本發(fā)明涉及微藻養(yǎng)殖技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種小球藻細(xì)胞分選的方法。

背景技術(shù)：

小球藻，為綠藻門小球藻屬普生性單細(xì)胞綠藻，是一種球形單細(xì)胞淡水藻類，細(xì)胞球形、橢圓形，是一種高效的光合植物，以光合自養(yǎng)生長繁殖，分布極廣，是地球上動(dòng)植物中唯一能在20h增長4倍的生物，所以其應(yīng)用價(jià)值很高。

小球藻是一種優(yōu)質(zhì)的綠色營養(yǎng)源食品，細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、脂肪和碳水化合物含量都很高，又有多種維生素，可食用和作為餌料，并且具有某些特殊醫(yī)療保健功能，我國常見的種類有蛋白核小球藻、橢圓小球藻、普通小球藻等，其中蛋白核小球藻蛋白質(zhì)含量高，營養(yǎng)價(jià)值最高。

小球藻養(yǎng)殖中，其各個(gè)細(xì)胞的發(fā)育階段也是不均一的，初分裂的細(xì)胞個(gè)體/密度小，成熟或接近老化的細(xì)胞個(gè)體/密度大，各自所含的營養(yǎng)物質(zhì)如蛋白、脂肪酸、葉綠素等物質(zhì)的含量也各不相同，因此依據(jù)小球藻不同生長階段細(xì)胞的顆粒大小和密度的差異，針對(duì)性的對(duì)小球藻細(xì)胞進(jìn)行分選，實(shí)現(xiàn)成熟細(xì)胞和未成熟細(xì)胞的分離，將含成熟細(xì)胞的藻液進(jìn)行采收，而未成熟細(xì)胞則可以回流繼續(xù)培養(yǎng)，對(duì)小球藻養(yǎng)殖領(lǐng)域具有重要意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明為解決上述技術(shù)問題，提供了一種小球藻細(xì)胞分選的方法。

具體是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的：

一種小球藻細(xì)胞分選的方法，包括以下步驟：

(1)過濾除雜：用篩網(wǎng)，將培養(yǎng)池中的藻液進(jìn)行過濾，除去藻液中的細(xì)胞絮凝團(tuán)、草桿、樹葉，將藻液重復(fù)過濾2～3次；

(2)藻液狀態(tài)判斷：用高倍顯微鏡對(duì)藻液進(jìn)行觀察，觀察過濾后的藻液中成熟細(xì)胞的密度，成熟細(xì)胞的直徑，據(jù)此調(diào)節(jié)進(jìn)料泵參數(shù)，控制給料壓力；

(3)分選：利用水泵將過濾后的藻液泵入水力旋流器，經(jīng)過水力旋流器分選。

進(jìn)一步，所述的篩網(wǎng)為150～200目的篩網(wǎng)。

進(jìn)一步，所述的高倍顯微鏡，為400倍或更高倍數(shù)的顯微鏡。

進(jìn)一步，水力旋流器的直徑＜100mm，泵入壓力為0.1～0.4Mpa。

進(jìn)一步，水力旋流器的直徑為50～75mm，泵入壓力為0.1～0.2Mpa。

進(jìn)一步，所述的分選，含有細(xì)胞較大、密度較高的成熟藻細(xì)胞的藻液從底流口流出，經(jīng)過離心回收，含有細(xì)胞較小、密度較低的未成熟細(xì)胞的藻液從溢流口流出，返回培養(yǎng)池繼續(xù)培養(yǎng)。

進(jìn)一步，藻細(xì)胞直徑≥6μm，密度≥50％的成熟細(xì)胞從水力旋流器的底流口流出。

綜上所述，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于，通過細(xì)胞分選，將蛋白、葉綠素等指標(biāo)較優(yōu)的成熟細(xì)胞進(jìn)行采收，而未成熟細(xì)胞回流繼續(xù)培養(yǎng)，提高了產(chǎn)品質(zhì)量的優(yōu)質(zhì)性和穩(wěn)定程度；大量未成熟細(xì)胞回流培養(yǎng)，可以縮短批次培養(yǎng)的周期；該方法還可實(shí)現(xiàn)藻液的初步濃縮，可以大大降低采收過程的能耗，達(dá)到縮短單位產(chǎn)量采收所需時(shí)間和整體降低采收成本效果。

具體實(shí)施方式

下面對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式作進(jìn)一步詳細(xì)的說明，但本發(fā)明并不局限于這些實(shí)施方式，任何在本實(shí)施例基本精神上的改進(jìn)或代替，仍屬于本發(fā)明權(quán)利要求所要求保護(hù)的范圍。

實(shí)施例1

一種小球藻細(xì)胞分選的方法，包括以下步驟：

(1)過濾除雜：用篩網(wǎng)，將培養(yǎng)池中的藻液進(jìn)行過濾，除去藻液中的細(xì)胞絮凝團(tuán)、草桿、樹葉，將藻液重復(fù)過濾2～3次；

(2)藻液狀態(tài)判斷：用高倍顯微鏡對(duì)藻液進(jìn)行觀察，觀察過濾后的藻液中成熟細(xì)胞的密度，成熟細(xì)胞的直徑，據(jù)此調(diào)節(jié)進(jìn)料泵參數(shù)，控制給料壓力；

(3)分選：利用水泵將過濾后的藻液泵入水力旋流器，經(jīng)過水力旋流器分選。

所述的篩網(wǎng)為150目的篩網(wǎng)。

所述的高倍顯微鏡，為400倍的顯微鏡。

水力旋流器的直徑為50mm，泵入壓力為0.1Mpa。

所述的分選，含有細(xì)胞較大、密度較高的成熟藻細(xì)胞的藻液從底流口流出，經(jīng)過離心回收，含有細(xì)胞較小、密度較低的未成熟細(xì)胞的藻液從溢流口流出，返回培養(yǎng)池繼續(xù)培養(yǎng)。

藻細(xì)胞直徑≥6μm，密度≥50％的成熟細(xì)胞從水力旋流器的底流口流出。

實(shí)施例2

一種小球藻細(xì)胞分選的方法，包括以下步驟：

(1)過濾除雜：用篩網(wǎng)，將培養(yǎng)池中的藻液進(jìn)行過濾，除去藻液中的細(xì)胞絮凝團(tuán)、草桿、樹葉，將藻液重復(fù)過濾2～3次；

(2)藻液狀態(tài)判斷：用高倍顯微鏡對(duì)藻液進(jìn)行觀察，觀察過濾后的藻液中成熟細(xì)胞的密度，成熟細(xì)胞的直徑，據(jù)此調(diào)節(jié)進(jìn)料泵參數(shù)，控制給料壓力；

(3)分選：利用水泵將過濾后的藻液泵入水力旋流器，經(jīng)過水力旋流器分選。

所述的篩網(wǎng)為200目的篩網(wǎng)。

所述的高倍顯微鏡，為600倍的顯微鏡。

水力旋流器的直徑為75mm，泵入壓力為0.2Mpa。

所述的分選，含有細(xì)胞較大、密度較高的成熟藻細(xì)胞的藻液從底流口流出，經(jīng)過離心回收，含有細(xì)胞較小、密度較低的未成熟細(xì)胞的藻液從溢流口流出，返回培養(yǎng)池繼續(xù)培養(yǎng)。

藻細(xì)胞直徑≥6μm，密度≥50％的成熟細(xì)胞從水力旋流器的底流口流出。

實(shí)施例3

一種小球藻細(xì)胞分選的方法，包括以下步驟：

(1)過濾除雜：用篩網(wǎng)，將培養(yǎng)池中的藻液進(jìn)行過濾，除去藻液中的細(xì)胞絮凝團(tuán)、草桿、樹葉，將藻液重復(fù)過濾2～3次；

(2)藻液狀態(tài)判斷：用高倍顯微鏡對(duì)藻液進(jìn)行觀察，觀察過濾后的藻液中成熟細(xì)胞的密度，成熟細(xì)胞的直徑，據(jù)此調(diào)節(jié)進(jìn)料泵參數(shù)，控制給料壓力；

(3)分選：利用水泵將過濾后的藻液泵入水力旋流器，經(jīng)過水力旋流器分選。

所述的篩網(wǎng)為180目的篩網(wǎng)。

所述的高倍顯微鏡，為400倍的顯微鏡。

水力旋流器的直徑為60mm，泵入壓力為0.15Mpa。

所述的分選，含有細(xì)胞較大、密度較高的成熟藻細(xì)胞的藻液從底流口流出，經(jīng)過離心回收，含有細(xì)胞較小、密度較低的未成熟細(xì)胞的藻液從溢流口流出，返回培養(yǎng)池繼續(xù)培養(yǎng)。

藻細(xì)胞直徑≥6μm，密度≥50％的成熟細(xì)胞從水力旋流器的底流口流出。

實(shí)施例4

一種小球藻細(xì)胞分選的方法，包括以下步驟：

(1)過濾除雜：用篩網(wǎng)，將培養(yǎng)池中的藻液進(jìn)行過濾，除去藻液中的細(xì)胞絮凝團(tuán)、草桿、樹葉，將藻液重復(fù)過濾2～3次；

(2)藻液狀態(tài)判斷：用高倍顯微鏡對(duì)藻液進(jìn)行觀察，觀察過濾后的藻液中成熟細(xì)胞的密度，成熟細(xì)胞的直徑，據(jù)此調(diào)節(jié)進(jìn)料泵參數(shù)，控制給料壓力；

(3)分選：利用水泵將過濾后的藻液泵入水力旋流器，經(jīng)過水力旋流器分選。

所述的篩網(wǎng)為200目的篩網(wǎng)。

所述的高倍顯微鏡，為400倍的顯微鏡。

水力旋流器的直徑為75mm，泵入壓力為0.1Mpa。

所述的分選，含有細(xì)胞較大、密度較高的成熟藻細(xì)胞的藻液從底流口流出，經(jīng)過離心回收，含有細(xì)胞較小、密度較低的未成熟細(xì)胞的藻液從溢流口流出，返回培養(yǎng)池繼續(xù)培養(yǎng)。

藻細(xì)胞直徑≥6μm，密度≥50％的成熟細(xì)胞從水力旋流器的底流口流出。