學(xué)的，我們?cè)诮梃b歐洲藥典標(biāo)準(zhǔn)的同時(shí)，通過對(duì)市售原料及各步反應(yīng)的分析，推導(dǎo)出新的可能的工藝雜質(zhì)(包含中間體工藝雜質(zhì)、成品工藝雜質(zhì))：

經(jīng)檢測(cè)市售的D-色氨酸甲酯鹽酸鹽中主要雜質(zhì)為少量殘留的D-色氨酸，在生產(chǎn)過程中原料中的D-色氨酸會(huì)與胡椒醛反應(yīng)生成相應(yīng)的工藝雜質(zhì)M1Z1和M1Z2，M1Z1、M1Z2會(huì)進(jìn)一步?；馍呻s質(zhì)M2Z1、M2Z2，M2Z1、M2Z2再與甲胺水溶反應(yīng)在原料藥中生成Z1、Z2。這些化合物會(huì)作為雜質(zhì)引入到他達(dá)拉非中間體及產(chǎn)品中，影響他達(dá)拉非藥物的質(zhì)量。

然而，由于目前還沒有高純度的上述雜質(zhì)化合物M2Z1、M2Z2、Z1、Z2能夠作為對(duì)照品，難以實(shí)現(xiàn)對(duì)他達(dá)拉非產(chǎn)品中雜質(zhì)化合物M2Z1、M2Z2、Z1、Z2的定量和/或定性檢測(cè)，無法監(jiān)控前述雜質(zhì)含量，存在較大的安全隱患。

為了能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)他達(dá)拉非產(chǎn)品中雜質(zhì)化合物M2Z1、M2Z2、Z1、Z2的定量和/或定性檢測(cè)，更好地監(jiān)控他達(dá)拉非原料藥及中間體的雜質(zhì)含量和產(chǎn)品質(zhì)量，保障用藥安全，亟需發(fā)明一種高純度的雜質(zhì)化合物M2Z1、M2Z2、Z1、Z2及其制備方法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供式Ⅰ、式Ⅱ所示的化合物，其純度高，可以作為對(duì)照品檢測(cè)或監(jiān)控他達(dá)拉非原料藥及中間體雜質(zhì)含量和產(chǎn)品質(zhì)量，保障他達(dá)拉非的用藥安全。

本發(fā)明提供的式Ⅰ、式Ⅱ所示的化合物：

其中，

R₁選自鹵素或NR₂R₃；R₂、R₃分別獨(dú)立地選自H或C₁～C₄烷基。

進(jìn)一步的，所述的鹵素為氟、氯或溴；所述的R₂、R₃分別獨(dú)立地選自H或甲基。

進(jìn)一步的，所述化合物的純度≥95％；優(yōu)選的，所述化合物的純度≥99％。

本發(fā)明還提供了一種制備上述化合物的方法，它包括以下步驟：

①、化合物3與氨基保護(hù)試劑反應(yīng)，得到化合物4；

②、化合物4與化合物A反應(yīng)，得到化合物5；

③、化合物5與酸反應(yīng)，得到化合物6a和6b；

④、化合物6a或6b與Cl-CO-CH₂-R₁反應(yīng)，分別得到化合物7a、7b；

⑤、化合物7a或7b與氫氣反應(yīng)，得到化合物M2Z1、M2Z2；

其中，M₁為氨基保護(hù)基；R₄、R₅、R₆、R₇、R₈分別獨(dú)立地選自H、烷基、烷氧基、硝基或鹵素；R₁為鹵素。

進(jìn)一步的，所述的氨基保護(hù)基為叔丁氧羰基；所述的鹵素為氟、氯或溴。

進(jìn)一步的，

步驟①中，所述化合物3與氨基保護(hù)試劑是在加入堿、有機(jī)溶劑的條件下進(jìn)行反應(yīng)；

其中，

所述化合物3與氨基保護(hù)試劑的摩爾比為1：1～3；所述化合物3與堿的摩爾比為1：1～3；所述化合物3與有機(jī)溶劑的重量體積比為1：10～20g/mL；

所述反應(yīng)的溫度為20～30℃；所述反應(yīng)的時(shí)間為1～3小時(shí)；

所述的氨基保護(hù)試劑為二碳酸二叔丁酯；所述的堿為三乙胺、二乙胺、氫氧化鈉或氫氧化鉀；所述的有機(jī)溶劑為乙醇、四氫呋喃或二氯甲烷；

步驟②中，所述化合物4與化合物A是在加入催化劑、N,N-二異丙基碳二酰亞胺、含氮類溶劑的條件下進(jìn)行反應(yīng)；

其中，

所述化合物4與化合物A的摩爾比為1：1～3；所述化合物4與催化劑的摩爾比為1：1～3；所述化合物4與N,N-二異丙基碳二酰亞胺的摩爾比為1：1～3；所述化合物4與含氮類溶劑的重量體積比為1：10～20g/mL；

所述反應(yīng)的溫度為20～30℃；所述反應(yīng)的時(shí)間為0.5～1.5小時(shí)；

所述的催化劑為N,N-二甲基-4-氨基吡啶；所述的含氮類溶劑為N,N-二甲基甲酰胺。

進(jìn)一步的，

步驟③中，所述化合物5與酸是在鹵烴類溶劑中進(jìn)行反應(yīng)；

其中，

所述化合物5與酸的摩爾比為1：40～50；所述化合物5與鹵烴類溶劑的重量體積比為1：5～10g/mL；

所述反應(yīng)的溫度為-5～5℃；所述反應(yīng)的時(shí)間為1～3小時(shí)；

所述的酸為三氟乙酸、鹽酸或硫酸；所述的鹵烴類溶劑為二氯甲烷或三氯甲烷。

進(jìn)一步的，

步驟④中，所述化合物6a或6b與Cl-CO-CH₂-R₁是在加入有機(jī)胺、鹵烴類溶劑的條件下進(jìn)行反應(yīng)；

其中，

所述化合物6a或6b與Cl-CO-CH₂-R₁的摩爾比為1：1～2；所述化合物6a或6b與有機(jī)胺的摩爾比為1：1～5；所述化合物6a或6b與鹵烴類溶劑的重量體積比為1：20～50g/mL；

所述反應(yīng)的溫度為-5～5℃；所述反應(yīng)的時(shí)間為0.5～1.5小時(shí)；

所述的有機(jī)胺為三乙胺；所述的鹵烴類溶劑為三氯甲烷；

步驟⑤中，所述化合物7a或7b與氫氣是在加入Pd/C催化劑、醇類溶劑的條件下進(jìn)行反應(yīng)；

其中，

所述氫氣的壓力為0.5～1.5atm；所述化合物7a或7b與Pd/C催化劑的重量比為1：0.1～0.3；所述化合物7a或7b與醇類溶劑的重量體積比為1：20～50g/mL；

所述反應(yīng)的溫度為30～50℃；所述反應(yīng)的時(shí)間為5～10小時(shí)；

所述的醇類溶劑為甲醇或乙醇。

本發(fā)明還提供了另外一種制備上述化合物的方法，它包括以下步驟：

a、按照上述的方法，得到化合物M2Z1、M2Z2；

b、化合物M2Z1或M2Z2與R₂-NH-R₃反應(yīng)，得到化合物Z1、Z2；

其中，R₂、R₃分別獨(dú)立地選自H或C₁～C₄烷基。

進(jìn)一步的，步驟b中，所述化合物M2Z1或M2Z2與R₂-NH-R₃是在加入含氮類溶劑、水的條件下進(jìn)行反應(yīng)；

其中，

所述M2Z1或M2Z2與R₂-NH-R₃的摩爾比為1：2.5～7.5；所述化合物M2Z1或M2Z2與含氮類溶劑的重量體積比為1：50～120g/mL；所述化合物M2Z1或M2Z2與水的重量體積比為1：150～300g/mL；

所述的含氮類溶劑為N,N-二甲基甲酰胺。

本發(fā)明的化合物M2Z1、M2Z2、Z1、Z2，純度高，可以作為對(duì)照品檢測(cè)或監(jiān)控他達(dá)拉非藥物的雜質(zhì)含量和產(chǎn)品質(zhì)量，保障他達(dá)拉非的用藥安全；而且，本發(fā)明的制備方法簡(jiǎn)便，易于操作和控制，能耗低、用時(shí)少，生產(chǎn)效率高，成本低，經(jīng)濟(jì)價(jià)值明顯，具有十分良好的產(chǎn)業(yè)化前景。

本發(fā)明中提供的化合物和衍生物可以根據(jù)IUPAC(國(guó)際純粹與應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(huì))或CAS(化學(xué)文摘服務(wù)社，Columbus，OH)命名系統(tǒng)命名。

關(guān)于本發(fā)明的使用術(shù)語的定義：除非另有說明，本文中基團(tuán)或者術(shù)語提供的初始定義適用于整篇說明書的該基團(tuán)或者術(shù)語；對(duì)于本文沒有具體定義的術(shù)語，應(yīng)該根據(jù)公開內(nèi)容和上下文，給出本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠給予它們的含義。

“取代”是指分子中的氫原子被其它不同的原子或分子所替換。

碳?xì)浠鶊F(tuán)中碳原子含量的最小值和最大值通過前綴表示，例如，前綴C_a～C_b烷基表明任何含“a”至“b”個(gè)碳原子的烷基。因此，例如，C₁～C₄烷基是指包含1～4個(gè)碳原子的烷基。

顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識(shí)和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。

以下通過實(shí)施例形式的具體實(shí)施方式，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明具體實(shí)施方式中使用的原料、設(shè)備均為已知產(chǎn)品，通過購(gòu)買市售產(chǎn)品獲得。

實(shí)施例1、制備化合物M2Z1、M2Z2

1、(1R,3R)-1-(1,3-苯并二氧戊環(huán)-5-基)-1,2,3,4-四氫-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸(化合物3)的制備

稱取10g(1R,3R)-1-(1,3-苯并二氧戊環(huán)-5-基)-1,2,3,4-四氫-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸甲酯鹽酸鹽(化合物2)置于500mL單頸瓶中，并加入甲醇250mL溶清，室溫下緩慢滴加3M的NaOH溶液43mL，溶液變?yōu)榈S色，TLC檢測(cè)(展開劑：正己烷:乙酸乙酯:氨水＝3：1：1％)，反應(yīng)完全后滴加3M的HCl溶液，調(diào)節(jié)pH＝1，減壓濃縮除去甲醇，抽濾，補(bǔ)加純化水150mL，滴加碳酸氫鈉水溶液調(diào)節(jié)pH＝6-7，抽濾，并用純化水洗滌濾餅至流出液pH＝7，抽干，收集濾餅，減壓干燥，得6.80g目標(biāo)產(chǎn)物3，收率：78.0％，HPLC純度100％；

¹H-NMR(d₆-DMSO，400Hz):10.818(s,1H),10.116(brs,2H),7.558-7.539(d,1H),7.294-7.274(d,1H),7.133-6.976(m,5H),6.103-6.100(d,2H),5.848(s,1H),4.608-4.566(dd,1H),3.398-3.347(dd,1H),3.269-3.195(ddd,1H)ppm；MS(m/z):337.1[M+H]⁺。

2、(1R,3R)-1-(1,3-苯并二氧戊環(huán)-5-基)-2-(叔丁氧羰?；?-1,2,3,4-四氫-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸(化合物4)的制備

在500mL三頸反應(yīng)瓶中，依次將6.5g(1R,3R)-1-(1,3-苯并二氧戊環(huán)-5-基)-1,2,3,4-四氫-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸(化合物3)、3.91g三乙胺溶解于120mL乙醇中，室溫下加入8.43g(Boc)₂O，反應(yīng)2h后用冰醋酸調(diào)節(jié)pH＝6，減壓濃縮后，加入0.2M的檸檬酸水溶液100mL，用乙酸乙酯萃取2次，每次200mL，合并有機(jī)層，用飽和氯化鈉溶液150mL洗滌1次，無水硫酸鈉干燥3h，過濾，減壓濃縮至干，得目標(biāo)產(chǎn)物4的粗品8.35g，收率：99.0％。

3、(1R,3R)-1-(1,3-苯并二氧戊環(huán)-5-基)-2-(叔丁氧羰酰基)-1,2,3,4-四氫-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸芐酯(化合物5)的制備

在250mL反應(yīng)瓶中，依次將8.35g(1R,3R)-1-(1,3-苯并二氧戊環(huán)-5-基)-2-(叔丁氧羰酰基)-1,2,3,4-四氫-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸(化合物4)、3.1g芐醇、3.5g N,N-二甲基-4-氨基吡啶溶解于100mL N,N-二甲基甲酰胺中，室溫下加入N,N-二異丙基碳二酰亞胺4.8g，反應(yīng)1h后攪拌下將反應(yīng)液倒入500mL飽和氯化鈉溶液中，用乙酸乙酯萃取2次，每次200mL，合并有機(jī)層用200mL飽和氯化鈉溶液洗滌1次，再用無水硫酸鈉干燥，過濾，收集濾液，減壓濃縮得目標(biāo)產(chǎn)物5粗品9.89g，收率:100％。

4、(1R,3R)-1-(1,3-苯并二氧戊環(huán)-5-基)-1,2,3,4-四氫-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸芐酯(化合物6a)、(1S,3R)-1-(1,3-苯并二氧戊環(huán)-5-基)-1,2,3,4-四氫-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸芐酯(化合物6b)的制備

在250mL反應(yīng)瓶中，將9.89g(1R,3R)-1-(1,3-苯并二氧戊環(huán)-5-基)-2-(叔丁氧羰酰基)-1,2,3,4-四氫-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸芐酯(化合物5)粗品溶解于二氯甲烷50mL中，冰水浴控溫0-5℃，滴加三氟乙酸60mL，滴畢繼續(xù)保溫反應(yīng)2h，將反應(yīng)液分5批次緩慢加入到500mL過飽和碳酸氫鈉溶液中，攪拌10min，過濾，將濾液分液，保留有機(jī)層，并用飽和氯化鈉溶液100mL洗滌1次，用無水硫酸鈉干燥有機(jī)層，過濾，減壓濃縮至干得粗品，將粗品用300-400目硅膠層析柱純化(洗脫劑：正己烷：乙酸乙酯＝4：1)，制得產(chǎn)物6a(4.49g)、產(chǎn)物6b(2.93g)，總收率：92.6％。

產(chǎn)物6a：收率56.0％；HPLC純度：100％；¹H-NMR(CDCl₃,400Hz):7.531-7.513(d,1H),7.462(s,1H),7.402-7.339(m,5H),7.226-7.207(d,1H),7.159-7.7088(m,2H),6.891-6.869(dd,1H),6.826-6.778(m,2H),5.942(s,2H),5.294-5.207(dd,2H)，5.182(s,1H),4.006-3.968(dd,1H),3.255-3.208(m,1H),3.052-2.981(m,1H)ppm；1D-NOE:1-H(δ5.182,1.85％)；MS(m/z):427.2[M+H]⁺。

產(chǎn)物6b:收率36.6％；HPLC純度：100％；¹H-NMR(CDCl₃,400Hz):7.564(s,1H),7.546-7.528(d,1H),7.303-7.246(m,5H),7.228-7.225(d,1H),7.178-7.097(m,2H),6.737(s,3H),5.916(s,2H),5.341(s,1H),5.187-5.106(dd,2H),4.052-4.024(dd,1H),3.305-3.250(m,1H),3.210-3.153(m,1H)ppm；1D-NOE:1-H(δ5.341,0％)；MS(m/z):427.3[M+H]⁺,

5、(1R,3R)-1-(1,3-苯并二氧戊環(huán)-5-基)-2-(2-氯乙?；?-1,2,3,4-四氫-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸芐酯(化合物7a)、(1S,3R)-1-(1,3-苯并二氧戊環(huán)-5-基)-2-(2-氯乙?；?-1,2,3,4-四氫-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸芐酯(化合物7b)的制備

在250mL反應(yīng)瓶中，將3.10g(1R,3R)-1-(1,3-苯并二氧戊環(huán)-5-基)-1,2,3,4-四氫-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸芐酯(化合物6a)溶解于80mL三氯甲烷中，加入三乙胺2.21g，在0-5℃下滴加氯乙酰氯的三氯甲烷溶液5mL(稱取1.23g氯乙酰氯溶解于5mL三氯甲烷中)，滴畢后反應(yīng)1h，向反應(yīng)體系中緩慢滴加100mL飽和碳酸氫鈉溶液，攪拌10min，分液，收集有機(jī)層，水層用三氯甲烷萃取1次，合并有機(jī)層，用0.2M鹽酸80mL洗滌1次，再用飽和氯化鈉洗滌1次，用無水硫酸鈉干燥，過濾，收集濾液，減壓濃縮至干得淡黃色目標(biāo)產(chǎn)物7a的粗品3.60g，收率:98.3％。

在250mL反應(yīng)瓶中，將1.80g(1S,3R)-1-(1,3-苯并二氧戊環(huán)-5-基)-1,2,3,4-四氫-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸芐酯(化合物6b)溶解于80mL三氯甲烷中，加入三乙胺1.28g，在0-5℃下滴加氯乙酰氯的三氯甲烷溶液(稱取氯乙酰氯0.71g溶解于5mL三氯甲烷中)，滴畢反應(yīng)1h后，向反應(yīng)體系中滴加100mL飽和碳酸氫鈉溶液，攪拌10min，分液，水層用三氯甲烷萃取1次，合并有機(jī)層，用0.2M鹽酸80mL洗滌1次，再用飽和氯化鈉洗滌1次，用無水硫酸鈉干燥，過濾，收集濾液，減壓濃縮至干得淡黃色目標(biāo)產(chǎn)物7b粗品2.12g,收率：100％。

6、(1R,3R)-1-(1,3-苯并二氧戊環(huán)-5-基)-2-(2-氯乙?；?-1,2,3,4-四氫-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸(化合物M2Z1)、(1S,3R)-1-(1,3-苯并二氧戊環(huán)-5-基)-2-(2-氯乙酰基)-1,2,3,4-四氫-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸(化合物M2Z2)的制備

在250mL反應(yīng)瓶中，將3.0g(1R,3R)-1-(1,3-苯并二氧戊環(huán)-5-基)-2-(2-氯乙酰基)-1,2,3,4-四氫-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸芐酯(化合物7a)溶解于無水乙醇120mL中，加入0.65g 10％Pd/C，在1atm氫氣下于40℃攪拌反應(yīng)6h，過濾，減壓濃縮至干，將濃縮物用硅膠柱層析純化后(洗脫劑:正己烷：乙酸乙酯：冰醋酸＝2：1：0.1)，溶解于200mL二氯甲烷中，再用純化水洗滌3次，每次150mL，再用飽和氯化鈉150mL洗滌一次，將有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮得固體，將固體用乙醚溶解后減壓濃縮得固體，制得他達(dá)拉非雜質(zhì)M2Z1共1.32g，收率：53.7％，HPLC純度：100％；

¹H-NMR(CDCl₃，400Hz):7.749(brs,1H),7.580-7.561(d,1H),7.288-7.269(d,1H),7.224-7.143(m,2H),6.766(m,3H),6.563(s,1H),5.528(s,1H),5.434(s,1H),4.960(s,1H),4.312-4.281(d,1H),4.167-4.138(d,1H),3.645-3.605(d,1H),3.204-3.150(dd,1H)ppm；MS(m/z):413.1[M+H]⁺,291.0[M-C₇H₅O₂]⁺。

在250mL反應(yīng)瓶中，將2.0g(1S,3R)-1-(1,3-苯并二氧戊環(huán)-5-基)-2-(2-氯乙?；?-1,2,3,4-四氫-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸芐酯(化合物7b)溶解于無水乙醇中，加入0.53g 10％Pd/C，在1atm氫氣下于40℃攪拌反應(yīng)6h，過濾，減壓濃縮，將濃縮物用硅膠柱層析純化(正己烷：乙酸乙酯：冰乙酸＝2：1：0.1)得粗品，將粗品溶解于200mL二氯甲烷中，再用純化水洗滌3次，每次150mL，再用飽和氯化鈉150mL洗滌1次，將有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮得固體，將固體懸浮于12mL乙腈中，于25℃下攪拌洗滌0.5h,抽濾，并用5mL乙腈洗滌濾餅，收集濾餅得白色固體,減壓干燥后即得0.66g他達(dá)拉非雜質(zhì)M2Z2，收率:40.2％，HPLC純度：96.7％；

¹H-NMR(CDCl₃，400Hz):7.808(brs,1H),7.514-7.496(d,1H),7.236-7.218(d,1H),7.164-7.086(m,2H),6.863-6.844(d,1H),6.752(m,2H),6.005(s,1H),5.916(s,2H),5.348-5.183(m,1H),4.157-4.123(d,1H),3.892-3.224(m,3H)ppm；MS(m/z):413.1[M+H]⁺,291.1[M-C₇H₅O₂]⁺。

實(shí)施例2、制備化合物Z1、Z2

1、(1R,3R)-1-(1,3-苯并二氧戊環(huán)-5-基)-2-(2-甲氨基乙酰基)-1,2,3,4-四氫-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸(化合物Z1)的制備

在250mL反應(yīng)瓶中，加入20mL N,N-二甲基甲酰胺，40％甲胺水溶液228mg，20-25℃緩慢滴加雜質(zhì)化合物M2Z1的N,N-二甲基甲酰胺溶液(將242mg M2Z1溶解于4mL N,N-二甲基甲酰胺中配制而成)，滴畢，滴加純化水60mL，滴畢，用乙酸乙酯萃取3次，每次60mL，再用飽和氯化鈉溶液50mL洗滌一次，再用無水硫酸鈉干燥過夜，次日抽濾旋干，向剩余液體中繼續(xù)滴加純化水3mL，并用乙酸乙酯萃取3次，每次3mL，收集有機(jī)層，用無水硫酸鈉干燥，抽濾，洗滌，減壓濃縮后用硅膠層析柱純化制得196mg目標(biāo)產(chǎn)品Z1，收率:82.1％，HPLC純度：100％；

¹H-NMR(CDCl₃，400Hz):7.746(s,1H),7.609-7.590(d,1H),7.222-7.137(m,3H),6.931(s,1H),6.798-6.728(m,2H),5.950-5.944(d,2H),5.334(s,1H),4.445(s,1H),4.346(s,2H),3.894-3.856(d,1H),3.023-2.997(d,1H),2.340(s,3H)ppm；MS(m/z):408.1[M+H]⁺。

2、(1S,3R)-1-(1,3-苯并二氧戊環(huán)-5-基)-2-(2-甲氨基乙?；?-1,2,3,4-四氫-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸(化合物Z2)的制備

在100mL反應(yīng)瓶中，加入17mLN,N-二甲基甲酰胺、40％甲胺水溶液283mg，20-25℃緩慢滴加雜質(zhì)化合物M2Z2的N,N-二甲基甲酰胺溶液(將378mg M2Z2溶解于4mL N,N-二甲基甲酰胺中配制而成)，滴畢，滴加純化水66mL，用乙酸乙酯萃取3次，每次44mL，再用飽和氯化鈉溶液50mL洗滌一次，再用無水硫酸鈉干燥過夜，次日抽濾，洗滌，減壓濃縮，濃縮物用制備硅膠層析柱純化制得279mg目標(biāo)產(chǎn)品Z2,收率:74.8％，HPLC純度：100％；

¹H-NMR(CDCl₃，400Hz):7.846(brs,1H),7.516-7.501(d,1H),7.161-7.113(m,3H),6.818(s,1H),6.759-6.721(m,2H),5.916(s,2H),5.683(s,1H),5.350(m,2H),4.296-4.257(d,1H),3.807-3.662(d,1H),3.389(s,1H),2.696(s,3H)ppm；MS(m/z):408.1[M+H]⁺。

綜上所述，本發(fā)明的化合物M2Z1、M2Z2、Z1、Z2，純度高，可以作為對(duì)照品檢測(cè)或監(jiān)控他達(dá)拉非藥物的雜質(zhì)含量和產(chǎn)品質(zhì)量，保障他達(dá)拉非的用藥安全；而且，本發(fā)明的制備方法簡(jiǎn)便，易于操作和控制，能耗低、用時(shí)少，生產(chǎn)效率高，成本低，經(jīng)濟(jì)價(jià)值明顯，具有十分良好的產(chǎn)業(yè)化前景。