專利名稱：：糖修飾的細胞抑制劑的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及由于糖修飾而對腫瘤有特異性的細胞抑制劑。適當?shù)拈g隔保證了血清穩(wěn)定性，同時保證了細胞內(nèi)作用。用化學療法治療腫瘤疾病常常伴有嚴重的副作用，這是由于化療對其它組織的增生細胞也有毒性?？茖W家們致力于改進所用活性化合物的選擇性已經(jīng)許多年了。一種常用的方法是前藥的合成，例如，通過改變pH(Tietze等人，如DE-4229903)，或通過酶(如葡糖苷酶；Jacquesy等人，EP-511917；Bosslet等人，EP-595133)，或通過抗體-酶共軛(Bagshawe等人，WO88/07378；Senter等人，US-PS4975278；Bosslet等人，EP-595133)，使前藥在靶組織中或多或少選擇地釋放。除此之外，這些方法的問題是共軛體在其它組織和器官中缺乏穩(wěn)定性，尤其是活性化合物到處分布，這是由于活性化合物在腫瘤組織細胞外釋放造成的。腫瘤細胞表面的明確的植物血凝素模式(Gabius；Onkologie12，(1989)，175)開辟了通過將相應的糖類單元與細胞抑制劑連接特別地選址于腫瘤細胞的主要可能性。但這些觀點受到有類似糖類特性(半乳糖，乳糖，甘露糖，N-乙酰基-葡糖胺，巖藻糖等)的植物血凝素也出現(xiàn)在其它組織中，尤其是在肝中這個事實的限制(Ashwell等人，《生物化學年度綜述)》(Annu.RevBiochem)，46(1982)，531；Stahl等人，《美國國立科學研究院研究進展)》(Proc.NatlAcad.Sci.USA)，74(1977)，1521；Hill等人，《生物化學雜志)》(J.Biol.Chem.)，262(1986)，7433；Jansen等人，《生物化學雜志)》(J.Biol.Chem.)，266(1991)，3343)。如果使用這些未修飾的糖類，則必須期望含有活性化合物的葡糖共軛體在肝和其它富集植物血凝素器官中具有很高的濃度。雜環(huán)胺batracyline(1)對各種腸癌模型表現(xiàn)出良好的抗腫瘤活性(US-PS4757072)。具有良好體外活性和更好的溶解性的(1)的肽共軛體(US-4180343)在動物研究中比batracyline更難以被接受。EP-501250所述的巖藻糖共軛體在肝有相當高的濃度。喹諾酮-a(2)，7-[(3aRS，4RS，7aSR)-4-氨基-1，3，3a，4，7，7a-六氫-異氮茚-2-基]-8-氯-1-環(huán)丙基-6-氟-1，4-二氫-4-氧-3-喹啉羧酸，(2)(喹諾酮-a)除了表現(xiàn)出突出的抗細菌活性外還表現(xiàn)出非常好的抗多種腫瘤細胞系活性(EP-520240，JP-4253973)。然而，它們又面臨毒性很大的問題(例如，基因毒性，骨髓毒性，體內(nèi)高急性毒性等)。通過對新修飾的細胞抑制劑的研究我們驚喜地發(fā)現(xiàn)，它是一類具有下列不同性質(zhì)的新型共軛體糖類與細胞抑制劑(如batracyline，喹諾酮-a)的新型連接方式在血清中穩(wěn)定的葡糖共軛體。其活性不取決于活性化合物的細胞外釋放。其抗多種腫瘤細胞系的體外活性可與其基礎細胞抑制劑媲美。細胞特異性吸收取決于糖類。由于在上述共軛體的糖部分實現(xiàn)了區(qū)域選擇性修飾，使細胞和組織選擇性(特別是肝腫瘤)得到顯著提高。本發(fā)明共軛體在體內(nèi)的承受性比活性化合物和相應的肽共軛體有顯著提高。而且，本發(fā)明共軛體的溶解性比其基礎細胞抑制劑的有顯著提高。本發(fā)明提供了下面通式化合物K-Sp-L-AA1-AA2-C(I)其中K＝未取代的或區(qū)域選擇性修飾的糖基，Sp＝任意取代的亞芳基或亞烷基，其中R＝氯或羥基烷基氨基，通過NH基連接到Sp，AA1是D或L構型的氨基酸基，它可以任意帶有第二個K-SpL-基團，其中，獨立于第一個K-Sp-L-基團，K，Sp和L可以有上述涵義，或是一個直鍵。氨基酸基可以通過α-氨基，或者如果需要，通過側鏈氨基或羥基官能團，也可以通過這兩種官能團與L連接。如果AA1還帶有其它官能團，它們可以脫保護形式或用已知的保護基以保護形式存在。適當?shù)谋Ｗo基有，例如，乙?；┍豸驶?，芐氧羰基，芴基甲氧羰基，叔丁氧羰基，烯丙基，芐基，甲基或叔丁基。AA2是D或L構型的氨基酸基，它可以任意帶有第二個K-SpL-基團，其中，獨立于第一個K-Sp-L-基團，K，Sp和L可以有上述涵義，或是一個直鍵。氨基酸基可以通過α-氨基，或者如果需要，通過側鏈氨基或羥基官能團，也可以通過這兩種官能團與AA1連接。如果AA2還帶有其它官能團，它們可以脫保護形式或用已知的保護基以保護形式存在。適當?shù)谋Ｗo基有，例如，芐氧羰基，乙?；?，烯丙氧羰基，芴基甲氧羰基，叔丁氧羰基，烯丙基，芐基，甲基或叔丁基。C＝細胞抑制基團或細胞抑制劑衍生物基團，它可以另外帶有一個氨基或羥基。C可以是嵌入物，局部異構酶抑制劑，抗代謝物，烷基化劑，小管抑制劑，酪氨酸磷酸激酶抑制劑，蛋白激酶-C-抑制劑，或具有另一個或未知細胞抑制性或細胞毒性機理的活性化合物。C可以是，例如，核苷，endiine抗菌素，喹諾酮-或naphthyridone-羧酸，或細胞毒性肽抗菌素如從dolastatins類得到的。C可以是batracyline，喹諾酮-a，5-氟尿嘧啶，胞嘧啶阿糖苷(arabinoside)，甲氨蝶呤，表鬼臼毒素吡喃葡糖苷(鬼臼亞乙苷)，喜樹堿，道諾霉素，阿霉素，紫杉醇，長春花堿，長春新堿，動力霉素(dynemycin)，刺孢霉素，埃斯波霉素(esperamycin)，槲皮素，蘇拉明，erbstatin，環(huán)磷酰胺，絲裂霉素(mitamycin)C，苯丙氨酸氮芥，順氯氨鉑，博來霉素，星形孢菌素或其它有抗腫瘤作用的活性化合物。結構單元-Sp-L-AA1-AA2-整個代表連接K和C的間隔區(qū)。優(yōu)選的的式(I)化合物是其中K＝具有通式(II)的糖基，其中A＝甲基，羥甲基，羧基及其衍生的酯和酰胺，烷氧基甲基，酰氧基甲基或羧基烷氧基甲基及其衍生的酯和酰胺。A也可以是CH2-B，其中B也可以是通過異頭中心(anomericcentre)連接的通式(II)糖基。R2，R3，R4＝分別或同時一起為H，羥基，烷氧基，羧基烷氧基及其衍生的酯和酰胺，羥基烷氧基，氨基烷氧基，酰氧基，羧基烷基羰氧基，硫酸根，磷酸根，鹵素或在同一結構中被修飾并通過異頭中心連接的另外的糖基(II)。另外，R2還可以是氨基或酰氨基。R2，R3，R4其中的兩個還可以一起代表一個環(huán)氧基。糖結構單元的異頭中心的立體化學結構可以是α或β。葡糖，甘露糖，半乳糖，古洛糖，鼠李糖或巖藻糖構型可以由其它中心的立體化學結構產(chǎn)生。Sp＝被K和L在鄰-，間-或?qū)ξ恍揎?，而且還可以帶有1-4個取代基的亞芳基，這些取代基可以彼此不同或相同，可以是H，甲基，甲氧基，羥基，羧基，甲氧羰基，氰基，硝基，鹵素，磺酰基或磺酰胺；Sp還可以是直鏈或支鏈亞烷基。其中R＝氯或羥基烷基氨基，AA1是D或L構型的氨基酸基，它可以任意帶有第二個K-Sp-L-基團，其中獨立于第一個K-Sp-L-基團的K，Sp和L可以有上述涵義，或是一個直鍵。氨基酸基可以通過α-氨基，或者如果適當，通過側鏈氨基或羥基官能團，也可以通過這兩種官能團與L連接。如果AA1還帶有其它官能團，它們可以脫保護形式或用已知的保護基以保護形式存在。適當?shù)谋Ｗo基有，例如，乙?；?，烯丙氧羰基，芐氧羰基，芴基甲氧羰基，叔丁氧羰基，烯丙基，芐基，甲基或叔丁基。AA2是D或L構型的氨基酸基，它可以任意帶有第二個K-Sp-L-基團，其中獨立于第一個K-Sp-L-基團的K，Sp和L可以有上述涵義，或是一個直鍵。氨基酸基可以通過α-氨基，或者如果適當，通過側鏈氨基或羥基官能團，也可以通過這兩種官能團與AA1連接。如果AA2還帶有其它官能團，它們可以脫保護形式或用已知的保護基以保護形式存在。適當?shù)谋Ｗo基有，例如，芐氧羰基，烯丙氧羰基，乙?；袒籽豸驶?，叔丁氧羰基，烯丙基，芐基，甲基或叔丁基。C可以是，例如，核苷，endiine抗菌素，或細胞毒性肽抗菌素如從dolastatms類得到的，或下面定義的喹諾酮-或naphthyridone-羧酸殘基。C可以是，例如，batracyline，5-氟尿嘧啶，胞嘧啶阿糖苷，甲氨蝶呤，鬼臼亞乙苷，喜樹堿，道諾霉素，阿霉素，紫杉醇，長春花堿，長春新堿，動力霉素，刺孢霉素，埃斯波霉素，槲皮素，蘇拉明，erbstatin，環(huán)磷酰胺，絲裂霉素C，苯丙氨酸氮芥，順氯氨鉑，博來霉素，星形孢菌素或其它有抗腫瘤活性的活性化合物。該細胞抑制劑通過氨基或羥基官能團與AA2連接。特別優(yōu)選的的式(I)化合物是其中K＝具有通式(II)的糖基，其中A＝甲基，羥甲基，羧基和甲氧羰基甲基和CH2-B，其中B也可以是通過異頭中心連接的通式(II)糖基。R2，R3，R4＝分別或同時一起為H，羥基，C1-C3烷氧基，羧基-C1-C3-烷氧基及其衍生的C1-C3烷基酯和酰胺，羥基烷氧基，酰氧基，羧基-(C1-C3烷基)-羰氧基，硫酸根，或通過異頭中心連接到R3或R4位置的其它糖基。R2，R3或R4其中的兩個還可以一起代表一個環(huán)氧基。異頭中心的立體化學結構可以是α或β。D-甘露糖，D-半乳糖，L-古洛糖，D-葡糖，L-鼠李糖或L-巖藻糖構型可以從其它中心的立體化學結構產(chǎn)生。Sp＝被K和L在鄰-或?qū)ξ恍揎?，而且，除了可以帶有氫原子以外還可以帶有其它取代基的亞芳基，該取代基可以是甲基，硝基或氯；其中R＝氯或羥基烷基氨基，AA1是D或L構型的氨基酸基如賴氨酸，丙氨酸，谷氨酸，甘氨酸，烏氨酸，酪氨酸，纈氨酸或絲氨酸，或是一個直鍵。氨基酸基可以通過α-氨基，或者如果適當，通過側鏈氨基官能團，也可以通過這兩種官能團與L連接，并且可以任意帶有另一個與第一個相同或不同的K-Sp-L-基團。如果AA1還帶有其它官能團，它們優(yōu)選是脫保護形式的。AA2是D或L構型的氨基酸基如丙氨酸，賴氨酸，甘氨酸，絲氨酸，鳥氨酸或二氨基丙酸，或是一個直鍵。氨基酸基可以通過α-氨基，或者如果適當，通過側鏈氨基官能團，也可以通過這兩種官能團與AA1連接，并且可以任意帶有另一個與第一個相同或不同的K-Sp-L-基團。如果AA2還帶有其它官能團，它們優(yōu)選是脫保護形式的。C可以是batracyline，甲氨蝶呤，喹諾酮-a，鬼臼亞乙苷，苯丙氨酸氮芥，紫杉醇，喜樹堿，道諾霉素或阿霉素，或下面定義的喹諾酮-或naphthyridone-羧酸。該細胞生長抑制體通過氨基或羥基官能團與AA2連接。用作離析物的喹諾酮-或naphthyridone-羧酸結構單元C可以用通式(III)結構表示，T-Q(III)其中Q代表下列基團，其中Ra代表有1-4個碳原子并且任意被鹵素或羥基一-或二-取代的烷基，乙烯基，有3-6個碳原子并且被1或2個氟原子任意取代的環(huán)烷基，雙環(huán)[1.1.1]戊-1-基，1，1-二甲基炔丙基，3-環(huán)氧丙基(oxetanyl)，甲氧基，氨基，甲氨基，二甲氨基，或任意被鹵素，氨基或羥基一-或二-取代的苯基，或與Re一起形成在Re定義中所述的橋，Rb代表羥基，有1-3個碳原子的烷氧基或硝基甲基，Rc代表氫或甲基，或者與Rg一起形成在Rg定義中所述的橋，Rd代表氫，CH3，CH2F或＝CH2，X1代表氫，鹵素或硝基，X2代表氫，鹵素，氨基，羥基，甲氧基，巰基，甲基，鹵代甲基或乙烯基，Y代表N或C-Re，其中Re代表氫，鹵素，CF3，OCH3，OCHF2，CH3，CN，CH＝CH2或C＝CH，或者與Ra一起形成有下列結構的橋-*O-CH2-CH-CH3，-*S-CH2-CH2-，-*S-CH2-CH-CH3，-*CH2-CH2-CH-CH3或-*O-CH2-N-Rf，其中帶*的原子與Y的碳原子連接，其中Rf代表氫，甲基或甲酰基，及D代表N或C-Rg，其中Rg代表氫，鹵素，CF3，OCH3，OCHF2或CH3，或者與Rc一起形成有下列結構的橋-*O-CH2-，-*NH-CH2-，-*N(CH3)-CH2-，-*N(C2H5)-CH2-，-*N(C3H5)-CH2-或-*S-CH2-，其中帶*的原子與D的碳原子連接，n代表1，2或3，及T代表下列基團其中Rh代表其中Rk代表氫或甲基，及Ri代表氫，C1-C3烷基或環(huán)丙基。作為細胞抑制體C的特別優(yōu)選的式(III)化合物是其中Q代表下列基團，其中Ra代表有2-4個碳原子并且任意被1個氟原子取代的烷基，任意被1個氟原子取代的環(huán)丙基，或任意被氟一-或二-取代的苯基，Rb代表羥基，或有1-2個碳原子的烷氧基，Rc代表氫或甲基，或者與Rg一起形成在Rg定義中所述的橋，X1代表氟，X2代表氫或氨基，Y代表N或C-Re，其中Re代表氫，氟，氯，CF3，OCH3，OCHF2或C≡CH，或者與Ra一起形成有下列結構的橋-*O-CH2-CH-CH3或-*O-CH2-N-Rr，其中帶*的原子與Y的碳原子連接，其中Rf代表甲基，及D代表N或C-Rg，其中Rg代表氫，氟，氯，CF3，OCH3或CH3，或者與Re一起形成有下列結構的橋-*O-CH2-，-*NH-CH2-，-*N(CH3)-CH2-或-*S-CH2-，其中帶*的原子與D的碳原子連接，及T代表下列基團其中Rh代表其中Rk代表氫或甲基，及Ri代表氫或甲基。與喜樹堿或其衍生物產(chǎn)生的葡糖共軛體可能是特別優(yōu)選的。其中K，Sp和L代表氫且C代表喜樹堿的通式I化合物尤為重要。這是些新物質(zhì)，并且可以作為中間產(chǎn)物進行反應進而得到通式I的其它衍生物，尤其是作為細胞抑制劑它們還表現(xiàn)出令人感興趣的藥物活性譜。本發(fā)明化合物可以是立體異構體形式如對映體或非對映體形式，或者是它們的混合物如外消旋形式。本發(fā)明還涉及純立體異構體和它們的混合物形式。如果需要，可以用已知方法如色譜法或結晶法將立體異構體混合物分離成單一的立體異構體構型。本發(fā)明化合物也可以是鹽的形式。與有機或無機堿或酸形成的鹽和內(nèi)鹽全部概括如下?？杉尤氲乃岚?，例如，優(yōu)選氫鹵酸如鹽酸和氫溴酸，特別是鹽酸，以及磷酸，硝酸，硫酸，單-和雙-官能團羧酸及羥基羧酸如乙酸，馬來酸，丙二酸，草酸，葡糖酸，琥珀酸，甲酸，酒石酸，檸檬酸，水楊酸，山梨酸和乳酸，以及磺酸如對甲笨磺酸，1，5-萘-二磺酸或樟腦磺酸。生理上可接受的鹽可以是有游離羧基的本發(fā)明化合物的金屬鹽或銨鹽。特別優(yōu)選的鹽有，例如，鈉，鉀，鎂或鈣鹽，以及從氨或有機胺衍生的銨鹽，例如，乙胺，二-或三乙胺，二-或三乙醇胺，二環(huán)己胺，二甲氨基乙醇，精氨酸，賴氨酸，1，2-乙二胺或苯乙胺。實施例系列A生物試驗實施例A.1生長抑制試驗以確定batracyline和喹諾酮-a的葡糖共軛體的細胞毒性將人體結腸細胞系SW480和HT29(ATCC號CCL228和HBT-38)和鼠黑瘤細胞系B16F10在Roux盤中，在加入10％FCS的RPMI1640培養(yǎng)基中培養(yǎng)。然后將培養(yǎng)物用胰蛋白酶作用，并將其溶解于加有10％FCS的RPMI中使細胞濃度達到50,000細胞/mL。以100μL細胞懸浮液/孔加到一個96孔微孔板內(nèi)，并在一個37℃的充有CO2的培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)1天。再加入100μLRPMI培養(yǎng)基和1μL帶有試驗物質(zhì)的二甲亞砜。3天和6天后檢查生長情況。在每個孔中加入40μL初始濃度為5mg/mL的MTT(3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基四唑溴化物)水溶液。將該微孔板在37℃的充有CO2的培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)5小時。然后吸出培養(yǎng)基并加入100μL異丙醇/孔。與100μLH2O一起搖動30分鐘后，用TitertekMultiskanMCC/340(Flow)在540nm測量消光。batracyline的葡糖共軛體的細胞毒性作用示于表1a，用IC50表示每種情況的SW480和HT29細胞系。喹諾酮-a的葡糖共軛體的對SW480，HT29和B16F10細胞系的IC50值匯總于表1b。表1a表1a(續(xù))表1a-(續(xù))</tables>表1a-(續(xù))</tables>表1b表1b-(續(xù))</tables>根據(jù)實施例系列5，6和11，生物活性對糖類的依賴性由無糖對照化合物N-[Nα，Nε-二-(4-羥基苯基氨基-硫代羰基)-賴氨酰]-batracyline和N-[Nα，Nε-二-(4-羥基苯基氨基-硫代羰基)-賴氨酰-D-丙氨酰]-batracyline和N-[Nα，Nε-二-(4-羥基苯基氨基-硫代羰基)-D-賴氨酰]-喹諾酮-a(IC50＞250)的無活性另外加以說明。實施例A.2葡糖共軛體的可裂解性的體外研究人血的裂解動力學將1.225mL人血與1.25mLPBS和25μL底物儲藏溶液(1mg/mL3％二甲亞砜的PBS溶液)一起在37℃培養(yǎng)。1小時和24小時后分別取出1mL樣品，并與1mL乙醇混合，在4℃放置20分鐘。離心(3500rpm)5分鐘后取出100μL上清液進行HPLC分析。細胞中的裂解動力學將2.25mLPBS與225μL細胞懸浮液(30mg/mL)和25μL底物儲藏溶液(1mg/mL3％二甲亞砜的PBS溶液)一起在37℃培養(yǎng)。1小時和24小時后分別取出1mL樣品，并與1mL乙醇混合，在4℃放置20分鐘。離心(3500rpm)5分鐘后取出100μL上清液進行HPLC分析。HPLC條件儀器Watersunit柱BischoffHypersilOCSRP185μm250×4mm洗脫劑A10mM磷酸鉀緩沖液，pH4.5B80％乙腈/20％水流量1mL/分鐘波長372nm梯度0分鐘10％B10分鐘60％B15分鐘60％B18分鐘10％B20分鐘60％B對喹諾酮-a共軛體的洗脫劑A100％甲醇B10mM磷酸鉀緩沖液，pH2.2；10mM庚磺酸表2a*裂解產(chǎn)物是N-[D-丙氨酰]-batracyline表2b實施例A.3器官分布研究全部實驗都采用“藥物開發(fā)實驗室，OncotestGmbH”，F(xiàn)reiburg，H.H.Fiebig教授飼養(yǎng)的無胸腺的裸鼠(品系NMRInu/nu)。將動物放在層流條件下的Macrolon籠中。將預先在裸鼠身上生長了幾代的細胞系SW480組織用作腫瘤物質(zhì)。按每個動物的兩塊腫瘤組織同時移植到6-8周的裸鼠的兩肋。飼養(yǎng)動物26-27天直到隨機取樣。腫瘤的平均大小為500mg，相當于直徑10mm的腫瘤。藥物動力學本身處理如下將要研究的物質(zhì)注射到裸鼠體內(nèi)，然后將其放回籠中等到1/2小時和4小時后取樣。從所取的鼠樣身上抽取血樣。為達到這一目的要用麻醉醚麻醉老鼠(持續(xù)1/2-1分鐘)。注射后0.5小時和4小時后打開老鼠的腹腔，然后在麻醉條件下通過尾部Vena腔靜脈給鼠放血1-2分鐘，最后，折斷其脖頸將其致死。結果，中央循環(huán)系統(tǒng)停止工作，并壓入器官灌注液。然后，暴露出各器官并除去，手術進行約5分鐘。然后立即稱重各器官樣品和身體的其余部分，并將它們冷凍在液氮中。物質(zhì)“共軛體1”以300mg/kg體重的量進行腹膜內(nèi)給藥，而物質(zhì)“共軛體2”以100mg/kg體重的量靜脈內(nèi)注射到尾部靜脈。每種物質(zhì)和每次使用5只動物。共軛體1和共軛體2的分布情況分別匯總于表3和4。A.校正系列將溶解于乙醇/水(1∶1，v/v)的5，10，50，100和200μg物質(zhì)加到1g牛肝中。將樣品與1g海沙和2.5mL冷乙醇/水(1∶1，v/v)一起在一個研缽中研磨，并以3500rpm離心2分鐘。除去上清液后再次將剩余物與2.5mL乙醇/水混合，離心并合并上清液。對于每種情況，各取100μL樣品進行HPLC分析。HPLC條件儀器Watersunit柱BischoffHypersilOCSRP185μm250×4mm洗脫劑A80％乙腈/20％水B10mM磷酸鉀緩沖液，pH4.5梯度0分鐘90％B10分鐘40％B15分鐘40％B18分鐘90％B20分鐘90％B流量1mL/分鐘波長372nmB.器官的處理器官的處理類似于A，整個器官用2.5mL乙醇/水破碎，然后提取。C.血液的處理將一定量的血樣與2mL乙醇/水(1∶1，v/v)混合，并以3500rpm離心2分鐘。倒掉上清液，并在剩余物中加入2mL乙醇/水(1∶1，v/v)，離心并合并上清液。對于每種情況，各取100μL樣品進行HPLC分析，HPLC條件同A。共軛體1(EP501250-A1)共軛體2(實施例39)表3</tables>表4實施例A.4batracyline葡糖共軛體(單獨給藥)的急性毒性的測定batracyline衍生物的急性毒性用nu/nu裸鼠測定。以每kg鼠重量400mg的濃度給老鼠靜脈內(nèi)注射batracyline水溶液，腹膜內(nèi)注射該物質(zhì)的二甲亞砜溶液。根據(jù)21天后動物體重的減少和動物存活數(shù)計算老鼠對藥物可以承受的單次劑量(individualdose)。老鼠對藥物可以承受的單次劑量見表5。對于物質(zhì)3.16，3.33，3.9，6.12，614，6.2，6.81和8.2，老鼠每kg體重可以承受200mg以上的劑量。對于物質(zhì)3.33，6.12，6.14，6.2和6.81，即便使用400mg/kg以上的單次劑量也無法檢測到老鼠有急性毒性反應。相比之下，使用25-50mg/kg單次劑量的無糖賴氨酰-D-丙氨酰-batracyline(2.13)就已經(jīng)有明顯的毒性反應了。表5老鼠所能承受的batracyline衍生物和喹諾酮-a衍生物的最大單次劑量</tables>實施例A.5幾次給藥之后的急性毒性的測定在第1-4天和第7-10天，或者在第1，5和9天，分別以400，200和100mg/kg/天的劑量，給老鼠部分靜脈內(nèi)注射及部分腹膜內(nèi)注射藥物。根據(jù)第21天動物體重的減少和動物存活數(shù)進行估算。在實驗中每種藥物和每種劑量各使用5只老鼠。結果匯總于表6。表6對于多次給藥老鼠所能承受的最大劑量</tables>實施例A.6喹諾酮-a葡糖共軛體的haematopoietic活性與它們的基礎活性化合物的比較原料和方法體外從鼠的股骨沖洗出骨髓細胞。將105個細胞與重組鼠GM-CSF(Genzyme；母細胞群形式)和藥物(10-4-100μg/mL)在McCoy5A培養(yǎng)基(0.3％瓊脂)和37℃和7％CO2條件下培養(yǎng)。7天后數(shù)一數(shù)細胞群(＜50個細胞)和簇(17-50個細胞)的個數(shù)。體內(nèi)分別以1，3，10或30mg/kg的劑量給鼠皮下使用試驗化合物。在各時間點(3，24，48，72p.inj(小時/每次注射后))切下股骨并分離出骨髓細胞。將2×105個細胞與上述GM-CSF一起按上述方法培養(yǎng)。7天后數(shù)一數(shù)細胞群和簇的個數(shù)。結果如表7所示，對葡糖共軛體的研究表明它對骨髓母細胞增生有抑制作用，相比喹諾酮-a降低了105-103倍。在體內(nèi)試驗中還發(fā)現(xiàn)，相比喹諾酮-a將化合物12.3加到30mg/kg的用量也沒有觀察到對母細胞增生有抑制作用。用3mg/kg喹諾酮-a已經(jīng)大大抑制了母細胞增生(見圖1)。表7CSF誘發(fā)鼠骨髓母細胞增生</tables>實施例A.7喹諾酮-a共軛體的抗腫瘤活性喹諾酮-a葡糖共軛體的體外活性是根據(jù)Hamburger和Salmon(科學Science197461-463)所述方法在雙層軟瓊脂培養(yǎng)系統(tǒng)中用人體腫瘤異種移植測定的。實體腫瘤最初生長在無胸腺裸鼠(NMRInu/nu)體內(nèi)，手術分離并機械粉碎后，在0.05％膠原酶，0.07％DNAse和0.1％透明質(zhì)酸酶的RPMI酶混合物中在37℃培養(yǎng)30分鐘便可得到單獨的細胞。將細胞洗滌兩次，然后用200μm和20μm目的篩子篩過。所用培養(yǎng)方法如下底層由0.2mLIscoves’sModifiedDulbeccosMedium和20％胎牛血清及0.7％瓊脂構成。在24孔多孔板中將含有40,000-200,000個細胞的0.2mL該培養(yǎng)基和0.4％瓊脂用于該基層，并將抑細胞生長抑制劑加到0.2mL培養(yǎng)基中。將培養(yǎng)物在37℃和7％CO2氣氛中培養(yǎng)6-15天。在反轉顯微鏡下數(shù)數(shù)已經(jīng)生長的菌落的個數(shù)，在評估進行前24小時用氯化四唑鎓染色劑給存活的菌落染色?；钚曰衔锏男Ч么婊罹湎鄬τ谖刺幚淼陌迳洗婊畹木鋽?shù)量之比的百分數(shù)表示(T/C＝處理過的菌落數(shù)量×100/未處理過的對照組的菌落數(shù)量)。如果T/C值≤30％，說明該抑制劑是活性的。該值以μg/mL為單位表示為IC70，列于表8。表8</tables>實施例A.8體內(nèi)試驗方法在第0天給鼠接種5×106B16F10腫瘤細胞。被移植到動物體內(nèi)的腫瘤細胞發(fā)展成實體腹膜腫瘤，然后每天用試驗物質(zhì)或載體對照物治療動物。在對照組50％的動物在第14天到20天之間一般就死亡了。試驗物質(zhì)以在緩沖劑或在含有20％甲醇和20％二甲亞砜的有機溶劑體系中以0.7％氯化鈉溶液中的形式給藥。用載體給藥對動物的存活時間沒有影響。提高治療效果就是延長被治療動物的存活時間。承受化合物的能力用沒有接種腫瘤的動物的平行試驗分析。治療指數(shù)可根據(jù)承受力和延長的存活時間估算。表9存活的百分數(shù)％</tables>表9證明了實施例11.12化合物對接種了B16F10腫瘤的鼠的治療活性。實施例A.9用裸鼠模型對體內(nèi)腫瘤生長的抑制原料在全部研究抑制腫瘤生長的體內(nèi)實驗中均采用無胸腺裸鼠(NMRInu/nu)。選用的大細胞肺癌LXFL529在裸鼠體內(nèi)經(jīng)過一系列過程后得以發(fā)展。人體腫瘤的起源由同功酶和免疫組織化學方法證明。實驗的建立將腫瘤皮下植入6-8周的nu/nu裸鼠的兩肋。不考慮兩倍時間，待腫瘤直徑達到5-7mm馬上開始治療。將這些鼠隨機分成治療組和對照組(每組5只帶有8-10可測腫瘤的鼠)。對照組的各腫瘤全都迅速生長。用滑尺測量腫瘤的兩維尺寸。腫瘤的體積與細胞數(shù)量密切相關，因此體積被用于所有測算。根據(jù)等式“體積＝長度×寬度×寬度/2”([a×b2]/2，a和b代表成直角的兩個直徑)”計算體積。用第X天的腫瘤尺寸除以第0天(隨機的時間)的腫瘤尺寸來計算各腫瘤的相對腫瘤體積(RTV)的值。RVT平均值被用于進一步的測算。腫瘤體積增長的抑制(試驗組與對照組腫瘤體積之比，T/C，用百分數(shù)表示)是推斷的測量值。治療根據(jù)每種情況的周期性計劃在第1，5和9天進行所有化合物的給藥。而且，所有化合物用水作為溶劑進行腹膜內(nèi)給藥。表10a)最大承受劑量(MTD)b)第19天在本試驗中，實施例系列18的喜樹堿化合物有極好的可比較性或更好的作用，因此被用作標準。實施例系列B合成實施例實施例1.1對氨基苯基2-O-甲基-β-L-巖藻糖苷1.1.a)對硝基苯基3，4-O-異亞丙基-β-L-巖藻糖苷在0℃間隔30分鐘先后將65mg對甲苯磺酸和5×100μL2-甲氧基丙烯加到對硝基苯基β-L-巖藻糖苷(750mg，2.63mmol)的40mL二甲基甲酰胺/二噁烷(1∶2)溶液中。混合物在20℃攪拌16小時后將其濃縮，剩余物經(jīng)快速色譜(二氯甲烷/甲醇99∶1)提純。濃縮后得到710mg(83％)白色固體。1.1.b)對硝基苯基2-O-甲基-3，4-O-異亞丙基-β-L-巖藻糖苷先將100mg(0.307mmol)實施例1.1.a)得到的化合物加到含96μL甲基碘的10mL四氫呋喃中，然后分批加入11mg氫化鈉(80％濃度)?；旌衔镌?0℃攪拌3小時后加入96μl甲基碘和11mg氫化鈉?；旌衔镌僭?0℃攪拌16小時后加入一點水和100mL二氯甲烷。用水搖蕩兩次進行萃取，濃縮有機相，然后用柱色譜(石油醚/乙酸乙酯8∶1)提純產(chǎn)物，得到78mg(75％)目標產(chǎn)物。1.1)對氨基苯基2-O-甲基-β-L-巖藻糖苷將78mg(0.23mmol)對硝基苯基2-O-甲基-3，4-O-異亞丙基-β-L-巖藻糖苷在20℃在3mL80％濃乙酸中攪拌16小時。真空除去乙酸后在混合物中加入10mL甲醇。加入二氧化鉑后在稍微加壓的氫氣中進行氫化。用Celite(硅藻土)濾出懸浮液，用甲醇洗滌濾餅上的物質(zhì)。經(jīng)色譜(二氯甲烷/甲醇97.5∶2.5)提純后得到77mg(80％)目標產(chǎn)物。[TLC二氯甲烷/甲醇9∶1Rf＝0.42]實施例1.2對氨基苯基3-O-甲基-β-L-巖藻糖苷1.2.a)對硝基苯基3-O-甲基-β-L-巖藻糖苷將784g(31.5mmol)二丁基氧化錫加到6g(21mmol)對硝基苯基β-L-巖藻糖苷的300mL無水甲醇中，并將混合物加熱回流2小時。濃縮后干燥剩余物，然后將其溶于300mL二甲基甲酰胺。加入15.7mL甲基碘后將混合物在70℃攪拌40小時。真空除去溶劑，將剩余物溶于300mL二氯甲烷。濾掉懸浮物，再次濃縮留下的溶液，并將剩余物進行快速色譜(二氯甲烷/甲醇99∶1)提純。濃縮后得到381.5mg(61％)目標產(chǎn)物，1.2)對氨基苯基3-O-甲基-β-L-巖藻糖苷將3.81g(12.73mmol)對硝基苯基3-O-甲基-β-L-巖藻糖苷用類似實施例1.1的方法氫化。得到3g(88％)目標產(chǎn)物。[TLC二氯甲烷/甲醇9∶1Rf＝0.53]實施例1.3對氨基苯基3-O-甲基-α-L-巖藻糖苷用類似實施例1.2的方法從對硝基苯基α-L-巖藻糖苷開始制備。兩個階段的總產(chǎn)率為63％。[TLC二氯甲烷/甲醇9∶1Rf＝0.39]實施例1.4對氨基苯基4-O-甲基-β-L-巖藻糖苷1.4.a)對硝基苯基2-O-芐基-4-O-乙?；?β-L-巖藻糖苷將31mg對甲苯磺酸和1134mg(7mmol)原乙酸三乙酯加到1g(3.5mmol)對硝基苯基β-L-巖藻糖苷的100mL無水四氫呋喃中，混合物在20℃攪拌15分鐘后真空蒸餾除去溶劑。將剩余物溶于50mL四氫呋喃和3mL二甲基甲酰胺，然后加入4165μL芐基溴和210mg氫化鈉(60％濃度)?；旌衔镌?0℃攪拌1小時后加入10mL80％濃度的乙酸。濃縮混合物，剩余物經(jīng)快速色譜(二氯甲烷/甲醇99∶1)提純。濃縮并干燥后得到1236mg(85％)目標產(chǎn)物。1.4.b)對硝基苯基2-O-芐基-3-O-乙?；?4-O-甲基-β-L-巖藻糖苷將1000mg(2.39mmol)對硝基苯基2-O)-芐基-4-O-乙?；?β-L-巖藻糖苷溶解在60mL苯中。加入2988μL甲基碘和1109mg氧化銀后將混合物加熱回流8小時。用快速色譜(二氯甲烷/甲醇99∶1)將產(chǎn)生的混合產(chǎn)物分離成幾部分，其中包括239mg(23％)對硝基苯基2-O-芐基-3-O-乙?；?4-O-甲基-β-L-巖藻糖苷和653mg(63％)異構體對硝基苯基2-O-芐基-3-O-甲基-4-O-乙酰基-β-L-巖藻糖苷，后者為白色固體。1.4)對氨基苯基4-O-甲基-β-L-巖藻糖苷將224mg(0.52mmol)對硝基苯基2-O-芐基-3-O-乙酰基-4-O-甲基-β-L-巖藻糖苷溶解于20mL甲醇，然后加入390μL1N甲醇鈉溶液?；旌衔镌?0℃攪拌16小時后用80％濃乙酸中和，然后濃縮，并將剩余物溶于二氯甲烷。有機相用1N碳酸氫鈉溶液和水洗滌，干燥并濃縮。將剩余物溶于20mL甲醇，用類似實施例1.1的方法在鈀/活性炭上進行氫化。濃縮后將產(chǎn)物溶于水并凍干。分離得到119mg(88％)白色非晶形固體。[TLC二氯甲烷/甲醇9∶1Rf＝0.38]實施例1.5對氨基苯基3-O-正丙基-β-L-巖藻糖苷1.5.a)對硝基苯基2-O-芐基-3-O-正丙基-4-O-乙?；?β-L-巖藻糖苷類似于實施例1.4.b，從化合物1.4.a用丙基碘制備異構體3-和4-丙基化產(chǎn)物，并用色譜分離。以49％產(chǎn)率得到對硝基苯基2-O-芐基-3-O-正丙基-4-O-乙?；?β-L-巖藻糖苷，另外以29％產(chǎn)率得到對硝基苯基2-O-芐基-3-O-乙酰基-4-O-正丙基-β-L-巖藻糖苷。1.5.b)對氨基苯基3-O-正丙基-β-L-巖藻糖苷類似于實施例1.4，從實施例1.5.a)餾分1合成目標產(chǎn)物。產(chǎn)率78％。[TLC二氯甲烷/甲醇9∶1Rf＝0.42]實施例1.6對氨基苯基3-脫氧基-β-L-巖藻糖苷1.6.a)對硝基苯基3，6-二脫氧基-3-氯-4-O-乙酰基-β-L-古洛糖苷將31mg對甲苯磺酸和1134mg(7mmol)原乙酸三乙酯加到1g(3.5mmol)對硝基苯基-β-L-巖藻糖苷的100mL無水四氫呋喃中，混合物在20℃攪拌15分鐘后真空蒸餾除去溶劑。加入100mL鹽酸的二氯甲烷飽和溶液。反應10分鐘后濃縮混合物，產(chǎn)物經(jīng)快速色譜(二氯甲烷/甲醇99∶1)提純，得到793mg(65％)目標產(chǎn)物。[TLC二氯甲烷甲醇97.5∶2.5Rf＝0.36]1.6.b)對硝基苯基3，6-二脫氧基-3-氯-β-L-古洛糖苷將375mg(1.08mmol)對硝基苯基3，6-二脫氧基-3-氯-4-O-乙?；?β-L-巖藻糖苷溶解在25mL甲醇中，并加入10滴1N甲醇鈉溶液。20分鐘后用乙酸酸化混合物并濃縮，剩余物在400mL二氯甲烷和60mL水之間分配。干燥和濃縮有機相，剩余物從二氯甲烷/乙醚沉淀，得到315mg(96％)目標產(chǎn)物。1.6)對氨基苯基3-脫氧基-β-L-巖藻糖苷將315mg(1.04mmol)對硝基苯基3，6-二脫氧基-3-氯-β-L-巖藻糖苷溶解于40mL甲醇，然后加入200mg鈀/活性炭和290μL三乙胺，并在稍微加壓的氫氣中氫化4天。過濾所得懸浮液，洗滌并濃縮，產(chǎn)物經(jīng)快速色譜(二氯甲烷/甲醇97.5∶2.5)提純，得到160mg(65％)脫氧基化合物。[TLC二氯甲烷/甲醇95∶5Rf＝0.18]實施例1.7對氨基苯基3，4-二脫氧基-β-L-巖藻糖苷將400mg(1.16mmol)對硝基苯基3，6-二脫氧基-3-氯-4-O-乙?；?β-L-古洛糖苷(實施例1.6.a)溶解于55mL甲醇，并加入323μL三乙胺，然后并在稍微加壓的氫氣中在鈀/活性炭上(10％)氫化?；旌衔镌?0℃攪拌16小時后用Celite過濾，沖洗濾餅上的物質(zhì)，濃縮濾液，再將剩余物溶于100mL甲醇。加入1.5mL1N甲醇鈉溶液，并將混合物在室溫攪拌16小時。用乙酸中和后濃縮，形成的產(chǎn)物經(jīng)快速色譜(二氯甲烷/甲醇97.5∶2.5)提純。濃縮相應的餾分，并從甲醇/乙醚沉淀，得到120mg(46％)目標化合物[TLC二氯甲烷/甲醇95∶5Rf＝0.31]以及77mg(28％)對氨基苯基3-脫氧基-β-L-巖藻糖苷[TLC二氯甲烷/甲醇95∶5Rf＝0.18]。實施例1.8對氨基苯基3，4-環(huán)氧基-β-L-巖藻糖苷將80mg(0.23mmol)對硝基苯基3，6-二脫氧基-3-氯-4-O-乙?；?β-L-古洛糖苷(實施例1.6.a)溶解于10mL甲醇，并加入345μL甲醇鈉溶液。超聲處理1小時后混合物用80％濃度的乙酸酸化。濃縮后剩余物經(jīng)色譜(二氯甲烷/甲醇99∶1)提純。濃縮有關的餾分后將剩余物溶于甲醇，類似于實施例1.1在鈀/活性炭上進行氫化，得到46mg(75％)目標化合物。FAB-MSm/e＝238＝M+1。實施例1.9對氨基苯基4-脫氧基-β-L-巖藻糖苷用類似于T.Lindhorst和J.Thiem在糖類研究(CarbohydrRes.)209(1991)，119中所述方法，從對硝基苯基-β-L-巖藻糖苷經(jīng)過對硝基苯基2，3-二-O-苯甲?；?4，6-二脫氧基-4-碘-β-L-巖藻糖苷制備標題化合物。[TLC二氯甲烷/甲醇90∶10Rf＝0.3]。實施例1.10對氨基苯基3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖苷1.10.a)對硝基苯基3-O-甲氧羰基甲基-β-L-巖藻糖苷將1g(3.5mmol)對硝基苯基-β-L-巖藻糖苷和1.3g(5.2mmol)二丁基氧化錫在50mL甲醇中加熱回流2小時。濃縮溶液，將剩余物溶于50mL二噁烷，然后加入2mL溴乙酸甲酯和100mg四丁基碘化銨，并將混合物加熱回流16小時。蒸發(fā)掉溶劑，產(chǎn)物經(jīng)快速色譜(二氯甲烷/甲醇99∶1)提純。濃縮相應的餾分后剩余物從甲醇/乙醚重新沉淀，得到455mg(37％)目標化合物。1.10)對氨基苯基3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖苷將282mg(0.79mmol)對硝基苯基3-甲氧羰基甲基-β-L-巖藻糖苷溶解于20mL甲醇，然后加入440μL2N氫氧化鋰溶液?；旌衔镌?0℃攪拌2小時后用酸性離子交換劑SC108酸化至pH3，然后過濾。在稍微加壓的氫氣中氫化1.5小時，然后除去催化劑，并用甲醇洗滌。濃縮混合物，將剩余物溶于水。凍干后以86％產(chǎn)率得到目標產(chǎn)物(212mg)。[TLC乙腈/水/乙酸5∶1∶0.2Rf＝0.24]實施例1.11對氨基苯基3-O-甲氧羰基甲基-β-L-巖藻糖苷將250mg(0.7mmol)對硝基苯基-3-甲氧羰基甲基-β-L-巖藻糖苷(實施例1.10.a)溶解于20mL甲醇，然后在稍微加壓的氫氣中在鈀/活性炭上氫化1.5小時。除去催化劑，并用甲醇洗滌。濃縮混合物，將剩余物溶于水。凍干后得到195mg目標產(chǎn)物(85％)。[TLC二氯甲烷/甲醇9∶1Rf＝0.43；FAB-MSm/e＝328＝M+1]實施例1.12對氨基苯基3-O-羥乙基-β-L-巖藻糖苷1.12.a)對硝基苯基3-O-羥乙基-β-L-巖藻糖苷將1000mg(2.8mmol)對硝基苯基3-甲氧羰基甲基-β-L-巖藻糖苷溶解于160mL四氫呋喃和40mL水的混合物，然后加入53mg硼氫化鈉。10分鐘后蒸發(fā)掉溶劑，剩余物經(jīng)快速色譜(二氯甲烷/甲醇95∶5)提純。濃縮相應的餾分后將剩余物溶于水中，凍干混合物，得到362mg(40％)目標產(chǎn)物。1.12)對氨基苯基3-O-羥乙基-β-L-巖藻糖苷用類似實施例1.1的方法氫化362mg實施例1.12.a)得到的化合物后得到270mg(82％)目標產(chǎn)物。[TLC乙腈/水10∶1Rf＝0.43]實施例1.13對氨基苯基2-O-羧甲基-β-L-巖藻糖苷1.13.a)對硝基苯基2-O-甲氧羰基甲基-β-L-巖藻糖苷將250mg(0.88mmol)對硝基苯基β-L-巖藻糖苷溶解于25mL無水四氫呋喃和3mL二甲基甲酰胺的混合物，然后加入80mg(2.64mmol)80％濃度的氫化鈉。將混合物在20℃攪拌10分鐘后加入35μL溴乙酸芐酯。以后再每間隔10分鐘加入35μL溴乙酸芐酯，共加三次。連續(xù)攪拌混合物30分鐘，然后用甲醇淬滅。10分鐘后用5mL80％濃度的乙酸酸化。濃縮混合物，接著用二氯甲烷蒸餾剩余物。采用快速色譜提純，先用流動相系統(tǒng)二氯甲烷/甲醇/冰醋酸90∶10∶1洗脫，然后用比例為80∶20∶2的同一系統(tǒng)洗脫。濃縮相應的餾分后用乙醚溶解剩余物，從先前的洗脫液中得到157mg(42％)目標化合物。[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.65]。從后面的洗脫液得到異構體3-O-烷基化化合物(33％)。[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.54]。1.13)對氨基苯基2-O-羧甲基-β-L-巖藻糖苷用實施例1.10所述方法水解和氫化150mg對硝基苯基2-O-甲氧羰基甲基-β-L-巖藻糖苷，得到109mg(83％)目標產(chǎn)物。[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.35]實施例1.14.a對硝基苯基β-L-巖藻糖苷單琥珀酰基化區(qū)域異構體產(chǎn)物的合成將1100mg(3.86mmol)對硝基苯基β-L-巖藻糖苷溶解于50mL吡啶，并加入580mg(5.79mmol)琥珀酸酐?；旌衔镌?0℃攪拌16小時后濃縮，然后用二氯甲烷蒸餾剩余物兩次。產(chǎn)物從二氯甲烷/乙醚沉淀，得到1g不可分離的混合物。將該物質(zhì)溶于甲醇/水，并加入846mg(2.6mmol)碳酸銫。蒸發(fā)掉溶劑，剩余物用二甲基甲酰胺蒸餾。將剩余物溶于二甲基甲酰胺，并加入618μL芐基溴。超聲處理1小時后濾除溴化銫。濃縮濾液，剩余物在500mL乙酸乙酯和50mL水之間分配。干燥并濃縮有機相，經(jīng)快速色譜分離出幾部分(流動相系統(tǒng)二氯甲烷/甲醇99∶1)為餾分187mg(4.8％)對硝基苯基3-O-(3-芐氧羰基-丙酰基)-β-L-巖藻糖苷[TLC二氯甲烷/甲醇95∶5Rf＝0.45]。餾分227mg(1.5％)對硝基苯基2-O-(3-芐氧羰基-丙?；?-β-L-巖藻糖苷[TLC二氯甲烷/甲醇95∶5Rf＝0.34]。餾分3190mg(10.3％)對硝基苯基4-O-(3-芐氧羰基-丙?；?-β-L-巖藻糖苷[TLC二氯甲烷/甲醇95∶5Rf＝0.28]。實施例1.14對氨基苯基3-O-琥珀?；?β-L-巖藻糖苷將85mg(0.17mmol)實施例1.14.a得到的餾分1溶解于5mL四氫呋喃和1mL水的混合物中。加入20mg二氧化鉑，然后氫化8小時。濾出催化劑用四氫呋喃/水洗滌，濃縮濾液。將剩余物溶于水并凍干，得57mg(94％)目標產(chǎn)物[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.65]。實施例1.15對氨基苯基2-O-琥珀酰基-β-L-巖藻糖苷類似于實施例1.14，將實施例1.14.a得到的餾分2氫化，得到16mg(87％)目標產(chǎn)物[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.62]。實施例1.16對氨基苯基4-O-琥珀酰基-β-L-巖藻糖苷類似于實施例1.14，將實施例1.14.a得到的餾分3氫化，得到125mg(88％)目標產(chǎn)物[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.63]。實施例1.17對氨基苯基3，4-二-O-甲基-β-L-巖藻糖苷1.17.a)對硝基苯基2-O-芐基-3，4-O-異亞丙基-β-L-巖藻糖苷將377mg(1.16mmol)實施例1.1.a得到的化合物溶解于30mL無水四氫呋喃中，然后依次加入690μL芐基溴和52mg氫化鈉，并將化合物在20℃攪拌。4和6小時后再在混合物上先后添加690μL芐基溴和氫化鈉。用類似實施例1.1.b的方法處理，得到245mg(51％)目標化合物。1.17.b)對硝基苯基2-O-芐基-3，4-二-O-甲基-β-L-巖藻糖苷在20℃將245mg(0.59mmol)對硝基苯基2-O-芐基-3，4-O-異亞丙基-β-L-巖藻糖苷在80％濃度的乙酸中攪拌16小時。濃縮混合物，剩余物用乙醚/戊烷攪拌。吸濾混合物并干燥剩余物后將所得產(chǎn)物溶于20mL無水四氫呋喃。加入45mg80％濃度的氫化鈉，15分鐘后注入160μL甲基碘。將混合物在20℃攪拌20小時后用甲醇和冰醋酸淬滅，濃縮混合物，剩余物在二氯甲烷和水之間分配。干燥和濃縮有機相，剩余物經(jīng)快速色譜(二氯甲烷/甲醇100∶1)提純。濃縮和干燥相應的餾分，得到188mg(79％)目標產(chǎn)物。1.17)對氨基苯基3，4-二-O-甲基-β-L-巖藻糖苷室溫下將180mg(0.45mmol)實施例1.17.b所得化合物在加入50mg鈀/活性炭的15mL甲醇和3mL二氯甲烷的混合物中氫化2天。濾除催化劑，濃縮濾液，剩余物經(jīng)快速色譜(二氯甲烷/甲醇97.5∶2.5)提純，得到86mg(68％)目標化合物。[TLC二氯甲烷/甲醇95∶5Rf＝0.21]實施例1.18對氨基苯基3-O-氨基甲?；谆?β-L-巖藻糖苷將100mg(0.305mmol)實施例1.11所得化合物溶解于10mL甲醇，并加入0.5mL17％濃度的氫氧化銨。4小時后濃縮混合物，將剩余物溶于水并凍干，得到95mg(定量的)目標化合物。[TLC乙腈/水10∶1Rf＝0.43]實施例1.19對氨基苯基2-O-羥乙基-β-L-巖藻糖苷類似于實施例1.12.a和1.12，從200mg(0.56mmol)對硝基苯基2-O-甲氧羰基甲基-β-L-巖藻糖苷(實施例1.13.a)制備標題化合物，得到76mg(兩個階段的產(chǎn)率為45％)。[TLC二氯甲烷/甲醇9∶1Rf＝0.2]實施例1.20對氨基苯基3，6-二脫氧基-3-氯-β-L-巖藻糖苷將50mg(0.165mmol)實施例1.6.b所得化合物在5mL甲醇中用鈀/活性炭氫化1小時。濾出催化劑并沖洗，濃縮濾液，將剩余物溶于水中并凍干，得到45mg(89％)目標化合物。[TLC二氯甲烷/甲醇9∶1Rf＝0.35]實施例1.21對氨基苯基α-L-鼠李糖苷類似于實施例1.1，從300mg對硝基苯基α-L-鼠李糖苷(Sigma)制備標題化合物，產(chǎn)率為96％。實施例1.22對氨基苯基3-O-羧甲基-α-L-鼠李糖苷1.22.a)對硝基苯基3-O-甲氧羰基甲基-α-L-鼠李糖苷將481mg(1.63mmol)對硝基苯基α-L-鼠李糖苷溶于30mL甲醇，并加入629mg(2.45mmol)二丁基氧化錫。將混合物加熱回流2小時，然后濃縮，將剩余物溶于30mL二噁烷。加入85mg四丁基碘化銨和950μL溴乙酸甲酯，并將混合物加熱回流16小時。如果需要，上面再加上1mL溴乙酸甲酯，并延長反應時間。濃縮混合物，剩余物經(jīng)快速色譜提純(二氯甲烷/甲醇99∶1洗脫)，干燥后得到408mg(70％)對硝基苯基3-O-甲氧羰基甲基-α-L-鼠李糖苷。[TLC二氯甲烷/甲醇95∶5Rf＝0.36]1.22)對氨基苯基3-O-羧甲基-α-L-鼠李糖苷用完全類似于實施例1.10的方法，從對硝基苯基3-O-甲氧羰基甲基-α-L-鼠李糖苷進行合成，以80％的產(chǎn)率得到目標產(chǎn)物。[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.26]實施例1.23對氨基苯基β-D-吡喃半乳糖苷將對硝基苯基β-D-吡喃半乳糖苷(3.0g，10mmol)溶解于甲醇水1∶1(50mL)。在加入鈀/活性炭(10％Pd，200mg)之后在稍微加壓的氫氣中氫化3小時。用Celite過濾該懸浮液，用熱甲醇/水1∶1(100mL)洗滌濾餅上的物質(zhì)。真空濃縮濾液，從甲醇重結晶，得到無色晶體(2.11g，78％)；TLC[甲醇]Rf＝0.62；[α]20＝-39.5°(c＝1.0/H2O)；熔點＝166℃。實施例1.24對氨基苯基2-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷1.24.a)對硝基苯基6-O-三苯基甲基-β-D-吡喃半乳糖苷將對硝基苯基β-D-吡喃半乳糖苷(9.0g，30mmol)，氯三苯基甲烷(16.7g，60mmol)和N，N-二甲氨基吡啶(609mg，5mmol)的無水吡啶(100mL)在60℃加熱4小時。真空濃縮后剩余物用快速色譜法提純[石油醚/乙酸乙酯2∶1→3∶2，每種情況下都含有0.5％三乙胺]，得到無色晶體(9.23g，57％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.55；熔點＝82℃。1.24.b)對硝基苯基3，4-O-異亞丙基-6-O-三苯基甲基-β-D-吡喃半乳糖苷將二甲氧基丙烷(400mL)和催化量的(±)-樟腦-10-磺酸(400mg，1.7mmol)加到上步化合物(8.7g，16mmol)中。在室溫下反應1小時后加入三乙胺(240mL，1.7mmol)使反應結束。真空濃縮混合物，剩余物用快速色譜法提純[石油醚/乙酸乙酯2∶1]，得到無色泡沫(6.2g，66％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯1∶1]Rf＝046；[α]20＝-42.1°(c＝0.94/CH2Cl2)。1.24.c)對硝基苯基2-O-甲基-3，4-O-異亞丙基-6-O-三苯基甲基-β-D-吡喃半乳糖苷將化合物1.24.b(5.83g，10mmol)溶解于二甲基甲酰胺(100mL)和甲基碘(2.5mL，40mmol)，然后分批加入80％氫化鈉的礦物油(450mg，15mmol)懸浮液。在室溫下反應2小時后滴加甲醇(10mL)使反應結束。真空濃縮混合物，將剩余物溶于二氯甲烷(1000mL)，并將溶液與水(500mL)一起劇烈攪拌。有機相用硫酸鎂(50g)干燥并真空濃縮，剩余物經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯12∶1→8∶1]，得到無色泡沫(4.72g，79％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯1∶1]Rf＝0.72；[α]20＝-35.7°(c＝1.0/CH3OH)。1.24.d)對硝基苯基2-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷將99％濃度的三氟乙酸(20mL)加到上步化合物(4.48g，7.5mmol)的二氯甲烷(200mL)溶液中，并將混合物在室溫攪拌3小時。真空濃縮混合物后剩余物經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯5∶1→2∶1]，得到無色晶體(1.09g，46％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.42；熔點＝177℃。1.24)對氨基苯基2-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷將化合物1.24.d(946mg，3mmol)溶解于甲醇(50mL)，加入水(0.5mL)和堿性阮內(nèi)鎳(約200mg)后在稍微加壓的氫氣中氫化2小時。用Celite過濾該懸浮液，用甲醇(100mL)洗滌濾餅上的物質(zhì)。真空濃縮濾液，得到棕色泡沫(579mg，68％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.28；[α]20＝-39.3°(c＝0.15/CH3OH)。實施例1.25對氨基苯基3-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷1.25.a)對硝基苯基3-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷將二丁基氧化錫(1.87g，7.5mmol)加到對硝基苯基β-D-吡喃半乳糖苷(1.5g，5.0mmol)的無水甲醇(40mL)溶液中，并將混合物加熱回流。3小時后真空濃縮混合物，剩余物用真空油泵干燥1小時。將產(chǎn)物溶于二噁烷(40mL)，并在其中加入甲基碘(1.9mL，30mmol)，然后在100℃浴溫度攪拌16小時。真空蒸餾除去溶劑，剩余物快速色譜法提純[乙酸乙酯/石油醚2∶1→乙酸乙酯]，得到無色晶體(1.32g，84％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.34；熔點＝196℃；[α]20＝-53.3°(c＝1.0/CH3OH)。1.25)對氨基苯基3-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷將上步化合物(946mg，3mmol)按照實施例1.24所述還原，并對產(chǎn)物進行處理，得到棕色晶體(656mg，77％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.21；熔點＝196℃；[α]20＝-25.2°(c＝1.0/CH3OH)。實施例1.26對氨基苯基4-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷，乙酸鹽1.26.a)對硝基苯基3-O-芐基-β-D-吡喃半乳糖苷將二丁基氧化錫(1.87g，7.5mmol)加到對硝基苯基β-D-吡喃半乳糖苷(1.5g，5.0mmol)的無水二噁烷(40mL)溶液中，并將混合物加熱回流。3小時后將芐基溴(3.6mL，30mmol)加到所得溶液中，然后在回流狀態(tài)下攪拌48小時。真空蒸餾除去溶劑，剩余物快速色譜法提純[乙酸乙酯/石油醚2∶1→1∶1]，得到無色晶體(1.58g，81％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.69；熔點＝127℃。1.26.b)對硝基苯基3-O-芐基-4，6-O-異亞丙基-βD-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24.b所述方法反應化合物1.26.a?？焖偕V法提純[石油醚/乙酸乙酯5∶1→3∶1]后得到無色泡沫(6.54g，95％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯1∶1]Rf＝0.34；[α]20＝-38.9°(c＝1.0/CH2Cl2)。1.26.c)對硝基苯基2，3-二-O-芐基-4，6-O-異亞丙基-β-D-吡喃半乳糖苷將化合物1.26.b(4.31g，10mmol)溶解于二甲基甲酰胺(100mL)和芐基溴(12mL，100mmol)，然后分批加入80％氫化鈉的礦物油(450mg，15mmol)懸浮液。在室溫下反應2小時后滴加甲醇(10mL)使反應結束。真空濃縮混合物，將剩余物溶于二氯甲烷(1000mL)，并將溶液與水(500mL)一起劇烈攪拌。有機相用硫酸鎂(50g)干燥并真空濃縮，剩余物經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯20∶1→15∶1→10∶1]，得到含有雜質(zhì)的無色油(2.72g，52％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯1∶1]Rf＝0.62。1.26.d)對硝基苯基2，3-二-O-芐基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24.d所述方法反應上步化合物(2.6g，5mmol)。真空濃縮后通過用乙醚沸騰萃取剩余物，得到無色晶體(805mg，33％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯1∶1]Rf＝0.23；熔點＝160℃。1.26.e)對硝基苯基2，3-二-O-芐基-6-O-三苯基甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24.a所述方法將化合物1.26.d(722mg，1.5mmol)三苯甲基化。快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯15∶1→10∶1→5∶1]后得到無色泡沫(880mg，81％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯2∶1]Rf＝0.79；[α]20＝-25.3°(c＝0.3/CH2Cl2)。1.26.f)對硝基苯基2，3-二-O-芐基-4-O-甲基-6-O-三苯基甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24.c所述方法將上步化合物(724mg，1mmol)甲基化?？焖偕V提純[石油醚/乙酸乙酯10∶1→5∶1]后得到無色泡沫(662mg，90％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯5∶1]Rf＝0.66；[α]20＝-38.7°(c＝0.2/CH2Cl2)。1.26)對氨基苯基4-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷，乙酸鹽將上步化合物(590mg，0.8mmol)溶解于90％濃度的乙酸(50mL)，加入鈀/活性炭(10％Pd，200mg)后在稍微加壓的氫氣中氫化16小時。用Celite過濾該懸浮液，用甲醇(100mL)洗滌濾餅上的物質(zhì)。真空濃縮濾液，剩余物從乙醚/石油醚重新沉淀，得到無色晶體(253mg，92％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝0.12。實施例1.27對氨基苯基6-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷1.27.a)化合物1.24.b的芐基化按照實施例1.26.c所述方法將化合物1.24.b(5.84g，10mmol)芐基化?？焖偕V法提純[石油醚/乙酸乙酯15∶1→12∶1→5∶1→乙酸乙酯，每種情況都含有0.5％三乙胺]后得到兩種產(chǎn)物餾分餾分1對硝基苯基2-O-芐基-3，4-O-異亞丙基-6-O-三苯基甲基-β-D-吡喃半乳糖苷；黃色泡沫(1.71g，25％)TLC[石油醚/乙酸乙酯2∶1]Rf＝0.72；[α]20＝-8.1°(c＝1.0/CH2Cl2)。餾分2對硝基苯基2-O-芐基-3，4-O-異亞丙基-β-D-吡喃半乳糖苷；黃色泡沫(806mg，19％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯2∶1]Rf＝0.45；[α]20＝+2.8°(c＝1.2/CH3OH)。1.27.b)對硝基苯基2-O-芐基-3，4-O-異亞丙基-6-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24.c所述方法將實施例1.27.a的餾分2(777mg，1.8mmol)甲基化。經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯10∶1→8∶1]后得到棕色油(730mg，91％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯2∶1]Rf＝0.54；[α]20＝-11.6°(c＝1.1/CH2Cl2)。1.27.c)對硝基苯基2-O-芐基-6-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24.d所述方法反應上步化合物(668mg，1.5mmol)。真空濃縮后通過用少量乙醚沸騰萃取剩余物，冷卻到室溫后得到淡米色晶體(388mg，64％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯1∶1]Rf＝0.15；熔點＝143℃。1.27)對氨基苯基6-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24所述方法將化合物1.27.c(324mg，0.8mmol)還原16小時。真空濃縮濾液后通過用少量乙醚沸騰萃取剩余物，得到米色晶體(184mg，81％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.05；熔點＝115℃(分解)。實施例1.28對氨基苯基2，3-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷1.28.a)對硝基苯基β-D-吡喃半乳糖苷的異亞丙基化將無水甲苯磺酸(500mg)加到對硝基苯基β-D-吡喃半乳糖苷(7.5g，25mmol)的加到丙酮(1000mL)溶液中。在常壓下蒸餾30分鐘除去丙酮(250mL)，之后立即添加碳酸鉀(500mg)來中和混合物。真空濃縮后將剩余物與乙醚(1000mL)一起攪拌。過濾混合物，濃縮濾液，剩余物經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯2∶1→1∶1→3∶2]后得到兩種產(chǎn)物餾分餾分1對硝基苯基3，4-O-異亞丙基-β-D-吡喃半乳糖苷；無色泡沫(3.74g，44％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.59；[α]20＝-54.2°(c＝0.38/CH3OH)。餾分2對硝基苯基4，6-O-異亞丙基-β-D-吡喃半乳糖苷；無色泡沫(4.3g，50％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.54；[α]20＝-81.0°(c＝0.38/CH3OH)。1.28.b)對硝基苯基2，3-二-O-甲基-4，6-O-異亞丙基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24.c所述方法將實施例1.28.a的餾分2(4.1g，12mmol)甲基化。經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯5∶1→2∶1]后得到無色泡沫(2.93g，66％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯1∶1]Rf＝0.42；[α]20＝-52.6°(c＝0.34/CH3OH)。1.28.c)對硝基苯基2，3-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24.d所述方法反應上步化合物(2.77g，7.5mmol)。在室溫1小時后真空濃縮混合物，用真空油泵干燥剩余物1小時。用乙醚/石油醚1∶1蒸煮，得到無色晶體(1.11g，45％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.24；熔點＝156℃。1.28)對氨基苯基2，3-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24所述方法將化合物1.28.c(989mg，3mmol)還原。得到無色油(396mg，44％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.50；[α]20＝-19.4°(c＝0.16/CH3OH)。實施例1.29對氨基苯基2，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷1.29.a)化合物1.26.a的三苯甲基化按照實施例1.24.a所述方法將化合物1.26.a(11.7g，30mmol)三苯甲基化。經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯10∶1→7∶1→5∶1，每種情況都含有0.5％三乙胺]后得到兩種產(chǎn)物餾分餾分1三苯甲基2-O-(對硝基苯基)-3-O-芐基-6-O-三苯基甲基-β-D-吡喃半乳糖苷；無色泡沫(8.5g，32％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯2∶1]Rf＝0.68；[α]20＝+42.8°(c＝1.0/CH2Cl2)。餾分2對硝基苯基3-O-芐基-6-O-三苯基甲基-β-D-吡喃半乳糖苷；無色泡沫(9.0g，47％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯2∶1]Rf＝0.22；[α]20＝-22.6°(c＝1.03/CH2Cl2)。1.29.b)對硝基苯基2，4-二-O-甲基-3-O-芐基-6-O-三苯基甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24.c所述方法將實施例1.29.a的餾分2(7.6g，12mmol)甲基化。經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯15∶1→10∶1]后得到無色泡沫(7.07g，89％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯2∶1]Rf＝0.79；[α]20＝-35.8°(c＝1.09/CH3OH)。1.29.c)對氨基苯基2，4-二-O-甲基-3-O-芐基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.26所述方法將上步化合物(6.0g，9mmol)氫化48小時。得到無色晶體(1.39g，40％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯2∶1]Rf＝0.20；熔點＝148℃。1.29)對氨基苯基2，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24所述方法將化合物1.29.c(779mg，2mmol)氫化5天。將合并的濾液真空蒸發(fā)和將剩余物用乙醚(2×50mL)煮沸萃取后得到微綠色油(391mg，65％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.16；熔點＝260℃(分解)。實施例1.30對氨基苯基2，6-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷1.30.a)對硝基苯基2，6-二-O-甲基-3，4-O-異亞丙基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24.c所述方法將實施例1.28.a的餾分1(4.1g，12mmol)甲基化。經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯101→8∶1→5∶1]后得到無色油(3.25g，73％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯1∶1]Rf＝0.65。1.30.b)對硝基苯基2，6-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24.d所述方法進行上步化合物(2.77g，7.5mmol)的反應。經(jīng)快速色譜提純[乙酸乙酯/石油醚2∶1]后得到無色晶體(1.63g，66％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.31；熔點＝222℃。1.30)對氨基苯基2，6-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24所述方法將化合物1.30.b(989mg，3mmol)還原。得到無色油(597mg，66％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.56；[α]20＝-53.1°(c＝0.49/CH3OH)。實施例1.31對氨基苯基3，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷，乙酸鹽1.31.a)對硝基苯基2，6-二-O-芐基-3，4-O-異亞丙基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.26.c所述方法將實施例1.28.a的餾分1(4.1g，12mmol)芐基化。經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯6∶1]后得到黃色油(5.3g，85％)；TLC[乙酸乙酯/石油醚2∶1]Rf＝0.76；[α]20＝+8.8°(c＝1.2/CH3OH)。1.31.b)對硝基苯基2，6-二-O-芐基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24.d所述方法進行上步化合物(4.69g，9mmol)的反應。在室溫30分鐘后真空濃縮混合物，并將剩余物用真空油泵干燥1小時。從乙醇重結晶后得到無色晶體(2.89g，67％)；TLC[乙酸乙酯/石油醚2∶1]Rf＝042；熔點＝133℃；[α]20＝-64.2°(c＝1.0/CH3OH)。1.31.c)對硝基苯基2，6-二-O-芐基-3，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24.c所述方法將上步化合物(2.4g，5mmol)甲基化。從乙醇/正己烷重結晶后得到無色晶體(1.74g，69％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯1∶1]Rf＝0.74；熔點＝149℃。1.31)對氨基苯基3，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷，乙酸酯按照實施例1.26所述方法將化合物1.31.c(1.52g，3mmol)氫化。得到無色晶體(664mg，62％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.47；熔點＝140℃(分解)。實施例1.32對氨基苯基3，6-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷1.32.a)對硝基苯基3-O-甲基-6-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-β-D-吡喃半乳糖苷將咪唑(1g，15mmol)和叔丁基二甲基甲硅烷基氯(1.25g，8mmol)加到化合物1.25.a(1.58g，5mmol)的二甲基甲酰胺(150mL)溶液中。將混合物在室溫攪拌24小時，然后加水(100mL)使反應中斷。用二氯甲烷(1000mL)稀釋混合物，有機相用水(2×1000mL)洗滌，硫酸鎂(20g)干燥并真空濃縮。經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯15∶1→10∶1→5∶1]后得到還有點雜質(zhì)的黃色泡沫(826mg，38％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.59；[α]20＝-56.3°(c＝1.0/CH2Cl2)。1.32.b)對硝基苯基2，4-二-O-芐基-3-O-甲基-6-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.26.c所述方法將上步化合物(773mg，1.8mmol)芐基化。經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯30∶1→5∶1]后得到無色泡沫(810mg，74％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯5∶1]Rf＝0.58。1.32.c)對硝基苯基2，4-二-O-芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷在0℃將化合物1.32.b(732mg，1.2mmol)溶解于四氫呋喃(6mL)，并加入1M四丁基氟化銨的四氫呋喃(2.4mL)溶液。將混合物在室溫攪拌40分鐘，然后真空濃縮。經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯5∶1→3∶1→2∶1]后得到無色晶體(512mg，86％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯1∶1]Rf＝0.36；熔點＝177℃。1.32.d)對硝基苯基2，4-二-O-芐基-3，6-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24.c所述方法將上步化合物(446mg，0.9mmol)甲基化。經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯20∶1→10∶1→8∶1]后得到無色油(401mg，87％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯1∶1]Rf＝0.70；[α]20＝-56.5°(c＝0.96/CH2Cl2)。1.32)對氨基苯基3，6-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24所述方法將化合物1.32.d(357mg，0.7mmol)氫化。真空蒸發(fā)合并的濾液并通過用乙醚(20mL)沸騰萃取剩余物后得到無色晶體(207mg，99％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯1∶1]Rf＝0.02；熔點＞280℃(分解)。實施例1.33對氨基苯基4，6-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷1.33.a)對硝基苯基2，3-二-O-芐基-4，6-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24.c所述方法將化合物1.26.d(2.4g，5mmol)甲基化。經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯5∶1→3∶1]后得到無色晶體(1.89g，74％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯1∶1]Rf＝0.76；熔點＝100℃。1.33)對氨基苯基4，6-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24所述方法將化合物1.33.a(1.53g，3mmol)氫化。得到無色晶體(890mg，99％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯1∶1]Rf＝0.71；熔點＝180℃(分解)。實施例1.34對氨基苯基2，3，4-三-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷1.34.a)對硝基苯基2，3，4-三-O-甲基-6-O-三苯基甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24.c所述方法將化合物1.24.a(1.63g，3mmol)甲基化。經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯5∶1→3∶1]后得到無色泡沫(1.24g，71％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯1∶1]Rf＝0.54；[α]20＝-53.6°(c＝0.3/CH3OH)。1.34.b)對硝基苯基2，3，4-三-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24.d所述方法進行上步化合物(1.17g，2mmol)的反應。經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯3∶1→2∶1]后得到無色晶體(468mg，68％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯1∶1]Rf＝0.12；熔點＝104℃；[α]20＝-68.2°(c＝0.47/CH3OH)。1.34)對氨基苯基2，3，4-三-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24所述方法將化合物1.34.b(343mg，1mmol)還原。得到米色晶體(224mg，71％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.67；熔點＝138℃。實施例1.35對氨基苯基2，3，6-三-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷1.35.a)對硝基苯基2，3，6-三-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.25.a所述方法將化合物1.30.b(2.63g，3mmol)有選擇地進行甲基化。經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯5∶1→2∶1]后得到棕色油(890mg，32％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝037；[α]20＝-63.3°(c＝0.9/CH2Cl2)。1.35)對氨基苯基2，3，6-三-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24所述方法將上步化合物(858mg，2.5mmol)還原。得到米色泡沫(519mg，66％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.23；[α]20＝-34.5°(c＝0.86/CH3OH)。實施例1.36對氨基苯基2，4，6-三-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷1.36.a)對硝基苯基2，4，6-三-O-甲基-3-O-芐基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24.c所述方法將化合物1.26.a(1.96g，5mmol)甲基化。經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯10∶1→8∶1]后得到無色晶體(1.47g，68％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯2∶1]Rf＝0.46；熔點＝164℃。1.36)對氨基苯基2，4，6-三-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.26所述方法將上步化合物(1.3g，3mmol)還原。得到無色晶體(642mg，68％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯2∶1]Rf＝0.12；熔點＝147℃(分解)。實施例1.37對氨基苯基3，4，6-三-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷1.37.a)對硝基苯基2-O-芐基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24.d所述方法進行實施例1.27.a餾分1(1.17g，2mmol)的反應。經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯3∶1→2∶1]后得到無色晶體(468mg，68％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯1∶1]Rf＝0.12；熔點＝104℃；[α]20＝-68.2°(c＝0.47/CH3OH)。1.37.b)對硝基苯基2-O-芐基-3，4，6-三-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24.c所述方法將上步化合物(391mg，1mmol)甲基化。經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯10∶1→5∶1]后得到淺黃色晶體(303mg，70％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.81；[α]20＝-76.5°(c＝1.1/CH2Cl2)。1.37)對氨基苯基3，4，6-三-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24所述方法將化合物1.37.b(260mg，0.6mmol)氫化。得到米色晶體(161mg，86％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.20；熔點＝132℃。實施例1.38對氨基苯基2，3，4，6-四-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷1.38.a)對硝基苯基2，3，4，6-四-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24.c所述方法將對硝基苯基β-D-吡喃半乳糖苷(904mg，3mmol)甲基化。經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯8∶1→6∶1→4∶1→2∶1]后得到無色蠟狀固體(633mg，59％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.67；[α]20＝-55.7°(c＝0.9/CH2Cl2)。1.38)對氨基苯基2，3，4，6-四-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24所述方法將化合物1.33.a(536mg，1.5mmol)氫化。真空蒸發(fā)合并的濾液并通過用乙醚(20mL)煮沸萃取剩余物后得到無色晶體(412mg，84％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.42；熔點＝204℃(分解)。實施例1.39對氨基苯基α-D-吡喃甘露糖苷按照實施例1.23所述方法將對硝基苯基α-D-吡喃甘露糖苷(3.0g，10mmol)氫化。從甲醇/乙醚沉淀后得到無色晶體(2.03g，75％)；TLC[甲醇]Rf＝0.69；[α]20＝+1027°(c＝1.0/H2O)；熔點＝161℃。實施例1.40對氨基苯基3-O-甲基-(α-D-吡喃甘露糖苷1.40.a)對硝基苯基6-O-三苯基甲基-α-D-吡喃甘露糖苷按照實施例1.24.a所述方法將對硝基苯基α-D-吡喃甘露糖苷(3.0g，10mmol)三苯甲基化，得到無色晶體(4.35g，80％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.52；[α]20＝+104.0°(c＝1.0/CH3OH)；熔點＝102-104℃。1.40.b)對硝基苯基3-O-甲基-6-O-三苯基甲基-α-D-吡喃甘露糖苷按照實施例1.26.a所述方法將上步化合物(2.72g，5mmol)與甲基碘(2mL，30mmol)反應。經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯2∶1]并重新從乙醇/正己烷沉淀后得到無色晶體(1.83g，66％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.68；[α]20＝+106.4°(c＝1.0/CH3OH)；熔點＝104℃。1.40)對氨基苯基3-O-甲基-α-D-吡喃甘露糖苷將化合物1.40.b(1.4g，2.5mmol)溶解于甲醇(50mL)。加入鈀/活性炭(10％Pd，300mg)后在稍微加壓的氫氣中氫化24小時。用Celite過濾該懸浮液，用甲醇(100mL)充分洗滌濾餅上的物質(zhì)。真空濃縮濾液后剩余物用水(50mL)萃取。過濾混合物，凍干濾液，得到棕色非晶形固體(709mg，99％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.33；[α]20＝+92.9°(c＝1.1/CH3OH)。實施例1.41對氨基苯基2，3-二-O-甲基-α-D-吡喃甘露糖苷1.41.a)對硝基苯基4，6-O-亞芐基-α-D-吡喃甘露糖苷將苯甲醛縮二甲醇(3.2mL，21.4mmol)和54％四氟硼酸的乙醚溶液(2.7mL，20mmol)加到對硝基苯基α-D-吡喃甘露糖苷(6.0g，20mmol)的二甲基甲酰胺(120mL)溶液中。將混合物在室溫攪拌5小時，然后添加三乙胺(2.8mL，20mmol)使反應中斷。真空濃縮混合物，經(jīng)快速色譜提純[甲苯→甲苯/乙醇20∶1]后得到無色晶體(6.48g，83％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.82；[α]20＝+170.7°(c＝1.0/CH2Cl2)；熔點＝116℃。1.41.b)對硝基苯基2，3-二-O-甲基-4，6-O-亞芐基-α-D-吡喃甘露糖苷按照實施例1.24.c所述方法將上步化合物(3.9g，10mmol)甲基化。經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯20∶1→7∶1]并重新從乙醇/正己烷沉淀后得到無色泡沫(3.2g，77％)；TLC[乙酸乙酯/石油醚2∶1]Rf＝0.67；[α]20＝+167.3°(c＝1.05/CH3OH)。1.41)對氨基苯基2，3-二-O-甲基-α-D-吡喃甘露糖苷按照實施例1.26所述方法氫化化合物1.41.b(1.25g，3mmol)。經(jīng)快速色譜提純[乙酸乙酯/石油醚2∶1→乙酸乙酯，每種情況都含有0.5％三乙胺]后得到紅棕色泡沫(480mg，53％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.31；[α]20＝+83.6°(c＝0.76/CH3OH)。實施例1.421.42.a)對硝基苯基3-O-甲氧羰基甲基-α-D-吡喃半乳糖苷將二丁基氧化錫(9.3g，37.5mmol)加到對硝基苯基β-D-吡喃半乳糖苷(7.53g，25mmol)的無水二噁烷(180mL)溶液中，并將混合物加熱回流。4小時后在所得溶液中加入溴乙酸甲酯(8.3mL，90mmol)和四丁基碘化銨(9.25g，25mmol)，并在回流狀態(tài)下繼續(xù)攪拌3小時。真空蒸餾除去溶劑，剩余物經(jīng)快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇50∶1→20∶1]。除了得到一些副產(chǎn)物之外還得到化合物1.42.a(4.05g，43％)，為無色晶體；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.54；[α]20＝-62.0°(c＝1.0/CH3OH)；熔點＝176℃。1.42)對氨基苯基3-O-甲氧羰基甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24所述方法氫化化合物1.42.a(3.73g，10mmol)。從乙醇/正己烷重新沉淀后得到無色晶體(2.98g，87％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.39；[α]20＝-36.3°(c＝1.07/CH3OH)；熔點＝155℃。實施例1.431.43.a)對硝基苯基3-O-羧甲基-β-D-吡喃半乳糖苷，鈉鹽將氫氧化鈉(400mg，10mmol)的水(5mL)溶液加到化合物1.42.a(3.73g，10mmol)的甲醇(100mL)溶液中，并將混合物在室溫攪拌2小時。真空濃縮后將剩余物用真空油泵干燥1小時。在冰浴中冷卻后濾出固體，得到無色晶體(3.66g，96％)；TLC[甲醇]Rf＝0.62；[α]20＝-50.0°(c＝1.0/CH3OH)；熔點＝180-185℃。1.43)對氨基苯基3-O-羧甲基-β-D-吡喃半乳糖苷，鈉鹽按照實施例1.24所述方法氫化上步化合物(3.05g，8mmol)。通過用乙醇(50mL)沸騰萃取后得到無色晶體(2.03g，72％)；TLC[甲醇]Rf＝0.70；[α]20＝-22.4°(c＝1.0/CH3OH)；熔點＝180-182℃。實施例1.44對氨基苯基3-O-氨基甲?；谆?β-D-吡喃半乳糖苷1.44.a)對硝基苯基3-O-氨基甲?；谆?β-D-吡喃半乳糖苷將25％氨水溶液(10mL)加到化合物1.42.a(373mg，1mmol)的甲醇(30mL)溶液中，并將混合物在室溫攪拌15分鐘。真空濃縮后將剩余物用真空油泵干燥2小時，然后加入乙醇(30mL)。將混合物煮至回流5分鐘，在冰浴中冷卻后過濾，得到無色晶體(306mg，85％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.14；[α]20＝-41.7°(c＝1.0/CH3OH)；熔點＝229℃(分解)。1.44)對氨基苯基3-O-氨基甲酰基甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24所述方法氫化上步化合物(287mg，0.8mmol)。從甲醇/乙醚重新沉淀后得到無色晶體(207mg，79％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.10；熔點＝205℃(分解)。實施例1.45對氨基苯基3-O-(N-甲基-氨基甲?；谆?-β-D-吡喃半乳糖苷1.45.a)對硝基苯基3-O-(N-甲基-氨基甲?；谆?-β-D-吡喃半乳糖苷將30％甲胺水溶液(10mL)加到化合物1.42.a(373mg，1mmol)的甲醇(30mL)溶液中，并將混合物在室溫攪拌2小時。真空濃縮后將剩余物用真空油泵干燥2小時，然后從乙醇重結晶，得到無色晶體(372mg，100％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.33；[α]20＝-36.7°(c＝1.0/CH3OH)；熔點＝205℃。1.45)對氨基苯基3-O-(N-甲基-氨基甲?；谆?-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24所述方法氫化化合物1.45.a(298mg，0.8mmol)。從甲醇/乙醚重新沉淀后得到無色晶體(180mg，66％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.16；熔點＝239℃。實施例1.46對氨基苯基3-O-(N-丙基-氨基甲?；谆?-β-D-吡喃半乳糖苷1.46.a)對硝基苯基3-O-(N-丙基-氨基甲酰基甲基)-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.45.a所述方法將化合物1.42.a(373mg，1mmol)與正丙胺(823μL，10mmol)反應。真空濃縮后剩余物從乙醇/正己烷重新沉淀，得到無色晶體(340mg，85％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.49；[α]20＝-32.4°(c＝1.0/CH3OH)；熔點＝155℃。1.46)對氨基苯基3-O-(N-丙基-氨基甲酰基甲基)-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24所述方法氫化化合物1.46.a(320mg，0.8mmol)。從甲醇/乙醚重新沉淀后得到無色晶體(188mg，63％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.31；熔點＝154℃。實施例1.47對氨基苯基3-O-(N-丁基-氨基甲?；谆?-β-D-吡喃半乳糖苷1.47.a)對硝基苯基3-O-(N-丁基-氨基甲?；谆?-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.45.a所述方法將化合物1.42.a(373mg，1mmol)與正丁胺(900μL，10mmol)反應。真空濃縮后剩余物從乙醇/正己烷重新沉淀，得到無色晶體(413mg，100％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.51；[α]20＝-26.8°(c＝1.0/CH3OH)；熔點＝92℃。1.47)對氨基苯基3-O-(N-丁基-氨基甲?；谆?-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.24所述方法氫化化合物1.47.a(332mg，0.8mmol)。從乙醇/正已烷重新沉淀后得到無色晶體(105mg，34％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.32；熔點＝135℃。實施例1.48對氨基苯基3-O-甲氧羰基甲基-α-D-吡喃甘露糖苷1.48.a)對硝基苯基3-O-甲氧羰基甲基-6-O-三苯基甲基-α-D-吡喃甘露糖苷按照實施例1.42.a所述方法進行化合物1.40.a(13.6g，25mmol)的反應?？焖偕V提純[石油醚/乙酸乙酯10∶1]后，除一些副產(chǎn)品外得到無色晶體(2.79g，18％)；TLC[乙酸乙酯/石油醚2∶1]Rf＝0.50；熔點＝95-97℃。1.48)對氨基苯基3-O-甲氧羰基甲基-α-D-吡喃甘露糖苷按照實施例1.40所述方法氫化化合物1.48.a(1.23g，2mmol)并處理產(chǎn)物，得到棕色非晶形固體(250mg，36％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.45。實施例1.49對氨基苯基3-O-羧甲基-α-D-吡喃甘露糖苷1.49.a)對硝基苯基3-O-芐氧羰基甲基-6-O-三苯基甲基-α-D-吡喃甘露糖苷按照實施例142.a所述方法將化合物1.40.a(13.6g，25mmol)與溴乙酸芐酯(14.4mL，90mmol)反應?？焖偕V提純[石油醚/乙酸乙酯20∶1→10∶1]后，除一些副產(chǎn)品外得到黃色泡沫(5.0g，29％)；TLC[乙酸乙酯/石油醚2∶1]Rf＝0.66；[α]20＝+74.8°(c＝1.0/CH2Cl2)。1.49)對氨基苯基3-O-羧甲基-α-D-吡喃甘露糖苷按照實施例1.40所述方法氫化上步化合物(2.08g，3mmol)36小時。濃縮濾液后剩余物從乙醇/正己烷重新沉淀。用乙酸乙酯洗滌，并從乙醇/乙醚重新沉淀，得到無色晶體(495mg，50％)；TLC[甲醇]Rf＝0.53；熔點＝205-207℃。實施例1.50對氨基苯基3-O-氨基甲?；谆?α-D-吡喃甘露糖苷1.50.a)對硝基苯基3-O-氨基甲?；谆?6-O-三苯基甲基-α-D-吡喃甘露糖苷按照實施例1.44.a所述方法進行化合物1.49.a(1.04g，1.5mmol)的反應。用真空油泵干燥后剩余物經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯2∶3]，得到無色晶體(561mg，62％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.67；[α]20＝+91.3°(c＝1.0/CH2Cl2)；熔點＝125-127℃。1.50)對氨基苯基3-O-氨基甲?；谆?α-D-吡喃甘露糖苷按照實施例1.40所述方法氫化上步化合物(541mg，0.9mmol)48小時。濃縮濾液后剩余物用甲醇充分洗滌，得到無色晶體(134mg，45％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.21；熔點＝126-128℃。實施例1.51對氨基苯基3-脫氧基-β-D-吡喃半乳糖苷1.51.a)對硝基苯基2，6-二-O-芐基-4-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖苷將原乙酸三乙酯(3mL，16.3mmol)和甲苯磺酸(20mg)加到化合物1.31.b(2.7g，5.6mmol)的二氯甲烷(20mL)中。在室溫30分鐘后用二氯甲烷(200mL)稀釋，并用飽和碳酸氫鈉溶液(50mL)洗滌。有機相用硫酸鎂干燥，過濾后真空濃縮濾液。將所得無色泡沫溶解于80％的乙酸(15mL)。在室溫30分鐘后將混合物倒入飽和碳酸氫鈉溶液(200mL)，用氯仿(3×75mL)萃取。合并的有機相用水(100mL)洗滌，硫酸鎂干燥，過濾后真空濃縮濾液。從乙醇/石油醚重新沉淀后得到無色晶體(2.43g，83％)；TLC[乙酸乙酯/石油醚2∶1]Rf＝0.64；[α]20＝-62.1°(c＝1.0/CH2Cl2)；熔點＝83℃。1.51.b)對硝基苯基2，6-二-O-芐基-3-O-三氟甲磺?；?4-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖苷在-20℃的氬氣中將三氟甲磺酸酐(2mL，11.8mmol)的二氯甲烷(30mL)溶液滴加到化合物1.51.a(2.3g，4.4mmol)的二氯甲烷(30mL)和吡啶(3mL)的混合溶液中。在-20℃1小時后將混合物倒入飽和碳酸氫鈉溶液(200mL)中。分離出有機相，用硫酸鎂干燥，過濾后真空濃縮濾液。經(jīng)快速色譜提純[甲苯→甲苯/乙酸乙酯20∶1]后得到無色晶體(2.39g，83％)；TLC[甲苯/乙酸乙酯5∶1]Rf＝0.55；[α]20＝-61.4°(c＝1.0/CH2Cl2)；熔點＝105℃。1.51.c)對硝基苯基2，6-二-O-芐基-3-脫氧基-β-D-吡喃半乳糖苷將上步化合物(1.31g，2mmol)溶解于甲苯(25mL)，并加入四氫硼化四丁基銨(1.54g，6mmol)。在80℃2小時后混合物用二氯甲烷(200mL)稀釋，并用水(50mL)洗滌一次。有機相用硫酸鎂干燥，過濾后真空濃縮濾液。經(jīng)快速色譜提純[甲苯/乙酸乙酯7∶1]后得到無色晶體(596mg，64％)；TLC[甲苯/乙酸乙酯5∶1]Rf＝0.10；[α]20＝-81.3°(c＝1.0/CH2Cl2)；熔點＝114℃。1.51)對氨基苯基3-脫氧基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.40所述方法氫化化合物1.51.c(465mg，1mmol)6小時。濃縮濾液后剩余物從乙醇/石油醚重新沉淀，得到無色晶體(206mg，81％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.22。實施例1.52對氨基苯基3，4-二脫氧基-β-D-吡喃半乳糖苷1.52.a)對硝基苯基2，6-二-O-芐基-3，4-二-O-三氟甲磺?；?β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.51.b所述方法將化合物1.31.b(2.12g，4.4mmol)與三氟甲磺酸酐(4mL，23.6mmol)反應。經(jīng)快速色譜提純[甲苯→甲苯/乙酸乙酯50∶1]后得到黃色油(2.75g，84％)；TLC[甲苯/乙酸乙酯5∶1]Rf＝0.67；[α]20＝-22.5°(c＝1.0/CH2Cl2)。1.52.b)對硝基苯基2，6-二-O-芐基-3，4-二脫氧基β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.51.c所述方法將化合物1.52.a(1.49g，2mmol)與四氫硼化四丁基銨(2.31g，9mmol)反應。經(jīng)快速色譜提純[甲苯→甲苯/乙酸乙酯50∶1]后得到無色晶體(629mg，70％)；TLC[甲苯/乙酸乙酯5∶1]Rf＝0.53；[α]20＝-79.1°(c＝1.0/CH2Cl2)；熔點＝89℃。1.52)對氨基苯基3，4-二脫氧基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.40所述方法氫化化合物1.52.b(450mg，1mmol)5小時。濃縮濾液后剩余物從乙醇/石油醚重新沉淀得到無色晶體(183mg，76％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.47；[α]20＝-115.1°(c＝1.0/CH3OH)；熔點＝187℃。實施例1.53對氨基苯基6-O-乙?；?β-D-吡喃半乳糖苷1.53.a)對硝基苯基6-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖苷在0℃將新制備的吡啶(2mL，25mmol)和乙酰氯(1.85mL，26mmol)的乙腈(20mL)滴加到對硝基苯基β-D-吡喃半乳糖苷(7.53g，25mmol)的無水乙腈(80mL)溶液中。將混合物在0℃攪拌30分鐘后真空濃縮。經(jīng)快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇50∶1→20∶1]后得到無色晶體(4.02g，47％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.50。1.53)對氨基苯基6-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.40所述方法氫化化合物1.53.a(1.72g，5mmol)2小時。濃縮濾液后剩余物從甲醇/乙醚重新沉淀得到無色晶體(1.34g，86％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.34；[α]20＝-41.0°(c＝0.56/CH3OH)；熔點＝180℃(分解)。實施例1.54對氨基苯基3，4-二-O-甲氧羰基甲基-β-D-吡喃半乳糖苷1.54.a)?；衔?.24.a將化合物1.24.a(1.36g，3mmol)溶解于二甲基甲酰胺(25mL)，并分批加入溴乙酸甲酯(1mL，10.6mmol)和80％氫化鈉的礦物油(300mg，10mmol)懸浮液。在室溫3.5小時后再次加入溴乙酸甲酯(250μL，2.65mmol)和氫化鈉的礦物油(75mg，2.5mmol)。2小時后通過滴加甲醇(5mL)使反應結束。真空濃縮混合物，將剩余物溶于二氯甲烷(250mL)，并將溶液與水(100mL)一起劇烈攪拌。用硫酸鎂干燥有機相并真空濃縮，剩余物經(jīng)快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯10∶1→7∶1→45∶1→3∶1]后得到三種產(chǎn)物餾分餾分1對硝基苯基2，3，4-三-O-甲氧羰基甲基-β-D-吡喃半乳糖苷；無色泡沫(401mg，21％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯1∶1]Rf＝0.47；[α]20＝-51.9°(c＝0.26/CH3OH)。餾分2未確定；無色泡沫(88mg)；TLC[石油醚/乙酸乙酯1∶1]Rf＝0.39；[α]20＝-61.5°(c＝0.26/CH3OH)。餾分3對硝基苯基3，4-二-O-甲氧羰基甲基-β-D-吡喃半乳糖苷；無色泡沫(275mg，16％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯1∶1]Rf＝0.30；[α]20＝-38.6°(c＝0.28/CH3OH)。1.54)對氨基苯基3，4-二-O-甲氧羰基甲基-β-D-吡喃半乳糖苷按照實施例1.40所述方法氫化化合物1.54.a(206mg，0.3mmol)16小時。濃縮濾液后通過用乙醚(20mL)沸騰萃取剩余物，得到灰色晶體(45.6mg，37％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯1∶1]Rf＝0.22；熔點＝155℃(分解)。實施例1.55對氨基苯基2，3，4-三-O-甲氧羰基甲基-β-D-吡喃半乳糖苷如實施例1.40中描述的那樣將來自實施例1.54.a的餾分1(380mg，0.5mmol)氫化。濃縮濾液之后，剩余物通過用乙醚(20ml)煮沸萃取得到棕黃色油(46.8mg，19％)；TLC[石油醚/乙酸乙酯1∶1]Rf＝0.29；熔點＝106℃(分解)。實施例1.56對-氨基苯基4-O-(β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷如實施例1.23中描述的那樣將對-硝基苯基4-O-(β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(4.63g，10mmol)氫化。得到無色結晶(3.04g，70％)；TLC[甲醇]Rf＝0.55；熔點＝235-237℃(分解)。實施例1.57對-氨基苯基4-O-(3’-硫酸根合-β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷鈉鹽1.57.a)對-硝基苯基4-O-(3’，4’-O-異亞丙基-βD-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷將二甲氧基丙烷(400ml)和催化量的(±)-樟腦-10-磺酸(400mg，1.7mmol)加入對-硝基苯基4-O-(β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃半乳糖苷(23.2g，50mmol)中。室溫下3天之后，通過加入三乙胺(240μ1，1.7mmol)終止反應，真空濃縮混合物，剩余物在油泵真空下干燥2小時。得到的結晶在10∶1的甲醇/水(500ml)中溶解，混合物經(jīng)回流煮沸6小時。經(jīng)過真空濃縮和快速色譜[二氯甲烷/甲醇25∶1→10∶1，每次用0.5％的三乙胺]之后，得到無色結晶(15.2g，60％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝0.49；熔點＝253-255℃(分解)。1.57.b)對-硝基苯基2，3，6-三-O-苯甲酰基-4-O-(2’，6’-二-O-苯甲酰基-3’，4’-(O-異亞丙基-β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷在0℃用30分鐘將苯甲酰氯(50ml，430mmol)慢慢滴入化合物1.57.a(15.1g，30mmol)在吡啶(300ml)中的溶液中。然后將混合物在室溫下再攪拌2小時，隨后將該批物料倒入冰水(2000ml)中并且攪拌，15分鐘之后，將沉淀的結晶過濾并溶于二氯甲烷(1500ml)中。溶液用水(2×500ml)和1N碳酸氫鈉溶液(2×500ml)洗滌，有機相用硫酸鎂(50g)干燥并且在真空濃縮，剩余物通過用甲醇重結晶提純。得到無色結晶(26.7g，87％)；TLC[二氯甲烷/甲醇50∶1]Rf＝0.49；[α]20＝+23.6°(c＝1.08/CH2Cl2)；熔點＝272-274℃。1.57.c)對-硝基苯基2，3，6-三-O-苯甲?；?4-O-(2’，6’-二-O-苯甲?；?β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷將99％濃度的三氟乙酸(20ml)加入化合物1.57.b(20.5g，20mmol)在二氯甲烷(400ml)中的溶液中，混合物在室溫下攪拌20分鐘。然后將溶液用1N碳酸氫鈉溶液(2×200ml)洗滌，有機相用硫酸鎂(10g)干燥并且在真空濃縮，剩余物通過用二氯甲烷/乙醚再沉淀提純。得到無色結晶(18.0g，91％)；TLC[二氯甲烷/甲醇20∶1]Rf＝0.18；熔點＝234℃。1.57.d)對-硝基苯基2，3，6-三-O-苯甲?；?4-O-(2’，6’-二-O-苯甲?；?4’-O-乙?；?β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷如實施例1.51.a中描述的那樣將化合物1.57.c(5.5g，5.6mmol)反應。經(jīng)過快速色譜[石油醚/乙酸乙酯3∶1→1∶1]之后，得到無色結晶(4.03g，70％)；TLC[二氯甲烷/甲醇20∶1]Rf＝0.67；熔點＝118℃。1.57.e)對-硝基苯基2，3，6-三-O-苯甲?；?4-O-(2’，6’-二-O-苯甲酰基-3’-硫酸根合-4’-O-乙?；?β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷鈉鹽將三氧化硫-吡啶配合物(4.5g，28mmol)加入化合物1.57.d(3.59g，3.5mmol)在吡啶(200ml)中的溶液中，混合物在60℃攪拌2小時，然后在室溫下攪拌16小時。通過滴加甲醇(50ml)終止反應，混合物通過真空濃縮。剩余物通過快速色譜[二氯甲烷/甲醇10∶1]提純。得到的固體產(chǎn)物溶于1∶1的二氯甲烷/甲醇(200ml)，加入AmberliteIR120(鈉鹽形式，10g)。該混合物在室溫下攪拌1小時，過濾，真空濃縮濾液。得到無色結晶(3.64g，92％)；TLC[二氯甲烷/甲醇2∶1]Rf＝0.87；熔點＝168℃。1.57.f)對-硝基苯基4-O-(3’-硫酸根合-β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷鈉鹽將化合物1.57.e(3.4g，3mmol)溶于無水甲醇(150ml)中，加入甲醇鈉(200mg)，混合物在60℃攪拌7小時。冷卻至室溫之后，混合物用LewatitSC108(酸形式)中和，然后過濾。通過滴加1N氫氧化鈉溶液使濾液的pH值增加至pH7-8，真空蒸發(fā)混合物，剩余物從甲醇/乙醚再沉淀得到淺棕色結晶(1.30g，77％)；TLC[二氯甲烷/甲醇2∶1]Rf＝0.55；熔點＝230℃(分解)。1.57)對-氨基苯基4-O-(3’-硫酸根合-β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷鈉鹽如實施例1.24中描述的那樣將上面的化合物(1.13g，2mmol)還原。剩余物通過用乙醚(50ml)煮沸萃取之后，得到無色結晶(983mg，92％)；TLC[二氯甲烷/甲醇2∶1]Rf＝0.22；熔點＝176℃(分解)。實施例1.58對-氨基苯基4-O-(3’-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷1.58.a)對-硝基苯基4-O-(β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷的選擇性甲基化如實施例1.25.a中描述的那樣將對-硝基苯基4-O-(β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(2.3g，5mmol)甲基化。通過快速色譜[二氯甲烷/甲醇20∶1→10∶1→5∶1]得到兩個產(chǎn)物餾分1對-硝基苯基2-O-甲基-4-O-(3’-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷；無色結晶(264mg，11％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝0.46；[α]20＝-73.9°(c＝1.0/CH3OH)；熔點＝228℃(分解)。餾分2對-硝基苯基4-O-(3’-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷；無色結晶(1.0g，42％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝0.29；[α]20＝-65.3°(＝1.1/CH3OH)；熔點＝220℃(分解)。1.58)對-氨基苯基4-O-(3’-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷如實施例1.24中描述的那樣將來自實施例1.58.a的餾分2(955mg，2mmol)還原。用乙醚(50ml)洗滌之后，得到無色結晶(894mg，100％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝0.08；熔點＝129℃(分解)。實施例1.59對-氨基苯基2-O-甲基-4-O-(3’-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷如實施例1.24中描述的那樣將來自實施例1.58.a的餾分1(246mg，0.5mmol)還原。用乙醚(20ml)洗滌之后，得到無色結晶(186mg，81％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝0.13；[α]20＝-3.6°(c＝1.0/CH3OH)熔點＝105℃(分解)。實施例1.60對-氨基苯基4-O-(3’，4’-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷1.60.a)對-硝基苯基2，3，6-三-O-苯甲基-4-O-(2’，6’-二-O-苯甲基-3’，4’-O-異亞丙基-β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷如實施例1.26.c中描述的那樣將化合物1.57.a(5.0g，10mmol)與溴化芐(30ml，250mmol)反應16小時。在真空中濃縮之后，將剩余物溶于乙酸乙酯(300ml)中，溶液用水(200ml)洗滌。有機相用硫酸鎂(10g)干燥并且在真空中濃縮，剩余物通過快速色譜提純[二氯甲烷/石油醚5∶1→二氯甲烷]。得到棕色油(5.3g，56％)；TLC[二氯甲烷/甲醇50∶1]Rf＝0.70；[α]20＝-23.2°(c＝1.08/CH2Cl2)。1.60.b)對-硝基苯基2，3，6-三-O-苯甲基-4-O-(2’，6’-二-O-苯甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷如實施例1.57.c中描述的那樣將上面的化合物(4.77g，5mmol)反應。在真空中濃縮和從乙醚/石油醚再沉淀之后，得到無色結晶(3.94g，86％)；TLC[二氯甲烷/甲醇50∶1]Rf＝0.36；熔點＝116℃。1.60.c)對-硝基苯基2，3，6-三-O-苯甲基-4-O-(2’，6’-二-O-苯甲基-3’，4’-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃萄萄糖苷如實施例1.24.c中描述的那樣將化合物1.60.b(1.8g，2mmol)甲基化。從二氯甲烷/石油醚再沉淀得到無色結晶(1.55g，82％)TLC[二氯甲烷/甲醇50∶1]Rf＝0.74；熔點＝161-162℃。1.60)對-氨基苯基4-O-(3’，4’-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷將化合物1.60.c(1.41g，1.5mmol)溶于甲醇(50ml)，加入氫氧化鈀/活性炭(潮濕，20％的鈀，500mg)之后，在氫氣氣氛下在稍加壓下氫化6天。用硅藻土過濾懸浮液，用甲醇(100ml)徹底洗滌在濾器上的物料。真空濃縮濾液，用二氯甲烷洗滌剩余物得到棕色結晶(425mg，61％)；熔點＝124℃(分解)。實施例2.1N-丙氨酰-batracyline2.1.a)N-[N-(叔丁氧基羰基)-丙氨酰]-batracyline將N-(叔丁氧基羰基)-丙氨酸(3.3g，17.5mmol)和2-異丁氧基-1-異丁氧基羰基-1，2-二氫-喹啉(6.8ml，23mmol)溶于100ml二氯甲烷中?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?0分鐘之后，加入batracyline(4.1g，16.5mmoL)在無水二甲基甲酰胺(350ml)中的溶液，將該批物料在室溫下再攪拌48小時。然后真空濃縮至50ml，濃縮液中加入乙酸乙酯至300ml，迅速在其沸點上加熱10分鐘。然后將混合物冷卻至室溫并且過濾，濾器上的物料通過用乙酸乙酯(200ml)再次煮沸萃取。冷卻至0℃并且攪拌，過濾得到黃色結晶(6.18g，84％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.57；熔點＝246-247℃(分解)。2.1)N-丙氨酰-batracyline在室溫下將化合物2.1.a(10.5g，25mmoL)在無水三氟乙酸(150ml)中的溶液攪拌15分鐘。該批物料真空濃縮至30ml之后，倒入飽和碳酸氫鈉溶液(1000ml)中并且同時劇烈攪拌。攪拌持續(xù)10分鐘，過濾混合物，剩余物用水、少量異丙醇和乙醚洗滌。得到黃色結晶產(chǎn)物(7.15g，89％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.06；熔點＝261-262℃(分解)。實施例2.2N-[賴氨酰-丙氨酰]-batracyline的二-三氟乙酸鹽2.2.a)N-[Nα，Nε-二-(叔丁氧基羰基)-賴氨酰-丙氨酰]-batracyline將N，N-二-(叔丁氧基羰基)賴氨酸(2.1g，6mmol)和2-異丁氧基-1-異丁氧基羰基-1，2-二氫-喹啉(2.4ml，8mmol)溶于20ml二氯甲烷中。混合物在室溫下攪拌20分鐘之后，加入化合物2.1(1.6g，5mmol)在二甲基甲酰胺(40ml)中的溶液，將該批物料在室溫下再攪拌16小時。然后真空濃縮，剩余物通過快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯2∶1→1∶1→乙酸乙酯]。得到黃色結晶(2.89g，89％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.52；熔點＝203-204℃。2.2)N-[賴氨酰-丙氨酰]-batracyline的二-三氟乙酸鹽將無水三氟乙酸(10ml)加入上面的化合物(2.6g，4mmol)在二氯甲烷(25ml)中的懸浮液中，得到的溶液在室溫下攪拌30分鐘。真空濃縮之后，剩余物通過加入乙醚(100ml)結晶。過濾沉淀并且用乙醚充分洗滌。得到黃色結晶(2.68g，99％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.05；熔點＝144-146℃(分解)。實施例2.3N-[D-丙氨酰]-batracyline2.3.a)N-[N-芐氧基羰基-D-丙氨酰]-batracyline如實施例2.1.a中描述的那樣將N-芐氧基羰基-D-丙氨酸(3.9g，17.5mmo1)反應并且處理產(chǎn)物。得到的黃色結晶(6.4g，80％)通過過濾分離，合并的濾液經(jīng)真空濃縮，剩余物通過快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯3∶2(1∶1]。再得到1.35g(17％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.45；熔點＝256℃；[α]20＝+75.1°(c＝1.0/CH2Cl2+0.5％CH3OH)。2.3)N-[D-丙氨酰]-batracyline將化合物2.3.a(11.4g，25mmol)溶于溴化氫在冰醋酸(100ml)中的33％濃度的溶液中。室溫下30分鐘之后，真空濃縮該批物料至30ml，然后將濃縮液倒入飽和碳酸氫鈉溶液(1000ml)中并且劇烈攪拌。攪拌持續(xù)10分鐘，過濾混合物，剩余物用水、少量異丙醇和乙醚洗滌。得到黃色結晶產(chǎn)物(7.87g，98％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.06；熔點＝267℃(分解)。實施例2.4N-[Nα-(叔丁氧基羰基)-賴氨酰-D-丙氨酰]-batracyline2.4.a)N-[Nα-(叔丁氧基羰基)-Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酰-D-丙氨酰]-batracyline將Nα-(叔丁氧基羰基)-Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酸(5.3g，11.3mmol)和2-異丁氧基-1-異丁氧基羰基-1，2-二氫-喹啉(4ml，14mmol)溶于40ml二氯甲烷中。混合物在室溫下攪拌20分鐘之后，加入化合物2.3(3.2g，10mmol)在二甲基甲酰胺(80ml)中的溶液，該批物料在室溫下再攪拌16小時。然后真空濃縮，剩余物懸浮于二氯甲烷中(100ml)。得到的懸浮液中加入乙醚(300ml)。過濾和用乙醚洗滌在濾器中的物料之后，得到黃色結晶(5.65g，65％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.45；熔點＝186℃。2.4)N-[Nα-(叔丁氧基羰基)-賴氨酰-D-丙氨酰]batracyline將上面的化合物(5.6g，7.3mmol)溶于二甲基甲酰胺(50ml)中。加入哌啶(50ml)之后，混合物在室溫下攪拌3小時，然后真空濃縮，剩余物通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.1→15∶5∶0.1]。得到黃色結晶(2.5g，62％)；熔點＝217℃(分解)。實施例2.5N-[Nα-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酰-D-丙氨酰]-batracyline的三氟乙酸鹽2.5.a)N-[Nα-(芴基-9-甲氧基羰基)-Nε-(叔丁氧基羰基)-賴氨酰-D-丙氨酰]-batracyline如實施例2.4.a中描述的那樣將Nα-(芴基-9-甲氧基羰基)-Nε-(叔丁氧基羰基)-賴氨酸(5.3g，11.3mmol)反應并提純產(chǎn)物。得到黃色結晶(7.0g，80％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.51；熔點＝223℃。2.5)N-[Nα-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酰-D-丙氨酰]-batracyline的三氟乙酸鹽如實施例2.2中描述的那樣將化合物2.5.a(6.17g，8mmol)反應。真空濃縮之后，剩余物從二氯甲烷/乙醚再沉淀得到黃色結晶(6.08g，97％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.05；熔點＝224℃(分解)。實施例2.6N-[Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酰-D-丙氨酰]-batracyline的三氟乙酸鹽如實施例2.2中描述的那樣將化合物2.4.a(6.17g，8mmol)反應。真空濃縮之后，剩余物從二氯甲烷/乙醚再沉淀得到黃色結晶(5.97g，95％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.04；熔點＝188℃(分解)。實施例2.7N-[賴氨酰-D-天冬氨酰]-batracyline的雙-三氟乙酸鹽2.7.a)N-[N-(芴基-9-甲氧基羰基)-D-天冬氨酰(β-叔丁基酯)]-batracyline如實施例2.1.a中描述的那樣將N-(芴基-9-甲氧基羰基)-D-天冬氨酰(β-叔丁基酯)(7.2g，17.5mmol)反應。真空濃縮之后，剩余物溶于二氯甲烷(1000ml)，混合物用1N鹽酸(2×200ml)和1N碳酸氫鈉溶液(1×200ml)洗滌。硫酸鎂(20g)干燥之后，過濾，濃縮至100ml，加入石油醚，以黃色結晶形式得到化合物2.7.a(9.7g，86％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.71；熔點＝195℃。2.7.b)N-[D-天冬氨酰-(β-叔丁基酯)]-batracyline將上面的化合物(6.4g，10mmol)溶于二氯甲烷(100ml)中。加入嗎啉(50m1)之后，室溫下攪拌混合物5小時，然后真空濃縮，剩余物用快速色譜提純[乙酸乙酯/石油醚4∶1→乙酸乙酯→乙酸乙酯/乙醇10∶1]。得到黃色結晶(3.44g，82％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.21；熔點＝209℃(分解)。2.7.c)N-[Nα，Nε-二-(叔丁氧基羰基)-賴氨酰-D-天冬氨酰-(β-叔丁基酯)]-batracyline如實施例2.2.a中描述的那樣使化合物2.7.b(2.1g，5mmol)反應，得到黃色晶體(1.71g，46％)；TLC[乙酸乙酯]Rf0.61；熔點142℃。2.7)N-[賴氨酰-D-天冬氨酰]-batracylme的雙三氟乙酸鹽如實施例2.2中描述的那樣將化合物2.7.c(1.65g，2.2mmol)反應并提純產(chǎn)物。得到黃色結晶(1.5g，95％)；TLC[甲醇/乙酸10∶1]Rf＝0.29；熔點＝154-155℃(分解)。實施例2.8N-[賴氨酰-D-谷氨酰]-batracyline的雙-氫溴酸鹽2.8.a)N-[N-(叔丁氧基羰基)-D-谷氨酰(β-芐基酯)]-batracyline如實施例2.1.a中描述的那樣將N-(叔丁氧基羰基)-D-谷氨酰(β-芐基酯)(5.9g，17.5mmol)反應。真空濃縮之后，剩余物用快速色譜提純[石油醚/乙酸乙酯1∶1]得到黃色結晶(9.45g，86％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.61；[α]20＝+53.1°(c＝1.0/CH2Cl2)；熔點＝159℃。2.8.b)N-[D-谷氨酰-(β-芐基酯)]-batracyline將化合物2.8.a(9.1g，10mmol)溶于甲酸(100ml)中，室溫下攪拌溶液6小時。真空濃縮之后，剩余物溶于甲醇(100ml)，通過小心地加入25％濃度的氨水溶液將溶液的pH值升至8。重新在真空濃縮，隨后用快速色譜提純[乙酸乙酯/乙醇10∶1]得到黃色油狀物(4.2g，56％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.06。2.8.c)N-[Nα，Nε-二-(叔丁氧基羰基)-賴氨酰-D谷氨酰-(β-芐基酯)]-batracyline如實施例2.2.a中描述的那樣將上面的化合物(3.75g，8mmol)反應并提純產(chǎn)物。得到黃色無定形固體(2.26g，35％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.40；[α]20＝+32.1°(c＝1.2/CH2Cl2)。2.8)N-[賴氨酰-D-谷氨酰]-batracyline二氫溴酸鹽將化合物2.8.c(2.0g，2.5mmol)溶于在冰醋酸(50ml)中的33％濃度的溴化氫溶液中。室溫下1小時之后，將物料真空濃縮，剩余物用乙醚徹底洗滌。得到紅黃色結晶產(chǎn)物(1.63g，98％)；熔點＝207-209℃(分解)。實施例2.9N-[賴氨酰-甘氨酰]-batracyline的雙-三氟乙酸鹽2.9.a)N-[N-(叔丁氧基羰基)-甘氨酰]-batracyline如實施例2.1.a中描述的那樣將N-(叔丁氧基羰基)-甘氨酰(3.07g，17.5mmol)反應。室溫下3天之后，真空濃縮混合物，剩余物溶于乙醇(200ml)?；旌衔镌诨亓鳁l件下攪拌30分鐘之后過濾，冷卻之后以黃色結晶形式得到目標化合物(4.73g，66％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.44；熔點＝279℃(分解)。2.9.b)N-甘氨酰-batracyline鹽酸鹽將上面的化合物(4.1g，10mmol)溶于二氯甲烷(1200ml)中，同時在超聲浴中加熱。加入在乙醚(100ml)中的氯化氫之后，室溫下攪拌混合物30分鐘，真空濃縮，剩余物中加入乙醇(200ml)?；旌衔镌诨亓鳁l件下攪拌10分鐘之后過濾，冷卻之后以黃色結晶形式得到產(chǎn)物(3.21g，94％)；熔點＝297-299℃(分解)。2.9.c)N-[Nα，Nε-二-(叔丁氧基羰基)-賴氨酰-甘氨酰]-batracyline將N，N-二-(叔丁氧基羰基)-賴氨酸(2.1g，6mmol)和2異丁氧基-1-異丁氧基羰基-1，2-二氫-喹啉(2.4ml，8mmol)溶于20ml二氯甲烷中。室溫下攪拌混合物20分鐘之后，加入化合物2.9.b(1.71g，5mmol)，乙基二異丙基胺(0.86ml，5mmol)和二甲基甲酰胺(40ml)的溶液，室溫下再攪拌物料16小時。然后真空濃縮，剩余物通過快速色譜提純[乙酸乙酯/石油醚1∶1→乙酸乙酯]。得到黃色結晶(1.69g，53％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.31；熔點＝211℃(分解)。2.9)N-[賴氨酰-甘氨酰]-batracyline雙-三氟乙酸鹽如實施例2.2中描述的那樣將化合物2.9.c(1.4g，2.2mmol)反應并提純產(chǎn)物。得到黃色結晶(1.33g，91％)；熔點＝153℃(分解)。實施例2.10N-[賴氨酰-絲氨酰]-batracyline雙-三氟乙酸鹽2.10.a)N-[N-(叔丁氧基羰基)-絲氨酰]-batracyline如實施例2.1.a中描述的那樣將N-(叔丁氧基羰基)-絲氨酸(3.6g，17.5mmol)反應。48小時之后，真空濃縮混合物至100ml并且向濃縮物中加入2升二氯甲烷。得到的溶液用水(1×500ml)，用0.5N鹽酸(2×250ml)和用飽和碳酸氫鈉水溶液(1×250ml)洗滌。硫酸鎂(50g)干燥，真空蒸出溶劑，剩余物經(jīng)過快速色譜[石油醚/乙酸乙酯1∶1]以黃色結晶形式得到化合物2.10.a(4.6g，64％)；TLC[乙酸乙酯/乙酸100∶1]Rf＝0.38；熔點＝219℃(分解)；[α]20＝-61.0°(c＝0.5/CH2Cl2+0.5％CH3OH)。2.10.b)N-絲氨酰-batracyline鹽酸鹽將濃鹽酸(10ml)加入上面的化合物(4.6g，10.4mmol)在二氧雜環(huán)己烷(70ml)中的懸浮液中，同時攪拌，然后在室溫下將混合物劇烈攪拌1小時。然后真空濃縮，剩余物在油泵真空下干燥2小時，加入乙醇(100ml)之后，混合物在回流下煮沸15分鐘。冷卻并且吸濾得到橙色結晶(1.97g，96％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.05；[α]20＝+51.8°(c＝1.0/H2O)；熔點大于270℃(分解)。2.10.c)N-[Nα，Nε-二-(叔丁氧基羰基)-賴氨酰-絲氨酰]-batracyline如實施例2.9.c中描述的那樣將化合物2.10.b(1.86g，5mmol)反應。通過快速色譜提純[乙酸乙酯/石油醚2∶1→乙酸乙酯]之后得到黃色結晶(1.18g，36％)；TLC[乙酸乙酯/乙酸100∶1]Rf＝0.24；熔點＝188℃(分解)；[α]20＝-13.1°(c＝0.5/CH2Cl2+0.5％CH3OH)。2.10)N-[賴氨酰-絲氨酰]-batracyline雙-三氟乙酸鹽如實施例2.2中描述的那樣將化合物2.10.c(1.0g，1.5mmol)反應并提純產(chǎn)物。得到黃色結晶(1.0g，96％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.10；熔點＝188-190℃(分解)。實施例2.11N-[賴氨酰-D-絲氨酰]-batracyline二氫溴酸鹽2.11.a)N-[N-(芴基-9-甲氧基羰基)-O-(叔丁基)-D-絲氨酰]-batracyline如實施例2.1.a中描述的那樣將N-(芴基-9-甲氧基羰基)-O-(叔丁基)-D-絲氨酸(6.7g，17.5mmol)反應。經(jīng)過真空濃縮和快速色譜[石油醚/乙酸乙酯1∶1]以黃色結晶形式得到化合物2.11.a(5.64g，52％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.87；熔點＝225-226℃(分解)。2.11.b)N-[O-(叔丁基)-D-絲氨酰]-batracyline如實施例2.7.b中描述的那樣將上面的化合物(2.89g，4.7mmol)反應。經(jīng)過快速色譜[石油醚/乙酸乙酯3∶2→乙酸乙酯]以黃色結晶得到產(chǎn)物(1.15g，62％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.11；熔點＝197℃。2.11.c)N-[Nα，Nε-二-(叔丁氧基羰基)-賴氨酰-O-(叔丁基)-D-絲氨酰]-batracyline如實施例2.2.a中描述的那樣將上面的化合物(1.1g，2.8mmol)反應。得到黃色結晶(1.94g，96％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.59；熔點＝208℃(分解)。2.11.d)N-[賴氨酰-O-(叔丁基)-D-絲氨酰]-batracyline雙-三氟乙酸鹽如實施例2.2中描述的那樣將化合物2.11.c(1.08g，1.5mmol)反應并提純產(chǎn)物。得到黃色結晶(1.1g，98％)；TLC[甲醇/乙酸10∶1]Rf＝0.30；熔點＝128℃。2.11)N-[賴氨酰-D-絲氨酰]-batracyline二-氫溴酸鹽如實施例2.8中描述的那樣將化合物2.11.d(1.05g，1.4mmol)反應并提純產(chǎn)物。得到黃色結晶(846mg，96％)；熔點＝247-248℃。實施例2.12N-[賴氨酰-D-蘇氨酰]-batracyline二氫溴酸鹽2.12.a)N-[N-(芴基-9-甲氧基羰基)-O-(叔丁基)-D-蘇氨酰]-batraeyline如實施例2.1.a中描述的那樣將N-(芴基-9-甲氧基羰基)-O-(叔丁基)-D-蘇氨酸(6.96g，17.5mmol)反應。經(jīng)過真空濃縮和快速色譜[石油醚/乙酸乙酯1∶1]以黃色結晶形式得到化合物2.12.a(745g，68％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.63；熔點＝225-226℃。2.12.b)N-[O-(叔丁基)-D-蘇氨酰]-batracyline如實施例2.7.b中描述的那樣將化合物2.12.a(3.8g，6mmol)反應。真空濃縮之后，得到黃色結晶產(chǎn)物(1.9g，78％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.21；熔點＝110-111℃。2.12.c)N-[Nα，Nε-二-(叔丁氧基羰基)-賴氨酰-O-(叔丁基)-D-蘇氨酰]-batracyline如實施例2.2.a中描述的那樣將化合物2.12.b(1.8g，4.5mmol)反應。得到黃色結晶(2.6g，79％)；TLC[乙酸乙酯]Rf＝0.59；熔點＝112℃，2.12.d)N-[賴氨酰-O-(叔丁基)-D-蘇氨酰]-batracyline雙-三氟乙酸鹽如實施例2.2中描述的那樣將上面的化合物(2.5g，3.4mmol)反應并提純產(chǎn)物。得到黃色結晶(2.5g，96％)；TLC[甲醇/乙酸10∶1]Rf＝0.30；熔點＝142℃(分解)。2.12)N-[賴氨酰-D-蘇氨酰]-batracyline二-氫溴酸鹽如實施例2.8中描述的那樣將化合物2.12.d(2.29g，3mmol)反應并提純產(chǎn)物。得到紅黃色結晶(1.86g，97％)；熔點＝232℃(分解)。實施例2.13N-[賴氨酰-D-丙氨酰]-batracyline雙-三氟乙酸鹽2.13.a)N-[Nα，Nε-二-(叔丁氧基羰基)-賴氨酰-D-丙氨酰]-batracyline將6g(17.3mmol)Nα，Nε-二-(叔丁氧基羰基)-賴氨酸溶于75ml二甲基甲酰胺，在0℃加入3g(26mmol)N-羥基琥珀酰亞胺和4.29g(20.8mmol)N，N’-二環(huán)己基碳化二亞胺。3小時之后，濾出生成的脲，濾液中加入5g(15.6mmol)N-[D-丙氨酰]-batracyline(實施例2.3)，混合物在20℃攪拌16小時。濾掉殘余的脲并除去。濃縮濾液，剩余物與甲醇攪拌，過濾混合物。再濃縮濾液，剩余物再用甲醇處理。再過濾混合物，合并濾渣。將它們?nèi)苡诙燃淄?甲醇10∶1，產(chǎn)物用乙醚沉淀。得到8.22g(81％)目標產(chǎn)物結晶。2.13)N-[賴氨酰-D-丙氨酰]-batracyline二-三氟乙酸鹽類似于實施例2.2從8.2g化合物2.13.a制備。產(chǎn)量7.58g(89％)。實施例2.14N-[Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酰]-batracyline三氟乙酸鹽2.14.a)N-[Nα-(叔丁氧基羰基)-Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酰]-batracyline類似于實施例2.4.a從Nα-(叔丁氧基羰基)-Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酸和batracyline制備。產(chǎn)率78％。2.14)N-[Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酰]-batracyline三氟乙酸鹽類似于實施例2.5從化合物2.14.a制備。產(chǎn)率90％。實施例2.15N-[賴氨酰-Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酰]-batracyline雙-三氟乙酸鹽2.15.a)N-[Nα，Nε-二-(叔丁氧基羰基)-賴氨酰-Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酰]-batracyline將3240mg(4.54mmol)化合物2.14溶于50ml二甲基甲酰胺，加入2550mg(5.45mmol)Nα，Nε-二-(叔丁氧基羰基)-賴氨酸對-硝基苯基酯和938微升乙基二異丙基胺。在20℃攪拌混合物16小時，濃縮，剩余物開始與乙醚攪拌。過濾混合物，濾渣再與甲醇/乙醚1∶1進行攪拌。經(jīng)過吸濾和干燥之后以這種方式得到目標產(chǎn)物3881mg(92％)。2.15)N-[賴氨酸-Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酰]-batracyline雙-三氟乙酸鹽類似于實施例2.2用無水三氟乙酸/二氯甲烷1∶1脫保護化合物2.15.a。產(chǎn)率95％。實施例2.16N-[賴氨酰-Nβ-(芴基-9-甲氧基羰基)-α，β-二氨基丙?；鵠-batracyline雙-三氟乙酸鹽類似于實施例2.14和2.15經(jīng)過4步從batracyline和Nα-(叔丁氧基羰基)-Nβ-(芴基-9-甲氧基羰基)-二氨基丙酸制備該肽共軛體。實施例2.17N-[賴氨酰]-batracyline類似于實施例2.4從N-[Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酰]-batracyline三氟乙酸鹽(實施例2.14)裂解Fmoc。產(chǎn)率65％。實施例2.18N-[絲氨酰-D-丙氨酰]-batracyline三氟乙酸鹽2.18.a)N-[N-(叔丁氧基羰基)-絲氨酰-D-丙氨酰]-batracyline類似于實施例2.13.a從N-(叔丁氧基羰基)-絲氨酸和N-[D-丙氨酰]-batracyline(實施例2.3)制備。產(chǎn)率77％。2.18)N-[絲氨酰-D-丙氨酰]-batracyline三氟乙酸鹽類似于實施例2.2從化合物2.18.a制備。產(chǎn)率98％。實施例2.19N-[D-丙氨酰-D-丙氨酰]-batracyline三氟乙酸鹽類似于實施例2.18經(jīng)過2步制備。實施例2.20N-[谷氨酰-D-丙氨酰]-batracyline類似于實施例2.18從N-叔丁氧基羰基-谷氨酰-δ-叔丁基酯和N-[D-丙氨酰]-batracyline(實施例2.3)通過2步制備。裂解Boc之后，濃縮混合物，剩余物溶于水，用0.1N氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至7，吸濾甜菜堿。實施例3.1-3.34通式實施例3.1N-{Nε-[O-(β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline3.1.a)N-{Nα-(叔丁氧基羰基)-Nε-[O-(β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracylinc將硫光氣(34微升，0.44mmol)加入在10ml1∶1的二氧雜環(huán)己烷/水中的55mg(0.22mmol)對-氨基苯基β-L-巖藻糖苷中，同時攪拌。10分鐘之后，真空濃縮混合物，剩余物在高真空度下干燥1小時。然后將得到的異硫氰酸酯在無水二甲基甲酰胺中在115微升乙基二異丙基胺存在下與109mg(0.21mmol)N-[Nα-(叔丁氧基羰基)-賴氨酰-D-丙氨酰]-batracyline(實施例2.4)偶合。將粗產(chǎn)物從甲醇/異丙醇沉淀兩次之后，得到目標產(chǎn)物132mg(75％)。[TLC二氯甲烷/甲醇9∶1Rf＝0.15]。3.1)N-{Nε-O-(β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline在0℃將來自實施例3.1.a的化合物127mg(0.15mmol)在10ml二氯甲烷中與6ml無水三氟乙酸攪拌2小時。濃縮混合物，隨后將剩余物與5ml二氯甲烷蒸餾3次，產(chǎn)物用二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2色譜分離。冷凍干燥之后得到89mg(71％)目標產(chǎn)物。[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶0.4Rf＝0.3]。類似于實施例3.1，從實施例2.4中的部分被保護的肽共軛體或從被類似制備的異構體N-[Nα-(叔丁氧基羰基)-賴氨酰-丙氨酰]-batracyline制備下列的糖共軛體實施例3.2N-{Nε-[O-(2-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物來自實施例1.1的糖用快速色譜使用二氯甲烷/甲醇95∶5進行中間體提純步驟和使用二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2進行最后的提純步驟。產(chǎn)率55％[TLC∶二氯甲烷/甲醇/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.4]。實施例3.3N-{Nε-[O-(2-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-丙氨酰}batracyline離析物來自實施例1.1的糖通過從二氯甲烷/甲醇95∶5沉淀進行中間體提純步驟和用快速色譜使用二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2進行最后的提純步驟。產(chǎn)率65％[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2Rf＝0.21]。實施例3.4N-{Nε-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物來自實施例1.2的糖用快速色譜使用二氯甲烷/甲醇97.5∶2.5進行中間體提純步驟和用乙醚從甲醇進行最后的沉淀步驟；產(chǎn)率59％[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2Rf＝0.19]。實施例3.5N-{Nε-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-丙氨酰}-batracyline離析物來自實施例1.2的糖通過用乙醚從二氯甲烷/甲醇1∶1沉淀進行中間體提純步驟和用快速色譜使用二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2進行最后的提純步驟。產(chǎn)率36％[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶0.5Rf＝0.57]。實施例3.6N-{Nε-[O-(3-O-甲基-α-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物來自實施例1.3的糖通過用乙醚從甲醇沉淀進行中間體提純步驟和用快速色譜使用二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2進行最后的提純步驟。產(chǎn)率44％[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2Rf＝0.15]。實施例3.7N-{Nε-[O-(3-脫氧-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物來自實施例1.6的糖用快速色譜使用二氯甲烷/甲醇95∶5進行中間體提純步驟和用乙醚從甲醇進行最后的沉淀步驟；產(chǎn)率35％[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.42]。實施例3.8N-{Nε-[O-(3，4-環(huán)氧-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物來自實施例1.8的糖用快速色譜使用二氯甲烷/甲醇95∶5進行中間體提純步驟。用乙醚從甲醇進行數(shù)次最后的沉淀步驟，隨后用乙酸乙酯攪拌。[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.49]。實施例3.9N-{Nε-[O-(3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline鈉鹽離析物來自實施例1.10的糖通過用甲醇攪拌和用乙醚完全沉淀進行中間體提純步驟。用快速色譜使用二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶3∶0.3；然后用15∶6∶0.6的相同的系統(tǒng)進行最后的提純步驟。濃縮相應的餾分，剩余物溶于水，用0.1N氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至7。吸濾混合物，濾渣溶于1∶3的二甲基甲酰胺/水，加入1當量的0.1N氫氧化鈉溶液。濃縮混合物，鈉鹽溶于水并冷凍干燥。產(chǎn)率43％。[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶0.5Rf＝0.15]。實施例3.10N-(Nε-[O-(3-0-氨基甲酰基甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline鈉鹽離析物來自實施例1.18的糖通過用甲醇攪拌和用乙醚完成沉淀進行中間體提純步驟。用快速色譜使用二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2進行最后的提純步驟。[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶3∶0.3Rf＝0.38]。熔點190℃(分解)。實施例3.11N-{Nε-[O-(4-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline乙酸鹽離析物來自實施例1.4的糖用快速色譜通過使用二氯甲烷/甲醇95∶5進行中間體提純步驟和使用二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2進行最后的提純步驟。濃縮之后，剩余物中加入1當量冰醋酸和10ml水，冷凍干燥混合物。產(chǎn)率52％[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.43]。熔點。FAB-MSm/z＝760＝M+1。實施例3.12N-{Nε-[O-(α-D-葡糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物對-氨基苯基α-D-葡糖苷通過用甲醇攪拌和用乙醚完全沉淀進行中間體提純步驟和最后的提純步驟。產(chǎn)率83％[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶8∶0.8Rf＝0.48]。實施例3.13N-{Nε-[O-(α-D-葡糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物對-氨基苯基α-D-葡糖苷類似于制備實施例3.12產(chǎn)物的異構體。實施例3.14N-{Nε-[O-(3-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽3.14.a)N-{Nα-(叔丁氧基羰基)-Nε-[O-(3-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline將硫光氣(33.5ml，0.44mmol)加入化合物1.25(62.8mg，0.22mmol)在1∶1的二氧雜環(huán)己烷/水(10ml)中的溶液中，同時攪拌。10分鐘之后，真空濃縮混合物，剩余物在油泵真空下干燥1小時。將得到的異硫氰酸酯溶于無水二甲基甲酰胺(10ml)中，加入化合物2.4(109.7mg，0.2mmol)和乙基二異丙基胺(0.5ml)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?6小時，然后真空濃縮，剩余物通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇20∶1]。得到黃色結晶(108.3mg，62％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝0.42；熔點＝194-195℃(分解)。3.14)N-{Nε-[O-(3-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽如實施例2.2中描述的那樣從化合物3.14.a(105.1mg，0.12mmol)裂解叔丁氧基羰基。真空濃縮之后，從甲醇/乙醚再沉淀，得到黃色結晶(57.4mg，54％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝0.16；熔點＝188-189℃(分解)。類似于實施例3.14.a和3.14，從肽共軛體24(在每種情況下109.7mg，0.2mmol)制備下列的糖共軛體實施例3.15N-{Nε-[O-(β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物糖1.23(59.7mg，0.22mmol)用快速色譜進行中間體提純步驟[二氯甲烷/甲醇10∶1]得到黃色結晶(79.5mg，46％)；TLC[甲醇]Rf＝0.74；熔點＝182℃。如實施例3.14中描述的那樣進行最終產(chǎn)物的提純得到黃色結晶(77.1mg，44％)；TLC[甲醇]Rf＝0.27；熔點＝191-192℃(分解)。實施例3.16N-{Nε-[O-(3，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}batracyline三氟乙酸鹽離析物糖1.31(79mg，0.22mmol)用快速色譜進行中間體提純步驟[二氯甲烷/甲醇30∶1→20∶1]得到黃色結晶(150.7mg，85％)；TLC[二氯甲烷/甲醇10∶1]Rf＝0.35；熔點＝197-199℃(分解)。如實施例3.14中描述的那樣進行最終產(chǎn)物的提純得到黃色結晶(137mg，76％)；TLC[二氯甲烷/甲醇10∶1]Rf＝0.13；熔點＝184-186℃(分解)。實施例3.17N-{Nε-[O-(3-O-甲氧基羰基甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}batracyline三氟乙酸鹽離析物糖1.42(75.5mg，0.22mmol)用快速色譜進行中間體提純步驟[二氯甲烷/甲醇30∶1→25∶1]得到黃色結晶(124.1mg，66％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.50；熔點＝165℃。如實施例3.14中描述的那樣進行最終產(chǎn)物的提純得到黃色結晶(107.8mg，57％)；TLC[二氯甲烷/甲醇4∶1]Rf＝0.53；熔點＝183℃(分解)。實施例3.18N-{Nε-[O-(3-O-羧甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物糖1.43(77.3mg，0.22mmol)通過從乙醇/乙醚再沉淀進行中間體提純步驟得到鈉鹽黃色結晶(172mg，91％)；TLC[甲醇]Rf＝0.71；熔點＝225-228℃。如實施例3.14中描述的那樣進行最終產(chǎn)物的提純得到黃色結晶(1365mg，73％)；TLC[甲醇]Rf＝0.12；熔點＝217-220℃(分解)。實施例3.19N-(Nε-[O-(3-O-氨基甲?；谆?β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物糖1.44(72.2mg，0.22mmol)用快速色譜進行中間體提純步驟[二氯甲烷/甲醇10∶1]得到黃色結晶(137.7mg，75％)；TLC[二氯甲烷/甲醇4∶1]Rf＝0.41；熔點＝198-201℃(分解)。如實施例3.14中那樣進行最終產(chǎn)物的提純得到黃色結晶(140.2mg，75％)；TLC[二氯甲烷/甲醇4∶1]Rf＝0.16；熔點＝188-190℃(分解)。實施例3.20N-(Nε-[O-(3-O-(N-甲基-氨基甲?；谆?-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物糖1.45(75.3mg，0.22mmol)用快速色譜進行中間體提純步驟[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)7∶1∶0.1]得到黃色結晶(158.4mg，85％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.25；熔點＝161-163℃(分解)。如實施例3.14中那樣進行最終產(chǎn)物的提純得到黃色結晶(132.5mg，70％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.10；熔點＝191-193℃(分解)。實施例3.21N-{Nε-[O-(3-O-(N-丙基-氨基甲?；谆?-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物糖1.46(81.35mg，0.22mmol)用快速色譜進行中間體提純步驟[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)8∶1∶0.1]得到黃色結晶(153.1mg，80％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.33；熔點＝1.87℃(分解)。如實施例3.14中那樣進行最終產(chǎn)物的提純得到黃色結晶(154.9mg，79％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.21；熔點＝179℃。實施例3.22N-{Nε-[O-(3-O-(N-丁基-氨基甲?；谆?-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物糖1.47(84.6mg，0.22mmol)用快速色譜進行中間體提純步驟[二氯甲烷/甲醇12∶1]得到黃色結晶(132.7mg，68％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.54；熔點＝180-182℃。如實施例3.14中那樣進行最終產(chǎn)物的提純得到黃色結晶(115.2mg，58％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.30；熔點＝176℃。實施例3.23N-{Nε-[O-(3，4-二脫氧-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物糖1.52(52.6mg，0.22mmol)用快速色譜進行中間體提純步驟[二氯甲烷/甲醇25∶1]得到黃色結晶(127.4mg，77％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.60；熔點＝166-167℃。如實施例3.14中那樣進行最終產(chǎn)物的提純得到黃色結晶(1031.mg，61％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.44；熔點＝173-175℃(分解)。實施例3.24N-{Nε-[O-(6-O-乙?；?β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物糖1.53(78.2mg，0.22mmol)用快速色譜進行中間體提純步驟[二氯甲烷/甲醇25∶1]得到黃色結晶(88.3mg，49％)；TLC[二氯甲烷/甲醇4∶1]Rf＝0.61；熔點＝196-199℃(分解)。如實施例3.14中那樣進行最終產(chǎn)物的提純得到黃色結晶(89.6mg，49％)；TLC[二氯甲烷/甲醇4∶1]Rf＝0.31；熔點＝186℃(分解)。實施例3.25N-{Nε-[O-(α-D-吡喃甘露糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物糖1.39(59.7mg，0.22mmol)用快速色譜進行中間體提純步驟[二氯甲烷/甲醇10∶1]得到黃色結晶(101.7mg，59％)；TLC[甲醇]Rf＝0.79；熔點＝180℃(分解)。如實施例3.14中那樣進行最終產(chǎn)物的提純得到黃色結晶(1031.mg，59％)；TLC[甲醇]Rf＝0.34；熔點＝177-178℃(分解)。實施例3.26N-{Nε-[O-(3-O-甲基-α-D-吡喃甘露糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物糖1.40(62.8mg，0.22mmol)用快速色譜進行中間體提純步驟[二氯甲烷/甲醇20∶1]得到黃色結晶(56.6mg，32％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝0.38；熔點＝191-192℃(分解)。如實施例3.14中那樣進行最終產(chǎn)物的提純得到黃色結晶(46.6mg，26％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝0.13；熔點＝190-191℃(分解)。實施例3.27N-{Nε-[O-(2，3-二-O-甲基-α-D-吡喃甘露糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物糖1.41(66mg，0.22mmol)用快速色譜進行中間體提純步驟[二氯甲烷/甲醇25∶1]得到黃色結晶(77.8mg，44％)；TLC[二氯甲烷/甲醇4∶1]Rf＝0.65；熔點＝182-183℃(分解)。如實施例3.14中那樣進行最終產(chǎn)物的提純得到黃色結晶(66.1mg，37％)；TLC[二氯甲烷/甲醇4∶1]Rf＝0.40；熔點＝181℃。實施例3.28N-{Nε-[O-(3-O-甲氧基羰基甲基-α-D-吡喃甘露糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物糖1.48(75.5mg，0.22mmol)用快速色譜進行中間體提純步驟[二氯甲烷/甲醇18∶1]得到黃色結晶(62.1mg，33％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.66；熔點＝165℃。如實施例3.14中那樣進行最終產(chǎn)物的提純得到黃色結晶(57.6mg，30％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.43；熔點＝183-184℃。實施例3.29N-{Nε-[O-(3-O-羧甲基-α-D-吡喃甘露糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物糖1.49(77.3mg，0.22mmol)通過從乙醇/乙醚再沉淀進行中間體提純步驟得到鈉鹽黃色結晶(173.4mg，92％)；TLC[甲醇]Rf＝0.57；熔點＝201-205℃(分解)。如實施例3.14中那樣進行最終產(chǎn)物的提純得到黃色結晶(171.7mg，92％)；TLC[甲醇]Rf＝0.29；熔點＝196-198℃(分解)。實施例3.30N-{Nε-[O-(3-O-氨基甲?；谆?α-D-吡喃甘露糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物糖1.50(72.2mg，0.22mmol)用快速色譜進行中間體提純步驟[二氯甲烷/甲醇10∶1]得到黃色結晶(106.6mg，58％)；TLC[二氯甲烷/甲醇4∶1]Rf＝0.34；熔點＝192-194℃(分解)。如實施例3.14中那樣進行最終產(chǎn)物的提純得到黃色結晶(107.7mg，58％)；TLC[二氯甲烷/甲醇4∶1]Rf＝0.13；熔點＝186-187℃(分解)。實施例3.31N-{Nε-[O-(3，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline3.31.a)N-{Nα-(芴基-9-甲氧基羰基)-Nε-[O-(3，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline將硫光氣(33.5ml，0.44mmol)加入化合物1.31(79mg，0.22mmol)在1∶1的二氧雜環(huán)己烷/水(10ml)中的溶液中。10分鐘之后，真空濃縮混合物，剩余物在油泵真空下干燥1小時。將得到的異硫氰酸酯溶于無水二甲基甲酰胺(10ml)中，加入化合物2.5(157mg，0.2mmol)和乙基二異丙基胺(0.5ml)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?6小時，然后真空濃縮，剩余物溶于1∶1的二氯甲烷/甲醇中。通過加入乙醚使產(chǎn)物沉淀，用少量冰冷的甲醇洗滌。得到黃色結晶(191mg，94％)TLC[二氯甲烷/甲醇10∶1]Rf＝0.35；熔點＝203℃(分解)。3.31)N-{Nε-[O-(3，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例2.4中描述的那樣從化合物3.31.a(182.2mg，0.18mmol)裂解芴基-9-甲氧基羰基。真空濃縮之后溶于1∶1的甲醇/二氯甲烷，通過加入乙醚使產(chǎn)物沉淀。得到黃色結晶(127.1mg，89％)；TLC[甲醇]Rf＝0.46；熔點＝158℃。類似于實施例3.31.a和3.31，從肽共軛體2.5(在每種情況下157mg，0.2mmol)制備下列的糖共軛體實施例3.32N-{Nε-[O-(3-O-(哌啶基-N)-羰基甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物糖1.42(75.5mg，0.22mmol)如實施例3.31.a中描述的那樣進行中間體提純步驟；得到黃色結晶(191.2mg，91％)；TLC[二氯甲烷/甲醇10∶1]Rf＝0.28；熔點＝208℃(分解)。如實施例3.31中描述的那樣進行最終產(chǎn)物的提純得到黃色結晶(155.8mg，88％)；TLC[甲醇]Rf＝0.47；熔點＝120℃(分解)。實施例3.33N-{Nε-[O-(3-O-羧甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline鈉鹽離析物糖1.43(77.3mg，0.22mmol)如實施例3.31.a中描述的那樣進行中間體提純步驟；得到黃色結晶(192mg，90％)；TLC[乙醇/甲醇1∶1]Rf＝0.05；熔點＝211-213℃(分解)。如實施例3.31中描述的那樣進行最終產(chǎn)物的提純得到黃色結晶(110.6mg，66％)；TLC[甲醇]Rf＝0.33；熔點＝233-235℃(分解)。實施例3.34N-(Nε-[O-(3-O-氨基甲?；谆?β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物糖1.44(72.2mg，0.22mmol)如實施例3.31.a中描述的那樣進行中間體提純步驟；得到黃色結晶(159.2mg，76％)；TLC[二氯甲烷/甲醇10∶1]Rf＝0.04；熔點＝177℃(分解)。如實施例3.31中描述的那樣進行最終產(chǎn)物的提純得到黃色結晶(125.1mg，76％)；TLC[甲醇]Rf＝0.48；熔點＝106℃(分解)。實施例4.1-4.12通式實施例4.14.1.a)N-{Nα-[O-(β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline根據(jù)實施例3.1a中的方法首先將140mg(0.55mmol)對-氨基苯基β-L-巖藻糖苷轉化成異硫氰酸酯，然后將產(chǎn)物與430mg(0.55mmol)N-[Nα-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酰-D-丙氨酰]-batracyline三氟乙酸鹽(實施例2.5)在375微升乙基二異丙基胺存在下偶合。從甲醇/二氯甲烷沉淀之后，粗產(chǎn)物通過快速色譜(乙腈/水10∶1)提純。剩余物與乙醚攪拌之后得到目標產(chǎn)物358mg(67％)。[TLC乙腈/水10∶1Rf＝0.48]。4.1)N-{Nα-[O-(β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline將來自實施例4.1.a的化合物356mg(0.37mmol)溶于10ml二甲基甲酰胺和5ml哌啶中，溶液在20℃攪拌1小時。濃縮混合物，剩余物用二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶6∶0.6色譜分離。以46％的產(chǎn)率得到目標產(chǎn)物。[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶0.5Rf＝0.11]。類似于實施例4.1，從部分被保護的肽共軛體2.5制備下列的糖共軛體實施例4.2N-{Nα-[O-(3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline鈉鹽離析物來自實施例1.10的糖用色譜使用二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶3∶0.3；然后使用15∶4∶0.5的相同系統(tǒng)進行中間體提純步驟。在甜菜堿步驟通過與水攪拌提純最終產(chǎn)物；隨后用0.1N氫氧化鈉溶液轉化成鈉鹽，從二氧雜環(huán)己烷/水冷凍干燥。產(chǎn)率65％；熔點＝220℃。實施例4.3N-{Nα-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物來自實施例1.2的糖通過用二氯甲烷和乙醚沉淀進行中間體提純步驟；通過用乙醚從二甲基甲酰胺沉淀數(shù)次提純最終產(chǎn)物。產(chǎn)率88％[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.28]。實施例4.4N-{Nα-[O-(4-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物來自實施例1.4的糖通過用乙醚從二氯甲烷/甲醇1∶1數(shù)次沉淀進行中間體提純步驟；用柱色譜提純最終產(chǎn)物[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶8∶0.8]，用乙醚從二氯甲烷/甲醇1∶1沉淀。產(chǎn)率74％[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)10∶10∶1Rf＝0.19]。實施例4.5N-{Nα-[O-(3，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline4.5.a)N-{Nα-[O-(3，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基-Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline將硫光氣(33.5ml，0.44mmol)加入化合物1.31(79mg，0.22mmol)在1∶1的二氧雜環(huán)己烷/水(10ml)中的溶液中。10分鐘之后，真空濃縮混合物，剩余物在油泵真空下干燥1小時。將得到的異硫氰酸酯溶于無水二甲基甲酰胺(10ml)中，加入化合物2.6(157mg，0.2mmol)和乙基二異丙基胺(0.5ml)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?6小時，然后真空濃縮。剩余物從1∶1的二氯甲烷/甲醇中利用乙醚數(shù)次沉淀，最后用少量冰冷的甲醇洗滌得到黃色結晶(198mg，98％)；TLC[二氯甲烷/甲醇10∶1]Rf＝0.23；熔點＝175℃。4.5)N-{Nα-[O-(3，4-二-O)-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例2.4中描述的那樣從化合物4.5.a(172.1mg，0.17mmol)裂解芴基-9-甲氧基羰基。真空濃縮之后溶于1∶1的甲醇/二氯甲烷，通過加入乙醚使產(chǎn)物沉淀。得到黃色結晶(114.5mg，85％)；TLC[二氯甲烷/甲醇1∶1]Rf＝0.16；熔點＝206℃(分解)。類似于實施例4.5.a和4.5，從肽共軛體2.6(在每種情況下157mg，0.2mmol)制備下列的糖共軛體實施例4.6N-{Nα-[O-(β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物糖1.23(59.7mg，0.22mmol)如實施例4.5.a中描述的那樣進行中間體提純步驟；得到黃色結晶(185.8mg，94％)；TLC[二氯甲烷/甲醇10∶1]Rf＝0.09；熔點＝182℃(分解)。如實施例4.5中描述的那樣進行最終產(chǎn)物的提純得到黃色結晶(134.3mg，88％)；TLC[二氯甲烷/甲醇1∶1]Rf＝0.04；熔點＝221℃(分解)。實施例4.7N-{Nα-[O-(3-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物糖1.25(62.8mg，0.22mmol)如實施例4.5.a中描述的那樣進行中間體提純步驟；得到黃色結晶(193.5mg，97％)；TLC[二氯甲烷/甲醇10∶1]Rf＝0.27；熔點＝178℃(分解)。用快速色譜進行最終產(chǎn)物的提純[二氯甲烷/甲醇2∶1→1∶1]得到黃色結晶(130.5mg，84％)；TLC[二氯甲烷/甲醇1∶1]Rf＝0.09；熔點＝206℃(分解)。實施例4.8N-{Nα-[O-(3-O-甲氧基羰基甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物糖1.42(75.5mg，0.22mmol)如實施例4.5.a中描述的那樣進行中間體提純步驟；得到黃色結晶(209.8mg，99％)；TLC[二氯甲烷/甲醇10∶1]Rf＝0.32；熔點＝235℃(分解)。如實施例4.5中描述的那樣進行最終產(chǎn)物的提純得到黃色結晶(164.3mg，99％)；TLC[二氯甲烷/甲醇1∶1]Rf＝0.05；熔點＝217℃(分解)。實施例4.9N-{Nα-[O-(3-O-羧甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline鈉鹽離析物糖1.43(77.3mg，0.22mmol)如實施例4.5.a中描述的那樣進行中間體提純步驟；得到黃色結晶(210.3mg，99％)；TLC[二氯甲烷/甲醇10∶1]Rf＝0.02；熔點＝185℃。如實施例4.5中描述的那樣進行最終產(chǎn)物的提純之后，剩余物懸浮于水(10ml)中，在攪拌下向懸浮液中滴加0.05N氫氧化鈉溶液直到溶液變清(pH小于10)。將過濾后的溶液冷凍干燥得到黃色無定形固體(150.8mg，90％)；TLC[二氯甲烷/甲醇1∶1]Rf＝0.04。實施例4.10N-{Nα-[O-(3-O-氨基甲?；谆?β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物糖1.44(72.2mg，0.22mmol)如實施例4.5.a中描述的那樣進行中間體提純步驟；得到黃色結晶(152.7mg，73％)；TLC[二氯甲烷/甲醇10∶1]Rf＝0.11；熔點＝229℃(分解)。如實施例4.5中描述的那樣進行最終產(chǎn)物的提純之后，剩余物懸浮于水/二氧雜環(huán)己烷1∶1(20ml)中。將過濾后的溶液冷凍干燥得到黃色無定形固體(98.4mg，61％)；TLC[二氯甲烷/甲醇1∶1]Rf＝0.10；[α]20＝+44.9°(c＝0.2/H2O)。實施例4.11N-{Nα-[O-(α-D-吡喃甘露糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物糖1.39(59.7mg，0.22mmol)如實施例4.5.a中描述的那樣進行中間體提純步驟；得到黃色結晶(179.6mg，91％)；TLC[二氯甲烷/甲醇10∶1]Rf＝0.07；熔點＝176℃(分解)。如實施例4.5中描述的那樣進行最終產(chǎn)物的提純得到黃色結晶(137.5mg，90％)；TLC[二氯甲烷/甲醇1∶1]Rf＝0.09；熔點＝213℃(分解)。實施例4.12N-{Nα-[O-(3-O-甲基-α-D-吡喃甘露糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物糖1.40(62.8mg，0.22mmol)如實施例4.5.a中描述的那樣進行中間體提純步驟；得到黃色結晶(94.2mg，48％)；TLC[二氯甲烷/甲醇10∶1]Rf＝0.13；熔點＝173℃(分解)。如實施例4.5中描述的那樣進行最終產(chǎn)物的提純得到黃色結晶(66.6mg，43％)；TLC[二氯甲烷/甲醇1∶1]Rf＝0.07；熔點＝215℃(分解)。實施例5.1-5.23通式實施例5.1N-{Nα-[O-(3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-Nε-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline將30微升(0.18mmol)硫光氣加入在10ml1∶1的二氧雜環(huán)己烷/水中的50mg(0.16mmol)對-氨基苯基3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖苷(實施例1.10)中，同時攪拌。10分鐘之后，真空濃縮混合物，剩余物在高真空度下干燥1小時。然后將得到的異硫氰酸酯在無水二甲基甲酰胺中在82微升乙基二異丙基胺存在下與109mg(0.144mmol)來自實施例3.4的共軛體偶合。濃縮混合物，剩余物通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶0.5]。將濃縮后得到的物質(zhì)從水中冷凍干燥。產(chǎn)率89mg(56％)。[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶6∶0.6Rf＝0.22]。類似于實施例5.1制備下列帶有混合取代基的共軛體實施例5.2N-{Nα-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-Nε-[O-(3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物來自實施例1.2的糖，來自實施例3.10的共軛體粗產(chǎn)物通過用乙醚從甲醇中沉淀提純。產(chǎn)率78％[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.45]。實施例5.3N-{Nα-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-Nε-[4-羥基苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物來自實施例4.3的共軛體，4-羥基-苯胺通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2]；產(chǎn)率60％[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2Rf＝0.31]。實施例5.4N-{Nα-[O-(3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-Nε-[4-羥基苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物來自實施例4.2的共軛體，4-羥基-苯胺通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶0.5]。然后將剩余物與甲醇/乙醚攪拌。產(chǎn)率55％[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶6∶0.6Rf＝0.3]。實施例5.5N-{Nα-[O-(4-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基苯基氨基硫代羰基]-Nε-[4-羥基苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物來自實施例4.4的共軛體，4-羥基-苯胺通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2]。然后將剩余物用乙醚從甲醇/二氯甲烷沉淀。產(chǎn)率49％，熔點＝128℃[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2Rf＝0.26]。實施例5.6N-{Nα-[4-羥基苯基氨基硫代羰基]-Nε-[O-(4-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物來自實施例3.11的共軛體，4-羥基-苯胺通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2]。然后將剩余物從水/二氧雜環(huán)己烷冷凍干燥。產(chǎn)率50％[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2Rf＝0.29]。實施例5.7N-{Nα-[4-羥基苯基氨基硫代羰基]-Nε-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物來自實施例3.4的共軛體，4-羥基-苯胺剩余物用乙醚從甲醇沉淀。產(chǎn)率76％[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2Rf＝0.26]。實施例5.8N-{Nα-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基苯基氨基硫代羰基]-Nε-[4-羥基乙基氨基-2-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基苯基氨基]三嗪-6基]]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物來自實施例8.10的共軛體，來自實施例1.2的糖通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2]。產(chǎn)率9％；FAB-MSm/z＝1165＝M+1；[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶3∶0.3Rf＝0.27]。實施例5.9N-{Nα-[O-(3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基苯基氨基硫代羰基]-Nε-[乙酰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物N-[Nε-(乙?；?-賴氨酰-D-丙氨酰]-batracyline，來自實施例1.10的糖通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2；然后用15∶4∶0.5的相同系統(tǒng)]。然后剩余物從水冷凍干燥。產(chǎn)率46％[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.31]。實施例5.10N-{Nα-[O-(4-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基苯基氨基硫代羰基]-Nε-[乙酰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline將10微升乙酸酐加入在5ml二甲基甲酰胺中的51mg(0.067mmol)來自實施例4.4的共軛體中，室溫下攪拌混合物30分鐘。濃縮，剩余物從甲醇中用乙醚沉淀。產(chǎn)率46mg(86％)[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.6]。實施例5.11N-{Nα-[O-(β-L-巖藻糖基)-4-羥基苯基氨基硫代羰基]-Nε-[琥珀?；鵠-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline鈉鹽將3mg琥珀酸酐加入在2ml二甲基甲酰胺中的20mg(0.027mmol)來自實施例4.1的共軛體中，室溫下攪拌混合物6小時。濃縮，剩余物從甲醇中用乙醚沉淀。剩余物溶于水，加入27微升0.1N氫氧化鈉溶液。產(chǎn)率20mg(86％)[TLC二氯甲烷/甲醇/冰醋酸80∶20∶2Rf＝0.2]。實施例5.12N-{Nα-[O-(3-O-甲氧基羰基甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-Nε-[O-(3，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例3.31.a中描述的那樣將糖1.42(37.7mg，0.11mmol)與肽共軛體3.31(79mg，0.1mmol)反應。真空濃縮之后用快速色譜分離[二氯甲烷/甲醇20∶1→10∶1]，得到黃色結晶(52.9mg，45％)；TLC[二氯甲烷/甲醇10∶1]Rf＝0.14；熔點＝178℃(分解)。實施例5.13N-{Nα-[O-(3-O-羧甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-Nε-[O-(3，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline鈉鹽如實施例3.31.a中描述的那樣將糖1.43(38.6mg，0.11mmol)與肽共軛體3.31(79mg，0.1mmol)反應。真空濃縮之后溶于1∶1的甲醇/二氯甲烷中，通過加入乙醚使產(chǎn)物沉淀。剩余物懸浮于水(10ml)中，其中加入0.05N氫氧化鈉溶液并且攪拌，直到溶液變清(pH小于10)。將過濾后的溶液冷凍干燥得到黃色無定形固體(87.9mg，74％)；TLC[乙醇]Rf＝0.17；[α]20＝+56.0°(c＝0.1/H2O)。實施例5.14N-{Nα-[O-(3-O-羧甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基苯基氨基硫代羰基]-Nε-[O-(3，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例3.31.a中描述的那樣將糖1.44(36.1mg，0.11mmol)與肽共軛體3.31(79mg，0.1mmol)反應。真空濃縮之后溶于1∶1的甲醇/二氯甲烷中，通過加入乙醚使產(chǎn)物沉淀。得到黃色結晶(45.9mg，39％)；TLC[乙醇]Rf＝0.38；熔點＝219℃(分解)。實施例5.15N-{Nα-[O-(3，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-Nε-[O-(3-O-(哌啶基-N)-羰基甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例3.31.a中描述的那樣將糖1.31(39.5mg，0.11mmol)與肽共軛體3.32(88.7mg，0.1mmol)反應。真空濃縮之后用快速色譜分離[二氯甲烷/甲醇20∶1(10∶1]，得到黃色結晶(38.8mg，32％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝0.79；熔點＝205℃(分解)。實施例5.16N-{Nα-[O-(3-O-羧甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-Nε-[O-(3-O-(哌啶基-N)-羰基甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline鈉鹽如實施例3.31.a中描述的那樣將糖1.43(38.6mg，0.11mmol)與肽共軛體3.32(88.7mg，0.1mmol)反應。真空濃縮之后溶于1∶1的甲醇/二氯甲烷中，通過加入乙醚使產(chǎn)物沉淀。剩余物懸浮于水(10ml)中，其中加入0.05N氫氧化鈉溶液并且攪拌，直到溶液變清(pH小于10)。將過濾后的溶液冷凍干燥得到黃色無定形固體(90.3mg，71％)；TLC[乙醇]Rf＝0.05；[α]20＝+39.0°(c＝0.1/H2O)。實施例5.17N-{Nα-[O-(3-O-氨基甲?；谆?β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-Nε-[O-(3-O-(哌啶基-N)-羰基甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例3.31.a中描述的那樣將糖1.44(36.1mg，0.11mmol)與肽共軛體3.32(88.7mg，0.1mmol)反應。真空濃縮之后溶于1∶1的甲醇/二氯甲烷中，通過加入乙醚使產(chǎn)物沉淀。得到黃色結晶(44.8mg，36％)；TLC[乙醇]Rf＝0.06；熔點＝223℃(分解)。實施例5.18N-{Nα-[O-(3，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-Nε-[O-(3-O-羧甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline鈉鹽如實施例3.31.a中描述的那樣將糖1.31(39.5mg，0.11mmol)與肽共軛體3.33(84.2mg，0.1mmol)反應。真空濃縮之后，剩余物中加入1∶1的甲醇/二氯甲烷(20ml)，通過加入乙醚使產(chǎn)物沉淀。剩余物懸浮于水(10ml)中，其中加入0.05N氫氧化鈉溶液并且攪拌，直到溶液變清(pH小于10)。將過濾后的溶液冷凍干燥得到黃色無定形固體(80.7mg，68％)；TLC[乙醇]Rf＝0.09；[α]20＝+35.0°(c＝0.1/H2O)。實施例5.19N-{Nα-[O-(3-O-甲氧基羰基甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-Nε-[O-(3-O-羧甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline鈉鹽如實施例3.31.a中描述的那樣將糖1.42(37.7mg，0.11mmol)與肽共軛體3.33(84.2mg，0.1mmol)反應。真空濃縮之后，剩余物中加入1∶1的甲醇/二氯甲烷(20ml)，通過加入乙醚使產(chǎn)物沉淀。剩余物懸浮于水(10ml)中，其中加入0.05N氫氧化鈉溶液并且攪拌，直到溶液變清(pH小于10)。將過濾后的溶液冷凍干燥得到黃色無定形固體(87.5mg，71％)；TLC[乙醇]Rf＝0.10；[α]20＝+24.6°(c＝0.1/H2O)。實施例5.20N-{Nα-[O-(3-O-氨基甲?；谆?β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-Nε-[O-(3-O-羧甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline鈉鹽如實施例3.31.a中描述的那樣將糖1.44(36.1mg，0.11mmol)與肽共軛體3.33(84.2mg，0.1mmol)反應。真空濃縮之后，剩余物中加入1∶1的甲醇/二氯甲烷(20ml)，通過加入乙醚使產(chǎn)物沉淀。剩余物懸浮于水(10ml)中，其中加入0.05N氫氧化鈉溶液并且攪拌，直到溶液變清(pH小于10)。將過濾后的溶液冷凍干燥得到黃色無定形固體(78.6mg，65％)；TLC[乙醇]Rf＝0.11；[α]20＝-44.0°(c＝0.13/H2O)。實施例5.21N-{Nα-[O-(3，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-Nε-[O-(3-O-氨基甲酰基甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例3.31.a中描述的那樣將糖1.31(39.5mg，0.11mmol)與肽共軛體3.34(81.9mg，0.1mmol)反應。真空濃縮之后用快速色譜提純[乙醇→乙醇/甲醇2∶1]，得到黃色結晶(17.4mg，15％)；TLC[乙醇]Rf＝0.20；熔點大于290℃(分解)。實施例5.22N-{Nα-[O-(3-O-甲氧基羰基甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-Nε-[O-(3-O-氨基甲?；谆?β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例3.31.a中描述的那樣將糖1.42(37.7mg，0.11mmol)與肽共軛體3.34(81.9mg，0.1mmol)反應。真空濃縮之后溶于甲醇/二氯甲烷1∶1中，通過加入乙醚使產(chǎn)物沉淀。得到黃色結晶(72mg，60％)；TLC[乙醇]Rf＝0.21；熔點＝222℃(分解)。實施例5.23N-{Nα-[O-(3-O-羧甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-Nε-[O-(3-O-氨基甲?；谆?β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline鈉鹽如實施例3.31.a中描述的那樣將糖1.43(38.6mg，0.11mmol)與肽共軛體3.34(81.9mg，0.1mmol)反應。真空濃縮之后溶于1∶1的甲醇/二氯甲烷中，通過加入乙醚使產(chǎn)物沉淀。剩余物懸浮于水(10ml)中，其中加入0.05N氧氧化鈉溶液并且攪拌，直到溶液變清(pH小于10)。將過濾后的溶液冷凍干燥得到黃色無定形固體(78.2mg，65％)；TLC[乙醇]Rf＝0.07；[α]20＝+33.0°(c＝0.1/H2O)。實施例6.1-6.89通式實施例6.1N-{Nα，Nε-二-[O-(2-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline將硫光氣(30微升，0.4mmol)加入化合物1.1(50mg，0.19ml)在1∶1的二氧雜環(huán)己烷/水(10ml)中溶液中，同時攪拌。10分鐘之后，真空濃縮混合物，剩余物在油泵真空下干燥1小時。將得到的異硫氰酸酯溶于無水二甲基甲酰胺(10ml)中，加入化合物2.13(61mg，0.09mmol)和乙基二異丙基胺(0.5ml)。室溫下攪拌混合物16小時，然后真空濃縮，剩余物通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2]。剩余物用乙醚從甲醇中沉淀。得到48mg(50％)黃色結晶目標產(chǎn)物。類似于實施例6.1從實施例2.13中的肽共軛體或其L-丙氨酰異構體(實施例2.2)制備下列糖共軛體實施例6.2N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物100mg(0.38mmol)來自實施例1.2的糖通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶0.5∶0.05；然后用15∶1∶0.1相同的系統(tǒng)]；然后從二氯甲烷/甲醇/乙醚沉淀。產(chǎn)率59％。熔點＝178℃(分解)[TLC乙腈/水10∶1Rf＝0.51]。實施例6.3N-{Nα，Nε-二-[O-(4-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物115mg(0.44mmol)來自實施例1.4的糖通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2]；然后從二氯甲烷/甲醇(1∶1)/乙醚沉淀。產(chǎn)率58％。熔點＝176℃(分解)[TLC乙腈/水10∶1Rf＝0.52]。實施例6.4N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-丙氨酰}-batracyline離析物115mg(0.44mmol)來自實施例1.2的糖通過從二氯甲烷/甲醇(1∶1)/乙醚沉淀提純。產(chǎn)率93％。熔點＝192℃(分解)[TLC乙腈/水10∶1Rf＝0.46]。實施例6.5N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-α-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物100mg(0.38mmol)來自實施例1.3的糖通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶1∶0.1]；從二氯甲烷/甲醇(1∶1)/乙醚沉淀。熔點＝178℃(分解)；FAB-MSm/z＝1071＝M+1。實施例6.6N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-正丙基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-丙氨酰}-batracyline離析物38mg(0.127mmol)來自實施例1.5的糖通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶1∶0.1]；從二氯甲烷/甲醇(1∶1)/乙醚沉淀。產(chǎn)率42％，熔點167-170℃(分解)，[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)Rf＝0.34]。實施例6.7N-{Nα，Nε-二-[O-(3-脫氧-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物40mg(0.167mmol)來自實施例1.6的糖通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2]；從甲醇/乙醚沉淀。產(chǎn)率81％。[TLC乙腈/水10∶1Rf＝0.46]。實施例6.8N-{Nα，Nε-二-[O-(3，4-二脫氧-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物41mg(0.183mmol)來自實施例1.7的糖通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇95∶5]；從水/二氧雜環(huán)己烷冷凍干燥。產(chǎn)率60％[TLC二氯甲烷/甲醇9∶1Rf＝0.22]。實施例6.9N-{Nα，Nε-二-[O-(3-羥基乙基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物75mg(0.25mmol)來自實施例1.12的糖通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2；然后用15∶4∶0.5的相同的系統(tǒng)]。從甲醇/乙醚沉淀。產(chǎn)率66％；[TLC乙腈/水10∶1Rf＝0.28]。實施例6.10N-{Nα，Nε-二-[O-(2-羥乙基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物50mg(0.167mmol)來自實施例1.19的糖通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶3∶0.3]；從甲醇/乙醚沉淀；從水/二氧雜環(huán)己烷冷凍干燥。產(chǎn)率72％；[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.39]。實施例6.11N-{Nα，Nε-二-[O-(2-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline二鈉鹽離析物50mg(0.16mmol)來自實施例1.13的糖通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶8∶0.8；然后用15∶10∶1的相同系統(tǒng)]。用乙醚浸提剩余物，然后從水/二氧雜環(huán)己烷冷凍干燥。用2當量0.1N氫氧化鈉溶液轉化成二鈉鹽，然后從水冷凍干燥。產(chǎn)率49％；[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.5Rf＝0.38]。MS-FABFAB-；m/z＝1157＝M-2Na++H+。實施例6.12N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline二鈉鹽離析物200mg(0.64mmol)來自實施例1.10的糖通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶0.5；然后用15∶8∶0.8；最后用15∶10∶1的相同系統(tǒng)]。用乙醚浸提剩余物，然后從水/二氧雜環(huán)己烷1∶1冷凍干燥。用2當量0.1N氫氧化鈉溶液轉化成二鈉鹽，然后從水冷凍干燥。產(chǎn)率59％；[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)Rf＝0.1]。實施例6.13N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-氨基甲?；谆?β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物60mg(0.19mmol)來自實施例1.18的糖通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶3∶0.3]。剩余物用乙醚從二氯甲烷/甲醇(1∶1)沉淀，吸濾，然后從水/二氧雜環(huán)己烷1∶1冷凍干燥。產(chǎn)率36％[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.46]。熔點190℃(分解)。實施例6.14N-{Nα，Nε-二-[O-(β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物100mg(0.39mmol)對-氨基苯基β-L-巖藻糖苷通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2；然后用15∶4∶0.5的相同系統(tǒng)]。剩余物用乙醚從二甲基甲酰胺沉淀，吸濾。產(chǎn)率48％。熔點195-198℃。實施例6.15N-{Nα，Nε-二-[O-(α-L-鼠李糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物158mg(0.61mmol)來自實施例1.21的糖通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶3∶0.3；然后用15∶4∶0.5的相同系統(tǒng)]。剩余物從水/二氧雜環(huán)己烷冷凍干燥。產(chǎn)率87％[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶0.5Rf＝0.25]。實施例6.16N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-羧甲基-α-L-鼠李糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline二鈉鹽離析物200mg(0.64mmol)來自實施例1.22的糖通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶0.5；然后用15∶8∶0.8；最后用15∶10∶1的相同系統(tǒng)]。用乙醚浸提剩余物，然后從水/二氧雜環(huán)己烷1∶1冷凍干燥。類似于實施例6.1從batracyline的各種肽共軛體制備下列在氨基端含有完全被脫保護的賴氨酸結構單元的糖共軛體實施例6.17N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-甘氨酰}-batracyline二鈉鹽離析物32mg(0.1mmol)來自實施例1.10的糖32mg(0.045mmol)N-[賴氨酰-甘氨酰]-batracyline雙-三氟乙酸鹽(實施例2.9)通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶8∶0.8；然后用15∶15∶1.5的相同系統(tǒng)]。用乙醚從二甲基甲酰胺/甲醇(1∶1)沉淀，然后從水/二氧雜環(huán)己烷冷凍干燥。用2當量0.1N氫氧化鈉溶液轉化成二鈉鹽，然后從水冷凍干燥。產(chǎn)率25％；[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶8∶0.8Rf＝0.19]。FAB-MSm/z＝1189＝M+1。實施例6.18N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-甘氨酰}-batracyline離析物60mg(0.22mmol)來自實施例1.2的糖66mg(0.1mmol)N-[賴氨酰-甘氨酰]-batracyline雙-三氟乙酸鹽(實施例2.9)通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/冰醋酸90∶10∶1]。用乙醚從甲醇沉淀，然后從水/二氧雜環(huán)己烷冷凍干燥。產(chǎn)率68％；[TLC二氯甲烷/甲醇/冰醋酸80∶20∶2Rf＝0.62]。實施例6.19N-{Nα，Nε-二-[O-(β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-賴氨酰}-batracyline6.19.a)N-{Nα，Nε-二-[O-(β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酰}-batracyline離析物297mg(1mmol)對-氨基苯基β-L-巖藻糖苷66mg(0.1mmol)N-[賴氨酰-Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酰]-batracyline雙-三氟乙酸鹽(實施例2.15)206微升乙基二異丙基胺用乙醚從甲醇/二氯甲烷(1∶1)沉淀兩次提純，用乙醚洗滌濾渣。產(chǎn)率89％[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶0.5Rf＝0.31]。6.19)N-{Nα，Nε-二-[O-(β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-賴氨酰}-batracyline將515mg(0.39mmol)來自實施例6.19.a的化合物溶于5ml二甲基甲酰胺和5ml哌啶中，溶液在20℃攪拌30分鐘。濃縮物料，剩余物用乙醚浸提。吸濾混合物，濾渣溶于二甲基甲酰胺中。用乙醚沉淀之后漂洗濾渣，剩下335mg(78％)目標產(chǎn)物結晶。FAB-MSm/z＝1100＝M+1。實施例6.20N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-二氨基丙酰}-batracyline6.20.a)N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-Nβ-(芴基-9-甲氧基羰基)-二氨基丙酰}-batracyline類似于實施例6.19合成離析物60mg(0.22mmol)來自實施例1.2的糖100mg(0.11mmol)N-[賴氨酰-Nβ-(芴基-9-甲氧基羰基)-二氨基丙酰]-batracyline雙-三氟乙酸鹽(實施例2.16)76微升乙基二異丙基胺用乙醚從甲醇沉淀兩次提純，用乙醚洗滌濾渣。產(chǎn)率105mg(73％)。6.20)N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-二氨基丙酰}-batracyline類似于實施例6.19將103mg(0.079mmol)來自實施例6.20.a的化合物用哌啶脫保護。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶3∶0.3；然后用15∶6∶0.6的相同系統(tǒng)]。從水/二氧雜環(huán)己烷冷凍干燥。產(chǎn)率21％；[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.32]。實施例6.21N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-二氨基丙酰}-batracyline二鈉鹽類似于實施例6.20經(jīng)過2步由來自實施例1.10的糖和來自實施例2.16的肽共軛體制備該化合物?？梢允÷陨V提純，因為副產(chǎn)物可以通過用甲醇和乙醚浸提除去。然后用2當量0.1N氫氧化鈉溶液將產(chǎn)物轉化成二鈉鹽。2步產(chǎn)率66％；[TLC乙腈/水/冰醋酸10∶3∶1.5Rf＝0.3]。實施例6.22N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-絲氨酰}-batracyline離析物60mg(0.22mmol)來自實施例1.2的糖76mg(0.11mmol)N-[賴氨酰-絲氨酰]-batracyline雙-三氟乙酸鹽(實施例2.10)通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/甲醇(17％)15∶2∶0.2]。從二氯甲烷/甲醇/乙醚沉淀。產(chǎn)率26％；[TLC乙腈/水10∶1Rf＝0.39]。實施例6.23N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-絲氨酰}-batracyline離析物60mg(0.22mmol)來自實施例1.2的糖69mg(0.11mmol)N-[賴氨酰-D-絲氨酰]-batracyline二氯溴酸鹽(實施例2.11)通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/甲醇(17％)15∶2∶0.2]；從二氧雜環(huán)己烷/水冷凍干燥。產(chǎn)率29％。[TLC乙腈/水10∶1Rf＝0.36]實施例6.24N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-batracyline離析物80mg(0.3mmol)來自實施例1.2的糖53mg(0.14mmol)N-[賴氨酰]-batracyline(實施例2.17)通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/甲醇(17％)15∶1∶0.1；然后用15∶2∶0.2的相同系統(tǒng)]。從甲醇/乙醚沉淀。產(chǎn)率26％；[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2Rf＝0.22]。實施例6.25N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-batracyline離析物60mg(0.19mmol)來自實施例1.10的糖24mg(0.063mmol)N-[賴氨酰]-batracyline(實施例2.17)通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/甲醇(17％)15∶2∶0.2；然后用15∶4∶0.5的相同系統(tǒng)]；從水冷凍干燥。產(chǎn)率26％；[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.25]。實施例6.26N-{Nα，Nε-二-[O-(3，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-batracyline將硫光氣(33.5微升，0.44mmol)加入化合物1.31(79mg，0.22mmol)在1∶1的二氧雜環(huán)己烷/水(10ml)中溶液中，同時攪拌。10分鐘之后，真空濃縮混合物，剩余物在油泵真空下干燥1小時。將得到的異硫氰酸酯溶于無水二甲基甲酰胺(10ml)中，加入化合物2.17(37.7mg，0.1mmol)和乙基二異丙基胺(0.5ml)。室溫下攪拌混合物16小時，然后真空濃縮，剩余物通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇30∶1→20∶1→10∶1]。得到黃色結晶(57.7mg，53％)；TLC[乙酸乙酯/乙醇2∶1]Rf＝0.72；熔點＝125℃(分解)。實施例6.27N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲氧基羰基甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.42(75.5mg，0.22mmol)與肽共軛體2.17(37.7mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇30∶1(20∶1(10∶1]得到黃色結晶(51.1mg，44％)；TLC[乙醇]Rf＝0.80；熔點＝176℃(分解)。實施例6.28N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-羧甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-batracyline二鈉鹽如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.43(77.3mg，0.22mmol)與肽共軛體2.17(37.7mg，0.1mmol)反應。用乙醚從甲醇/二氯甲烷1∶1再沉淀提純得到黃色結晶(53mg，47％)；TLC[甲醇]Rf＝0.75；熔點大于260℃(分解)。實施例6.29N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-氨基甲酰基甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.44(72.2mg，0.22mmol)與肽共軛體2.17(37.7mg，0.1mmol)反應。用乙醚從甲醇/二氯甲烷1∶l再沉淀提純得到黃色結晶(55.6mg，48％)；TLC[乙醇]Rf＝0.09；熔點＝206℃(分解)。實施例6.30N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-絲氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.25(62.8mg，0.22mmol)與肽共軛體2.10(69.3mg，0.1mmol)反應。真空濃縮之后，剩余物溶于二氯甲烷/甲醇1∶1(10ml)，加入乙醚(15ml)使產(chǎn)物沉淀，用少量冰冷的甲醇洗滌。得到黃色結晶(46mg，41％)；TLC[乙酸乙酯/乙醇]Rf＝0.12；熔點＝190-191℃。實施例6.31N-{Nα，Nε-二-[O-(β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-絲氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將對-氨基苯基β-L-吡喃巖藻糖苷(56.2mg，0.22mmol)與肽共軛體2.10(69.3mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[乙酸乙酯→乙醇]，用乙醚從甲醇/二氯甲烷1∶1再沉淀得到黃色結晶(73.8mg，70％)；TLC[乙醇]Rf＝0.15；熔點＝123℃。實施例6.32N-{Nα，Nε-二-[O-(3，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-絲氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.31(79mg，0.22mmol)與肽共軛體2.10(69.3mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[乙酸乙酯→乙酸乙酯/乙醇7∶1]得到黃色結晶(43.8mg，38％)；TLC[乙酸乙酯/乙醇2∶1]Rf＝0.31；熔點＝176℃。實施例6.33N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲氧基羰基甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-絲氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.42(75.5mg，0.22mmol)與肽共軛體2.10(69.3mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[乙酸乙酯→乙酸乙酯/乙醇3∶1]得到黃色結晶(46.2mg，37％)；TLC[乙酸乙酯/乙醇2∶1]Rf＝0.12；熔點＝161℃。實施例6.34N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-羧甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-絲氨酰}-batracyline二鈉鹽如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.43(77.3mg，0.22mmol)與肽共軛體2.10(69.3mg，0.1mmol)反應并提純產(chǎn)物。得到黃色結晶(39.2mg，31％)；TLC[甲醇]Rf＝0.77；熔點＝213-215℃{分解)。實施例6.35N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-氨基甲?；谆?β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-絲氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.44(72.2mg，0.22mmol)與肽共軛體2.10(69.3mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[乙酸乙酯/乙醇2∶1]得到黃色結晶(66.1mg，53％)；TLC[乙酸乙酯/乙醇2∶1]Rf＝0.14；熔點＝192℃(分解)。實施例6.36N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-α-D-吡喃甘露糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-絲氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.40(62.8mg，0.22mmol)與肽共軛體2.10(69.3mg，0.1mmol)反應并提純產(chǎn)物。得到黃色結晶(48.9mg，44％)；TLC[乙酸乙酯/乙醇2∶1]Rf＝0.10；熔點＝204℃。實施例6.37N-{Nα，Nε-二-[O-(2，3-二-O-甲基-α-D-吡喃甘露糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-絲氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.41(66mg，0.22mmol)與肽共軛體2.10(69.3mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[乙酸乙酯→乙酸乙酯/乙醇7∶1]得到黃色結晶(52mg，45％)；TLC[乙酸乙酯/乙醇2∶1]Rf＝0.28；熔點＝164-165℃。實施例6.38N-{Nα，Nε-二-[O-(4-O-(β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-絲氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.56(95.4mg，0.22mmol)與肽共軛體2.10(69.3mg，0.1mmol)反應。真空濃縮之后，產(chǎn)物用熱甲醇(50ml)徹底洗滌。得到黃色結晶(6.16mg，44％)；TLC[甲醇]Rf＝0.32；熔點＝222℃(分解)。實施例6.39N-{Nα，Nε-二-[O-(β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-絲氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將對-氨基苯基β-L-吡喃巖藻糖苷(56.2mg，0.22mmol)與肽共軛體2.11(62.6mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[乙酸乙酯→乙醇]，用乙醚從甲醇/二氯甲烷1∶1再沉淀得到黃色結晶(50.9mg，48％)；TLC[乙醇]Rf＝0.14；熔點＝133℃。實施例6.40N-{Nα，Nε-二-[O-(3，4-二-O-甲基-β-L-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-絲氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.31(79mg，0.22mmol)與肽共軛體2.11(62.6mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[乙酸乙酯→乙酸乙酯/乙醇5∶1]得到黃色結晶(53.8mg，47％)；TLC[乙酸乙酯/乙醇2∶1]Rf＝0.38；熔點＝146℃。實施例6.41N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲氧基羰基甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-絲氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.42(75.5mg，0.22mmol)與肽共軛體2.11(62.6mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[乙酸乙酯→乙酸乙酯/乙醇3∶1]得到黃色結晶(52.4mg，42％)；TLC[乙酸乙酯/乙醇2∶1]Rf＝0.12；熔點＝168℃。實施例6.42N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-羧甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-絲氨酰}-batracyline二鈉鹽如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.43(77.3mg，0.22mmol)與肽共軛體2.11(62.6mg，0.1mmol)反應并提純產(chǎn)物。得到黃色結晶(69.2mg，55％)；TLC[甲醇]Rf＝0.71；熔點＝214-216℃(分解)。實施例6.43N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-氨基甲酰基甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-絲氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.44(72.2mg，0.22mmol)與肽共軛體2.11(62.6mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[乙酸乙酯/乙醇2∶1]得到黃色結晶(46.4mg，38％)；TLC[乙酸乙酯/乙醇2∶1]Rf＝0.10；熔點＝173℃。實施例6.44N-{Nα，Nε-二-[O-(β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-天冬氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將對-氨基苯基β-L-吡喃巖藻糖苷(56.2mg，0.22mmol)與肽共軛體2.11(72.1mg，0.1mmol)反應。用乙醚從甲醇/二氯甲烷1∶1再沉淀提純得到黃色結晶(69.4mg，64％)；TLC[乙醇]Rf＝0.14；熔點＝185-187℃。實施例6.45N-{Nα，Nε-二-[O-(3，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-天冬氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.31(79mg，0.22mmol)與肽共軛體2.7(72.1mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[乙酸乙酯/乙酸200∶1→乙酸乙酯/乙醇3∶1]得到黃色結晶(99.5mg，85％)；TLC[乙醇]Rf＝0.59；熔點＝149℃(分解)。實施例6.46N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-羧甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-天冬氨酰}-batracyline二鈉鹽如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.43(77.3mg，0.22mmol)與肽共軛體2.7(72.1mg，0.1mmol)反應。用乙醚從甲醇/二氯甲烷1∶1再沉淀提純得到黃色結晶(93.4mg，73％)；熔點＝220℃(分解)。實施例6.47N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-氨基甲?；谆?β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-天冬氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.44(72.2mg，0.22mmol)與肽共軛體2.7(72.1mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[乙酸乙酯/乙醇/乙酸400∶100∶2]得到黃色結晶(69.7mg，57％)；TLC[乙醇]Rf＝0.11；熔點＝111℃。實施例6.48N-{Nα，Nε-二-[O-(β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-天冬氨酰}-batracyline鈉鹽將化合物6.44(21.7mg，20mmol)懸浮于水(10ml)中，其中滴加0.05N氫氧化鈉溶液并且攪拌，直到溶液變清(pH小于10)。冷凍干燥過濾的溶液得到黃色無定形固體(20.6mg，93％)。實施例6.49N-{Nα，Nε-二-[O-(3，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-天冬氨酰}-batracyline鈉鹽如實施例6.48中描述的那樣將化合物6.45(23.5mg，20μmo1)反應并且處理產(chǎn)物。得到黃色無定形固體(23.9mg，100％)。實施例6.50N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-羧甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-天冬氨酰}-batracyline三鈉鹽將化合物6.46(25.6mg，20mmol)溶于水(10ml)中，其中滴加0.05N氫氧化鈉溶液并且攪拌，直到溶液pH至8。冷凍干燥過濾的溶液得到黃色無定形固體(24mg，92％)。實施例6.51N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-氨基甲?；谆?β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-天冬氨酰}-batracyline鈉鹽如實施例6.48中描述的那樣將化合物6.47(24.7mg，20μmol)反應并且處理產(chǎn)物。得到黃色無定形固體(23.0mg，92％)。實施例6.52N-{Nα，Nε-二-[O-(β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-谷氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將對-氨基苯基β-L-吡喃巖藻糖苷(56.2mg，0.22mmol)與肽共軛體2.8(66.8mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[乙酸乙酯/乙酸200∶1→乙酸乙酯/乙醇/乙酸10∶1∶0.1]得到黃色結晶(39.5mg，36％)；TLC[乙醇]Rf＝0.09；熔點＝138-139℃(分解)。實施例6.53N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-羧甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-谷氨酰}-batracyline二鈉鹽如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.43(77.3mg，0.22mmol)與肽共軛體2.8(66.8mg，0.1mmol)反應并且提純產(chǎn)物。得到黃色結晶(97.4mg，75％)；熔點＝180℃(分解)。實施例6.54N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-羧甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-谷氨酰}-batracyline三鈉鹽如實施例6.50中描述的那樣將化合物6.53(25.6mg，20μmol)反應并且處理產(chǎn)物。得到黃色無定形固體(24.3mg，92％)；[α]20＝+20.0°(c＝0.26/H2O)。實施例6.55N-{Nα，Nε-二-[O-(β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-甘氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將對-氨基苯基β-L-吡喃巖藻糖苷與肽共軛體2.9(66.2mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[乙酸乙酯→乙醇]得到黃色結晶(62.2mg，60％)；TLC[乙醇]Rf＝0.12；熔點＝176℃。實施例6.56N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-甘氨酰}batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.25(62.8mg，0.22mmol)與肽共軛體2.9(66.2mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[乙酸乙酯/乙醇10∶1→2∶1]得到黃色結晶(56.2mg，52％)；TLC[乙酸乙酯/乙醇2∶1]Rf＝0.22；熔點＝197℃。實施例6.57N-{Nα，Nε-二-[O-(3，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-甘氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.31(79mg，0.22mmol)與肽共軛體2.9(66.2mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[乙酸乙酯/乙醇10∶1→3∶1]得到黃色結晶(26.2mg，23％)；TLC[乙酸乙酯/乙醇2∶1]Rf＝0.39；熔點＝209℃。實施例6.58N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲氧基羰基甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-甘氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.42(75.5mg，0.22mmol)與肽共軛體2.9(66.2mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[乙酸乙酯/乙醇→10∶1]得到黃色結晶(22mg，18％)；TLC[乙酸乙酯/乙醇2∶1]Rf＝0.06；熔點＝194-195℃(分解)。實施例6.59N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-羧甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-甘氨酰}-batracyline二鈉鹽如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.43(77.3mg，0.22mmol)與肽共軛體2.9(66.2mg，0.1mmol)反應。真空濃縮之后，用甲醇、二氯甲烷和乙醚徹底洗滌產(chǎn)物。得到黃色結晶(86.8mg，71％)；熔點＝230-232℃(分解)。實施例6.60N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-氨基甲?；谆?β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-甘氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.44(722mg，0.22mmol)與肽共軛體2.9(66.2mg，0.1mmol)反應。真空濃縮之后，用甲醇、二氯甲烷和乙醚徹底洗滌產(chǎn)物，得到黃色結晶(40.9mg，35％)；TLC[乙酸乙酯/乙醇2∶1]Rf＝0.05；熔點＝214-216℃(分解)。實施例6.61N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-α-D-吡喃甘露糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-甘氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.40(62.8mg，0.22mmol)與肽共軛體2.9(66.2mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[乙酸乙酯/乙醇10∶1→2∶1]得到黃色結晶(72.2mg，66％)；TLC[乙酸乙酯/乙醇2∶1]Rf＝0.18；熔點＝175℃。實施例6.62N-{Nα，Nε-二-[O-(2，3-二-O-甲基-α-D-吡喃甘露糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-甘氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.41(66mg，0.22mmol)與肽共軛體2.9(66.2mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[乙酸乙酯/乙醇10∶1→3∶1]得到黃色結晶(66.6mg，60％)；TLC[乙酸乙酯/乙醇2∶1]Rf＝0.41；熔點＝173℃。實施例6.63N-{Nα，Nε-二-[O-(β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-蘇氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將對-氨基苯基β-L-吡喃巖藻糖苷(56.2mg，0.22mmol)與肽共軛體2.12(64mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[乙酸乙酯→乙醇]和用乙醚使產(chǎn)物從甲醇/二氯甲烷1∶1中再沉淀得到黃色結晶(30.5mg，28％)；TLC[乙醇]Rf＝0.10；熔點＝172℃。實施例6.64N-{Nα，Nε-二-[O-(β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-笨基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.23(59.7mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇10∶1→1∶1]得到黃色結晶(68.3mg，64％)；TLC[二氯甲烷/甲醇1∶1]Rf＝0.49；熔點＝222-224℃(分解)。實施例6.65N-{Nα，Nε-二-[O-(2-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.24(62.8mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應。通過用乙醚從甲醇/二氯甲烷1∶1再沉淀提純得到黃色結晶(69.6mg，63％)；TLC[乙醇]Rf＝0.24；熔點＝208℃(分解)。實施例6.66N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.25(62.8mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇15∶1→10∶1→5∶1]得到黃色結晶(94.3mg，85％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝0.16；熔點＝212℃(分解)。實施例6.67N-{Nα，Nε-二-[O-(4-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.26(62.8mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇15∶1→10∶1→5∶1]得到黃色結晶(52.6mg，48％)；TLC[二氯甲烷/甲醇]Rf＝0.88；熔點＝192℃(分解)。實施例6.68N-{Nα，Nε-二-[O-(6-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.27(62.8mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應。通過用乙醚從甲醇/二氯甲烷1∶1中再沉淀提純得到黃色結晶(96.7mg，88％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝0.04；熔點＝210℃(分解)。實施例6.69N-{Nα，Nε-二-[O-(2，3-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.28(65.9mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇20∶1]得到黃色結晶(57.4mg，51％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝0.40；熔點＝148℃(分解)。實施例6.70N-{Nα，Nε-二-[O-(2，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.29(65.9mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇20∶1→15∶1→10∶1]得到黃色結晶(74.2mg，65％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝O.40；熔點＝140℃(分解)。實施例6.71N-{Nα，Nε-二-[O-(2，6-二-O-甲基-β-D吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.30(65.9mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇20∶1→15∶1]得到黃色結晶(43.9mg，40％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝0.43；熔點＝229℃(分解)。實施例6.72N-{Nα，Nε-二-[O-(3，4-二-O-甲基-β-D吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.31(79mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇10∶1]得到黃色結晶(66.2mg，59％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.39；熔點＝184℃。實施例6.73N-{Nα，Nε-二-[O-(3，6-二-O-甲基-β-D吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.32(65.9mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇15∶1→10∶1]得到黃色結晶(57.1mg，50％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝0.42；熔點＝190℃(分解)。實施例6.74N-{Nα，Nε-二-[O-(4，6-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.33(79mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇20∶1→15∶1→10∶1]得到黃色結晶(47.0mg，42％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝0.39；熔點＝169℃。實施例6.75N-{Nα，Nε-二-[O-(2，3，4-三-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.34(69mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇30∶1]得到黃色結晶(83.8mg，72％)；TLC[二氯甲烷/甲醇10∶1]Rf＝0.36；熔點＝165℃(分解)。實施例6.76N-{Nα，Nε-二-[O-(2，3，6-三-O-甲基-β}-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.35(69mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應。通過用乙醚從甲醇/二氯甲烷1∶1中再沉淀提純得到黃色結晶(105mg，91％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝0.48；熔點＝194℃(分解)。實施例6.77N-{Nα，Nε-二-[O-(2，4，6-三-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.36(69mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇30∶1→10∶1]得到黃色結晶(67mg，58％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝0.54；熔點＝228℃(分解)。實施例6.78N-{Nα，Nε-二-[O-(3，4，6-三-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.37(69mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應。通過用乙醚從甲醇/二氯甲烷1∶1中再沉淀提純得到黃色結晶(109.3mg，94％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝0.52；熔點＝180℃(分解)。實施例6.79N-{Nα，Nε-二-[O-(2，3，4，6-四-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.38(69mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應。通過用乙醚從甲醇/二氯甲烷1∶1中再沉淀提純得到黃色結晶(99.2mg，84％)；TLC[二氯甲烷/甲醇10∶1]Rf＝0.73；熔點＝188℃(分解)。實施例6.80N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲氧基羰基甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.42(75.5mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應。通過用乙醚從甲醇/二氯甲烷1∶1中再沉淀提純得到黃色結晶(22mg，18％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝0.33；熔點＝194-195℃(分解)。實施例6.81N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-羧甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline二鈉鹽如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.43(77.3mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應并提純產(chǎn)物。得到黃色結晶(99.7mg，81％)；TLC[甲醇]Rf＝0.80；熔點＝230℃(分解)。實施例6.82N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-氨基甲?；谆?β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.44(72.2mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇7∶1]得到黃色結晶(29.4mg，25％)；TLC[二氯甲烷/甲醇3∶1]Rf＝0.23；熔點＝201-202℃。實施例6.83N-{Nα，Nε-二-[O-(3，4-O)-二脫氧-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.52(52.6mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇17∶1]得到黃色結晶(38.8mg，37％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.40；熔點＝175℃。實施例6.84N-{Nα，Nε-二-[O-(α-D-吡喃甘露糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.39(59.7mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇10∶1→1∶1]得到黃色結晶(52mg，48％)；TLC[二氯甲烷/甲醇1∶1]Rf＝0.19；熔點＝196℃。實施例6.85N-{Nα，Nε-二-[O-(3，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.31(79mg，0.22mmol)與肽共軛體2.2(67.7mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇10∶1]得到黃色結晶(77.6mg，69％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)15∶3∶0.2]Rf＝0.33；熔點＝186℃。實施例6.86N-{Nα，Nε-二-[O-(4-O-(β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.56(95.4mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應。真空濃縮之后，剩余物用熱甲醇(50ml)徹底洗滌。得到黃色結晶(102.8mg，73％)；TLC[甲醇]Rf＝0.27；熔點＝225-226℃(分解)。實施例6.87N-{Nα，Nε-二-[O-(4-O-(3’-硫酸根合-β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline二鈉鹽如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.57(117.8mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應。通過用乙醚從甲醇/二氯甲烷1∶1中再沉淀提純得到黃色結晶(152.8mg，95％)；熔點＝232℃(分解)。實施例6.88N-{Nα，Nε-二-[O-(4-O-(3’-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.58(98.4mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應。通過用乙醚從甲醇/二氯甲烷1∶1中再沉淀提純得到黃色結晶(118.2mg，83％)；TLC[二氯甲烷/甲醇1∶1]Rf＝0.58；熔點＝221℃(分解)。實施例6.89N-{Nα，Nε-二-[O-(2-O-甲基-4-O-(3’-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.59(101.5mg，0.22mmol)與肽共軛體2.13(67.7mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇15∶1→10∶1→5∶1]得到黃色結晶(101.03mg，70％)；TLC[二氯甲烷/甲醇2∶1]Rf＝0.58；熔點＝233℃(分解)。實施例7.1-7.13通式類似于實施例4.1.a)從batracyline其他氨基酸或肽共軛體或從batracyline開始制備下列的肽共軛體實施例7.1N-{N-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-丙氨酰}-batracyline離析物來自實施例1.2的糖，來自實施例2.3的氨基酸共軛體通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶1∶0.1]。從二氧雜環(huán)己烷/水冷凍干燥。產(chǎn)率42％[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2Rf＝0.31]。實施例7.2N-{N-[O-(3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-丙氨酰}-batracyline鈉鹽離析物來自實施例1.10的糖，來自實施例2.3的氨基酸共軛體通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶3∶0.3]。從二氧雜環(huán)己烷/水冷凍干燥，然后用0.1N氫氧化鈉溶液轉化成鈉鹽。產(chǎn)率43％；[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶0.5Rf＝0.14]。實施例7.3N-{N-[O-(β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-絲氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物對-氨基苯基β-L-巖藻糖苷，來自實施例2.18的氨基酸共軛體通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶3∶0.3]。從二氧雜環(huán)己烷/水冷凍干燥。產(chǎn)率93％；[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶3∶0.3Rf＝0.28]。FAB-MSm/z＝705＝M+1。實施例7.4N-{N-[O-(β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-丙氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物對-氨基苯基β-L-巖藻糖苷，來自實施例2.19的氨基酸共軛體通過用甲醇浸提和用乙醚從甲醇/二氯甲烷沉淀提純。產(chǎn)率65％；[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.78]。實施例7.5N-{N-[O-(β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-谷氨酰-D-丙氨酰}-batracyline離析物對-氨基苯基β-L-巖藻糖苷，來自實施例2.20的氨基酸共軛體通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶0.4]。從二氧雜環(huán)己烷/水冷凍干燥。產(chǎn)率92％；[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶8∶0.8Rf＝0.55]。實施例7.6N-[O-(3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-batracyline將250mg(1mmol)batracyline溶于50ml二氧雜環(huán)己烷中，加入184微升硫光氣之后，在20℃攪拌混合物2小時。濃縮，剩余物用乙醚浸提并過濾。濾渣在高真空下干燥16小時，然后溶于30ml二甲基甲酰胺。加入來自實施例1.10的糖312mg(1mmol)和500微升乙基二異丙基胺，混合物用超聲處理4小時。然后濃縮，剩余物通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2；然后用15∶6∶0.6的相同系統(tǒng)]。濃縮相應的餾分，從二氧雜環(huán)己烷/水冷凍干燥。產(chǎn)率363mg(60％)；[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶6∶0.6Rf＝0.38]。實施例7.7N-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-batracyline類似于實施例7.6從batracyline和來自實施例1.2的糖開始制備。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶1∶0.1]，產(chǎn)率58％；[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2Rf＝0.39]。FAB-MSm/z＝561＝M+1。實施例7.8N-{N-[O-(3，4-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.31(37.5mg，0.11mmol)與肽共軛體2.3(32mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇30∶1]得到黃色結晶(49.3mg，75％)；TLC[乙酸乙酯/乙醇2∶1]Rf＝0.81；熔點＝185℃(分解)。實施例7.9N-{N-[O-(2，3，4-三-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.34(34.5mg，0.11mmol)與肽共軛體2.3(32mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇40∶1→15∶1]得到黃色結晶(54.9mg，81％)；TLC[二氯甲烷甲醇20∶1]Rf＝0.15；熔點＝190℃(分解)。實施例7.10N-{N-[O-(3-O-甲氧基羰基甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.42(37.8mg，0.11mmol)與肽共軛體2.3(32mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇20∶1→10∶1]得到黃色結晶(44.3mg，63％)；TLC[乙醇]Rf＝0.85；熔點＝195℃(分解)。實施例7.11N-{N-[O-(3-O-羧甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-丙氨酰}-batracyline鈉鹽如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.43(38.6mg，0.11mmol)與肽共軛體2.3(32mg，0.1mmol)反應。通過用乙醚從甲醇/二氯甲烷1∶1中再沉淀得到黃色結晶(63.8mg，89％)；TLC[乙醇]Rf＝0.15；熔點＝217℃(分解)。實施例7.12N-{N-[O-(3-O-氨基甲?；谆?β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將化合物1.44(37.8mg，0.11mmol)與肽共軛體2.3(32mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇20∶1→10∶1→5∶1]得到黃色結晶(20mg，29％)；TLC[乙醇]Rf＝0.15；熔點＝184℃(分解)。實施例7.13N-{N-[O-(β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-丙氨酰}-batracyline如實施例6.26中描述的那樣將對-氨基苯基β-L-吡喃巖藻糖苷(28.1mg，0.11mmol)與肽共軛體2.3(32mg，0.1mmol)反應。通過快速色譜提純[乙酸乙酯/石油醚2∶1→5∶1]得到黃色結晶(49.8mg，81％)；TLC[乙醇]Rf＝0.50；熔點＝173℃。實施例8.1-8.12通式實施例8.1N-{Nε-[2-氯-4-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基]-三嗪-6-基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽8.1.a)N-{Nα-(叔丁氧基羰基)-Nε-[2-氯-4-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基]-三嗪-6-基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline將265mg(0.98mmol)對-氨基苯基3-O-甲基β-L-巖藻糖苷(實施例1.2)和181mg(0.98mmol)氰尿酰氯溶于50ml1∶1的二氧雜環(huán)已烷/水中的中，混合物冷卻至-5℃，加入83mg碳酸氫鈉之后，在該溫度下攪拌15分鐘。加入溶于14ml二甲基甲酰胺中的538mg(0.98mmol)N-[Nα-(叔丁氧基羰基)-賴氨酰-D-丙氨酰]-batracyline(實施例2.4)，然后再加入83mg碳酸氫鈉，讓混合物升至室溫。在20℃攪拌16小時之后，濃縮混合物，剩余物用水處理。吸濾混合物，在高真空下干燥濾渣得到目標產(chǎn)物890mg(96％)。[TLC二氯甲烷/甲醇10∶1Rf＝0.26]。8.1)N-{Nε-[2-氯-4-[O-(3-O-甲基-β-L巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基]-三嗪-6-基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽在0℃將來自實施例8.1.a的化合物100mg(0.11mmol)在5ml無水三氟乙酸和5ml二氯甲烷的混合物中攪拌30分鐘。濃縮混合物，剩余物通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶1.5∶0.15]。隨后從甲醇/乙醚沉淀得到41mg(95％)目標產(chǎn)物。[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2Rf＝0.26]。FAB-MSm/z＝829＝M+1。實施例8.2N-{Nε-[4-羥乙基氨基-2-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基]-三嗪-6-基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽8.1.a)N-{Nα-(叔丁氧基羰基)-Nε-[4-羥乙基氨基-2-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基]-三嗪-6-基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline將100mg(0.11mmol)實施例8.1.a的化合物溶于3ml二氧雜環(huán)己烷中。加入60mg碳酸鉀和0.1N乙醇胺在二氧雜環(huán)己烷中的溶液6.5ml，混合物在80℃攪拌18小時。然后濃縮，剩余物用水攪拌。過濾混合物，濾渣通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶1∶0.1]。濃縮相應的餾分之后，在高真空下干燥，得到目標產(chǎn)物83mg(80％)。[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2Rf＝0.23]。8.2)N-{Nε-[4-羥乙基氨基-2-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基]-三嗪-6-基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽類似于實施例8.1將來自實施例8.2.a的化合物67mg(0.07mmol)脫保護。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2]。隨后從甲醇/乙醚沉淀以90％的產(chǎn)率得到目標產(chǎn)物。FAB-MSm/z＝854＝M+1。類似于實施例8.1制備下列的糖共軛體實施例8.3N-{Nε-[2-氯-4-[O-(2-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基]-三嗪-6-基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物來自實施例1.1的糖；產(chǎn)率76％；FAB-MSm/z＝829＝M+1。實施例8.4N-{Nε-[2-氯-4-[O-(β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基]-三嗪-6-基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物對-氨基苯基β-L-巖藻糖苷；產(chǎn)率36％；FAB-MSm/z＝815＝M+1；[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶0Rf＝0.44]。實施例8.5N-{Nε-[2-氯-4-[O-(3-脫氧-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基]-三嗪-6-基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物來自實施例1.6的糖；產(chǎn)率56％；FAB-MSm/z＝799＝M+1；[TLC乙腈/水/冰醋酸15∶1∶0.2Rf＝0.54]。類似于實施例8.1.a，8.2.a和8.2從實施例2.4中的batracyline-肽共軛體或從以相應的方法制備的L-丙氨酰異構體制備下列的糖共軛體實施例8.6N-{Nε-[4-羥乙基氨基-2-[O-(2-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基]-三嗪-6-基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物來自實施例1.1的糖；產(chǎn)率78％；FAB-MSm/z＝854＝M+1；[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶0.5Rf＝0.33]。實施例8.7N-{Nε-[4-羥乙基氨基-2-[O-(3-脫氧-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基]-三嗪-6-基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物來自實施例1.4的糖；產(chǎn)率38％；[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶0.5Rf＝0.4]。實施例8.8N-{Nε-[4-羥乙基氨基-2-[O-(3-脫氧-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基]-三嗪-6-基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物來自實施例1.6的糖；產(chǎn)率77％；FAB-MSm/z＝824＝M+1；[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶0.5Rf＝0.37]。實施例8.9N-{Nε-[4-羥乙基氨基-2-[O-(β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基]-三嗪-6-基]-賴氨酰-D-丙氨酰}batracyline三氟乙酸鹽離析物對-氨基苯基β-L-巖藻糖苷；產(chǎn)率52％；FAB-MSm/z＝840＝M+1；[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶0.5Rf＝0.30]。實施例8.10N-{Nε-[4-羥乙基氨基-2-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基]-三嗪-6-基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物來自實施例1.2糖；產(chǎn)率88％；[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶3∶0.3Rf＝0.35]。實施例8.11N-{Nε-[4-羥乙基氨基-2-[O-(2-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基]-三嗪-6-基]-賴氨酰-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物來自實施例1.1的糖；產(chǎn)率58％；[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶0.5Rf＝0.40]。實施例8.12N-{Nε-[4-羥乙基氨基-2-[O-(4-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基]-三嗪-6-基]-賴氨酰-丙氨酰}-batracyline三氟乙酸鹽離析物來自實施例1.4的糖；產(chǎn)率66％；FAB-MSm/z＝854＝M+1；[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶05Rf＝0.37]。實施例9.1N-[D-丙氨酰]-喹諾酮-a三氟乙酸鹽9.1.a)N-[N-(叔丁氧基羰基)-D-丙氨酰]-喹諾酮-a將N-(叔丁氧基羰基)-D-丙氨酸(3.6g，19.2mmol)和2-異丁氧基-1-異丁氧基羰基1，2-二氫-喹啉(5.8g，19.2mmol)溶于200ml二甲基甲酰胺中。室溫下攪拌混合物8小時之后，加入喹諾酮-a(4g，9.6mmol)和3.3ml乙基二異丙基胺，物料用超聲處理10小時。濃縮，剩余物溶于二氯甲烷，產(chǎn)物用乙醚沉淀。過濾之后用乙醚洗滌，在高真空下干燥，得到4.58g(81％)目標產(chǎn)物，該產(chǎn)物不用進一步處理即可反應。9.1)N-[D-丙氨酰]-喹諾酮-a三氟乙酸鹽在0℃將4.56g(7.75mmol)來自實施例9.1.a的化合物溶于50ml二氯甲烷和50ml無水三氟乙酸中，在該溫度下攪拌溶液1小時。濃縮，然后剩余物用二氯甲烷蒸餾，產(chǎn)物用乙醚從甲醇沉淀。得到4.07g(87％)目標產(chǎn)物結晶。[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.34]。實施例9.2N-[丙氨酰]-喹諾酮-a三氟乙酸鹽根據(jù)與實施例9.1中的異構體的相同方式進行合成。實施例9.3N-[賴氨酰-D-丙氨酰]-喹諾酮-a雙-三氟乙酸鹽9.3.a)N-[Nα，Nε-二-(叔丁氧基羰基)-賴氨酰-D-丙氨酰]-喹諾酮-a將341mg(0.984mmol)Nα，Nε-二-(叔丁氧基羰基)-賴氨酸溶于10ml二甲基甲酰胺中，在0℃加入200mg(1.48mmol)N-羥基苯并三唑和227mg(11.8mmol)N’-(3-二甲基氨基丙基)-N-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽。在10℃攪拌混合物3小時之后，加入來自實施例9.1的化合物432mg(0.82mmol)，混合物在20℃再攪拌2小時。濃縮，剩余物與50ml水攪拌3次。然后剩余物溶于二氯甲烷，混合物用硫酸鈉干燥。用乙醚沉淀得到516mg(78％)目標產(chǎn)物。[TLC乙腈/水10∶1Rf＝0.55]。9.3)N-[賴氨酰-D-丙氨酰]-喹諾酮-a雙-三氟乙酸鹽類似于實施例9.1脫保護512mg(0.63mmol)來自實施例9.3.a的化合物。用乙醚從乙酸乙酯沉淀。產(chǎn)率479mg(90％)；[TLC乙腈/水/冰醋酸10∶3∶1.5Rf＝0.3]。實施例9.4N-[賴氨酰-丙氨酰]-喹諾酮-a雙-三氟乙酸鹽根據(jù)與實施例9.3中的異構體的相同方式進行合成。實施例9.5N-[Nα-(叔丁氧基羰基)-賴氨酰-D-丙氨酰]-喹諾酮-a9.5.a)N-[Nα-(叔丁氧基羰基)-Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酰-D-丙氨酰]-喹諾酮-a將1.57g(3.36mmol)Nα-(叔丁氧基羰基)-Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酸溶于25ml二甲基甲酰胺中，在0℃加入600mg(5.04mmol)N-羥基琥珀酰亞胺和820mg(4.03mmol)N，N’-二環(huán)己基碳化二亞胺。3小時之后，過濾生成的脲，濾液中加入來自實施例9.1的化合物1.5g(2.86mmol)，混合物在室溫下攪拌16小時。過濾剩余的脲，濾液通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇97.5∶2.5；然后用90∶10的相同系統(tǒng)]。然后產(chǎn)物用乙醚從二氯甲烷/甲醇1∶1沉淀。產(chǎn)率1.5g(56％)；[TLC二氯甲烷/甲醇9∶1Rf＝0.47]。9.5)N-[Nα-(叔丁氧基羰基)-賴氨酰-D-丙氨酰］-喹諾酮-a在二甲基甲酰胺中用哌啶從實施例9.5.a)裂解Fmoc。粗產(chǎn)物用乙醚從二甲基甲酰胺沉淀提純。產(chǎn)率72％；[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.43]。實施例9.6N-[Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酰-D-丙氨酰]-喹諾酮-a三氟乙酸鹽類似于實施例9.1從實施例9.5.a)裂解Boc。粗產(chǎn)物從甲醇/乙醚沉淀。產(chǎn)率80％；[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶0.5Rf＝0.36]。實施例9.7N-[Nα-(叔丁氧基羰基)-賴氨酰-丙氨酰]-喹諾酮-a根據(jù)與實施例9.5中的異構體的相同方式進行合成。實施例9.8N-[賴氨酰]-喹諾酮-a雙-三氟乙酸鹽9.8.a)N-[Nα，Nε-二-(叔丁氧基羰基)-賴氨酰]-喹諾酮-a根據(jù)實施例9.1.a的方法將1317mg(3.8mmol)Nα，Nε-二-(叔丁氧基羰基)-賴氨酸與喹諾酮-a連接。通過快速色譜進行提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶1∶0.1]。得到1010mg(71％)目標產(chǎn)物。9.8)N-[賴氨酰]-喹諾酮-a雙-三氟乙酸鹽類似于實施例9.1將1005mg(1.347mmol)來自實施例9.8.a的化合物脫保護。用乙醚從二氯甲烷/甲醇1∶1沉淀之后，得到966mg(93％)目標產(chǎn)物結晶。[TLC乙腈/水/冰醋酸10∶5∶3Rf＝0.33]。實施例9.9N-[D-賴氨酰]-喹諾酮-a雙-三氟乙酸鹽根據(jù)與實施例9.8中的異構體的相同方式進行合成。實施例9.10N-[Nα-(叔丁氧基羰基)-賴氨酰]-喹諾酮-a9.10.a)N-Nα-(叔丁氧基羰基)-Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酰]-喹諾酮-a根據(jù)實施例9.8.a的方法將1350mg(2.88mmol)Nα-(叔丁氧基羰基)-Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酸與喹諾酮-a連接。用快速色譜進行提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶1∶0.1；然后用15∶2∶0.2的相同系統(tǒng)]。得到1025mg(82％)目標產(chǎn)物。9.10)N-[Nα-(叔丁氧基羰基)-賴氨酰]-喹諾酮-a類似于實施例9.5從實施例9.10.a)裂解Fmoc。粗產(chǎn)物用乙醚從甲醇沉淀兩次。產(chǎn)率86％；[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.48]。實施例9.11N-[Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酰]-喹諾酮-a三氟乙酸鹽類似于實施例9.1從實施例9.10.a)裂解Boc。粗產(chǎn)物從甲醇/乙醚沉淀兩次。從二氧雜環(huán)己烷/水冷凍干燥。產(chǎn)率92％；[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶0.5Rf＝0.44]。實施例10.1-10.3通式實施例10.1N-{Nε-[O-(3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-喹諾酮-a10.1.a)N-{Nα-(叔丁氧基羰基)-Nε-[O-(3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-喹諾酮-a將47微升(0.28mmol)硫光氣加入在15ml1∶1的二氧雜環(huán)己烷/水中的78mg(0.25mmol)的對-氨基苯基3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖苷(實施例1.10)中，同時攪拌?；旌衔镌?0℃攪拌10分鐘之后濃縮，剩余物在高真空度下干燥1小時。然后將得到的異硫氰酸酯在無水二甲基甲酰胺中在86微升乙基二異丙基胺存在下與180mg(0.25mmol)N-[Nα-(叔丁氧基羰基)-賴氨酰-D-丙氨酰]-喹諾酮-a(實施例9.5)偶合。將粗產(chǎn)物從二氯甲烷/乙醚沉淀兩次之后，與水攪拌，從二氧雜環(huán)己烷/水冷凍干燥，得到210mg(78％)目標產(chǎn)物。[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.62]。10.1)N-{Nε-[O-(3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-喹諾酮-a在0℃將來自實施例10.1.a的化合物208mg(0.193mmol)在10ml二氯甲烷中與10ml無水三氟乙酸攪拌1小時。濃縮混合物，隨后將剩余物與15ml甲醇蒸餾，用二氯甲烷/甲醇/氨(17％)10∶10∶0.8色譜分離。用乙醚從二甲基甲酰胺沉淀之后得到52mg(28％)目標產(chǎn)物。[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.53]。類似于實施例10.1，從實施例9.5，9.7和9.10中的部分被保護的肽共軛體制備下列糖共軛體實施例10.2N-{Nε-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-丙氨酰}-喹諾酮-a離析物來自實施例1.2的糖；來自實施例9.7的肽共軛體用乙醚從甲醇數(shù)次沉淀進行中間體提純步驟。用快速色譜使用二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶0.5；然后用15∶8∶0.8的相同系統(tǒng)進行最后的提純步驟。產(chǎn)率20％[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶8∶0.8Rf＝0.15]。實施例10.3N-{Nε-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-喹諾酮-a離析物來自實施例1.2的糖；來自實施例9.10的氨基酸共軛體用乙醚從甲醇沉淀進行中間體提純步驟。用快速色譜使用二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶8∶0.8進行最后的提純步驟。產(chǎn)率39％[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.33]。實施例11.1-11.18通式實施例11.1N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-喹諾酮-a根據(jù)實施例10.1.a的方法將50mg(0.19mmol)對-氨基苯基3-O-甲基-β-L-巖藻糖苷(實施例1.2)先轉化成異硫氰酸酯，然后將得到的產(chǎn)物在5ml二甲基甲酰胺中在55微升乙基二異丙基胺存在下與68mg(0.08mmol)N-[賴氨酰-[D-丙氨酰]-喹諾酮-a雙-三氟乙酸鹽(實施例9.3)偶合。室溫下攪拌混合物16小時，濃縮，剩余物通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/冰醋酸85∶15∶1.5]。然后用乙醚從甲醇沉淀得到62mg(63％)目標產(chǎn)物。[TLC二氯甲烷/甲醇/冰醋酸80∶20∶2Rf＝0.5]；MS-MALDIm/z＝1242＝M+1。類似于實施例11.1，從實施例9.3，9.4，9.8和9.9中的肽共軛體制備下列糖共軛體實施例11.2N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-丙氨酰}-喹諾酮-a離析物50mg(0.19mmol)來自實施例1.2的糖；0.08mmol來自實施例9.4的肽共軛體用快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨冰醋酸90∶10∶1]，用乙醚從甲醇沉淀。產(chǎn)率79％[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.42]。實施例11.3N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-丙氨酰}-喹諾酮-a離析物52mg(0.166mmol)來自實施例1.10的糖；0.07mmol來自實施例9.4的肽共軛體用快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨冰醋酸80∶20∶2]，剩余物與甲醇攪拌。[TLC乙腈/水/冰醋酸10∶3∶1.5Rf＝0.62]。實施例11.4N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-喹諾酮-a離析物44mg(0.14mmol)來自實施例1.10的糖；0.06mmol來自實施例9.3的肽共軛體用快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨冰醋酸80∶20∶2]，剩余物與甲醇攪拌。產(chǎn)率57％；[TLC乙腈/水/冰醋酸10∶3∶1.5Rf＝0.62]。實施例11.5N-{Nα，Nε-二-[O-(α-L-鼠李糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-丙氨酰}-喹諾酮-a離析物44mg(0.166mmol)來自實施例1.21的糖；0.07mmol來自實施例9.4的肽共軛體用快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨冰醋酸80∶20∶1]，剩余物與甲醇/乙醚攪拌。產(chǎn)率90mg(89％)；[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.51]；MS-ESIm/z＝1212＝M+1。實施例11.6N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-喹諾酮-a離析物70mg(0.258mmol)來自實施例1.2的糖；0.11mmol來自實施例9.8的氨基酸共軛體用快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨冰醋酸90∶10∶1]，用乙醚從二氯甲烷/甲醇1∶1沉淀。剩余物與水攪拌。產(chǎn)率41％；[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.65]。實施例11.7N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-賴氨酰}-喹諾酮-a離析物50mg(0.19mmol)來自實施例1.2的糖；0.08mmol來自實施例9.9的氨基酸共軛體用快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨冰醋酸90∶10∶1]，用乙醚從二氯甲烷/甲醇1∶1沉淀。剩余物與水攪拌。產(chǎn)率67％；[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.65]；MS-FABm/z＝1169＝M+1。實施例11.8N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]賴氨酰}-喹諾酮-a二鈉鹽離析物50mg(0.16mmol)來自實施例1.10的糖；0.07mmol來自實施例9.8的氨基酸共軛體濃縮反應物料之后，剩余物溶于10ml二甲基甲酰胺中，加入8ml0.1N氫氧化鈉溶液，混合物在20℃攪拌2小時。再次濃縮，然后將剩余物溶于水，其pH值調(diào)至5。冷凍干燥產(chǎn)物，用甲醇然后用甲醇/乙醚浸提。得到68mg(65％)目標產(chǎn)物。[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.26]。實施例11.9N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-賴氨酰}-喹諾酮-a二鈉鹽離析物100mg(0.32mmol)來自實施例1.10的糖；0.13mmol來自實施例12.9的氨基酸共軛體濃縮反應物料之后，剩余物溶于10ml二甲基甲酰胺中，加入16ml0.1N氫氧化鈉溶液，混合物在20℃攪拌2小時。再次濃縮，然后將剩余物溶于水，其pH值調(diào)至5。冷凍干燥產(chǎn)物，用甲醇然后用甲醇/乙醚浸提。得到160mg(77％)目標產(chǎn)物。熔點218-220℃；[TLC乙腈/水/冰醋酸10∶3∶1.5Rf＝0.69]。實施例11.10N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-α-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-賴氨酰}-喹諾酮-a離析物50mg(0.19mmol)來自實施例1.3的糖；0.0gmmol來自實施例9.9的氨基酸共軛體類似于實施例11.7制備。通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)10∶10∶1]，然后用乙醚從/甲醇1∶1沉淀。產(chǎn)率66％。[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.62]。實施例11.11N-{Nα，Nε-二-[O-(α-L-鼠李糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-賴氨酰}-喹諾酮-a離析物50mg(0.19mmol)來自實施例1.21的糖；0.08mmol來自實施例9.9的氨基酸共軛體類似于實施例11.7制備。產(chǎn)率57％。[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.63]。實施例11.12N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-賴氨酰}-喹諾酮-a鈉鹽將58mg(0.05mmol)來自實施例11.7的化合物懸浮于水中，用1當量0.1N氫氧化鈉溶液轉化成鈉鹽。冷凍干燥之后，得到60mg目標產(chǎn)物。實施例11.13N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-喹諾酮-a鈉鹽將硫光氣(33.5ml，0.44mmol)加入化合物1.25(62.8mg，0.22mmol)在1∶1的二氧雜環(huán)己烷/水(10ml)中的溶液中，同時攪拌。10分鐘之后真空濃縮混合物，剩余物在油泵真空下干燥1小時。然后將得到的異硫氰酸酯溶于無水二甲基甲酰胺(10ml)中，加入化合物9.8(77.4mg，0.1mmol)和乙基二異丙基胺(0.5ml)。室溫下攪拌混合物16小時，然后真空濃縮，剩余物用快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)10∶10∶1→甲醇/氨(25％)20∶1]。將得到的黃色結晶懸浮于水(10ml)中。其中滴加0.05N氫氧化鈉溶液同時攪拌，直到溶液變清(pH小于10)。冷凍干燥過濾的溶液得到黃色無定形固體(39.7mg，32％)；[α]20＝+25.8°(c＝0.26/H2O)。實施例11.14N-{Nα，Nε-二-[O-(4-O-(3’-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-喹諾酮-a鈉鹽如實施例11.13中描述的那樣將化合物1.58(98.4mg，0.22mmol)與肽共軛體9.8(77.4mg，0.1mmol)反應并提純產(chǎn)物。得到黃色無定形固體(62.5mg，40％)；[α]20＝+12.9°(c＝0.26/H2O)。實施例11.15N-{Nα，Nε-二-[O-(2-O--甲基-4-O-(3’-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-喹諾酮-a鈉鹽如實施例11.13中描述的那樣將化合物1.59(101.5mg，0.22mmol)與肽共軛體9.8(77.4mg，0.1mmol)反應。通過用乙醚從甲醇/二氯甲烷1∶1再沉淀提純，通過用乙醇煮沸提取得到黃色結晶，將該結晶如所述那樣轉化成鈉鹽。得到黃色無定形固體(51.1mg，32％)；[α]20＝+27.9°(c＝0.24/H2O)。實施例11.16N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-賴氨酰}-喹諾酮-a鈉鹽如實施例11.13中描述的那樣將化合物1.25(62.8mg，0.22mmol)與肽共軛體9.9(77.4mg，0.1mmol)反應并提純產(chǎn)物。得到黃色無定形固體(77.3mg，63％)；[α]20＝-23.8°(c＝0.63/H2O)。實施例11.17N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-α-D-吡喃甘露糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-賴氨酰}-喹諾酮-a鈉鹽如實施例11.13中描述的那樣將化合物1.40(62.8mg，0.22mmol)與肽共軛體9.9(77.4mg，0.1mmol)反應并提純產(chǎn)物。得到黃色無定形固體(33.6mg，27％)；[α]20＝+0.7°(c＝0.28/H2O)。實施例11.18N-{Nα，Nε-二-[O-(4-O-(3’-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-賴氨酰}-喹諾酮-a鈉鹽如實施例11.13中描述的那樣將化合物1.58(98.4mg，0.22mmol)與肽共軛體9.9(77.4mg，0.1mmol)反應并提純產(chǎn)物。得到黃色無定形固體(63.0mg，41％)；[α]20＝-21.8°(c＝0.22/H2O)。實施例12.1-12.15通式實施例12.1N-{N’-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-丙氨酰}-喹諾酮-a根據(jù)實施例10.1.a的方法將447mg(1.66mmol)對-氨基苯基3-O-甲基-β-L-巖藻糖苷(實施例1.2)先轉化成異硫氰酸酯。然后將產(chǎn)物在40ml二甲基甲酰胺中在586微升乙基二異丙基胺存在下與1g(1.66mmol)N-[D-丙氨酰]-喹諾酮-a三氟乙酸鹽(實施例9.1)偶合。室溫下攪拌混合物2小時，濃縮，剩余物用乙醚從二氯甲烷/甲醇沉淀數(shù)次提純。然后濾渣與水再攪拌兩次。得到876mg(66％)目標產(chǎn)物。熔點198℃；[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.63]。類似于實施例12.1，從實施例9.1和9.2中的氨基酸共軛體制備下列糖共軛體實施例12.2N-{N’-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-丙氨酰}-喹諾酮-a離析物25mg(0.092mmol)來自實施例1.2的糖用快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/冰醋酸90∶10∶1]，用乙醚從二氯甲烷/甲醇1∶1沉淀，剩余物與水攪拌。產(chǎn)率53mg(52％)。[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.65]。實施例12.3N-{N’-[O-(3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-丙氨酰}-喹諾酮-a單鈉鹽離析物523mg(1.67mmol)來自實施例1.10的糖；840mg(1.39mmol)來自實施例12.1的化合物反應6小時之后濃縮混合物，剩余物與水攪拌。用快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶8∶0.8；然后用10∶11的相同系統(tǒng)]，接著從二氧雜環(huán)己烷/水冷凍干燥。產(chǎn)物溶于水中，加入1當量0.1N氫氧化鈉溶液，再進行冷凍干燥。產(chǎn)率525mg(45％)。[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.39]。實施例12.4N-{N’-[O-(α-L-鼠李糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-丙氨酰}-喹諾酮-a離析物20mg(0.076mmol)來自實施例1.21的糖用快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/冰醋酸90∶10∶1]，用乙醚從甲醇沉淀。產(chǎn)率20mg(34％)。[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.42]。從部分保護的N-(賴氨酰)-喹諾酮-a共軛體和N-(賴氨酰-D-丙氨酰)-喹諾酮-a共軛體制備下列糖共軛體實施例12.5N-{Nα-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-喹諾酮-a12.5.a)N-{Nα-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-Nε-[芴基-9-甲氧基羰基]-賴氨酰}-喹諾酮-a根據(jù)實施例10.1.a的方法將92mg(0.34mmol)對-氨基苯基3-O-甲基-β-L-巖藻糖苷(實施例1.2)先轉化成異硫氰酸酯。然后將產(chǎn)物在20ml二甲基甲酰胺中在116微升乙基二異丙基胺存在下與300mg(0.34mmol)N-[Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酰]-喹諾酮-a三氟乙酸鹽(實施例9.11)偶合。室溫下攪拌混合物16小時，濃縮，剩余物用乙醚從二氯甲烷沉淀提純。然后濾渣再與水攪拌，從二氧雜環(huán)己烷/水冷凍干燥。得到290mg(79％)目標產(chǎn)物。[TLC乙腈/水10∶1Rf＝0.6]。12.5)N-{Nα-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-喹諾酮-a將288mg(0.267mmol)實施例12.5.a的化合物溶于20ml二氯甲烷中，加入8ml哌啶。在20℃攪拌混合物30分鐘之后，濃縮，剩余物用乙醚從二氯甲烷中沉淀。產(chǎn)物通過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)10∶10∶2]。剩余物與乙醚攪拌，從水中冷凍干燥。得到90mg(39％)目標產(chǎn)物。[TLC二氯甲烷/甲醇/氨(17％)10∶10∶5Rf＝0.4]。類似于實施例12.5，從實施例9.11和9.6中的共軛體制備下列糖共軛體實施例12.6N-{Nα-[O-(3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-喹諾酮-a二鈉鹽離析物63mg(0.2mmol)來自實施例1.10的糖；158mg(0.18mmol)來自實施例9.11的化合物用快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶0.5；然后用10∶10∶1的相同系統(tǒng)]進行中間體提純步驟，與甲醇攪拌數(shù)次和用乙醚洗滌濾渣進行最后的提純步驟。產(chǎn)率44％。然后將產(chǎn)物懸浮于水，用2當量0.1N氫氧化鈉溶液制備二鈉鹽，冷凍干燥溶液。[TLC乙腈/水/冰醋酸10∶3∶1.5Rf＝0.34]。實施例12.7N-{Nα-[O-(3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-喹諾酮-a離析物147mg(0.47mmol)來自實施例1.10的糖；448mg(0.47mmol)來自實施例9.6的化合物通過用乙醚從二氯甲烷/甲醇1∶1兩次沉淀進行中間體提純步驟；濾渣與水攪拌(產(chǎn)率92％)。用快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)10∶10∶2]進行最后的提純步驟，用乙醚從二甲基甲酰胺沉淀。產(chǎn)率59％。[TLC乙腈/水/冰醋酸10∶3∶1.5Rf＝0.4]。實施例12.8N-{Nα-[O-(3-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-喹諾酮-a鹽酸鹽離析物化合物1.25(62.8mg，0.22mmol)；肽共軛體9.11(180.0mg，0.2mmol)用快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇10∶1→7∶1→2∶1]進行中間體提純步驟。得到黃色結晶(145.7mg，67％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝0.48。然后如實施例4.5中描述的那樣將芴基-9-甲氧基羰基裂解并提純產(chǎn)物。得到黃色結晶并將其懸浮于水(10ml)。其中滴加0.1N鹽酸同時攪拌，直到溶液變清(pH大于3)。冷凍干燥過濾的溶液得到黃色無定形固體(119.4mg，66％)；[α]20＝+33.8°(c＝0.28/H2O)。實施例12.9N-{Nα-[O-(3，6-二-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-喹諾酮-a鹽酸鹽離析物化合物1.32(65.9mg，0.22mmol)；肽共軛體9.11(180.0mg，0.2mmol)用快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇10∶1→7∶1→2∶1]進行中間體提純步驟。得到黃色結晶(115.0mg，52％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝0.44。然后如實施例4.5中描述的那樣將芴基-9-甲氧基羰基裂解并提純產(chǎn)物。得到黃色結晶并將其懸浮于水(10ml)。其中滴加0.1N鹽酸同時攪拌，直到溶液變清(pH大于3)。冷凍干燥過濾的溶液得到黃色無定形固體(94.3mg，51％)；[α]20＝+44.2°(c＝0.34/H2O)。實施例12.10N-{Nα-[O-(3-O-甲基-α-D-吡喃甘露糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-喹諾酮-a鹽酸鹽離析物化合物1.40(62.8mg，0.22mmol)；肽共軛體9.11(180.0mg，0.2mmol)用快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇10∶1→5∶1→1∶1]進行中間體提純步驟。得到黃色結晶(96.7mg，44％)；TLC[二氯甲烷/甲醇5∶1]Rf＝0.47。然后如實施例4.5中描述的那樣將芴基-9-甲氧基羰基裂解并提純產(chǎn)物。得到黃色結晶并將其懸浮于水(10ml)。其中滴加0.1N鹽酸同時攪拌，直到溶液變清(pH大于3)。冷凍干燥過濾的溶液得到黃色無定形固體(78.2mg，43％)；[α]20＝-157.2°(c＝0.30/H2O)。實施例12.11N-{Nα-[O-(4-O-(3’-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-喹諾酮-a鹽酸鹽離析物化合物1.58(98.4mg，0.22mmol)；肽共軛體9.11(180.0mg，0.2mmol)用快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)20∶10∶1→10∶10∶1→甲醇/氨(17％)20∶1]進行中間體提純步驟。得到米黃色結晶(132.1mg，53％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)10∶10∶3]Rf＝0.60。然后如實施例4.5中描述的那樣將芴基-9-甲氧基羰基裂解并提純產(chǎn)物。得到黃色結晶并將其懸浮于水(10ml)。其中滴加0.1N鹽酸同時攪拌，直到溶液變清(pH大于3)。冷凍干燥過濾的溶液得到黃色無定形固體(90.0mg，42％)；[α]20＝+192.2°(c＝0.27/H2O)。根據(jù)實施例12.1的方法從未取代的喹諾酮-a開始制備下列糖共軛體實施例12.12N-[O-(3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-喹諾酮-a二鈉鹽離析物78.5mg(0.25mmol)來自實施例1.10的糖；70mg(0.167mmol)喹諾酮-a反應6小時之后濃縮混合物，剩余物溶于二甲基甲酰胺，混合物與4ml0.1N氫氧化鈉溶液攪拌1小時。用快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶0.5]。用0.1N氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7，冷凍干燥。產(chǎn)率60mg(44％)。[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.42]。FAB-MSm/z＝773＝M-2Na++3H+。實施例12.13N-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-喹諾酮-a離析物32mg(0.12mmol)來自實施例1.2的糖；50mg(0.12mmol)喹諾酮-a反應時間為2小時；用快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/冰醋酸9∶10∶1]；用乙醚從二氯甲烷/甲醇1∶1沉淀。產(chǎn)率59mg(51％)。[TLC乙腈/水10∶1Rf＝0.43]。實施例12.14N-{Nα-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-喹諾酮-a鹽酸鹽將86mg(0.1mmol)實施例12.5的化合物溶于水并且用1當量0.1N鹽酸轉化成鹽。冷凍干燥得到88mg目標化合物。實施例12.15N-{Nα-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-二氨基丙氨酰}-喹諾酮-a鹽酸鹽類似于實施例12.14經(jīng)過幾步反應從Nα-(叔丁氧基羰基)-Nβ-(芴基-9-甲氧基羰基)-L-二氨基丙酸和喹諾酮-a制備糖共軛體12.5；[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.3]。實施例13通式實施例13.1N-{N’-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-丙氨酰}-喹諾酮-b13.1a)喹諾酮-b4-氨基-7-[(3aRS，4RS，7aSR)-4-氨基-1，3，3a，4，7，7a-六氫異氮雜茚-2-基]-1-環(huán)丙基-6-氟-1，4-二氫-8-甲氧基-4-氧代-3-喹啉甲酸將170mg(1.5mmol)1，4-二氮雜二環(huán)[2.2.2]辛烷和152mg(1.1mmol)(3aRS，4RS，7aSR)-4-氨基-1，3，3a，4，7，7a-六氫異吲哚加入在4ml乙腈和2ml二甲基甲酰胺混合物中的310mg(1mmol)5-氨基-1-環(huán)丙基-6，7-二氟-1，4-二氫-8-甲氧基-4-氧代-3-喹啉甲酸中，混合物加熱回流1小時。真空濃縮，剩余物用約20ml水攪拌，吸濾沉淀的剩余物，真空下在100℃干燥。產(chǎn)率301mg(70％)，熔點237-239℃(同時分解)。13.1.b)N-[D-丙氨酰]-喹諾酮-b三氟乙酸鹽類似于實施例9.1從化合物13.1.a和N-(叔丁氧基羰基)-D-丙氨酸開始制備目標化合物。13.1)N-{N’-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-賴氨酰}-喹諾酮-b類似于實施例12.1從化合物13.1.b和對氨基苯基3-O-甲基-β-L-巖藻糖苷(實施例1.2)開始制備目標化合物。實施例1.4通式喹諾酮-c8-(2-氨基-5-甲基-8-氮雜二環(huán)[4.3.0]壬-3-烯-8-基)-1-甲基-7-氟-5-氧代-5H-噻唑[3，2-a]喹啉-4-甲酸實施例14.1N-{Nα-[O-(3-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-喹諾酮-c鹽酸鹽14.1.a)N-[Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酰]-喹諾酮-c三氟乙酸鹽離析物Nα-(叔丁氧基羰基)-Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酸(1.4g，3.0mmol)；喹諾酮-c(820mg，1.9mmol)類似于實施例9.1.a進行中間體產(chǎn)物的制備。從乙醇/乙醚再沉淀得到淺黃色結晶(1.37g，82％)，類似于實施例9.1.b從該產(chǎn)物游離出化合物14.1.a。得到橙色結晶(1.25g，74％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)30∶10∶1]Rf＝0.7；熔點180℃。14.a)N-{Nα-[O-(3-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-喹諾酮-c鹽酸鹽類似于實施例12.5將化合物1.25(62.8mg，0.22mmol)與肽共軛體14.1.a(178.4mg，0.2mmol)反應。用快速色譜[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)30∶6∶1→30∶10∶1]進行中間體提純步驟。得到淺黃色結晶(97.0mg，44％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)30∶10∶1]Rf＝0.23。然后如所描述的那樣將芴基-9-甲氧基羰基裂解并提純產(chǎn)物。得到黃色結晶并將其懸浮于水(10ml)。其中滴加0.1N鹽酸同時攪拌，直到溶液變清(pH大于3)。冷凍干燥過濾的溶液得到黃色無定形固體(75.8mg，41％)；[α]20＝+12.5°(c＝0.27/H2O)。類似于實施例14.1從肽共軛體14.1.a制備下列糖共軛體實施例14.2N-{Nα-[O-(3-O-甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-喹諾酮-c鹽酸鹽離析物化合物1.2(59.5mg，0.22mmol)；肽共軛體14.1.a(178.4mg，0.2mmol)用快速色譜[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)30∶6∶1→30∶10∶1]進行中間體提純步驟。得到淺黃色結晶(146.6mg，67％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)30∶6∶1]Rf＝0.48。然后如所描述的那樣將芴基-9-甲氧基羰基裂解，將產(chǎn)物轉化成鹽酸鹽。得到黃色無定形固體(107.7mg，60％)；[α]20＝+51.6°(c＝0.36/H2O)。實施例14.3N-{Nα-[O-(3-O-羧甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-喹諾酮-c二鈉鹽類似于實施例12.6經(jīng)過幾步反應從化合物14.1.a開始制備糖共軛體14.4；[FAB-MSm/z＝911＝M-2Na+3H]。實施例14.4N-{Nα-[O-(3-O-甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-賴氨酰}-喹諾酮-c鹽酸鹽類似于實施例14.2中的異構體制備該共軛體；[FAB-MSm/z＝867＝M+H]。實施例15通式喹諾酮-d4-(2-氨基-8-氮雜二環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-8-基)-1-環(huán)丙基-6，8-二氟-1，4-二氫-4-氧代-喹啉-3-甲酸實施例15.1N-{Nα-[O-(3-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-喹諾酮-d鹽酸鹽15.1.a)N-[Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酰]-喹諾酮-d三氟乙酸鹽如實施例9.1.a中描述的那樣將Nα-(叔丁氧基羰基)-Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酸(1.4g，3.0mmol)與喹諾酮-d鹽酸鹽(1.28mg，2.8mmol)反應。用乙醚從二氯甲烷/甲醇1∶1再沉淀得到米黃色結晶(1.97g，83％)，類似于實施例9.1.b從該產(chǎn)物游離出化合物15.1.a。得到米黃色結晶(1.7g，70％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)28∶14∶1]Rf＝0.60；熔點＝215℃。15.1)N-{Nα-[O-(3-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-喹諾酮-d鹽酸鹽類似于實施例12.5將化合物1.25(62.8mg，0.22mmol)與肽共軛體15.1.a(173.2mg，0.2mmol)反應。用快速色譜[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)28∶14∶1→甲醇/氨(25％)20∶1]進行中間體提純步驟。得到米黃色結晶(140.8mg，65％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)28∶14∶1]Rf＝0.06。然后如所描述的那樣將芴基-9-甲氧基羰基裂解并提純產(chǎn)物。得到黃色結晶并將其懸浮于水(10ml)。其中滴加0.1N鹽酸同時攪拌，直到溶液變清(pH大于3)。冷凍干燥過濾的溶液得到黃色無定形固體(102.6mg，57％)；[α]20＝-49.0°(c＝0.26/H2O)。類似于實施例15.1從肽共軛體15.1.a制備下列糖共軛體實施例15.2N-{Nα-[O-(4-O-(3’-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-β-D-吡喃葡糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰}-喹諾酮-d鹽酸鹽離析物化合物1.58(98.4mg，0.22mmol)；肽共軛體15.1.a(173.2mg，0.2mmol)用快速色譜[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)20∶10∶1(10∶10∶1(甲醇/氨(25％)20∶1]進行中間體提純步驟。得到米黃色結晶(106.6mg，43％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(25％)10∶10∶3]Rf＝0.51。然后如所描述的那樣將芴基-9-甲氧基羰基裂解，將產(chǎn)物轉化成鹽酸鹽。得到黃色無定形固體(82.0mg，39％)；[α]20＝+22.8°(c＝0.29/H2O)。實施例16帶有苯丙氨酸氮芥的糖共軛體通式實施例16.1N-{N’-[O-(3-O-甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-丙氨酰}-苯丙氨酸氮芥16.1.a)N-叔丁氧基羰基-D-丙氨酰-苯丙氨酸氮芥將114mg(0.6mmol)N-叔丁氧基羰基-D-丙氨酸溶于10ml二甲基甲酰胺中，在0℃加入138mgN’-(3-二甲基氨基丙基)-N-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽和1-羥基-苯并三唑。10分鐘之后，加入153mg苯丙氨酸氮芥，混合物在室溫下攪拌16小時。濃縮，剩余物在二氯甲烷和水之間分配。洗滌有機相，用硫酸鈉干燥，濃縮，剩余物經(jīng)過快速色譜提純[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶2∶0.2→15∶4∶0.5]。得到目標化合物134mg(56％)；TLC[二氯甲烷/甲醇/氨(17％)15∶4∶0.5]Rf＝045。16.1)N-{N’-[O-(3-O-甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-丙氨酰}-苯丙氨酸氮芥如實施例9.1和12.1中描述的那樣進行保護基的裂解和與糖偶合。TLC[乙腈/水10∶1]Rf＝0.26；FAB-MSm/z＝685＝M-H。實施例16.2N-{N’-[O-(3-O-甲基-β-L-巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-丙氨酰-丙氨酰}-苯丙氨酸氮芥類似于實施例16.1經(jīng)過幾步反應可以制備該化合物。TLC[乙腈/水10∶1]Rf＝0.2；FAB-MSm/z＝756＝M-H。實施例17帶有阿霉素(亞德里亞霉素)的糖共軛體通式實施例17.1N-{N’-[O-(3-O-甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-丙氨酰-丙氨酰}-阿霉素17.1.a)N-[O-(3-O-甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-丙氨酰-丙氨酸將160mg(1mmol)丙氨酰-丙氨酸溶于20ml二氧雜環(huán)己烷/水1∶1中，加入1mlHünig堿。根據(jù)10.1.a的方法先將1.2mmol對-氨基苯基3-O-甲基-β-L-巖藻糖苷(實施例1.2)轉化成異硫氰酸酯，然后將產(chǎn)物加入二肽溶液中。室溫下攪拌混合物16小時，剩余物通過快速色譜提純(乙腈/水15∶1)。濃縮相應的餾分之后，從甲醇/乙醚沉淀產(chǎn)物。產(chǎn)率267mg(57％)。17.1)N-{N’-[O-(3-O-甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-丙氨酰-丙氨酰}-阿霉素將48mg(0.1mmol)來自實施例17.1.a的化合物溶于10ml二甲基甲酰胺中，加入23.1mgN’-(3-二甲基氨基丙基)-N-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽和21mg1-羥基-笨并三唑。5分鐘之后，加入30mg阿霉素和35微升Hünig堿，室溫下攪拌混合物30分鐘。濃縮，剩余物通過快速色譜提純(二氯甲烷/甲醇88∶12)。濃縮相應的餾分，剩余物從二氧雜環(huán)己烷/水冷凍干燥。得到20mg(40％)目標化合物。TLC[二氯甲烷/甲醇10∶1]Rf＝0.17；ESIm/z＝997＝M+H。實施例17.2N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-賴氨酰-丙氨酰}-阿霉素17.2.a)Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-賴氨酰-丙氨酸如實施例17.1.a中描述的那樣將580mg(1.31mmol)D-賴氨酰-丙氨酸的二-三氟乙酸鹽與2.2當量來自實施例1.2的糖在1.3mlHünig堿存在下連接。通過快速色譜用乙腈/水10∶1進行提純，得到446mg(41％)目標化合物。17.2)N-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-D-賴氨酰-丙氨酰}-阿霉素如實施例17.1中描述的那樣將59mg來自實施例17.2.a的化合物與20mg阿霉素連接。得到15mg共軛體。TLC[二氯甲烷/甲醇85∶15]Rf＝0.43；FAB-MSm/z＝1365＝M+H。實施例18帶有喜樹堿的糖共軛體通式實施例18.120-O-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-丙氨酰}-喜樹堿18.1.a)20-O-(丙氨酰)-喜樹堿三氟乙酸鹽將500mg(1.44mmol)喜樹堿溶于20ml二甲基甲酰胺中，然后加入50mg4-二甲基氨基吡啶和N-叔丁氧基羰基-丙氨酸N-羧酸酐。3小時之后，再加入775mgN-叔丁氧基羰基-丙氨酸-N-羧酸酐，懸浮液用超聲處理16小時。濃縮混合物，粗產(chǎn)物溶于50ml二氯甲烷，在0℃加入5ml三氟乙酸。攪拌混合物30分鐘之后，再次濃縮，通過快速色譜提純產(chǎn)物[乙腈/水20∶1]。收集相應的餾分并濃縮，剩余物從二氧雜環(huán)己烷/水冷凍干燥。得到712mg(93％)目標化合物；[FAB-MSm/z＝420＝M+H]。18.1.b)20-O-(賴氨酰-丙氨酰)-喜樹堿雙-三氟乙酸鹽根據(jù)標準的方法將來自實施例18.1.a的共軛體與Nα，Nε-二-(叔丁氧基羰基)-賴氨酸連接，然后將產(chǎn)物脫保護。以65％的產(chǎn)率得到目標化合物。18.1)20-O-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-笨基氨基硫代羰基]-賴氨酰-丙氨酰}-喜樹堿類似于實施例11.1中的方法將對-氨基苯基3-O-甲基-β-L-巖藻糖苷(實施例1.2)與實施例18.1.b的共軛體連接。產(chǎn)率40％[TLC乙腈/水10∶1Rf＝0.44]。實施例18.220-O-{Nα-[O(3-O-羧甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-丙氨酰}-喜樹堿18.2.a)20-O-[Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酰丙氨酰]-喜樹堿雙-三氟乙酸鹽根據(jù)標準的方法將來自實施例18.1.a的共軛體與Nα-(叔丁氧基羰基)-Nε-(芴基-9-甲氧基羰基)-賴氨酸連接，然后將產(chǎn)物在α-氨基官能團上脫保護。以24％的產(chǎn)率得到目標化合物。[TLC乙腈/水20∶1Rf＝0.15]。18.2.b)20-O-{Nα-[O-(3-O-羧甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-Nε-[芴基-9-甲氧基羰基]-賴氨酰-丙氨酰}-喜樹堿類似于實施例12.6和12.5將來自實施例18.1.a的化合物用來自實施例1.10的糖衍生物修飾。粗產(chǎn)物可以通過用水浸提提純，然后從二氧雜環(huán)己烷/水冷凍干燥，不用進一步提純即可用于下一步反應。18.2)20-O-{Nα-[O-(3-O-羧甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-丙氨酰}-喜樹堿在二甲基甲酰胺中用哌啶將共軛體18.2.b脫保護。30分鐘之后，濃縮混合物，剩余物用二氯甲烷浸提兩次。然后溶于二甲基甲酰胺中，用甲醇/乙醚沉淀。吸濾產(chǎn)物，用乙醚洗滌，然后從二氧雜環(huán)己烷/水冷凍干燥。產(chǎn)率86％；[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.17]。實施例18.320-O-{Nα-[O-(3-O-羧甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-丙氨酰}-喜樹堿鈉鹽將62mg(0.074mmol)來自實施例18.2的共軛體溶于二氧雜環(huán)己烷/水中，并用1當量0.1N氫氧化鈉溶液轉化成鈉鹽。產(chǎn)率定量[TLC乙腈/水/冰醋酸5∶1∶0.2Rf＝0.17]。類似于實施例18.1和18.2制備下列喜樹堿的糖共軛體實施例18.420-O-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-D-丙氨酰}-喜樹堿實施例18.520-O-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-纈氨酰}-喜樹堿實施例18.620-O-{Nα-[O-(3-O-羧甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-纈氨酰}-喜樹堿實施例18.720-O-{Nα-[O-(3-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-纈氨酰}-喜樹堿實施例18.820-O-{Nα-[O-(3-O-甲基-β-D-吡喃半乳糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-丙氨酰}-喜樹堿實施例18.920-O-{Nα-[O-(3-O-羧甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-纈氨酰}-喜樹堿鹽酸鹽用1當量0.01N鹽酸將化合物18.6轉化成鹽酸鹽。實施例18.1020-O-{Nα-[O-(3-O-羧甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-丙氨酰}-喜樹堿鹽酸鹽用1當量0.01N鹽酸將化合物18.2轉化成鹽酸鹽。實施例18.1120-O-{Nα-[O-(3-O-羧甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-苯基丙氨酰}-喜樹堿鹽酸鹽實施例18.1220-O-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-羧甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-丙氨酰}-喜樹堿鈉鹽實施例18.1320-O-{Nα，Nε-二-[O-(3-O-羧甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-纈氨酰}-喜樹堿鈉鹽實施例18.1420-O-{Nα-[O-(3-O-甲基-β-L-吡喃巖藻糖基)-4-羥基-苯基氨基硫代羰基]-賴氨酰-丙氨酰}-喜樹堿鹽酸鹽權利要求1.通式(I)化合物及其異構體和鹽，K-Sp-L-AA1-AA2-C(I)其中K＝未取代的或區(qū)域選擇性修飾的糖基，Sp＝任意取代的亞芳基或亞烷基，其中R＝氯或羥基烷基氨基，AA1是D或L構型的氨基酸基，它可以任意帶有保護基或第二個K-Sp-L-基團，其中獨立于第一個K-Sp-L-基團的K，Sp和L可以有上述涵義，或是一個直鍵，AA2是D或L構型的氨基酸基，它可以任意帶有保護基或第二個K-Sp-L-基團，其中獨立于第一個K-Sp-L-基團的K，Sp和L可以有上述涵義，或是一個直鍵，及C＝細胞毒性基團或細胞抑制基團或細胞抑制劑衍生的基團，它可以另外帶有一個氨基或羥基。2.權利要求1的通式(I)化合物及其并構體和鹽，其中K是通式(II)的糖基，其中A＝甲基，羥甲基，羧基及其衍生的酯和酰胺，烷氧基甲基，酰氧基甲基或羧基烷氧基甲基及其衍生的酯和酰胺；A也可以是CH2-B，其中B也可以是通過異頭中心(anomericcentre)連接的通式(II)糖基，R2，R3，R4＝分別或同時一起為H，羥基，烷氧基，羧基烷氧基及其衍生的酯和酰胺，羥基烷氧基，氨基烷氧基，酰氧基，羧基烷基羰氧基，硫酸根，磷酸根，鹵素或在同一結構中被修飾并通過異頭中心連接的另外的糖基(II)，R2另外還可以是氨基或酰氨基，或者，R2，R3和R4中的兩個一起代表一個環(huán)氧基，及Sp，L，AA1，AA2和C的定義同權利要求1。3.權利要求1的式(I)化合物及其異構體和鹽，其中Sp＝被K和L在鄰-，間-或?qū)ξ恍揎?，而且還可以帶有1-4個取代基的亞芳基，這些取代基可以彼此不同或相同，可以是H，甲基，甲氧基，羥基，羧基，甲氧羰基，氰基，硝基，鹵素，磺酰基或磺酰胺，或Sp還可以是直鏈或支鏈亞烷基，及K，L，AA1，AA2和C的定義同權利要求1。4.權利要求1的通式(I)化合物及其異構體和鹽，其中C是核苷，endiine抗菌素，或細胞毒性肽抗菌素，喹諾酮-或naphthyridone-羧酸或batracyline，5-氟尿嘧啶，胞嘧啶阿糖苷，甲氨蝶呤，鬼臼亞乙苷，喜樹堿，道諾霉素，阿霉素，紫杉醇，長春花堿，長春新堿，動力霉素，刺孢霉素，埃斯波霉素，槲皮素，蘇拉明，erbstatin，環(huán)磷酰胺，絲裂霉素C，苯丙氨酸氮芥，順氯氨鉑，博來霉素，星形孢菌素或其它有抗腫瘤活性的活性化合物，及K，Sp，L，AA1和AA2的定義同權利要求1。5.權利要求1的通式(I)化合物及其異構體和鹽，其中AA1是從D或L構型的賴氨酸，丙氨酸，天冬氨酸，谷氨酸，甘氨酸，鳥氨酸，酪氨酸，纈氨酸或絲氨酸衍生的氨基酸基團，并且可以任意與另一個K-Sp-L-基團連接，其中AA1表示一個鍵，及K，Sp，L，AA1，AA2和C的定義同權利要求1。6.權利要求1的通式(I)化合物及其異構體和鹽，其中AA2是從D或L構型的賴氨酸，丙氨酸，甘氨酸，鳥氨酸，二氨基丙酸或絲氨酸衍生的氨基酸基團，并且可以任意與另一個K-Sp-L-基團連接，或者，其中AA2表示一個鍵，及K，Sp，L，AA1和C的定義同權利要求1。7.權利要求1的通式(I)化合物及其異構體和鹽，其中C代表式(III)基團，T-Q(III)其中Q代表下列基團，其中Ra代表有1-4個碳原子并且任意被鹵素或羥基一-或二-取代的烷基，乙烯基，有3-6個碳原子并且被1或2個氟原子任意取代的環(huán)烷基，雙環(huán)[1.1.1]戊-1-基，1，1-二甲基炔丙基，3-氧雜環(huán)丁烷基(3-oxetanyl)，甲氧基，氨基，甲氨基，二甲氨基，或任意被鹵素，氨基或羥基一-或二-取代的苯基，或與Re一起形成在Re定義中所述的橋，Rb代表羥基，有1-3個碳原子的烷氧基或硝基甲基，Rc代表氫或甲基，或者與Rg一起形成在Rg定義中所述的橋，Rd代表氫，CH3，CH2F或＝CH2，X1代表氫，鹵素或硝基，X2代表氫，鹵素，氨基，羥基，甲氧基，巰基，甲基，鹵代甲基或乙烯基，Y代表N或C-Re，其中Re代表氫，鹵素，CF3，OCH3，OCHF2，CH3，CN，CH＝CH2或C＝CH，或者與Ra一起形成有下列結構的橋-*O-CH2-CH-CH3，-*S-CH2-CH2-，-*S-CH2-CH-CH3，-*CH2-CH2-CH-CH3或-*O-CH2-N-Rf，其中帶*的原子與Y的碳原子連接，其中Rf代表氫，甲基或甲?；?，及D代表N或C-Rg，其中Rg代表氫，鹵素，CF3，OCH3，OCHF2或CH3，或者與Rc一起形成有下列結構的橋-*O-CH2-，-*NH-CH2-，-*N(CH3)-CH2-，-*N(C2H5)-CH2-，-*N(C3H5)-CH2-或-*S-CH2-，其中帶*的原子與D的碳原子連接，n代表1，2或3，及T代表下列基團其中Rh代表-N-Rk，CH2-O-或-CH2-N-Rk，其中Rk代表氫或甲基，及R1代表氫，C1-C3烷基或環(huán)丙基，及K，Sp，L，AA1和AA2的定義同權利要求1。8.權利要求7的式(I)化合物及其異構體和鹽，其中Q代表下列基團，其中Ra代表有2-4個碳原子并且任意被1個氟原子取代的烷基，任意被1個氟原子取代的環(huán)丙基，或任意被氟原子一-或二-取代的苯基，或與Re一起形成在Re定義中所述的橋，Rb代表羥基或有1-2個碳原子的烷氧基，Rc代表氫或甲基，或者與Rg一起形成在Rg定義中所述的橋，X1代表氟，X2代表氫或氨基，Y代表N或C-Re，其中Re代表氫，氟，氯，CF3，OCH3，OCHF2或C≡CH，或者與Ra一起形成有下列結構的橋-*O-CH2-CH-CH3或-*O-CH2-N-Rf，其中帶*的原子與Y的碳原子連接，其中Rf代表甲基，及D代表N或C-Rg，其中Rg代表氫，氟，氯，CF3，OCH3或CH3，或者與Re一起形成有下列結構的橋-*O-CH2-，-*NH-CH2-，-*N(CH3)-CH2-或-*S-CH2-，其中帶*的原子與D的碳原子連接，及T代表下列基團其中Rh代表-N-Rk，其中Rk代表氫或甲基，及Ri代表氫或甲基。9.含有一種或多種權利要求1-8的化合物的藥物。10.權利要求1-8的式(I)化合物在制備藥物中的應用。全文摘要本發(fā)明涉及由于糖修飾而對腫瘤有特異性的細胞抑制劑。適當?shù)拈g隔保證了血清穩(wěn)定性,同時保證了細胞內(nèi)作用。文檔編號C07D513/04GK1185786SQ96194180公開日1998年6月24日申請日期1996年3月22日優(yōu)先權日1995年4月4日發(fā)明者H·－C·勒爾徹恩,K·范德姆布魯赫,U·佩特爾森,J·鮑姆加爾滕,N·皮爾,H·－P·安托尼克,W·維徹爾,M·斯佩澤爾,K·D·布雷姆申請人:拜爾公司