專利名稱：喹諾酮羧酸衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及喹諾酮羧酸衍生物，比已有的喹諾酮系抗生素具有更出色和廣泛的抗菌活性。更特別的是，它關(guān)于式(1)代表的新的喹諾酮羧酸衍生物，其具有7-[8-(烴氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛烷-6-基]的衍生物作為取代基，和其藥用可接受的鹽和異構(gòu)體
其中A是C-H、C-F、C-Cl、C-O-CH3或N；Y是H或氨基；R1是環(huán)丙基或2，4-二氟苯基；R2是C1-4烷基；和R3是H或C1-4烷基。
眾所周知，由于其有效和廣泛的抗菌活性，喹諾酮羧酸衍生物是對治療人和動(dòng)物感染疾病非常有用的合成抗生素。喹諾酮系列抗生素，例如氟哌酸(norfloxacin)、吡啶羧酶(ofloxacin)和卷須霉素(ciprofloxacin)，目前被有效地應(yīng)用于治療人類疾病，其有效性已得到承認(rèn)。然而，這類藥物有一個(gè)問題盡管它們對革蘭陰性細(xì)菌表現(xiàn)出出色的抗菌活性，但是它們卻對革蘭陽性細(xì)菌表現(xiàn)出一般的或相對低的活性。因此，為了解決現(xiàn)有喹諾酮系列抗生素的這一問題，已經(jīng)進(jìn)行了各種研究。最后，開發(fā)了對革蘭陽性細(xì)菌有改善的抗菌活性的sparfloxacin。
然而，這一化合物仍表現(xiàn)出對鏈球菌(Streptococci)、甲氧苯青霉素抗性金黃色葡萄球菌(Streptococcus aureus)(MRSA)和其他正在增加的喹諾酮抗性菌株的弱抗菌活性。這些菌株以呼吸感染的病原體而著稱。因此，對于發(fā)展改良的喹諾酮抗生素的需要增加了，改善的喹諾酮抗生素應(yīng)對這樣的喹諾酮抗性菌株具有出色的抗菌活性。
另一方面，韓國專利公開出版號96-873、96-22501和96-22502，和EP688772A1公開了下式16、17和18的喹諾酮系抗生素藥劑
其中，Q是C-H、C-F、C-Cl、C-OH、C-O-CH3或N；R是H、甲基或氨基；R1是環(huán)丙基、乙基或被不止一個(gè)氟原子取代的苯基；R2是H、C1-4直鏈或支鏈烷基、苯基或烯丙基。
其中，R是H、甲基或氨基；Q是C-H、C-F、C-Cl、C-CH3、C-O-CH3或N；R1是環(huán)丙基、乙基或被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的苯基；R2是C3-C4支鏈烷基如叔丁基和環(huán)丙基甲基，具有一個(gè)三鍵的C3-C6烷基如丙基(propagyl)和單一丙基(homopropagyl)、2-鹵乙基、甲氧甲基、甲氧基羰基甲基、或具有下式的基團(tuán)
其中，n是0或1；m是0、1或2；x是亞甲基、O或N；R3和R4獨(dú)立地是H或C1-C3烷基，或它們可能與其連接的氮形成環(huán)。
其中R是H、甲基或氨基；Q是C-H、C-F、C-Cl、C-CH3、C-O-CH3或N；R1是環(huán)丙基、乙基或被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的苯基；R2是下式a代表的基團(tuán)、下式b代表的基團(tuán)或下式c代表的含一個(gè)雜原子基的芳基甲基
其中，X是2-、3-或4-氟、氰基、硝基、甲氧基、甲基或C1-C4烷基或2，4-二氟基團(tuán)；
；或含一個(gè)如下式c的不同基團(tuán)的芳甲基
R3和R4獨(dú)立地是H或C1-C3烷基，或它們與其連接的氮形成環(huán)。
上述化合物在結(jié)構(gòu)上不同于本發(fā)明式1的化合物。特別是，在韓國專利公開出版號96-873、96-22501和96-22502以及EP688772A1公開的化合物中，在吡咯烷環(huán)位置7的一個(gè)烷氧亞氨基被取代，與該烷氧亞氨基鄰接的一些取代基如氨基、烷氨基、氨基甲基、烷氨基甲基是以直鏈的形式連接到吡咯烷環(huán)上。與此相反，在本發(fā)明的化合物中，在位置7上被肟和其衍生物取代的吡咯烷環(huán)與氮雜環(huán)丁烷結(jié)構(gòu)形成一種二氮雜螺化合物。因此，本發(fā)明化合物在結(jié)構(gòu)上不同于上述專利公開出版物中的化合物。在抗菌活性方面，本發(fā)明化合物對最近越來越多的喹諾酮抗性菌株表現(xiàn)出強(qiáng)抗菌活性，而上述專利公開出版物中的化合物對喹諾酮抗性菌株具有非常弱的抗菌活性。
此外，盡管EP265230A1公開了在喹諾酮衍生物位置7上的二氮雜螺化合物取代，它具體公開的只有下式的2，7-二氮雜螺[4，4]壬烷和2-甲基-2，7-二氮雜螺[4，4]壬烷化合物，而沒有具體公開本發(fā)明公開的2，6-二氮雜螺[3，4]辛烷化合物。而且沒有提到本發(fā)明中公開的在位置7上的2，6-二氮雜螺[3，4]辛烷取代基中引入的烷氧亞氨基。因此本發(fā)明化合物在結(jié)構(gòu)上不同于上述專利公開出版物中的化合物。關(guān)于抗菌活性，本發(fā)明化合物對喹諾酮抗性菌株以及革蘭陰性和革蘭陽性細(xì)菌具有出色的抗菌活性，而上述專利公開出版物中的化合物對革蘭陰性和革蘭陽性細(xì)菌只有普通的抗菌活性。
本發(fā)明人努力不懈地研制新的喹諾酮羧酸，其具有對革蘭陰性和革蘭陽性細(xì)菌出色的抗菌活性，以及對這樣的問題菌株如鏈球菌、甲氧苯青霉素抗性金黃色葡萄球菌(MRSA)和其他正越來越多的喹諾酮抗性菌株具有提高了的抗菌活性。
最后，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)在位置7被7-[8-(烷氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛烷-6-基]取代的喹諾酮羧酸對上述菌株表現(xiàn)出出色的抗菌活性，因此完成了本發(fā)明。
發(fā)明概述因此，本發(fā)明的一個(gè)目的是提供上述式1的新的喹諾酮羧酸衍生物及其藥用可接受的鹽和異構(gòu)體，上述化合物對革蘭陰性和革蘭陽性細(xì)菌具有出色的抗菌活性且特別表現(xiàn)出對甲氧苯青霉素抗性菌株和已有的喹諾酮抗性菌株的高抗菌活性。
本發(fā)明的另一目的是提供式1的新喹諾酮羧酸衍生物的制備工藝。
發(fā)明詳述本發(fā)明的特征在于下式1代表的喹諾酮羧酸衍生物和其藥用可接受的鹽和異構(gòu)體
其中A是C-H、C-F、C-Cl、C-O-CH3或N；Y是H或氨基；R1是環(huán)丙基或2，4-二氟苯基；R2是C1-4烷基；和R3是H或C1-4烷基。
本發(fā)明在下文詳細(xì)描述。
根據(jù)本發(fā)明，上式1的喹諾酮羧酸衍生物的典型實(shí)例如下1-環(huán)丙基-6-氟-7-[8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺-[3，4]辛烷-6-基]-1，4-二氫-4-氧-1，8-二氮雜萘-3-羧酸，1-環(huán)丙基-6-氟-7-[8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺-[3，4]辛烷-6-基]-1，4-二氫-4-氧-喹啉-3-羧酸，1-環(huán)丙基-6，8-二氟-7-[8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺-[3，4]辛烷-6-基]-1，4-二氫-4-氧-喹啉-3-羧酸，1-環(huán)丙基-6-氟-8-氯-7-[8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺-[3，4]辛烷-6-基]-1，4-二氫-4-氧-喹啉-3-羧酸，1-環(huán)丙基-5-氨基-6，8-二氟-7-[8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺-[3，4]辛烷-6-基]-1，4-二氫-4-氧-喹啉-3-羧酸，1-(2，4-二氟苯基)-6-氟-7-[8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺-[3，4]辛烷-6-基]-1，4-二氫-4-氧-喹啉-3-羧酸，1-(2，4-二氟苯基)-6-氟-7-[8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺-[3，4]辛烷-6-基]-1，4-二氫-4-氧-1，8-二氮雜萘-3-羧酸，1-環(huán)丙基-6-氟-7-[8-(乙氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺-[3，4]辛烷-6-基]-1，4-二氫-4-氧-1，8-二氮雜萘-3-羧酸，1-環(huán)丙基-5-氨基-6，8-二氟-7-[8-(乙氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺-[3，4]辛烷-6-基]-1，4-二氫-4-氧-喹啉-3-羧酸，1-環(huán)丙基-6-氟-7-[8-(甲氧亞氨基)-2-甲基-2，6-二氮雜螺-[3，4]辛烷-6-基]-1，4-二氫-4-氧-1，8-二氮雜萘-3-羧酸，1-環(huán)丙基-6-氟-7-[8-(甲氧亞氨基)-2-甲基-2，6-二氮雜螺-[3，4]辛烷-6-基]-1，4-二氫-4-氧-喹啉-3-羧酸，1-環(huán)丙基-6，8-二氟-7-[8-(甲氧亞氨基)-2-甲基-2，6-二氮雜螺-[3，4]辛烷-6-基]-1，4-二氫-4-氧-喹啉-3-羧酸，1-環(huán)丙基-6-氟-8-氯-7-[8-(甲氧亞氨基)-2-甲基-2，6-二氮雜螺-[3，4]辛烷-6-基]-1，4-二氫-4-氧-喹啉-3-羧酸，和1-環(huán)丙基-5-氨基-6，8-二氟-7-[8-(甲氧亞氨基)-2-甲基-2，6-二氮雜螺-[3，4]辛烷-6-基]-1，4-二氫-4-氧-喹啉-3-羧酸。
本發(fā)明式1代表的喹諾酮羧酸衍生物在吡咯烷環(huán)和因此可能存在的順式或反式幾何異構(gòu)體的位置7有一個(gè)雙鍵。本發(fā)明包括所有這樣的幾何異構(gòu)體。
按照本發(fā)明所屬領(lǐng)域中的常規(guī)方法，可用本發(fā)明式1代表的喹諾酮羧酸衍生物制備藥用可接受的鹽。可以制備加酸鹽作為這些鹽中的一種，因此所用的典型酸包括無機(jī)酸如氫氯酸、磷酸和硫酸；和有機(jī)酸如甲烷磺酸、對甲苯磺酸、乙酸、檸檬酸、馬來酸、琥珀酸、草酸、苯甲酸、酒石酸、延胡索酸、manderic acid和葡糖醛酸。此外陽離子如鈉或鉀離子也可用于制備藥用可接受的鹽。
此外，本發(fā)明包括式1代表的喹諾酮羧酸衍生物的制備工藝。
本發(fā)明式1的喹諾酮羧酸衍生物可根據(jù)下列反應(yīng)流程1和2代表的兩種方法中任一種來制備。
在下面的反應(yīng)流程1中，下式2化合物與下式3化合物進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng)得到本發(fā)明希望的化合物，即下式1代表的喹諾酮羧酸衍生物。
其中，A，Y，R1，R2和R3各自如上定義，且X是鹵素原子，優(yōu)選氟或氯。式2化合物可按照U.S.4382892中描述的方法制備。式3化合物可以游離堿或酸性鹽的形式使用，該酸性鹽可通過使用酸如氫氯酸、乙酸和三氟乙酸而形成。
為了詳細(xì)說明上述反應(yīng)流程，式2化合物與式3化合物的偶聯(lián)反應(yīng)是在溶劑外加適當(dāng)?shù)膲A(酸受體)的存在下進(jìn)行而得到式1代表的喹諾酮羧酸衍生物。反應(yīng)優(yōu)選在0-200℃下，攪拌1-24小時(shí)完成。
作為在上述反應(yīng)中使用的溶劑，乙腈、二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亞砜(DMSO)和吡啶是優(yōu)選的。作為堿(酸受體)，優(yōu)選使用無機(jī)堿如碳酸氫鈉、碳酸鈣、和碳酸鈉，或有機(jī)堿如三乙胺、二異丙基乙胺、吡啶、二甲基吡啶、N，N-二甲基苯胺，N，N-二甲基氨基吡啶，1，8-二氮雜二環(huán)[5，4，0]十一碳-7-烯(DBU)、1，5-二氮雜環(huán)[4，3，0]壬烯-5(DBN)和1，4-二氮雜環(huán)[2，2，2]辛烷(DABCO)。此外，通過使用過量(2-10摩爾當(dāng)量)的式3化合物作為酸受體可增加反應(yīng)效率。使用離子交換樹脂可增加反應(yīng)速率。典型的離子交換樹脂可包括AmberliteIRA-420、AmberliteIRA-900和AmberliteIRA-64。
在第二種制備工藝(反應(yīng)流程2)中，式2化合物與式3a化合物進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng)，經(jīng)由下式4的中間體而制備本發(fā)明希望的化合物，即下式1代表的化合物，其中R3是H。此外，可通過其中R3是H的式1化合物與低級醛進(jìn)行還原性烷基化反應(yīng)而制備其中R3是C1-4烷基的式1化合物。
其中，A，X，Y，R1，R2和R3各自如上定義，且P是胺保護(hù)基團(tuán)。
式3a化合物可以游離堿或酸性鹽的形式使用，且該酸性鹽可通過使用酸如鹽酸、乙酸和三氟乙酸而形成。此外，式3a化合物的典型胺保護(hù)基團(tuán)(P)包括甲酰、乙酰、三氟乙酰、苯甲酰、烷氧羰基(例如乙氧羰基、叔丁氧羰基、苯甲基氧羰基、對甲氧苯甲基氧羰基、三氯乙氧羰基)、苯甲基、對甲氧苯甲基和三苯甲基。
在反應(yīng)流程1中說明的式2化合物與式3化合物的偶聯(lián)反應(yīng)的同樣條件下進(jìn)行上述反應(yīng)。這樣通過堿性水解或常規(guī)的去保護(hù)反應(yīng)移去從縮合反應(yīng)制得的式4化合物的胺保護(hù)基團(tuán)(P)而得到式1化合物。
例如，溶劑中的式4化合物在酸或堿的存在下，在室溫-120℃下，進(jìn)行反應(yīng)移去胺保護(hù)基團(tuán)。作為去保護(hù)反應(yīng)中使用的酸，可以使用無機(jī)酸如鹽酸、溴酸和硫酸或有機(jī)酸如乙酸、三氟乙酸、甲酸、對甲苯磺酸。此外，當(dāng)胺保護(hù)基團(tuán)(P)是苯甲基、對甲氧苯甲基、苯甲氧羰基、對甲氧苯甲氧羰基或三氯乙氧羰基時(shí)，可通過在氫氣氛中5-100℃下使用鈀、雷內(nèi)鎳(Raney nickel)或鉑進(jìn)行還原反應(yīng)移去胺保護(hù)基團(tuán)(P)。
另一方面，R3是C1-4烷基的式1化合物可通過R3是H的式1化合物與C1-4醛在弱酸性條件下，0-50℃下，通過使用氰基硼氫化鈉作為還原劑進(jìn)行還原性烷基化來制備。
式3和3a化合物，也是本發(fā)明原材料，可通過下列反應(yīng)流程3來制備。
其中，R2和R3如上定義；L是甲烷磺酰氧、對甲苯磺酰氧或鹵素，優(yōu)選氟或氯；和P’是胺保護(hù)基團(tuán)如甲酰、乙酰、三氟乙酰、苯甲酰、烷氧羰基(例如乙氧羰基、叔丁氧羰基、苯甲氧羰基、對甲氧苯甲氧羰基、三氯乙氧羰基)、苯甲基、對甲氧苯甲基和三苯甲基。
為了詳細(xì)說明反應(yīng)流程3的工藝，酮酯化合物(式5)與福爾馬林水溶液在0℃-室溫下在堿的存在下反應(yīng)，得到羥酮化合物(式6)。這一反應(yīng)適用的堿包括碳酸鈉、碳酸鈣、碳酸氫鈉、氫氧化鈉和氫氧化鈣，適用的溶劑包括醇類如甲醇、乙醇和異丙醇。式6化合物與烷氧基胺反應(yīng)得到高產(chǎn)的式7烷氧亞氨基吡咯烷衍生物。在這一反應(yīng)中，吡啶可用作溶劑以及堿。此外，當(dāng)水、四氫呋喃或醇(甲醇、乙醇等)被用作溶劑時(shí)，無機(jī)堿如碳酸氫鈉和乙酸鈉也可與這樣的溶劑一同使用。為了將式7化合物中的一個(gè)羥基轉(zhuǎn)化成適當(dāng)?shù)碾x去基L[甲烷磺酰氧(-OMs)，對甲苯磺酰氧(-OTs)或鹵素]，該羥基基團(tuán)與甲烷磺酰氯或?qū)妆交酋Ｂ仍谟袡C(jī)堿如三乙胺和吡啶的存在下，在0-50℃下反應(yīng)得到式8化合物，其中的的羥基被離去基L所取代。另一方面，還可通過將式7化合物中的羥基根據(jù)常規(guī)方法轉(zhuǎn)化成鹵素而制得式8化合物。在這種鹵化反應(yīng)的代表性實(shí)例中，將吡啶加入三苯基磷化氫和四溴化碳中(J.Chem.Soc.Perkin Trans.1，3549，1997)，然后與式7化合物反應(yīng)得到式8的溴化合物。使用適當(dāng)?shù)倪€原劑在0℃至所用溶劑的回流溫度下還原如此得到的式8化合物的酯基而得到高產(chǎn)的式9醇化合物。這一反應(yīng)代表性還原劑是硼氫化鈉且當(dāng)其與鋰鹽(氯化鋰或溴化鋰)一起使用會(huì)增加其反應(yīng)活性。當(dāng)疊氮化鈉與式9化合物的離去基L反應(yīng)，得到式10的疊氮甲基吡咯烷化合物。作為這一反應(yīng)使用的溶劑，優(yōu)選二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基亞砜(DMSO)。為了將式10的疊氮甲基吡咯烷化合物中的羥基轉(zhuǎn)化成適當(dāng)?shù)碾x去基L[甲烷磺酰氧(-OMs)，對甲苯磺酰氧(-OTs)或鹵素]，在與式7化合物轉(zhuǎn)化成式8化合物相同的條件下進(jìn)行相同的反應(yīng)得到式11化合物，其中的羥基高產(chǎn)轉(zhuǎn)化成離去基L。使用金屬催化劑如鉑、碳載鈀(Pd/C)和雷內(nèi)鎳，或在惰性溶劑如四氫呋喃中使用三苯基磷化氫或三苯基亞磷酸酯還原式11化合物中的疊氮基，高產(chǎn)率得到式12的氨基甲基吡咯烷化合物。當(dāng)在適當(dāng)?shù)膲A存在下在50-130℃下加熱將式12化合物，發(fā)生環(huán)化反應(yīng)得到式13的8-烷氧亞氨基-2，6-二氮雜螺[3，4]辛烷衍生物。作為這一反應(yīng)使用的溶劑，優(yōu)選乙腈、二甲基甲酰胺、吡啶和甲苯，優(yōu)選的堿包括有機(jī)堿如三乙胺、二異丙胺、吡啶、二甲基吡啶、N，N-二甲基苯胺、N，N-二甲基氨基吡啶、1，8-二氮雜二環(huán)[5，4，0]十一碳-7-烯(DBU)、1，5-二氮雜二環(huán)[4，3，0]壬烯-5(DBN)和1，4-二氮雜二環(huán)[2，2，2]辛烷(DABCO)。在與在反應(yīng)流程2中說明的從式4化合物制備式1化合物中所用的胺保護(hù)基團(tuán)P的去保護(hù)反應(yīng)相同的條件下，根據(jù)胺保護(hù)基團(tuán)的類型移去式13化合物中的胺保護(hù)基團(tuán)P’，得到R3是H的式3化合物。另一方面，其中R3是C1-4烷基的式3化合物的制備，是使用氰基硼氫化鈉作為還原劑在弱酸性條件下使式13化合物中暴露的胺與C1-4醛發(fā)生還原性烷基化反應(yīng)，然后在與在反應(yīng)流程2中說明的從式4化合物制備式1化合物中所用的胺保護(hù)基團(tuán)P的去保護(hù)反應(yīng)實(shí)質(zhì)相同的條件下，根據(jù)胺保護(hù)基團(tuán)的類型移去胺保護(hù)基團(tuán)P’。此外，將與前文定義的胺保護(hù)基團(tuán)P’相同類型的胺保護(hù)基團(tuán)P引入式13化合物，得到式14化合物，然后按照選自前述的去保護(hù)方法的適當(dāng)?shù)娜ケＷo(hù)方法，根據(jù)胺保護(hù)基團(tuán)的類型移去胺保護(hù)基團(tuán)P’而制備用于反應(yīng)流程2的另一種原料-式3a化合物。
下面的制備實(shí)施例和實(shí)施例將進(jìn)一步說明本發(fā)明，但并不限制其范圍。
制備11-苯甲基-4-甲烷磺酰氧甲基-4-羥甲基-吡咯烷-3-酮-O-甲基肟將50g 1-苯甲基-4-乙氧羰基-吡咯烷-3-酮溶于300ml異丙醇，并向其中繼續(xù)加入4ml 10％NaOH和20.7ml福爾馬林。將混合物在室溫下攪拌30分鐘并減壓濃縮。向濃縮殘留物中加入200ml水。得到的溶液萃取兩次，每次用200ml乙醚，用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮，得到46g1-苯甲基-4-羥甲基-4-乙氧羰基-吡咯烷-3-酮(產(chǎn)率82.0％)。將得到的化合物溶于400ml吡啶中并向其中加入甲氧胺氫氯化物，在室溫下攪拌1小時(shí)。反應(yīng)混合物減壓濃縮，用400ml二氯甲烷稀釋，用水和鹽溶液洗，用硫酸鎂干燥、過濾并減壓濃縮，得到43g1-苯甲基-4-羥甲基-4-乙氧羰基-吡咯烷-3-酮-O-甲基肟(產(chǎn)率84.6％)。將如此得到的化合物溶于含22ml三乙胺和400ml二氯甲烷的溶液中并冷卻至0-5℃，向其中逐滴加入10ml甲烷磺酰氯并將反應(yīng)溫度緩慢增至室溫。將反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)，用水和鹽溶液洗，用硫酸鎂干燥、過濾并減壓濃縮，得到50g 1-苯甲基-4-甲烷磺酰氧甲基-4-乙氧羰基-吡咯烷-3-酮-O-甲基肟(產(chǎn)率92.6％)。將該產(chǎn)物溶于200ml四氫呋喃中并在室溫下繼續(xù)向其中加入13g硼氫化鈉和400ml乙醇和緩慢加入11g氯化鋰。反應(yīng)混合物攪拌5小時(shí)并倒入300ml冰水中。得到的溶液用稀釋的鹽酸調(diào)節(jié)pH值至5-6，減壓濃縮以從中除去大部分有機(jī)溶劑，然后萃取兩次，每次用200ml乙醚，用硫酸鎂干燥，過濾和減壓濃縮。殘留物用硅膠柱色譜(乙酸乙酯∶正己烷＝2∶1)純化得到42g題目所述液體化合物(產(chǎn)率94.3％)。
1H-NMR(CDCl3，ppm)2.54(d，1H)，2.84(d，1H)，2.96(s，3H)，3.30(s，2H)，3.60～3.71(m，4H)，3.77(s，3H)，4.32～4.53(m，2H)，7.22～7.27(m，5H)。
制備21-苯甲基-4-甲烷磺酰氧甲基-4-疊氮甲基-吡咯烷-3-酮-O-甲基肟將42g 1-苯甲基-4-甲烷磺酰氧甲基-4-羥甲基-吡咯烷-3-酮-O-甲基肟溶于400ml二甲基甲酰胺，并向其中加入21g疊氮化鈉，得到的溶液在110℃攪拌6小時(shí)。將反應(yīng)混合物減壓濃縮，用300ml乙醚稀釋，每次用200ml水洗兩次，再每次用200ml鹽溶液洗兩次，用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮，得到31g 1-苯甲基-4-疊氮甲基-4-羥甲基-吡咯烷-3-酮-O-甲基肟(產(chǎn)率87.3％)。將得到的化合物和18ml三乙胺加入到300ml二氯甲烷中并冷卻至0-5℃，然后向其中緩慢滴入9.0ml甲烷磺酰氯。將反應(yīng)溫度升至室溫并將混合物攪拌1小時(shí)。用200ml水和200ml鹽溶液洗反應(yīng)混合物，國硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮，濃縮的殘留物用硅膠柱色譜(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶3)純化得到38.8g題目所述化合物(產(chǎn)率98.4％)。
1H-NMR(CDCl3，ppm)2.77(d，2H)，2.98(s，3H)，3.34(s，2H)，3.57(s，2H)，3.65(s，2H)，3.85(s，3H)，4.31(s，2H)，7.22～7.27(m，5H)。
制備3叔丁基-6-苯甲基-8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛烷-2-羧酸酯將10g 1-苯甲基-4-甲烷磺酰氧甲基-4-疊氮甲基-吡咯烷-3-酮-O-甲基肟溶于100ml乙酸乙酯中，并向其中加入5ml 50％的雷內(nèi)鎳稀漿，得到的混合物在氫氣氛下攪拌3小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾并減壓濃縮得到8.0g 1-苯甲基-4-甲烷磺酰氧甲基-4-氨基甲基-吡咯烷-3-酮-O-甲基肟(產(chǎn)率86％)。將得到的化合物溶于200ml乙腈中并向其中滴入3.9ml1，8-二氮雜二環(huán)[5，4，0]十一碳-7-烯，將得到的混合物攪拌8小時(shí)，減壓濃縮，并溶于150ml二氯甲烷中，用100ml水和100ml鹽溶液洗，用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮，得到4.0g 6-苯甲基-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-8-酮-O-甲基肟(產(chǎn)率69.3％)。將得到的化合物和2.5ml三乙胺溶于50ml二氯甲烷中并向其中加入3.9g碳酸氫二-叔丁酯。得到的混合物攪拌4小時(shí)，用50ml水洗，用硫酸鎂干燥，過濾和減壓濃縮。濃縮的殘留物用硅膠柱色譜(乙酸乙酯∶正己烷∶二氯甲烷＝3∶5∶1)純化，得到4.6g題目所述化合物(產(chǎn)率80.9％)。
1H-NMR(CDCl3，ppm)1.36(s，9H)，2.80(s，2H)，3.24(s，2H)，3.51(s，2H)，3.78(d，2H)，3.80(s，3H)，4.24(d，2H)，7.20～7.27(m，5H)。
制備48-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛烷-2-羧酸叔丁酯將4.0g 6-苯甲基-8-(給養(yǎng)亞氨基)-2，6-二氮雜[3，4]辛烷-2-羧酸叔丁酯溶于40ml甲醇中并向其中加入4.0g 10％的Pd-C。得到的混合物在氫氣氛下5℃攪拌2小時(shí)，過濾和減壓濃縮，得到1.3g題目所述化合物(產(chǎn)率87.9％)。
1H-NMR(CDCl3，ppm)1.39(s，9H)，3.18(s，2H)，3.58(s，2H)，3.78(d，2H)，3.80(s，3H)，4.05(d，2H)。
制備51-苯甲基-4-甲烷磺酰氧甲基-4-羥甲基-吡咯烷-3-酮-O-乙基肟題目所述化合物按照制備1中同樣的程序制備。
1H-NMR(CDCl3，ppm)1.21(t，3H，J＝7.07Hz)，2.92(bs，2H)，3.03(bs，2H)，3.40(m，2H)，3.72～3.75(m，4H)，4.05～4.11(m，2H)，4.35～4.42(m，2H)，7.26～7.33(m，5H)。
制備61-苯甲基-4-甲烷磺酰氧甲基-4-疊氮甲基-吡咯烷-3-酮-O-乙基肟題目所述化合物按照制備2同樣的程序制備。
1H-NMR(CDCl3，ppm)1.14(t，3H，J＝7.08Hz)，2.63～2.72(dd，2H，J＝9.48Hz)，2.91(s，3H)，3.29(s，2H)，3.51(s，2H)，3.58(s，2H)，4.04(q，2H，J＝7.08Hz)，4.28(s，2H)，7.24(m，5H)。
制備76-苯甲基-8-(乙氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛烷-2-羧酸叔丁酯題目所述化合物按照制備3同樣的程序制備。
1H-NMR(CDCl3，ppm)1.19(m，3H)，1.41(s，9H)，2.85(bs，2H)，3.30(bs，2H)，3.64(bs，2H)，3.80(bs，2H)，4.07～4.11(m，4H)，7.30(bs，5H)。
制備88-(乙氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛烷-2-羧酸叔丁酯題目所述化合物按照制備4同樣的程序制備。
1H-NMR(CDCl3，ppm)1.20(t，3H，J＝6.84Hz)，1.38(s，9H)，3.32(s，2H)，3.62(s，2H)，3.88(d，2H)，4.10～4.191(m，4H)，4.97(s，1H)。
制備96-苯甲基-8-(甲氧亞氨基)-2-甲基-2，6-二氮雜螺[3，4]辛烷將550mg 6-苯甲基-2，6-二氮雜螺[3，4]辛烷-8-一-O-甲基肟(6-benzyl-2，6-diazaspirol[3，4]octane-8-one-O-methyloxime)加入10ml乙醇中并向其中加入0.4ml乙酸和176mg仲甲醛，得到的混合物在室溫下攪拌30分鐘，再向其中加入370mg氰基硼氫化鈉。得到的混合物在室溫下攪拌16小時(shí)，用碳酸鉀水溶液中和和減壓蒸餾，將得到的殘留物加入50ml二氯甲烷中，用50ml水洗，用硫酸鎂干燥，過濾和減壓濃縮。殘留物用硅膠柱色譜(甲醇∶正己烷∶二氯甲烷＝1∶10∶8)純化，得到350mg題目所述化合物(產(chǎn)率60.1％)。
1H-NMR(CDCl3，ppm)2.38(s，3H)，2.87(s，2H)，3.19(s，2H)，3.23(d，2H)，3.29(d，2H)，3.58(s，2H)，3.89(s，3H)，7.17～7.27(m，5H)。
制備108-(甲氧亞氨基)-2-甲基-2，6-二氮雜螺[3，4]辛烷將340mg 6-苯甲基-8-(甲氧亞氨基)-2-甲基-2，6-二氮雜螺[3，4]辛烷溶于10ml的甲醇中，并向其中加入300mg 10％的Pd-C。得到的混合物在50℃氫氣氛下攪拌2小時(shí)，過濾和減壓濃縮，得到195mg題目所述化合物(產(chǎn)率85.2％)。
1H-NMR(CDCl3，ppm)2.33(s，3H)，3.23～3.28(m，4H)，3.35(d，2H)，3.56(s，2H)，3.86(s，3H)。
制備117-[2-(叔丁氧羰基)-8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6基]-1-環(huán)丙基-6-氟-4-氧-1，4-二氫[1，8]二氮雜萘-3-羧酸將400mg 1-環(huán)丙基-6-氟-7-氯-4-氧-1，4-二氫[1，8]二氮雜萘-3-羧酸和840mg 8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛烷-2-羧酸叔丁酯加入10ml乙腈中，得到的混合物在45-50℃攪拌3小時(shí)。然后過濾和干燥沉淀出的固體，得到650mg題目所述的化合物(產(chǎn)率93.9％)。
熔點(diǎn)278-279℃1H-NMR(CDCl3，ppm)1.05(m，2H)，1.27(m，2H)，1.45(s，9H)，3.61～3.67(m，1H)，3.90(s，3H)，3.94(s，2H)，4.25(s，2H)，4.27(s，2H)，4.56(s，2H)，8.04(d，1H，J＝11.7，Hz)，8.68(s，1H)。
制備127-[2-(叔丁氧羰基)-8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-1-環(huán)丙基-6-氟-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸將400mg 1-環(huán)丙基-6，7-二氟-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸和840mg 8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛烷-2-羧酸叔丁酯加入10ml乙腈中，得到的混合物回流3小時(shí)。然后過濾和干燥沉淀出的固體，得到340mg題目所述的化合物(產(chǎn)率46.4％)。
熔點(diǎn)255～256℃1H-NMR(CDCl3，ppm)1.18(bs，2H)，1.39(m，2H)，1.45(s，9H)，3.52(bs，1H)，3.91～4.05(m，7H)，4.27(d，2H)，4.34(s，2H)，7.00(d，1H，J＝7.07Hz)，7.94(d，1H，J＝13.67Hz)，8.64(s，1H)。
制備137-[2-(叔丁氧羰基)-8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-1-環(huán)丙基-6，8-二氟-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸將150mg 1-環(huán)丙基-6，7，8-三氟-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸和320mg8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛烷-2-羧酸叔丁酯加入10ml乙腈中，得到的混合物回流7小時(shí)，然后冷卻至室溫。過濾和干燥沉淀出的固體，得到120mg題目所述的化合物(產(chǎn)率55.5％)。
熔點(diǎn)255～256℃1H-NMR(CDCl3，ppm)1.16(s，2H)，1.29(d，2H)，1.44(s，9H)，3.92～3.94(m，6H)，4.05(s，2H)，4.22(d，2H)，4.38(s，2H)，7.89(d，1H)，8.76(s，1H)。
制備147-[2-(叔丁氧羰基)-8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-1-環(huán)丙基-6-氟-8-氯-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸將300mg 1-環(huán)丙基-6，7-二氟-8-氯-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸、530mg8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛烷-2-羧酸叔丁酯和2gAmberliteIRA-420加入10ml乙腈中，并向其中滴入1ml三乙胺。得到的混合物回流72小時(shí)，然后將得到的固體濾出。將濾出液減壓濃縮并向其中加入10ml乙酸乙酯，得到的溶液攪拌4小時(shí)。過濾和干燥沉淀出的固體，得到169mg題目所述化合物(產(chǎn)率31.4％)。
熔點(diǎn)203～204℃1H-NMR(CDCl3，ppm)1.16(bs，2H)，1.39(d，2H)，1.44(s，9H)，3.92～3.94(m，6H)，4.03(s，2H)，4.21(d，2H)，4.38(s，2H)，7.88(d，1H，J＝13.19Hz)，8.76(s，1H)。
制備157-[2-(叔丁氧羰基)-8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-1-環(huán)丙基-5-環(huán)丙基-5-氨基-6，8-二氟-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸將750mg 1-環(huán)丙基-5-氨基-6，7，8-三氟-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸、1.05g 8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛烷-2-羧酸叔丁酯和4gAmberliteIRA-420加入20ml乙腈中，并向其中滴入2ml三乙胺。得到的混合物回流5天，然后向其中加入2ml二甲基甲酰胺。得到的混合物攪拌1小時(shí)然后將沉淀固體濾出。將濾出液減壓濃縮并向得到的殘留物中加入10ml乙腈，并攪拌1小時(shí)。過濾和干燥沉淀出的固體，得到420mg題目所述化合物(產(chǎn)率30.9％)。
熔點(diǎn)256～257℃1H-NMR(CDCl3，ppm)1.05(s，2H)，1.18(d，2H)，1.44(s，9H)，3.89～3.96(m，6H)，3.99(s，2H)，4.21(d，2H)，4.34(s，2H)，8.62(s，1H)。
制備167-[2-(叔丁氧羰基)-8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-1-(2，4-二氟苯基)-6-氟-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸將95mg 1-(2，4-二氟苯基)-6，7-二氟-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸、120mg 8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛烷-2-羧酸叔丁酯和400mgAmberliteIRA-420加入10ml乙腈中，并向其中滴入0.5ml三乙胺。得到的混合物回流48小時(shí)，然后將沉淀固體濾出。向?yàn)V出液中加入5ml乙醚，得到的混合物攪拌4小時(shí)。過濾和干燥沉淀出的固體，得到110mg題目所述化合物(產(chǎn)率67.8％)。
熔點(diǎn)263～264℃1H-NMR(CDCl3，ppm)1.43(s，9H)，3.64(s，2H)，3.86～3.91(m，2H)，3.92(s，3H)，4.18～4.21(m，4H)，5.91(d，1H，J＝6.84Hz)，7.18～7.24(m，2H)，7.48(m，1H)，8.06(d，1H，J＝13.68)，8.54(s，1H)。
制備177-[2-(叔丁氧羰基)-8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-1-(2，4-二氟苯基)-6-氟-4-氧-1，4-二氫-1，8-二氮雜萘-3-羧酸將110mg 1-(2，4-二氟苯基)-6-氟-7-氯-4-氧-1，4-二氫-1，8-二氮雜萘-3-羧酸、120mg 8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛烷-2-羧酸叔丁酯加入10ml乙腈中，并向其中滴入0.5ml三乙胺。得到的混合物在50℃攪拌4小時(shí)，然后在室溫下攪拌2小時(shí)。過濾和干燥沉淀出的固體，得到150mg題目所述化合物(產(chǎn)率79.9％)。
熔點(diǎn)230～232C1H-NMR(CDCl3，ppm)1.47(s，9H)，3.82～3.92(m，7H)，4.17～4.29(m，4H)，7.07～7.13(m，2H)，7.35～7.41(m，1H)，8.12(d，1H，J＝12.20Hz)，8.64(s，1H)。
制備187-[2-(叔丁氧羰基)-8-(乙氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-1-環(huán)丙基-6-氟-4-氧-1，4-二氫-1，8-二氮雜萘-3-羧酸將360mg 1-環(huán)丙基-6-氟-7-氯-4-氧-1，4-二氫-1，8-二氮雜萘-3-羧酸和500mg 8-(乙氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛烷-2-羧酸叔丁酯加入10ml乙腈中，并向其中滴入1ml三乙胺。得到的混合物在50℃攪拌2小時(shí)，然后在室溫下攪拌1小時(shí)。過濾和干燥沉淀出的固體，得到380mg題目所述化合物(產(chǎn)率57.9％)。
熔點(diǎn)261～262℃1H-NMR(CDCl3，ppm)1.06(s，2H)，1.27～1.31(m，5H)，1.45(s，9H)，3.64～3.66(m，1H)，3.96(d，2H)，4.19～4.28(m，6H)，4.57(s，2H)，8.08(d，1H，J＝12.20Hz)，8.12(s，1H)。
制備197-[2-(叔丁氧羰基)-8-(乙氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-1-環(huán)丙基-5-氨基-6，8-二氟-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸將400mg 1-環(huán)丙基-5-氨基-6，7，8-三氟-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸、680mg 8-(乙氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛烷-2-羧酸叔丁酯和2gAmberliteIRA-420加入15ml乙腈中，并向其中滴入1.5ml三乙胺。得到的混合物回流5天和過濾。濾出液減壓濃縮并向得到的殘留物中加入10ml異丙醇，得到的溶液在室溫下攪拌1小時(shí)。過濾和干燥沉淀出的固體，得到380mg題目所述化合物(產(chǎn)率51.1％)。
熔點(diǎn)235～236℃
1H-NMR(CDCl3，ppm)0.98(bs，2H)，1.15～1.23(m，5H)，1.34(s，9H)，3.26～3.30(m，1H)，3.86(d，2H)，3.93(s，2H)，4.06～4.12(m，4H)，4.28(s，2H)，8.53(s，1H)。
實(shí)施例11-環(huán)丙基-6-氟-7-[8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-4-氧-1，4-二氫[1，8]二氮雜萘-3-羧酸甲烷磺酸酯將350mg 7-[2-(叔丁氧羰基)-8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-1-環(huán)丙基-6-氟-4-氧-1，4-二氫[1，8]二氮雜萘-3-羧酸溶于5ml二氯甲烷中，并向其中滴入0.6ml三氟乙酸?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?小時(shí)，并向其中加入10ml乙醚。再攪拌1小時(shí)和將沉淀出的固體過濾，溶于5ml稀釋的NaOH并用稀釋的鹽酸中和。過濾和干燥如此得到的沉淀物。將得到的固體加入5ml溶于乙醇的1N-甲烷磺酸中并攪拌1小時(shí)。過濾和干燥如此得到的沉淀物，得到185g題目所述化合物(產(chǎn)率47.8％)。
熔點(diǎn)228～229℃1H-NMR(DMSO-d6+CF3COOD，ppm)0.97(s，2H)，1.14(d，2H)，2.48(s，3H)，3.57(bs，1H)，3.88(s，3H)，4.06～4.17(m，4H)，4.40(s，2H)，4.49(s，2H)，7.88(d，1H，J＝12.67Hz)，8.49(s，1H)。
實(shí)施例21-環(huán)丙基-6-氟-7-[8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸甲烷磺酸酯將175mg 7-[2-(叔丁氧羰基)-8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-1-環(huán)丙基-6-氟-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸溶于5ml二氯甲烷中，并向其中滴入1ml三氟乙酸。得到的混合物在室溫下攪拌18小時(shí)，并向其中加入10ml乙醚。過濾和干燥得到的沉淀物。將如此得到的固體溶于2ml稀釋的NaOH并用稀釋的鹽酸中和，過濾和干燥得到的沉淀物下。將得到的固體加入2ml溶于乙醇的1N-甲烷磺酸中并在室溫下攪拌3小時(shí)。過濾和干燥沉淀物，得到35mg題目所述化合物(產(chǎn)率28.5％)。
熔點(diǎn)216～217℃1H-NMR(DMSO-d6+CF3COOD，ppm)1.04(s，2H)，1.22(d，2H)，2.45(s，3H)，3.62(bs，1H)，3.84(s，3H)，4.06～4.18(m，6H)，4.23(s，2H)，7.10(d，1H，J＝7.15Hz)，7.76(d，1H，J＝14.27Hz)，8.52(s，1H)。
實(shí)施例31-環(huán)丙基-6，8-二氟-7-[8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸將150mg 7-[2-(叔丁氧羰基)-8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-1-環(huán)丙基-6，8-二氟-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸溶于5ml二氯甲烷中，并向其中滴入1ml三氟乙酸?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?小時(shí)，并向其中加入10ml乙醚。再攪拌1小時(shí)和將沉淀出的固體過濾和干燥。將這樣得到的固體溶于5ml稀釋的氫氧化鈉并用稀釋的鹽酸中和。過濾和干燥如此得到的沉淀物，得到115mg題目所述化合物(產(chǎn)率87.4％)。
熔點(diǎn)205～207℃1H-NMR(DMSO-d6+CF3COOD，ppm)1.16(s，4H)，3.87～3.97(m，4H)，4.06～4.33(m，6H)，4.39(s，2H)，7.77(d，1H，J＝13.15Hz)，8.63(s，1H)。
實(shí)施例41-環(huán)丙基-6-氟-8-氯-7-[8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸將150mg 7-[2-(叔丁氧羰基)-8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-1-環(huán)丙基-6-氟-8-氯-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸溶于5ml二氯甲烷中，并向其中滴入0.2ml三氟乙酸?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?8小時(shí)，并向其中加入10ml吡啶和10ml水。減壓蒸餾除去二氯甲烷并攪拌1小時(shí)。過濾和干燥如此得到的沉淀物，得到題目所述化合物(67mg)。
產(chǎn)率54.7％熔點(diǎn)220～221℃1H-NMR(DMSO-d6+CF3COOD，ppm)0.95(s，2H)，1.16(d，2H)，3.89(s，3H)，4.02～4.06(m，4H)，4.13～4.23(m，4H)，4.34(bs，1H)，7.92(d，1H，J＝12.44Hz)，8.82(s，1H)。
實(shí)施例51-環(huán)丙基-5-氨基-6，8-二氟-7-[8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸甲烷磺酸酯將420mg 7-[2-(叔丁氧羰基)-8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-1-環(huán)丙基-5-氨基-6，8-二氟-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸溶于10ml二氯甲烷中，并向其中滴入1ml三氟乙酸?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?8小時(shí)，并向其中加入10ml吡啶。減壓蒸餾。殘留物用硅膠色譜(氯仿∶甲醇∶水＝6∶2∶0.2)純化。將得到的固體加入2ml溶于乙醇的1N-甲烷磺酸中并在室溫下攪拌3小時(shí)。過濾和干燥如此得到的沉淀物，得到題目所述化合物(165mg)。
產(chǎn)率39.6％熔點(diǎn)238～239℃1H-NMR(DMSO-d6+CF3COOD，ppm)1.09(bs，4H)，2.49(s，3H)，3.89(s，3H)，3.92～3.99(m，1H)，4.08～4.20(m，6H)，4.35(s，2H)，8.50(s，1H)。
實(shí)施例61-(2，4-二氟苯基)-6-氟-7-[8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸二甲烷磺酸酯將90mg 7-[2-(叔丁氧羰基)-8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-1-(2，4-二氟苯基)-6-氟-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸溶于5ml二氯甲烷中，并向其中滴入0.1ml三氟乙酸?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?2小時(shí)，并向其中加入5ml吡啶。混合物減壓蒸餾以除去二氯甲烷再向其中加入5ml水。在室溫下攪拌2小時(shí)。過濾和干燥得到的沉淀物，加入2ml溶于乙醇的1N-甲烷磺酸中并在室溫下攪拌1小時(shí)。過濾和干燥如此得到的沉淀物，得到題目所述化合物(45mg)。
產(chǎn)率43.1％熔點(diǎn)216～217℃1H-NMR(DMSO-d6+CF3COOD，ppm)2.49(s，6H)，3.74～4.09(m，11H)，5.93(d，1H)，7.24(m，1H)，7.45(m，1H)，7.88(m，1H)，7.89(d，1H，J＝14.40Hz)，8.60(s，1H)。
實(shí)施例71-(2，4-二氟苯基)-6-氟-7-[8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-4-氧-1，4-二氫-1，8-二氮雜萘-3-羧酸甲烷磺酸酯將140mg 7-[2-(叔丁氧羰基)-8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-1-(2，4-二氟苯基)-6-氟-4-氧-1，4-二氫-1，8-二氮雜萘-3-羧酸溶于5ml二氯甲烷中，并向其中滴入0.2ml三氟乙酸?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?2小時(shí)，并向其中加入5ml吡啶。減壓蒸餾以除去二氯甲烷，再向其中加入5ml水。在室溫下攪拌2小時(shí)。過濾和干燥得到的沉淀物，并2ml溶于乙醇的1N-甲烷磺酸中并在室溫下攪拌1小時(shí)。過濾和干燥如此得到的沉淀物，得到題目所述化合物(95mg)。
產(chǎn)率68.3％熔點(diǎn)201～202℃1H-NMR(DMSO-d6+CF3COOD，ppm)2.49(s，3H)，3.85(s，3H)，3.88～4.10(m，8H)，7.23～7.26(m，1H)，7.40～7.46(m，1H)，7.70～7.76(m，1H)，8.07(d，1H，J＝12.44Hz)，8.76(s，1H)。
實(shí)施例81-環(huán)丙基-6-氟-7-[8-(乙氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-4-氧-1，4-二氫-1，8-二氮雜萘-3-羧酸甲烷磺酸酯將380mg 7-[2-(叔丁氧羰基)-8-(乙氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-1-環(huán)丙基-6-氟-4-氧-1，4-二氫-1，8-二氮雜萘-3-羧酸溶于5ml二氯甲烷中，并向其中滴入0.6ml三氟乙酸?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?2小時(shí)，并向其中加入3ml吡啶。減壓蒸餾以除去二氯甲烷，再向其中加入1ml水。在室溫下攪拌2小時(shí)。過濾和干燥這樣獲得的沉淀固體。將得到的固體加入2ml溶于乙醇的1N-甲烷磺酸中并在室溫下攪拌1小時(shí)。過濾和干燥如此得到的沉淀物，得到220mg題目所述化合物(產(chǎn)率58.3％)。
熔點(diǎn)211～212℃1H-NMR(DMSO-d6+CF3COOD，ppm)1.02(bs，2H)，1.19～1.28(m，5H)，2.48(s，3H)，3.63～3.68(m，1H)，4.06～4.20(m，5H)，4.38(s，2H)，4.51(s，2H)，7.97(d，1H，J＝12.44Hz)，8.55(s，1H)。
實(shí)施例91-環(huán)丙基-5-氨基-6，8-二氟-7-[8-(乙氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸甲烷磺酸酯將380mg 7-[2-(叔丁氧羰基)-8-(乙氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-1-環(huán)丙基-5-氨基-6，8-二氟-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸溶于10ml二氯甲烷中，并向其中滴入0.7ml三氟乙酸?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?8小時(shí)，并向其中加入10ml吡啶。減壓蒸餾以除去溶劑。殘留物用硅膠色譜(氯仿∶甲醇∶水＝6∶2∶0.2)純化。將得到的固體加入1.5ml溶于乙醇的1N-甲烷磺酸中并在室溫下攪拌3小時(shí)。過濾和干燥如此得到的沉淀物，得到180mg題目所述化合物(產(chǎn)率47.1％)。
熔點(diǎn)221～222℃1H-NMR(DMSO-d6+CF3COOD，ppm)0.96～1.02(m，4H)，1.15(t，3H，J＝7.08Hz)，2.49(s，3H)，3.87(d，1H)，3.98～4.12(m，8H)，4.22(s，2H)，8.42(s，1H)。
實(shí)施例101-環(huán)丙基-6-氟-7-[8-(甲氧亞氨基)-2-甲基-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-4-氧-1，4-二氫-1，8-二氮雜萘-3-羧酸將300mg 1-環(huán)丙基-6-氟-7-[8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-4-氧-1，4-二氫-1，8-二氮雜萘-3-羧酸加入10ml乙醇中，并向其中滴入0.2ml乙酸和42mg對甲醛?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?0分鐘，并向其中加入85mg氰基硼氫化鈉。在室溫下攪拌2小時(shí)。過濾和干燥得到的沉淀物，得到260mg題目所述化合物(產(chǎn)率83.7％)。
熔點(diǎn)225～227℃1H-NMR(DMSO-d6+CF3COOD，ppm)0.95(s，2H)，1.16(d，2H)，2.49(s，3H)，3.58～3.61(m，1H)，3.87(s，3H)，4.08～4.18(m，4H)，4.34(s，2H)，4.46(s，2H)，7.93(d，1H，J＝12.43Hz)，8.51(s，1H)。
實(shí)施例111-環(huán)丙基-5-氨基-6，8-二氟-7-[8-(甲氧亞氨基)-2-甲基-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸將300mg 1-環(huán)丙基-5-氨基-6，8-二氟-7-[8-(甲氧亞氨基)-2，6-二氮雜螺[3，4]辛-6-基]-4-氧-1，4-二氫-3-喹啉羧酸加入10ml乙醇中，并向其中滴入0.2ml乙酸和44mg對甲醛?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?0分鐘，并向其中加入91mg氰基硼氫化鈉。在室溫下攪拌2小時(shí)。過濾和干燥得到的沉淀物，得到280mg題目所述化合物(產(chǎn)率90.4％)。
熔點(diǎn)220～222℃1H-NMR(DMS0-d6+CF3COOD，ppm)1.15～1.23(m，4H)，2.64(s，3H)，4.05(s，3H)，4.06～4.10(m，1H)，4.20～4.39(m，6H)，4.47(s，2H)，8.62(s，1H)。
實(shí)驗(yàn)1.體外抗菌活性實(shí)驗(yàn)為了評價(jià)根據(jù)本發(fā)明在實(shí)施例中制備出的化合物的體外抗菌活性，按照2-fold瓊脂稀釋方法(Hoechst 345)使用Muller-Hinton瓊脂測定最小抑菌濃度(MIC，μg/ml)。接種107cfu/ml的細(xì)菌并在37℃下培養(yǎng)18小時(shí)，然后測定抗菌活性。對于甲氧苯青霉素抗性菌株，活性測定是在30℃培養(yǎng)48小時(shí)后進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)使用Hoechst標(biāo)準(zhǔn)菌株。
結(jié)果列于下表1和2中。
表1.體外抗菌活性(μg/ml)
<p>(μg/ml)<
<p>(μg/ml)
<p>(μg/ml)
表2.對抗性株的體外抗菌活性(μg/ml)
<p>實(shí)驗(yàn)2.急性毒理實(shí)驗(yàn)在根據(jù)本發(fā)明各實(shí)施例制備的喹諾酮羧酸衍生物的急性毒理實(shí)驗(yàn)中，使用23-25g ICR老鼠。每組老鼠包括5只雄鼠和5只雌鼠且每個(gè)樣品化合物分配成5個(gè)劑量。
將老鼠僅供水饑餓24小時(shí)后，將用0.2ml 0.1NNaOH稀釋且分別調(diào)節(jié)到預(yù)定劑量的樣品注入老鼠尾巴的靜脈中。注射后1小時(shí)，喂養(yǎng)老鼠，然后在14天內(nèi)觀察致死率。
結(jié)果，根據(jù)本發(fā)明的喹諾酮羧酸衍生物及其藥用可接受的鹽的LD50(mg/Kg)值大于320，因此證明了本發(fā)明化合物作為抗菌劑具有高安全性。
發(fā)明效果由于具有非常低的毒性，根據(jù)本發(fā)明的喹諾酮羧酸衍生物是非常安全的化合物，并且它們比已知的喹諾酮抗菌劑對革蘭陽性菌抗菌活性提高了，對革蘭陰性菌具有良好抗菌活性，并對甲氧苯青霉素抗性菌株和已知的喹諾酮抗性菌株具有特別出色的抗菌活性。
因此，本發(fā)明的喹諾酮羧酸衍生物是非常有用的抗菌劑。
權(quán)利要求
1.一種由下式1代表的喹諾酮羧酸衍生物或其藥用可接受的鹽或其異構(gòu)體
其中，A是C-H、C-F、C-Cl、C-O-CH3或N；Y是H或氨基；R1是環(huán)丙基或2，4-二氟苯基；R2是C1-4烷基；和R3是H或C1-4烷基。
2.一種制備喹諾酮羧酸衍生物的工藝方法，包括在酸受體的存在下進(jìn)行式2化合物與式3化合物的偶聯(lián)反應(yīng)，得到式1化合物
其中，A是C-H、C-F、C-Cl、C-O-CH3或N；Y是H或氨基；R1是環(huán)丙基或2，4-二氟苯基；R2是C1-4烷基；R3是H或C1-4烷基；和X是鹵素原子。
3.權(quán)利要求2所述的工藝方法，其中使用離子交換樹脂增加縮合反應(yīng)的反應(yīng)性，該離子交換樹脂選自AmberliteIRA-420、AmberliteIRA-900和AmberliteIRA-64。
4.一種喹諾酮羧酸衍生物的制備工藝方法，包括在酸受體的存在下進(jìn)行式2化合物和式3a化合物的偶聯(lián)反應(yīng)得到式4化合物，并從式4化合物上移去胺保護(hù)基團(tuán)(P)，得到其中R3是H的式1化合物，該工藝方法可選擇進(jìn)一步包括使用C1-4醛使其中R3是H的式1化合物發(fā)生還原反應(yīng)，得到其中R3是C1-4烷基的式1化合物
其中，A是C-H、C-F、C-Cl、C-O-CH3或N；Y是H或氨基；R1是環(huán)丙基或2，4-二氟苯基；R2是C1-4烷基；R3是H或C1-4烷基；X是鹵素原子；和P是胺保護(hù)基團(tuán)。
5.一種式3的8-烷氧基亞氨基-2，6-二氮雜螺[3，4]辛烷衍生物
其中，R2是C1-4烷基，和R3是H或C1-4烷基。
6.一種式3化合物的制備工藝方法，包括將式5化合物轉(zhuǎn)化成式7的肟化合物，使該肟化合物進(jìn)行環(huán)化反應(yīng)得到式13化合物并使式13化合物進(jìn)行去保護(hù)反應(yīng)，或在去保護(hù)反應(yīng)后用低級醛進(jìn)行還原性烷基化反應(yīng)，得到式3化合物
其中，R2是C1-4烷基；R3是H或C1-4烷基；和P’是氨基保護(hù)基團(tuán)。
7.權(quán)利要求6所述的工藝方法，其中式5化合物轉(zhuǎn)化成肟化合物是通過將其與甲醛反應(yīng)得到式6化合物，然后將式6化合物與烷氧基胺反應(yīng)得到式7的烷氧基亞氨基化合物
其中，R2是C1-4烷基；和P’是氨基保護(hù)基團(tuán)。
8.權(quán)利要求6所述的工藝方法，其中的環(huán)化反應(yīng)包括將式7化合物中的羥基基團(tuán)轉(zhuǎn)化成離去基團(tuán)L而得到式8化合物，離去基選自甲烷磺?；趸?、對甲苯磺?；趸望u素；將式8化合物中的酯基團(tuán)還原成醇而得到式9的醇化合物；用疊氮基團(tuán)代替式9化合物中的離去基團(tuán)L而得到式10化合物；將式10化合物中的羥基轉(zhuǎn)化成離去基團(tuán)L而得到式11化合物；將式11化合物中的疊氮基團(tuán)還原成伯胺而得到式12化合物；和使式12化合物發(fā)生環(huán)化反應(yīng)而得到式13化合物
其中，R2是C1-4烷基；和P’是氨基保護(hù)基團(tuán)。
全文摘要
本發(fā)明涉及喹諾酮羧酸衍生物,比已有的喹諾酮系抗生素具有更出色和廣泛的抗菌活性。更特別的是,它屬于式(1)代表的新的喹諾酮羧酸衍生物,其具有7－[8－(烴氧亞氨基)－2,6－二氮雜螺[3,4]辛烷－6－基]的衍生物作為取代基,和其藥用可接受的鹽和異構(gòu)體;其中A是C－H、C－F、C－Cl、C－O－CH
文檔編號C07D487/10GK1259952SQ98806026
公開日2000年7月12日 申請日期1998年6月26日 優(yōu)先權(quán)日1997年6月26日
發(fā)明者尹晟俊, 鄭龍浩, 李致雨, 吳允錫, 金南斗, 林栽敬, 陳允豪 申請人:同和藥品工業(yè)株式會(huì)社