本發(fā)明有關(guān)于一種真菌的培養(yǎng)方法，特別指一種冬蟲夏草的培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)：

冬蟲夏草(Ophiocordyceps sinensis)又名中華蟲草，其為冬蟲夏草菌的子實(shí)體與僵蟲菌核構(gòu)成的復(fù)合體。冬蟲夏草的藥用價(jià)值自古就有記載，在中醫(yī)上來(lái)說(shuō)，冬蟲夏草對(duì)于人體有調(diào)陰補(bǔ)陽(yáng)的功效，常食用可改善先天虛弱體質(zhì)，也為延年益壽、養(yǎng)身的極品?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究指出冬蟲夏草中含有許多成份，如蟲草多醣、胺基酸、D-甘露醇、蟲草素、生物堿、微量元素、腺苷等，使其具有許多生理活性，包含有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗菌作用、抗病毒、護(hù)肝、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌、對(duì)中樞神經(jīng)的鎮(zhèn)靜、調(diào)節(jié)心血管、腎臟、呼吸道等作用。不過(guò)，由于野生冬蟲夏草須生長(zhǎng)于高寒、缺氧及低氣壓的環(huán)境中，因此，冬蟲夏草一直以來(lái)都被視為最珍貴的補(bǔ)氣、補(bǔ)陽(yáng)、補(bǔ)陰的代表藥物之一。

早期研究發(fā)現(xiàn)中國(guó)被毛孢(Hirsutella sinensis)接種蝙蝠蛾幼蟲后，能完成從染菌直到長(zhǎng)出子實(shí)體的全過(guò)程，證明中國(guó)被毛孢為冬蟲夏草的無(wú)性型菌株。為能改善野生冬蟲夏草取得不易且價(jià)錢高昂的缺失，許多研究改以發(fā)酵技術(shù)開發(fā)利用冬蟲夏草。一般來(lái)說(shuō)，發(fā)酵技術(shù)分為液態(tài)發(fā)酵技術(shù)及固態(tài)發(fā)酵技術(shù)兩種，而相較于液態(tài)發(fā)酵技術(shù)，固態(tài)發(fā)酵技術(shù)具有下列優(yōu)點(diǎn)：比較適合真菌類，具有較高產(chǎn)量；使用設(shè)備較為簡(jiǎn)單；廢液排放量少，減少對(duì)于環(huán)境污染；容易控制生產(chǎn)成本。

雖然現(xiàn)有研究已經(jīng)揭露固態(tài)發(fā)酵技術(shù)較有利于冬蟲夏草的開發(fā)，不過(guò)，過(guò)去少有研究投注心力于開發(fā)冬蟲夏草的發(fā)酵技術(shù)，并且，基于固態(tài)發(fā)酵技術(shù)涉及許多培養(yǎng)條件，例如培養(yǎng)基組成、溫度、濕度、光照等，都分別會(huì)影響到冬蟲夏草的產(chǎn)率及其內(nèi)活性成份的含量，以致于仍未有現(xiàn)有技術(shù)揭露冬蟲夏草內(nèi)特定成份的生產(chǎn)方法或其培養(yǎng)條件。據(jù)此，目前仍未有能夠以人工方式穩(wěn)定量產(chǎn)冬蟲夏草的方法以及自其內(nèi)獲得特定活性成份的方法，使得冬蟲夏草的開發(fā)利用倍增難度，導(dǎo)致市場(chǎng)上冬蟲夏草的產(chǎn)品價(jià)位仍持續(xù)高居不下、供不應(yīng)求。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的主要目的即在于提供一種冬蟲夏草的培養(yǎng)方法，其通過(guò)人工培養(yǎng)環(huán)境的調(diào)控，大幅提升冬蟲夏草內(nèi)生物堿的含量，而有利于保健產(chǎn)品的開發(fā)與 量產(chǎn)。

本發(fā)明的另一目的在于提供一種冬蟲夏草的培養(yǎng)方法，其能以人工培養(yǎng)的方式培養(yǎng)出固態(tài)冬蟲夏草，用以使所培養(yǎng)出的冬蟲夏草的成份及其含量十分接近于野生冬蟲夏草。

本發(fā)明的次一目的在于提供一種冬蟲夏草的培養(yǎng)方法，其能夠通過(guò)人工培養(yǎng)方法穩(wěn)定冬蟲夏草的生產(chǎn)品質(zhì)，提高其生產(chǎn)效率。

為能達(dá)成上述目的，本發(fā)明所揭一種冬蟲夏草的培養(yǎng)方法，其將一種菌接種于一培養(yǎng)基中，在一培養(yǎng)環(huán)境下進(jìn)行暗室培養(yǎng)后，再進(jìn)行至少4周的光照培養(yǎng)。

較佳地，該光照培養(yǎng)的光照強(qiáng)度為300～500lux。

較佳地，該培養(yǎng)環(huán)境包含有培養(yǎng)濕度為70～90％、培養(yǎng)溫度為15～25℃，其中，在本發(fā)明的一具體實(shí)施例中，該培養(yǎng)溫度為20℃。

較佳地，暗室培養(yǎng)的時(shí)間為至少4周，其中，在本發(fā)明的一具體實(shí)施例中，暗室培養(yǎng)時(shí)間為6周時(shí)，能獲得較高量的蟲草素。

較佳地，該培養(yǎng)基的含水量為50～60％。

較佳地，該培養(yǎng)基包含有一粉狀基質(zhì)及一氮源，而該粉狀基質(zhì)由至少一五谷雜糧的植物所制備而成，該氮源選得為酵母萃取物、蛋白胨或其組合。

較佳地，光照培養(yǎng)的時(shí)間為4周～12周，如4周、8周、12周，其中，由本發(fā)明的實(shí)施例中可知，光照培養(yǎng)時(shí)間越長(zhǎng)，能夠使所培養(yǎng)出的冬蟲夏草具有較高量的蟲草素及菌絲體。

本發(fā)明的有益效果為：

本發(fā)明提供一種冬蟲夏草的培養(yǎng)方法，能以人工固態(tài)培養(yǎng)方式大量且穩(wěn)定地獲得冬蟲夏草，改善野生冬蟲夏草生長(zhǎng)緩慢的缺點(diǎn)，提高冬蟲夏草生長(zhǎng)效率及特定活性成份含量，使所培養(yǎng)出的冬蟲夏草的成份及組成類似于野生冬蟲夏草，而能夠達(dá)到降低生產(chǎn)成本，提供經(jīng)濟(jì)效益等功效。

附圖說(shuō)明

圖1為蟲草素的標(biāo)準(zhǔn)檢量線。

圖2為腺苷的標(biāo)準(zhǔn)檢量線。

圖3為甘露醇的標(biāo)準(zhǔn)檢量線。

圖4為在不同光照起始點(diǎn)給予光照4周后所測(cè)得的甘露醇含量及菌絲總量。

圖5為在不同光照起始點(diǎn)給予光照8周后所測(cè)得的甘露醇含量及菌絲總量。

圖6為在不同光照起始點(diǎn)給予光照12周后所測(cè)得的甘露醇含量及菌絲總量。

圖7為在不同光照起始點(diǎn)給予光照4周后所測(cè)得的腺苷含量及菌絲總量。

圖8為在不同光照起始點(diǎn)給予光照8周后所測(cè)得的腺苷含量及菌絲總量。

圖9為在不同光照起始點(diǎn)給予光照12周后所測(cè)得的腺苷含量及菌絲總量。

圖10為在不同光照起始點(diǎn)給予光照4周后所測(cè)得的蟲草素含量及菌絲總量。

圖11為在不同光照起始點(diǎn)給予光照8周后所測(cè)得的蟲草素含量及菌絲總量。

圖12為在不同光照起始點(diǎn)給予光照12周后所測(cè)得的蟲草素含量及菌絲總量。

圖13為各組冬蟲夏草分別以不同光照條件培養(yǎng)后，分別測(cè)得各組內(nèi)蟲草素、腺苷、甘露醇含量以及菌絲總量的結(jié)果。

圖14為各組冬蟲夏草分別以不同光照條件培養(yǎng)后，分別測(cè)得各組內(nèi)蟲草素、腺苷、甘露醇含量以及菌絲總量的結(jié)果。

圖15為各組冬蟲夏草分別以不同光照條件培養(yǎng)后，分別測(cè)得各組內(nèi)蟲草素、腺苷、甘露醇含量以及菌絲總量的結(jié)果。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明揭露一種冬蟲夏草的培養(yǎng)方法，其用以通過(guò)人工調(diào)控固態(tài)培養(yǎng)環(huán)境，使人工培養(yǎng)的冬蟲夏草具有類似于野生冬蟲夏草的成份，并且，其菌絲體能夠穩(wěn)定且快速地生長(zhǎng)，以達(dá)到供應(yīng)市場(chǎng)上的需求的功效。

如同本發(fā)明所述技術(shù)領(lǐng)域且具通常知識(shí)者所周知，野生冬蟲夏草的生長(zhǎng)環(huán)境極為復(fù)雜，因此，為能培養(yǎng)出的冬蟲夏草的成份及組成類似于野生冬蟲夏草，并且，要提升其生長(zhǎng)效率，在人工培養(yǎng)冬蟲夏草除須采用真正的冬蟲夏草菌株外，仍需要考慮到各種不同環(huán)境因子。

用以培養(yǎng)冬蟲夏草的固態(tài)培養(yǎng)基中包含有基質(zhì)、氮源及金屬離子，舉例來(lái)說(shuō)，氮源為酵母萃取物、蛋白胨或其組合；基質(zhì)為五谷雜糧類的植物，作為碳源，如燕麥、大豆、薏仁、玉米、小米等。再者，培養(yǎng)基的含水量會(huì)影響冬蟲夏草的生長(zhǎng)，一般來(lái)說(shuō)，含水量以50～60％為佳，其中，當(dāng)含水量為50％時(shí)，冬蟲夏草培養(yǎng)約5～7天會(huì)開始出現(xiàn)白色菌絲生長(zhǎng)于基質(zhì)表面，再經(jīng)過(guò)18～20天的培養(yǎng)，菌絲會(huì)附著于整個(gè)基質(zhì)表面且具有一定的厚度；而在含水量60％時(shí)，冬蟲夏草培養(yǎng)約14～16天后，開始出現(xiàn)明顯菌絲生長(zhǎng)。

由于培養(yǎng)容器中空氣交換有利于真菌菌絲生長(zhǎng)，因此，培養(yǎng)冬蟲夏草的培養(yǎng)容器為透氣性佳的容器，使于培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)容器內(nèi)部氣體與外部氣體交換，能獲得較佳的生長(zhǎng)效果。舉例來(lái)說(shuō)，該培養(yǎng)容器如中國(guó)臺(tái)灣實(shí)用新型專利第M468890號(hào)專利所示、具有通氣管道的試管或盒體，或是使用疏水膜的容器。

濕度及溫度皆為影響冬蟲夏草生長(zhǎng)的因素之一，其中，低濕度環(huán)境會(huì)使培 養(yǎng)基干燥太快，不利于冬蟲夏草生長(zhǎng)，反之，高濕度環(huán)境有利于冬蟲夏草生長(zhǎng)，因而，若在較為干燥的培養(yǎng)環(huán)境中，一般會(huì)通過(guò)保濕機(jī)器來(lái)維持環(huán)境中的濕度，例如加濕器。一般來(lái)說(shuō)，濕度70～90％、培養(yǎng)溫度介于15～25℃為較佳。

以下，為能更進(jìn)一步證實(shí)本發(fā)明的功效，茲舉若干實(shí)施例并搭配附圖說(shuō)明如后。而該實(shí)施例為本發(fā)明的例示，非用以限制本發(fā)明的說(shuō)明書及權(quán)利要求的解釋。

在下列實(shí)施例中，所采用的冬蟲夏草(Ophiocordyceps sinensis)采于臺(tái)灣新竹食品工業(yè)發(fā)展研究所生物資源保存及研究中心，寄存編號(hào)為BCRC37843。

實(shí)施例一：制備冬蟲夏草種菌

將購(gòu)于臺(tái)灣新竹食品工業(yè)發(fā)展研究所生物資源保存及研究中心的該冬蟲夏草(BCRC37843)以平板及斜面培養(yǎng)基在溫度15～22℃下培養(yǎng)約40～70天后，在4℃冰箱中保存，其中，以濃度為39g/L的馬鈴薯葡萄糖洋菜培養(yǎng)基在溫度20℃下培養(yǎng)60天為較佳。

將經(jīng)培養(yǎng)的該冬蟲夏草切塊，并接種于酸堿值6.0的一培養(yǎng)基中，再以均質(zhì)棒打碎菌塊，進(jìn)行培養(yǎng)，以獲得一冬蟲夏草種菌，其中，培養(yǎng)基以含有蔗糖、酵母萃取物及蛋白胨的培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度為25℃、120rpm培養(yǎng)箱、培養(yǎng)18天為較佳。

實(shí)施例二：制備培養(yǎng)基

先將五谷雜糧類的固態(tài)碳源以粉碎機(jī)粉碎為適當(dāng)大小的顆粒，約15克，作為培養(yǎng)基質(zhì)，而該顆粒大小以20～30網(wǎng)孔(mesh)為佳。制備一培養(yǎng)液，其較佳配方為2％葡萄糖、1％氮源、0.01硫酸鎂、0.01％磷酸二氫鉀，其中，氮源為酵母萃取物或蛋白胨。將該培養(yǎng)液添加至該培養(yǎng)基質(zhì)中，獲得一培養(yǎng)基。

實(shí)施例三：檢測(cè)蟲草素及腺苷的含量

將蟲草素及腺苷的標(biāo)準(zhǔn)品分別以15％甲醇溶液制備成濃度200、400、600、800、1000μg/mL的溶液，用高效液相層析儀(High Performance Liquid Chromatography，HPLC)進(jìn)行分析對(duì)蟲草素、腺苷標(biāo)準(zhǔn)品甲醇萃取液進(jìn)行定性與定量分析，以制作出標(biāo)準(zhǔn)線，如圖1及圖2所示，其中，高效液相層析儀的條件如下：Luna C18(5μm，4×250nm)的液相層析管柱、254nm波長(zhǎng)、0.4ml/分的流速、流動(dòng)相為甲醇：0.02M磷酸鉀(15：85)，注入體積為20μL。

取0.1公克的樣品粉末裝入離心管中，加入5毫升的甲醇溶液，先以100℃的沸水進(jìn)行萃取，以7000rpm的轉(zhuǎn)速離心10分鐘，再取1.5毫升進(jìn)行離心(7000rpm，10分鐘)，以0.22μm濾膜過(guò)濾。將濾液通過(guò)高效液相層析儀對(duì)冬 蟲夏草甲醇萃取液進(jìn)行定性與定量分析，而分析條件與標(biāo)準(zhǔn)品的分析條件相同。通過(guò)該蟲草素及腺苷的標(biāo)準(zhǔn)線，能獲得得到該樣品中蟲草素及腺苷的含量。

實(shí)施例四：檢測(cè)甘露醇的含量

取樣品粉末0.25公克于離心管中，加入100毫升蒸餾水，以80℃恒溫水槽加熱，約1小時(shí)后，以轉(zhuǎn)速7000rpm離心10分鐘，取上清液1毫升分置于不同離心管中，再將裝有1毫升上清液的離心管內(nèi)加入1毫升的高碘酸鈉溶液，混合均勻，在室溫中靜置10分鐘后，加入0.1％的L-鼠李糖2毫升，混合后再加入4毫升新配Nash試劑，混合均勻，放入53℃恒溫水槽中加熱至變色，冷卻到室溫時(shí)，在波長(zhǎng)415nm的條件下以分光光度計(jì)測(cè)量其吸收值，通過(guò)圖3所示檢量線，換算出該樣品中甘露醇的濃度值。

實(shí)施例五：光照試驗(yàn)(一)

依據(jù)實(shí)施例二所述，將制備好的培養(yǎng)基置入一培養(yǎng)容器中。將實(shí)施例一的該冬蟲夏草種菌以接菌量20％接入各該培養(yǎng)容器中，分別于溫度20℃、濕度70～80％，進(jìn)行黑暗培養(yǎng)，待菌絲體長(zhǎng)滿培養(yǎng)基表面后，再培養(yǎng)至一固定培養(yǎng)周數(shù)：4周、5周、6周、7周、8周、9周，而該固定培養(yǎng)周數(shù)作為光照起始點(diǎn)，用以后續(xù)進(jìn)行不同周數(shù)的光照，其中，光照為日光燈白光，強(qiáng)度為300～500lux，光照時(shí)間分別為4周、8周、12周。最后，分別采集于各該固定培養(yǎng)周數(shù)經(jīng)不同光照時(shí)間的冬蟲夏草菌體，經(jīng)45℃的溫度烘干，磨粉檢測(cè)其內(nèi)腺苷、蟲草素、甘露醇的含量，結(jié)果如圖4至圖12所示。

由圖4至圖12的結(jié)果可知，光照時(shí)間的長(zhǎng)短及光照起始點(diǎn)會(huì)影響到冬蟲夏草內(nèi)活性成份的含量，其中：

由圖4的結(jié)果顯示，在固定培養(yǎng)周數(shù)(即光照起始點(diǎn))為第4、5、6周時(shí)分別進(jìn)行光照周數(shù)為4周，冬蟲夏草內(nèi)的甘露醇含量緩慢成長(zhǎng)。而在固定培養(yǎng)周數(shù)(即光照起始點(diǎn))為第7周，進(jìn)行光照4周后，會(huì)使冬蟲夏草菌株內(nèi)的甘露醇大幅成長(zhǎng)，并且，隨著光照起始點(diǎn)的周數(shù)增加，甘露醇含量也增加，在第9周開始進(jìn)行光照4周，使冬蟲夏草菌株內(nèi)的甘露醇含量為最高。

由圖5的結(jié)果顯示，在固定培養(yǎng)周數(shù)為4及5周時(shí)分別給予8周光照，冬蟲夏草內(nèi)的甘露醇含量于培養(yǎng)前期緩慢成長(zhǎng)。當(dāng)在固定培養(yǎng)周數(shù)為第6周進(jìn)行光照8周后，冬蟲夏草菌株內(nèi)的甘露醇開始快速生長(zhǎng)，而當(dāng)在固定培養(yǎng)周數(shù)為第9周時(shí)給予冬蟲夏草進(jìn)行光照8周，使得冬蟲夏草的生理活性下降。

請(qǐng)?jiān)賲㈤唸D6，在固定培養(yǎng)周數(shù)為第4及5周分別進(jìn)行光照12周，冬蟲夏草內(nèi)的甘露醇含量持續(xù)成長(zhǎng)，而在固定培養(yǎng)周數(shù)第6、7、8、9周分別開始進(jìn)行12周 光照，其內(nèi)甘露醇含量持續(xù)減少。

綜合圖4至圖6的結(jié)果顯示，在固定培養(yǎng)周數(shù)第6周開始進(jìn)行光照，能使冬蟲夏草內(nèi)甘露醇的含量增加，其中，又以提供光照時(shí)間為8周能夠使冬蟲夏草內(nèi)具有最高甘露醇含量，濃度約為181.55mg/g。

由圖7的結(jié)果可知，在固定培養(yǎng)周數(shù)為4、5、6周時(shí)分別給予4周光照，會(huì)使冬蟲夏草內(nèi)的腺苷含量增加，而在固定培養(yǎng)周數(shù)為第7、8、9周時(shí)分別給予光照4周后，會(huì)使冬蟲夏草內(nèi)腺苷含量隨著固定培養(yǎng)周數(shù)增加而減少。

由圖8的結(jié)果可知，在光照時(shí)間為8周時(shí)，隨著固定培養(yǎng)周數(shù)的增加，冬蟲夏草內(nèi)的腺苷含量逐漸減少，其中，又以固定培養(yǎng)周數(shù)為第9周時(shí)，冬蟲夏草內(nèi)線苷含量為最低。而由圖9的結(jié)果可知，在光照時(shí)間為12周時(shí)，隨著固定培養(yǎng)周數(shù)的增加，冬蟲夏草內(nèi)的腺苷含量緩慢減少，并且，在固定培養(yǎng)周數(shù)為第9周時(shí)，冬蟲夏草內(nèi)腺苷含量為最低。

綜合圖7至圖9的結(jié)果顯示，在固定培養(yǎng)周數(shù)第5周開始進(jìn)行光照，使冬蟲夏草內(nèi)腺苷含量增加，其中，又以提供光照4周能夠使冬蟲夏草內(nèi)具有最高腺苷含量，濃度約為120.50μg/g。

由圖10的結(jié)果可知，當(dāng)光照時(shí)間為4周時(shí)，在固定培養(yǎng)周數(shù)為4及5周時(shí)給予光照，能使冬蟲夏草內(nèi)的蟲草素含量增加，而在固定培養(yǎng)周數(shù)為第6、7、8、9周時(shí)給予光照，會(huì)使冬蟲夏草內(nèi)蟲草素含量隨著固定培養(yǎng)周數(shù)的增加而減少。

由圖11的結(jié)果可知，當(dāng)光照時(shí)間為8周時(shí)，在固定培養(yǎng)周數(shù)為4、5、6周時(shí)給予光照，能使冬蟲夏草內(nèi)的蟲草素含量增加，而在固定培養(yǎng)周數(shù)為第7、8、9周時(shí)給予光照，會(huì)使冬蟲夏草內(nèi)蟲草素含量減少，并且，在固定培養(yǎng)周數(shù)為第9周時(shí)，冬蟲夏草內(nèi)的蟲草素含量為最低。

由圖12的結(jié)果可知，在固定培養(yǎng)周數(shù)第4、5周分別給予光照12周時(shí)，會(huì)使冬蟲夏草內(nèi)蟲草素的含量下降，而在固定培養(yǎng)周數(shù)第6周時(shí)給予光照12周后，冬蟲夏草內(nèi)蟲草素含量大幅提升。在固定培養(yǎng)周數(shù)第7、8、9周給予光照12周后，冬蟲夏草內(nèi)蟲草素含量會(huì)開始下降。

由圖10至圖12的結(jié)果顯示，在固定培養(yǎng)周數(shù)為第6周時(shí)提供光照能使冬蟲夏草內(nèi)蟲草素的含量增加，其中，以光照時(shí)間為第8周時(shí)能夠獲得最高量的蟲草素，約為1589.00(μg/g)。

實(shí)施例六：光照試驗(yàn)(二)

依據(jù)實(shí)施例二所述，將制備好的培養(yǎng)基分別置入兩個(gè)培養(yǎng)容器中，再將實(shí)施例一的該冬蟲夏草種菌以接菌量20％分別接入各該培養(yǎng)容器中，各該組冬蟲 夏草分別于溫度20℃、濕度70～80％及下列光照條件下進(jìn)行培養(yǎng)，其中，第一組連續(xù)8周靜置于暗室中進(jìn)行培養(yǎng)；第二組前4周在暗室中培養(yǎng)，后4周在強(qiáng)度300～500lux的光照下進(jìn)行培養(yǎng)。待各組培養(yǎng)完成后，分別取樣檢測(cè)其內(nèi)腺苷、蟲草素、甘露醇的含量，結(jié)果如圖13所示。

由圖13的結(jié)果可知，相較于第一組，第二組冬蟲夏草的菌絲量多約0.15克，腺苷含量下降約46.67μg/g，甘露醇含量下降約44.05mg/g，蟲草素含量大幅增加約455.17μg/g。由此可知，在冬蟲夏草的固態(tài)培養(yǎng)過(guò)程中提供光照有利于促進(jìn)其菌絲體的生長(zhǎng)及合成蟲草素。

實(shí)施例七：光照試驗(yàn)(三)

依據(jù)實(shí)施例二所述，將制備好的培養(yǎng)基分別置入三培養(yǎng)容器中，再將實(shí)施例一的該冬蟲夏草種菌以接菌量20％分別接入各該培養(yǎng)容器中，各該組冬蟲夏草分別在溫度20℃、濕度70～80％及下列光照條件下進(jìn)行培養(yǎng)，其中，第一組連續(xù)12周靜置于暗室中進(jìn)行培養(yǎng)；第二組前8周在暗室中培養(yǎng)，后4周在強(qiáng)度300～500lux的光照下進(jìn)行培養(yǎng)；第三組前4周在暗室中培養(yǎng)，后8周在強(qiáng)度300～500lux的光照下進(jìn)行培養(yǎng)。待各組培養(yǎng)完成后，分別取樣檢測(cè)其內(nèi)腺苷、蟲草素、甘露醇的含量，結(jié)果如圖14所示。

由圖14的結(jié)果可知，第一組冬蟲夏草內(nèi)甘露醇的含量分別高于第二組及第三組24.31mg/g及27.70mg/g，并且，其腺苷的含量分別高于第二組及第三組53.83μg/g及135.33μg/g。而第二組及第三組冬蟲夏草的菌絲量明顯高于第一組。第三組冬蟲夏草內(nèi)的蟲草素含量為三組中最高，約為第二組的1.63倍，第一組的2倍多，具體來(lái)說(shuō)，第三組的蟲草素含量高于第二組約441.00μg/g且高于第一組約588.83μg/g。

由此可知，光照確實(shí)對(duì)于冬蟲夏草生產(chǎn)蟲草素及其菌絲體生長(zhǎng)有幫助，并且，隨著光照時(shí)間增加，能夠有效提升蟲草素的生產(chǎn)及菌絲體的生長(zhǎng)。

實(shí)施例八：光照試驗(yàn)(四)

依據(jù)實(shí)施例二所述，將制備好的培養(yǎng)基分別置入四個(gè)培養(yǎng)容器中，再將實(shí)施例一的該冬蟲夏草種菌以接菌量20％分別接入各該培養(yǎng)容器中，各該組冬蟲夏草分別在溫度20℃、濕度70～80％及下列光照條件下進(jìn)行培養(yǎng)，其中，第一組連續(xù)16周靜置于暗室中進(jìn)行培養(yǎng)；第二組前12周在暗室中培養(yǎng)，后4周在強(qiáng)度300～500lux的光照下進(jìn)行培養(yǎng)；第三組前8周在暗室中培養(yǎng)，后8周在強(qiáng)度300～500lux的光照下進(jìn)行培養(yǎng)；第四組前4周在暗室中培養(yǎng)，后12周在強(qiáng)度300～500lux的光照下進(jìn)行培養(yǎng)。待各組培養(yǎng)完成后，分別取樣檢測(cè)其內(nèi)腺苷、蟲草 素、甘露醇的含量，結(jié)果如圖15所示。

由圖15的結(jié)果可知，就菌絲總量來(lái)說(shuō)，第一組為最低，第二組為次低，第三組及第四組的菌絲量明顯增加。就甘露醇含量來(lái)說(shuō)，隨著光照時(shí)間增加，甘露醇含量逐漸下降，因此，第一組的甘露醇含量為最高，而分別高于第二組、第三組及第四組10.81mg/g、30.50mg/g及37.27mg/g。就腺苷來(lái)說(shuō)，第一組具有最高量的腺苷，第一組腺苷含量分別高于第二組、第三組及第四組42.67μg/g、142.00μg/g、147.95μg/g。第四組的蟲草素含量為最高，而為第一組的兩倍多，并且，第四組的蟲草素含量分別高于第一組、第二組及第三組673.85μg/g、445.17μg/g及271.00μg/g。

由此可知，在冬蟲夏草固態(tài)培養(yǎng)過(guò)程中提供光照，能夠提升冬蟲夏草蟲草素及菌絲的生長(zhǎng)，并且，隨著光照時(shí)間的增加，蟲草素及菌絲的生長(zhǎng)效率會(huì)越佳。

通過(guò)上述實(shí)施例的說(shuō)明，能清楚證實(shí)本發(fā)明所揭冬蟲夏草的培養(yǎng)方法具有提高冬蟲夏草生長(zhǎng)效率及特定活性成份含量，而能夠有效地改善野生冬蟲夏草生長(zhǎng)緩慢的缺點(diǎn)。換言之，本發(fā)明所揭冬蟲夏草的培養(yǎng)方法能以人工固態(tài)培養(yǎng)方式大量且穩(wěn)定地獲得冬蟲夏草，并且，使所培養(yǎng)出的冬蟲夏草的成份及組成類似于野生冬蟲夏草，而能夠達(dá)到降低生產(chǎn)成本，提供經(jīng)濟(jì)效益等功效。

以上僅是通過(guò)各該實(shí)施例詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明，熟知該技術(shù)領(lǐng)域者在不脫離本發(fā)明精神下，而對(duì)于說(shuō)明書中的實(shí)施例所做的任何簡(jiǎn)單修改或是變化，均應(yīng)為本案權(quán)利要求所涵蓋。