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在銅使用下重組蛋白表達(dá)的增強(qiáng)的制作方法

文檔序號:12284528閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種增加哺乳動物細(xì)胞的蛋白表達(dá)的方法,其包括將約0.5微摩爾至約10.0微摩爾的銅添加至細(xì)胞培養(yǎng)基。

2.一種增加細(xì)胞比產(chǎn)率的方法,其包括將約0.5微摩爾至約10.0微摩爾的銅添加至細(xì)胞培養(yǎng)基。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其中將包含增強(qiáng)的細(xì)胞培養(yǎng)基和哺乳動物細(xì)胞的制備系統(tǒng)用于制備重組蛋白。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法,其中將包含增強(qiáng)的細(xì)胞培養(yǎng)基和哺乳動物細(xì)胞的制備系統(tǒng)用于制備重組蛋白。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法,其中所述重組蛋白為凝固性蛋白。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法,其中凝固性蛋白選自重組因子VIII、B結(jié)構(gòu)域缺失的重組因子VIII、以及重組因子VII或重組因子VIIa。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其中哺乳動物細(xì)胞選自CHO、BHK或人哺乳細(xì)胞。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其中將銅與增加培養(yǎng)基的滲透克分子濃度的其它主體離子如鈉和鉀一起添加以進(jìn)一步增強(qiáng)蛋白表達(dá)。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其中將基于膜的細(xì)胞截留系統(tǒng)與灌注細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)合使用。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其中所添加的銅的形式為二價銅離子。

11.一種增加B結(jié)構(gòu)域缺失的重組因子VIII在哺乳動物細(xì)胞中的表達(dá)的方法,其包括將約0.5至約10.0微摩爾的二價銅添加至與制備系統(tǒng)一起使用的細(xì)胞培養(yǎng)基,所述制備系統(tǒng)由與基于膜的外部細(xì)胞截留系統(tǒng)結(jié)合使用的灌注細(xì)胞培養(yǎng)組成。

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