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通過TALEN平臺技術(shù)的甜菜原生質(zhì)體的轉(zhuǎn)化方法與流程

文檔序號:12070535閱讀:來源:國知局
技術(shù)總結(jié)
用于轉(zhuǎn)化甜菜原生質(zhì)體的方法,包括以下步驟:?從分離自甜菜植物的氣孔保衛(wèi)細(xì)胞獲得原生質(zhì)體,?用包含感興趣的核苷酸序列和轉(zhuǎn)錄激活子樣效應(yīng)子核酸酶(TALEN)或者包含編碼這些轉(zhuǎn)錄激活子樣效應(yīng)子核酸酶(TALEN)序列的序列的一種或多種載體的核酸構(gòu)建體轉(zhuǎn)化所述原生質(zhì)體,其中這些TALEN靶向并加工靶序列,并通過同源重組用包含所述感興趣的核苷酸序列的核酸構(gòu)建體替換所述靶序列,?可能地,向這些原生質(zhì)體的體外培養(yǎng)物應(yīng)用對所述原生質(zhì)體的體外培養(yǎng)物有毒的,優(yōu)選地致死的培養(yǎng)基,和?從細(xì)胞培養(yǎng)物再生甜菜植物,優(yōu)選地,從整合了包含感興趣的序列的核酸構(gòu)建體的存活的原生質(zhì)體再生甜菜植物,所述感興趣的序列可能使所述轉(zhuǎn)化的細(xì)胞對所應(yīng)用的培養(yǎng)基的毒性活性具有耐受性。

技術(shù)研發(fā)人員:蓋伊·魏恩斯;馬克·勒菲弗;夏夫高達(dá)·塔姆曼納高達(dá);米里耶勒·隆梅爾;羅松
受保護(hù)的技術(shù)使用者:西斯凡德爾哈維公眾公司
文檔號碼:201580031432
技術(shù)研發(fā)日:2015.06.12
技術(shù)公布日:2017.05.24

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