抗病毒化合物相關(guān)申請的交叉引用依據(jù)35U.S.C.§119(e)，本申請要求2012年12月21日提交的美國臨時申請系列No.61/745,452的權(quán)益和2013年3月14日提交的美國申請系列No.13/830,346的優(yōu)先權(quán)，將其全部內(nèi)容通過引用并入本文中。

背景技術(shù)：
丙肝被認(rèn)為是一種特征在于肝病的慢性肝臟病毒性疾病。盡管靶向肝臟的藥物廣泛使用并且顯示出效力，但毒性和其他副作用限制了其實用性。丙肝病毒(HCV)的抑制劑用于限制HCV感染的建立和進(jìn)展以及用于HCV的診斷試驗中。對新的HCV治療劑存在著需求。特別地，對具有廣泛地對抗HCV基因型(例如，基因型1a、1b、2a、3a、4a)的活性的HCV治療劑存在著需求。對不易于產(chǎn)生病毒耐藥性的藥劑也存在特別的需求。在AntimicrobialAgentsandChemotherapy(抗微生物劑和化療)，2010年9月，第54卷，p.3641-3650中描述了用于基因型1a和1b的HCNS5A的抑制劑的耐藥性突變。

技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明提供了用于治療丙肝(HCV)的藥物組合物和方法中的化合物。特別地，本文中提供了具有多環(huán)核心和至少一個2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基、4-甲基四氫-2H-吡喃-4-基或四氫-2H-吡喃-3-基封端基團(tuán)的化合物，該化合物呈現(xiàn)出有益的特性，如，例如，增強(qiáng)的生物利用率和/或增強(qiáng)的對抗特定HCV基因型的活性，包括但不限于，其已知的耐藥性突變(參見，例如，表1、2A和2B)。在一個實施方案中，本發(fā)明提供通式(I)的化合物：E1a-V1a–C(＝-P1a-O)W1a-P1b-C(＝O)-V1b-E1b(I)其中：W1a是：和W1a可選被一個或多個鹵素、烷基、鹵代烷基、可選取代的芳基、可選取代的雜環(huán)或氰基取代；Y5是-O-CH2-、-CH2-O-、-O-C(＝O)-或-C(＝O)-O-；X5是-CH2-CH2-或-CH＝CH-；P1a和P1b各自獨立是：V1a和V1b各自獨立地是：條件是V1a和V1b中的至少一個是E1a和E1b各自獨立地是-N(H)(烷氧基羰基)、-N(H)(環(huán)烷基羰基)或-N(H)(環(huán)烷氧基羰基)；或E1a-V1a合在一起是R9a；或E1b-V1b合在一起是R9b；和R9a和R9b各自獨立地是：或其藥物學(xué)上可接受的鹽或前藥。本發(fā)明還提供了是本發(fā)明化合物的同位素富集化合物，所述本發(fā)明化合物在化合物的一個或多個位置上包含富集的同位素。本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，其包含本發(fā)明的化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽或前藥和至少一種藥物學(xué)上可接受的載體。本發(fā)明還提供了一種用于治療丙肝(HCV)的藥物組合物。在一個實施方案中，該組合物包含至少一種用于治療HCV的附加治療劑。在一個實施方案中，該治療劑選自病毒唑、NS3蛋白酶抑制劑、HCVNS5B聚合酶的核苷或核苷酸抑制劑、α-葡糖苷酶1抑制劑、保肝藥、HCV聚合酶的非核苷抑制劑，或其組合。在一個實施方案中，所述組合物進(jìn)一步包含HCVNS5B聚合酶的核苷或核苷酸抑制劑。在一個實施方案中，HCVNS5B聚合酶的核苷或核苷酸抑制劑選自病毒唑、鹽酸塔利韋林(viramidine)、左旋韋林(levovirin)、L-核苷或艾沙托立賓(isatoribine)。在一個實施方案中，提供了一種藥物組合物，其包含在此所述的化合物和至少一種HCVNS5B聚合酶的核苷或核苷酸抑制劑，以及至少一種藥物學(xué)上可接受的載體。在一個實施方案中，該組合物進(jìn)一步包含干擾素、PEG化干擾素、病毒唑或其組合。在一個實施方案中，HCVNS5B聚合酶的核苷或核苷酸抑制劑是索非布韋(sofosbuvir)。在一個實施方案中，提供了一種藥物組合物，其包含本文中所述的化合物和至少一種NS3蛋白酶抑制劑，和至少一種藥物學(xué)上可接受的載體。在一個實施方案中，組合物進(jìn)一步包含索非布韋。本發(fā)明還提供了進(jìn)一步包含干擾素或PEG化干擾素的藥物組合物。本發(fā)明還提供了進(jìn)一步包含核苷類似物的藥物組合物。本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，其中所述核苷類似物選自病毒唑、鹽酸塔利韋林、左旋韋林、L-核苷或艾沙托立賓，并且所述干擾素是α-干擾素或PEG化α-干擾素。本發(fā)明還提供了一種治療丙肝的方法，所述方法包括將包含治療有效量的本發(fā)明的化合物的藥物組合物給藥于人類患者。本發(fā)明還提供了一種抑制HCV的方法，包括將有效抑制HCV含量的本發(fā)明的化合物給藥于患有與HCV活性相關(guān)病癥的哺乳動物。本發(fā)明還提供了用于醫(yī)療(例如，用于抑制HCV活性或治療與HCV活性相關(guān)的病癥)的本發(fā)明的化合物，以及本發(fā)明的化合物用于制造用于抑制哺乳動物中的HCV或治療與HCV活性相關(guān)病癥的藥物的用途。本發(fā)明還提供了合成方法和在此公開的新中間產(chǎn)物，其用于制備本發(fā)明的化合物。本發(fā)明的一些化合物用于制備本發(fā)明的其他化合物。在另一個方面中，本發(fā)明提供了一種本發(fā)明的化合物，或其藥物學(xué)上可接受的鹽或前藥，用于丙肝或丙肝相關(guān)疾病的預(yù)防性或治療性處理。在另一個方面中，本發(fā)明提供了一種抑制樣本中HCV活性的方法，包括用本發(fā)明的化合物處理樣本。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)通式(I)的化合物具有有用的對抗HCV基因型的活性。另外，通式(I)的特定化合物具有顯著的對抗GT1中的耐藥性變體的功效。具體實施方式現(xiàn)在將詳細(xì)參照本發(fā)明的特定實施方案，在附帶的結(jié)構(gòu)和通式中說明了其實例。盡管將結(jié)合列舉的實施方案來描述本發(fā)明，但將理解它們不是用來將本發(fā)明限于那些實施方案。相反，本發(fā)明用來涵蓋所有替換、改變和等價物，其被包括在實施方案限定的本發(fā)明的范圍內(nèi)?；衔飳υ诖说耐ㄊ?I)限定的“P”基團(tuán)(例如，P1a和P1b)具有一個連接通式(I)的-C(＝O)-的鍵，一個連接W1a基團(tuán)的鍵。將理解P基團(tuán)的氮連接通式(I)的-C(＝O)-基團(tuán)并且P基團(tuán)的碳連接W1a基團(tuán)。在W1a基團(tuán)中，存在Y5基團(tuán)。將Y5基團(tuán)限定為-O-CH2-或-CH2-O-基團(tuán)時，那些Y5基團(tuán)具有方向性。Y5基團(tuán)連接W1a基團(tuán)，每個W1a基團(tuán)的繪制都是相同的從左到右方向。因此，例如，當(dāng)Y5是-O-CH2-時，直接確定為以下的結(jié)構(gòu)：例如，當(dāng)Y5是-CH2-O-時，直接確定為以下的結(jié)構(gòu)：在結(jié)構(gòu)I中，W1a基團(tuán)具有如I中所示的從左至右的方向，并且W1a如所繪制的。E1a-V1a–C(＝O)-P1a-W1a-P1b-C(＝O)-V1b-E1b(I)其中：W1a是例如，P1a基團(tuán)連接W1a的咪唑基團(tuán)，而P1b基團(tuán)連接W1a的五環(huán)系統(tǒng)。“烷基”是含有正、仲、叔或環(huán)碳原子的C1-C18烴。實例是甲基(Me，-CH3)、乙基(Et、-CH2CH3)、1-丙基(n-Pr、n-丙基、-CH2CH2CH3)、2-丙基(i-Pr、i-丙基、-CH(CH3)2)、1-丁基(n-Bu、n-丁基、-CH2CH2CH2CH3)、2-甲基-1-丙基(i-Bu、i-丁基、-CH2CH(CH3)2)、2-丁基(s-Bu、s-丁基、-CH(CH3)CH2CH3)、2-甲基-2-丙基(t-Bu、t-丁基、-C(CH3)3)、1-戊基(n-戊基、-CH2CH2CH2CH2CH3)、2-戊基(-CH(CH3)CH2CH2CH3)、3-戊基(-CH(CH2CH3)2)、2-甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH2CH3)、3-甲基-2-丁基(-CH(CH3)CH(CH3)2)、3-甲基-1-丁基(-CH2CH2CH(CH3)2)、2-甲基-1-丁基(-CH2CH(CH3)CH2CH3)、1-己基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH3)、2-己基(-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3)、3-己基(-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3))、2-甲基-2-戊基(-C(CH3)2CH2CH2CH3)、3-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3)、4-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH2CH(CH3)2)、3-甲基-3-戊基(-C(CH3)(CH2CH3)2)、2-甲基-3-戊基(-CH(CH2CH3)CH(CH3)2)、2,3-二甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH(CH3)2)、3,3-二甲基-2-丁基(-CH(CH3)C(CH3)3)和環(huán)丙基甲基“烯基”是含有正、仲、叔或碳原子的具有至少一個不飽和位點(即，碳-碳sp2雙鍵)的C2-C18烴。實例包括，但不限于，乙烯(ethylene)或乙烯基(vinyl)(-CH＝CH2)、烯丙基(-CH2CH＝CH2)、環(huán)戊烯基(-C5H7)和5-己烯基(-CH2CH2CH2CH2＝CH2)?！叭不笔呛姓?、仲、叔或碳原子的具有至少一個不飽和位點(即，碳-碳sp三鍵)的C2-C18烴。實例包括，但不限于，乙炔基(-C≡CH)和炔丙基(-CH2C≡CH)?！巴閾巍敝傅氖?-18個碳原子的飽和、支鏈或直鏈或環(huán)狀烴殘基，并且具有兩個通過從母體鏈烷的相同或兩個不同碳原子除去兩個氫原子產(chǎn)生的單價根心。通常的烷撐殘基包括，但不限于，亞甲基(-CH2-)、1,2-乙基(-CH2CH2-)、1,3-丙基(-CH2CH2CH2-)、1,4-丁基(-CH2CH2CH2CH2-)等?！皝喯┗?alkenylene)”指的是2-18個碳原子的不飽和、支鏈或直鏈或環(huán)狀烴殘基，并且具有兩個通過從母體烯烴的相同或兩個不同碳原子除去兩個氫原子產(chǎn)生的單價根心。通常的亞烯基殘基包括，但不限于，1,2-乙烯(-CH＝CH-)?！皝喨不?alkynylene)”指的是2-18個碳原子的不飽和、支鏈或直鏈或環(huán)狀烴殘基，并且具有兩個通過從母體炔烴的相同或兩個不同碳原子除去兩個氫原子產(chǎn)生的單價根心。通常的亞炔基殘基包括，但不限于，乙炔基(-C≡C-)、炔丙基(-CH2C≡C-)和4-戊炔基(-CH2CH2CH2C≡CH)。如在此所用的術(shù)語“烷氧基(alkoxy)”或“烷基氧(alkyloxy)”指的是通過氧原子連接母體分子部分的烷基。如在此所用的術(shù)語“烷氧基羰基”指的是通過羰基連接母體分子部分的烷氧基。如在此所用的術(shù)語“環(huán)烷基”指的是具有三至七個碳原子和零個雜原子的飽和單環(huán)、烴環(huán)系統(tǒng)。環(huán)烷基基團(tuán)的代表性實例包括，但不限于，環(huán)丙基、環(huán)戊基和環(huán)己基。本發(fā)明的環(huán)烷基可選被一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自烷氧基、烷基、芳基、氰基、鹵素、鹵代烷氧基、鹵代烷基、雜環(huán)基、羥基、羥烷基、硝基和-NRxRy的取代基取代，其中芳基和雜環(huán)基進(jìn)一步可選被一個、兩個或三個獨立地選自烷氧基、烷基、氰基、鹵素、鹵代烷氧基、鹵代烷基、羥基和硝基的取代基取代。如在此所用的術(shù)語“環(huán)烷基羰基”指的是通過羰基基團(tuán)連接母體分子部分的環(huán)烷基基團(tuán)。如在此所用的術(shù)語“環(huán)烷氧基”指的是通過氧原子連接母體分子部分的環(huán)烷基基團(tuán)。如在此所用的術(shù)語“環(huán)烷氧基羰基”指的是通過羰基基團(tuán)連接母體分子部分的環(huán)烷氧基基團(tuán)?！胺蓟币馑际峭ㄟ^從母體芳香環(huán)系統(tǒng)的單個碳原子除去一個氫原子產(chǎn)生的6-20個碳原子的單價芳香烴殘基。通常的芳基基團(tuán)包括，但不限于，源自苯的殘基、取代的苯、萘、蒽、聯(lián)苯等?！胺纪榛敝傅氖瞧渲幸粋€氫原子鍵合碳原子的無環(huán)烷基殘基，通常末端或sp3碳原子被芳基殘基替代。通常的芳烷基基團(tuán)包括，但不限于，芐基、2-苯乙烷-1-基、2-萘乙烷-1-基、萘并芐基、2-萘并苯乙烷-1-基等。芳烷基基團(tuán)包含6至20個碳原子，例如，芳烷基基團(tuán)的烷基部分(包括鏈烷基、烯基或炔基基團(tuán))是1至6個碳原子，而芳基部分是5至14個碳原子。“取代的烷基”、“取代的芳基”和“取代的芳烷基”意思是各自其中的一個或多個氫原子分別獨立地被非氫取代基替代的烷基、芳基和芳烷基。通常的取代基包括，但不限于：鹵素(例如，F(xiàn)、Cl、Br、I)、-R、-OR、-SR、-NR2、-CF3、-CCl3、-OCF3、-CN、-NO2、-N(R)C(＝O)R、-C(＝O)R、-OC(＝O)R、-C(O)OR、-C(＝O)NRR、-S(＝O)R、-S(＝O)2OR、-S(＝O)2R、-OS(＝O)2OR、-S(＝O)2NRR，并且每個R獨立地是H、烷基、芳基、芳烷基或雜環(huán)。烷撐、亞烯基和亞炔基基團(tuán)也可以被相似地替代。關(guān)于通式I的化合物的特定部分的術(shù)語“可選取代的”(例如，可選取代的芳基)指的是具有0、1、2或多個取代基的部分。環(huán)結(jié)構(gòu)中的符號意思是單或雙鍵的鍵。在非限制性實例中，可以是如本文所用的“鹵代烷基”包括被一個或多個鹵素(例如，F(xiàn)、Cl、Br、I)取代的烷基基團(tuán)。鹵代烷基的代表性實例包括三氟甲基、2,2,2-三氟乙基和2,2,2-三氟-1-(三氟甲基)乙基。如本文所用的“雜環(huán)”或“雜環(huán)基”包括，只是舉例并不是限于Paquette，LeoA.；現(xiàn)代雜環(huán)化學(xué)原理(PrinciplesofModernHeterocyclicChemistry)(W.A.Benjamin，NewYork，1968)，特別是第1、3、4、6、7和9章；雜環(huán)化合物化學(xué)，專著系列(TheChemistryofHeterocyclic實施例ounds,ASeriesofMonographs)”(JohnWiley&Sons，NewYork，1950至今)，特別是第13、14、16、19和28卷；和J.Am.Chem.Soc.(1960)82:5566中描述的這些雜環(huán)。在一個特定的實施方案中，“雜環(huán)”包括如如本文中所定義的“碳環(huán)”，其中一個或多個(例如，1、2、3或4)碳原子已經(jīng)被雜原子(例如，O、N或S)替代。術(shù)語雜環(huán)還包括其是雜環(huán)的“雜芳基”，其中至少一個雜環(huán)是芳香族的。雜環(huán)的實例包括，只是舉例并不限于吡啶基、二氫吡啶基、四氫吡啶基(哌啶基)、噻唑基、四氫苯硫基、硫氧化的四氫苯硫基、嘧啶基、呋喃基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、四唑基、苯并呋喃基、硫代萘基、吲唑基、吲哚烯基(indolenyl)、喹啉基、異喹啉基、苯并咪唑基、哌啶基、4-哌啶基、吡咯烷基、2-吡咯烷基、吡咯啉基、四氫呋喃基、四氫喹啉基、四氫異喹啉基、十氫喹啉基、八氫異喹啉基、吖辛基(azocinyl)、三嗪基、6H-1,2,5-噻二唑基、2H,6H-1,5,2-二噻唑基、噻吩基、噻蒽基、吡喃基、異苯并呋喃基、色滿基、呫噸基、酚黃素基(phenoxathinyl)、2H-吡咯基、異噻唑基、異噁唑基、吡嗪基、噠嗪基、吲嗪基、異吲哚基、3H-吲哚基、1H-吲唑基、嘌呤基、4H-喹嗪基、酞嗪基、萘啶基、喹喔啉基、喹唑啉基、噌啉基、蝶啶基、4H-咔唑基、咔唑基、β-咔啉基、菲啶基、吖啶基、嘧啶基、菲咯啉基、吩嗪基、吩噻嗪基、呋吖基、吩噁嗪基、異苯并二氫吡喃基、苯并二氫吡喃基、咪唑烷基、咪唑啉基、吡唑烷基、吡唑啉基、哌嗪基、二氫吲哚基、異二氫吲哚基、奎寧環(huán)基、嗎啉基、噁唑烷基、苯并三唑基、苯并異噁唑基、羥吲哚基、苯并噁唑啉基、靛紅酰基(isatinoyl)和雙-四氫呋喃基：只是舉例并不是限制，碳鍵合的雜環(huán)在吡啶的2、3、4、5或6位，噠嗪的3、4、5或6位，嘧啶的2、4、5或6位，吡嗪的2、3、5或6位，呋喃、四氫呋喃、硫代呋喃、噻吩、吡咯或四氫吡咯的2、3、4或5位，噁唑、咪唑或噻唑的2、4或5位，異噁唑、吡唑或異噻唑的3、4或5位，氮丙啶的2或3位，氮雜環(huán)丁烷的2、3或4位，喹啉的2、3、4、5、6、7或8位或異喹啉的1、3、4、5、6、7或8位鍵合。更典型地，碳鍵合的雜環(huán)包括2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、5-吡啶基、6-吡啶基、3-噠嗪基、4-噠嗪基、5-噠嗪基、6-噠嗪基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基、6-嘧啶基、2-吡嗪基、3-吡嗪基、5-吡嗪基、6-吡嗪基、2-噻唑基、4-噻唑基或5-噻唑基。只是舉例并不是限制，氮鍵合的雜環(huán)在氮丙啶、氮雜環(huán)丁烷、吡咯、吡咯烷、2-吡咯啉、3-吡咯啉、咪唑、咪唑烷、2-咪唑啉、3-咪唑啉、吡唑、吡唑啉、2-吡唑啉、3-吡唑啉、哌啶、哌嗪、吲哚、二氫吲哚、1H-吲唑的1位，異吲哚或異二氫吲哚的2位，嗎啉的4位和咔唑或β-咔啉的9位鍵合。更典型地，氮鍵合的雜環(huán)包括1-吖啶基(1-aziridyl)、1-氮雜環(huán)丁二烯基(azetedyl)、1-吡咯基、1-咪唑基、1-吡唑基和1-哌啶基?！疤辑h(huán)”指的是具有多達(dá)約25個碳原子的飽和、不飽和或芳香環(huán)。通常，碳環(huán)具有約3至7個碳原子的作為單環(huán)，約7至12個碳原子的作為雙環(huán)，和多達(dá)約25個碳原子的作為多環(huán)。單環(huán)碳環(huán)具有3至6個環(huán)原子，更典型的是5或6個環(huán)原子。雙環(huán)碳環(huán)具有7至12個環(huán)原子，例如排列為雙環(huán)[4,5]、[5,5]、[5，,6]或[6,6]系統(tǒng)；或9或10個環(huán)原子，排列為雙環(huán)[5,6]或[6,6]系統(tǒng)。術(shù)語碳環(huán)包括為飽和或不飽和碳環(huán)的“環(huán)烷基”。單環(huán)碳環(huán)的實例包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、1-環(huán)戊-1-烯基、1-環(huán)戊-2-烯基、1-環(huán)戊-3-烯基、環(huán)己基、1-環(huán)己-1-烯基、1-環(huán)己-2-烯基、1-環(huán)己-3-烯基、苯基、螺環(huán)基(spiryl)和奈基。如在此所用的術(shù)語“氨基”指的是-NH2。術(shù)語“手性的”指的是具有鏡像配偶體的不可重疊性質(zhì)的分子，而術(shù)語“非手性的”指的是在其鏡像配偶體上可重疊的分子。術(shù)語“立體異構(gòu)體”指的是具有同一化學(xué)構(gòu)成，但是原子或基團(tuán)在空間的排列不同的化合物?！胺菍τ钞悩?gòu)體”指的是具有兩個或更多個手性中心并且其分子互相不是鏡像的立體異構(gòu)體。非對映異構(gòu)體具有不同的物理性質(zhì)，例如熔點、沸點、光譜特性質(zhì)和反應(yīng)性。在高分辨率的分析程序(如，電泳和色譜)下，可以分離非對映體的混合物?！皩τ钞悩?gòu)體”指為互相非可重疊鏡像的化合物的兩種立體異構(gòu)體。術(shù)語“治療(treatment)”或“治療中(treating)”在涉及疾病或病癥的范圍中，包括預(yù)防疾病或病癥發(fā)生、抑制疾病或病癥、消除疾病或病癥和/或減輕疾病或病癥的一種或多種癥狀。本文中使用的立體化學(xué)的定義和慣例一般遵循S.P.Parker編輯，McGraw-Hill化學(xué)術(shù)語字典(McGraw-HillDictionaryofChemicalTerms)(1984)，McGraw-HillBook實施例any，NewYork；和Eliel，E.和Wilen，S.，有機(jī)化合物的立體化學(xué)(StereochemistryofOrganic實施例ounds)(1994)，JohnWiley&Sons、Inc.，NewYork。許多有機(jī)化合物以光學(xué)活性形式存在，即，它們具有旋轉(zhuǎn)平面偏振光的平面的能力。在描述光學(xué)活性化合物中，前綴(D和L)或(R和S)被用于指代有關(guān)分子手性中心的分子絕對構(gòu)型。前綴d和l、或(+)和(-)被用于表示平面偏振光被化合物旋轉(zhuǎn)的信號，(-)或l表示化合物是左旋的。前綴為(+)或d的化合物是右旋的。對于給定的化學(xué)構(gòu)造來說，除了它們是互為鏡像之外，這些立體異構(gòu)體是相同的。一種特殊的立體異構(gòu)體也被稱為對映異構(gòu)體，并且這類異構(gòu)體的混合物常被稱作對映異構(gòu)體混合物。對映異構(gòu)體的50:50混合物被稱為外消旋混合物或外消旋物，當(dāng)在化學(xué)反應(yīng)或過程中沒有立體選擇性或立體特異性時，它可以產(chǎn)生。術(shù)語“外消旋混合物”和“外消旋物”是指兩種對映異構(gòu)體物質(zhì)的等摩爾混合物，缺乏旋光性。本發(fā)明包括在此所述化合物的所有立體異構(gòu)體。前藥如在此所用的術(shù)語“前藥”指的是給藥于生物系統(tǒng)時產(chǎn)生本發(fā)明的抑制HCV活性的化合物(“活性抑制化合物”)的任何化合物?？梢宰鳛橐韵碌慕Y(jié)果從前藥形成化合物：(i)自發(fā)的化學(xué)反應(yīng)，(ii)酶催化的化學(xué)反應(yīng)，(iii)光解作用，和/或(iv)代謝化學(xué)反應(yīng)?！扒八幉糠帧敝傅氖窃诖x過程中，全身地、在細(xì)胞內(nèi)，通過水解、酶切割，或通過一些其它過程，從活性抑制性化合物分離出的不穩(wěn)定的官能團(tuán)(Bundgaard，Hans，藥物設(shè)計和研發(fā)教科書(TextbookofDrugDesignandDevelopment)(1991)中的“”前藥的設(shè)計和應(yīng)用(DesignandApplicationofProdrugs)，P.Krogsgaard-Larsen和H.Bundgaard編輯，HarwoodAcademicPublishers，113-191頁)。能夠?qū)Ρ景l(fā)明的前藥化合物產(chǎn)生酶激活機(jī)制的酶包括，但不限于，酰胺酶、酯酶、微生物酶、磷脂酶、膽堿酯酶和磷酸酶。前藥部分可以用于增強(qiáng)溶解度、吸收和親脂性，以優(yōu)化藥物遞送、生物利用度和功效。前藥部分可以包括有活性的代謝物或藥物本身。示例性的前藥部分包括水解敏感的或不穩(wěn)定的酰氧基甲基酯-CH2OC(＝O)R99和酰氧基甲基碳酸酯-CH2OC(＝O)OR99，其中R99是C1-C6烷基、C1-C6取代的烷基、C6-C20芳基或C6-C20取代的芳基。酰氧基烷基酯首先用作羧酸的前藥策略，然后應(yīng)用于磷酸酯和膦酸酯，參見Farquhar等人(1983)J.Pharm.Sci.72：324；以及美國專利No.4816570、4968788、5663159和5792756。隨后，酰氧基烷基酯用于遞送磷酸穿過細(xì)胞膜和增強(qiáng)口服生物利用率。酰氧基烷基酯的一種相近變體，烷氧基羰基氧基烷基酯(碳酸酯)，也可以作為本發(fā)明組合的化合物中的前藥部分來增強(qiáng)口服生物利用率。一種示例性的酰氧基甲基酯是特戊?；趸籽趸?POM)-CH2OC(＝O)C(CH3)3。一種示例性的酰氧基甲基碳酸酯前藥部分是特戊酰氧基甲基碳酸酯(POC)-CH2OC(＝O)OC(CH3)3。保護(hù)基在本發(fā)明的上下文中，保護(hù)劑包括前藥部分和化學(xué)保護(hù)基。“保護(hù)基”指的是掩蔽或改變官能團(tuán)的性質(zhì)或化合物整體的性質(zhì)的化合物部分?；瘜W(xué)保護(hù)基和保護(hù)/去受保護(hù)的策略是本領(lǐng)域公知的。參見：例如，“有機(jī)化學(xué)中的保護(hù)基”(ProtectiveGroupsinOrganicChemistry)，TheodoraW.Greene，JohnWiley&Sons、Inc.，NewYork，1991。保護(hù)基經(jīng)常用于掩蔽某些官能團(tuán)的反應(yīng)性，輔助希望的化學(xué)反應(yīng)的功效，例如，以有序的和有計劃的方式產(chǎn)生和斷裂化學(xué)鍵。除了受保護(hù)的官能團(tuán)的反應(yīng)性以外，化合物官能團(tuán)的保護(hù)會改變其它物理性質(zhì)，例如極性、親脂性(疏水性)和可以通過普通分析工具測量的其它性質(zhì)?；瘜W(xué)上受保護(hù)的中間體本身可以是生物學(xué)上有活性的或無活性的。受保護(hù)的化合物也可以表現(xiàn)出改變的，且在有些情況下，優(yōu)化的體外和體內(nèi)性質(zhì)，例如穿過細(xì)胞膜和對酶降解或螯合的抵抗力。在該作用中，具有預(yù)期療效的受保護(hù)的化合物可以稱作前藥。保護(hù)基的另一個功能是，將母體藥物轉(zhuǎn)化成前藥，由此前藥在體內(nèi)轉(zhuǎn)化后釋放出母體藥物。因為有活性的前藥可以比母體藥物更有效地被吸收，前藥可以具有比母體藥物更大的體內(nèi)效力。在體外(在化學(xué)中間體的情況下)或在體內(nèi)(在前藥的情況下)去除保護(hù)基。利用化學(xué)中間體，在去保護(hù)后得到的產(chǎn)物(例如，醇)是生理上可接受的并不特別重要，盡管如果產(chǎn)物是藥理學(xué)上無害的，通常更希望這樣。保護(hù)基是可用的、通常已知和使用的，并且可選用于防止合成程序(即，制備本發(fā)明化合物的途徑或方法)過程中與受保護(hù)基團(tuán)的副反應(yīng)。對于大部分關(guān)于保護(hù)哪個基團(tuán)、什么時候進(jìn)行的決定和化學(xué)保護(hù)基“PG”的性質(zhì)將取決于保護(hù)所對抗反應(yīng)的化學(xué)性質(zhì)(例如，酸性、堿性、氧化、還原或其他條件)和所確定的合成方向。如果化合物被多個PG取代，PG不需要是，并且通常不是相同的。通常，PG將用于保護(hù)官能團(tuán)，如羧基、羥基、硫代或氨基基團(tuán)，并且因此用于防止副反應(yīng)或用于另外促進(jìn)合成效率。去保護(hù)來產(chǎn)生游離的去保護(hù)基團(tuán)的順序取決于所計劃的合成方向和將遇到的反應(yīng)條件，并且可以以技術(shù)人員確定的任何順序來進(jìn)行?？梢员Ｗo(hù)本發(fā)明的化合物的各種官能團(tuán)。例如，用于-OH基團(tuán)(羥基、羧酸、膦酸或其他官能團(tuán))的保護(hù)基包括“醚-或酯-形成基團(tuán)”。醚-或酯-形成基團(tuán)能夠用于在此所列合成方案中的化學(xué)保護(hù)基。然而，一些羥基和硫代保護(hù)基既不是醚-形成基團(tuán)，也不是酯-形成基團(tuán)，如本領(lǐng)域技術(shù)人員所了解的，并且包括酰胺，以下將討論。多種羥基保護(hù)基以及酰胺-形成基團(tuán)和相應(yīng)的化學(xué)分裂反應(yīng)描述于有機(jī)合成中的保護(hù)基(ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis)，TheodoraW.Greene(JohnWiley&Sons，Inc.，NewYork，1991，ISBN0-471-62301-6)(“Greene”)。還可以參見Kocienski，PhilipJ.；保護(hù)基(ProtectingGroups)(GeorgThiemeVerlagStuttgart，NewYork，1994)，在此將其全部引入作為參考。特別地，第1章，保護(hù)基：綜述(ProtectingGroups:AnOverview)，第1-20頁，第2章，羥基保護(hù)基(HydroxylProtectingGroups)，第21-94頁，第3章，二醇保護(hù)基(DiolProtectingGroups)，第95-117頁，第4章，羧基保護(hù)基(CarboxylProtectingGroups)，第118-154頁，第5章，羰基保護(hù)基(CarbonylProtectingGroups)，第155-184頁。對于用于羧酸、膦酸、膦酸鹽、磺酸的保護(hù)基，和用于酸的其他保護(hù)基，參見以下所列的Greene。立體異構(gòu)體本發(fā)明的化合物可以具有手性中心，例如，手性碳或磷原子。本發(fā)明的化合物因此包括所有立體異構(gòu)體的外消旋混合物，包括對映異構(gòu)體、非對映體和阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體。另外，本發(fā)明的化合物包括在任何或所有的不對稱的手性原子處富集或拆分的旋光異構(gòu)體。換句話說，從描述明顯的手性中心作為手性異構(gòu)體或外消旋的混合物形式來提供。外消旋的和非對映異構(gòu)體的混合物，以及分離或合成的、基本上不含其對映異構(gòu)體或非對映異構(gòu)體配偶體的單獨的旋光異構(gòu)體，都在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。通過公知技術(shù)將外消旋混合物分離成其單獨的、基本上旋光純的異構(gòu)體，所述公知技術(shù)例如，分離與旋光活性助劑(例如，酸或堿)形成的非對映異構(gòu)體的鹽，之后將其轉(zhuǎn)變回旋光活性物質(zhì)。在多數(shù)情況下，從所需原料的適當(dāng)?shù)牧Ⅲw異構(gòu)體開始或通過對映選擇性反應(yīng)，通過立體特異性反應(yīng)，合成所需的旋光異構(gòu)體。在特定的情況中，本發(fā)明的化合物也可以呈現(xiàn)為互變異構(gòu)體。盡管只描繪了一種互變異構(gòu)體，但在本發(fā)明的范圍內(nèi)考慮所有這樣的形式。例如，對于嘌呤、嘧啶、咪唑、胍、脒和四唑系統(tǒng)，存在烯-胺互變異構(gòu)體，并且所有它們可能的互變異構(gòu)形式在本發(fā)明的范圍內(nèi)。鹽和水合物本發(fā)明的化合物的生理上或藥物學(xué)上可接受的鹽的實例包括源自適當(dāng)堿的鹽，所述堿例如堿金屬(例如，鈉)、堿土金屬(例如，鎂)、銨和NX4+(其中X是C1-C4烷基)。氫原子或氨基的生理上可接受的鹽包括：有機(jī)羧酸的鹽，所述有機(jī)羧酸如醋酸、苯甲酸、乳酸、富馬酸、酒石酸、馬來酸、丙二酸、蘋果酸、羥乙磺酸、乳糖酸和琥珀酸；有機(jī)磺酸的鹽，所述有機(jī)磺酸如甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸和p-甲苯磺酸；和無機(jī)酸的鹽，所述無機(jī)酸如鹽酸、硫酸、磷酸和氨基磺酸。羥基化合物的生理上可接受的鹽包括所述化合物的陰離子與諸如Na+和NX4+(其中X獨立地選自H或C1-C4烷基)。對于治療用途，本發(fā)明的化合物的活性成分的鹽通常是生理上可接受的，即，它們是源自生理上可接受的酸或堿的鹽。然而，也可以將不是生理上可接受的酸或堿的鹽用于，例如，制備或純化生理上可接受的化合物。所有鹽，無論是否源自生理上可接受的酸或堿，都在本發(fā)明的范圍內(nèi)。通常通過將金屬氫氧化物與本發(fā)明的化合物反應(yīng)來制備金屬鹽。以這種方式制備的金屬鹽的實例是含有Li+、Na+和K+的鹽?？梢酝ㄟ^加入合適的金屬化合物，將溶解性較低的化合物從溶解性較高的鹽的溶液中沉淀出來。此外，可以從特定的有機(jī)和無機(jī)酸(例如，HCl、HBr、H2SO4、H3PO4)或有機(jī)磺酸的酸加成至堿性中心(通常是胺)或酸性基團(tuán)來形成鹽。最后，將理解本文中的組合物包括未離子化的以及兩性離子形式的本發(fā)明的化合物，以及與水合物中的化學(xué)計量的水結(jié)合。本發(fā)明的范圍內(nèi)還包括母體化合物與一種或多種氨基酸的鹽。任何天然或非天然的氨基酸是合適的，尤其是作為蛋白質(zhì)成分發(fā)現(xiàn)的天然產(chǎn)生的氨基酸，盡管氨基酸通常是帶有具有堿性或酸性基團(tuán)的側(cè)鏈的氨基酸，例如，賴氨酸、精氨酸或谷氨酸，或是帶有具有中性基團(tuán)的側(cè)鏈的氨基酸，如甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、丙氨酸、異亮氨酸或亮氨酸。HCV的抑制方法本發(fā)明的另一個方面涉及抑制HCV活性的方法，包括用本發(fā)明的化合物或組合物處理懷疑含有HCV的樣本的步驟。本發(fā)明的處理步驟包括向所述樣本中添加本發(fā)明的化合物，或它包括向所述樣本中添加所述組合物的前體。添加步驟包括上面描述的任意施用方法。如果需要，通過任何方法，包括直接和間接的檢測HCV活性的方法，可以觀察在施用組合物后的HCV活性。全面考慮了檢測HCV活性的定量、定性和半定量方法。通常，應(yīng)用上述篩選方法之一，然而，也可應(yīng)用任何其它方法，如觀測活生物體的生理性能。許多生物體含有HCV。本發(fā)明的化合物可用于動物或人類中與HCV激活相關(guān)病癥的治療或預(yù)防中。然而，在篩選能夠抑制HCV活性的化合物的過程中，應(yīng)牢記，酶試驗的結(jié)果不可能總是與細(xì)胞培養(yǎng)試驗相關(guān)。因此，基于細(xì)胞的試驗通常應(yīng)為主要的篩選工具。藥物制劑本發(fā)明的化合物用常規(guī)載體和賦形劑配制，它們將按照常規(guī)實踐進(jìn)行選擇。片劑將含有賦形劑、助流劑、填充劑、粘合劑等。含水制劑以無菌的形式制備，并且當(dāng)預(yù)期以口服給藥以外形式遞送時，通常將是等滲的。所有制劑將可選含有賦形劑，如藥物賦形劑手冊(HandbookofPharmaceuticalExcipients)(1986)中列舉的那些。賦形劑包括抗壞血酸和其它抗氧化劑、螯合劑(如EDTA)、碳水化合物(如糊精、羥基烷基纖維素、羥基烷基甲基纖維素)、硬脂酸等。制劑的pH值范圍從約3到約11，但通常是約7到10。通常，化合物將以0.01毫克至2克的劑量來給藥。在一個實施方案中，劑量將為約10毫克至450毫克。考慮了所述化合物可以一天給藥一次、兩次或三次。盡管能夠?qū)⒒钚猿煞謫为毥o藥，但是優(yōu)選將它們制成藥物制劑。本發(fā)明的制劑，無論是用于獸類還是人類應(yīng)用，均包含至少一種本本發(fā)明的化合物(本文中稱為活性成分)，與一種或多種可接受的載體，且可選包含其它治療成分。載體必須是“可接受的”，其含義是與制劑中的其它成分相容，并且在生理上對其接受者而言無害。制劑包括適合于上述給藥途徑的那些。可以將制劑便利地制成單位劑型，并且可以通過制藥領(lǐng)域眾所周知的任意方法制成制劑。技術(shù)和制劑一般可以在雷明頓藥物科學(xué)(Remington’sPharmaceuticalSciences)(MackPublishingCo.，Easton，PA.)中找到。這類方法包括將活性成分與構(gòu)成一種或多種輔助成分的載體混合的步驟。通常，如下制備制劑：通過均勻和緊密混合活性成分與液體載體或細(xì)分散固體載體或兩者，且然后如果必要，使產(chǎn)物成形?？梢詫⑦m合于口服給藥的本發(fā)明的制劑制成分散單位，如各自包含預(yù)定量活性成分的膠囊、扁囊劑或片劑；作為粉末或顆粒；作為在水性或非水性液體中的溶液或混懸劑；或作為水包油型液體乳劑或油包水型液體乳劑。還可以將活性成分作為大丸劑、藥糖劑或糊劑給藥。通過可選使用一種或多種輔助成分壓制或模制來制備片劑?？梢酝ㄟ^在合適的機(jī)器中壓制自由流動形式(如粉末或顆粒))的可選混合了粘合劑、潤滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑、表面活性劑或分散劑的活性成分來制備壓制片。可以通過在合適的機(jī)器中模制使用經(jīng)惰性液體稀釋劑濕潤的粉狀活性成分混合物來制備模制片?？梢钥蛇x地給片劑包衣或刻痕，并且可選配制，以使活性成分從中緩慢或受控釋放。就眼或其它外部組織(如口腔和皮膚)感染而言，優(yōu)選將制劑作為局部用軟膏劑或霜劑施用，其含有例如0.075％至20％w/w含量的活性成分(包括范圍為0.1％至20％w/w，以0.1％w/w遞增，諸如0.6％w/w，0.7％w/w等的活性成分)，優(yōu)選0.2％至15％w/w且最優(yōu)選0.5％至10％w/w。當(dāng)配制成軟膏劑時，可以將活性成分與石蠟或與水易混溶的軟膏劑基質(zhì)一起使用?；蛘?，可以使用水包油型霜劑基質(zhì)將活性成分配制成霜劑。如果需要，霜劑基質(zhì)的水相可以包括，例如，至少30％w/w的多元醇，即具有兩個或多個羥基的醇，如丙二醇、丁1,3-二醇、甘露醇、山梨醇、甘油和聚乙二醇(包括PEG400)，及其混合物。局部用制劑可以理想地包括增強(qiáng)活性成分通過皮膚或其它受侵害區(qū)域吸收或滲透的化合物。這類透皮增強(qiáng)劑的實例包括二甲亞砜和相關(guān)類似物。本發(fā)明的乳劑的油相可以由已知組分按照已知方式構(gòu)成。盡管該相可以僅包含乳化劑(也稱作利泄劑)，但是理想地包含至少一種乳化劑與脂肪或油或與脂肪和油兩者的混合物。優(yōu)選，包括親水性乳化劑與作為穩(wěn)定劑的親脂性乳化劑。還優(yōu)選包括油和脂肪兩者。乳化劑與或不與穩(wěn)定劑共同構(gòu)成所謂的乳化蠟，并且該蠟與油和脂肪共同構(gòu)成所謂的乳化軟膏劑基質(zhì)，該基質(zhì)形成霜劑的油分散相。適用于本發(fā)明的制劑中的利泄劑和乳劑穩(wěn)定劑包括吐溫司盤十六十八醇、芐醇、肉豆蔻醇、單硬脂酸甘油酯和十二烷基硫酸鈉。用于制劑的合適的油或脂肪的選擇基于實現(xiàn)所需的化妝品特性(cosmeticproperties)。霜劑應(yīng)優(yōu)選為具有合適的稠度的非油膩性的無染色和可洗滌的產(chǎn)品，以避免從管或其它容器中滲漏?？梢允褂弥辨溁蛑ф?、一或二元烷基酯，如二-異己二酸酯、硬脂酸異鯨蠟酯、椰子油脂肪酸丙二醇二酯、肉豆蔻酸異丙酯、油酸癸酯、棕櫚酸異丙酯、硬脂酸丁酯、棕櫚酸2-乙基己酯或稱作CrodamolCAP的支鏈酯類的混合物，最后三種為優(yōu)選的酯。這些可以單獨或結(jié)合使用，這取決于所需的特性?；蛘?，使用高熔點脂質(zhì)，如白軟石蠟和/或液體石蠟或其它礦物油。根據(jù)本發(fā)明的藥物制劑包含一種或多種本發(fā)明的化合物與一種或多種藥物學(xué)上可接受的載體或賦形劑和可選的其它治療劑。含有活性成分的藥物制劑可以是適合于指定給藥方法的任意形式。當(dāng)用于口服應(yīng)用時，例如，可以制備片劑、糖錠、錠劑、水或油混懸劑、可分散粉末或顆粒、乳劑、硬或軟膠囊、糖漿劑或酏劑?？梢园凑罩苽渌幬锝M合物領(lǐng)域公知的任意方法制備指定用于口服應(yīng)用的組合物，并且這類組合物可以含有一種或多種試劑，包括甜味劑、調(diào)味劑、著色劑和防腐劑，以便提供適口的制劑。含有活性成分與適合于制備片劑的無毒性藥學(xué)上可接受賦形劑的片劑為可接受的。這些賦形劑可以為，例如，惰性稀釋劑，如碳酸鈣或碳酸鈉、乳糖、乳糖單水合物、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、聚烯吡酮、磷酸鈣或磷酸鈉；制粒劑和崩解劑，如玉米淀粉或藻酸；粘合劑，如纖維素、微晶纖維素、淀粉、明膠或阿拉伯膠；和潤滑劑，如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石。可以給片劑不包衣或通過公知技術(shù)，包括微囊化包衣，以便延緩在胃腸道中崩解和吸收，且由此在延長時間期限內(nèi)提供持續(xù)作用。例如，可以使用延時材料，如單獨或與蠟一起使用的單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。還可以將口服使用的制劑制成硬膠囊，其中將活性成分與惰性固體稀釋劑(如磷酸鈣或高嶺土)混合，或制成軟膠囊，其中將活性成分與水或油介質(zhì)混合，如花生油、液體石蠟或橄欖油。本發(fā)明的含水混懸劑含有活性物質(zhì)與適于制備含水混懸劑的賦形劑的混合物。這類賦形劑包括懸浮劑，如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃蓍樹膠和阿拉伯樹膠，以及分散或濕潤劑，如天然存在的磷脂(例如，卵磷脂)、環(huán)氧烷與脂肪酸的縮合產(chǎn)物(例如，聚氧乙烯硬脂酸酯)、環(huán)氧乙烷與長鏈脂肪醇的縮合產(chǎn)物(例如，十七乙烯氧基鯨蠟醇(heptadecaethyleneoxycetanol))、環(huán)氧乙烷與衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的縮合產(chǎn)物(例如，聚氧乙烯失水山梨醇單油酸酯)。含水混懸劑還可以含有一種或多種防腐劑(如對羥基苯甲酸乙酯或?qū)αu基苯甲酸正丙酯)、一種或多種著色劑、一種或多種調(diào)味劑和一種或多種甜味劑，如蔗糖或糖精?？梢酝ㄟ^將活性成分懸浮于植物油(如，花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)或礦物油(如，液體石蠟)中來配制油混懸劑?？诜鞈覄┛梢院性龀韯绶湎?、硬石蠟或鯨蠟醇?？梢约尤肴缟厦嫠瞿切┑奶鹞秳┖驼{(diào)味劑，以便提供適口的口服制劑。可以通過添加抗氧化劑，如抗壞血酸，對這些組合物防腐。適合于通過添加水制備含水混懸劑的本發(fā)明的可分散粉末和顆粒提供了活性成分與分散劑或濕潤劑、懸浮劑和一種或多種防腐劑的混合物。通過以上述披露舉例說明那些合適的分散劑或濕潤劑和懸浮劑。還可以存在其它賦形劑，例如甜味劑、調(diào)味劑和著色劑。本發(fā)明的藥物組合物還可以為水包油型乳劑的形式。油相可以為植物油(如，橄欖油或花生油)、礦物油(如，液體石蠟)，或這些的混合物。合適的乳化劑包括天然存在的樹膠(如，阿拉伯樹膠和黃蓍樹膠)、天然存在的磷脂(如，大豆卵磷脂)、衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯類或偏酯類，如失水山梨糖醇單油酸酯和這些偏酯與環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物，如聚氧乙烯失水山梨醇單油酸酯。該乳劑還可以包含甜味劑和調(diào)味劑?？梢允褂锰鹞秳?，如甘油、山梨醇或蔗糖配制糖漿劑和酏劑。這類制劑還可以包含緩和劑、防腐劑、調(diào)味劑或著色劑。本發(fā)明的藥物組合物可以為無菌可注射制劑形式，如無菌可注射的水或油混懸劑。可以按照公知技術(shù)，使用上面所述的合適的分散劑或濕潤劑和懸浮劑配制該混懸劑。無菌可注射制劑還可以為在無毒性腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液或懸浮劑，如在1,3-丁-二醇中的溶液，或制備成凍干粉末。在可以使用的可接受的媒介物和溶劑中有水、林格溶液和等滲氯化鈉溶液。此外，無菌固定油常用作溶劑或懸浮介質(zhì)。為了這一目的，可以使用任意溫和的固定油，包括合成的甘油一酯或二酯。此外，脂肪酸，如油酸，同樣可以用于制備可注射制劑。可以與載體材料合并產(chǎn)生單一劑型的活性成分的量根據(jù)所治療宿主和特定給藥方式的不同而改變。例如，指定用于對人體口服給藥的定時釋放制劑可以包含混合了適當(dāng)和便利含量的載體物質(zhì)的約1mg至1000mg活性成分，所述的載體物質(zhì)的適當(dāng)和便利含量可以占總組合物的約5％至約95％(重量：重量)?？梢灾苽湓撍幬锝M合物以便提供可易于測定的給藥用量。例如，指定用于靜脈內(nèi)輸注的水溶液可以包含約3μg至500μg活性成分/毫升溶液，以便可以約30mL/h的速率輸注適當(dāng)?shù)捏w積。適合于對眼給藥的制劑包括滴眼劑，其中將活性成分溶于或懸浮于合適的載體中，尤其是用于活性成分的含水溶劑中?；钚猿煞謨?yōu)選以0.5％至20％，有利的是0.5％至10％，特別是約1.5％w/w的濃度存在于這類制劑中。適合于在口腔中局部給藥的制劑包括在調(diào)味基質(zhì)(通常為蔗糖和阿拉伯膠或黃蓍膠)中包含活性成分的錠劑；在惰性基質(zhì)(如明膠和甘油，或蔗糖和阿拉伯膠)中包含活性成分的軟錠劑；和在合適的液體載體中包含活性成分的漱口藥。可以將用于直腸給藥的制劑制成含合適基質(zhì)的栓劑，所述的合適的基質(zhì)例如為可可脂或水楊酸酯。適合于肺內(nèi)或鼻部給藥的制劑具有例如0.1微米至500微米的粒度(包括遞增微米的0.1至500微米范圍中的粒度，如0.5、1、30微米、35微米等)，其通過經(jīng)鼻道快速吸入或通過經(jīng)口腔吸入給藥，以便達(dá)到肺泡囊。合適的制劑包括活性成分的水或油溶液。可以按照常規(guī)方法制備適合于氣霧劑或干粉給藥的制劑并且可以使其與其它治療劑(如本文中所述的迄今用于治療或預(yù)防與HCV活性相關(guān)的化合物)一起遞送?？梢詫⑦m合于陰道給藥的制劑制成陰道栓劑、棉塞、霜劑、凝膠劑、糊劑、泡沫劑或噴霧劑，除包含活性成分外，其還包含如本領(lǐng)域公知的合適的這類載體。適合于腸胃外給藥的制劑包括水性和非水性的無菌注射溶液，其可以包含抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑和賦予制劑與指定接受者血液等滲的溶質(zhì)；和可以包括懸浮劑和增稠劑的水和非水的無菌混懸劑。將制劑提供在單位劑量或多劑量容器中，例如密封安瓿和小瓶，并且可以將其儲存在冷凍干燥(凍干)條件下，這僅需要在使用前即刻添加無菌液體載體，例如注射用水。由上述類型的無菌粉末，顆粒和片劑制備臨時注射溶液和混懸液。優(yōu)選的單位劑量制劑為包含如上文所述活性成分的每日劑量或單位每日亞劑量或其適當(dāng)部分的那些制劑。應(yīng)理解，除上面具體提到的組分外，本發(fā)明的制劑可以包括本領(lǐng)域中常規(guī)有關(guān)所討論制劑類型的其它試劑，例如適合于口服給藥的那些可以包括調(diào)味劑。本發(fā)明進(jìn)一步提供了獸用組合物，其包含至少一種如上定義的活性成分與用于此的獸用載體。獸用載體為用于給藥組合物目的的物質(zhì)并且可以為固體，液體或氣態(tài)物質(zhì)，另外其為惰性的或獸藥領(lǐng)域中可接受的且與活性成分相容?？梢酝ㄟ^口服，腸胃外或通過任意其它所需途徑給予這些獸用組合物。還可以將本發(fā)明的化合物進(jìn)行配制，以用于提供活性成分的受控釋放，使得可以更低劑量給藥或改善活性成分的藥物動力學(xué)或毒性性質(zhì)。因此，本發(fā)明還提供了包含一種或多種本發(fā)明化合物的配制成用于持續(xù)或受控釋放的組合物?；钚猿煞值挠行┝恐辽偃Q于待治療病癥的性質(zhì)、毒性(不管化合物是否是預(yù)防使用(更低劑量))、遞送的方法和藥物制劑，且將通過臨床醫(yī)生使用常規(guī)劑量遞增研究而決定。在一個實施方案中，活性成分(即，如本文中描述的一種或多種化合物)或包含活性成分的藥物組合物在治療基因型1HCV感染患者、基因型2HCV感染患者、基因型3HCV感染患者、基因型4HCV感染患者、基因型5HCV感染患者和/或基因型6HCV感染患者中的一種或多種中是有效的。在一個實施方案中，活性成分或包含活性成分的藥物組合物在治療基因型1HCV感染患者中是有效的，包括基因型1a和/或基因型1b。在另一個實施方案中，活性成分或包含活性成分的藥物組合物在治療基因型2HCV感染患者中是有效的，包括基因型2a、基因型2b、基因型2c和/或基因型2d。在另一個實施方案中，活性成分或包含活性成分的藥物組合物在治療基因型3HCV感染患者中是有效的，包括基因型3a、基因型3b、基因型3c、基因型3d、基因型3e和/或基因型3f。在另一個實施方案中，活性成分或包含活性成分的藥物組合物在治療基因型4HCV感染患者中是有效的，包括基因型4a、基因型4b、基因型4c、基因型4d、基因型4e、基因型4f、基因型4g、基因型4h、基因型4i和/或基因型4j。在另一個實施方案中，活性成分或包含活性成分的藥物組合物在治療基因型5HCV感染患者中是有效的，包括基因型5a。在另一個實施方案中，活性成分或包含活性成分的藥物組合物在治療基因型6HCV感染患者中是有效的，包括基因型6a。在一些實施方案中，給藥活性成分或包含活性成分的藥物組合物，單獨地或結(jié)合一種或多種用于治療HCV的治療劑(如，HCVNS3蛋白酶抑制劑或HCVNS5B聚合酶抑制劑)，持續(xù)約24周，約16周，或約12周，或更短時間。在進(jìn)一步的實施方案中，給藥活性成分或包含活性成分的藥物組合物，單獨地或結(jié)合一種或多種用于治療HCV的治療劑(如，HCVNS3蛋白酶抑制劑或HCVNS5B聚合酶抑制劑)，持續(xù)約24周或更短時間，約22周或更短時間，約20周或更短時間，約18周或更短時間，約16周或更短時間，約12周或更短時間，約10周或更短時間，約8周或更短時間，或約6周或更短時間，或約4周或更短時間?；钚猿煞只虬钚猿煞值乃幬锝M合物可以每日給藥一次、每日兩次、每隔一天一次、一周兩次、一周三次、一周四次或一周五次。在進(jìn)一步的實施方案中，在約4周，6周，8周，12周，或16周，或在約20周，或在約24周，或在約4個月，或在約5個月，或在約6個月，或在約1年，或在約2年時，獲得了持續(xù)的病毒學(xué)應(yīng)答。給藥途徑本發(fā)明的一種或多種化合物(本文稱為活性成分)通過適于待治療的病況的任何途徑給藥。合適的途徑包括口服、直腸、鼻、局部(包括頰和舌下)、陰道和胃腸外(包括皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、皮內(nèi)、鞘內(nèi)和硬膜外)等。應(yīng)當(dāng)理解，優(yōu)選的途徑可隨著例如接受者的狀況而變化。本發(fā)明的化合物的優(yōu)點是它們是口服生物可利用的且可以口服給藥。HCV聯(lián)合治療在另一個實施方案中，合適組合的非限制性實例包括通式(I)和(A1-A4)的一種或多種化合物與一種或多種干擾素、病毒唑或其類似物、HCVNS3蛋白酶抑制劑、α-葡萄糖苷酶1抑制劑、保肝藥、HCVNS5B聚合酶的核苷或核苷酸抑制劑、HCVNS5B聚合酶的非核苷抑制劑、HCVNS5A抑制劑、TLR-7激動劑、親環(huán)素抑制劑、HCVIRES抑制劑、藥物動力學(xué)增強(qiáng)劑和用于治療HCV的其它藥物或治療劑。更具體地，在此所述的一種或多種化合物可以與一種或多種選自由以下組成的組中的化合物組合：1)干擾素，例如，PEG化的rIFN-α2b(PEG-Intron)、PEG化的rIFN-α2arIFN-α2b(A)、rIFN-α2a干擾素α(MOR-22、OPC-18、subalin)、干擾素alfacon-1干擾素α-n1(Wellferon)、干擾素α-n3干擾素β(DL-8234)、干擾素-ω(ω510)、albinterferonα-2bIFNα-2bXL、BLX-883DA-3021、糖基化的干擾素α2b(AVI-005)、PEG-Infergen、PEG化的干擾素λ-1(PEG化的IL-29)和2)病毒唑及其類似物，例如病毒唑和塔利韋林3)HCVNS3蛋白酶抑制劑，例如，波普瑞韋(SCH-503034、SCH-7)、替拉瑞韋(telaprevir)(VX-950)、TMC435350、BI-1335、BI-1230、MK-7009、VBY-376、VX-500、GS-9256、GS-9451、BMS-605339、PHX-1766、AS-101、YH-5258、YH5530、YH5531、ABT-450、ACH-1625、ITMN-191、MK5172、MK6325和MK2748；4)α-葡糖苷酶1抑制劑，例如，西戈韋(celgosivir)(MX-3253)、米格列醇和UT-231B；5)保肝藥，例如，emericasan(IDN-6556)、ME-3738、GS-9450(LB-84451)、silibilin和MitoQ；6)HCVNS5B聚合酶的核苷或核苷酸抑制劑，例如，R1626、R7128(R4048)、IDX184、IDX-102、BCX-4678、伐洛他濱(valopicitabine)(NM-283)、MK-0608、索非布韋(GS-7977(之前為PSI-7977))、VLX-135(之前為ALS-2200)和INX-189(現(xiàn)在為BMS986094)；7)HCVNS5B聚合酶的非核苷抑制劑，例如，PF-868554、VCH-759、VCH-916、JTK-652、MK-3281、GS-9190、VBY-708、VCH-222、A848837、ANA-598、GL60667、GL59728、A-63890、A-48773、A-48547、BC-2329、VCH-796(nesbuvir)、GSK625433、BILN-1941、XTL-2125、ABT-072、ABT-333、GS-9669、PSI-7792和GS-9190；8)HCVNS5A抑制劑，例如，AZD-2836(A-831)、BMS-790052、ACH-3102、ACH-2928、MK8325、MK4882、MK8742、PSI-461、IDX719、GS-5885和A-689；9)TLR-7激動劑，例如，咪喹莫特、852A、GS-9524、ANA-773、ANA-975、AZD-8848(DSP-3025)和SM-360320；10)親環(huán)素抑制劑，例如，DEBIO-025、SCY-635和NIM811；11)HCVIRES抑制劑，例如，MCI-067；12)藥物動力學(xué)增強(qiáng)劑，例如，BAS-100、SPI-452、PF-4194477、TMC-41629、GS-9350(可比西他(cobicistat))、GS-9585和羅紅霉素；和13)用于治療HCV的其他藥物，例如，胸腺肽α1(日達(dá)仙(Zadaxin))、硝唑尼特(nitazoxanide)(Alinea、NTZ)、BIVN-401(virostat)、PYN-17(altirex)、KPE02003002、actilon(CPG-10101)、GS-9525、KRN-7000、civacir、GI-5005、XTL-6865、BIT225、PTX-111、ITX2865、TT-033i、ANA971、NOV-205、tarvacin、EHC-18、VGX-410C、EMZ-702、AVI4065、BMS-650032、BMS-791325、Bavituximab、MDX-1106(ONO-4538)、Oglufanide和VX-497(merimepodib)。再在另一個實施方案中，本申請公開了包含本文中所述的化合物，或其藥物學(xué)上可接收的鹽、溶劑化物和/或酯的藥物組合物，結(jié)合至少一種附加治療劑，和藥物學(xué)上可接收的載體或賦形劑。更具體地，所述附加治療劑可以結(jié)合一種或多種選自HCVNS5B聚合酶的非核苷酸抑制劑(ABT-072和ABT-333)、HCVNS5A抑制劑(ACH-3102和ACH-2928)和HCVNS3蛋白酶抑制劑(ABT-450和ACH-125)的化合物。在另一個實施方案中，結(jié)合本文中公開的藥物組合物使用的治療劑可以是，當(dāng)與在此所述的化合物結(jié)合使用時具有治療效果的任意藥劑。例如，與在此所述的化合物結(jié)合使用的治療劑可以是干擾素、病毒唑類似物、NS3蛋白酶抑制劑、NS5B蛋白酶抑制劑、α-葡萄糖苷酶1抑制劑、保肝藥、HCV的非核苷抑制劑和用于治療HCV的其他藥物。在另一個實施方案中，結(jié)合本文中公開的藥物組合物使用的附加治療劑是親環(huán)素抑制劑，包括例如，WO/2013/185093中公開的親環(huán)素抑制劑。非限制性實例包括一種或多種選自由以下的化合物組成的組：及其立體異構(gòu)體和立體異構(gòu)體的混合物。在另一個實施方案中，結(jié)合本文中公開的藥物組合物使用的附加治療劑是HCVNS5B聚合酶的非核苷酸抑制劑。非限制性實例包括GS-9669。可以結(jié)合本文中提供的組合物的其他抗-HCV劑的實例包括，但不限于以下的：A.干擾素，例如，PEG化的rIFN-α2b(PEG-Intron)、PEG化的rIFN-α2a(Pegasys)、rIFN-α2b(IntronA)、rIFN-α2a(Roferon-A)、干擾素α(MOR-22、OPC-18、Alfaferone、Alfanative、Multiferon、subalin)、干擾素alfacon-1(Infergen)、干擾素α-n1(Wellferon)、干擾素α-n3(Alferon)、干擾素β(Avonex，DL-8234)、干擾素-ω(ωDUROS，Biomed510)、albinterferonα-2b(Albuferon)、IFNα-2bXL、BLX-883(Locteron)、DA-3021、糖基化的干擾素α-2b(AVI-005)、PEG-Infergen、PEG化的干擾素λ-1(PEG化的IL-29)或belerofon、IFNα-2bXL、rIFN-α2a、共有IFNα、infergen、rebif、PEG化IFN-β、口服干擾素α、feron、reaferon、inermaxα、r-IFN-β和infergen+actimmuneribavirin和病毒唑類似物，例如，rebetol、copegus、VX-497和鹽酸塔利韋林(塔利韋林)；B.NS5A抑制劑，例如，化合物B(以下描述的)、化合物C(以下描述的)、ABT-267、化合物D(以下描述的)、JNJ-47910382、daclatasvir(BMS-790052)、ABT-267、MK-8742、EDP-239、IDX-719、PPI-668、GSK-2336805、ACH-3102、A-831、A-689、AZD-2836(A-831)、AZD-7295(A-689)和BMS-790052；C.NS5B聚合酶抑制劑，例如，化合物E(以下所述的)、化合物F(以下所述的)、ABT-333、化合物G(以下所述的)、ABT-072、化合物H(以下所述的)、tegobuvir(GS-9190)、GS-9669、TMC647055、setrobuvir(ANA-598)、非利布韋(PF-868554)、VX-222、IDX-375、IDX-184、IDX-102、BI-207127、valopicitabine(NM-283)、PSI-6130(R1656)、PSI-7851、BCX-4678、nesbuvir(HCV-796)、BILB1941、MK-0608、NM-107、R7128、VCH-759、GSK625433、XTL-2125、VCH-916、JTK-652、MK-3281、VBY-708、A848837、GL59728、A-63890、A-48773、A-48547、BC-2329、BMS-791325和BILB-1941；D.NS3蛋白酶抑制劑，例如，化合物I、化合物J、化合物K、ABT-450、化合物L(fēng)(以下描述的)、simeprevir(TMC-435)、波普瑞韋(SCH-503034)、narlaprevir(SCH-900518)、vaniprevir(MK-7009)、MK-5172、丹諾普韋(ITMN-191)、sovaprevir(ACH-1625)、neceprevir(ACH-2684)、特拉匹韋(VX-950)、VX-813、VX-500、faldaprevir(BI-201335)、asunaprevir(BMS-650032)、BMS-605339、VBY-376、PHX-1766、YH5531、BILN-2065和BILN-2061；E.α-葡糖苷酶1抑制劑，例如，西戈韋(MX-3253)、米格列醇和UT-231B；F.保肝藥，例如，IDN-6556、ME3738、MitoQ和LB-84451；G.HCV的非核苷抑制劑，例如，苯并咪唑衍生物、苯并-1,2,4-噻二嗪衍生物和苯丙氨基酸衍生物；和H.其他抗HCV劑，例如，日達(dá)仙、硝唑尼特(alinea)、BIVN-401(virostat)、DEBIO-025、VGX-410C、EMZ-702、AVI4065、巴維昔單抗、oglufanide、PYN-17、KPE02003002、actilon(CPG-10101)、KRN-7000、civacir、GI-5005、ANA-975、XTL-6865、ANA971、NOV-205、tarvacin、EHC-18和NIM811。化合物B是NS5A抑制劑并由以下化學(xué)結(jié)構(gòu)表示：化合物C是NS5A抑制劑并由以下化學(xué)結(jié)構(gòu)表示：化合物D是NS5A抑制劑并由以下化學(xué)結(jié)構(gòu)表示：參見美國公開No.2013/0102525和其中的參考文獻(xiàn)。化合物E是NS5BThumbII聚合酶抑制劑并且由以下的化學(xué)結(jié)構(gòu)來表示：化合物F是設(shè)計來通過HCVNS5B聚合酶抑制病毒RNA復(fù)制的核苷抑制劑前藥，并且由以下化學(xué)結(jié)構(gòu)來表示：化合物G是HCV聚合酶抑制劑并且由以下的結(jié)構(gòu)來表示：參見美國公開No.2013/0102525和其中的參考文獻(xiàn)?；衔颒是HCV聚合酶抑制劑并且由以下結(jié)構(gòu)來表示：參見美國公開No.2013/0102525和其中的參考文獻(xiàn)?；衔颕是HCV蛋白酶抑制劑，并且由以下化學(xué)結(jié)構(gòu)來表示：參見2013年7月2日提交的PCT/US2013/049119，和其中的參考文獻(xiàn)。化合物J是HCV蛋白酶抑制劑并且由以下化學(xué)結(jié)構(gòu)來表示：化合物K是HCV蛋白酶抑制劑，并且由以下化學(xué)結(jié)構(gòu)來表示：化合物L(fēng)是HCV蛋白酶抑制劑并且由以下化學(xué)結(jié)構(gòu)來表示：參見美國公開No.2013/0102525和其中的參考文獻(xiàn)。在一個實施方案中，結(jié)合本文中所述的藥物組合物使用的附加治療劑是HCVNS3蛋白酶抑制劑。非限制性實例包括選自以下組成的組的一種或多種化合物：在另一個實施方案中，本申請?zhí)峁┝艘环N治療需要的人類患者中的丙肝的方法，包括將治療有效量的本文中所述的藥物組合物和附加治療劑給藥于患者，所述附加治療劑選自：PEG化rIFN-α2b、PEG化rIFN-α2α、rIFN-α2b、rIFN-α2bXL、rIFN-α2α、共有IFNrα、干復(fù)津、rebif、locteron、AVI-005、PEG-干復(fù)津、PEG化IFN-β、口服干擾素α、feron、reaferon、intermaxα、r-IFN-β、干復(fù)津+干擾素(infergen+actimmune)、IFN-ω和DUROS、albuferon、reberol、copegus、左旋韋林、VX-497、鹽酸塔利韋林(塔利韋林)、A-831、A-689、NM-283、valopicitabine、R1626、PSI-61309(R1656)、HCV-796、BILB1941、MK-0608、NM-107、R7128、VCH-759、PF-868554、GSK625433、XTL-2125、SCH-503034(SCH-7)、VX-950(特拉匹韋)、ITMN-191和BILN-2065、MX-3253(西戈斯韋)、UT-231B、IDN-6556、ME3738、MitoQ和LB-84451、苯并咪唑衍生物、苯并-1,2,4-噻二嗪衍生物，和苯丙氨酸衍生物、日達(dá)仙、硝唑尼特(alinea)、BIVN-401(virostat)、DEBIO-025、VGX-410C、EMZ-702、AVI4065、巴維昔單抗、oglufanide、PYN-17、KPE02003002、actilon(CPG-10101)、KRN-7000、civacir、GI-5005、ANA-975(艾沙托立賓)、XTL-6865、ANA971、NOV-205、tarvacin、EHC-18和NIM811，以及藥物學(xué)上可接收的載體或賦形劑。在另一個實施方案中，提供了包含本文中所述的通式(I)的化合物和索非布韋和/或GS-5885和可選的干擾素或病毒唑的藥物組合物?？紤]了將以本領(lǐng)域已知的方式來給藥附加治療劑并且由某位本領(lǐng)域技術(shù)人員來選擇劑量。例如，可以以約0.01微克至約3克/天的劑量來給藥附加治療劑。化合物的代謝產(chǎn)物本文所述化合物的體內(nèi)代謝產(chǎn)物也落在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。這些產(chǎn)物可產(chǎn)生自，例如，所施用化合物的氧化、還原、水解、酰胺化、酯化等，主要是由于酶過程產(chǎn)生的。因此，本發(fā)明包括通過以下方法產(chǎn)生的化合物，該方法包括將本發(fā)明的化合物與哺乳動物接觸足夠產(chǎn)生其代謝產(chǎn)物的一段時間。通常如下來鑒定此類產(chǎn)物：制備放射標(biāo)記(例如，C14或H3)的本發(fā)明的化合物，將其以可檢測的劑量(例如大于約0.5mg/kg)腸胃外地施用給動物，如大鼠、小鼠、豚鼠、猴，或施用給人，允許發(fā)生代謝的足夠時間(通常，約30秒到30小時)，并從尿液、血液或其它生物樣本中分離它的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物。由于它們被標(biāo)記，這些產(chǎn)物很容易分離(其它是使用能結(jié)合殘留在代謝產(chǎn)物中的表位的抗體來分離)。代謝產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)以常規(guī)方式測定，例如用MS或NMR分析。通常，代謝產(chǎn)物的分析以與本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的常規(guī)藥物代謝研究相同的方法進(jìn)行。轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，只要它們不以其他方式在體內(nèi)被發(fā)現(xiàn)，即使它們自身不具有HCV抑制活性，也可用于本發(fā)明的化合物的治療給藥的診斷測定。用于測定化合物在替代胃腸分泌物中的穩(wěn)定性的方法是已知的。制備化合物的示例性方法本發(fā)明還涉及制備本發(fā)明組合物的方法。通過有機(jī)合成的任一種適用技術(shù)來制備組合物。許多這樣的技術(shù)是本領(lǐng)域公知的。然而，許多已知技術(shù)詳細(xì)闡述于有機(jī)合成方法簡編(實施例endiumofOrganicSyntheticMethods)(JohnWiley&Sons，NewYork)，Vol.1，IanT.HarrisonandShuyenHarrison，1971；Vol.2，IanT.HarrisonandShuyenHarrison，1974；Vol.3，LouisS.HegedusandLeroyWade，1977；Vol.4，LeroyG.Wade,Jr.,1980；Vol.5，LeroyG.Wade，Jr.,1984；和Vol.6，MichaelB.Smith；以及March,J.，高級有機(jī)化學(xué)(AdvancedOrganicChemistry)，第三版，(JohnWiley&Sons，NewYork，1985)，全面的有機(jī)合成(實施例rehensiveOrganicSynthesis)?，F(xiàn)代有機(jī)化學(xué)的選擇、策略和效率(Selectivity,Strategy&EfficiencyinModernOrganicChemistry)，見第9卷，BarryM.Trost總編(PergamonPress，NewYork，1993印刷)。適用于制備本發(fā)明的化合物的其他方法描述于國際專利申請公開號WO2006/020276中。在以下的圖解和實施例中提供了用于制備本發(fā)明的組合物的多種示例性方法。這些方法用來說明這些制備的性質(zhì)，而不是用來限制適用方法的范圍。通常，反應(yīng)條件，例如，溫度、反應(yīng)時間、溶劑、提純(work-up)程序等，對于待進(jìn)行的特定反應(yīng)，將是本領(lǐng)域中常用的那些。所述的參考材料，與在此引用的材料一起，包含這些條件的詳細(xì)描述。通常，溫度將是-100℃至200℃，溶劑將是質(zhì)子惰性的或質(zhì)子的，并且反應(yīng)時間將為10秒至10天。提純通常由淬滅任何未反應(yīng)的試劑接著在水/有機(jī)層系統(tǒng)之間分離(萃取)并且分離含產(chǎn)物層組成。氧化和還原反應(yīng)通常在接近室溫(約20℃)的溫度下進(jìn)行，盡管對于金屬氧化物還原，常常將溫度降至0℃至-100℃，對于還原，溶劑通常是質(zhì)子惰性的，而對于氧化，可以是質(zhì)子的或質(zhì)子惰性的。調(diào)節(jié)反應(yīng)時間以實現(xiàn)所需的轉(zhuǎn)化。縮合反應(yīng)通常在接近室溫的溫度下進(jìn)行，盡管對于非平衡、動力學(xué)控制的縮合還原的溫度(0℃至-100℃)也是常用的。溶劑可以是質(zhì)子的(常用于平衡反應(yīng)中)或質(zhì)子惰性的(常用于動力學(xué)控制的反應(yīng))。標(biāo)準(zhǔn)合成技術(shù)，如，例如，共沸除去反應(yīng)副產(chǎn)物和使用無水反應(yīng)條件(例如，惰性氣體環(huán)境)，是本領(lǐng)域常用的，并且合適時將使用。當(dāng)結(jié)合化學(xué)合成操作使用時，術(shù)語“處理過的”、“處理中”、“處理”等，意思是接觸、混合、反應(yīng)、使其反應(yīng)、使其接觸和本領(lǐng)域中常用于表示以這樣的方式處理一種或多種化學(xué)物質(zhì)使其轉(zhuǎn)化成一種或多種其他化學(xué)物質(zhì)的其他術(shù)語。這表示“用化合物二處理化合物一”與“使化合物一與化合物二反應(yīng)”、“將化合物一接觸化合物二”、“將化合物一與化合物二反應(yīng)”和有機(jī)合成領(lǐng)域常用于合理地表示用化合物二“處理”、“反應(yīng)”、“使其接觸”化合物一等的其他表述同義。例如，處理表示其中使有機(jī)化學(xué)物質(zhì)反應(yīng)的合理且常用的方式。除非另外指出，否則確定使用通常的濃度(0.01M至10M，通常為0.1M至1M)、溫度(-100℃至250℃，通常為-78℃至150℃，更常見為-78℃至100℃，再更常見為0℃至100℃)、反應(yīng)容器(通常為玻璃、塑料、金屬的)、溶劑、壓力、氣氛(通常對于氧氣和水不敏感性反應(yīng)，使用空氣，對于氧氣和水敏感性反應(yīng)，使用氮氣和氬氣)等。有機(jī)合成領(lǐng)域中已知的相似反應(yīng)的知識可用于選擇給定方法中“處理”的條件和裝置。特別地，有機(jī)合成領(lǐng)域的普通技術(shù)人員根據(jù)本領(lǐng)域的知識選擇合理預(yù)期能成功進(jìn)行所需方法的化學(xué)反應(yīng)的條件和裝置。示例性圖解和實施例(下文中稱為“示例性圖解”)的每個改變導(dǎo)致產(chǎn)生特定示例性材料的各種類似物。以上引用的描述有機(jī)合成合適方法的引用適用于這樣的改變。在每個示例性圖解中，從另一種產(chǎn)物和/或起始材料中分離出反應(yīng)產(chǎn)物將是有利的。通過本領(lǐng)域常用技術(shù)，將每個步驟或一系列步驟的所需產(chǎn)物分離和/或純化(下文中稱為分離)至所需的均一度。通常，這樣的分離涉及多相萃取、從溶劑或溶劑混合物結(jié)晶、蒸餾、升華或色譜。色譜可以涉及多種方法，包括，例如：反相和正相；大小排阻；離子交換；高、中和低壓液相色譜方法和裝置；小規(guī)模分析；模擬移動床(SMB)和制備性薄層或厚層色譜，以及小規(guī)模薄層和快速色譜技術(shù)。另一類分離方法涉及用選定的試劑處理混合物，以結(jié)合或另外呈現(xiàn)可分離的所需產(chǎn)物、未反應(yīng)的起始材料、反應(yīng)副產(chǎn)物等。這樣的試劑包括吸附劑或吸收劑，如，例如，活性炭、分子篩、離子交換介質(zhì)等。或者，在堿性材料的情況中，試劑可以是酸，在酸性材料的情況中，試劑可以是堿，結(jié)合試劑，如，例如抗體、結(jié)合蛋白、選擇性螯合劑，如冠醚、液體/液體離子萃取劑(LIX)等。合適的分離方法的選擇取決于所涉及材料的性質(zhì)。例如，蒸餾和升華中的沸點和分子量、色譜中極性官能團(tuán)的存在或不存在、多相萃取中酸性和堿性介質(zhì)中材料的穩(wěn)定性等。本領(lǐng)域技術(shù)人員將使用最可能的技術(shù)來實現(xiàn)所需的分離。通過使用如非對映異構(gòu)體的形成的方法，使用可選活性拆分劑，通過外消旋混合物的拆分，獲得單一的立體異構(gòu)體，如對映異構(gòu)體，基本上不含其立體異構(gòu)體(StereochemistryofCarbon實施例ounds(碳化合物的立體化學(xué))，(1962)，E.L.Eliel,McGrawHill；Lochmuller，C.H.,(1975)J.Chromatogr.，113，3)283-302)。本發(fā)明的手性化合物的外消旋混合物可以通過任何合適的方法來分開和分離，包括：(1)用手性化合物形成離子的、非對映異構(gòu)鹽，并且通過分步結(jié)晶或其他方法分離，(2)用手性衍生劑形成非對映異構(gòu)化合物、分離非對映異構(gòu)體并轉(zhuǎn)化成純的立體異構(gòu)體，和(3)在手性條件下直接分離基本上純的或富集的立體異構(gòu)體。在方法(1)下，可以通過對映異構(gòu)純的手性堿(如，番木鱉堿、奎寧、麻黃堿、馬錢子堿、α-甲基-β-苯乙胺(安非他明)等)與帶有酸性官能團(tuán)的不對稱化合物(如，羧酸和磺酸)的反應(yīng)來形成非對映異構(gòu)鹽?？梢源偈狗菍τ钞悩?gòu)鹽來通過分步結(jié)晶或離子色譜來分離。對于氨基化合物的光學(xué)異構(gòu)體的分離，手性羧酸或磺酸(如，樟腦磺酸)、酒石酸、扁桃酸或乳酸的添加可以導(dǎo)致非對映異構(gòu)鹽的形成?；蛘撸ㄟ^方法(2)，將待分解的底物與手性化合物的一個對映異構(gòu)體反應(yīng)，來形成非對映異構(gòu)對(Eliel,E.和Wilen,S.(1994)StereochemistryofOrganic實施例ounds(有機(jī)化合物的立體化學(xué))，JohnWiley&Sons,Inc.,p.322)?？梢酝ㄟ^將不對稱化合物與對映異構(gòu)純的手性衍生劑反應(yīng)來形成非對映異構(gòu)化合物，如，薄荷基衍生物，接著分離非對映異構(gòu)體，并且水解，以產(chǎn)生游離的、非對映異構(gòu)富集的底物。測定光學(xué)純度的方法涉及制備外消旋混合物的手性酯，如薄荷酯，例如，在堿存在下的(-)薄荷基氯甲酸酯，或Mosher酯、α-甲氧基-α-(三氟甲基)苯基醋酸酯(JacobIII.(1982)，J.Org.Chem.47:4165)，并且分析NMR光譜的兩種阻旋異構(gòu)(atropisomeric)非對映異構(gòu)體的存在。可以按照分離阻旋異構(gòu)奈基-異喹啉(Hoye，T.，WO96/15111)通過正-和反-相色譜來分開和分離阻旋異構(gòu)化合物的穩(wěn)定非對映異構(gòu)體。通過方法(3)，使用手性固定相，通過色譜分離兩種對映異構(gòu)體的外消旋混合物(ChiralLiquidChromatography(1989)W.J.Lough編輯，ChapmanandHall，NewYork；Okamoto，(1990)J.ofChromatogr.513:375-378)?？梢酝ㄟ^用于使用不對稱碳原子區(qū)分其他手性分子的方法，如炫光度和圓二色性，來區(qū)分富集或純化的對映異構(gòu)體。圖解和實施例以下和在實施例中描述了這些示例性方法的一般方面。以下方法的每種產(chǎn)物可選在其用于隨后的過程之前進(jìn)行分開、分離和/或純化。在此，例如，在以下的實施例中，提供了用于制備本發(fā)明化合物的各種示例性方法。這些方法用來說明這些制備的性質(zhì)并不是用來限制適用方法的范圍。本發(fā)明的特定化合物可以用作用于制備本發(fā)明的其他化合物的中間體。在在此所述的示例性方法中，片段E-V-也可以寫成R9-。PG表示用于其連接的給定官能團(tuán)的常用保護(hù)基?？梢允褂脴?biāo)準(zhǔn)技術(shù)，如Wuts,P.G.M.，Greene，T.有機(jī)合成中的保護(hù)基(ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis)，第4版，JohnWiley&Sons，Inc.:Hoboken，NewJersey，2007中所述的那些，來完成保護(hù)基的安置和去除。圖解1.E-V-C(＝O)-P-W-P-C(＝O)-V-E的代表性合成圖解1顯示了本發(fā)明的E-V-C(＝O)-P-W-P-C(＝O)-V-E分子的一般合成，其中，為了說明的目的，E是甲氧基羰基氨基。在堿性條件下(例如，氫氧化鈉)，分別用一或二當(dāng)量的氯甲酸甲酯處理1a或1c提供了分子1b或1d。圖解2.E-V-C(＝O)-P-W-P-C(＝O)-V-E的代表性合成圖解2顯示了本發(fā)明的E-V-C(＝O)-P-W-P-C(＝O)-V-E分子的一般合成，其中，為了說明的目的，P是吡咯烷。使用肽耦合劑(例如，HATU)完成了用酸2b耦合胺2a，獲得了2c。或者，在相似的條件下，用二當(dāng)量的2b耦合胺2d，提供了2e。或者，將胺2d與二當(dāng)量的2b’直接反應(yīng)，以提供2e，其中E’是離去基團(tuán)，如羥基苯并三唑、對-硝基苯酚等，使得結(jié)構(gòu)2b’為活性酯。圖解3.R1-V-C(＝O)-P-R2的代表性合成圖解3顯示了R1-V-C(＝O)-P-R2中間體的合成，其中，為了說明的目的，P是吡咯烷，R1是描述為-E的一般基團(tuán)或氨基保護(hù)基，而R2是描述為-W-P-C(＝O)-V-E、-W-P-C(＝O)-V-NH-PG、-W-P-NH-PG或-W-NH-PG的一般基團(tuán)。使用肽耦合劑(例如，HATU)完成了用酸3b或3e耦合胺3a(或3d、3h、3k)，分別獲得了3c(或3f、3g、3i、3j、3l、3m)。圖解4.E-V-C(＝O)-R1的代表性合成圖解4顯示了E-V-C(＝O)-R1中間體的一般合成，其中，為了說明的目的，E是甲氧基羰基氨基，而R1是描述為P-W-P-C(＝O)-V-NH-PG、-P-W-P-PG、-P-W-PG、-P-PG或-O-PG的一般基團(tuán)。在堿性條件下(例如，氫氧化鈉)，用氯甲酸甲酯處理4a(或4c、4e、4g、4i)提供了分子4b(或4d、4f、4h、4j)。圖解5.R1-P-W-P-R2的代表性合成圖解5顯示了本發(fā)明的R1-P-W-P-R2中間體的一般合成，其中，為了說明的目的，R1和R2是獨立的保護(hù)基，并且W是通過過渡金屬元素介導(dǎo)的環(huán)化構(gòu)建的兩個芳香環(huán)單體。用烷基溴化物如5a烷化苯酚5b，提供了醚5c。在鈀催化劑的存在下，芳香環(huán)的環(huán)化提供了化合物5d。用CuBr2處理5d提供了α-鹵代酮5e，其在堿性條件下(例如，Et3N)添加酸時提供了5f。5f與胺或胺鹽(例如，醋酸銨)的反應(yīng)獲得了含咪唑分子5g?？梢栽贛nO2存在下，通過加熱來完成5g、5i或5l的氧化，分別提供了5h、5j或5m。用鈀催化劑，如Pd2dba3和X-Phos，以及硼源(如雙(戊酰)二硼)轉(zhuǎn)化5g或5h，提供了硼酸酯5i或5j。使用鈀催化劑，如Pd(PPh3)4或PdCl2(dppf)，用合適的耦合伴侶(例如，5k)耦合硼酸酯，獲得了5l或5m。對于每個過渡金屬介導(dǎo)的交聯(lián)耦合反應(yīng)，親核試劑和親電子試劑的作用可以顛倒，以提供相同的耦合產(chǎn)物。能夠構(gòu)建W但使用替換的耦合伴侶和試劑的其他過渡金屬介導(dǎo)的交聯(lián)耦合包括但不限于，Negishi、Kumada、Stille和Ullman耦合。對于含交替的兩個芳香環(huán)的W基團(tuán)的制備，通過起始試劑的合適選擇來使用這個一般性的圖解。圖解6.R1-P-W-P-R2的代表性合成圖解6顯示了本發(fā)明的R1-P-W-P-R2中間體的一般合成，其中，為了說明的目的，R1和R2是獨立的保護(hù)基，并且W是通過過渡金屬元素介導(dǎo)的環(huán)化構(gòu)建的兩個芳香環(huán)單體。在鈀催化劑(例如，醋酸鈀和S-Phos)的存在下，用激活的乙烯基試劑(例如，乙烯基三氟硼酸鉀)處理5d，提供了乙烯基化合物6a?？梢杂肗-溴琥珀酸亞胺溴化，接著用MnO2氧化，可以實現(xiàn)轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的α-鹵代酮。通過在堿性條件下(例如，Et3N)添加酸來進(jìn)行α-鹵代酮的置換。用三溴化吡啶處理時進(jìn)行了6d的溴化，并且接著在堿性條件下添加第二種酸，以提供二酯6e。用胺或胺鹽(例如，醋酸銨)與6e反應(yīng)，獲得了含咪唑分子6f?？梢栽贛nO2的存在下，實現(xiàn)6f的氧化，以提供6g。圖解7.E-V-C(＝O)-P-W-P-R的代表性合成圖解7顯示了本發(fā)明的E-V-C(＝O)-P-W-P-R中間體的一般合成，其中，為了說明的目的，R是保護(hù)基，而W是兩個芳香環(huán)單體。通過在堿性條件下(例如，Et3N)添加酸來進(jìn)行α-鹵代酮6b的置換。用三溴化吡啶處理時進(jìn)行了7b的溴化，并且接著在堿性條件下添加第二種酸，以提供二酯7e。用胺或胺鹽(例如，醋酸銨)與7c反應(yīng)，獲得了含咪唑分子7d。可以在MnO2的存在下，實現(xiàn)7d的氧化，以提供7e。圖解8.R-P-W-P-C(＝O)-V-E的代表性合成圖解8顯示了本發(fā)明的E-V-C(＝O)-P-W-P-R中間體的一般合成，其中，為了說明的目的，R是保護(hù)基，而W是兩個芳香環(huán)單體。通過在堿性條件下(例如，Et3N)添加酸來進(jìn)行α-鹵代酮6d的置換。用胺或胺鹽(例如，醋酸銨)與8a反應(yīng)，獲得了含咪唑分子8b?？梢栽贛nO2的存在下，實現(xiàn)8b的氧化，以提供8c。圖解9.E-V-C(＝O)-P-W-P-C(＝O)-V-E的代表性合成圖解9顯示了本發(fā)明的E-V-C(＝O)-P-W-P-C(＝O)-V-E分子的一般合成，其中，為了說明的目的，E是乙基羰基氨基。在堿性條件下(例如，氫氧化鈉)，分別用一或二當(dāng)量的丙酰氯處理9a或9c提供了分子9b或9d。圖解10.R1-P-W-P-R2的代表性合成圖解10顯示了本發(fā)明的R1-P-W-P-R2中間體的可替換一般合成，其中，為了說明的目的，R1和R2是獨立的保護(hù)基，并且W是通過過渡金屬元素介導(dǎo)的環(huán)化構(gòu)建的兩個芳香環(huán)單體。用溴化劑(即，三溴化吡啶)溴化6b提供了二溴化物10a。在堿性條件下(例如，K2CO3)，通過添加酸進(jìn)行伯溴的置換，以提供10d。按照圖解8中所述的方法可以實現(xiàn)10f或10g的轉(zhuǎn)化。圖解11.E-V-C(＝O)-P-W-P-R的代表性合成圖解11顯示了本發(fā)明的E-V-C(＝O)-P-W-P-R的可替換一般合成，其中，為了說明的目的，R是保護(hù)基，而W是兩個芳香環(huán)單體。用溴化劑(即，三溴化吡啶)溴化6b提供了二溴化物10a。然后在堿性條件下(例如，K2CO3)，通過添加酸進(jìn)行伯溴的置換，以提供11b。按照圖解8中所述的方法可以實現(xiàn)11d或11e的轉(zhuǎn)化。圖解12.R1-V-C(＝O)-P-R2的代表性合成圖解12顯示了R1-V-C(＝O)-P-R2中間體的一般合成，其中，為了說明的目的，P是吡咯烷，R1是描繪為-E或氨基保護(hù)基的一般基團(tuán)，而R2是描繪為-C(＝O)-O-PG的一般基團(tuán)。使用肽耦合劑(例如，HATU)，完成了用酸12b或12e的胺12a(或12d)的耦合，分別獲得了12c(或12f)。可以通過除去適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基，接著在堿性條件下(例如，氫氧化鈉)，用氯甲酸甲酯處理，來實現(xiàn)12f至12c的轉(zhuǎn)化。圖解13.E-V-C(＝O)-P-W-P-C(＝O)-V-E的代表性合成圖解13顯示了本發(fā)明的E-V-C(＝O)-P-W-P-C(＝O)-V-E中間體的替換一般合成，其中，為了說明的目的，W是兩個芳香環(huán)單體。通過在堿性條件下(例如，K2CO3)添加酸來進(jìn)行兩個溴化物的置換，以提供11c。可以按照圖解8中所述的方法來完成11d或11e的轉(zhuǎn)化。特定的實施方案在一個實施方案中，提供了通式(I)的化合物：E1a-V1a–C(＝O)-P1a-W1a-P1b-C(＝O)-V1b-E1b(I)其中：W1a是并且W1a可選被一個或多個鹵素、烷基、鹵代烷基、可選取代的芳基、可選取代的雜環(huán)或氰基取代；Y5是-O-CH2-、-CH2-O-、-O-C(＝O)-或-C(＝O)-O-；X5是-CH2-CH2-或-CH＝CH-；P1a和P1b各自獨立地是：V1a和V1b各自獨立地是：條件是V1a和V1b中的至少一個是E1a和E1b各自獨立地是-N(H)(烷氧基羰基)、-N(H)(環(huán)烷基羰基)或-N(H)(環(huán)烷氧基羰基)；或E1a-V1a合在一起是R9a；或E1b-V1b合在一起是R9b；和R9a和R9b各自獨立地是：或其藥物學(xué)上可接受的鹽或前藥。在一個實施方案中，本發(fā)明提供具有以下通式的化合物：其中通式A1、A2、A3和A4中顯示的咪唑環(huán)可選被一個或多個鹵素、鹵代烷基、氰基或烷基取代；或其藥物學(xué)上可接受的鹽或前藥。在一個實施方案中，本發(fā)明提供了具有以下結(jié)構(gòu)式的化合物：取代；其中通式A2和A4中顯示的咪唑環(huán)可選被一個或多個鹵素、鹵代烷基、氰基或烷基或其藥物學(xué)上可接受的鹽或前藥。在一個實施方案中，P1a和P1b各自獨立地是：在一個實施方案中，V1a和V1b各自獨立地是：條件是V1a和V1b中的至少一個是在一個實施方案中，提供了通式(I)的化合物：E1a-V1a–C(＝O)-P1a-W1a-P1b-C(＝O)-V1b-E1b(I)其中：W1a是并且W1a可選被一個或多個鹵素、烷基、鹵代烷基或氰基取代；Y5是-O-CH2-或-CH2-O-；X5是-CH2-CH2-或-CH＝CH-；P1a和P1b各自獨立地是：V1a和V1b各自獨立地是：條件是V1a和V1b中的至少一個是E1a和E1b各自獨立地是-N(H)(烷氧基羰基)、-N(H)(環(huán)烷基羰基)或-N(H)(環(huán)烷氧基羰基)；或E1a-V1a合在一起是R9a；或E1b-V1b合在一起是R9b；和R9a和R9b各自獨立地是：或其藥物學(xué)上可接受的鹽或前藥。在一個實施方案中，V1a和V1b中的一個是：而V1a和V1b中的另一個是在一個實施方案中，V1a和V1b中的一個是：而V1a和V1b中的另一個是在一個實施方案中，V1a和V1b中的一個是：而V1a和V1b中的另一個是在一個實施方案中，V1a和V1b中的一個是：而V1a和V1b中的另一個是在一個實施方案中，V1a和V1b中的一個是：而V1a和V1b中的另一個是在一個實施方案中，V1a和V1b中的一個是：而V1a和V1b中的另一個是在一個實施方案中，V1a和V1b中的一個是：而V1a和V1b中的另一個是在一個實施方案中，V1a和V1b中的一個是：而V1a和V1b中的另一個是在一個實施方案中，V1a和V1b中的一個是：而V1a和V1b中的另一個是在一個實施方案中，P1a和P1b各自獨立地是：在一個實施方案中，V1a和V1b中的一個是：在一個實施方案中，V1a和V1b都是：在一個實施方案中，V1a和V1b中的一個是：在一個實施方案中，V1a和V1b都是：在一個實施方案中，V1a和V1b中的一個是：條件是鍵(a)連接E1a或E1b，并且鍵(b)連接通式(1)或(A1、A2、A3或A4)的-C(＝O)-基團(tuán)。在一個實施方案中，V1a和V1b中的一個是：條件是鍵(a)連接E1a或E1b，并且鍵(b)連接通式(1)或(A1、A2、A3或A4)的-C(＝O)-基團(tuán)。在一個實施方案中，V1a和V1b中的一個是：條件是鍵(a)連接E1a或E1b，并且鍵(b)連接通式(1)或(A1、A2、A3或A4)的-C(＝O)-基團(tuán)。在一個實施方案中，V1a和V1b中的一個是：條件是鍵(a)連接E1a或E1b，并且鍵(b)連接通式(1)或(A1、A2、A3或A4)的-C(＝O)-基團(tuán)。在一個實施方案中，P1a和P1b各自獨立地是：在一個實施方案中，P1a和P1b中的一個是：在一個實施方案中，P1a和P1b中的一個是：在一個實施方案中，P1a和P1b都是：在一個實施方案中，-V1a-C(＝O)-P1a-和-P1b-C(＝O)-V1b-各自獨立地是：條件是V1a和V1b中的至少一個是在一個實施方案中，-V1a-C(＝O)-P1a-和-P1b-C(＝O)-V1b-各自獨立地是：條件是V1a和V1b中的至少一個是在一個實施方案中，-V1a-C(＝O)-P1a-和-P1b-C(＝O)-V1b-中的一個是：而-V1a-C(＝O)-P1a-和-P1b-C(＝O)-V1b-中的另一個是：在一個實施方案中，-V1a-C(＝O)-P1a-和-P1b-C(＝O)-V1b-中的一個是：而-V1a-C(＝O)-P1a-和-P1b-C(＝O)-V1b-中的另一個是：在一個實施方案中，-V1a-C(＝O)-P1a-和-P1b-C(＝O)-V1b-都是在一個實施方案中，E1a和E1b中的至少一個是-N(H)(烷氧基羰基)。在一個實施方案中，E1a和E1b都是-N(H)(烷氧基羰基)。在一個實施方案中，E1a和E1b中的至少一個是-N(H)C(＝O)OMe。在一個實施方案中，E1a和E1b都是-N(H)C(＝O)OMe。在一個實施方案中，本發(fā)明提供了以下通式的化合物：和或其藥物學(xué)上可接收的鹽或前藥。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了以下通式的化合物：或其藥物學(xué)上可接受的鹽或前藥。在一個實施方案中，本發(fā)明提供了以下通式的化合物：在一個實施方案中，本發(fā)明提供了以下通式的化合物：現(xiàn)在將通過以下非限制性實施例來說明本發(fā)明。在整個說明書中，包括實施例，使用以下縮寫。實施例中間體17-(2-溴-5-氯芐氧基)-3,4-二氫萘-1(2H)-酮向二甲基甲酰胺(850mL)中的7-羥基-1-四氫萘酮(13.9g，85.7mmol)和1-溴-2-(溴甲基)-4-氯苯(25.6g，90.0mmol)的攪拌溶液中，加入碳酸鉀(24g，172mmol)。在氬氣下將反應(yīng)攪拌18小時，然后用乙酸乙酯(1L)稀釋。用水將有機(jī)物洗滌三次，并用鹽水洗滌一次。然后用硫酸鎂干燥有機(jī)層、過濾并濃縮。向所得到的油中加入甲醇(500mL)，并且將懸浮液攪拌三十分鐘。通過過濾分離了7-(2-溴-5-氯芐氧基)-3,4-二氫萘-1(2H)-酮(27.8g，89％產(chǎn)量)。3-氯-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)-酮向含有特戊酸鈀(II)(1.18g，3.8mmol)、三(4-氟苯基)磷化氫(1.20g，3.8mmol)、特戊酸(2.33g，22.8mmol)和碳酸鉀(31.8g，228mmol)的1L燒瓶中，加入二甲基乙酰胺(380mL)中的7-(2-溴-5-氯芐氧基)-3,4-二氫萘-1(2H)-酮(27.8g，76.2mmol)溶液。將燒瓶抽空并且回填氬氣5次，然后在氬氣和60℃下攪拌24小時。將反應(yīng)冷卻至室溫，并且用MTBE和水稀釋。將所得到的兩相混合物攪拌3小時，并且通過Celite過濾，用MTBE沖洗。分離濾液的有機(jī)層，然后用水洗滌兩次，并用鹽水洗滌一次。然后用硫酸鎂干燥有機(jī)物，過濾，濃縮和通過快速柱色譜(己烷/DCM)純化來產(chǎn)生作為月白色固體的3-氯-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)-酮(14.4g，67％產(chǎn)量)。3-乙烯基-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)-酮將3-頸烘干的500mL圓底燒瓶在Ar下冷卻，然后裝入3-氯-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)酮(12.0g，42.1mmol)，乙烯三氟硼酸鉀(8.47g，6.32mmol)、Pd(OAc)2(473mg，2.11mmol)、SPhos(1.74g，4.25mmol)、K2CO3(17.5g，126mmol)和無水戊醇(120mL)。用Ar將反應(yīng)混合物噴射16min，然后加熱至回流，持續(xù)5.5h。完成時，將反應(yīng)混合物冷卻至RT，并在減壓下濃縮。將粗制殘余物懸浮于DCM中，然后用H2O和鹽水洗滌。將有機(jī)溶液通過MgSO4干燥，過濾并在減壓下濃縮。將所得到的殘余物通過硅石塞進(jìn)一步純化，用DCM洗脫，以獲得3-乙烯基-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)酮(10.2g，87％)。3-(2-溴乙?；?-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)酮將3-乙烯基-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)酮(9.98g，36.1mmol)溶解于攪拌的THF(70mL)、DMSO(70mL)和H2O(35mL)溶液中。一次性地加入NBS(6.75g，37.9mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌33min。完成時，用EtOAc稀釋反應(yīng)介質(zhì)，并用H2O洗滌兩次，用鹽水洗滌一次。將有機(jī)相通過MgSO4干燥，過濾并在減壓下濃縮。將所得到的粗制溴醇(bromohydrin)懸浮于DCM(200mL)中，并且用活化MnO2(62.7g，722mmol)處理。在室溫下攪拌15h后，將反應(yīng)混合物通過硅藻土過濾，并且用DCM將濾餅沖洗數(shù)次。用MeOH(～100mL)處理合并的濾液(～400mL)，并將混合物在減壓下逐漸濃縮，使得固體材料從溶液中沉淀出來。當(dāng)液體體積達(dá)到～200mL時，濾出固體，并用MeOH沖洗。將濃縮/沉淀/過濾/沖洗順序再進(jìn)行2x，形成3次粉末狀3-(2-溴乙?；?-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)酮的收集(2個步驟，7.49g，56％)。中間體29-溴-3-(2-溴乙?；?-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)-酮將3-(2-溴乙?；?-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)-酮(2.58g，6.95mmol)、三溴吡啶(2.56g，8.0mmol)、二氯甲烷(22mL)和甲醇(2.5mL)在約20℃下攪拌3小時，以獲得漿液。過濾沉淀的產(chǎn)物，用二氯甲烷(10mL)洗滌，并在真空爐中在40℃下干燥，以獲得9-溴-3-(2-溴乙?；?-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)-酮(2.62g，84％產(chǎn)量)。400MHz1HNMR(CDCl3)δ8.03-8.01(m,1H),7.85(d,J＝8.2Hz,1H),7.82(s,1H),7.71(s,1H),7.67(s,1H),5.19(s,2H),4.74(dd,J＝4.1,4.1Hz,1H),4.45(s,2H),3.37-3.29(m,1H),2.99-2.92(m,1H),2.59-2.46(m,2H)。中間體2a9-溴-3-(2-溴乙?；?-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)-酮向DCM(365mL)中的3-(2-溴-1-羥乙基)-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)-酮(20.3g，54.4mmol)加入MeOH(22mL)和三溴吡啶(18.24g，57.0mmol)。2h后，加入水(100mL)，并在簡短攪拌后，層分離，并收集底部的有機(jī)層。然后用1MHCl(100mL)洗滌有機(jī)層，并收集含有9-溴-3-(2-溴-1-羥乙基)-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]-色烯8(9H)酮的底部有機(jī)層。400MHz1HNMR(CDCl3)7.75(d,J＝8.1Hz,1H),7.68(s,1H),7.61(s,1H),7.42(d,J＝7.5Hz,1H),7.24(s,1H),5.13(s,2H),4.99-4.96(m,1H),4.73(dd,J＝4.1,4.1Hz,1H),3.69-3.66(m,1H),3.58-3.53(m,1H),3.35-3.27(m,1H),2.96-2.90(m,1H),2.58-2.44(m,2H),C-OH未觀察到。向DCM(365mL)中的9-溴-3-(2-溴-1-羥乙基)-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]-色烯8(9H)酮(大約54.4mmol)中加入碳酸氫鈉(5.45g)、溴化鈉(6.14g)、TEMPO(16.55mg)和水(60mL)。將溶液在0-5℃之間冷卻，并加入6％漂白劑(91.5mL)。1h后，加入異丙醇(20mL)，并將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝亍ＭＶ箶嚢韬?，層分離，并收集下部的有機(jī)層，濃縮，除去大約345g的溶劑。將漿液過濾，用50mL水洗滌濾餅，然后用50mLDCM(預(yù)冷至5℃)洗滌。收集固體，并在真空下干燥，以獲得9-溴-3-(2-溴乙?；?-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)-酮(18.6g，76％產(chǎn)量)。400MHz1HNMR(CDCl3)δ8.03-8.01(m,1H),7.85(d,J＝8.2Hz,1H),7.82(s,1H),7.71(s,1H),7.67(s,1H),5.19(s,2H),4.74(dd,J＝4.1,4.1Hz,1H),4.45(s,2H),3.37-3.29(m,1H),2.99-2.92(m,1H),2.59-2.46(m,2H)；100MHz13CNMR(CDCl3)δ190.4,189.6,154.2,136.6,134.1,133.9,132.9,131.8,129.3,127.2,125.6,124.2,123.3,117.0,68.1,49.9,31.8,30.4,25.5。中間體2b3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)-酮將在氮氣氣氛下裝備有頂置攪拌器和回流冷凝器的300mL燒瓶中裝入3-氯-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)-酮(10.0g，35.12mmol)、粉末狀無水磷酸三鉀(22.4g，105.4mmol)、XPhos(1.34g，2.81mmol)和PdCl2(MeCN)2(364mg，1.40mmol)。加入乙腈(140mL)，接著加入TMS乙炔(18mL，141mmol)。將混合物加熱至65℃。6h后，判斷反應(yīng)完成，并將混合物冷卻至20℃。將混合物通過燒結(jié)玻璃漏斗過濾，并用乙腈洗滌濾餅。將濾液在減壓下濃縮至約150mL，并用庚烷萃取(50mL，3×100mL)。將N-乙酰半胱氨酸(15g)加入乙腈相中，并將混合物在45℃下攪拌5h。將混合物冷卻至室溫，通過燒結(jié)玻璃漏斗過濾，并用乙腈洗滌濾液。將濾液在減壓下濃縮至約120mL。加入水(120mL)，并將混合物在45℃下攪拌40分鐘，然后冷卻至室溫。30分鐘后，將混合物通過燒結(jié)玻璃漏斗過濾，以提供作為黃色固體的3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)-酮(4.07g，33.4％產(chǎn)量)：400MHz1HNMR(CDCl3)δ7.65(d,J＝8.1Hz,1H),7.60(s,1H),7.55(s,1H),7.47(dd,J＝8.1,1.4Hz,1H),7.27(s,1H),5.06(s,2H),2.95(t,J＝6.1Hz,2H),2.67–2.59(m,2H),2.18–2.08(m,2H),0.26(s,9H)。3-乙?；?10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)-酮將帶有攪拌棒的20mL小瓶中裝入3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)-酮(850mg，2.44mmol)和甲酸(9.8mL)。將溶液加熱至65℃。3h后，判斷反應(yīng)完成。將混合物在減壓下濃縮；將所得到的殘余物在CH2Cl2中吸收，并裝載至預(yù)填充的25g硅膠筒上。通過預(yù)填充80g硅膠柱上的色譜純化產(chǎn)物，用5％至85％EtOAc/己烷的溶劑梯度洗脫。將含有產(chǎn)物的級分合并，并濃縮，以提供3-乙?；?10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)-酮(616mg，86％)：400MHz1HNMR(CDCl3)δ8.00–7.94(m,1H),7.81(d,J＝8.2Hz,1H),7.77(s,1H),7.64(s,2H),5.16(s,2H),2.98(t,J＝6.1Hz,2H),2.69–2.64(m,2H),2.63(s,3H),2.21–2.09(m,2H)。9-溴-3-(2-溴乙?；?-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)-酮將帶有攪拌棒的20mL小瓶中裝入3-乙酰基-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)-酮(100mg，0.366mmol)、9:1CH2Cl2/MeOH(3.4mL)和三溴吡啶(246mg，0.769mmol)。將溶液加熱至35℃。30分鐘后，判斷反應(yīng)完成。將混合物冷卻至環(huán)境溫度，用EtOAc(50mL)稀釋，并用飽和含水Na2S2O3(20mL)、2％含水NaHCO3(20mL)、水(20mL)和鹽水(10mL)連續(xù)洗滌。將有機(jī)相通過MgSO4干燥，過濾并在減壓下濃縮，得到9-溴-3-(2-溴乙酰基)-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)-酮(68mg，41％)：400MHz1HNMR(CDCl3)δ8.03-8.01(m,1H),7.85(d,J＝8.2Hz,1H),7.82(s,1H),7.71(s,1H),7.67(s,1H),5.19(s,2H),4.74(dd,J＝4.1,4.1Hz,1H),4.45(s,2H),3.37-3.29(m,1H),2.99-2.92(m,1H),2.59-2.46(m,2H)。中間體3(S)-乙基2-(叔-丁氧基羰基氨基)-5-氧己酸酯將兩口圓底燒瓶中的無水THF(150mL)中的乙基N-Boc(S)-焦谷氨酸酯(20.0g，77.7mmol)在氬氣下冷卻至-40℃。將甲基-溴化鎂溶液(醚中3.0M，28.5mL，85.5mmol)在30分鐘內(nèi)逐滴加入反應(yīng)混合物中。將反應(yīng)在-40℃下攪拌4hr，然后在0℃下攪拌1hr。將反應(yīng)在乙酸乙酯和飽和氯化銨溶液之間分離，并且用1NHCl酸化。用乙酸乙酯將含水層再萃取兩次。將有機(jī)層合并并且用硫酸鈉干燥。通過柱色譜(20％-40％EtOAc/己烷)純化粗制材料，以產(chǎn)生作為粘性油的(S)-乙基2-(叔-丁氧基羰基氨基)-5-氧己酸酯，并且直接用于下一個步驟中。(S)-乙基5-甲基-3,4-二氫-2H-吡咯-2-羧酸酯用三氟乙酸/二氯甲烷溶液(1:1混合物，100mL)處理1L燒瓶中的(S)-乙基2-(叔-丁氧基羰基氨基)-5-氧己酸酯。觀察泡沸并且使混合物在室溫下攪拌4小時。該時間后，在真空下除去揮發(fā)物，以產(chǎn)生作為油的(S)-乙基5-甲基-3,4-二氫-2H-吡咯-2-羧酸酯，并且直接用于下一個步驟中。(2S,5S)-乙基5-甲基吡咯烷-2-羧酸酯用乙醇(400mL)溶解1L燒瓶中的(S)-乙基5-甲基-3,4-二氫-2H-吡咯-2-羧酸酯，并且排空，用氬氣沖洗三次(3x)。加入鈀碳(大約750mg，10％w/w，干的)，并且使反應(yīng)排空氣體，用氫氣沖洗(3x)。使反應(yīng)在氫氣氣氛下攪拌16小時。將混合物通過硅藻土塞過濾，并且將濾液真空濃縮。將二乙醚加入油中，形成了沉淀物。將混合物過濾，以產(chǎn)生作為白色固體的(2S,5S)-乙基5-甲基吡咯烷-2-羧酸酯(三個步驟中10.6g，67.4mmol，86.7％)。1HNMR(400MHz,cdcl3)δ4.48(dd,1H),4.27(q,2H),3.92–3.80(m,1H),2.52–2.36(m,1H),2.32–2.13(m,2H),1.75–1.60(m,1H),1.51(d,3H),1.30(t,3H)。(2S,5S)-1-叔-丁基2-乙基-5-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸酯向二氯甲烷(250mL)中的(2S,5S)-乙基5-甲基吡咯烷-2-羧酸酯(7.0g，44.5mmol)溶液中，在10分鐘內(nèi)逐滴加入二叔丁酐(10.7g，49.0mmol)、二異丙基乙胺(17.1mL，98.0mmol)，并且連續(xù)加入二甲基氨基吡啶(0.27g，2.23mmol)。觀察泡沸，并且使混合物在室溫下攪拌16小時。用HCl(250mL，1N)洗滌反應(yīng)。然后用硫酸鈉干燥有機(jī)層。通過柱色譜(5％-25％EtOAc/己烷)純化粗制材料，以產(chǎn)生作為油的(2S,5S)-1-叔-丁基2-乙基-5-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸酯(6.46g，25.1mmol，56％)。LCMS-ESI+：對C13H23NO4分析計算值：257.16(M+)；實測值：258.70(M+H+)。(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸向乙醇(20mL)中的(2S,5S)-1-叔-丁基2-乙基-5-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸酯(6.46g，25.1mmol)溶液中加入氫氧化鋰單水合物(2.11g，50.2mmol)和去離子水(12mL)。將混合攪拌16小時，然后在乙酸乙酯與飽和鹽水和1NHCl的1:1混合物之間分離。用乙酸乙酯將含水層再萃取一次。將有機(jī)層合并，用硫酸鈉干燥并且在真空下除去溶劑，以產(chǎn)生作為白色固體的(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸(定量)，并直接用于下一個步驟中。中間體4(2S,5S)-乙基1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸酯將(2S,5S)-乙基5-甲基吡咯烷-羧酸酯2,2,2-三氟醋酸酯(10.0g，39.3mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(6.88g，39.3mmol)和HATU(14.9g，39.3mmol)在DMF(100mL)中混合，并加入DIPEA(15.0mL，86.5mmol)。在室溫下攪拌1h后，用EtOAc稀釋反應(yīng)混合物。用10％HCl、飽和含水NaHCO3和鹽水連續(xù)洗滌有機(jī)相，然后通過MgSO4干燥，過濾并在減壓下濃縮，以獲得(2S,5S)-乙基1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸酯。該粗制材料沒有進(jìn)一步純化就繼續(xù)使用。(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸將(2S,5S)-乙基1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸酯(39.3mmol，假定從之前的轉(zhuǎn)化完全轉(zhuǎn)化)懸浮于MeOH(200mL)中，并加入含水LiOH(1.0M，100mL，100mmol)。將反應(yīng)混合物o/n攪拌，然后在減壓下濃縮，以除去大部分MeOH。用DCM將水溶液洗滌2x，然后用10％HCl酸化至pH～1-2。然后用EtOAc將酸性水相萃取5x。將合并的EtOAc萃取物通過MgSO4干燥，過濾并在減壓下濃縮，以獲得(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸(2個步驟中6.89g，56％)。中間體5(2S,4S)-1-叔-丁基2,4-二甲基吡咯烷-1,2,4-三羧酸酯向MeOH(196mL)中的(2S,4S)-1-叔-丁基2-甲基4-氰基吡咯烷-1,2-二羧酸酯(9.0g，35.4mmol)溶液中，加入HCl(1,4-二噁烷中4M，100mL，403mmol)。將溶液在室溫下攪拌16h，并且真空濃縮。將粗制中間體溶解于EtOAc(180mL)中，并且用含水碳酸氫鹽(sat.)堿化。加入二-叔-丁基碳酸氫鹽(8.5g，38.9mmol)，并且將兩相溶液在室溫下攪拌12h。然后分離層，并且用EtOAc將含水層反萃取。用鹽水洗滌合并的有機(jī)層，通過Na2SO4干燥，并濃縮。通過硅膠色譜(15％至40％至100％EtOAc/己烷)純化粗油，以提供(2S,4S)-1-叔-丁基2,4-二甲基吡咯烷-1,2,4-三羧酸酯(9.56g，94％)。(3S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-(甲氧基羰基)吡咯烷-3-羧酸向(2S,4S)-1-叔-丁基2,4-二甲基吡咯烷-1,2,4-三羧酸酯(9.56g，333.3mmol)的0℃(外部溫度，冰浴)THF(70mL)溶液中，在15分鐘內(nèi)逐滴加入NaOH(1N含水，33mL，33.3mmol)。將溶液在0℃下攪拌5h，然后用HCl(1N)酸化。用EtOAc(3x)萃取溶液。將合并的有機(jī)層通過Na2SO4干燥并濃縮。通過硅膠色譜(2％至5％至10％MeOH/CH2Cl2)純化粗油，以提供(3S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-(甲氧基羰基)吡咯烷-3-羧酸(6.38g，70％)。(2S,4S)-1-叔-丁基2-甲基4-(羥甲基)吡咯烷-1,2-二羧酸酯向(3S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-(甲氧基羰基)吡咯烷-3-羧酸(6.38g，23.3mmol)的0℃(外部溫度，冰浴)THF(116mL)溶液中，加入Et3N(4.9mL，35.0mmol)和氯甲酸乙酯(2.7mL，28.0mmol)。將所得到的溶液在0℃下攪拌45min，在該時間過程中，形成了白色沉淀物。將反應(yīng)混合物通過硅藻土過濾并濃縮。將粗制中間體溶解于THF(59mL)中并且冷卻至0℃(外部溫度，冰浴)。緩慢加入H2O(59mL)中的NaBH4(4.41g，116.7mmol)并且將所得到的溶液在0℃下攪拌2h。用EtOAc稀釋反應(yīng)混合物，并且用H2O洗滌。用EtOAc反萃取含水層。將合并的有機(jī)層通過Na2SO4干燥并濃縮。通過硅膠色譜(42％至69％至100％EtOAc/己烷)純化粗油，以提供(2S,4S)-1-叔-丁基2-甲基4-(羥甲基)吡咯烷-1,2-二羧酸酯(3.63g，60％)。(2S,4S)-1-叔-丁基2-甲基4-(甲氧基甲基)吡咯烷-1,2-二羧酸酯向CH2Cl2(50mL)溶液中的(2S,4S)-1-叔-丁基2-甲基4-(羥甲基)吡咯烷-1,2-二羧酸酯(2.57g，9.9mmol)中加入AgOTf(4.07g，15.8mmol)和2,6-二-叔-丁基吡啶(4.4mL，19.8mmol)。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃(外部溫度，冰浴)，并且緩慢加入MeI(0.98mL，15.8mmol)。將所得到的漿液在0℃下攪拌1.5h，并且在室溫下攪拌1.5h。用CH2Cl2稀釋漿液，并且通過硅藻土過濾。將濾液濃縮至干，溶解于Et2O中，并用HCl(1N)和鹽水洗滌。用Et2O反萃取含水層。將合并的有機(jī)層通過Na2SO4干燥并濃縮。通過硅膠色譜(10％至75％至100％EtOAc/己烷)純化粗油，以提供(2S,4S)-1-叔-丁基2-甲基4-(甲氧基甲基)吡咯烷-1,2-二羧酸酯(2.11g，78％)。1H-NMR:400MHz,(CDCl3)δ:(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物，主要報告的)4.20(t,1H),3.71(s,3H),3.67(m,1H),3.34(m,2H),3.30(s,3H),3.16(t,1H),2.43(m,2H),1.74(m,1H),1.38(s,9H)。(2S,4S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4-(甲氧基甲基)吡咯烷-2-羧酸向THF(38mL)和MeOH(15mL)混合物中的(2S,4S)-1-叔-丁基2-甲基4-(甲氧基甲基)吡咯烷-1,2-二羧酸酯(2.11g，7.7mmol)的溶液中加入LiOH(2.5M含水，15mL，38.6mmol)。將所得到的溶液在室溫下攪拌2h，并用含水HCl(1N)酸化。用CH2Cl2(4x)萃取所需產(chǎn)物。將合并的有機(jī)層通過Na2SO4干燥并濃縮，以提供(2S,4S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4-(甲氧基甲基)吡咯烷-2-羧酸(2.0g，99％)。1H-NMR:400MHz,(CDCl3)δ:(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物，主要報告的)4.33(t,1H),3.65(m,1H),3.35(m,2H),3.32(s,3H),3.16(t,1H),2.45(m,2H),2.12(m,1H),1.46(s,9H)。中間體6(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5甲基吡咯烷-2-羧酸以與中間體4相似的方式合成(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊酰基)-5甲基吡咯烷-2-羧酸，用(2S,3S)-2-(甲氧基羰基-氨基)-3-甲基戊酸替代(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸。MS(ESI)m/z301.19[M+H]+。中間體7(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-乙基吡咯烷-2-羧酸以與中間體3相似的方式合成(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-乙基吡咯烷-2-羧酸，用乙基溴化鎂替代甲基溴化鎂。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.37(1H,s),4.05-4.07(1H,m),3.63-3.64(1H,m),2.13-2.15(1H,m),1.63-1.90(4H,m),1.39(10H,m),0.83(3H,t,J＝7.2Hz)。中間體8(2S,5S)-5-乙基-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁?；?吡咯烷-2-羧酸以與中間體4相似的方式合成(2S,5S)-5-乙基-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)吡咯烷-2-羧酸，用(2S,5S)-甲基5-乙基吡咯烷-2-羧酸酯-HCl取代(2S,5S)-乙基5-甲基吡咯烷-2-羧酸酯-2,2,2-三氟醋酸酯。MS(ESI)m/z301.15[M+H]+。中間體9(2S,5S)-5-乙基-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?吡咯烷-2-羧酸以與中間體4相似的方式合成(2S,5S)-5-乙基-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?吡咯烷-2-羧酸，用(2S,3S)-2-(甲氧基羰基-氨基)-3-甲基戊酸替代(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸，并用(2S,5S)-甲基5-乙基吡咯烷-2-鹽酸羧酸酯替代(2S,5S)-乙基5-甲基吡咯烷-2-羧酸酯2,2,2-三氟醋酸酯。中間體10(S)-1-叔-丁基2-甲基4-氧吡咯烷-1,2-二羧酸酯在30分鐘內(nèi)，邊攪拌邊將CrO3(194g，1.94mol)緩慢加入0℃的DCM(900mL)中的吡啶(340mL)溶液中。將混合物溫?zé)嶂潦覝?，并且加入DCM(700mL)中的(2S,4R)-1-叔-丁基2-甲基4-羥基吡咯烷-1,2-二羧酸酯(56g，0.216mmol)。將反應(yīng)在室溫下強(qiáng)烈攪拌4h。輕輕倒出所形成的深色固體并用DCM洗滌。用含水NaHCO3，10％含水檸檬酸和鹽水洗滌有機(jī)相，并通過無水Na2SO4干燥。真空除去溶劑，并通過硅膠柱色譜(PE:EtOAc＝50:1至10:1)純化，獲得作為黃色油的(S)-1-叔-丁基2-甲基4-氧吡咯烷-1,2-二羧酸酯(42.6g，81％)。(S)-1-叔-丁基2-甲基4-亞甲基吡咯烷-1,2-二羧酸酯在氮氣氣氛下，在室溫下，將THF(1100mL)中的Ph3PEtBr(84g，227mmol)和KOtBu(76.7g，556mmol)溶液攪拌1h，然后逐滴加入THF(350mL)中的(S)-1-叔-丁基2-甲基4-氧吡咯烷-1,2-二羧酸酯(50g，206mol)。將混合物在室溫下攪拌4h。TLC顯示出反應(yīng)完成。用含水NH4Cl淬滅混合物，并濃縮，以除去THF，然后溶解于EtOAc和水中。用水、鹽水洗滌合并的有機(jī)層，并通過Na2SO4干燥，過濾并濃縮。通過柱色譜(PE:EtOAc＝30:1至5:1)純化粗產(chǎn)物，以獲得作為黃色油的(S)-1-叔-丁基2-甲基4-亞甲基吡咯烷-1,2-二羧酸酯(18.3g，35％)。(2S)-1-叔-丁基2-甲基4-乙基吡咯烷-1,2-二羧酸酯將EtOH(500mL)中的(S)-1-叔-丁基2-甲基4-亞甲基吡咯烷-1,2-二羧酸酯(50g，196mmol)，Pd/C(5g)的混合物在室溫下氫化過夜。將混合物過濾并濃縮，以獲得作為無色油的(2S)-1-叔-丁基2-甲基4-乙基吡咯烷-1,2-二羧酸酯(9.8g，97％)。(2S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4-乙基吡咯烷-2-羧酸將MeOH(1500mL)中的(2S)-1-叔-丁基2-甲基4-乙基吡咯烷-1,2-二羧酸酯(49.5g，0.19mol)，LiOH(950mL，1M)的混合物在室溫下攪拌過夜。TLC顯示出反應(yīng)完成。將混合物濃縮，用1NHCl調(diào)節(jié)pH至2。用EA提取混合物，用鹽水洗滌合并的有機(jī)層，通過Na2SO4干燥，濃縮，以獲得作為白色固體的(2S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4-乙基吡咯烷-2-羧酸(45.5g，97％)，沒有進(jìn)一步純化。(2S)-2-芐基1-叔-丁基4-乙基吡咯烷-1,2-二羧酸酯在0℃下，在THF(1L)中的(2S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4-乙基吡咯烷-2-羧酸(45.5g，187mmol)，TEA(37.8g，374mmol)的混合物中逐滴加入BnBr(38.5g，22.5mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜。TLC顯示出反應(yīng)完成。將混合物濃縮，以除去溶劑。將殘余物在EtOAc和水之間分離。用鹽水洗滌合并的有機(jī)層，通過Na2SO4干燥并濃縮。通過柱色譜純化粗產(chǎn)物，獲得作為無色油的(2S)-2-芐基1-叔-丁基4-乙基吡咯烷-1,2-二羧酸酯(46g，74％)。通過手性O(shè)D250*250mmi.d.10μ柱(移動相：A為n-己烷，而B為乙醇(0.05％IPAm)，梯度：A:B＝97:3，流速：100ml/min，波長：210和220nm，注射量：0.4g/注射)，通過制備性SFC，分離(2S)-2-芐基1-叔-丁基4-乙基吡咯烷-1,2-二羧酸酯，以提供(2S,4S)-2-芐基1-叔-丁基4-乙基吡咯烷-1,2-二羧酸酯。(2S,4S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4-乙基吡咯烷-2-羧酸將MeOH(1L)中的(2S,4S)-2-芐基1-叔-丁基4-乙基吡咯烷-1,2-二羧酸酯(18g，54.1mmol)，Pd/C(3.6g)的混合物在室溫下氫化過夜。TLC顯示出反應(yīng)完成。將混合物通過硅藻土過濾。將濾液濃縮，以獲得作為白色固體的(2S,4S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4-乙基吡咯烷-2-羧酸(10g，77％)。1HNMR:400MHzCDCl3:δ9.88(br,1H),4.31-4.19(m,1H),3.82-3.68(m,1H),3.03-2.95(m,1H),2.49-2.39(m,1H),2.12-2.03(m,1H),1.81-1.56(m,1H),1.45(d,J＝8Hz,11H),0.92(t,J＝6Hz,3H)。中間體11rel-(2S,4S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4,5-二甲基吡咯烷-2-羧酸向EtOH(100mL)中的1-叔-丁基2-乙基4,5-二甲基-1H-吡咯-1,2-二羧酸酯(4.016g，15.02mmol)的溶液中加入鈀碳(5％，0.58g)。將漿液在氫氣氛(1atm)下攪拌3天。將漿液通過硅藻土過濾，并用MeOH洗滌。將濾液濃縮，并將粗制物通過柱色譜(SiO2，5-10-20％EtOAc/己烷)，以提供rel-(2S,4S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4,5-二甲基吡咯烷-2-羧酸。向THF(70mL)、MeOH(25mL)和H2O(25mL)混合物中的rel-(2S,4S,5S)-1-叔-丁基2-乙基4,5-二甲基吡咯烷-1,2-二羧酸酯的溶液中加入氫氧化鋰(1.53g，63.7mmol)。將漿液在室溫下攪拌2.5h，在45℃下攪拌2h。將溶液冷卻至室溫，并加入HCl(含水，1N，70mL)。將有機(jī)物濃縮并將用EtOAc提取得到的含水層(3×)。將合并的有機(jī)層通過Na2SO4干燥，并濃縮，以提供rel-(2S,4S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4,5-二甲基吡咯烷-2-羧酸(3.08g，84％)。中間體12(2S,3aS,6aS)-2-芐基1-叔-丁基六氫環(huán)戊[b]吡咯-1,2(2H)-二羧酸酯向二氯甲烷(42mL)中的商業(yè)購得的(2S,3aS,6aS)-芐基六氫環(huán)五[b]吡咯-2-羧酸酯(4.70g，16.68mmol)的溶液中加入二-叔-丁基二羧酸酯(7.28g，33.36mmol)、N,N-二異丙基乙胺(5.82mL，33.36mmol)和4-(二甲基氨基)吡啶(0.20g，1.67mmol)。將溶液在空氣下攪拌16小時。完成時，將反應(yīng)真空濃縮，在乙酸乙酯中稀釋，并用1NHCl洗滌。用乙酸乙酯將含水層反萃取兩次，并將合并的有機(jī)層通過硫酸鈉干燥，過濾并濃縮。通過硅膠色譜(己烷中5-40％乙酸乙酯)純化所得到的殘余物，以獲得(2S,3aS,6aS)-2-芐基1-叔-丁基六氫環(huán)戊[b]吡咯-1,2(2H)-二羧酸酯，其沒有進(jìn)一步純化就使用了。MS(ESI)m/z368.47[M+Na]+。(2S,3aS,6aS)-1-(叔-丁氧基羰基)八氫環(huán)戊[b]吡咯-2-羧酸向裝有攪拌棒和(2S,3aS,6aS)-2-芐基1-叔-丁基六氫環(huán)戊[b]吡咯-1,2(2H)-二羧酸酯(5.76g，16.68mmol)的250mL圓底燒瓶中加入10％鈀碳(1.77g)。將乙醇倒在混合物上，并排空反應(yīng)混合物，用氫氣沖洗三次。將懸浮液在室溫下在氫氣氣氛下攪拌24小時。完成時，將反應(yīng)混合物通過硅藻土過濾，并濃縮，以產(chǎn)生(2S,3aS,6aS)-1-(叔-丁氧基羰基)八氫環(huán)戊[b]吡咯-2-羧酸(4.45g，>99％)。MS(ESI)m/z256.21[M+H]+。中間體13(2S,3aS,6aS)-芐基1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?八氫環(huán)戊[b]吡咯-2-羧酸酯向二氯甲烷(100mL)中的商業(yè)購得的(2S,3aS,6aS)-芐基八氫環(huán)戊[b]吡咯-2-鹽酸羧酸酯(10.0g，35.489mmol)的溶液中加入(2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊酸(10.072g，53.23mmol)、HATU(21.59g，56.78mmol)和DIPEA(18.59mL，106.46mmol)。將反應(yīng)攪拌過夜，在該時間，真空濃縮，在乙酸乙酯中稀釋并用HCl(1N)洗滌。用乙酸乙酯反萃取含水層，并將合并的有機(jī)物通過硫酸鈉干燥，過濾并濃縮。將所得到的油在少量氯仿中稀釋并過濾，以除去四甲基脲沉淀物。將所得到的油通過正常相色譜(己烷中的50％乙酸乙酯)純化，以獲得(2S,3aS,6aS)-芐基1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊酰基)八氫環(huán)戊[b]吡咯-2-羧酸酯(19.53g，>99％產(chǎn)量)，將其使用，沒有進(jìn)一步純化。LCMS-ESI+對C23H33N2O5分析計算值:417.23；實測值:417.37。(2S,3aS,6aS)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?八氫環(huán)戊[b]吡咯-2-羧酸向裝有攪拌棒和(2S,3aS,6aS)-芐基1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?八氫環(huán)戊[b]吡咯-2-羧酸酯(19.53g粗品，假定為35.49mmol)的250mL圓底燒瓶中加入10％鈀碳(3.55g)。將乙醇倒在混合物上，并將反應(yīng)混合物排空，并用氫氣沖洗三次。將懸浮液在氫氣氛下在室溫下攪拌3天。完成時，將反應(yīng)混合物通過硅藻土過濾并濃縮，以獲得(2S,3aS,6aS)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊酰基)八氫環(huán)戊[b]吡咯-2-羧酸(13.65g，>99％)。LCMS-ESI+對C16H26N2O5分析計算值:327.18；實測值:327.13。中間體14(2S,3aS,6aS)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁?；?八氫環(huán)戊[b]吡咯-2-羧酸以與(2S,3aS,6aS)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?八氫環(huán)戊[b]吡咯-2-羧酸相似的方式來合成(2S,3aS,6aS)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁?；?八氫環(huán)戊[b]吡咯-2-羧酸，用(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸替代(2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊酸。LCMS-ESI+對C15H25N2O5分析計算值:313.17；實測值:313.12。中間體15(2S,5S)-1-((S)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸以與中間體4相似的方式來合成(2S,5S)-1-((S)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，用(S)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸替代(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ5.33-5.16(m,1H),4.70-4.59(m,1H),4.54(t,1H),4.34-4.19(m,2H),4.12(q,1H),3.78-3.70(m,1H),3.67(s,3H),2.37-2.17(m,3H),2.15-2.07(m,1H),2.04(s,1H),1.84-1.73(m,1H),1.82-1.43(m,3H),1.32(d,3H),1.26(d,4H),1.11(d,3H),0.96(q,1H).LCMS-ESI+對C17H29N2O6分析計算值:357.19；實測值:357.08。實施例AA(2S,5S)-2-(9-溴-8-氧-8,9,10,11-四氫-5H-二苯并[c,g]色烯-3-基)-2-氧乙基1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸酯向二氯甲烷(50mL)中的9-溴-3-(2-溴乙?；?-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)-酮(4.00g，8.88mmol)的漿液中加入(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸(2.80g，9.32mmol)和K2CO3(1.84g，13.31mmol)。將所得到的漿液在室溫下攪拌18h。用二氯甲烷稀釋反應(yīng)并用含水HCl(0.5M)和鹽水洗滌。用二氯甲烷反萃取含水層(2×)，并將合并的有機(jī)層通過Na2SO4干燥并濃縮。將粗產(chǎn)物直接用于下一個反應(yīng)中。(2S,5S)-1-叔-丁基2-(3-(2-((2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羰基氧)乙?；?-8-氧-8,9,10,11-四氫-5H-二苯并[c,g]色烯-9-基)5-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸酯向THF(60mL)中的(2S,5S)-2-(9-溴-8-氧-8,9,10,11-四氫-5H-二苯并[c,g]色烯-3-基)-2-氧乙基1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸酯(5.95g，8.88mmol)的溶液中加入(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸(3.05g，13.3mmol)和Cs2CO3(2.31g，7.09mmol)。將所得到的溶液加熱至50℃，持續(xù)18h。將溶液冷卻至室溫，并用EtOAc稀釋，用含水HCl(0.5M)洗滌。用EtOAc反萃取含水層(2×)，并將合并的有機(jī)層通過Na2SO4干燥，并濃縮。通過柱色譜(SiO2，25-100％EtOAc(5％MeOH)/己烷)純化，以提供作為橙色泡沫的(2S,5S)-1-叔-丁基2-(3-(2-((2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羰基氧)乙?；?-8-氧-8,9,10,11-四氫-5H-二苯并[c,g]色烯-9-基)5-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸酯(2個步驟中，3.116g，43％)。LCMS-ESI+:對C44H55N3O12分析計算值:817.38(M+)；實測值:817.65(M+)。叔-丁基(2S,5S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(甲氧基羰基)-L-異亮氨酰]-5-甲基吡咯烷-2-基}-1H-咪唑-5-基)-1,4,5,11-四氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基]-5-甲基吡咯烷-1-羧酸酯向甲苯(35mL)中的(2S,5S)-1-叔-丁基2-(3-(2-((2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羰基氧)乙酰基)-8-氧-8,9,10,11-四氫-5H-二苯并[c,g]色烯-9-基)5-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸酯(3.116g，3.57mmol)的溶液中加入六甲基二硅氮烷(6.0mL，28.7mmol)和丙酸(8.0mL，107.1mmol)。將溶液加熱至90℃，持續(xù)18h，并冷卻至室溫。用MeOH稀釋溶液，并且用NH4OH和水的1:1混合物堿化。用二氯甲烷萃取漿液(3×)。將合并的有機(jī)層通過Na2SO4干燥，并濃縮。將粗油直接用于下一個步驟中。LCMS-ESI+:對C44H55N7O6分析計算值:777.42(M+)；實測值:778.30(M+H+)。叔-丁基(2S,5S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(甲氧基羰基)-L-異亮氨酰]-5-甲基吡咯烷-2-基}-1H-咪唑-5-基)-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基]-5-甲基吡咯烷-1-羧酸酯向二氯甲烷(25mL)中的叔-丁基(2S,5S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(甲氧基羰基)-L-異亮氨酰]-5-甲基吡咯烷-2-基}-1H-咪唑-5-基)-1,4,5,11-四氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基]-5-甲基吡咯烷-1-羧酸酯(2.77g，3.5mmol)的溶液中加入MnO2(9.00g，103mmol)。將所得到的漿液在室溫下攪拌20h。用二氯甲烷稀釋溶液，通過硅藻土過濾，并濃縮。將粗油通過柱色譜(SiO2，0-5-10％EtOAc/MeOH)純化，以提供作為棕色泡沫的叔-丁基(2S,5S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(甲氧基羰基)-L-異亮氨酰]-5-甲基吡咯烷-2-基}-1H-咪唑-5-基)-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基]-5-甲基吡咯烷-1-羧酸酯(2個步驟中，1.10g，40％)。LCMS-ESI+:對C44H53N7O6分析計算值:775.41(M+)；實測值:776.37(M+H+)。甲基{(2S,3S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧戊烷-2-基}氨基甲酸酯向二氯甲烷(4mL)和甲醇(0.5mL)混合物中的叔-丁基(2S,5S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(甲氧基羰基)-L-異亮氨酰]-5-甲基吡咯烷-2-基}-1H-咪唑-5-基)-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基]-5-甲基吡咯烷-1-羧酸酯(0.30g，0.39mmol)的溶液中加入HCl(二噁烷中4M，1.45mL，5.80mmol)。將溶液加熱至40℃，持續(xù)1h，并冷卻至室溫。然后將溶液真空濃縮。將所得到的固體溶解于DMF(3mL)中，接著加入(S)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸(0.11g，0.46mmol)、HATU(0.18g，0.48mmol)和二異丙基乙胺(0.3mL，1.72mmol)。將所得到的溶液在室溫下攪拌3h。加入含水HCl(6M，4滴)，并通過反相HPLC(Gemini柱，10-53％MeCN/H2O/0.1％TFA)純化溶液。將所需級分合并，并將有機(jī)物真空濃縮。用飽和NaHCO3堿化所得到的水溶液，以提供白色沉淀物。將固體過濾，并干燥，以提供作為白色粉末的甲基{(2S,3S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙酰基}-5-甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧戊烷-2-基}氨基甲酸酯(0.082g，23％)。LCMS-ESI+:對C50H62N8O9分析計算值:903.08(M+)；實測值:903.84(M+H+)。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.36–8.22(m,1H),7.98–7.82(m,1H),7.69–7.20(m,8H),5.22–5.07(m,3H),5.02(d,1H),4.73–4.64(m,1H),4.49(s,3H),4.26–3.97(m,4H),3.79(d,1H),3.72(s,1H),3.63–3.52(m,4H),3.47–3.32(m,1H),2.61–2.43(m,1H),2.32–1.98(m,4H),1.95–1.78(m,1H),1.79–1.65(m,1H),1.54(s,4H),1.41(d,2H),1.28–1.09(m,3H),1.04(dd,6H),0.90(d,1H),0.88–0.59(m,10H)。實施例AB甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙酰基}-4-(甲氧基甲基)吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯按照實施例AA，用(2S,4S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4-(甲氧基甲基)吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，并用(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，提供了甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-4-(甲氧基甲基)吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯(0.25g)。LCMS-ESI+:對C50H62N8O9分析計算值:918.46(M+)；實測值:919.97(M+H+)。1HNMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.39–8.11(m,1H),8.09–7.40(m,5H),7.28(s,2H),5.27–4.91(m,5H),4.49(s,3H),4.34–4.14(m,2H),4.14–4.00(m,3H),3.80(s,1H),3.59(s,2H),3.57(s,3H),3.54–3.39(m,3H),3.31(s,3H),2.68–2.46(m,2H),2.45–2.30(m,1H),2.31–1.93(m,5H),1.94–1.81(m,1H),1.50(d,2H),1.46–1.25(m,4H),1.10(dd,3H),1.06–0.90(m,9H),0.87(d,2H)。實施例AC甲基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2S,5S)-2-乙基-5-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(甲氧基羰基)氨基]-3-甲基丁酰基}-5-甲基吡咯烷-2-yl]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯按照實施例AB，用(2S,4S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4-(甲氧基甲基)吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，并用(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-乙基吡咯烷-2-羧酸，提供了甲基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2S,5S)-2-乙基-5-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(甲氧基羰基)氨基]-3-甲基丁酰基}-5-甲基吡咯烷-2-yl]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯(0.21g)。LCMS-ESI+:對C50H62N8O8分析計算值:902.47(M+)；實測值:904.14(M+H+).1HNMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.33–8.04(m,1H),8.01–7.68(m,1H),7.68–7.37(m,14H),7.32–7.17(m,1H),5.22–4.95(m,3H),4.50(s,6H),4.31–3.92(m,5H),3.80(s,1H),3.58(d,J＝2.9Hz,4H),3.52–3.35(m,1H),2.56–2.39(m,1H),2.31–2.11(m,2H),2.12–1.88(m,3H),1.88–1.76(m,1H),1.76–1.48(m,1H),1.40(d,J＝6.7Hz,2H),1.21(d,J＝7.0Hz,2H),1.12–1.02(m,4H),0.99(t,J＝7.3Hz,1H),0.93(d,J＝7.0Hz,1H),0.89(d,J＝6.6Hz,1H),0.87–0.74(m,5H),0.70–0.45(m,1H)。實施例AD甲基[(2S)-1-{(2S,5S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[(2S)-2-[(叔-丁氧基羰基)氨基]-2-(4-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)乙?；鵠-5-甲基吡咯烷-2-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基)-1H-咪唑-2-基]-5-甲基吡咯烷-1-基}-3-甲基-1-氧丁烷-2-基]氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基[(2S)-1-{(2S,5S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[(2S)-2-[(叔-丁氧基羰基)氨基]-2-(4-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)乙酰基]-5-甲基吡咯烷-2-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基)-1H-咪唑-2-基]-5-甲基吡咯烷-1-基}-3-甲基-1-氧丁烷-2-基]氨基甲酸酯，用(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊酰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，并用(S)-2-(叔-丁氧基羰基氨基)-2-(4-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)乙酸替代(S)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸。MS(ESI)m/z917.62[M+H]+。甲基[(2S)-1-{(2S,5S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[(2S)-2-[(甲氧基羰基)氨基]-2-(4-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)乙?；鵠-5-甲基吡咯烷-2-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基)-1H-咪唑-2-基]-5-甲基吡咯烷-1-基}-3-甲基-1-氧丁烷-2-基]氨基甲酸酯向二氯甲烷(6.4mL)和甲醇(1.2mL)混合物中的甲基[(2S)-1-{(2S,5S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[(2S)-2-[(叔-丁氧基羰基)氨基]-2-(4-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)乙?；鵠-5-甲基吡咯烷-2-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基)-1H-咪唑-2-基]-5-甲基吡咯烷-1-基}-3-甲基-1-氧丁烷-2-基]氨基甲酸酯(0.594g，0.648mmol)的溶液中加入HCl(二噁烷中4M，2.4mL，9.72mmol)。將溶液加熱至40℃，持續(xù)1h，并冷卻至室溫。然后將溶液真空濃縮。將所得到的固體溶解于DMF(3mL)中，接著添加氯甲酸甲酯(0.050mL，0.648mmol)和二異丙基乙胺(0.14mL，0.78mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘。通過LCMS監(jiān)控完成時，通過反相HPLC(Gemini柱，10-45％MeCN/H2O/0.1％TFA)來純化溶液。將所需級分凍干，以獲得甲基[(2S)-1-{(2S,5S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[(2S)-2-[(甲氧基羰基)氨基]-2-(4-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)乙酰基]-5-甲基吡咯烷-2-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基)-1H-咪唑-2-基]-5-甲基吡咯烷-1-基}-3-甲基-1-氧丁烷-2-基]氨基甲酸酯(0.057g，10％)。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.63(s,1H),8.19(d,1H),8.09–7.75(m,4H),7.75–7.61(m,2H),7.46–7.24(m,1H),5.39–5.24(m,2H),5.23–5.12(m,1H),4.84–4.60(m,2H),4.44–4.22(m,1H),4.22–4.02(m,1H),3.85–3.62(m,8H),3.60–3.45(m,2H),2.84–2.44(m,2H),2.42–2.23(m,3H),2.12–1.82(m,3H),1.67(d,2H),1.56(d,4H),1.37–1.19(m,4H),1.17–1.03(m,4H),0.98(d,3H),0.88(d,3H).MS(ESI)m/z875.53[M+H]+。實施例AE甲基[(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-{(2S,4S)-4-乙基-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(甲氧基羰基)-L-纈氨酰]-5-甲基吡咯烷-2-基}-1,11-二氫四色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基)-1H-咪唑-2-基]吡咯烷-1-基}-2-氧乙基]氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基[(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-{(2S,4S)-4-乙基-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(甲氧基羰基)-L-纈氨酰]-5-甲基吡咯烷-2-基}-1,11-二氫四色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基)-1H-咪唑-2-基]吡咯烷-1-基}-2-氧乙基]氨基甲酸酯，用(2S,4S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4-乙基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代，并用(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸。1HNMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.48-8.29(m,1H),8.10-7.91(m,1H),7.86-7.23(m,5H),5.35-5.15(m,2H),5.07(t,1H),4.46-4.26(m,2H),4.25-4.07(m,2H),3.91(s,1H),3.66(d,5H),3.52-3.37(m,1H),2.74-2.41(m,2H),2.40-1.89(m,6H),1.75-1.34(m,7H),1.33-0.75(m,18H).MS(ESI)m/z903.99[M+H]+。實施例AF甲基[(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-{(2S,4S)-4-乙基-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(甲氧基羰基)-L-纈氨酰]-5-甲基吡咯烷-2-基}-1H-咪唑-5-基)-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基]吡咯烷-1-基}-2-氧乙基]氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基[(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-{(2S,4S)-4-乙基-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(甲氧基羰基)-L-纈氨酰]-5-甲基吡咯烷-2-基}-1H-咪唑-5-基)-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基]吡咯烷-1-基}-2-氧乙基]氨基甲酸酯，用(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸。1HNMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.34(d,1H),7.94(dd,1H),7.88-7.60(m,3H),7.59-7.28(m,2H),5.25-5.11(m,3H),4.54(s,1H),4.39(t,1H),4.27-4.12(m,2H),4.12-4.02(m,1H),3.62(d,4H),3.48(s,3H),3.13(s,3H),2.68-2.45(m,1H),2.38-2.19(m,2H),2.19-1.83(m,4H),1.70-1.53(m,2H),1.46(d,2H),1.44-1.28(m,3H),1.28-1.13(m,1H),1.10(d,3H),1.07-0.87(m,12H),0.85-0.77(m,1H).MS(ESI)m/z903.88[M+H]+。實施例AG甲基(1S)-2-[(2S,5S)-2-乙基-5-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2[(甲氧基羰基)氨基]-3-甲基丁?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基]-2-氧-1-[(3R)-四氫-2H-吡喃-3-基]乙基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基(1S)-2-[(2S,5S)-乙基-5-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2[(甲氧基羰基)氨基]-3-甲基丁酰基}-5-甲基吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基]-2-氧-1-[(3R)-四氫-2H-吡喃-3-基]乙基}氨基甲酸酯，用(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸；用(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-乙基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，并用(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-((R)-四氫-2H-吡喃-3-基)乙酸替代(S)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸。1HNMR(400MHz,dmso)δ8.60(s,1H),8.25–7.43(m,7H),5.23(s,2H),5.13(m,1H),5.01–4.90(m,1H),4.59(s,1H),4.33(m,2H),4.12–3.43(m,14H),3.37(m,1H),3.08(m,2H),2.39–1.70(m,10H),1.44(m,5H),1.12(m,2H),0.92(m,5H),0.73–0.54(m,3H)MS(ESI)m/z875.95[M+H]+。實施例AH甲基{(1S)-2-[(2S,5S)-2-乙基-5-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(甲氧基羰基)氨基]-3-甲基丁?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基]-2-氧-1-[(3S)-四氫-2H-吡喃-3-基]乙基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基{(1S)-2-[(2S,5S)-2-乙基-5-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(甲氧基羰基)氨基]-3-甲基丁?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基]-2-氧-1-[(3S)-四氫-2H-吡喃-3-基]乙基}氨基甲酸酯，用(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸；用(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-乙基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，并用(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-((S)-四氫-2H-吡喃-3-基)乙酸替代(S)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸。1HNMR(400MHz,dmso)δ8.64(s,1H),8.24–7.46(m,8H),5.27(s,2H),5.13(s,1H),4.99(s,1H),4.62(s,1H),4.12m,5H),3.67–3.23(m,8H),3.12(s,1H),2.43–2.06(m,6H),2.04–1.63(m,8H),1.47(m,4H),1.38–1.07(m,3H),0.95(m,6H),0.79–0.62(m,3H).MS(ESI)m/z875.86[M+H]+。實施例AI甲基{(1S)-2-[(2S,5S)-2-甲基-5-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(甲氧基羰基)氨基]-3-甲基丁酰基}-5-甲基吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基]-2-氧-1-[(3R)-四氫-2H-吡喃-3-基]乙基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基{(1S)-2-[(2S,5S)-2-甲基-5-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(甲氧基羰基)氨基]-3-甲基丁?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基]-2-氧-1-[(3R)-四氫-2H-吡喃-3-基]乙基}氨基甲酸酯，用(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，并用(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-((R)-四氫-2H-吡喃-3-基)乙酸替代(S)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸。1HNMR(400MHz,dmso)δ8.60(s,1H),8.25–7.46(m,7H),5.23(s,2H),5.11(m,1H),4.96(s,1H),4.64(m,2H),4.16–3.58(m,9H),3.56–3.31(m,6H),3.08(m,3H),2.19(m,5H),1.86(m,3H),1.43(m,7H),1.24–0.92(m,3H),0.83(m,3H),0.68(m,3H).MS(ESI)m/z861.45[M+H]+。實施例AJ甲基{(1S)-2-[(2S,5S)-2-甲基-5-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(甲氧基羰基)氨基]-3-甲基丁?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基]-2-氧-1-[(3S)-四氫-2H-吡喃-3-基]乙基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基{(1S)-2-[(2S,5S)-2-甲基-5-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(甲氧基羰基)氨基]-3-甲基丁?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)吡咯烷-1-基]-2-氧-1-[(3S)-四氫-2H-吡喃-3-基]乙基}氨基甲酸酯，用(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，并用(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-((S)-四氫-2H-吡喃-3-基)乙酸替代(S)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)醋酸。1HNMR(400MHz,dmso)δ8.74–8.44(m,1H),8.26–7.31(m,9H),5.25(s,2H),5.19–5.04(m,1H),5.04–4.87(m,1H),4.77–4.48(m,1H),4.44–3.73(m,2H),3.66–2.95(m,4H),2.29(s,8H),1.83(s,7H),1.46(m,12H),0.85(m,5H),0.72(m,3H).MS(ESI)m/z861.41[M+H]+。實施例AK甲基[(2S)-1-{(2S,5S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[(2S)-2-[(叔-丁氧基羰基)氨基]-2-(4-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)乙?；鵠-5-甲基吡咯烷-2-基}-1H-咪唑-5-基)-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基]-5-甲基吡咯烷-1-基}-3-甲基-1-氧丁烷-2-基]氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基[(2S)-1-{(2S,5S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[(2S)-2-[(叔-丁氧基羰基)氨基]-2-(4-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)乙?；鵠-5-甲基吡咯烷-2-基}-1H-咪唑-5-基)-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基]-5-甲基吡咯烷-1-基}-3-甲基-1-氧丁烷-2-基]氨基甲酸酯，用(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸；用(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁?；?替代(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，并用(S)-2-(叔-丁氧基羰基氨基)-2-(4-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)乙酸替代(S)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸。實施例AL甲基[(2S)-1-{(2S,5S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[(2S)-2-[(甲氧基羰基)氨基]-2-(4-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)乙?；鵠-5-甲基吡咯烷-2-基}-1H-咪唑-5-基)-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基]-5-甲基吡咯烷-1-基}-3-甲基-1-氧丁烷-2-基]氨基甲酸酯將甲基[(2S)-1-{(2S,5S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[(2S)-2-[(叔-丁氧基羰基)氨基]-2-(4-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)乙酰基]-5-甲基吡咯烷-2-基}-1H-咪唑-5-基)-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基]-5-甲基吡咯烷-1-基}-3-甲基-1-氧丁烷-2-基]氨基甲酸酯(316mg，0.34mmol)溶解于EtOH(3mL)和HCl(1mL)中。將反應(yīng)混合物在60℃下攪拌1h，然后在減壓下濃縮。將粗殘余物溶解于用DIPEA(0.18mL，1.0mmol)和氯甲酸甲酯(0.03mL，0.38mmol)處理的THF(3mL)和CH2Cl2(3mL)中。1h后，用EtOAc稀釋混合物，并用水和鹽水連續(xù)洗滌。將有機(jī)物通過Na2SO4干燥，過濾并在減壓下濃縮。通過反相HPLC(Gemini，15至45％ACN/H2O+0.1％TFA)純化粗殘余物，以獲得甲基[(2S)-1-{(2S,5S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[(2S)-2-[(甲氧基羰基)氨基]-2-(4-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)乙?；鵠-5-甲基吡咯烷-2-基}-1H-咪唑-5-基)-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基]-5-甲基吡咯烷-1-基}-3-甲基-1-氧丁烷-2-基]氨基甲酸酯(100mg，33％)。1HNMR(400MHz,dmso)δ8.67(s,1H),8.26–7.47(m,8H),5.27(m,2H),5.15(m,1H),5.02–4.90(m,1H),4.70(s,1H),4.44(s,1H),4.29–3.28(m,16H),2.21(m,5H),1.75(m,3H),1.49(m,6H),1.35–1.05(m,3H),1.02–0.86(m,4H),0.83(m,3H),0.72(m,3H).MS(ESI)m/z875.91[M+H]+。實施例AM甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6S)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6S)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯，用(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，并用(2S)-2-((2R,6S)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸替代(S)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸。1HNMR(400MHz,dmso)δ8.64(s,1H),8.29–7.49(m,7H),5.26(s,2H),5.15(m,1H),5.07–4.91(m,1H),4.61(m,2H),4.17–3.29(m,16H),2.43–2.02(m,8H),1.83(s,2H),1.47(m,5H),1.36–0.76(m,12H),0.71(m,3H).MS(ESI)m/z889.60[M+H]+。實施例AN甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2R)-2-[(2R,6S)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2R)-2-[(2R,6S)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙酰基}-5-甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯，用(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，并用(2R)-2-((2R,6S)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸替代(S)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸。1HNMR(400MHz,dmso)δ8.59(m,2H),8.27–7.25(m,6H),5.23(m,2H),5.06–4.86(m,1H),4.76–4.21(m,3H),4.12–2.96(m,18H),2.51–1.69(m,12H),1.65–1.33(m,6H),1.25–0.55(m,8H),0.07(m,2H).MS(ESI)m/z889.69[M+H]+。實施例AO甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6S)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙酰基}-5-甲基吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6S)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯，用(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸；用(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，并用(2S)-2-((2R,6S)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸替代(S)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸。1HNMR(400MHz,dmso)δ8.60(s,2H),8.25–7.37(m,8H),5.22(s,2H),5.11(s,1H),4.95(s,1H),4.67(s,1H),4.52(m,2H),3.56(m,15H),2.25(m,8H),1.80(s,2H),1.44(m,6H),1.26–0.54(m,12H)MS(ESI)m/z889.56[M+H]+。實施例AP甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2R)-2-[(2R,6S)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2R)-2-[(2R,6S)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯，用(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸；用(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，并用(2R)-2-((2R,6S)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸替代(S)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸。1HNMR(400MHz,dmso)δ8.60(m,1H),8.24–7.41(m,8H),5.23(m,2H),5.10(m,2H),4.65(s,2H),3.73(m,14H),2.33(m,11H),1.84(s,3H),1.54–1.30(m,5H),1.29–0.61(m,11H),0.48(s,1H).MS(ESI)m/z890.05[M+H]+。實施例AQ甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-di甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯，用(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸來替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸。1HNMR(400MHz,dmso)δ8.63(s,1H),8.24–7.44(m,8H),5.25(s,2H),5.14(s,1H),4.99(s,1H),4.67(m,2H),3.96(m,5H),3.48(m,12H),2.44–1.75(m,9H),1.48(m,6H),1.30–1.10(m,3H),1.01(m,3H),0.85(m,4H),0.75(m,3H).MS(ESI)m/z889.58[M+H]+。實施例AR甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2R)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2R)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙酰基}-5-甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯，用(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，并用(R)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸替代(S)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸。1HNMR(400MHz,dmso)δ8.64(m,1H),7.67(m,7H),5.36–5.12(m,2H),4.99(s,1H),4.62(s,1H),4.38(s,1H),4.22(s,1H),4.16–4.02(m,1H),4.00–3.84(m,1H),3.70–3.09(m,12H),2.24(m,5H),1.84(s,2H),1.60(s,1H),1.44(m,4H),1.33–0.36(m,19H).MS(ESI)m/z889.76[M+H]+。實施例AS甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙酰基}-5-甲基吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯，用(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷，并用(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸。1HNMR(400MHz,dmso)δ8.65(s,1H),8.23–7.44(m,8H),5.26(s,2H),5.15(s,1H),4.99(s,1H),4.66(m,2H),4.24–3.82(m,4H),3.75–3.20(m,12H),2.42–1.72(m,10H),1.47(m,5H),1.30–0.96(m,6H),0.95–0.62(m,8H).MS(ESI)m/z889.88[M+H]+。實施例AT甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2R)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙酰基}-5-甲基吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2R)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯，用(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸；用(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，并用(R)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸替代(S)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸。1HNMR(400MHz,dmso)δ8.65(s,1H),7.74(m,8H),5.71–5.53(m,1H),5.28(s,2H),5.15(s,1H),5.05(s,1H),4.70(s,1H),4.13(m,5H),3.82–3.15(m,10H),2.70–2.57(m,1H),2.43–1.71(m,9H),1.67–1.29(m,6H),1.28–0.54(m,14H).MS(ESI)m/z889.53[M+H]+。實施例AU甲基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-di甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙酰基}-5-甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯，用(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊酰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸。1HNMR(400MHz,dmso)δ12.94(s,1H),12.36(s,1H),11.77(s,1H),8.42(m,1H),8.13–7.16(m,7H),5.11(s,3H),4.96(s,1H),4.64(s,2H),3.97(m,4H),3.67–3.11(m,13H),2.39–1.66(m,10H),1.62–1.30(m,7H),1.30–0.92(m,9H),0.81(m,6H).MS(ESI)m/z960.04[M+H]+。實施例AU-2(2S,5S)-2-(2-(9-(((2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羰基)氧)-8-氧-8,9,10,11-四氫-5H-二苯并[c,g]色烯-3-基)-2-氧乙基)1-叔-丁基5-甲基吡咯烷-1,2-二碳酸酯向THF(400mL)中的(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸(25.44g，111mmol)的溶液中加入碳酸銫(21.7g，66.6mmol)。將溶液在室溫下攪拌15min，接著加入9-溴-3-(2-溴乙?；?-10,11-二氫-5H-二苯并[c,g]色烯-8(9H)-酮(19.9g，44.4mmol)。將漿液在室溫下攪拌15分鐘，然后加熱至40℃，持續(xù)16小時。將反應(yīng)冷卻至室溫，并用EtOAc稀釋。用0.3M含水HCl洗滌溶液。用EtOAc反萃取含水層，并將合并的有機(jī)層通過Na2SO4干燥并濃縮。然后將粗油通過硅膠塞(260g)過濾，使用40％EtOAc/己烷。將濾液合并并濃縮，以提供(2S,5S)-2-(2-(9-(((2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羰基)氧)-8-氧-8,9,10,11-四氫-5H-二苯并[c,g]色烯-3-基)-2-氧乙基)1-叔-丁基5-甲基吡咯烷-1,2-二碳酸酯(33g，100％)。MS(ESI)m/z647.57[M-Boc]+。(2S,5S)-叔-丁基2-(5-(2-((2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1,4,5,11-四氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-羧酸酯向甲苯(600mL)和異丙醇(66mL)中的(2S,5S)-2-(2-(9-(((2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羰基)氧)-8-氧-8,9,10,11-四氫-5H-二苯并[c,g]色烯-3-基)-2-氧乙基)1-叔-丁基5-甲基吡咯烷-1,2-二碳酸酯(49.3g，66mmol)的溶液中加入醋酸銨(102g，1323mmol)。將反應(yīng)加熱至90℃，持續(xù)18小時，并冷卻至室溫。通過加入水(200mL)淬滅反應(yīng)，并在室溫下攪拌10min。分離有機(jī)層，并用水(200mL)洗滌。用甲苯/異丙醇/甲醇(10:1:1，60mL)的混合物反萃取合并的含水層。將合并的有機(jī)層轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶，并加入硅藻土(29g)、甲醇(150mL)以及鹽水和6MNaOH的2:1混合物。強(qiáng)烈攪拌40min后，將漿液過濾并用甲苯/異丙醇的9:1混合物沖洗。分離有機(jī)層，用EtOAc稀釋，并用水洗滌。然后將有機(jī)層濃縮，溶解于CH2Cl2/己烷的混合物中，并濃縮至干。這提供了(2S,5S)-叔-丁基2-(5-(2-((2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1,4,5,11-四氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-羧酸酯(32.3g，69％)。MS(ESI)m/z707.30[M+H]+。(2S,5S)-叔-丁基2-(5-(2-((2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-羧酸酯向CH2Cl2(420mL)中的(2S,5S)-叔-丁基2-(5-(2-((2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1,4,5,11-四氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-羧酸酯(32.3g，45.7mmol)的溶液中加入二氧化錳(120g，1380mmol)。將漿液在室溫下攪拌46小時。然后用CH2Cl2稀釋反應(yīng)，并加入硅藻土。在室溫下攪拌20min后，將漿液過濾并用CH2Cl2洗滌硅藻土。將濾液濃縮，以提供(2S,5S)-叔-丁基2-(5-(2-((2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-羧酸酯(25.1g，78％)。MS(ESI)m/z705.50[M+H]+。2-((2S,5S)-5-甲基吡咯烷-2-基)-9-(2-((2S,5S)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑在5分鐘內(nèi)向CH2Cl2(350mL)中的(2S,5S)-叔-丁基2-(5-(2-((2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基)-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-羧酸酯(25.1g，35.6mmol)的溶液中緩慢加入HCl(二噁烷中6M，180mL，720mmol)。將溶液在室溫下攪拌30分鐘，然后溫?zé)嶂?0℃，持續(xù)1.5小時。將所得到的漿液冷卻至室溫并過濾。然后用CH2Cl2洗滌沉淀物，并干燥，以提供作為四-HCl鹽的2-((2S,5S)-5-甲基吡咯烷-2-基)-9-(2-((2S,5S)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑(21.2g，92％)。MS(ESI)m/z505.18[M+H]+甲基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯向DMF(180mL)中的1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDCI.HCl，11.7g，61mmol)的溶液中加入1-羥基苯并三唑(8.2g，61mmol)。攪拌漿液，直至均勻，并冷卻至2℃。加入(S)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酸(15.0g，61.2mmol)并在1℃下攪拌1小時。然后加入2-((2S,5S)-5-甲基吡咯烷-2-基)-9-(2-((2S,5S)-5-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-基)-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑四-HCl鹽(15.6g，27.1mmol)和n-甲基嗎啉(17.8mL，162.6mmol)。將所得到的混合物在室溫下攪拌22小時。然后用EtOAc稀釋反應(yīng)，并用NH4Cl(2×500mL)、含水碳酸氫鹽(2×300mL)和鹽水(300mL)洗滌。用EtOAc反萃取含水層。將合并的有機(jī)層通過Na2SO4干燥并濃縮。將粗制材料通過硅膠塞純化，使用3至8％MeOH/CH2Cl2，以提供甲基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯(20.5g，79％)。MS(ESI)m/z959.87[M+H]+實施例AV甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-4-甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-di甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-4-甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯，用(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，并用(2S,4S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸。1HNMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.63(d,1H),8.19(d,1H),8.11–7.76(m,4H),7.72–7.57(m,1H),5.44–5.26(m,2H),5.23–5.11(m,1H),5.00–4.71(m,5H),4.47(t,1H),4.16(dt,3H),3.81–3.62(m,5H),3.53(t,1H),2.83–2.67(m,1H),2.53(dd,2H),2.33(dd,2H),2.04(dd,4H),1.54(dd,2H),1.52–1.38(m,3H),1.28(d,3H),1.20(s,1H),1.15(s,2H),1.11–0.95(m,6H),0.87(t,2H).LCMS-ESI+對C49H61N8O8分析計算值:890.05；實測值:889.23。實施例AW甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯，用(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，并用(S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸。1HNMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.65(s,1H),8.21(d,1H),8.08-7.96(m,1H),7.92(s,1H),7.85(d,1H),7.75-7.59(m,2H),5.45-5.38(m,1H),5.33(s,1H),5.23-5.11(m,1H),4.35-4.06(m,4H),4.01-3.92(m,1H),3.82-3.44(m,7H),2.75-2.48(m,3H),2.46-2.09(m,6H),2.07-1.91(m,2H),1.56(d,3H),1.49-1.36(m,2H),1.32-1.21(m,2H),1.15(d,3H),1.10-0.93(m,6H),0.88(d,2H)..LCMS-ESI+對C48H59N8O8分析計算值:875.45；實測值:875.29。實施例AX甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,3aS,6aS)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀八氫環(huán)戊[b]吡咯-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,3aS,6aS)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀八氫環(huán)戊[b]吡咯-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯，用(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，并用(2S,3aS,6aS)-1-(叔-丁氧基羰基)八氫環(huán)戊[b]吡咯-2-羧酸替代(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸。1HNMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.66(s,1H),8.21(d,1H),8.12-7.97(m,2H),7.94(s,1H),7.91-7.78(m,1H),7.74-7.62(m,2H),5.81-5.71(m,1H),5.39-5.26(m,3H),5.23-5.11(m,1H),4.84-4.76(m,2H),4.25(d,1H),4.21-4.06(m,2H),3.81(s,1H),3.74(s,1H),3.67(d,4H),3.63-3.52(m,1H),3.16-3.04(m,1H),2.76-2.64(m,1H),2.61-2.48(m,1H),2.44-2.29(m,3H),2.23(q,2H),2.18-2.08(m,2H),2.07-1.85(m,4H),1.84-1.66(m,2H),1.57(d,3H),1.49-1.36(m,2H),1.29(t,1H),1.27-1.18(m,1H),1.15(d,3H),1.12-1.01(m,4H),0.98(d,3H),0.88(d,2H).LCMS-ESI+對C51H63N8O8分析計算值:915.48；實測值:915.29。實施例AY甲基{(2S)-1-[(2S,3aS,6aS)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)六氫環(huán)戊[b]吡咯-1(2H)-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基{(2S)-1-[(2S,3aS,6aS)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)六氫環(huán)戊[b]吡咯-1(2H)-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯，用(2S,3aS,6aS)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁?；?八氫環(huán)戊[b]吡咯-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸。1HNMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.66(s,1H),8.29-8.18(m,1H),8.10-8.03(m,1H),7.94(d,1H),7.84(d,1H),7.73-7.64(m,1H),5.32(d,2H),5.24-5.13(m,1H),4.18(dd,2H),3.86-3.72(m,2H),3.67(d,3H),3.52(d,1H),3.11-2.97(m,1H),2.72-2.57(m,2H),2.54-2.21(m,3H),2.20-1.80(m,7H),1.79-1.70(m,1H),1.65(d,2H),1.61-1.52(m,1H),1.50-1.36(m,1H),1.36-1.23(m,2H),1.14(d,3H),1.10-1.02(m,1H),1.02-0.88(m,6H).LCMS-ESI+對C51H63N8O8分析計算值:915.48；實測值:915.379。實施例AZ、BA、BB、BC甲基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2S,3S,5S)-5-(5-{2-[(2S,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-4,5-二甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-2,3-二甲基吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯甲基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2R,3R,5R)-5-(9-{2-[(2S,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙酰基}-4,5-二甲基吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)-2,3-二甲基吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯甲基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2R,3R,5R)-5-(5-{2-[(2S,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-4,5-二甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-2,3-二甲基吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯甲基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2R,3R,5R)-5-(5-{2-[(2R,4R,5R)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙酰基}-4,5-二甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-2,3-二甲基吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯按照實施例AA，用rel-(2S,4S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4,5-二甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊酰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸和(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，并使用二當(dāng)量的(S)-2-((2R,6R)-2,6-di甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸，提供四種非對映異構(gòu)體的混合物。通過反相HPLC(Gemini柱，10-45％MeCN/H2O/0.1％TFA)分離非對映異構(gòu)體。實施例AZ。甲基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2S,3S,5S)-5-(5-{2-[(2S,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-4,5-二甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-2,3-二甲基吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯。RT＝3.757min(Gemini柱，8min內(nèi)2-95％MeCN/H2O/0.1％TFA).LCMS-ESI+:對C55H70N8O9分析計算值:986.53(M+)；實測值:987.88(M+H+).1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.25(s,1H),7.96–7.78(m,1H),7.76–7.34(m,8H),7.27(s,1H),5.22–5.06(m,4H),5.00(t,1H),4.65–4.44(m,2H),4.17–3.95(m,4H),3.57(s,6H),3.55–3.46(m,1H),3.45–3.33(m,1H),2.50–1.97(m,9H),1.55(t,2H),1.41(d,3H),1.37–1.26(m,5H),1.24–1.13(m,1H),1.13–1.01(m,12H),1.01–0.93(m,1H),0.86(d,3H),0.83–0.74(m,5H)。實施例BA。甲基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2R,3R,5R)-5-(9-{2-[(2S,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-4,5-二甲基吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)-2,3-二甲基吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯。RT＝3.899min(Gemini柱，8min內(nèi)2-95％MeCN/H2O/0.1％TFA).LCMS-ESI+:對C55H70N8O9分析計算值:986.53(M+)；實測值:987.95(M+H+).1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.43–8.28(m,1H),8.05–7.88(m,1H),7.88–7.42(m,6H),7.39–7.25(m,1H),5.31–5.01(m,4H),4.70–4.55(m,1H),4.46–4.18(m,2H),4.18–4.05(m,2H),4.04–3.94(m,0H),3.85–3.71(m,1H),3.65(s,5H),3.52–3.38(m,1H),2.63–1.98(m,9H),1.75–1.50(m,3H),1.47(d,3H),1.44–1.21(m,6H),1.18–0.99(m,16H),0.96–0.87(m,4H),0.87–0.82(m,3H),0.65(d,J＝6.1Hz,1H)。實施例BB。甲基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2R,3R,5R)-5-(5-{2-[(2S,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-4,5-二甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-2,3-二甲基吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯。RT＝3.940min(Gemini柱,8min內(nèi)2-95％MeCN/H2O/0.1％TFA).LCMS-ESI+:對C55H70N8O9分析計算值:986.53(M+)；實測值:987.86(M+H+).1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.23–8.03(m,1H),7.79–7.64(m,2H),7.59–7.20(m,6H),7.15–7.02(m,1H),5.04–4.87(m,3H),4.83(t,1H),4.43–4.27(m,1H),4.27–3.76(m,5H),3.63–3.46(m,3H),3.45–3.36(m,5H),2.55–1.68(m,10H),1.56–1.27(m,3H),1.23(d,J＝6.8Hz,1H),1.20–1.11(m,5H),1.08(t,J＝7.1Hz,1H),1.04–0.73(m,18H),0.73–0.51(m,5H),0.01(d,J＝6.0Hz,1H)。實施例BC。甲基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2R,3R,5R)-5-(5-{2-[(2R,4R,5R)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙酰基}-4,5-二甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-2,3-二甲基吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯。RT＝4.076min(Gemini柱，2-95％8min內(nèi)MeCN/H2O/0.1％TFA).LCMS-ESI+:對C55H70N8O9分析計算值:986.53(M+)；實測值：987.91(M+H+).1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.22–8.08(m,1H),7.81–7.67(m,1H),7.65–7.17(m,5H),7.10(s,1H),5.19–5.05(m,1H),5.04–4.80(m,3H),4.30–3.90(m,6H),3.63–3.46(m,4H),3.40(s,5H),2.55–1.60(m,10H),1.55–1.25(m,4H),1.21–0.95(m,12H),0.95–0.74(m,14H),0.56(d,2H),0.49–0.34(m,1H),0.05–0.04(m,1H)。實施例BD甲基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-4-甲氧基甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式合成了甲基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙酰基}-4-甲氧基甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯，用(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；鵯)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，并用(2S,4S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4-(甲氧基甲基)吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸。1HNMR(400MHz,dmso)δ8.71(s,1H),8.18(m,1H),7.95(m,4H),7.80–7.54(m,3H),7.45(m,1H),5.34–5.14(m,3H),5.05–4.92(m,1H),4.62(s,1H),4.35–3.03(m,13H),2.66(s,2H),2.50(m,2H),2.39–1.72(m,9H),1.55–0.67(m,28H).MS(ESI)m/z989.41[M+H]+。實施例BE甲基{(2S,3S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1,4,5,11-四氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧戊烷-2-基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基{(2S,3S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1,4,5,11-四氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧戊烷-2-基}氨基甲酸酯，省略用MnO2的氧化。1HNMR(400MHz,dmso)δ7.84(m,4H),7.62(m,2H),7.53(m,1H),7.25(s,1H),5.15(s,2H),5.02–4.88(m,2H),4.62(s,2H),4.14–3.24(m,16H),3.06(s,2H),2.88(s,2H),2.21(m,8H),1.82(s,2H),1.67(s,1H),1.44(m,8H),1.30–0.95(m,8H),0.91(m,3H),0.78(m,5H),0.64(m,3H).MS(ESI)m/z905.78[M+H]+。實施例BF甲基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,4,5,11-四氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,4,5,11-四氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯，用(2S,4S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，并省略用MnO2的氧化。1HNMR(400MHz,dmso)δ8.05–7.75(m,4H),7.73–7.47(m,3H),7.31(m,1H),5.15(s,2H),4.96(m,2H),4.61(s,2H),4.15–3.15(m,18H),3.06(s,2H),2.99–2.75(m,3H),2.17(m,8H),1.82(m,2H),1.53–1.32(m,6H),1.30–1.17(m,2H),1.14–0.87(m,11H),0.85–0.69(m,2H).MS(ESI)m/z961.54[M+H]+。實施例BG甲基{(2S,3S)-1-[(2S,3aS,6aS)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)六氫環(huán)戊[b]吡咯-1(2H)-基]-3-甲基-1-氧戊烷-2-基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基{(2S,3S)-1-[(2S,3aS,6aS)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)六氫環(huán)戊[b]吡咯-1(2H)-基]-3-甲基-1-氧戊烷-2-基}氨基甲酸酯，用(2S,3aS,6aS)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?八氫環(huán)戊[b]吡咯-2-羧酸。1HNMR(400MHz,dmso)δ8.62(s,1H),8.18(s,2H),7.90–7.64(m,3H),7.63–7.39(m,2H),5.24(s,2H),5.13(s,1H),5.02(s,1H),4.69(s,2H),4.13–3.85(m,3H),3.47(m,10H),2.87(s,2H),2.42(m,2H),2.10(s,5H),1.75(m,5H),1.51(m,7H),1.31–0.94(m,7H),0.92–0.64(m,9H).MS(ESI)m/z929.46[M+H]+。實施例BH甲基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-4-(甲氧基甲基)吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙酰基}-4-(甲氧基甲基)吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯，用(2S,4S)-1-(叔-丁氧基羰基)-4-(甲氧基甲基)吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊酰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸。1HNMR(400MHz,cdcl3)δ8.69(s,1H),8.28–8.09(m,2H),8.00–7.75(m,3H),7.62m,2H),7.50(m,1H),5.27(s,2H),5.14(,1H),4.73(s,1H),4.33–3.25(m,20H),2.66(s,1H),2.58–2.28(m,8H),2.25–1.79(m,4H),1.65–0.66(m,21H).MS(ESI)m/z989.65[M+H]+。實施例BI甲基{(2S)-1-[(2S,3aS,6aS)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)六氫環(huán)戊[b]吡咯-1(2H)-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基{(2S)-1-[(2S,3aS,6aS)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)六氫環(huán)戊[b]吡咯-1(2H)-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯，用(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊酰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，并用(2S,3aS,6aS)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3甲基丁酰基)八氫環(huán)戊[b]吡咯-2-羧酸替代(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸。1HNMR(400MHz,dmso)δ8.67(s,1H),7.72(m,8H),5.33–5.17(m,3H),5.00(m,1H),4.77(s,1H),4.62(s,1H),4.17–3.86(m,5H),3.49(m,10H),2.89(s,1H),2.56–1.70(m,7H),1.47(m,6H),1.30–0.97(m,6H),0.90(s,4H),0.81(m,8H).MS(ESI)m/z915.37[M+H]+.實施例BJ甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙酰基}吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧丁烷-2-基}氨基甲酸酯，用(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷e-2-羧酸，并用(2S,5S)-1-((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸。1HNMR(400MHz,dmso)δ8.67(s,1H),8.19(m,1H),8.03(m,2H),7.91–7.68(m,3H),7.68–7.38(m,3H),5.26(s,2H),5.14(m,2H),4.70(s,1H),4.20–3.23(m,14H),2.37(s,2H),2.22–1.71(m,6H),1.49(m,3H),1.41–0.97(m,7H),0.97–0.78(m,8H),0.72(m,3H).MS(ESI)m/z875.30[M+H]+。實施例BK甲基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2S)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2S)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯，用(S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，并用(S)-1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸。1HNMR(400MHz,dmso)δ8.69(s,1H),8.19(m,1H),8.08(s,1H),7.86(m,3H),7.73(s,1H),7.62(m,1H),7.47(m,1H),5.26(s,3H),5.10(m,1H),4.12–3.24(m,18H),2.37(s,2H),2.31–1.89(m,8H),1.31(m,6H),1.06(m,7H),0.96–0.76(m,8H).MS(ESI)m/z931.86[M+H]+。實施例BL甲基{(2S,3S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧戊烷-2-基}氨基甲酸酯以實施例AA相似的方式來合成甲基{(2S,3S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙酰基}-5-甲基吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-5-基}-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-3-甲基-1-氧戊烷-2-基}氨基甲酸酯，用(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸，并用(2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基戊?；?-5-甲基吡咯烷-2-羧酸替代(2S,5S)-1-(叔-丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-羧酸。1HNMR(400MHz,dmso)δ8.66(s,1H),8.18(m,1H),8.12–7.71(m,5H),7.58(m,2H),5.27(s,2H),5.15(m,1H),5.06–4.93(m,1H),4.67(m,2H),4.22–3.29(m,11H),2.23(m,7H),1.83(s,2H),1.65(s,1H),1.47(m,8H),1.29–0.98(m,7H),0.95–0.70(m,8H),0.66(m,3H).MS(ESI)m/z903.87[M+H]+。實施例BM乙基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(乙氧基羰基)氨基]乙酰基}-5-甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯將碘三甲基硅烷(1.14ml，8.03mmol)加入二氯甲烷(10ml)中的甲基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(甲氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯(770mg，0.8mmol)的溶液中，然后將混合物回流3小時。冷卻至室溫后，將混合物濃縮；溶解于乙酸乙酯中，并用2×7ml的1N鹽酸溶液提取。合并水相，冷卻，然后通過加入5N氫氧化鈉堿化。用3×10ml乙酸乙酯提取堿性水相。合并有機(jī)相，通過Na2SO4干燥，并真空濃縮，用水(7ml)中的氫氧化鈉(66.25mg，1.66mmol)處理產(chǎn)物667mg(98.5％)。將混合物在冰浴中冷卻，并且加入氯甲酸乙酯(0.16ml，1.66mmol)，將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌30min，用2×10ml乙酸乙酯提取。將合并的有機(jī)層通過Na2SO4干燥并濃縮。將殘余物通過反相HPLC純化(Gemini柱，10-46％MeCN/H2O/0.1％TFA)。合并所需級分，凍干，以提供乙基{(1S)-1-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(2R,6R)-2,6-二甲基四氫-2H-吡喃-4-基]-2-[(乙氧基羰基)氨基]乙?；鶀-5-甲基吡咯烷-2-基]-1,11-二氫異色烯并[4',3':6,7]萘并[1,2-d]咪唑-9-基}-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯烷-1-基]-2-氧乙基}氨基甲酸酯。1HNMR(400MHz,dmso)δ8.62(s,1H),8.26–7.33(m,9H),5.24(s,2H),5.13(s,1H),4.98(s,1H),4.80–4.55(m,2H),4.30–3.23(m,9H),2.19(m,9H),1.83(s,2H),1.48(m,10H),1.32–0.69(m,24H).MS(ESI)m/z987.89[M+H]+。生物學(xué)試驗血清蛋白對復(fù)制子效力的作用：在補充了生理濃度的人血清白蛋白(40mg/mL)或α-酸糖蛋白(1mg/mL)的正常細(xì)胞培養(yǎng)基(DMEM+10％FBS)中進(jìn)行了復(fù)制子試驗。將人血清蛋白存在下的EC50與正常培養(yǎng)基中的EC50相比，以確定效力的倍數(shù)變化(foldshift)。MT-4細(xì)胞細(xì)胞毒性：用連續(xù)稀釋的化合物將MT4細(xì)胞處理五天。在處理階段結(jié)束時，使用PromegaCellTiter-Glo試驗測量了細(xì)胞生活力，并進(jìn)行非線性回歸來計算CC50。EC50下與細(xì)胞相關(guān)的化合物濃度：用等于EC50濃度的化合物培養(yǎng)Huh-luc培養(yǎng)物。在多個時間點(0-72小時)，用冷的培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞2X，并用85％乙腈提??；還將提取每個時間點的介質(zhì)樣本。通過LC/MS/MS分析細(xì)胞和培養(yǎng)基提取物，以確定每個級分中化合物的摩爾濃度。本發(fā)明的代表性化合物顯示出活性。溶解度和穩(wěn)定性。通過取等份的10mMDMSO儲液并在測試介質(zhì)溶液(PBS，pH7.4和0.1NHCl，pH1.5)中準(zhǔn)備100μM終濃度的化合物來測定溶解度，使用1％的總DMSO濃度。將測試介質(zhì)溶液在室溫下振蕩培養(yǎng)1h。然后將溶液離心，并在HPLC/UV上測試收集的上清液。通過在相同濃度下將限定測試溶液中檢測到的化合物含量與DMSO中檢測到的含量相比來計算溶解度。還將測定用PBS在37℃下培養(yǎng)1小時后的化合物的穩(wěn)定性。在低溫保藏的人、狗和大鼠肝細(xì)胞中的穩(wěn)定性：將每種化合物在37℃下在肝細(xì)胞懸浮液(100μl，80,000°細(xì)胞/孔)中培養(yǎng)長達(dá)1小時。將低溫保藏的肝細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基中重建。將懸浮液轉(zhuǎn)移至96-孔平板中(50μL/孔)。將化合物在培養(yǎng)基中稀釋至2μM，然后加入肝細(xì)胞懸浮液中，以啟動培養(yǎng)。在啟動培養(yǎng)后0、10、30和60分鐘時取樣，并用由90％乙腈/10％水中的0.3％甲酸組成的混合物淬滅反應(yīng)。使用LC/MS/MS分析每個樣本中的化合物濃度。通過將濃度-時間數(shù)據(jù)與單相指數(shù)方程相配來測定肝細(xì)胞懸浮液中的化合物的消失半衰期。還將數(shù)據(jù)按比例放大，以表示固有的肝清除和/或總的肝清除。來自人、狗和大鼠的肝S9級分的穩(wěn)定性：將每種化合物在S9懸浮液(500μl，3mg蛋白/mL)中在37℃下培養(yǎng)長達(dá)1小時(n＝3)。將化合物加入S9懸浮液中，以啟動培養(yǎng)。在啟動培養(yǎng)后0、10、30和60分鐘時取樣。使用LC/MS/MS分析每個樣本中的化合物濃度。通過將濃度-時間數(shù)據(jù)與單相指數(shù)方程相配來測定S9懸浮液中的化合物的消失半衰期。Caco-2滲透性：通過合同服務(wù)部門(AbsorptionSystems，Exton，PA)測試化合物。以盲方式將化合物提供給合同者。將測量正向(A至B)和反向(B至A)滲透性。將Caco-2單層在12-孔Costar平板中的覆蓋膠原蛋白的微孔聚碳酸酯膜上生長至匯合。將化合物定量加在頂側(cè)，用于正向滲透性(A至B)，并定量加在基側(cè)，用于反向滲透性(B至A)。將細(xì)胞在潮濕的培養(yǎng)箱中在37℃和5％CO2下培養(yǎng)。在培養(yǎng)開始時以及在培養(yǎng)后1h和2h，從接收室取出200μL等份試樣，并用新鮮試驗緩沖液替代。使用LC/MS/MS分析每個樣本中的化合物濃度。計算了表觀滲透性，Papp。血漿蛋白結(jié)合：通過平衡滲析來測量血漿蛋白結(jié)合。將每種化合物以2μM的終濃度添加至(spikeinto)空白血漿中。將添加過的血漿和磷酸鹽緩沖液置于裝配好的滲析孔中，然后將其在37℃水浴中緩慢旋轉(zhuǎn)。在培養(yǎng)結(jié)束時，測定血漿和磷酸鹽緩沖液中的化合物濃度。使用以下等式計算未結(jié)合百分比：其中Cf和Cb是各自按照滲析后緩沖液和血漿濃度測定的游離和結(jié)合的濃度。CYP450剖析：在NAPDH存在或不存在的情況下，用5種重組的人CYP酶(包括CYP1A2、CYP2C9、CYP3A4、CYP2D6和CYP2C19)中的每一種培養(yǎng)每種化合物。將從培養(yǎng)開始時以及培養(yǎng)開始后的5、15、30、45和60分鐘時，從培養(yǎng)混合物中取得系列樣本。通過LC/MS/MS測定培養(yǎng)混合物中的化合物濃度。通過與培養(yǎng)開始時的樣本比較來計算每個時間點培養(yǎng)后剩余化合物中的化合物濃度。大鼠、狗、猴子和人血漿中的穩(wěn)定性：化合物將在血漿(大鼠、狗、猴子或人)中在37℃下培養(yǎng)長達(dá)2小時?；衔镆?和10μg/mL的終濃度加入血漿中。在添加化合物后5、5、15、30、60和120分鐘時獲取等份試樣。通過LC/MS/MS測量每個時間點的化合物濃度和主要代謝物?；诩?xì)胞的抗-HCV活性的評價：使用基于Renilla熒光素酶(RLuc)的HCV復(fù)制子受體試驗來測定抗病毒效力(EC50)。為了進(jìn)行用于基因型1和2aJFH-1的試驗，將穩(wěn)定的HCV1aRluc復(fù)制子細(xì)胞(帶有編碼Rluc報告子的雙順反子基因型1aH77復(fù)制子)、穩(wěn)定的HCV1bRluc復(fù)制子細(xì)胞(帶有編碼Rluc報告子的雙順反子1bCon1復(fù)制子)或穩(wěn)定的HCV2aJFH-1Rluc復(fù)制子細(xì)胞(帶有編碼Rluc報告子的雙順反子基因型2aJFH-1復(fù)制子；L31存在于NS5A中)分配至384孔平板中，用于EC50試驗。為了進(jìn)行用于基因型2a(M31存在于NS5A)或2b的試驗，將編碼Rluc-Neo報告子以及分別編碼基因型2aJ6株系NS5A基因或基因型2bMD2b-1株系NS5A基因(都存在M31)的NS5A嵌合基因型2aJFH-1復(fù)制子瞬時地轉(zhuǎn)染至Huh-Lunet細(xì)胞中，或建立為提供穩(wěn)定復(fù)制的復(fù)制子細(xì)胞。將每種細(xì)胞分配至384孔平板中，用于EC50試驗。為了進(jìn)行用于基因型3和4的試驗，將編碼Pi-Rluc報告子以及分別編碼基因型3aS52株系NS5A基因或基因型4aED43株系NS5A基因的NS5A嵌合基因型1bCon1復(fù)制子瞬時轉(zhuǎn)染(t)至Huh-Lunet細(xì)胞中，隨后將其分配至384孔平板中。將化合物以10mM的濃度溶解于DMSO中，并手動或使用自動化吸移裝置稀釋于DMSO中。將連續(xù)3-倍稀釋的化合物與細(xì)胞培養(yǎng)基手動混合，并使用自動化裝置加入接種的細(xì)胞中或直接加入細(xì)胞中。將DMSO用作陰性(溶劑；無抑制)對照，并將蛋白酶抑制劑ITMN-191以>100xEC50的濃度培養(yǎng)，作為陽性對照。72小時后，將細(xì)胞裂解并按照制造商(Promega-Madison，WI)推薦的，定量Renilla熒光素酶活性。進(jìn)行了非線性回歸，來計算EC50值。為了測定對抗抗性突變體的抗病毒效力(EC50)，通過定點誘變，將抗性突變，包括基因型1aNS5A中的M28T、Q30R、Q30H、Q30E、L31M、Y93C、Y93H和Y93N以及基因型1bNS5A中的Y93H和L31V/Y93H，單獨地引入1aPi-Rluc或1bPi-Rluc復(fù)制子中。按照以上所述的，將每個抗性突變體的復(fù)制子RNA瞬時地轉(zhuǎn)染至Huh-7-衍生的固化-51細(xì)胞中，并對這些轉(zhuǎn)染的細(xì)胞測定了抗病毒效力。SD大鼠中的IV和PO單劑量藥物動力學(xué)研究：在雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠(250-300g)中表征選定化合物的藥物動力學(xué)。在該研究中，將兩組原始純種SD大鼠(N＝3/組，禁食過夜)通過頸靜脈的靜脈內(nèi)(IV)灌輸(30分鐘內(nèi)1mg/kg)或通過口服管飼(2mg/kg)接受選定的化合物。靜脈內(nèi)(IV)給藥載體是pH2.0的5％乙醇、35％聚乙二醇400(PEG400)和60％水。口服給藥載體是pH2.2的5％乙醇、55％PEG400和40％檸檬酸鹽緩沖劑。在特定的時間點從頸靜脈或其他合適的靜脈收集連續(xù)血樣(每次大約0.3mL)。對于IV灌輸組，在給藥前以及開始灌輸后0.25、0.48、0.58、0.75、1.5、3、6、8、12和24小時時收集了血樣。對于口服組，在給藥前以及給藥后0.25、0.50、1、2、4、6、8、12和24小時時收集了血樣。將血樣收集至含有作為抗凝劑的EDTA-K3的VacutainerTM管中，并且在大約4℃下離心，以獲得血漿。將血漿樣本存儲在-20℃直至通過LC/MS/MC分析。為了分析大鼠血漿中的選定化合物，研發(fā)了利用高性能液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LC/MS/MS)的生物分析方法。使用選定反應(yīng)監(jiān)控(SRMA)進(jìn)行了檢測；在四極1(Q1)中選擇了表示前體(M+H)+物質(zhì)的離子，并在碰撞池(Q2)中用氬氣碰撞，以產(chǎn)生特定的產(chǎn)物離子，其隨后通過四極3(Q3)來監(jiān)控。在雄性大鼠血漿中制備了標(biāo)準(zhǔn)曲線和質(zhì)量控制樣本，并且以測試樣本相同的方式來處理，以產(chǎn)生定量數(shù)據(jù)。使用非房室藥物動力學(xué)分析(PhoenixWinNonlin，版本6.3)產(chǎn)生了藥物動力學(xué)參數(shù)。如果給藥前和處理的作為此后缺失的，將定量下限以下(LLOQ)的數(shù)值指定為零值。使用線性梯形法則計算了曲線下面積(AUC)。通過比較化合物的曲線下面積(AUC)和/或比較口服給藥后血漿中產(chǎn)生的與靜脈內(nèi)給藥后產(chǎn)生的代謝物，來確定口服生物利用率(％F)。上述針對本文中所述化合物的試驗中獲得的數(shù)據(jù)顯示于表1中。本發(fā)明的化合物與下列比較實施例相比時，呈現(xiàn)了針對特定HCV基因型和/或其抗性突變體提高的生物利用率和/或反應(yīng)性。使用合適的起始材料，根據(jù)本文中所述的合成實驗方案制備了以下表2A和2B中所示的比較實施例(化合物1-14)。表1表2A表2B