技術(shù)特征：

1.一種肉芝軟珊瑚提取物的生物活性SRB測定方法，其特征在于，步驟如下：

(1)取對數(shù)期的腫瘤細(xì)胞，用新鮮的RPMI-1640培養(yǎng)基調(diào)整細(xì)胞懸液的濃度為2×10⁵個/ml，每孔200μL加入96孔板中，每孔加入不同濃度的樣品溶液2μL；

(2)37oC培養(yǎng)17h；

(3)離心3min(4oC、3000prm)，吸去上清；

(4)每孔加入50μL預(yù)冷的80%TCA溶液，移入4oC冰箱中固定1.5h，再用去離子水沖洗5次，室溫晾干；

(5)每孔加入0.5%SRB染液(1%的TCA溶液)50μL，室溫靜置30min后，用預(yù)冷的1%TCA水溶液沖洗4次，去除未結(jié)合的染料，室溫晾干；

(6)每孔加入150μL非緩沖Tris溶液溶解(10mM，pH=10.5)與蛋白結(jié)合的染料，用酶標(biāo)儀在520nm下測定每孔吸光度OD值，在96孔板中每個樣品濃度設(shè)3孔，另設(shè)空白對照3孔，取3孔平均值，按公式IR(%)=(OD_空白-OD_樣品)/OD_空白×100%計算細(xì)胞增殖抑制率(IR%)，再利用Bliss方法由各種濃度的IR求出半數(shù)抑制濃度(IC₅₀)的標(biāo)準(zhǔn)差和平均值。