本發(fā)明涉及液體菌種技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種基于虎杖渣的鮑魚(yú)菇液體菌種培養(yǎng)基及其種鮑魚(yú)菇液體菌種制備方法。

背景技術(shù)：

鮑魚(yú)菇生產(chǎn)過(guò)程中，液體菌種具有固體菌種所不可比擬的優(yōu)勢(shì)，液體菌種具有生產(chǎn)周期短，菌齡短而一致，純度高、活力強(qiáng)，接種簡(jiǎn)便快捷，易實(shí)行工廠化、規(guī)模化、標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)?，F(xiàn)在，越來(lái)越多的人都在研究和使用液體菌種，而液體菌種的推廣和使用也是實(shí)現(xiàn)食用菌工廠化、規(guī)?；?biāo)準(zhǔn)化的必然趨勢(shì)。但是液體菌種也存在著自身的缺陷和不足：1、液體菌種萌發(fā)點(diǎn)多生長(zhǎng)速度快，但是穿透力不強(qiáng)，培養(yǎng)料過(guò)粗菌絲不易吃透培養(yǎng)料，菌絲將沿著培養(yǎng)料表面快速生長(zhǎng)，培養(yǎng)料內(nèi)部菌絲量很少，嚴(yán)重影響了菌種產(chǎn)量和質(zhì)量的問(wèn)題；2、常規(guī)的液體菌種雖然解決了固體菌種存在的一些問(wèn)題，能明顯縮短栽培周期、增強(qiáng)菌種活力和抗逆性、降低菌種污染率、使得菌種質(zhì)量整齊度提高，但仍存在例如發(fā)酵得到的液體菌種中菌球的密度、大小、均勻度等物理特性不是很理想等不足，如果用攪拌剪切的方法將菌球打碎，得到的菌種均勻度會(huì)更理想，但是，高速攪拌粉碎和打漿的剪切力對(duì)菌種傷害極大，對(duì)菌種整體的質(zhì)量影響較為嚴(yán)重。開(kāi)發(fā)分布均勻且具有更小粒徑菌絲球的高質(zhì)量的液體菌種具有重要意義。公開(kāi)號(hào)CN105309194A《食用菌微粒液體菌種生產(chǎn)新技術(shù)》提供了一種菌絲球粒徑在0.5㎜的食用菌微粒液體菌種，采用的增加食用菌液體菌種培養(yǎng)液通氣量，使通氣量在1:0.6—0.9V/V?min為適宜，同時(shí)在通氣發(fā)酵罐內(nèi)裝置攪拌器使培養(yǎng)液渦流運(yùn)動(dòng)延長(zhǎng)氣泡的運(yùn)動(dòng)路線的技術(shù)操作方法，該生產(chǎn)微粒液體菌種的方法是從生產(chǎn)工藝上進(jìn)行改進(jìn)，并沒(méi)有液體菌種培養(yǎng)基方面進(jìn)行改進(jìn)，實(shí)施起來(lái)技術(shù)難度要求高；公開(kāi)號(hào)CN105130516A《分子級(jí)生物培養(yǎng)基制作方法》提到了分子級(jí)生物培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分可以快速全面的被吸收，促進(jìn)液體菌種的生長(zhǎng)，但是并沒(méi)有提到分子級(jí)生物培養(yǎng)基對(duì)液體菌種菌絲球直徑大小的影響。發(fā)展一種基于液體菌種培養(yǎng)基原材料成分改進(jìn)液體菌種菌絲球直徑改善食用菌菌種產(chǎn)量和質(zhì)量的技術(shù)，具有重要的意義。

細(xì)菌納米纖維素是自然界的豐富的可再生產(chǎn)物之一，細(xì)菌納米纖維素是纖維素的物理最小結(jié)構(gòu)單元，是指直徑1-100nm之間的纖維，細(xì)菌納米纖維素質(zhì)輕，生物相容性好，可降解、可再生，反應(yīng)活性高，且具有楊氏模量高，聚合度高，潔凈度高，強(qiáng)度高，比表面積大等優(yōu)勢(shì)。將細(xì)菌納米纖維素作作為食用菌液體菌種培養(yǎng)基原材料，對(duì)食用菌液體菌種的菌絲球分布以及直徑具有一定的影響，進(jìn)而起到改善食用菌菌種質(zhì)量的作用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明目的就是為了彌補(bǔ)已有技術(shù)的缺陷，提供一種基于虎杖渣的鮑魚(yú)菇液體菌種培養(yǎng)基及其種鮑魚(yú)菇液體菌種制備方法。

本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

一種基于虎杖渣的鮑魚(yú)菇液體菌種培養(yǎng)基，包括以下重量份組分：虎杖渣17-18、鮑魚(yú)蛋白粉60-62、大豆酶解小分子肽9-10、麥芽糖12-13、核糖18-19、乙酸桂酯6-7、海螵蛸4-5、石膏1-1.2、碳酸鈣0.6-0.8、過(guò)磷酸鈣0.9-1、甘草酸二鉀1-1.1、檸檬酸鈉0.8-0.9、檸檬酸三銨1.2-1.3、硫酸亞鐵銨1.2-1.3、納米級(jí)電氣石粉5.6-6、細(xì)菌納米纖維素4.8-5、適量的水。

一種采用上述的培養(yǎng)基制備鮑魚(yú)菇液體菌種的方法，包括以下步驟：

（1）、將一半納米級(jí)電氣石粉和水按照0.1g/L混合，通電激發(fā)制備無(wú)菌水備用；將石膏、碳酸鈣、過(guò)磷酸鈣、甘草酸二鉀、檸檬酸鈉、檸檬酸三銨、硫酸亞鐵銨的總量和無(wú)菌水按1g/L混合在30℃攪拌溶解得溶液一；將大豆酶解小分子肽、麥芽糖、核糖、乙酸桂酯、海螵蛸的總量和無(wú)菌水按4g/L混合攪拌溶解得溶液二；將虎杖渣放入超微粉碎機(jī)中粉碎處理30min，放入鍋中加入總重量4倍的水小火文煮1h，之后過(guò)濾，得濾液和濾渣，將濾液中加入鮑魚(yú)蛋白粉混合攪拌均勻，并在進(jìn)行98℃進(jìn)行巴氏滅菌滅酶10min，得溶液三，將濾渣采用膨化機(jī)處理，得膨化虎杖渣微粉備用；將另一半納米電氣石粉和細(xì)菌納米纖維素以及總重量3-4倍的水混合攪拌均勻并采用高溫蒸汽滅菌，得溶液四備用；

（2）、將溶液三保持20℃、溶液二保持25℃、溶液一保持30℃，先將溶液一加入到溶液二中混合攪拌均勻得復(fù)合液，在將該復(fù)合液加入到溶液三中混合攪拌均勻得營(yíng)養(yǎng)液，并調(diào)整pH，此后對(duì)該營(yíng)養(yǎng)液進(jìn)行通電激發(fā)處理30min得液體培養(yǎng)基備用；

（3）、將鮑魚(yú)菇母種在無(wú)菌環(huán)境中先接種到一半的液體培養(yǎng)基上進(jìn)行液體發(fā)酵，發(fā)酵條件為pH5.3-5.5、接種量13%、溫度25-26℃、搖床轉(zhuǎn)速100r/min、培養(yǎng)11-12h，得鮑魚(yú)菇液體菌種一；

（4）、將剩余一半的液體培養(yǎng)基以及溶液四無(wú)菌混合均勻，之后加入膨化虎杖渣微粉以及總重量2-3倍的無(wú)菌水，高壓均質(zhì)之后，通電激化配合高溫再次滅菌，并放置到無(wú)菌培養(yǎng)瓶中，得復(fù)合培養(yǎng)基，將步驟（3）得到的鮑魚(yú)菇液體菌種一按35%的接種量在無(wú)菌環(huán)境中接種到該培養(yǎng)瓶中，溫度28-30℃，培養(yǎng)22-23h即得。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是：本發(fā)明以麥芽糖、核糖為碳源，以大豆酶解小分子肽、鮑魚(yú)蛋白粉為氮源，配合處理過(guò)的超微膨脹虎杖渣以及虎杖渣提取物共同制備鮑魚(yú)菇液體菌種液體培養(yǎng)基，營(yíng)養(yǎng)豐富，可以增強(qiáng)鮑魚(yú)菇的藥用功效的同時(shí)，提供了鮑魚(yú)菇液體菌種培養(yǎng)基的豐富原料；再者，加入了乙酸桂酯、海螵蛸營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，對(duì)提高鮑魚(yú)菇液體菌種的穩(wěn)定性具有重要作用；在液體菌種培養(yǎng)基的制備過(guò)程中，借助于納米電氣石粉以及電激化處理輔助滅菌，具有方便簡(jiǎn)單能耗少的特點(diǎn)；另外，膨化虎杖渣微粉，細(xì)菌納米纖維素的加入以及高壓均質(zhì)處理，保證了液體菌種培養(yǎng)基的穩(wěn)定性和均勻性以及培養(yǎng)料內(nèi)部的微小空間的存在，保證了鮑魚(yú)菇液體菌種菌絲球的分布穩(wěn)定性和均勻性，可以起到改善菌絲球質(zhì)量的作用，提高鮑魚(yú)菇液體菌種子實(shí)體質(zhì)量。

具體實(shí)施方式

一種基于虎杖渣的鮑魚(yú)菇液體菌種培養(yǎng)基，包括以下重量份組分：虎杖渣17、鮑魚(yú)蛋白粉60、大豆酶解小分子肽9、麥芽糖12、核糖18、乙酸桂酯6、海螵蛸4、石膏1、碳酸鈣0.6、過(guò)磷酸鈣0.9、甘草酸二鉀1、檸檬酸鈉0.8、檸檬酸三銨1.2、硫酸亞鐵銨1.2、納米級(jí)電氣石粉5.6、細(xì)菌納米纖維素4.8、適量的水。

一種采用上述的培養(yǎng)基制備鮑魚(yú)菇液體菌種的方法，包括以下步驟：

（1）、將一半納米級(jí)電氣石粉和水按照0.1g/L混合，通電激發(fā)制備無(wú)菌水備用；將石膏、碳酸鈣、過(guò)磷酸鈣、甘草酸二鉀、檸檬酸鈉、檸檬酸三銨、硫酸亞鐵銨的總量和無(wú)菌水按1g/L混合在30℃攪拌溶解得溶液一；將大豆酶解小分子肽、麥芽糖、核糖、乙酸桂酯、海螵蛸的總量和無(wú)菌水按4g/L混合攪拌溶解得溶液二；將虎杖渣放入超微粉碎機(jī)中粉碎處理30min，放入鍋中加入總重量4倍的水小火文煮1h，之后過(guò)濾，得濾液和濾渣，將濾液中加入鮑魚(yú)蛋白粉混合攪拌均勻，并在進(jìn)行98℃進(jìn)行巴氏滅菌滅酶10min，得溶液三，將濾渣采用膨化機(jī)處理，得膨化虎杖渣微粉備用；將另一半納米電氣石粉和細(xì)菌納米纖維素以及總重量3倍的水混合攪拌均勻并采用高溫蒸汽滅菌，得溶液四備用；

（2）、將溶液三保持20℃、溶液二保持25℃、溶液一保持30℃，先將溶液一加入到溶液二中混合攪拌均勻得復(fù)合液，在將該復(fù)合液加入到溶液三中混合攪拌均勻得營(yíng)養(yǎng)液，并調(diào)整pH，此后對(duì)該營(yíng)養(yǎng)液進(jìn)行通電激發(fā)處理30min得液體培養(yǎng)基備用；

（3）、將鮑魚(yú)菇母種在無(wú)菌環(huán)境中先接種到一半的液體培養(yǎng)基上進(jìn)行液體發(fā)酵，發(fā)酵條件為pH5.3、接種量13%、溫度25℃、搖床轉(zhuǎn)速100r/min、培養(yǎng)11h，得鮑魚(yú)菇液體菌種一；

（4）、將剩余一半的液體培養(yǎng)基以及溶液四無(wú)菌混合均勻，之后加入膨化虎杖渣微粉以及總重量2倍的無(wú)菌水，高壓均質(zhì)之后，通電激化配合高溫再次滅菌，并放置到無(wú)菌培養(yǎng)瓶中，得復(fù)合培養(yǎng)基，將步驟（3）得到的鮑魚(yú)菇液體菌種一按35%的接種量在無(wú)菌環(huán)境中接種到該培養(yǎng)瓶中，溫度28℃，培養(yǎng)22h即得。