1.一種用于轉(zhuǎn)化甜菜原生質(zhì)體的方法，包括以下步驟：
-從分離自甜菜植物的氣孔保衛(wèi)細(xì)胞獲得原生質(zhì)體，
-用包含感興趣的核苷酸序列和轉(zhuǎn)錄激活子樣效應(yīng)子核酸酶(TALEN)序列或者包含編碼所述轉(zhuǎn)錄激活子樣效應(yīng)子核酸酶(TALEN)序列的序列的一種或多種載體的核酸構(gòu)建體轉(zhuǎn)化所述原生質(zhì)體，其中所述轉(zhuǎn)錄激活子樣效應(yīng)子核酸酶靶向并處理所述原生質(zhì)體的靶序列，并且通過(guò)同源重組用包含感興趣的所述核苷酸序列的核酸構(gòu)建體替換所述靶序列，
-可能地，向所述原生質(zhì)體的體外培養(yǎng)物應(yīng)用對(duì)所述原生質(zhì)體的體外培養(yǎng)物有毒的培養(yǎng)基，和
-從所述原生質(zhì)體培養(yǎng)物再生甜菜植物，優(yōu)選地，從整合了包含感興趣的序列的核酸構(gòu)建體的存活的原生質(zhì)體再生甜菜植物，感興趣的所述序列可能使轉(zhuǎn)化的所述原生質(zhì)體對(duì)所應(yīng)用的培養(yǎng)基的毒性活性具有耐受性。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中感興趣的所述序列包含在氨基酸113位攜帶從L-丙氨酸(Ala)至L-酪氨酸(Tyr)的序列突變的突變BVALS 113序列，或由其組成，并且其中對(duì)所述原生質(zhì)體的體外培養(yǎng)有毒性的培養(yǎng)基包含一種或多種ALS抑制劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中所述一種或多種ALS抑制劑選自由以下各項(xiàng)組成的組：磺酰脲除草劑、磺酰氨基羰基三唑啉酮除草劑、咪唑啉酮除草劑、三唑并嘧啶除草劑、嘧啶基(硫代)苯甲酸酯除草劑或它們的混合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中所述磺酰脲除草劑選自由以下各項(xiàng)組成的組：甲酰胺磺隆、碘甲磺隆、酰嘧磺隆、乙氧嘧磺隆、氯嘧磺隆或它們的混合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中對(duì)于甲酰胺磺隆，以5×10-9M至1×10-6M之間的濃度，對(duì)于乙氧嘧磺隆，以5×10-11M至5×10-10M之間的濃度應(yīng)用所述ALS抑制劑。
6.根據(jù)以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中感興趣的所述序列編碼賦予對(duì)一種或多種除草劑的耐受性、對(duì)昆蟲(chóng)的耐受性、對(duì)線蟲(chóng)的耐受性、對(duì)植物疾病的耐受性、對(duì)病毒感染的耐受性、對(duì)應(yīng)激的耐受性的肽或蛋白質(zhì)，或者編碼一種或多種酶和/或編碼具有抗細(xì)菌或抗真菌特性的肽或蛋白質(zhì)。
7.根據(jù)以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中核酸構(gòu)建體包含允許感興趣的所述核苷酸序列在甜菜植物原生質(zhì)體、細(xì)胞、組織和/或植物中表達(dá)的一種或多種調(diào)控序列。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述一種或多種調(diào)控序列選自由以下各項(xiàng)組成的組：?jiǎn)?dòng)子、轉(zhuǎn)錄終止序列和聚A信號(hào)序列。
9.通過(guò)根據(jù)以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的轉(zhuǎn)化方法獲得的甜菜原生質(zhì)體、細(xì)胞、組織或植物。