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來自蘇云金桿菌的AXMI477、AXMI482、AXMI486和AXMI525毒素基因及其使用方法與流程

文檔序號:11849956閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種重組核酸分子,該重組核酸分子包括核苷酸序列,該核苷酸序列編碼具有殺有害生物活性的氨基酸序列,其中所述核苷酸序列選自下組,該組由以下各項組成:

a)在SEQ ID NO:1-4中列出的核苷酸序列;

b)核苷酸序列,其對包含SEQ ID NO:5-26中任一項的氨基酸序列的多肽進行編碼;

c)核苷酸序列,其對包含與SEQ ID NO:5-26中任一項的氨基酸序列具有至少95%序列一致性的氨基酸序列的多肽進行編碼。

2.如權(quán)利要求1所述的重組核酸分子,其中所述核苷酸序列是已經(jīng)被設(shè)計為用于在植物中表達(dá)的合成序列。

3.如權(quán)利要求1所述的重組核酸分子,其中所述核苷酸序列被可操作地連接至啟動子,該啟動子能夠指導(dǎo)所述核苷酸序列在植物細(xì)胞中表達(dá)。

4.一種包括如權(quán)利要求1所述的重組核酸分子的載體。

5.如權(quán)利要求4所述的載體,該載體進一步包括編碼異源多肽的核酸分子。

6.一種包括如權(quán)利要求1所述的重組核酸的宿主細(xì)胞。

7.如權(quán)利要求6所述的宿主細(xì)胞,該宿主細(xì)胞是細(xì)菌宿主細(xì)胞。

8.如權(quán)利要求6所述的宿主細(xì)胞,該宿主細(xì)胞是植物細(xì)胞。

9.一種包括如權(quán)利要求8所述的宿主細(xì)胞的轉(zhuǎn)基因植物。

10.如權(quán)利要求9所述的轉(zhuǎn)基因植物,其中所述植物選自下組,該組由以下各項組成:玉米、高粱、小麥、甘藍(lán)、向日葵、番茄、十字花科植物、胡椒、馬鈴薯、棉花、水稻、大豆、甜菜、甘蔗、煙草、大麥、以及油菜。

11.一種包括如權(quán)利要求1所述的核酸分子的轉(zhuǎn)基因種子。

12.一種具有殺有害生物活性的重組多肽,該多肽選自下組,該組由以下各項組成:

a)包括SEQ ID NO:5-26中任一項的氨基酸序列的多肽;以及

b)包括與SEQ ID NO:5-26中任一項的氨基酸序列具有至少95%序列一致性的氨基酸序列的多肽。

13.如權(quán)利要求12所述的多肽,該多肽進一步包括異源氨基酸序列。

14.一種包括如權(quán)利要求12所述的多肽的組合物。

15.如權(quán)利要求14所述的組合物,其中所述組合物選自下組,該組由以下各項組成:粉末、塵劑、小丸、顆粒、噴霧劑、乳液、膠體、以及溶液。

16.如權(quán)利要求14所述的組合物,其中所述組合物是通過將細(xì)菌細(xì)胞的培養(yǎng)物進行脫水、凍干、均質(zhì)化、提取、過濾、離心、沉降、或濃縮而制備的。

17.如權(quán)利要求14所述的組合物,該組合物包含按重量計從大約1%至大約99%的所述多肽。

18.一種用于控制鱗翅目、半翅目、鞘翅目、線蟲、或雙翅目有害生物群體的方法,該方法包括使所述群體與殺有害生物有效量的如權(quán)利要求12所述的多肽接觸。

19.一種用于殺死鱗翅目、半翅目、鞘翅目、線蟲、或雙翅目有害生物的方法,該方法包括使所述有害生物接觸或向所述有害生物喂食殺有害生物有效量的如權(quán)利要求12所述的多肽。

20.一種用于生產(chǎn)具有殺有害生物活性的多肽的方法,該方法包括在使編碼該多肽的核酸分子表達(dá)的條件下培養(yǎng)如權(quán)利要求6所述的宿主細(xì)胞。

21.一種植物或植物細(xì)胞,該植物或植物細(xì)胞已經(jīng)將DNA構(gòu)建體穩(wěn)定地合并到它的基因組中,該DNA構(gòu)建體包括對具有殺有害生物活性的蛋白質(zhì)進行編碼的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列選自下組,該組由以下各項組成:

a)在SEQ ID NO:1-4中列出的核苷酸序列;

b)核苷酸序列,其對包含SEQ ID NO:5-26中任一項的氨基酸序列的多肽進行編碼;以及

c)核苷酸序列,其對包含與SEQ ID NO:5-26中任一項的氨基酸序列具有至少95%序列一致性的氨基酸序列的多肽進行編碼。

22.一種用于保護植物免受有害生物侵害的方法,該方法包括在植物或其細(xì)胞中表達(dá)對殺有害生物多肽進行編碼的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列選自下組,該組由以下各項組成:

a)在SEQ ID NO:1-4中列出的核苷酸序列;

b)核苷酸序列,其對包含SEQ ID NO:5-26中任一項的氨基酸序列的多肽進行編碼;以及

c)核苷酸序列,其對包含與SEQ ID NO:5-26中任一項的氨基酸序列具有至少95%序列一致性的氨基酸序列的多肽進行編碼。

23.如權(quán)利要求22所述的方法,其中所述植物產(chǎn)生殺有害生物多肽,該殺有害生物多肽具有針對鱗翅目、半翅目、鞘翅目、線蟲、或雙翅目有害生物的殺有害生物活性。

24.一種用于增加植物的產(chǎn)量的方法,該方法包括在田地中使已經(jīng)將DNA構(gòu)建體穩(wěn)定合并到它的基因組中的植物或其種子生長,該DNA構(gòu)建體包括對具有殺有害生物活性的蛋白質(zhì)進行編碼的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列選自下組,該組由以下各項組成:

a)在SEQ ID NO:1-4中列出的核苷酸序列;

b)核苷酸序列,其對包含SEQ ID NO:5-26中任一項的氨基酸序列的多肽進行編碼;以及

c)核苷酸序列,其對包含與SEQ ID NO:5-26中任一項的氨基酸序列具有至少95%序列一致性的氨基酸序列的多肽進行編碼;

其中所述田地被有害生物侵染,所述多肽具有針對該有害生物的殺有害生物活性。

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