專利名稱：茶堿衍生物治療和預(yù)防休克狀態(tài)的用途,新的黃嘌呤衍生物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及茶堿衍生物用于制備治療和預(yù)防休克狀態(tài)的藥物的用途，該衍生物具有至少一個(gè)在1位的經(jīng)修飾的甲基上的醚功能基；還涉及具有上述取代模式的新的黃嘌呤化合物及其制備方法。
休克被定義為生命重要器官供給營養(yǎng)不足的急性病癥，休克時(shí)常常體現(xiàn)出對(duì)生命構(gòu)成高度危險(xiǎn)(Med.Mo.Pharm.1989，12/9279-282)。
產(chǎn)生休克的原因是多種多樣的。于是，心原性休克是由原發(fā)性心臟衰竭引起，結(jié)果是心肌梗塞，嚴(yán)重的心律不齊，心肌機(jī)能不全或其它心臟疾病所致；也由于體液丟失或置換造成血容量減少性休克(出血性的外傷性體克以及燒傷脫水性體克)所致；也由于全身性微生物或其毒素浸潤(革蘭氏陰性和革蘭氏陽性細(xì)菌，真菌，病毒，原蟲等)造成敗血癥休克所致；以及最后由于全身性抗原-抗體反應(yīng)造成過敏性休克。
盡管導(dǎo)致體克的原因各異，但是各種休克的發(fā)病機(jī)理和臨床表現(xiàn)卻十分類同(Pschyrembel，klinisches worterbuch〔臨床辭典〕Walter deGruyter-Verlag，255th Edition，1986，page 1513)。細(xì)胞功能的紊亂通常起著重要的作用，其結(jié)果是導(dǎo)致組織得不到足夠的氧氣和底物(局部缺血)以及不能將有毒的代射產(chǎn)物全部排除(Medwelt 1989，40519-522)。休克是一種動(dòng)力學(xué)活動(dòng)，其過程基本上取決于局部缺血的持續(xù)時(shí)間。首先為代償性休克階段，機(jī)體與神經(jīng)和激素控制的循環(huán)中心進(jìn)行反應(yīng)，即暫時(shí)地對(duì)位于機(jī)體中心部位的器官(心臟、大腦、肺、肝，腎)進(jìn)行保護(hù)。其臨床癥狀表現(xiàn)為心動(dòng)過速，但血壓仍然正?；蚵詾槠汀⒑粑贝俨橛泻粑詨A中毒，皮膚通常呈灰白色，冰冷和滑膩狀；在敗血性休克中還伴有發(fā)燒，陣發(fā)性戰(zhàn)栗。如果代償機(jī)能耗盡后，中樞器官毛細(xì)管灌流也會(huì)減弱，當(dāng)減弱到一定程度時(shí)，導(dǎo)致休克的第二階段，代償紊亂休克狀態(tài)，其特征為進(jìn)行性細(xì)胞死亡和功能喪失。休克的出現(xiàn)是不可逆的。在微循環(huán)區(qū)域內(nèi)，血管通透性劇烈增大，導(dǎo)致體液全部流失，使血細(xì)胞比容上升，組織間隙浮腫，并且釋放介質(zhì)，特別形起擴(kuò)散性血管內(nèi)凝固，例如，消耗性凝血病，有纖維蛋白血栓填塞于末端血管系統(tǒng)。持續(xù)性的心輸出量減少和血壓降低，導(dǎo)致循環(huán)完全停止，最終由于心臟、肝、腎或肺急性衰竭(ARDS＝急性呼吸困難綜合癥)或多種器官衰竭(MOF)所致，如果多種器官同時(shí)喪失它們的功能，則在休克的最后階段導(dǎo)致死亡。
常規(guī)治療是對(duì)癥治療，且包括緊急處置，以消除致命威脅，如容量置換，人工呼吸以預(yù)防ARDS，給予作用于血管的藥物，加強(qiáng)血液循環(huán)，服用鎮(zhèn)痛藥和鎮(zhèn)靜藥，糾正酸堿平衡失調(diào)，服用肝素以避免消耗性凝血癥，以及用皮質(zhì)甾類藥物來減弱膜的通透性。根據(jù)休克的原因，可進(jìn)一步進(jìn)行對(duì)癥治療，例如，在出血性休克中采取手術(shù)和止血，除去感染病灶和在敗血性體克中用抗菌素治療，在心原性休克中采用心臟起搏器，心原性要克用主動(dòng)脈氣球?qū)共珓?dòng)法。盡管采用了這些治療手段，但是治療結(jié)果仍然不令人滿意，例如，在心原性體克中，因心肌梗死的死亡率為90％。在敗血性體克中，超過50％，它是世界范圍內(nèi)護(hù)理中常見的死亡原因。
可以理解的是臨床學(xué)上需要一種更具有因果關(guān)系的治療概念，以便能盡早地阻斷體克的鏈鎖進(jìn)程，從而明顯地提高存活的機(jī)會(huì)。對(duì)此有希望的出發(fā)點(diǎn)是通過復(fù)雜的病理生理學(xué)過程提供構(gòu)成休克進(jìn)行性過程的基礎(chǔ)。按照目前的知識(shí)水平，在敗血性和非敗性體克中，一系列介質(zhì)系統(tǒng)和炎癥活性細(xì)胞被相應(yīng)的病理刺激物活化(N.Engl.J.Med.1993，328/201471-1477)，并采取了這種手段后，伴有擴(kuò)散性炎癥過程的內(nèi)皮炎癥被定義為SIRS(全身炎癥反應(yīng)綜合癥)(J.Amer.Med.Ass.1992，2683452)。該綜合癥的核心是活化粒細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞之間經(jīng)過補(bǔ)償性粘著分子所進(jìn)行的病理學(xué)相互作用，該補(bǔ)償性粘著分子隨進(jìn)行性血管損傷，導(dǎo)致微循環(huán)紊亂以及器官的破壞，表現(xiàn)為功能損傷增加，最終結(jié)果是多種器官衰竭。粒細(xì)胞內(nèi)皮的相互作用觸發(fā)血管壁相聯(lián)系的炎癥過程，隨通常的致病最后途徑而來的是敗血性和非敗血性情況發(fā)生，伴隨著休克的發(fā)展。此外，有充分事實(shí)表明，在非敗血性體克過程中，存在有細(xì)菌或其毒性產(chǎn)物侵入到血流中的情況，被描述為發(fā)生細(xì)菌移位，該過程經(jīng)由起始的非微生物觸發(fā)屏障失調(diào)，這種失調(diào)發(fā)生于肺，特別是發(fā)生在胃腸道，所以，非敗血性和敗血性情況是相互重迭的(Medwelt 1989，40525-532)。
目前，有關(guān)因果性治療介入的企圖是針對(duì)由炎癥介質(zhì)支持的疾病過程進(jìn)行特異性介入，從而盡早地阻斷病理信號(hào)鏈，及時(shí)地預(yù)防器官損傷的發(fā)展。例如，在大量臨床研究中，鼠和人單克隆抗體對(duì)抗在格蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的內(nèi)毒素(LPS)(LPS為脂多糖)，人體化重組體以及鼠和人單克隆抗體對(duì)抗細(xì)胞激動(dòng)素TNF(腫瘤壞死因子)，通過基因工程制備的可溶性TNF受體，其它的TNF〔即通過重組技術(shù)產(chǎn)生的，生理學(xué)上存在的白介素-1受體拮抗劑Antril(IL-1-RA)與TNF-起形成的結(jié)合蛋白〕，以及緩激肽拮抗劑Bradycor等已經(jīng)被研究過，迄今顯而易見，沒有發(fā)現(xiàn)在治療學(xué)上有所突破(Scrip Magazine，December199450-52)。所以對(duì)極其復(fù)雜疾病的有效阻斷劑深入細(xì)微的研究經(jīng)久不衰，且逐漸認(rèn)識(shí)到切斷寬范圍信號(hào)鎖鏈的特異性介質(zhì)僅僅只有很低的成功前景，而最有希望的治療優(yōu)勢(shì)是通過多功能的介入，即通過各種具選擇性活性的藥物復(fù)方，或有利地通過一種單藥與藥理學(xué)作用譜盡可能廣的藥物組成復(fù)方。
為測(cè)試制劑的抗休克作用，已開發(fā)了各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的模型。特別實(shí)用的，易于標(biāo)準(zhǔn)化及有預(yù)見性的模型(Proc.Nate.Acad.Sci.USA1979，76/115939-5943)是在C57BL/6小鼠身上內(nèi)毒素(LPS)-誘發(fā)的休克，其十分符合臨床情況，由于通過同時(shí)給予半乳糖胺(GalN)使動(dòng)物對(duì)LPS的靈敏度增加得如此之大，以至于在人體上比較低的致死劑量也足以觸發(fā)致命的休克癥狀(DN&P 1993，6/9641-646；biospektrum1955，1/546-52)。在此模型中，茶堿(1，3-二甲基黃嘌呤)在劑量達(dá)到耐受限度時(shí)，顯示不出顯著的保護(hù)作用。
令人驚奇的是，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，在茶堿分子1-位上引進(jìn)取代基，即至少一個(gè)醚功能基引入甲基后便產(chǎn)生很強(qiáng)的制劑，同時(shí)實(shí)質(zhì)上改善了耐受度。該結(jié)構(gòu)類型的三個(gè)化合物是已知的，即是3-n-丙基黃嘌呤，在其1-位上具有2-甲氧基乙基，2-乙氧基乙基或3-甲氧基丙基(J.Med.Chem.1993，36/101380-1386)，因?yàn)樗鼈兙哂兄夤軘U(kuò)張的性質(zhì)，理應(yīng)適宜于治療急性哮喘發(fā)作，但是，它們被用作為抗休克劑的文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)并未獲悉。
本發(fā)明涉及應(yīng)用至少一種式I化合物來生產(chǎn)用于治療和預(yù)防休克的藥物，特別是SIRS(全身性炎癥反應(yīng)綜合癥)，膿毒癥，膿毒綜合癥，敗血病性休克，多種器官衰竭(MOF)，ARDS(急性呼吸困難綜合癥)，出血性和外傷性體克，以及燒傷性和脫水性休克，和在再灌注綜合癥和體外循環(huán)中的休克樣并發(fā)癥。式I化合物如下
其中R1是a)直鏈或支鏈的(C1-C5)-烷基，b)(C1-C2)-烷氧基-(C1-C3)-烷基或c)苯基或苯基-(C1-C2)-烷基，其中苯基是未取代的或每一個(gè)苯基被一或二個(gè)鹵素原子所取代，A是非支鏈或支鏈的(C1-C4)-亞烷基橋，且R2是a)直鏈或支鏈的(C1-C5)-烷基，b)(C3-C6)-環(huán)烷基，c)(C4-C8)-環(huán)烷基烷基，d)苯基，e)苯基-(C1-C2)-烷基，式I化合物中較可取的是下列化合物其中，R1是a)直鏈或支鏈的(C1-C4)-烷基，b)甲氧基甲基c)甲氧基乙基d)苯基e)4-氯苯基
f)芐基，或g)4-氯芐基，A是非支鏈的(C1-C3)-亞烷基橋，且R2是a)直鏈或支鏈的(C1-C4)-烷基，b)環(huán)丙基，c)環(huán)丙基甲基，d)苯基，或e)芐基，更可取的式I化合物是，其中，R1是直鏈或支鏈的(C1-C4)-烷基，A是非支鏈的(C1-C3)-亞烷基橋，且R2是直鏈或支鏈的(C1-C4)-烷基，環(huán)丙基或環(huán)丙基甲基。
術(shù)語“(C4-C8)-環(huán)烷基烷基”定義那些被(C3-C6)-環(huán)烷基所取代的烷基，其中所有碳原子的個(gè)數(shù)之和小于或等于8，它們是環(huán)丙基甲基至戊基，環(huán)丁基甲基至丁基，環(huán)戊基甲基至丙基和環(huán)己基甲基至乙基。鹵素原子是碘，溴，氟，和較可取的氯。
本發(fā)明還涉及新的式I化合物，其中，R1是a)直鏈或支鏈的(C1-C5)-烷基，b)(C1-C2)-烷氧基-(C1-C3)-烷基或c)苯基或苯基-(C1-C2)-烷基，其中茉基是未取代的或每一個(gè)苯基被一或二個(gè)鹵素原子所取代，A是非支鏈或支鏈的(C1-C4)-亞烷基橋，且R2是a)直鏈或支鏈的(C1-C5)-烷基，b)(C3-C6)-環(huán)烷基，c)(C4-C8)-環(huán)烷基烷基，d)苯基，或e)苯基-(C1-C2)-烷基，在式I化合物中不包括a)R2是正丙基，R1是甲基或乙基且A是亞乙基橋或b)R2是正丙基，R1是甲基且A是亞丙基橋的化合物。
較可取的式I化合物是如下化合物，其中，
R1是a)直鏈或支鏈的(C1-C4)-烷基，b)甲氧基甲基c)甲氧基乙基d)苯基e)4-氯苯基f)芐基，或g)4-氯芐基，A是非支鏈或支鏈的(C1-C3)-亞烷基橋，且R2是a)直鏈或支鏈的(C1-C4)-烷基，b)環(huán)丙基，c)環(huán)丙基甲基，d)苯基，或e)芐基，在式I化合物中不包括a)R2是正丙基，R1是甲基或乙基且A是亞乙基橋或b)R2是正丙基，R1是甲基且A是亞丙基橋的化合物。
更可取的式I化合物是如下化合物，其中，R1是直鏈或支鏈的(C1-C4)-烷基，A是非支鏈的(C1-C3)-亞烷基橋，且R2是直鏈或支鏈的(C1-C4)-烷基，環(huán)丙基或環(huán)丙基甲基。
在式I化合物中不包括a)R2是正丙基，R1是甲基或乙基且A是亞乙基橋或b)R2是正丙基，R1是甲基且A是亞丙基橋的化合物。
式I化合物能在7-位上去掉質(zhì)子，并因此與堿性試劑形成鹽和溶劑化物，對(duì)此而言，較可取的是藥學(xué)上可接受的堿金屬和堿土金屬鹽以及與有機(jī)堿所成的鹽和溶劑化物，有機(jī)堿如乙二胺，或堿性氨基酸類如賴氨酸，鳥氨酸和精氨酸。因此，本發(fā)明還涉及具式I的1，3-二取代的黃嘌呤的生理上耐受的鹽和/或溶劑化物以及它們作為抗休克組合物中活性化合物的用途。
在R1和/或R2位上具有不對(duì)稱支鏈烷基和/或具有不對(duì)稱支鏈亞烷基橋A的式I化合物中有一或多個(gè)不對(duì)稱碳原子，并因此可有立體異構(gòu)體存在。因此，本發(fā)明還包括立體異構(gòu)純的化合物及其混合物，以及它們作為抗休克組合物中活性化合物的用途。
本發(fā)明還涉及一種制備新的式I化合物的相似方法，該方法的基本內(nèi)容見WO87/00523中，例如，采用下列步驟a)將式II的3-取代的黃嘌呤或其鹽
其中，R2同式I中定義，與式III試劑在無縮合劑或在堿性縮合劑存在下進(jìn)行反應(yīng)，Ra-X(III)其中Ra是一個(gè)容易除去的離開基團(tuán)，如，可用還原或氫解反應(yīng)除去的芐基，二苯甲基或三苯甲基，其具有未取代或取代的苯環(huán)，且X是鹵素，較可取的是氯，溴或碘，或是磺酸酯或膦酸酯，或者，b)將式IV的7-取代的黃嘌呤或其鹽
其中，Ra是帶有未取代或取代的苯基的芐基，與式V試劑在無縮合劑或在堿性縮合劑存在下進(jìn)行反應(yīng)，R2-X(V)其中R2同式I定義且X同式III中定義，生成式VI的3，7-二取代的黃嘌呤，
其中，R2同式I中定義且Ra同式III或IV中定義，而后，將式VII的烷基化試劑
R1-O-A-X(VII)其中R1和A同式I中定義且X同式III中定義，在無縮合劑或在堿性縮合劑存在下與式VI化合物或其鹽反應(yīng)，將式VI化合物轉(zhuǎn)化為式VIII的1，3，7-三取代的黃嘌呤
其中R1，A和R2同式I中定義且Ra同式III或IV中定義，最后，從中間體式VIII化合物中除去離去基團(tuán)Ra，得到本發(fā)明的式I化合物，并且任意地將其轉(zhuǎn)化為生理上可耐受的鹽，在需要的時(shí)候可先分離其立體異構(gòu)體。
在本文中作為起始物使用的式II和IV的單取代的黃嘌呤化合物及式III，V和VII烷基化試劑大部分是已知的，或可容易的用已知的方法來制備，因此，例如，式IV的7-芐基黃嘌呤通過芐基化，水解掉糖基轉(zhuǎn)化為鳥苷，然后將鳥苷結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)化為黃嘌呤結(jié)構(gòu)(Synth.commun.1990，202459-2467)。
采用合適的式VII的烷基化試劑將側(cè)鏈R1-O-A引入到黃嘌呤結(jié)構(gòu)的1-位上，雖然A是亞甲基(A＝-CH2-)的化合物，由于其鹵化物適宜作為反應(yīng)試劑所以具有特殊的位置，但是至少在大規(guī)模使用時(shí)會(huì)引發(fā)毒性問題。因此，在這種特殊情況下，采用相應(yīng)的磺酸酯是優(yōu)選的，例如，其可通過脂肪羧酸和脂肪族或芳香族磺酸的混合酸酐(J.Org.Chem.1971，36528-531)與式IX的二取代的甲縮醛進(jìn)行反應(yīng)很方便地得到，該反應(yīng)清楚且進(jìn)行的較完全(J.Amer.Chem.Soc.1969，915663-5665)
在本文中R3是脂肪族基團(tuán)，如甲基，乙基，或三氟甲基或是芳香族基團(tuán)，例如苯基，4-甲苯基或4-溴苯基，但優(yōu)選甲基或4-甲苯基，且R1同式I中的定義。
反應(yīng)可在反應(yīng)物和無水的質(zhì)子惰性溶劑中進(jìn)行，該溶劑對(duì)反應(yīng)物而言是惰性的，反應(yīng)溫度在-20℃至+40℃之間，較可取的為0℃至20℃之間。對(duì)水解和熱不穩(wěn)定性都十分敏感的高反應(yīng)活性的磺酸酯中間體可不必進(jìn)行分離，可方便地直接用將它們作為粗產(chǎn)物用于黃嘌呤VI1-位氮原子上的烷基化，通常不需要加入堿性縮合劑。
單和二取代的黃嘌呤衍生物II，IV和VI與式II，V或VII烷化劑的反應(yīng)，一般是在稀釋劑或溶劑中進(jìn)行的，所用稀釋劑或溶劑對(duì)反應(yīng)物是惰性的，特別合適的是偶極質(zhì)子惰性溶劑，例如，二甲基甲酰胺，二甲基乙酰胺，N-甲基吡咯烷酮，四甲基脲，六甲基磷酰胺或二甲基亞砜；然而，還可以采用甲酰胺，乙腈，丙酮，丁酮，或醇，如，甲醇，乙二醇及其單或二(C1-C4)烷基醚，乙醇，丙醇，異丙醇及各種丁醇；烴例如苯，甲苯或二甲苯；鹵代烴，如，二氯甲烷或氯仿；吡啶以及所述溶劑的混合物或它們與水的混合物。烷基化反應(yīng)最好在有堿性縮合劑的存在下進(jìn)行，適用的縮合劑有，例如，堿金屬和堿土金屬的氫氧化物，碳酸鹽，氫化物，烷氧化物及有機(jī)堿，例如，三烷基胺，如，三乙胺或三丁胺，季銨鹽或氫氧化鏻以及，帶有任意取代的銨基或鱗基的交聯(lián)樹脂。然而，也可直接用黃嘌呤衍生物各自制成的鹽，例如堿金屬，堿土金屬或任意取代的銨或鏻鹽。此外，黃嘌呤化合物通?？稍谏鲜鰺o機(jī)縮合劑的存在下和以堿金屬或堿土金屬鹽的形式，借助于相轉(zhuǎn)移催化劑例如，叔胺，季銨或鏻鹽，或采用冠醚，較可取的是在二相體系中存在有相轉(zhuǎn)移催化劑條件下進(jìn)行烷基化。合適的，極易購得的相轉(zhuǎn)移催化劑有四((C1-C4)烷基)-和甲基三辛基銨和鏻，甲基-，十四烷基，苯基和芐基-三(C1-C4)烷基-和十六烷基三甲基銨以及(C1-C12)烷基-和芐基三苯基鏻鹽，一般講來，具有較大的陽離子，而且更加對(duì)稱的結(jié)構(gòu)的化合物證明越有效。在上述方法中，反應(yīng)通常是在0℃到所用反應(yīng)介質(zhì)的沸點(diǎn)之間的溫度下進(jìn)行，可取的為20℃到130℃間，任意地可在加壓或減壓下反應(yīng)，但一般是在常壓下反應(yīng)，反應(yīng)時(shí)間可以是少于1小時(shí)至幾小時(shí)。
從式VIII化合物中除去離去基團(tuán)R2從而生成本發(fā)明中式I的黃嘌呤，這一反應(yīng)是在標(biāo)準(zhǔn)條件下進(jìn)行的，該條件詳見生物堿和肽合成中有關(guān)保護(hù)基的章節(jié)，因此，可設(shè)想它們大多是已知的。
在苯環(huán)上任意取代的芐基，二苯甲基或三苯甲基最好是用還原性方法除去，除了化學(xué)還原之外，特別是芐基化合物與鈉在液氨中反應(yīng)之外，用催化氫解，利用貴金屬催化劑除去上述三種芳烷基，在此處是合適的，用甲酸銨作為氫供體取代分子態(tài)氫通常是合適的。這里所用的反應(yīng)介質(zhì)一般為低級(jí)醇，任意地加入甲酸或其它氨；質(zhì)子惰性溶劑，如二甲基甲酰胺；或特別是冰乙酸；然而，它們與水的混合物也適用。合適的氫化催化劑為鈀黑及吸附在活性碳或硫酸鋇上的鈀，而其它貴金屬，如鉑，銠和釕常產(chǎn)生副反應(yīng)，由于與核上氫化競(jìng)爭(zhēng)，因此僅在有限的范圍內(nèi)使用。氫解反應(yīng)通常在20℃到100℃之間進(jìn)行，在常壓或最好在稍微加壓到不超過10巴下進(jìn)行，一般反應(yīng)需幾分鐘到幾小時(shí)。另外，在除去Ra保護(hù)基，如除去4-甲氧基芐基，二苯甲基或三苯甲基時(shí)，也可采用慣用的質(zhì)子催化反應(yīng)進(jìn)行水解反應(yīng)。
本發(fā)明中式I化合物的立體異構(gòu)化純品的制備，較可取的是借助于已知方法，分離出立體異構(gòu)體，與對(duì)映異構(gòu)體相反，作為非對(duì)映異構(gòu)體具有不同的物理和化學(xué)性質(zhì)，要分離其混合物，例如采用分級(jí)結(jié)晶或?qū)游龇椒?，通常不?huì)有什么困難。另外，將消旋體進(jìn)行物理拆分成為對(duì)映異構(gòu)體需要格外小心；因而，用光學(xué)活性堿形成非對(duì)映異構(gòu)鹽之后才能用分級(jí)結(jié)晶，而只有當(dāng)用手性固定相時(shí)(它對(duì)對(duì)映體有不同的立體親合力)才能用層析分離的方法。
具式VIII的1，3，7-三取代黃嘌呤是制備本發(fā)明中式(I)化合物有用的中間體，而且，特別是當(dāng)Ra為芐基時(shí)，其顯示出與式I的最終產(chǎn)物一樣的藥理學(xué)活性，并因此屬于本發(fā)明的權(quán)利要求范圍之內(nèi)，即使其水溶度很低而更不易于非腸道給藥。
基于有用的藥理學(xué)性質(zhì)，本發(fā)明中新的式I化合物非常適合于作為藥物制劑中的活性化合物，特別是在那些有效的治療和預(yù)防休克的藥物中，因而實(shí)際上豐富了藥物資源。它們既可以微膠囊的形式單獨(dú)服用，也可與另一種藥物混合使用，或與合適的賦形劑合用。
因此，本發(fā)明還涉及含有至少一種式I化合物的藥物，其中不包括在1-位上有2-甲氧乙基，2-乙氧乙基或3-甲氧丙基的3-正丙基黃嘌呤，以及先前所述具有其它適應(yīng)癥的藥物制劑中的活性化合物。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及采用式I化合物來生產(chǎn)用于非腸道給藥和口服給藥的藥物制劑，但該制劑也可任意地經(jīng)直腸，皮下或吸入方式給予休克患者。合適的固體或液體藥物劑型是，例如，顆粒劑，粉劑，片劑，包衣片劑，(微)膠囊劑，糖漿劑，乳劑，懸浮劑，凝膠劑，活性化合物緩釋劑，栓劑，活性化合物釋放型貼劑，氣霧劑，滴劑，特別是安瓿型或連續(xù)輸液所用的注射用瓶裝注射液，在這些制劑中，輔助劑，如，賦形劑，崩解劑，粘合劑，包衣劑，膨脹劑，滑動(dòng)或潤滑劑，調(diào)味劑，甜味劑或助溶劑是常規(guī)所用的。例如，常用的輔助劑有，碳酸鎂，二氧化鈦，乳糖，甘露糖醇和其它糖類，滑石，乳蛋白，明膠，淀粉，維生素，纖維素及其衍生物，動(dòng)物和植物油，聚乙二醇及溶劑，如，無菌水，生理鹽水溶液，醇類，甘油及其它多羥基醇。
優(yōu)選將藥品制成劑量單位形式并按劑量單位服用，每個(gè)單位中含有作為活性成分的特定劑量的式I化合物。在固體劑量單位情況中，如片劑，膠囊和栓劑中，該劑量可高達(dá)1000mg，但以100-600mg為可取，在以安瓿形式的注射溶液中，可達(dá)300mg，但以20-200mg為可取。
針對(duì)成年病人治療時(shí)，根據(jù)式I化合物在人體內(nèi)的活性以及對(duì)生命構(gòu)成威脅的疾病嚴(yán)重度，每日口服劑量為100-5000mg活性物質(zhì)，以300-3000mg為可?。磺乙?0-3000mg為靜脈注射劑量，以50-2000mg為可取。每日劑量給予或者以個(gè)別劑量單位一次給藥(或以若干小劑量單位)，或者按特定的時(shí)間間隔，將劑量分成幾份后重復(fù)給藥。
在連續(xù)靜脈輸液情況下，每日劑量為100至5000mg，較可取的為500-2000mg，相當(dāng)于輸液速率為每小時(shí)每公斤體重0.1-3mg，較可取的是0.3-1mg/公斤體重/小時(shí)。
然而，在所有給藥方式中，根據(jù)不同情況，也可采用較高或較低的每日劑量。
最后，在臨床需要時(shí)，式I化合物也可與其它合適的活性化合物聯(lián)合給藥，特別是與那些介入調(diào)控休克癥狀的信號(hào)鏈鎖的活性化合物一起合用，例如，與抗體合用對(duì)抗外毒素和內(nèi)毒素(LPS)，單細(xì)胞LPS受體CD14或LPS結(jié)合蛋白LBP；與細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)劑合用，如抗-TNF抗體，可溶性TNF受體及其它的TNF結(jié)合蛋白，白介素-1(IL-1)抑制劑和/或TNF產(chǎn)生和/或釋放抑制劑以及TNF和IL-1受體拮抗劑；與花生四烯酸代謝抑制劑，凝集抑制劑和補(bǔ)體鏈鎖抑制劑合用，例如，磷脂酶A2，環(huán)氧化酶及脂肪氧合-酶抑制劑(如甾體和非甾體抗炎藥，如布洛芬)，PAF(血小板活化因子)，白細(xì)胞三烯，血栓烷A2，凝血酶，血纖維蛋白，緩激肽和5-羥色胺拮抗劑以及抗-C5a或抗-C3a抗體；與抗凝血?jiǎng)┖脱“迥垡种苿┖嫌茫?，抗凝血酶III，組織血漿酶原激活劑tPA-1，肝素以及前列環(huán)素及其更穩(wěn)定的合成衍生物；與溶解酶釋放和/或生物作用抑制劑合用；與氧基消除劑合用，例如，過氧化物歧化酶，過氧化氫酶，α-生育酚或N-乙?；腚装彼?；與重金屬螯合劑，如去鐵胺合用；與細(xì)胞間粘合抑制劑合用，如纖連蛋白或針對(duì)粘合分子ELAM-1，ICAM-1，VCAM-1和CD11/CD18的抗體，或選用抗菌素，或在上述藥物制劑中配入式I化合物。
在下文中，按照表1化合物結(jié)構(gòu)觀點(diǎn)，借助具有代表性的制備實(shí)例，對(duì)所搜集的式I化合物的合成作詳盡的解釋。在表2中，以同樣安排方式，匯編了有用的式VIII中間體化合物。對(duì)所有合成制備的中間體及最終產(chǎn)物，其結(jié)構(gòu)式均通過1H-NMR譜及元素分析或質(zhì)譜確證。
制備實(shí)例實(shí)例11-甲氧甲基-3-甲基黃嘌呤(化合物1)a)7-芐基-3-甲基黃嘌呤將20g(0.5mol)NaOH溶于200ml水中，然后將其加到含有83g(0.5mol)3-甲基黃嘌呤的500ml甲醇中，混合物于70℃下攪拌1小時(shí)，在相同溫度下滴加85.5g(0.5mol)溴化芐，并于70-80℃下保溫5小時(shí)。然后冷卻，冷抽濾，在抽濾漏斗上用水洗滌產(chǎn)品，將其熱溶于1000ml1NNaOH溶液中，過濾，攪拌下用4N HCl慢慢調(diào)pH至9.5。由溫?zé)岬娜芤褐羞^濾結(jié)晶，水洗直至無氯化物存在，于真空干燥爐上干燥過夜。產(chǎn)量81.7g(理論值的63.8％)；熔點(diǎn)263℃。
C13H12N4O2(MW＝256.2g/mol)b)7-芐基-1-甲氧甲基-3-甲基黃嘌呤將2.3g(0.1g原子)鈉溶于200ml無水甲醇中，用25.6g(0.1mol)步驟a)的黃嘌呤進(jìn)行處理，混合物加熱回流直至形成澄清的溶液，冷卻，減壓蒸發(fā)，殘?jiān)稍?。將所得?-芐基-3-甲基黃嘌呤的鈉鹽懸浮于300ml無水乙腈中，50℃攪拌下向其中滴加8.8g(0.11mol)甲氧甲基氯化物的40ml乙腈溶液，混合物再于50℃下攪拌8小時(shí)。冷卻，減壓蒸發(fā)，殘?jiān)寐确氯芙?，未反?yīng)的7-芐基-3-甲基黃嘌呤用1N NaOH溶液振搖提取，用水洗滌氯仿相至其成中性，干燥，減壓蒸發(fā)，得22g(理論值的73.3％)油狀產(chǎn)品，其逐步固化，沸騰加熱下加入石油醚后可從乙酸乙酯中重結(jié)晶。
C15H16N4O3(MW＝300.3g/mol)；熔點(diǎn)114℃在7-芐基-3-甲基黃嘌呤的1-位上引入甲氧甲基基團(tuán)也可以采用4-甲苯磺酸甲氧甲酯作為烷化劑來進(jìn)行，其可由4-甲基磺酰氯及乙酸鈉或由4-甲苯磺酸及乙酸酐與甲醛縮二甲醇在二甲基甲酰胺中進(jìn)行反應(yīng)(WO87/00523)并就地與7-芐基-3-甲基黃嘌呤反應(yīng)來制備。
c)1-甲氧甲基-3-甲基黃嘌呤(化合物1)60℃下，于1.5g鈀/活性炭上，壓力3.5巴下，使10.5g(0.035mol)1，3，7-三取代黃嘌呤(得自步驟b)于200ml冰醋酸中進(jìn)行氫化。冷卻后，用一層氮?dú)飧采w，濾除催化劑，濾液減壓濃縮，于硅膠柱上過濾純化固體殘?jiān)?，洗脫液為氯?甲醇(10/1)。
產(chǎn)量5.5g(理論值的74.8％)；熔點(diǎn)218℃C8H10N4O3(MW＝210.2g/mol)元素分析理論值C45.71％H4.80％N26.66％實(shí)測(cè)值C45.98％H4.86％N26.98％
實(shí)例23-環(huán)丙基-1-(2-甲氧乙基)黃嘌呤(化合物10)a)將10.4g(0.26mol)NaOH溶于110ml水中，然后將其加到300ml含50g(0.26mol)3-環(huán)丙基黃嘌呤的甲醇懸浮液中，混合物于70℃下攪拌1小時(shí)，在相同溫度下滴加44.5g(0.26mol)溴芐，并于70-80℃之間保溫4小時(shí)。然后加入1.04g(0.026mol)NaOH和4.45g(0.026mol)溴芐。再過1小時(shí)后，冷卻混合物，冷抽濾，用水于抽濾漏斗上洗滌產(chǎn)品。粗品無需純化即可直接使用。
產(chǎn)量48g(理論值的65.4％)，熔點(diǎn)204℃C15H14N4O2(MW＝282.3g/mol)；質(zhì)譜283(60％，M+H)；240(21％)；91(100％)b)7-芐基-3-環(huán)丙基-1-(2-甲氧乙基)黃嘌呤60℃下將2.2g(15.9mmol)K2CO3加到3g(11.0mmol)7-芐基-3-環(huán)丙基黃嘌呤(得自步驟a)的二甲基甲酰胺熱溶液中，混合物于60℃下攪拌1小時(shí)。然后向其中滴加入1.51g(15.9mmol)2-甲氧乙基氯化物，混合物于80℃下攪拌6小時(shí)。冷卻至室溫，減壓濃縮，用CH2Cl2溶解油狀殘?jiān)?，?NNaOH溶液提取，用水洗至中性，MgSO4干燥，減壓濃縮，殘?jiān)鼰o需純化即可直接用于步驟c)。
產(chǎn)量2.7g(理論值的71.7％)；熔點(diǎn)117℃C18H20N4O3(MW＝340.4g/mol)；質(zhì)譜340(36％，M)282(43％)；148(100％)；91(86％)c)3-環(huán)丙基-1-(2-甲氧乙基)黃嘌呤(化合物10)使2.2g(6.45mmol)1，3，7-三取代黃嘌呤(得自步驟b)于1.05g鈀(10％)/活性炭上在250ml乙醇中進(jìn)行氫化反應(yīng)12小時(shí)?；旌衔镉靡粚拥?dú)飧采w，濾除催化劑，濾液減壓濃縮，殘?jiān)?jīng)閃式硅膠層析純化，以甲苯/乙醇(10/1)作洗脫液。
產(chǎn)量0.77g(理論值的47.7％)；熔點(diǎn)203℃C11H14N4O3(MW＝250.3g/mol)；質(zhì)譜250(55％，M)192(100％)；149(56％)；148(58％)；121(82％)；120(56％)實(shí)例33-丁基-1-(3-甲氧丙基)黃嘌呤(化合物14)
a)7-芐基-3-丁基黃嘌呤將10g(0.25mol)NaOH溶于100ml水中，然后將其加到300ml含有52g(0.25mol)3-丁基黃嘌呤的甲醇懸浮液中，混合物于70℃下攪拌1小時(shí)。在相同溫度下滴加42.8g(0.25mol)溴芐，并于70-80℃之間保溫5小時(shí)。加入1.0g(0.25mol)NaOH和4.28g(0.025mol)溴芐。2小時(shí)后，冷卻混合物，用1500ml水稀釋，冷抽濾，用水在抽濾漏斗上洗滌產(chǎn)品，然后將其溶于1000ml 1NNaOH溶液中，過濾，用濃HCl攪拌下慢慢調(diào)pH至3。從溶液中濾集結(jié)晶，水洗至無氯化物，減壓干燥。
產(chǎn)量54.1g(理論值的72.5％)；熔點(diǎn)187℃C16H18N4O2(MW＝298.3g/mol)；質(zhì)譜298(13％，M)；91(100％)b)7-芐基-3-丁基-1-(3-甲氧丙基)黃嘌呤60℃下，將2.1g(15.2mmol)K2CO3加到熱的3g(10.0mmol)7-芐基-3-丁基黃嘌呤(得自步驟a)的90ml二甲基甲酰胺溶液中，混合物60℃下攪拌1小時(shí)。向其中滴加入1.3g(12.0mol)3-甲氧丙基氯化物，混合物于100℃下攪拌3小時(shí)。冷卻混合物至室溫，用水處理，CH2Cl2提取。有機(jī)層用水和1N NaCH溶液洗滌，Na2SO4干燥，減壓濃縮。油狀殘余物經(jīng)閃式硅膠柱層析純化，甲苯/乙醇(39/1)作洗脫液。
產(chǎn)量3.2g(理論值的86.5％)；黃色油狀物C20H26N4O3(MW＝370.5g/mol)；質(zhì)譜371.3(100％，M+H)；339.3(16％)；298.3(15％)；1H-NMR(DMSO-d6，200MH2)δ＝0.90(t，3H，CH2CH3)；1.30(六重峰，2H，CH2CH2CH3)；1.63及1.75(2五重峰，4H，CH2CH2CH2)；3.32(S，3H，OCH3)；3.34(t，2H，OCH2)；5.48(S，2H芐H)；7.25-7.40(m，5H，芳香H)；8.26(S，1H，N＝CH)c)3-丁基-1-(3-甲氧丙基)黃嘌呤(化合物14)于0.1g鈀(10％)/活性炭上，在50ml乙醇中，對(duì)0.5g(1.35mmol)1，3，7-三取代黃嘌呤(得自步驟b)進(jìn)行氫化5小時(shí)。混合物用一層氮?dú)膺M(jìn)行覆蓋，濾除催化劑，濾液減壓濃縮。殘余物可從甲醇/甲基叔丁基醚中重結(jié)晶。
產(chǎn)量0.19g(理論值的52.2％)；熔點(diǎn)157℃C13H20N4O3(MW＝280.3g/mol)；質(zhì)譜281.3(M+H，100％)；249.2(M-OMe，70％)實(shí)例41-乙氧甲基-3-丙基黃嘌呤(化合物18)a)7-芐基-3-丙基黃嘌呤將4.12g(0.103mol)NaOH溶于41ml水中，然后將其加到含有20g(0.103mol)3-丙基黃嘌呤的112ml甲醇懸浮液中?；旌衔镉?0℃下攪拌1小時(shí)，在相同溫度下滴加12.23ml(0.103mol)溴芐，并于70-80℃之間保溫4小時(shí)。冷卻混合物，冷抽濾，在抽濾漏斗上用水洗滌產(chǎn)品，減壓干燥。
產(chǎn)量20.3g(理論值的69.4％)；熔點(diǎn)186℃C15H16N4O2(MW＝284.3g/mol)；質(zhì)譜；284(18％，M)；242(11％)；212(13％)；91(100％)b)7-芐基-1-乙氧甲基-3-丙基黃嘌呤于60℃下，將1.71g(12.0mmol)K2CO3加到熱的2.2g(7.7mmol)7-芐基-3-丙基黃嘌呤(得自步驟a)的60ml二甲基甲酰胺溶液中，混合物于60℃下攪拌1小時(shí)。向其中滴加入0.93ml(10.0mmol)乙氧基甲基氯化物，混合物于80℃下攪拌4.5小時(shí)。再加0.5ml(5.3mmol)乙氧甲基氯化物，混合物再攪拌6小時(shí)。然后加入12ml水和5ml甲醇，混合物放置過夜，再加60ml水，用甲基叔丁基醚提取3次。合并的有機(jī)層用水洗滌兩次，MgSO4干燥，減壓濃縮，粗品經(jīng)硅膠閃式柱層析純化，CH2Cl2/甲醇(19.8/0.2)作洗脫液。
產(chǎn)量2.28g(理論值的87％)；熔點(diǎn)110℃C18H22N4O3(MW＝342.4g/mol)；質(zhì)譜342(7％，M)；296(13％)；285(33％)，91(100％)c)1-乙氧甲基-3-丙基黃嘌呤(化合物18)在179mg鈀(10％)/活性炭上，于200ml乙醇中對(duì)1.79g(5.2mmol)1，3，7-三取代黃嘌呤(得自步驟b)進(jìn)行氫化6.5小時(shí)?；旌衔镉靡粚拥?dú)飧采w，濾除催化劑，減壓濃縮濾液，殘?jiān)?jīng)閃式硅膠柱層析純化，CH2Cl2/甲醇(19.8/0.2)作洗脫液。
產(chǎn)量1.12g(理論值的85％)；熔點(diǎn)134℃C11H16N4O3(MW＝252.3g/mol)；質(zhì)譜252(29％，M)208(40％)；195(100％)；166(65％)；136(50％)實(shí)例53-乙基-1-丙氧基甲基黃嘌呤(化合物27)a)7-芐基-3-乙基黃嘌呤將180g(1mol)3-乙基黃嘌呤引入1000ml二甲基甲酰胺中，混合物于攪拌下加熱至80℃，加入88g(0.64mol)K2CO3后，在1小時(shí)內(nèi)滴加133g(1.05mol)氯芐，100℃下攪拌2小時(shí)，用1000ml水處理，沉淀物進(jìn)行抽濾，水洗直至無鹽，于100℃下真空干燥爐干燥。如有所需，可進(jìn)行進(jìn)一步的純化，即與實(shí)例1a)相似，用4NHCl使之從1N NaOH溶液中重新沉淀出來。
產(chǎn)量262g(理論值的97％)，熔點(diǎn)218℃C14H14N4O2(MW＝270.3g/mol)元素分析理論值C62.21％H5.22％N20.73％實(shí)測(cè)值；C62.07％H5.36％N20.84％b)7-芐基-3-乙基-1-丙氧甲基黃嘌呤與實(shí)例1b)相似，將27g(0.1mol)7-芐基-3-乙基黃嘌呤轉(zhuǎn)化成鈉鹽，然后在乙腈中與13g(0.12mol)丙氧甲基氯化物(由1，3，5-三噁烷，1-丙醇及氯化氫氣體制備而得，產(chǎn)率67％)進(jìn)行反應(yīng)，經(jīng)處理后，得30g(理論值的87.6％)分析純產(chǎn)品，其可用乙酸乙酯任意地進(jìn)行重結(jié)晶。
C18H22N4O3(MW＝342.4g/mol)；熔點(diǎn)92℃元素分析理論值63.14％H6.48％N16.36％實(shí)測(cè)值C62.95％H6.55％N16.21％c)3-乙基-1-丙氧甲基黃嘌呤(化合物27)35℃下，于150ml乙醇中，在6g鈀(10％)/活性炭上，使17.1g(0.05mol)得自步驟(b)的產(chǎn)品與5g(0.08mol)甲酸銨一起攪拌數(shù)天，隨后再加入甲酸銨至總量為22g(0.35mol)。過濾混合物，濃縮濾液，殘?jiān)苡贜a2CO3溶液中，用氯仿洗滌，水相用2N鹽酸調(diào)pH至4，用氯仿振搖提取產(chǎn)品，干燥后蒸發(fā)，殘?jiān)靡宜嵋阴ブ亟Y(jié)晶。
產(chǎn)量8.6g(理論值的68.2％)；熔點(diǎn)159℃C11H16N4O3(MW＝252.3g/mol)元素分析理論值52.37％H6.39％N22.21％實(shí)測(cè)值52.85％H6.88％N22.50％用與實(shí)例1c)相似的氫解去芐基化反應(yīng)，可以得相同的化合物，產(chǎn)率58.9％。
實(shí)例63-異丁基-1-丙氧甲基黃嘌呤(化合物31)a)7-芐基鳥嘌呤鹽酸鹽在室溫下，將40ml(0.34ml)溴芐滴加至40g(0.147mol)鳥苷的200ml二甲亞砜溶液中，混合物在室溫下攪拌4小時(shí)。用100ml濃鹽酸處理，室溫?cái)嚢?0分鐘。然后將其傾入1200ml甲醇中，抽濾濾集沉淀，用甲醇洗滌。
產(chǎn)量35.9g(理論值的92％)；熔點(diǎn)＞325℃C12H12ClN5O(MW＝277.7g/mol)；堿C12H11N5O(MW＝241.6g/mol)，質(zhì)譜242.2(100％，M+H)b)7-芐基黃嘌呤將35.9g(0.13mol)7-芐基鳥嘌呤鹽酸鹽(得自步驟a))溶于90ml水和807ml冰醋酸的混合物中并將其加熱至100℃。冷卻至50℃后，一次向其中加入35.88g(0.52mol)亞硝酸鈉的90ml水溶液。室溫放置16小時(shí)后，抽濾濾集生成的沉淀，在抽濾漏斗上用水洗滌并干燥。
產(chǎn)量26.0g(理論值的83％)；熔點(diǎn)＞266℃C12H10N4O2(MW＝242.5g/mol)；質(zhì)譜243.1(95％，M+H)；91(100％)c)7-芐基-3-異丁基黃嘌呤50℃下，將1.5g(6.2mmol)7-芐基黃嘌呤(得自步驟b))溶于50ml二甲基甲酰胺中，分次加入0.149g(6.2mmol)NaH，于50℃下攪拌1小時(shí)。向其中滴加0.67ml(6.2mmol)異丁基溴，混合物加熱至80℃。5小時(shí)后，再加0.2ml(1.86mmol)異丁基溴，混合物再攪拌5小時(shí)。加入12ml水及5ml甲醇，室溫下攪拌2小時(shí)，再加入60ml水，混合物用甲基叔丁基醚提取3次。有機(jī)層用水洗滌，MgSO4干燥，減壓濃縮，殘?jiān)?jīng)閃式硅膠柱層析純化，以CH2Cl2/甲醇(99/1)作洗脫液。
產(chǎn)量1.16g(理論值的63％)；C16H18N4O(MW＝298.3g/mol)1H-NMR(DMSO-d6，200MHz)δ＝0.85(d，6H，CH(CH3)2)；2.16(m，1H，CH2CH(CH3)2)；3.73(d，2H，CH2CH)；5.45(S，2，芐基，H)；7.23-7.40(m，5H，芳香H)，8.20(s，1H，N＝CH)；11.13(S br.，1H，NH)d)7-芐基-3-異丁基-1-丙氧基黃嘌呤60℃下，將0.86(6.2mmol)K2CO3加到1.16g(3.9mmol)7-芐基-3-異丁基黃嘌呤(得自步驟C))的60ml二甲基甲胺懸浮液中，混合物于該溫度下攪拌1小時(shí)。滴加入0.56ml(5.1mmol)丙氧甲基氯化物，混合物于80℃下攪拌5.5小時(shí)。然后加入12ml水和5ml甲醇，放置過夜，再次加入60ml水，每次用150ml甲基叔丁基醚提取4次。合并的有機(jī)層用200ml水洗滌，MgSO4干燥，減壓濃縮，粗品經(jīng)閃式硅膠柱層析純化，以CH2Cl2作洗脫液。
產(chǎn)量1.2g(理論值的83％)；熔點(diǎn)72℃C20H26N4O3(MW＝370.5g/mol)；質(zhì)譜370(40％，M)；310(55％)；299(100％)；256(55％)；91(85％)e)3-異丁基-1-丙氧甲基黃嘌呤(化合物31)在86mg鈀(10％)/活性炭存在下，于22ml乙醇中對(duì)得自步驟d)的859mg(2.32mmol)1，3，7-三取代黃嘌呤進(jìn)行氫化6小時(shí)?；旌衔镉靡粚拥?dú)飧采w，濾除催化劑，減壓濃縮濾液。殘?jiān)?jīng)閃式硅膠柱層析純化，以CH2Cl2/甲醇(19/1)作洗脫液。
產(chǎn)量588mg(理論值的90％)；熔點(diǎn)141℃C13H10N4O3(MW＝280.3g/mol)；質(zhì)譜280(25％，M)；222(37％)；209(100％)；166(85％)；136(55％)
實(shí)例73-苯基-1-丙氧甲基黃嘌呤(化合物32)a)7-芐基-3-苯基黃嘌呤將0.53g(13.2mmol)NaH的5.3ml水溶液加到3.0g(13.2mmol)3-苯基黃嘌呤的18ml甲醇懸浮液中，混合物于70℃下攪拌1小時(shí)。然后向其中滴加1.56ml(13.2mmol)溴芐，并于70℃下攪拌7小時(shí)。冷卻后抽濾濾集沉淀，用水洗滌，溶于50ml1N NaOH溶液中，濾除不溶物，溶液用4N鹽酸調(diào)pH至8-9。抽濾濾集生成的沉淀，水洗，經(jīng)閃式硅膠柱層析純化，以CH2Cl2/甲醇(79/1)作洗脫液。
產(chǎn)量1.13g(理論值的27％)；熔點(diǎn)250℃C18H14N4O2(MW＝318.6g/mol)；質(zhì)譜319(100％，M+H)；91(19％)b)7-芐基-3-苯基-1-丙氧甲基黃嘌呤60℃下，將0.45g(3.26mmol)K2CO3加到得自步驟a)的0.65g(2.04mmol)7-芐基-3-苯基黃嘌呤的2.0ml二甲基甲酰胺中，混合物于此溫度下攪拌1小時(shí)。再滴加0.29ml(2.65mmol)丙氧甲基氯化物，混合物于80℃下攪拌1.5小時(shí)。加20ml水，用甲基叔丁基醚提取3次，每次用量24ml。合并的有機(jī)層用水洗滌兩次，每次用量24ml。合并的有機(jī)層用水洗滌兩次，每次用量12ml，MgSO4干燥，減壓濃縮，粗品經(jīng)閃式硅膠柱層析純化，以庚烷/乙酸乙酯(5/7)作洗脫液。
產(chǎn)量0.69g(理論值的87％)；熔點(diǎn)103℃C22H22N4O3(MW＝390.4g/mol)；質(zhì)譜391.2(100％，M+H)；331.2(12％)；241.1(25％)c)3-苯基-1-丙氧甲基黃嘌呤(化合物32)在50mg Pd(10％)/活性炭存在下，使535mg(1.37mmol)的1，3，7-三取代黃嘌呤(得自步驟b)在20ml乙醇中進(jìn)行氫化，混合物用一層氮?dú)飧采w，濾除催化劑，減壓濃縮濾液。殘?jiān)瞄W式硅膠柱層析純化，以CH2Cl2/甲醇(19/0.3)作洗脫液。
產(chǎn)量232mg(理論值的56％)；熔點(diǎn)220℃
C15H16N4O3(MW＝300.3g/mol)；質(zhì)譜300(23％，M)；242(68％)；229(55％)；185(100％)實(shí)例83-環(huán)丙甲基-1-丙氧甲基黃嘌呤(化合物34)a)7-芐基-3-環(huán)丙基甲基黃嘌呤將7g(29.0mmol)7-芐基黃嘌呤(得自實(shí)例6)的200ml二甲基甲酰胺溶液加熱至50℃，分次加入0.69g(29.0mmol)NaH，50℃下攪拌1小時(shí)。向此懸浮液中加入2.76ml(29.0mmol)環(huán)丙甲基溴，升溫至80℃。80℃保持7小時(shí)后，再加入1ml(11.0mmol)環(huán)丙甲基溴。再過6小時(shí)后，加入24ml水和10ml甲醇，放置過夜，再用120ml水處理，然后用甲基叔丁基醚提取3次，每次用量300ml。有機(jī)層用水洗滌，MgSO4干燥，減壓濃縮。粗品經(jīng)閃式硅膠柱層析純化，以CH2Cl2/甲醇(99/1)作洗脫液。
產(chǎn)量4.8g(理論值的56％)；熔點(diǎn)185℃C16H16N4O2(MW＝296.4g/mol)；質(zhì)譜297.3(100％，M+H)b)7-芐基-3-環(huán)丙甲基-1-丙氧甲基黃嘌呤60℃下，將1.12g(8.1mmol)K2CO3加到1.5g(5.06mmol)7-芐基-3-環(huán)丙甲基黃嘌呤(得自步驟a)的60ml二甲基甲酰胺溶液中，混合物于此溫度下攪拌1小時(shí)。然后向其中滴加722μl(6.58mmol)丙氧甲基氯化物，混合物于80℃下攪拌4小時(shí)。加入12ml水和5ml甲醇，50℃下攪拌2小時(shí)。再加60ml水，混合物用甲基叔丁基醚提取3次，合并有機(jī)層，用水洗滌兩次，MgSO4干燥，減壓濃縮，粗品用閃式硅膠柱層析純化，以CH2Cl2/甲醇(19.8/0.2)作洗脫液。
產(chǎn)量1.32g(理論值的71％)；熔點(diǎn)88℃C20H24N4O3(MW＝368.4g/mol)質(zhì)譜368(9％，M)；310(11％)；297(13％)；91(100％)c)3-環(huán)丙甲基-1-丙氧甲基黃嘌呤(化合物34)于60ml乙醇中130mg Pd(10％)/活性炭存在下，對(duì)938mg(2.55mmol)的1，3，7-三取代黃嘌呤(得自步驟b)進(jìn)行氫化15小時(shí)?；旌衔镉靡粚拥?dú)飧采w，濾除催化劑，減壓濃縮濾液。殘?jiān)?jīng)閃式硅膠柱層析純化，以CH2Cl2/甲醇(39/1)作脫液。
產(chǎn)量671mg(理論值的95％)；熔點(diǎn)132℃C13H18N4O3(MW＝278.3g/mol)質(zhì)譜278(26％，M)；220(80％)；207(64％)；136(87％)；122(67％)；55(100％)。
實(shí)例91-(2-丙氧乙基)-3-丙基黃嘌呤(化合物37)a)7-芐基-1-(2-丙氧乙基)-3-丙基黃嘌呤60℃下，將1.7g(12.48mmol)K2CO3加到得自實(shí)例4a)中的2.2g(7.8mmol)7-芐基-3-丙基黃嘌呤的70ml二甲基甲酰胺懸浮液中，混合物在此溫度下攪拌1小時(shí)。再滴加1.3ml(10.14mmol)2-丙氧乙基氯化物，混合物于80℃下攪拌10小時(shí)。再加入1.2ml甲醇和14ml水，混合物放置過夜，進(jìn)一步用70ml水處理，用甲基叔丁基醚提取3次，每次用量84ml。合并的有機(jī)層用水洗滌兩次，每次42ml。用MgSO4干燥，減壓濃縮，粗品用閃式硅膠柱層析純化，以CH2Cl2/甲醇(19/0.1)作洗脫液。
產(chǎn)量2.3g(理論值的80％)；熔點(diǎn)55℃C19H24N4O3(MW＝356.4g/mol)；質(zhì)譜356(10％，M)；297(15％)；285(38％)；91(100％)b)1-(2-丙氧乙基)-3-丙基黃嘌呤(化合物37)在0.2g鈀(10％)/活性炭存在下，于75ml乙醇中對(duì)1.75g(4.7mmol)1，3，7-三以代黃嘌呤(得自步驟a)進(jìn)行氫化6小時(shí)?；旌衔镉靡粚拥?dú)飧采w，濾除催化劑，減壓濃縮濾液，殘?jiān)?jīng)閃式柱層析純化，以CH2Cl2/甲醇(38/1)作洗脫液。
產(chǎn)量0.93g(理論值的70％)；熔點(diǎn)137℃；C13H20N4O3(MW＝280.6g/mol)；質(zhì)譜281.3(45％，M+H)221.2(100％)實(shí)例101-丁氧甲基-3-異丙基黃嘌呤(化合物42)a)7-芐基-3-異丙基黃嘌呤將3.5g(1.45mmol)7-芐基黃嘌呤(得自實(shí)例6b)的6ml二甲基甲酰胺溶液加熱至50℃，分次用0.35g(1.45mmol)NaH處理，用20ml二甲基甲酰胺稀釋，50℃下攪拌1小時(shí)。向其中加入1.36ml(91.45mmol)2-溴丙烷，升溫至80℃，在反應(yīng)過程中，再另外加入總量為491ml(52.3mmol)的2-溴丙烷。80℃下總反應(yīng)時(shí)間達(dá)16小時(shí)后，加10ml水和2ml甲醇，攪拌10分鐘，進(jìn)一步用70ml水處理，甲基叔丁基醚提取3次，每次70ml。合并有機(jī)層，水洗，MgSO4干燥，減壓濃縮，粗品經(jīng)閃式硅膠柱層析純化，以CH2Cl2/甲醇(19/0.4)作洗脫液。
產(chǎn)量1.17g(理論值的29％)；熔點(diǎn)219℃C15H18N4O2(MW＝286.6g/mol)；質(zhì)譜285.2(100％，M+H)b)7-芐基-1-丁氧甲基-3-異丙基黃嘌呤60℃下，將0.583g(4.22mmol)K2CO3加到0.75g(2.64mmol)7-芐基-3-異丙基黃嘌呤(得自步驟a)的20ml二甲基甲酰胺懸浮液中，混合物于此溫度下攪拌1小時(shí)。然后滴加0.42g(3.43mmol)丁氧甲基氯化物，混合物于80℃下攪拌6小時(shí)，再加入0.11g(0.87mmol)丁氧甲基氯化物，再攪拌5小時(shí)。加20ml水，用甲基叔丁基醚提取3次，每次30ml，合并有機(jī)層，用水洗滌兩次，每次20ml，MgSO4干燥，減壓濃縮，粗品經(jīng)閃式硅膠柱層析純化，以庚烷/乙酸乙酯(2/1)作洗脫液。
產(chǎn)量0.66g(理論值的68％)；油狀；C20H26N4O2(MW＝370.7g/mol)、質(zhì)譜371.4(100％，M+H)；297.2(33％)；1H-NMR(DMSO-d6，200MHZ)δ＝0.82(t，3H，(CH2)3CH3)；1.48(d，6H，CH(CH3)2)；1.14-1.56(m，4H，CH2(CH2)2CH3)；3.50(t，2H，OCH2)；5.06(m，1H，CH(CH3)2)；5.30(S，2H，芐基H)；5.50(S，2H，OCH2N)；7.24-7.43(m，5H，芳香H)；8.31(S，1H，N＝CH)c)1-丁氧甲基-3-異丙基黃嘌呤(化合物42)在86mg鈀(10％)/活性炭存在下，于60ml乙醇中對(duì)660mg(1.78mmol)1，3，7-三取代黃嘌呤(得自步驟b)進(jìn)行氫化14小時(shí)?；旌衔镉靡粚拥?dú)飧采w，濾除催化劑，減壓濃縮濾液，粗品用閃式硅膠柱層析純化，CH2Cl2/甲醇作洗脫液(19/0.3)。
產(chǎn)量416mg(理論值的83％)，熔點(diǎn)131℃C13H20N4O3(MW＝280.3g/mol)；質(zhì)譜281.2(100％，M+H)；207.2(30％)實(shí)例111-異丁氧甲基-3-甲基黃嘌呤(化合物48)60℃下，將1.9g(14.08mmol)K2CO3加到得自實(shí)例1a)的2.25g(8.8mmol)7-芳基-3-甲基黃嘌呤的50ml N-甲基吡咯烷酮懸浮液中，混合物于此溫度下攪拌1小時(shí)。然后滴加1.4g(11.44mmol)異丁氧甲基氯化物，混合物于80℃下攪拌3小時(shí)。再加入0.5g(4.4mmol)異丁氧甲基氯化物，混合物再攪拌2小時(shí)。加50ml水，混合物用甲基叔丁基醚提取3次，每次60ml。合并有機(jī)層，用水洗滌兩次，每次30ml，MgSO4干燥，減壓濃縮。粗品經(jīng)閃式硅膠柱層析純化，以CH2Cl2/甲醇(19/0.2)作洗脫液。
產(chǎn)量2.54g(理論值的85％)；熔點(diǎn)76℃C18H22N4O3(MW＝342.4g/mol)；質(zhì)譜343.3(100％，M+H)；269.2(88％)；179.1(24％)b)1-異丁氧甲基-3-甲基黃嘌呤(化合物48)在0.4g Pd(10％)/活性炭存在下，于50ml乙醇中對(duì)2.18(6.14mmol)1，3，7-三取代黃嘌呤(得自步驟a)進(jìn)行氫化25小時(shí)，混合物用一層氮?dú)獗Ｗo(hù)，濾除催化劑，減壓濃縮濾液。殘?jiān)瞄W式硅膠柱層析純化，以CH2Cl2/甲醇(19/0.3)作洗脫液。
產(chǎn)量0.59g(理論值的38％)；熔點(diǎn)160℃C11H16N4O3(MW＝252.3g/mol)；質(zhì)譜252(7％，M)；196(10％)；180(100％)；179(88％)；167(56％)實(shí)例121-仲-丁氧甲基-3-乙基黃嘌呤(化合物52)a)7-芐基-1-仲-丁氧甲基-3-乙基黃嘌呤60℃下，將2.45g(18.00mmol)K2CO3加到3.0g(11.0mmol)得自實(shí)例5a)的7-芐基-3-乙基黃嘌呤的60ml二甲基甲酰胺懸浮液中，混合物于此溫度下攪拌1小時(shí)。然后滴加1.77g(14.00mmol)仲-丁氧甲基氯化物，80℃下攪拌5小時(shí)。然后再加0.7g(5.5mmol)仲-丁氧甲基氯化物，攪拌3小時(shí)。加12ml水及5ml甲醇，混合物于50℃下攪拌2小時(shí)。再加60ml水，用甲基叔丁基醚提取3次，每次200ml，合并有機(jī)層，用200ml水洗滌，MgSO4干燥，減壓濃縮，粗品經(jīng)閃式硅膠柱層析純化，以CH2Cl2/甲醇(19.8/0.2)作洗脫液。
產(chǎn)量3.29(理論值的84％)；油狀；C19H24N4O3(MW＝356.4g/mol)，質(zhì)譜356(4％，M)；284(71％)；271(32％)；91(100％)；1H＝NMR(DMSO-d6，200MHZ)δ＝0.73(t，3H，CH2CH3)；1.05(d，3H，CHCH3)；1.21(t，3H，NC2CH3)；1.35(五重峰，2H，CHCH2CH3)；3.57(六重峰，1H，CHCH2)；4.02(q，2H，NCH2CH3)；5.30(AB系統(tǒng)，2H，OCH2N)；5.50(S，2H，芐基H)；7.23-7.40(m，5H，芳香H)；8.32(S，1H，N＝CH)b)1-仲丁氧甲基-3-乙基黃嘌呤(化合物52)在273mg Pd(10％)/活性炭存在下，于100ml乙醇中，對(duì)2.73g(7.66mmol)1，3，7-三取代黃嘌呤(得自步驟a)進(jìn)行氫化12.5小時(shí)?；旌衔镉靡粚拥?dú)飧采w，濾除催化劑，減壓濃縮濾液，粗品經(jīng)閃式硅膠柱層析純化，CH2Cl2/甲醇(19.7/0.3)作洗脫液。
產(chǎn)量1.82g(理論值的89％)；熔點(diǎn)189℃C12H18N4O3(MW＝266.3g/mol)；質(zhì)譜266(4％，M)；194(87％)；193(100％)；181(63％)；136(87％)實(shí)例131-(2-甲氧乙氧甲基)-3-甲基黃嘌呤(化合物53)a)7-芐基-1-(2-甲氧乙氧甲基)-3-甲基黃嘌呤50℃并攪拌下，將25.6g(0.1mol)7-芐基-3-甲基黃嘌呤(按實(shí)施例1a)方法制備)，15.2g(0.11mol)K2CO3及16.2g(0.13mol)2-甲氧乙氧甲基氯化物的500ml乙腈溶液組成的混合物加熱5小時(shí)，同實(shí)例1b)方法處理，所得的油狀產(chǎn)品借助硅膠柱過濾方法純化，以CH2Cl2/甲醇(10/1)作洗脫液。
產(chǎn)量22.8g(理論值的66.2％)；油狀，C17H20N4O4(MW＝344.3g/mol)元素分析理論值C59.29％H5.85％N16.27％實(shí)測(cè)值C59.01％H5.93％N16.02％b)1-(2-甲氧乙氧甲基)-3-甲基黃嘌呤(化合物53)按實(shí)例1c方法，對(duì)22.7g(0.066mol)得自步驟a)中的化合物進(jìn)行氫解去芐基化反應(yīng)，經(jīng)層析純化和乙醇重結(jié)晶，得10.0g最終產(chǎn)物(理論值的65％)。
C10H14N4O4(MW＝254.3g/mol)；熔點(diǎn)188℃元素分析理論值C47.24％H5.55％N22.04％實(shí)測(cè)值C47.22％H5.45％N22.06％實(shí)例143-乙基-1-(2-(2-甲氧乙氧)乙基)黃嘌呤(化合物56)由7-芐基-3-乙基黃嘌呤(按實(shí)例5a)制備)及1-溴-2-(2-甲氧乙氧)乙烷(按實(shí)例2b)，制備)可以制得14g(0.037mol)7-芐基-3-乙基-1-(2-(2-甲氧乙氧)乙基)黃嘌呤，產(chǎn)率為理論值的98％(C19H24N4O4(MW＝372.4g/mol))；二異丙醚重結(jié)晶后熔點(diǎn)為64℃元素分析理論值C61.28％H6.50％N15.04％實(shí)測(cè)值C61.44％H6.49％N15.26％然后氫解去芐基反應(yīng)(同實(shí)例1c)。粗品直接用乙酸乙酯重結(jié)晶，無需經(jīng)柱層析純化。
產(chǎn)量7.5g(理論值的71.8％)；熔點(diǎn)140℃；C12H18N4O4(MW＝282.3g/mol)元素分析理論值C51.05％H6.43％N19.85％實(shí)測(cè)值C51.51％H6.37％N19.87％實(shí)例153-甲基-1-(2-苯氧乙基)黃嘌呤(化合物60)a)7-芐基-3-甲基-1-(2-苯氧乙基)黃嘌呤60℃下，將2.6g(18.72mmol)K2CO3加到3.0g(11.7mmol)7-芐基-3-甲基黃嘌呤(按實(shí)例1a制備)的70ml二甲基甲酰胺懸浮液中，混合物于此溫度下攪拌1小時(shí)。然后向其中滴加3.1g(15.21mmol)2-苯氧乙基溴，混合物于80℃下攪拌5小時(shí)。過濾粗混合物，減壓濃縮濾液，殘?jiān)肅H2Cl2溶解，用1N NaOH洗滌一次，水洗兩次。有機(jī)相用MgSO4干燥，減壓濃縮，粗品經(jīng)閃式硅膠柱層析純化，以庚烷/乙酸乙酯(1/2)作洗脫液。
產(chǎn)量3.52g(理論值的80％)；熔點(diǎn)141℃；C21H20N4O3(MW＝376.4g/mol)；質(zhì)譜376(2％，M)；283(100％)；91(87％)。
b)3-甲基-1-(2-苯氧乙基)黃嘌呤(化合物60)于0.3g Pd(10％)/活性炭上，在500ml 乙醇中，對(duì)3.0g(8.0mmol)1，3，7-三取代黃嘌呤(得自步驟a)進(jìn)行氫化6小時(shí)。混合物用一層氮?dú)飧采w，濾除催化劑，減壓濃縮濾液。殘?jiān)瞄W式硅膠柱層析純化，以庚烷/乙酸乙酯(1/10)作洗脫液。產(chǎn)量1.09g(理論值的48％)；熔點(diǎn)207℃；C14H14N4O3(MW＝286.3g/mol)；質(zhì)譜287.2(45％，M+H)；193.1(100％)實(shí)例161-(4-氯代苯氧甲基)-3-甲基黃嘌呤(化合物65)a)7-芐基-1-(4-氯代苯氧甲基)-3-甲基黃嘌呤60℃下，將2.59g(19.0mmol)K2CO3加到3.0g(12.0mmol)7-芐基-3-甲基黃嘌呤(按實(shí)例1a方法制備)的50ml二甲基甲酰胺懸浮液中，并于此溫度下攪拌1小時(shí)。然后滴加2.69g(15.0mmol)4-氯苯氧甲基氯化物，混合物于80℃下攪拌8小時(shí)。粗混合物過濾，減壓濃縮濾液，殘余物用CH2Cl2溶解，用1N NaOH溶液洗滌一次，并用水洗滌兩次。有機(jī)層用MgSO4干燥，減壓濃縮，粗品經(jīng)閃式硅膠柱層析純化，以CH2Cl2/甲醇(19.8/0.2)作洗脫液。
產(chǎn)量4.15g(理論值的87％)；熔點(diǎn)96℃。
C20H17ClN4O3(MW＝396.8g/mol)；質(zhì)譜398(2％，37Cl，M)；396(6％，35Cl，M)；269(100％)；91(72％)b)1-(4-氯代苯氧甲基)-3-甲基黃嘌呤(化合物65)于0.34g Pd(10％)/活性炭存在下，在450ml乙醇中對(duì)3.37g(8.5mmol)1，3，7-三取代黃嘌呤(得自步驟a)進(jìn)行氫化5小時(shí)。混合物用一層氮?dú)獗Ｗo(hù)，濾除催化劑，減壓濃縮濾液。殘?jiān)?jīng)閃式柱層析(RP-18柱)純化，以水/乙腈(7/3)作洗脫液。
產(chǎn)量0.91g(理論值的34％)；熔點(diǎn)218℃C13H11ClN4O3(MW＝306.7g/mol)質(zhì)譜309.1(6％，37Cl，M+H)；307.1(19％，35Cl，M+H)；179.1(100％)；167.1(11％)實(shí)例171-芐氧甲基-3-甲基黃嘌呤(化合物68)a)3-甲基-7-三苯甲基黃嘌呤60℃下，將0.62g(25.88mmol)NaH分批加到3.9g(23.5mmol)3-甲基黃嘌呤的85ml二甲基甲酰胺懸浮液中，混合物于此溫度下攪拌1.5小時(shí)，加熱至90℃。然后加入6.6g(23.67mmol)三苯甲基氯化物的30ml二甲基甲酰胺溶液，90℃下攪拌3小時(shí)。熱抽濾濾除固體，減壓濃縮濾液，殘?jiān)?N NaOH溶液溶解，混合物加熱至80℃，抽濾濾除固體。濾液用2N鹽酸調(diào)至pH4-5。形成的沉淀經(jīng)閃式硅膠柱層析純化，以CH2Cl2/甲醇(19/0.2)作洗脫液。
產(chǎn)量6.55(理論值的68％)；熔點(diǎn)242℃C25H20N4O2(MW＝408.7g/mol)；質(zhì)譜409.1(21％，M+H)244.2(17％)；243.2(100％)；167.0(1 7％)b)1-芐氧基甲基-3-甲基-7-三苯甲基黃嘌呤60℃下，將1.3g(9.55mmol)K2CO3加到2.4g(5.9mmol)3-甲基-7-三苯甲基黃嘌呤(得自步驟a)的50ml二甲基甲酰胺溶液中，混合物于此溫度下攪拌1小時(shí)。滴加1.06ml(7.67mmol)芐氧甲基氯化物，混合物于80℃下攪拌7小時(shí)。加50ml水，混合物用甲基叔丁基醚提取3次，每次60ml。合并的有機(jī)層用水洗滌兩次，每次30ml，MgSO4干燥，減壓濃縮。粗品經(jīng)閃式硅膠柱層析純化，以庚烷/乙酸乙酯(3/2)作洗脫液。
產(chǎn)量1.57g(理論值的51％)；熔點(diǎn)164℃；C33H28N4O3(MW＝528.9g/mol)；質(zhì)譜535.2(74％，M+Li)；243.1(100％)c)1-芐氧甲基-3-甲基黃嘌呤(化合物68)將1.1ml乙醇和2.2ml1N HCl的混合物加到1.2g(2.27mmol)1，3，7-三取代黃嘌呤(得自步驟b)的11ml乙醇懸浮液中?；旌衔锘亓?.5小時(shí)，減壓濃縮，殘?jiān)?jīng)閃式硅膠柱層析純化，以CH2Cl2/甲醇(19/0.5)作洗脫液產(chǎn)量0.6g(理論值的92％)；熔點(diǎn)208℃C14H14N4O3(MW＝286.3g/mol)；質(zhì)譜287.2(57％，M+H)；257.1(77％)；179.1(100％)；91.1(24％)實(shí)例181-(2-(4-氯代芐氧)乙基)-3-甲基黃嘌呤(化合物70)a)1-(2-(4-氯代芐氧)乙基)-3-甲基-7-三苯甲基黃嘌呤60℃下，將1.3g(9.44mmol)K2CO3加到2.4g(5.9mmol)3-甲基-7-三苯甲基黃嘌呤(按實(shí)例17a方法制備)的50ml N-甲基吡咯烷酮溶液中，混合物于此溫度下攪拌1小時(shí)。滴加1.57g(7.67mmol)2-(4-氯代芐氧)乙基氯化物，80℃下攪拌1小時(shí)。然后再加入1.0g(4.9mmol)2-(4-氯代芐氧)乙基氯化物，再攪拌1小時(shí)。加50ml水，用甲基叔丁基醚提取3次，每次60ml，合并有機(jī)層，用水洗滌兩次，每次30ml，MgSO4干燥，減壓濃縮，粗品經(jīng)閃式硅膠柱層析純化，以庚烷/乙酸乙酯(3/2)作洗脫液。
產(chǎn)量2.13g(理論值的63％)；熔點(diǎn)179℃；C34H29ClN4O3(MW＝577.1g/mol)；質(zhì)譜585(5％，37Cl，M+Li)，583.2(8％，35Cl，M+Li)；243.1(100％)b)1-(2-(4-氯代芐氧)乙基)3-甲基黃嘌呤(化合物70)
將1.4ml乙醇和2.8ml 1N Hcl的混合物加入到1.3g(2.26mmol)1，3，7-三取代黃嘌呤(得自步驟a)的14ml乙醇懸浮液中?；旌衔锓序v回流1小時(shí)，減壓濃縮，閃式硅膠柱層析純化，以CH2Cl2/甲醇(19/0.5)作洗脫液。
產(chǎn)量0.72g(理論值的95％)；熔點(diǎn)152℃C15H15ClN4O3(MW＝334.7g/mol)；質(zhì)譜336(1％，37Cl，M)；334(2％，35Cl，M)；194(100％)；170(25％)；166(65％)表1式I化合物
藥理學(xué)試驗(yàn)和結(jié)果在C57BL/6小鼠上，在已建立的內(nèi)毒素(LPS)誘導(dǎo)致死性休克模型中，通過死亡率降低方法說明式I化合物的抗休克作用。
為進(jìn)進(jìn)行此項(xiàng)實(shí)驗(yàn)，將10ng來自烏流產(chǎn)沙門菌的LPS和7.5mg半乳糖胺的0.2ml磷酸鹽緩沖液，生理鹽水溶液組成的混合物通過靜脈注射給予每只動(dòng)物，按常規(guī)將在6-9小時(shí)內(nèi)致動(dòng)物死亡。在給予LPS刺激之前12時(shí)，經(jīng)腹膜內(nèi)途徑給予受試制劑，劑量為100mg/kg。對(duì)照組的動(dòng)物(n＝10)則給予純的0.9％生理鹽水作為安慰劑。為了評(píng)價(jià)制劑的作用，在給予LPS48小時(shí)后，測(cè)定治療組(n＝10)的動(dòng)物死亡數(shù)，由此，相地于對(duì)照組的死亡情況可以獲得死亡的百分抑制數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果列于表3。
表3 LPS誘導(dǎo)的小鼠死亡率的抑制
在廣泛的藥理學(xué)篩選中式I化合物也可顯示出以持續(xù)方式抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)中與局部缺血有關(guān)的細(xì)胞死亡，因此它們也適合用作以下疾病的治療和預(yù)防，如腦血管疾病，如中風(fēng)；短暫的缺血發(fā)作(TIA)；多梗塞癡呆，血管和退化的(Alzheimer)組成部分的混合型癡呆；脊髓損傷；由于頭部受傷引起的腦損傷；以及心動(dòng)停止后的神經(jīng)原損傷，(新生期)窒息及復(fù)活以及在供應(yīng)腦部的主動(dòng)脈區(qū)域的血管外科手術(shù)(例如分流手術(shù))。
可以很有說服力地去證明式I的茶堿衍生物具有神經(jīng)原保護(hù)作用，特別是在沙土鼠的暫時(shí)性普遍缺血模型中。這一發(fā)現(xiàn)對(duì)于茶堿本身而言，也同樣令人驚奇，在具有可比性的實(shí)驗(yàn)條件下，無論是在沙土鼠體內(nèi)(J.Cereb.Blood Flow Metab.1987，7/174-81)還是在大鼠體內(nèi)(J.Cereb.Blood Flow Metab1994，14/1166-173)均無抑制局部缺血神經(jīng)細(xì)胞損傷的作用，相反卻更能增加該作用。
上述實(shí)驗(yàn)可依照《德國動(dòng)物保護(hù)條例》(German AnimalProtection Act)來進(jìn)行。將30只體重在60-70g之間的雄性蒙古沙土鼠，隨機(jī)分成兩組，每組有15只動(dòng)物。在局部缺血后30分鐘經(jīng)腹膜內(nèi)注射給予第一組動(dòng)物相關(guān)的受試物質(zhì)。與此同時(shí)，作為對(duì)照組的第二組動(dòng)物僅給予相同體積的載體物質(zhì)。為了引起暫時(shí)性的前腦局部缺血，將動(dòng)物以仰臥的體位固定于加熱操作臺(tái)上，小心地將兩根通常的頸動(dòng)脈暴露出來，并借肋于微觀動(dòng)脈瘤小鉗閉合3分鐘。在3分鐘局部缺血期發(fā)生7天后，在鹵代烴麻醉下對(duì)動(dòng)物進(jìn)行斬首處理，小心快速地取出腦部，首先將其浸入Carnoy氏溶液(乙醇/氯仿/乙酸＝6/3/1)中，然后將其嵌入石蠟中。隨后，通過海馬的4-6μm厚的冠狀部分大約在前囟的高度被制備出來，并用蘇木精和曙紅進(jìn)行染色。此后，在半定量病理組織學(xué)記分的(0＝無，1＝輕微；2＝中度嚴(yán)重；3＝嚴(yán)重，4＝完全壞死)盲實(shí)驗(yàn)過程中，通過光顯微鏡測(cè)定海馬CA1區(qū)域內(nèi)錐體細(xì)胞嗜曙紅性壞死的程度。
由于神經(jīng)保護(hù)作用的評(píng)價(jià)結(jié)果是將藥劑組的平均病理組織學(xué)記分與對(duì)照組的平均病理組織學(xué)記分相比較而得的百分率變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果編列于表4。
表4對(duì)蒙古沙土鼠局部缺血神經(jīng)細(xì)胞損傷的抑制
權(quán)利要求
1.至少一種式I化合物，其光學(xué)立體異構(gòu)體和生理耐受鹽用于制備用于治療和/或預(yù)防休克的藥物，
其中R1是a)直鏈或支鏈的(C1-C5)-烷基，b)(C1-C2)-烷氧基-(C1-C3)-烷基或c)苯基或苯基-(C1-C2)-烷基，其中苯基是未取代的或每一個(gè)苯基被一或二個(gè)鹵素原子所取代，A是非支鏈或支鏈的(C1-C4)-亞烷基橋，且R2是a)直鏈或支鏈的(C1-C5)-烷基，b)(C3-C6)-環(huán)烷基，c)(C4-C8)-環(huán)烷基烷基，d)苯基，e)苯基-(C1-C2)-烷基。
2.權(quán)利要求1中的應(yīng)用，其中采用至少一種權(quán)利要求1中的式I化合物，其中，R1是a)直鏈或支鏈的(C1-C4)-烷基，b)甲氧基甲基c)甲氧基乙基d)苯基e)4-氯苯基f)芐基，或g)4-氯芐基，A是非支鏈或支鏈的(C1-C3)-亞烷基橋，且R2是a)直鏈或支鏈的(C1-C4)-烷基，b)環(huán)丙基，c)環(huán)丙基甲基，d)苯基，或e)芐基。
3.權(quán)利要求1或2中的應(yīng)用，其中采用至少一種權(quán)利要求1中的式I化合物，其中，R1是直鏈或支鏈的(C1-C4)-烷基，A是非支鏈的(C1-C3)-亞烷基橋，且R2是直鏈或支鏈的(C1-C4)-烷基，環(huán)丙基或環(huán)丙基甲基。
4.權(quán)利要求1至3中一或多個(gè)權(quán)利要求中的應(yīng)用，其用于治療和預(yù)防全身性炎癥反應(yīng)綜合癥，膿毒癥，膿毒綜合癥，敗血病性休克，多種器官衰竭，急性呼吸困難綜合癥，出血性和外傷性休克，以及燒傷性和脫水性休克，和在再循環(huán)綜合癥和體外循環(huán)中的休克樣并發(fā)癥。
5.權(quán)利要求1至4中一或多個(gè)權(quán)利要求中的應(yīng)用，其用于制備藥物制劑，該藥物制劑可經(jīng)非腸道途徑，口服，直腸或皮下給藥，或經(jīng)吸入方式給藥。
6.權(quán)利要求5中的應(yīng)用，其中所制備的藥物制劑還含有有效劑量的至少一種選自下列的化合物抗外源和內(nèi)源性毒素(LPS)，單細(xì)胞LPS受體CD14，LPS結(jié)合蛋白LBP的抗體；細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)劑；花生四烯酸代謝抑制劑，凝血和補(bǔ)體鏈鎖抑制劑抗凝劑和血小板凝結(jié)抑制劑；溶解酶釋放和/或生物活性抑制劑；氧基清除劑；重金屬螯合劑；細(xì)胞間粘合抑制劑和抗生素。
7.式I化合物，其任意的立體異構(gòu)體形式和其生理上的耐受鹽，其中，R1是a)直鏈或支鏈的(C1-C5)-烷基，b)(C1-C2)-烷氧基-(C1-C3)-烷基或c)苯基或苯基-(C1-C2)-烷基，其中苯基是未取代的或每一個(gè)苯基被一或二個(gè)鹵素原子所取代，A是非支鏈或支鏈的(C1-C4)-亞烷基橋，且R2是a)直鏈或支鏈的(C1-C5)-烷基，b)(C3-C6)-環(huán)烷基，c)(C4-C8)-環(huán)烷基烷基，d)苯基，e)苯基-(C1-C2)-烷基，在式I化合物中不包括a)R2是正丙基，R1是甲基或乙基且A是亞乙基橋或b)R2是正丙基，R1是甲基且A是亞丙基橋的化合物。
8.權(quán)利要求7中的式I化合物，其中，R1是a)直鏈或支鏈的(C1-C4)-烷基，b)甲氧基甲基c)甲氧基乙基d)苯基e)4-氯苯基f)芐基，或g)4-氯芐基，A是非支鏈的(C1-C3)-亞烷基橋，且R2是a)直鏈或支鏈的(C1-C4)-烷基，b)環(huán)丙基，c)環(huán)丙基甲基，d)苯基，或e)芐基。
9.權(quán)利要求7或8中的式I化合物，其中，R1是直鏈或支鏈的(C1-C4)-烷基，A是非支鏈的(C1-C3)-亞烷基橋，且R2是直鏈或支鏈的(C1-C4)-烷基，環(huán)丙基或環(huán)丙基甲基。
10.制備權(quán)利要求7至9中要求的式I化合物的方法，其包括，a)將式II的3-取代的黃嘌呤或其鹽
其中，R2同式I中定義，與式III試劑在無縮合劑或在堿性縮合劑存在下進(jìn)行反應(yīng)，Ra-X(III)其中Ra是一個(gè)容易還原除去的基團(tuán)或水解除去的芐基，二苯甲基或三苯甲基，它們具有未取代或取代的苯環(huán)，且X是鹵素，較可取的是氯，溴或碘，或是磺酸酯或膦酸酯基團(tuán)，或者，b)將式IV的7-取代的黃嘌呤或其鹽
其中，Ra是帶有未取代或取代的苯基的芐基，與式V試劑在無縮合劑或在堿性縮合劑存在下進(jìn)行反應(yīng)，R2-X(V)其中R2同式I中定義，且X同式III中定義，生成式VI的3，7-二取代的黃嘌呤，
其中，R2同式I中定義且Ra同式III或IV中定義，而后，用式VII的烷基化試劑R1-O-A-X (VII)其中R1和A同式I中定義且X同式III中定義，在無縮合劑或在堿性縮合劑存在下，與式VI化合物或其鹽反應(yīng)，將式VI化合物轉(zhuǎn)化為式VIII的1，3，7-三取代的黃嘌呤
其中R1，A和R2同式I中定義且Ra同式III或IV中定義，最后，從中間體式VIII化合物中除去離去基團(tuán)Ra，得到本發(fā)明的式I化合物，并且任意地將其轉(zhuǎn)化為生理上可耐受的鹽，在需要的時(shí)候可先分離其立體異構(gòu)體。
11.含有治療有效量的至少一個(gè)式I化合物的藥物，該式I化合物是權(quán)利要求7至9中一或多個(gè)權(quán)利要求中的化合物，或是按權(quán)利要求10來制備的。
12.制備權(quán)利要求11中藥物的方法，它包括采用藥學(xué)上可接受的和生理學(xué)上可耐受的賦形劑和添加劑，稀釋劑和/或其它活性化合物或輔助劑，將至少一個(gè)權(quán)利要求7至9中一或多個(gè)權(quán)利要求中的式I化合物制成合適的給藥劑型，
13.式VIII化合物和/或式VIII化合物的立體異構(gòu)體形式
其中，Ra是芐基，且R1，A和R2同權(quán)利要求1中式I中的定義。
全文摘要
式Ⅰ化合物適用作治療休克狀態(tài)的藥物。式Ⅷ化合物是制備式Ⅰ化合物的中間體。
文檔編號(hào)C07D473/04GK1169993SQ9711292
公開日1998年1月14日 申請(qǐng)日期1997年6月4日 優(yōu)先權(quán)日1996年6月7日
發(fā)明者U·格伯特, E·沃爾夫, E·德富巴, U·海尼特, H·安格諾斯多普洛斯, K·魯多爾非, J·J·格洛米 申請(qǐng)人:赫徹斯特股份公司