專利名稱：法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的雜環(huán)抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及能抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶和Ras蛋白法呢基化、因而可用作抗癌劑的化合物。這些化合物除可用于治療癌癥之外，還可用于治療與經(jīng)過Ras的信號(hào)傳導(dǎo)途徑有關(guān)的疾病及與被法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶后翻譯改性的含CAAX蛋白(不包括Ras)有關(guān)的疾病。這些化合物還可作其它異戊二烯基轉(zhuǎn)移酶的抑制劑，因而可有效地治療與蛋白質(zhì)的其它異戊二烯基改性有關(guān)的疾病。
哺乳動(dòng)物Ras基因族包括H-ras、K-ras和N-ras三種基因。Ras蛋白是一族調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)和分化的GTP結(jié)合和水解蛋白。抑制其GTP酶活性的正常Ras蛋白的過度生產(chǎn)或突變會(huì)導(dǎo)致無(wú)控制的細(xì)胞分化。
Ras的轉(zhuǎn)變活性取決于該蛋白對(duì)質(zhì)膜的定位。這種膜結(jié)合通過該胞質(zhì)溶膠的Ras蛋白的一系列后翻譯改性而發(fā)生。這一系列過程中首要而決定性的步驟是這些蛋白的法呢基化。這一反應(yīng)由法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶(FPT)催化，而焦磷酸法呢酯則作為該反應(yīng)的法呢基供體。Ras C端含有一個(gè)稱作“Cys-Aaa1-Aaa2-Xaa”盒(CAAX盒)的基序，其中Cys為半胱氨酸，Aaa為脂肪族氨基酸，Xaa為絲氨酸或蛋氨酸。法呢基化反應(yīng)發(fā)生在CAAX盒的半胱氨酰殘基(Cys-186)上，因而通過硫醚鍵與蛋白質(zhì)上的異戊二烯基團(tuán)相接。
根據(jù)本發(fā)明，式Ⅰ化合物、它的對(duì)映體和非對(duì)映體，以及它的可藥用的鹽類、前體藥物及其溶劑化物抑制S-法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶，該轉(zhuǎn)移酶與Ras致癌基因的官能有關(guān)。在式Ⅰ及整個(gè)說(shuō)明書中，除非另外指明，式中各符號(hào)定義如下 A1和A2各自獨(dú)立地為H、烷基、取代烷基、環(huán)烷基、取代環(huán)烷基、苯基或取代苯基;
G1為S或O;
G2為H、-C(O)OH、-C(O)NH2、5-四唑基、-C(O)N(R7)OH或-CH2OH;
X為O或R8N;
Y和Z各自獨(dú)立地為-CH2或-C(O)-;
R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7各自獨(dú)立地為H或烷基;
R1也可以為烷?；?
R1和A1可共同構(gòu)成-(CH2)m;
R8為H、烷基、苯基、苯烷基、取代苯基、(取代苯基)烷基或-C(O)R9;
R9為H、烷基、苯基、苯烷基、取代苯基或(取代苯基)烷基;
m為3或4;
n為0、1或2;
p為0、1或2;
q為0或1，但當(dāng)P為0時(shí)，q亦為0。
下面列出用于描述本發(fā)明的各種術(shù)語(yǔ)。除非另外特別限定，這些定義(單獨(dú)或作為大基團(tuán)的一部分)適用于整個(gè)說(shuō)明書中所用到的術(shù)語(yǔ)。
術(shù)語(yǔ)“烷基”或“烷-”指未取代的含有1至7個(gè)碳原子的直鏈或支鏈碳?xì)浠鶊F(tuán)?！暗图?jí)烷基”指未取代的含有1至4個(gè)碳原子的烷基。
術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”指含有3至8個(gè)碳原子的環(huán)狀碳?xì)浠鶊F(tuán)。
術(shù)語(yǔ)“鹵素”或“鹵”指氟、氯、溴和碘。
術(shù)語(yǔ)“烷氧基”指烷基-O-。
術(shù)語(yǔ)“烷?；敝竿榛?C(O)-。
術(shù)語(yǔ)“烷酰氧基”指烷基-C(O)-O-。
術(shù)語(yǔ)“烷氨基”和“二烷基氨基”分別指(烷基)NH-和(烷基)2N-。
術(shù)語(yǔ)“烷酰氨基”指烷基-C(O)-NH-。
術(shù)語(yǔ)“烷硫基”指烷基-S-。
術(shù)語(yǔ)“烷基硫羰”指烷基-S(O)-。
術(shù)語(yǔ)“烷基磺?；敝竿榛?S(O)2-。
術(shù)語(yǔ)“氨基甲?！敝?C(O)NH2。
術(shù)語(yǔ)“烷氧羰基”指烷基-O-C(O)-。
術(shù)語(yǔ)“取代烷基”和“取代環(huán)烷基”分別指被(例如)一至四個(gè)下述取代基取代的烷基或環(huán)烷基鹵素、羥基、烷氧基、烷?；?、烷酰氧基、氨基、烷氨基、二烷基氨基、烷酰氨基、巰基、烷硫基、烷基硫羰、烷基磺?；⒒酋０被⑾趸?、氰基、羧基、氨基甲酰、N-羥基氨基甲酰、烷氧羰基、苯基、取代苯基、胍基、吲哚基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡咯烷基、吡啶基、嘧啶基，等等。
術(shù)語(yǔ)“取代苯基”指被(例如)一至四個(gè)下述取代基取代的苯基烷基、鹵素、羥基、烷氧基、烷酰基、烷酰氧基、氨基、烷氨基、二烷基氨基、烷酰氨基、巰基、烷硫基、硝基、氰基、羧基、氨基甲酰、烷氧羰基、烷基硫羰、烷基磺?；?、磺酰氨基，等等。
式Ⅰ化合物所成的鹽也在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。雖然在(如)分離和提純本發(fā)明化合物時(shí)也用到其他鹽，但優(yōu)選可藥用的(即無(wú)毒、生理學(xué)上可接受的)鹽。
式Ⅰ化合物可與堿金屬(如鈉、鉀和鋰)、堿土金屬(如鈣和鎂)、有機(jī)堿(如二環(huán)己基胺、三丁胺、吡啶及氨基酸，如精氨酸、賴氨酸等)成鹽。這類鹽可通過在鹽不溶介質(zhì)或水性介質(zhì)中用所需離子交換化合物Ⅰ中的羧酸質(zhì)子得到(在水性介質(zhì)中，隨后進(jìn)行蒸發(fā))。
當(dāng)化合物Ⅰ含有堿性部分(如氨基或取代氨基)時(shí)，它可與各種有機(jī)和無(wú)機(jī)酸成鹽。這類鹽包括與下列酸形成的鹽氯化氫、溴化氫、甲磺酸、硫酸、乙酸、三氟乙酸、馬來(lái)酸、苯磺酸、甲苯磺酸，以及與其他各種酸形成的鹽(如硝酸鹽、磷酸鹽、硼酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、琥珀酸鹽、苯甲酸鹽、抗壞血酸鹽、水楊酸鹽等)。這類鹽可由化合物Ⅰ與等當(dāng)量酸在鹽不溶介質(zhì)或水性介質(zhì)中反應(yīng)形成(在水性介質(zhì)中，隨后進(jìn)行蒸發(fā))。
另外，可形成兩性離子(“內(nèi)鹽”)。
式Ⅰ化合物也可具有前體藥物形式。任何將在體內(nèi)轉(zhuǎn)變而提供生物活性劑(即式Ⅰ化合物)的化合物均為在本發(fā)明的范圍和精神之內(nèi)的前體藥物。例如，化合物Ⅰ可以是式Ⅱ的前體藥物形式 其中R10是低級(jí)烷基，如甲基、乙基等;
取代的低級(jí)烷基，如2-(N-嗎啉)乙基等;
低級(jí)芳烷基，如芐基、聯(lián)苯甲基等;
(酰氧基)烷基，如(新戊酰氧基)甲基、1-(丙酰氧基)-2-甲基-1-丙基等;
(氨基酰氧基)芳酰氧基烷基，如對(duì)-氨基乙酰氧基苯甲酰氧基甲基等;
(氨基烷氧基)芳酰氧基烷基，如對(duì)-2-[(N-嗎啉)乙氧基]苯甲酰氧基甲基等;
取代酰胺類，如N，N-二(2-羥乙基)乙酰氨基、4-甲基哌嗪-1-乙?；?、4-(2-羥乙基)哌嗪-1-乙酰基等;或二氧戊環(huán)甲基，如(5-甲基-2-氧代-1，3-二氧戊環(huán)-4-基)甲基等。
另外，對(duì)于其中A2為-(CH2)wOH(其中w為2或3)、G2為-C(O)OH的式Ⅰ化合物，A2和G2可結(jié)合起來(lái)形成內(nèi)酯環(huán)，該環(huán)可在體內(nèi)打開提供式Ⅰ化合物，其中A2為-(CH2)wOH(其中w為2或3)、G2為-C(O)OH。
不同形式的前體藥物為本領(lǐng)域內(nèi)眾所周知。這類前體藥物衍生物的實(shí)例可參見a)Design of Prodrugs(H.Bundgaard 編，Elsevier，1985)和Method in Enzymology，42卷，309-396頁(yè)(K.Widder等編，Academic Press，1985);
b)A Textbook of Drug Design and Development，Krogsgaard-Larsen和H.Bundgaard編，第5章“前體藥物的設(shè)計(jì)和應(yīng)用”(H.Bundgaard)，113-191頁(yè)(1991);
c)H.Bundgaard，Advanced Drug Delivery Reviews，8，1-38頁(yè)(1992);
d)H.Bundgaard等，Journal of Pharmaceutical Sciences，77，285頁(yè)(1998);
e)N.Kakeya等，Chem.Pharm.Bull.，32，692頁(yè)((1984)。
應(yīng)進(jìn)一步理解的是，化合物Ⅰ的溶劑化物(如水合物)也在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。溶劑化的方法為本領(lǐng)域內(nèi)公知。
對(duì)于化合物Ⅰ，優(yōu)選的部分如下A1和A2各自獨(dú)立地為H或D-，L-或DL- -CH3，-CH(CH3)2，-CH2CH(CH3)2，-CH(CH3)CH2CH3，-C(CH3)3，-CH2OH，-CH2CH2OH，-CH2CH2CH2OH，-CH(OH)CH3， ，
，-CH2C(O)OH，-CH2CH2C(O)OH，-CH2C(O)NH2，-CH2CH2C(O)NR11R12，(其中R11和R12各自獨(dú)立地為H、烷基或苯基，且R11和R12可共同構(gòu)成-(CH2)o-，其中o為2至6)、-CH2CH2C(O)NHOH，-CH2SH，-CH2CH2SH，-CH2CH2S(O)2NH2，-CH2CH2OCH3或 -CH2CH2SCH3.
特別優(yōu)選的部分如下A1為-CH3，-CH(CH3)2，-CH2CH(CH3)2，-C(CH3)3，-CH(CH3)CH2CH3，-CH2OH 或 -CH(OH)CH3;
A2為-CH2CH2SCH3、-CH2CH2OH、-CH2CH2CH2OH、-CH2CH2C(O)NR11R12(其中R11和R12各自獨(dú)立地為H、烷基或苯基，且R11和R12可共同構(gòu)成-(CH2)o-，其中o為2至6)、-CH2CH2OCH3或-CH2CH2SH;
G1為S;
G2為-C(O)OH;
X為R8N;
Y為-CH2-;
R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7和R8為H;
n為1;
p為1。
式Ⅰ化合物為S-法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的抑制劑，因而可用于治療各種癌癥，包括(但不限于)下列疾病-癌，包括膀胱癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、腎癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、子宮頸癌、甲狀腺癌和皮膚癌;
-淋巴細(xì)胞系的生血腫瘤，包括急性淋巴細(xì)胞白血病、B細(xì)胞淋巴瘤和Burketts淋巴瘤;
-髓細(xì)胞系的生血腫瘤，包括急性和慢性骨髓性白血病和前髓細(xì)胞白血病;
-起源于間質(zhì)的腫瘤，包括纖維肉瘤和橫紋肌肉瘤;和-其他腫瘤，包括黑瘤、精原細(xì)胞瘤、tetratocarcinoma、成神經(jīng)細(xì)胞瘤和神經(jīng)膠質(zhì)瘤。
式Ⅰ化合物特別適用于治療涉及Ras的高發(fā)病率腫瘤，如結(jié)腸、肺、胰腺腫瘤。通過施用含有一種或多種本發(fā)明化合物的組合物，可抑制哺乳動(dòng)物宿主的腫瘤生長(zhǎng)。
除癌癥外，式Ⅰ化合物也可用于治療可能與經(jīng)過Ras的信號(hào)傳導(dǎo)途徑有關(guān)的疾病，如神經(jīng)纖維瘤。
式Ⅰ化合物也可用于治療與也被法泥基蛋白轉(zhuǎn)移酶后翻譯改性的除Ras之外的含CAAX的蛋白(如核纖層蛋白和轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白)有關(guān)的疾病。
式Ⅰ化合物還可用作其它異戊二烯基轉(zhuǎn)移酶(如牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶)的抑制劑，因而可有效地治療與蛋白(如rap、rab、rac、rho基因產(chǎn)物等)的其它異戊二烯基改性(如牻牛兒基牻牛兒基化)有關(guān)的疾病。例如，最近的研究發(fā)現(xiàn)，肝炎丁種病毒(HDV)的丁種抗原大異構(gòu)的牻牛兒基牻牛兒基化是產(chǎn)生病毒感染的必要條件，因而這些化合物可用作抗HDV感染的藥物(J.S.Glenn等，Science，256，1331頁(yè)(1992))。
本發(fā)明的化合物也可與已知抗癌藥和細(xì)胞毒素并用。如果制成固定劑型，這類并用產(chǎn)品中所用的本發(fā)明的化合物的劑量在如下所述范圍內(nèi)，其他藥物活性劑的劑量也在其許可范圍內(nèi)。當(dāng)不宜采用組合制劑時(shí)，式Ⅰ化合物可與已知抗癌藥或細(xì)胞毒素順次使用。
本發(fā)明的化合物可與藥物賦形劑或稀釋劑制成制劑，經(jīng)口服、靜脈內(nèi)或皮下給藥。藥物組合物可按經(jīng)典方法，采用適合于所需給藥方式的固體或液體賦形劑、稀釋劑及添加劑進(jìn)行配制。若口服給藥，化合物可以片劑、膠囊劑、顆粒劑、粉劑等形式給藥。這些化合物可以單劑量或2至4分劑量形式給藥，其劑量范圍約為0.05至50mg/kg/天，優(yōu)選少于50mg/kg/天。
下面式Ⅲ化合物可與式Ⅳ的氨基酸的羧酸保護(hù)衍生物偶合生成下面式Ⅴ化合物
式Ⅲ中，Pro1為胺保護(hù)基團(tuán)(如叔丁氧羰基(Boc)、芐氧羰基(Cbz)等);式Ⅴ中，Pro2為羧酸保護(hù)基團(tuán)(如烷基、芐基、對(duì)-甲氧基芐基等)。
關(guān)于其他的胺基和羧酸保護(hù)基團(tuán)的實(shí)例(連同生成及最終去保護(hù)的方法)，參見T.W.Greene和P.G.M.Wuts，“Protective Groups in Organic Synthesis”，第二版，John Wiley & Sons，New York，1991。
可用于這一偶合的各種偶合劑包括1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸化物(EDCI)與1-羥基苯并三唑(HOBT)、二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)與HOBT、苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)氟磷酸鏻(BOP)與(或無(wú))HOBT、羰基二咪唑(CDI)、二(2-氧代-3-噁唑烷基)膦酰氯(BOP氯化物)、氯代甲酸異丙酯(IPCF)等。
式Ⅳ化合物為本領(lǐng)域內(nèi)已知。例如參見R.M.Williams，“Synthesis of Optically Active α-Amino Acids”，Pergamon Press，Oxford，1989。
式Ⅲ化合物可用本領(lǐng)域已知方法制備。例如，對(duì)于其中n為1、R3為烷基的式Ⅲ化合物的制備，可參見(如)J.W.Skiles等，J.Med.Chem.，29，784(1986)和U.Schollkopf等，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.，26，143(1987);對(duì)于其中R4為烷基、n為1的式Ⅲ化合物的制備，參見(如)I.Huber和D.Seebach，Helvitica Chim Acta，70，1944(1987);對(duì)于其中n為0、R3為H的式Ⅲ化合物的制備，參見(如)J.L.Stanton等，J.Med.Chem.，26，1267(1983);對(duì)于其中n為2、R3為H的式Ⅲ化合物的制備，參見(如)M.Okada等，JP 02，193，971，1990年7月31日。
式Ⅴ化合物可用適當(dāng)?shù)腘-去保護(hù)劑處理得到式Ⅵ的相應(yīng)的游離胺 (適當(dāng)選擇Pro1和Pro2保護(hù)基團(tuán)使得Pro1可在Pro2存在下被選擇性地除去。)式Ⅵ的胺可采用適當(dāng)?shù)呐己蟿?如BOP-Cl)與適當(dāng)?shù)氖舰鞯陌繁Ｗo(hù)氨基酸(其中Pro3為胺保護(hù)基團(tuán))偶合生成式Ⅷ化合物
(式Ⅶ化合物為本領(lǐng)域內(nèi)已知。例如參見R.M.Williams，“Synthesis of Optically Active α-Amino Acids”，Pergamon Press，Oxford，1989.)式Ⅷ化合物也可按下述方法制備式Ⅸ的C-端基保護(hù)氨基酸(其中Pro4為羧酸保護(hù)基團(tuán))與上述式Ⅶ的胺保護(hù)氨基酸偶合得到式Ⅹ化合物
化合物Ⅹ的Pro4保護(hù)基團(tuán)可用本領(lǐng)域已知方法選擇性除去而得到下面式Ⅺ化合物 (適當(dāng)選擇Pro3和Pro4保護(hù)基使得Pro4可在Pro3存在下被選擇除去。)然后式Ⅺ化合物與式Ⅳ的氨基酯偶合得到化合物Ⅷ。
式Ⅷ化合物可用本領(lǐng)域已知方法進(jìn)行選擇性N去保護(hù)而得到式Ⅻ的胺 (適當(dāng)選擇Pro2和Pro3保護(hù)基團(tuán)使得Pro3可在Pro2存在下被選擇除去。)用適當(dāng)?shù)呐己蟿┦故舰陌放c式ⅩⅢ的酸(其中X1和G1被任選保護(hù))偶合，得到式ⅩⅣ化合物
然后去掉ⅩⅣ的Pro2保護(hù)基團(tuán)，除去保護(hù)X1和G1的任選保護(hù)基團(tuán)，得到其中Y和Z為-C(O)-、G2為-C(O)OH的式Ⅰ化合物(對(duì)于X和G1的保護(hù)基團(tuán)的實(shí)例、它們的形成和去除過程，參見T.W.Greene和P.G.M.Wuts，“Protective Groups in Organic Synthesis”，John Wiley & sons，New York，1991)。
作為一種供選擇的方案，除去式Ⅹ化合物的氮保護(hù)基團(tuán)(Pro3)得到式ⅩⅤ的胺 然后式ⅩⅤ的胺可與式ⅩⅢ的酸偶合得到其中X和G1被任選保護(hù)的式ⅩⅥ化合物 選擇除去化合物ⅩⅥ的Pro4保護(hù)基團(tuán)得到式ⅩⅦ的酸 式ⅩⅦ的酸可與式Ⅳ的胺偶合得到式ⅩⅣ化合物。然后去掉ⅩⅣ的Pro2保護(hù)基團(tuán)，除去X和G1的任選保護(hù)基團(tuán)，也得到其中Y和Z為-C(O)-、G2為-C(O)OH的式Ⅰ化合物。
其中Y和Z為-C(O)-、G2為-C(O)OH或-C(O)NH2的式Ⅰ化合物可用本領(lǐng)域已知方法通過自動(dòng)固相肽合成制備。其實(shí)例可參見a)M.Bodanszky and A.Bodanszky，“The Practice of Peptide Synthesis”，Springer-Verlag，Berlin/Heidelberg/New York/Tokyo，1984.
b)J.M.Stewart and J.D.Young，“Solid Phase Peptide Synthesis”，Pierce Chemical Co.，Rockport，Illinois，1984.
用還原劑(如硼烷)還原下面式ⅩⅧ化合物(其中Pro5為胺保護(hù)基團(tuán)(如叔丁氧羰基(Boc)、芐氧羰基(Cbz)等))，得到式ⅩⅨ的醇 式ⅩⅨ化合物可用本領(lǐng)域已知方法進(jìn)行N去保護(hù)得到式ⅩⅨa的胺 式ⅩⅨa的胺可與式ⅩⅦ化合物偶合得到式ⅩⅩ化合物
然后除去保護(hù)X和G1的任選保護(hù)基團(tuán)得到其中Y和Z為-C(O)、G2為-CH2OH的式Ⅰ化合物。
式ⅩⅧ化合物為本領(lǐng)域內(nèi)已知。例如參見R.M.Williams，“Synthesis of Optically Active α-Amino Acids”，Pergamon Press，Oxford，1989。
其中Y和Z為-C(O)-、G2為-CH2OH的式Ⅰ化合物也可采用自動(dòng)固相肽合成方法制備，其中最后將產(chǎn)物從其固體載體上釋出的常規(guī)步驟采用J.M.Stewart等的美國(guó)專利4，254，023(1981)所述的方法。例如，慣常附著于苯乙酰氨基甲基(PAM)樹脂上的C末端氨基酸殘基在適當(dāng)?shù)娜軇?如四氫呋喃)中用硼氫化鋰處理后，以伯醇的形式釋出。
式ⅩⅦ化合物與式ⅩⅪ化合物偶合并除去X和G1上的任選保護(hù)基團(tuán)得到其中Y和Z為-C(O)-、G2為H的式Ⅰ化合物。式ⅩⅪ化合物可用本領(lǐng)域已知方法制備。
用本領(lǐng)域已知方法選擇除去式ⅩⅣ化合物中的Pro2基團(tuán)，得到其中X和G1被任選保護(hù)的式ⅩⅫ化合物
式ⅩⅫ化合物可用本領(lǐng)域已知方法與下面式ⅩⅩⅢ的烷氧基胺(其中Pro6為本領(lǐng)域已知的適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基團(tuán)，如芐基、2-四氫吡喃基(THP)等)偶合，得到其中X和G1被任選保護(hù)的式ⅩⅩⅣ的異羥肟醚 依Pro6、X和G1的定義按要求對(duì)式ⅩⅩⅣ化合物進(jìn)行適當(dāng)?shù)娜ケＷo(hù)，得到其中Y和Z為-C(O)-、G2為C(O)N(R7)OH的式Ⅰ化合物。
式ⅩⅧ的酸可用本領(lǐng)域內(nèi)已知方法與氨偶合生成式ⅩⅩⅤ的酰胺 可用本領(lǐng)域內(nèi)已知方法(如在吡啶中用POCl3或在吡啶中用對(duì)甲苯磺酰氯)使式ⅩⅩⅤ的酰胺脫水生成式ⅩⅩⅥ的腈 可用本領(lǐng)域已知方法將式ⅩⅩⅥ化合物轉(zhuǎn)化成式ⅩⅩⅦ的四唑(其中Pro7為適當(dāng)?shù)乃倪虮Ｗo(hù)基團(tuán)) 例如，在有機(jī)溶劑(如甲苯)中加熱式ⅩⅩⅥ化合物，然后用氫氧化物和三苯甲基氯處理，得到其中Pro7為三苯甲游基的式ⅩⅩⅦ化合物。例如參見P.Brooks等，J.Chem.Soc.，925(1960);Y.Hirotsu等，Bull.Chem.Soc.Japan，40，2945(1967);Z.Grzonka和B.Liberek，Roczniki Chemii，Ann.Soc.Chim.Polonorum，45，967(1971)。
作為一種供選擇的方案，式ⅩⅧ化合物也可用本領(lǐng)域已知方法與式ⅩⅩⅧ的胺偶合，得到式ⅩⅩⅨ的酰胺ⅩⅩⅧNH2-Pro7 式ⅩⅩⅨ的酰胺可在本領(lǐng)域內(nèi)已知條件(如按J.V.Duncia等，J.Org.Chem.，56，2395(1991)所述，在四氫呋喃中用疊氮基三甲基甲硅烷、三苯膦、疊氮基二羧酸二乙酯)下處理，得到式ⅩⅩⅦ化合物。例如，其中Pro7為氰乙基的式ⅩⅩⅦ化合物便可用這一方法制備。
除去式ⅩⅩⅦ化合物中的Pro5保護(hù)基團(tuán)得到式ⅩⅩⅩ的胺 式ⅩⅩⅩ的胺可與式ⅩⅦ的酸偶合得到式ⅩⅩⅪ化合物(其中X和G1被任選保護(hù))
依Pro7、X和G1的定義用本領(lǐng)域已知方法按要求對(duì)式ⅩⅩⅪ化合物進(jìn)行適當(dāng)?shù)娜ケＷo(hù)，得到其中Y和Z為-C(O)-、G2為5-四唑基的式Ⅰ化合物。
可用本領(lǐng)域內(nèi)已知方法將式Ⅶ的氨基酸(其中Pro3為適當(dāng)?shù)陌被Ｗo(hù)基團(tuán))轉(zhuǎn)化成式ⅩⅩⅫ的N-甲氧基-N-甲基酰胺 可用本領(lǐng)域內(nèi)已知方法(如Fehrentz等，Synthesis，676(1983))將式ⅩⅩⅫ化合物還原成式ⅩⅩⅩⅢ的醛 作為一種供選擇的方案，式ⅩⅩⅩⅢ化合物可按下述方法制備用還原劑(如硼烷)還原Ⅶ化合物，然后用(例如)Swern氧化法氧化所得的醇(如Luly等，J.Org.Chem.，52，1487(1987);Stanfield等，J.Org.Chem.，46，4797(1981))。
在另一種供選擇的方案中，式ⅩⅩⅩⅢ化合物可用還原劑(如二異丁基氫化鋁)還原式Ⅶ化合物的酯來(lái)制備。參見(例如)Rich等，J.Org.Chem.，43，3624(1978)。
可采用本領(lǐng)域內(nèi)已知方法(如Borch等，J.Am.Chem.Soc.，93，2897(1971))，用式Ⅵ的胺將式ⅩⅩⅩⅢ的N保護(hù)醛還原胺化，得到式ⅩⅩⅩⅣ化合物 式ⅩⅩⅩⅣ化合物可用適當(dāng)?shù)腘去保護(hù)劑處理，得到相應(yīng)的式ⅩⅩⅩⅤ的游離胺 (適當(dāng)選擇Pro2和Pro3保護(hù)基團(tuán)使得Pro3可在Pro2存在下被選擇除去。)可用適當(dāng)?shù)呐己蟿┦故舰趸衔锱c式ⅩⅢ的酸(其中X和G1被任選保護(hù))偶合，得到式ⅩⅩⅩⅥ化合物
去掉ⅩⅩⅩⅥ的Pro2保護(hù)基團(tuán)并除去X和G1上的任選保護(hù)基團(tuán)，得到其中Y為-C(O)-、Z為-CH2-、G2為C(O)OH的式Ⅰ化合物(對(duì)于X和G1的保護(hù)基團(tuán)的實(shí)例、它們的形成和除去過程，參見T.W.Greene和P.G.M.Wuts，“Protective Groups in Organic Synthesis”，第二版，John Wiley & Sons，New York，1991)。
也可用本領(lǐng)域內(nèi)已知方法(如Fehrentz等，Synthesis，676(1983))將式ⅩⅢ的酸(其中X和G1被任選保護(hù))轉(zhuǎn)化成式ⅩⅩⅩⅦ的N-甲氧基-N甲基酰胺 可用本領(lǐng)域內(nèi)已知方法(如Fehrentz等，Synthesis，676(1983))將式ⅩⅩⅩⅦ化合物選擇性還原成式ⅩⅩⅩⅧ的醛 可采用本領(lǐng)域內(nèi)已知方法(如Borch等，J.Am.Chem.Soc.，93，2897(1971))，用式Ⅻ的胺將式ⅩⅩⅩⅧ的醛還原胺化，得到式ⅩⅩⅩⅨ化合物 去掉ⅩⅩⅩⅨ中的Pro2保護(hù)基團(tuán)并除去X和G1上的任選保護(hù)基，得到其中Y為-CH2-、Z為-C(O)-、G2為C(O)OH的式Ⅰ化合物。
組合上述適當(dāng)步驟，本領(lǐng)域技術(shù)人員可制得其中Y和Z都為-CH2-、G2為C(O)OH的式Ⅰ化合物。另外，通過組合上述適當(dāng)步驟，本領(lǐng)域技術(shù)人員也可制備其中Y和Z之一或二者皆為-CH2-、G2為H、-C(O)NH2、5-四唑基、-C(O)N(R7)OH或CH2OH的式Ⅰ化合物。
在另一種方案中，可用本領(lǐng)域內(nèi)已知方法(Borch等，J.Am.Chem.Soc.，93，2897(1971))，用式ⅩⅩⅩⅩ的胺(其中Pro8為羧酸保護(hù)基團(tuán)，如烷基、芐基、對(duì)甲氧基芐基等)將式ⅩⅩⅩⅧ的醛還原胺化，得到式ⅩⅩⅩⅪ化合物
可用本領(lǐng)域內(nèi)已知方法選擇性除去Pro8保護(hù)基，得到相應(yīng)的羧酸，該羧酸可與式Ⅵ的胺偶合得到式ⅩⅩⅩⅨ化合物。按上述方法除去保護(hù)基團(tuán)，得到其中Y為-CH2-、Z為-C(O)-、G2為C(O)OH的式Ⅰ化合物。
在又一種方案中，可用適當(dāng)?shù)腘保護(hù)基團(tuán)Pro9(如Cbz基團(tuán))在仲胺上對(duì)其中R1為H的式ⅩⅩⅩⅪ化合物進(jìn)行保護(hù)，得到式ⅩⅩⅩⅫ化合物 可用本領(lǐng)域內(nèi)已知方法選擇性除去式ⅩⅩⅩⅫ化合物的Pro8保護(hù)基團(tuán)，得到相應(yīng)的羧酸，該羧酸可與式Ⅸ的胺偶合得到式ⅩⅩⅩⅩⅢ化合物
可用本領(lǐng)域內(nèi)已知方法選擇性除去式ⅩⅩⅩⅩⅢ化合物的Pro4保護(hù)基團(tuán)，得到相應(yīng)的羧酸，該羧酸可與式Ⅳ的胺偶合得到式ⅩⅩⅩⅩⅣ化合物 去掉ⅩⅩⅩⅩⅣ的Pro2保護(hù)基團(tuán)，除去N保護(hù)基團(tuán)Pro9(例如用三氟乙酸、苯硫基甲烷和溴代三甲基甲硅烷的混合物)，并除去X和G1上的任選保護(hù)基，得到其中Y為-CH2-、Z為-C(O)-、R1為H、G2為C(O)OH的式Ⅰ化合物。
在這些方法中，側(cè)鏈保護(hù)基團(tuán)可用于保護(hù)帶有反應(yīng)性官能團(tuán)(如羥基、羧基、氨基、巰基、胍基、咪唑基、吲哚基等)的氨基酸。用于保護(hù)任何氨基酸殘基的具體保護(hù)團(tuán)依待保護(hù)的側(cè)鏈而定且為本領(lǐng)域內(nèi)公知。側(cè)鏈保護(hù)基團(tuán)的實(shí)例包括用于保護(hù)羥基的乙?；⒈郊柞；?、芐基、叔丁基等;用于保護(hù)羧基的環(huán)己基、芐基、甲基、乙基、叔丁基等;用于保護(hù)巰基的芐基、4-甲基芐基、4-甲氧基芐基、乙?；?、乙酰氨基甲基、三苯甲基(三苯甲游基)等;用于保護(hù)氨基的叔丁氧羰基(Boc)、芐氧羰基(Cbz)、N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基](Fmoc)、鄰苯二甲?；?Pht)、對(duì)甲苯磺?；?Tos)、三氟乙?；?、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧羰基(Teoc)等;用于保護(hù)咪唑基的2，4-二硝基苯基、芐氧基甲基、Tos、Boc、三苯甲游基等;用于保護(hù)吲哚基的甲酰基、Cbz、Teoc、氨基甲酸2，2，2-三氯乙酯(TROC)等;用于保護(hù)胍基的甲苯磺?；⑾趸?、二(1-金剛烷氧羰基)等。
根據(jù)需要，側(cè)鏈保護(hù)基可通過(例如)在惰性溶劑或溶劑混合物中用一個(gè)或多個(gè)去保護(hù)劑處理來(lái)除去。關(guān)于保護(hù)基團(tuán)和合適的去保護(hù)劑的實(shí)例，參見M.bodansky和A.Bodansky，“The Practice of Peptide Synthesis”，Springer-Verlag，Inc.(1984);以及T.W.Greene和P.G.M.Wuts，“Protective Groups in Organic Synthesis”，第二版，John Wiley & Sons，New York，1991.
現(xiàn)在通過下述操作實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，這些實(shí)施例為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案。除非另外指明，所有的溫度均為攝氏度(℃)。這里例舉的化合物包含一個(gè)堿性部分(如胺或取代的胺，可以以其有機(jī)或無(wú)機(jī)酸鹽的形式存在。雖未在所有的實(shí)施例中均有這類明確說(shuō)明，但這對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是不言自明的。這些實(shí)施例僅作說(shuō)明之用而無(wú)限定之意。
實(shí)施例1(R＊，S＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸
A.(R＊)-N-[[2-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯在4℃下，攪拌(S)-3，4-二氫-2，3(1H)-異喹啉二羧酸的2-(1，1-二甲基乙基)酯(2.0g，7.21mmol)和L-蛋氨酸甲酯鹽酸化物(1.44g，7.21mmol)的5∶15N-甲基吡咯烷酮-CH2Cl2溶液。加入N，N-二異丙基乙胺(1.23ml，7.21mmol)，隨后加入N-羥基苯并三唑(974mg，7.21mmol)。將反應(yīng)混合物攪拌5分鐘，然后加入1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺·HCl(1.38g，7.21mmol)。反應(yīng)混合物回到室溫，攪拌過夜，并在CH2Cl2和飽和NaCl之間分配。有機(jī)相逐次用檸檬酸、NaHCO3和NaCl洗滌，用MgSO4干燥并真空濃縮，得到2.64g(86%)化合物A。該化合物不經(jīng)進(jìn)一步提純而直接用于下一步。
B.(R＊)-N-[(1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基)羰基]-L-蛋氨酸，甲酯在室溫下，用10ml三氟乙酸和0.5ml甲硫醚處理化合物A(2g，6.22mmol)在10mlCH2Cl2中的溶液并攪拌0.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物真空濃縮，溶于CH2Cl2后再濃縮。重復(fù)該過程五次，得到透明玻璃狀的化合物B(99%)。該化合物不經(jīng)進(jìn)一步提純而直接用于下一步。
C.(R＊)-N-[[2-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯將化合物B(4.73mmol)溶于CH2Cl2(20ml)并冷卻至0℃。加入N-叔丁氧羰基-L-纈氨酸(2.06g，9.466mmol)、二(2-氧代-3-噁唑烷基)膦酰氯(1.2g，4.733mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.2g，1.6ml，9.466mmol)。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌24小時(shí)。補(bǔ)加二(2-氧代-3-噁唑烷基)膦酰氯(1.2g，4.733mmol)和N，N-二異丙基乙胺(590mg，0.8ml，4.733mmol)，并將反應(yīng)混合物在0℃下再攪拌12小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮并用色譜法分離(硅膠，用50%乙酸乙酯、50%己烷洗脫)。收集有效級(jí)分并濃縮，得到化合物C，為透明油狀物(2.4g，97%)。
D.(R＊)-N-[[2-(L-纈氨酰)-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯在室溫下，將化合物C(190mg，0.45mmol)在甲硫醚(0.3ml)和4NHCl的二氧六環(huán)溶液中攪拌30分鐘。將反應(yīng)混合物真空濃縮，溶于CH2Cl2(30ml)并濃縮。重復(fù)后一過程五次，得到透明玻璃狀的化合物D(99%)。該化合物不經(jīng)進(jìn)一步提純而直接用于下一偶合步驟。
E.N2-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-N-甲氧基-N-甲基-S-(三苯甲基)-L-半胱氨酰胺將N-丁氧羰基-S-三苯甲游基-L-半胱氨酸(20.0g，43.14mmol)、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺·HCl(8.3g，43.1mmol)和1-羥基苯并三唑水合物(5.8g，43.1mmol)溶于二甲基甲酰胺(100ml)中。然后加入N，O-二甲基羥胺鹽酸化物(4.91g，50.6mmol)和N，N-二異丙基乙胺(6.13g，8.3ml，47.5mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，傾入水(50ml)中，并用乙酸乙酯(3×200ml)萃取。合并有機(jī)層，用水(3×500ml)和鹽水(200ml)洗滌，用MgSO4干燥，濃縮并用色譜法分離(硅膠、用40%乙酸乙酯、60%己烷洗脫)。收集含產(chǎn)物的級(jí)分并濃縮，得到化合物E，為白色固體(19.95g，92%)。
F.N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-S-(三苯甲基)-L-半胱氨醛將化合物E(1.00g，1.89mmol)溶于四氫呋喃(4ml)中并將溶液冷卻到0℃。在20分鐘內(nèi)滴加1M LiAlH4的四氫呋喃溶液(4.9ml，4.9mmol)。在0℃和氮?dú)夥障?，將反?yīng)混合物攪拌30分鐘。加入乙醚(200ml)，在0℃下，滴加1M KHSO4(40ml)處理反應(yīng)混合物。將混合物在0℃下再攪拌30分鐘并分層。有機(jī)層用飽和NaHCO3(50ml)、1M KHSO4(50ml)和鹽水(50ml)洗滌，用MgSO4干燥并濃縮，得到化合物F，為白色玻璃狀物(840mg，99%)，該物不經(jīng)進(jìn)一步提純而立即將其用于下一步。
G.(R＊，S＊)-N-[[2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基-L-蛋氨酸，甲酯在室溫下，將化合物D(0.45mmol)和化合物F(250mg，0.54mmol)溶于甲醇(10ml)和冰醋酸(0.2ml)中。將氰基硼氫化鈉(28mg，0.45mmol)溶于甲醇(2ml)，并在30分鐘內(nèi)將其溶液逐滴加入。將反應(yīng)混合物攪拌3小時(shí)。然后補(bǔ)加化合物F(125mg，0.27mmol)，將反應(yīng)混合物再攪拌3小時(shí)。將混合物冷卻至0℃，緩慢加入飽和NaHCO3(50ml)。然后用乙酸乙酯(60ml)萃取產(chǎn)物。乙酸乙酯層用水(100ml)和鹽水(100ml)洗滌，用MgSO4干燥，濃縮并用色譜法分離(硅膠，用40%乙酸乙酯、50%己烷洗脫)。收集含產(chǎn)物的級(jí)分并濃縮，得到化合物G，為透明油狀物(260mg，67%)。
H.(R＊，S＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸在室溫下，將化合物G(1.8g，2.11mmol)溶于甲醇(30ml)和5N NaOH(10ml)中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。將混合物用5N HCl中和至pH值為6，濃縮并溶于乙酸乙酯(100ml)和水(100ml)中。分出水層，用5N HCl酸化至pH值為2，并用乙酸乙酯(100ml)萃取。合并有機(jī)層，用鹽水(50ml)洗滌，用MgSO4干燥并濃縮，得到白色固體。將其溶于CH2Cl2(10ml)、三氟乙酸(10ml)和三乙基甲硅烷(1.0ml)，并在室溫下攪拌40分鐘。將混合物濃縮，溶于CH2Cl2(50ml)，然后再濃縮。重復(fù)后一過程五次，得到粗產(chǎn)物，為白色膠粘固體(定量回收粗產(chǎn)物)。固體粗品用制備HPLC提純(YMC-C18柱，2.2×25cm，5微米，120埃;溶劑A，0.1%三氟乙酸的水溶液;溶劑B，0.1%三氟乙酸的乙腈溶液40分鐘，A、B混合物(含B25～35%)，流速9ml/分;220nm紫外監(jiān)測(cè))。合并含化合物H的級(jí)分并凍干，得到白色固體(790mg，75%產(chǎn)率)。
mp 103-104℃旋光度-44.2°(c＝0.5，甲醇)MS(M+H)+497+.
元素分析(2.20 C2HF3O2，0.80 H2O)計(jì)算值C，45.03;H，5.68;N，7.99;F，13.40;
實(shí)測(cè)值C，45.03;H，5.44;N，7.95;F，12.99.
1H-NMR(CD3OD，270 MHz)δ(ppm)7.17(4H，m)，4.72(4H，m)，4.48(1H，m)，4.29(1H，m)，3.92(1H，m)，3.25(2H，m)，2.69(2H，m)，2.43(1H，m)，2.12(3H，m)，1.95(3H，d)，1.83(2H，m)，0.98(6H，m).
實(shí)施例2
(R＊)-N-[[2-N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸 A.(R＊)-N-[[2-N-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-S-(三苯甲基)-L-半光氨酰-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯在4℃下，用7.5ml三氟乙酸處理化合物1C(1.2g，2.3mmol)在7.5ml CH2Cl2中的溶液并攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物真空濃縮，溶于CH2Cl2，并用N，N-二異丙基乙胺中和。將所得溶液加入冰浴冷凍的N-叔丁氧羰基-S-三苯甲游基-L-半胱氨酸(3.21g，6.9mmol)、苯并三唑-1-基氧基三(三甲氨基)氟磷酸鏻(3.05g，6.9mmol)、N-羥基苯并三唑(936mg，6.9mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.2ml，9mmol)的四氫呋喃溶液中。使反應(yīng)混合物回到室溫并攪拌過夜。真空除去溶劑，將殘余物溶于乙酸乙酯。有機(jī)溶液逐次用飽和檸檬酸、NaHCO3和NaCl洗滌，然后用MgSO4干燥并真空濃縮，得到白色泡沫狀殘余物。在5×16硅膠柱上純化，用25%至40%的乙酸乙酯/己烷洗脫，得到1.34g(1.55mmol，67%)化合物A。
作為一種供選擇的方案，將化合物1C(3g，5.75mmol)加入2N HCl的乙酸(10ml)和甲硫醚(1ml)溶液中。攪拌3小時(shí)后，真空除去溶劑，殘余物用乙醚(3×50ml)研制。所得物質(zhì)(2.4g)的乙酸乙酯(100ml)溶液用NaHCO3(20ml)洗滌，用Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮，將殘余物(2.19g)溶于二甲基甲酰胺(30ml)并在N2下冷卻至0℃。向其中加入N-叔丁氧羰基-S-三苯甲游基-L-半胱氨酸(2.42g，5.21mmol)、N，N-二異丙基乙胺(905ml，5.21mmol)和苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)氟磷酸鏻(2.30g，5.21mmol)。30分鐘后，使反應(yīng)混合物升至室溫。攪拌6小時(shí)后，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(300ml)稀釋，并逐次用飽和NaHCO3(100ml)、磷酸緩沖液(pH＝4，100ml)和10%氯化鋰(3×100ml)洗滌。有機(jī)層用Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮。殘余物用硅膠柱提純(用3∶1至1∶1的己烷/乙酸乙酯400ml洗脫)，得到化合物A(4.23g，86%)。
TLC∶Rf＝0.49(1∶1己烷/乙酸乙酯，用硫酸鈰銨顯色);
mp82-84℃。
B.(R＊)-N-[[2-[N-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-S-(三苯甲基)-L-半胱氨酰]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸在室溫下，用LiOH(162mg，3.88mmol)在30ml H2O中的溶液處理化合物A(1.34g，1.55mmol)在90ml甲醇中的溶液3小時(shí)。真空除去甲醇，水溶液用水稀釋，用乙醚洗滌并用飽和檸檬酸酸化。用乙酸乙酯將產(chǎn)物由水相中萃取出來(lái)。有機(jī)溶液用飽和NaCl洗滌并用MgSO4干燥，真空除去溶劑，得到650mg(0.76mmol，50%)化合物B，不經(jīng)進(jìn)一步提純而將其直接用于下一步。
作為一種供選擇的方案，在0℃下，向化合物A(1.0g，1.15mmol)的四氫呋喃(4ml)溶液中加入1N NaOH(2.30ml，2.30mmol)。攪拌2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物傾入1N HCl(10ml)中并用乙酸乙酯(3×50ml)萃取。有機(jī)層用Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮，得到化合物B(970mg，99%)。
TLCRf＝0.75(9∶1∶0.05氯仿/甲醇/乙酸，用硫酸鈰銨顯色);
mp112-115℃。
C.(R＊)-N-[[2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸在室溫下，用95ml三氟乙酸、3ml苯硫基甲烷、1ml甲硫醚和1ml乙二硫醇的混合物處理化合物B3.5小時(shí)。真空除去揮發(fā)分，殘余物用冷乙醚研制。收集到286mg(0.56mmol，74%)肽的粗品沉淀，用冷乙醚洗滌，最后用冰醋酸萃取。將乙酸溶液凍干，凍干物用反相HPLC純化，采用25-60%溶劑B在溶劑A中的溶液梯度洗脫60分鐘(溶劑A0.05%三氟乙酸的水溶液;溶液B0.05%三氟乙酸的乙腈溶液)，凍干后，得到120mg純化合物C。
FAB-MS533(M Na+)，511(MH+)，362(M-Met H+)，309(M-Tic Met H+).
分析結(jié)果 C28H34N4O5S2·C2HF3O2·H2O理論值C，47.22;H，5.82;N，8.85;S，10.12;F，8.55.
實(shí)測(cè)值C，47.21;H，5.67;N，8.60;S，10.15;F，8.41.
實(shí)施例3(R＊)-N-[[2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯 除反應(yīng)在0℃進(jìn)行外，采用上述由化合物B制備化合物2C的方法，由化合物2A(672mg，0.72mmol)制得標(biāo)題化合物(100mg，27%)。
FAB-MS525(MH+)，547(MNa+).
分析結(jié)果 C24H36N4O5S2·1.22C2HF3O2·0.14H2O理論值C，47.66;H，5.67;N，8.41;S，9.62;F，10.44.
實(shí)測(cè)值C，47.66;H，5.41;N，8.17;S，9.85;F，10.42.
實(shí)施例4(R＊)-N-[[2-[N-(3-巰基-1-氧代丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸
A.(R＊)-N-[[2-[N-[3-[(三苯甲基)硫基]-1-氧代丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯在0℃下，用50ml 1∶1的三氟乙酸/CH2Cl2處理化合物C(2.61g，5mmol)1小時(shí)。真空除去揮發(fā)分，將殘余物溶于25ml四氫呋喃，用N，N-二異丙基乙胺中和，并將其加入冰冷的S-三苯甲游基-3-巰基丙酸(5.22g，15mmol，根據(jù)Kwang等，J.Med.Chem.，13，414(1970)所述方法制備)、苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)氟磷酸鏻(6.65g，15mmol)、N-羥基苯并三唑(2.03g，15mmol)和N，N-二異丙基乙胺(2.7ml)在75ml四氫呋喃中的溶液中。使反應(yīng)混合物回到室溫并攪拌過夜。將反應(yīng)混合物真空濃縮，殘余物在乙酸乙酯和NaCl之間分配。有機(jī)相用檸檬酸、NaHCO3和NaCl洗滌，用MgSO4干燥并濃縮，得到白色泡沫狀殘余物。將其在5×16硅膠柱上純化，采用20-60%乙酸乙酯/己烷作洗脫液，得到2.07g(55%)化合物A。
B.(R＊)-N-[[2-[N-[3-[(三苯甲基)硫基]-1-氧代丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸按上述化合物2B的制備方法，用LiOH處理化合物A(1.59g，2.1mmol)，得到1.25g(88%)化合物B。
C.(R＊)-N-[[2-[N-(3-巰基-1-氧代丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸按化合物3A的制備中所述方法，將化合物B(740mg，1mmol)在三氟乙酸/苯硫基甲烷/甲硫醚/乙硫醇中去保護(hù)。除去揮發(fā)分后，將殘余物用乙醚/戊烷研制，沉淀的粗產(chǎn)物用冷戊烷洗滌，然后用0.5%的三氟乙酸的乙腈溶液萃取。乙腈溶液用等體積的0.5%的三氟乙酸水溶液稀釋，凍干后，將殘余物用反相HPLC純化，得到化合物C。
FAB-MS496(MH+)，518(MNa+).
分析結(jié)果 C23H33N3O5S2·0.46C2HF3O2·0.03H2O理論值C，52.40;H，6.16;N，7.79;S，11.91;F，4.73實(shí)測(cè)值C，52.40;H，6.24;N，7.79;S，11.91;F，4.72.
實(shí)施例5(R＊，R＊)-N-[[2-[2-(L-半胱氨酰氨基)-3-甲基丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸
A.N2-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-N-甲氧基-N-甲基-L-纈氨酰胺將N，O-二甲基鹽酸胲(4.91g，50.6mmol)溶于CH2CL2(100ml)中。加入N-叔丁氧羰基-L-纈氨酸(10.0g，46mmol)、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺鹽酸化物(9.7g，50.6mmol)和N，N-二異丙基乙胺(6.13g，8.3ml，47.5mmol)。在室溫下，將反應(yīng)混合物攪拌16小時(shí)，濃縮并用色譜法分離(硅膠，用40%乙酸乙酯、60%己烷洗脫)。收集有效級(jí)分并濃縮，得到化合物A，為透明油狀物(3.5g，42%)。
B.N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨醛采用上述由化合物1E制備化合物1F的方法，由化合物A(3.5g，11.8mmol)制得化合物B(2.6g，99%;無(wú)色油狀物)。
C.(R＊)-N-[[2-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-甲基丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯在室溫下，向化合物B(2.6g，11.82mmol)和化合物1B(4.66g，13.0mmol)的甲醇(100ml)溶液中加入冰醋酸(2.0ml)。在30分鐘內(nèi)分批加入氰基硼氫化鈉(743mg，11.83mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4小時(shí)。將混合物冷卻至0℃。緩慢加入飽和NaHCO3(100ml)并用乙酸乙酯(200ml)萃取產(chǎn)物。乙酸乙酯層用水(200ml)和鹽水(100ml)洗滌，用MgSO4干燥，濃縮并用色譜法純化(硅膠，用50%乙醚、50%己烷洗脫)。收集含產(chǎn)物的級(jí)分并濃縮，得到化合物C，為透明油狀物(1.5g，30%)。
D.(R＊，R＊)-N-[[2-[2-[[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-S-(三苯甲基)-L-半胱氨酰]氨基]-3-甲基丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯在室溫下，將化合物C(1.5g，2.96mmol)在甲硫醚(0.4ml)和4N HCl的二氧六環(huán)溶液中攪拌30分鐘。將混合物濃縮，溶于CH2Cl2(30ml)，然后再濃縮。重復(fù)后一過程五次，得到胺鹽酸化物，為透明玻璃狀物。將其溶于二甲基甲酰胺(20ml)和N，N-二異丙基乙胺(383mg，0.52ml，2.96mmol)中。將該溶液逐滴加入攪拌下的N-叔丁氧羰基-S-三苯甲游基-L-半胱氨酸(1.65g，3.55mmol)、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺·HCl(737mg，3.85mmol)和1-羥基苯并三唑水合物(519mg，3.85mmol)的二甲基甲酰胺(30ml)溶液中。將反應(yīng)混合物攪拌16小時(shí)。將混合物傾入水(100ml)中并用乙酸乙酯(2×100ml)萃取產(chǎn)物。合并乙酸乙酯層，用水(3×200ml)和鹽水(100ml)洗滌，用MgSO4干燥，濃縮并用色譜法純化(硅膠，用50%乙酸乙酯、50%己烷洗脫)。收集含產(chǎn)物的級(jí)分并濃縮，得到化合物D，為透明油狀物(1.9g，75%)。
E.(R＊，R＊)-N-[[2-[2-(L-半胱氨酰氨基)-3-甲基丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸采用上述由化合物1G制備化合物1H的方法，由化合物D(1.4g，1.64mmol)制得化合物E(50%)。
mp 112-113℃旋光度-55.7°(c＝0.5，甲醇)MS(M+H)+497+.
元素分析 2.20 C2HF3O2，0.80 H2O計(jì)算值C，43.123;H，5.02;N，6.84;
實(shí)測(cè)值C，42.83;H，5.12;N，7.13.
1H-NMR(CD3OD，270 MHz)δ(ppm)7.28(4H，m)，4.57(2H，m)，4.39(1H，m)，4.22(2H，m)，4.11(1H，m)，3.14(4H，br m)，2.55(2H，m)，2.21(2H，m)，2.10(3H，s)，1.97(3H，m)，0.98(6H，m).
實(shí)施例6(R＊)-N-[[2-[N-(3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸 A.3-[(三苯甲基)硫基]-N-甲氧基-N-甲基丙酰胺向攪拌下的S-三苯甲游基-3-硫基丙酸(4.5g，12.9mmol，根據(jù)Kwang等，J.Med.Chem.，13，414(1970)所述方法制備)的CH2Cl2(40ml)溶液中加入N，N-二異丙基乙胺(2.2ml，12.9mmol)，隨后加入苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)氟磷酸鏻(5.7g，12.9mmol)。數(shù)分鐘后，補(bǔ)加二異丙基乙胺(2.2ml，12.9mmol)，并同時(shí)加入N，O-二甲基鹽酸胲(1.31g，13.5mmol)。將溶液在室溫下攪拌2小時(shí)。補(bǔ)加CH2Cl2(80ml)，溶液用1N KHSO4(3×)、飽和NaHCO3(3×)和鹽水(2×)洗滌。有機(jī)層用MgSO4干燥并濃縮。殘余物用乙酸乙酯/己烷重結(jié)晶兩次，得到化合物A(4.12g，82%)。
B.[(三苯甲基)硫基]丙醛采用上述由化合物1E制備化合物1F的方法，由化合物A(1.8g，5.2mmol)制得化合物B(1.5g，88%)。
C.(R＊)-N-[[2-[N-[3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯采用與上述由化合物5B和化合物1B制備化合物5C類似的方法，由化合物B(1.5g，4.6mmol)和化合物1D(2.2g，5.2mmol)制得化合物C(1.8g，53%)。
D.(R＊)-N-[[2-[N-(3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸采用與上述由化合物1G制備化合物1H類似的方法，由化合物C(700mg，0.94mmol)制得化合物D(白色粉末，49%)。
MS(M+H)+482+1H-NMR(CD3OD，270 MHz)δ(ppm)7.23-7.13(4H，m)，4.65-4.49(4H，m)，4.26(1H，m)，3.22(1H，m)，3.06-2.88(3H，m)，2.51-2.35(4H，m)，1.97(3H，s)，2.33-1.77(4H，m)，1.10-1.07(6H，m).
元素分析 C23H34N3O4S2·1.2C2HF3O2，1.35H2O計(jì)算值C，47.53;H，5.95;N，6.55;S，9.99;F，10.68;
實(shí)測(cè)值C，47.54;H，5.85;N，6.69;S，9.76;F，10.66.
旋光度-33.8°(c＝0.7，甲醇).
實(shí)施例7
(R＊)-N-[[2-[N-(3-巰基丙基)-L-丙氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸 A.(R＊)-N-[[2-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-丙氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯將化合物1A(4.0g，9.47mmol)在甲硫醚(0.5ml)和4N HCl的二氧六環(huán)(10ml)溶液中攪拌30分鐘。將混合物濃縮，溶于CH2Cl2(50ml)，再濃縮。重復(fù)后一過程五次，得到胺鹽酸化物，為透明玻璃狀物。將其溶于CH2Cl2(40ml)中并冷卻至0℃。加入叔丁氧羰基-L-丙氨酸(3.58g，18.93mmol)、二(2-氧代-3-噁唑烷基)膦酰氯(4.82g，19.93mmol)和N，N-二異丙基乙胺(3.68g，5.0ml，28.40mmol)。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮并用色譜法分離(硅膠，用40%乙酸乙酯、60%己烷洗脫)。收集含產(chǎn)物的級(jí)分并濃縮，得到化合物A，為白色玻璃狀物(4.6g，99%)。
B.(R＊)-N-[[2-[N-[3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-L-丙氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯在室溫下，將化合物A(2.5g，5.07mmol)在甲硫醚(0.3ml)和4N HCl的二氧六環(huán)(10ml)溶液中攪拌30分鐘。將混合物濃縮，溶于CH2Cl2(30ml)，再濃縮。重復(fù)后一過程五次，得到胺鹽酸化物，為透明玻璃狀物。在室溫下，將該物質(zhì)和化合物6B(4.4g，13.25mmol)溶于甲醇(100ml)和冰醋酸(2.0ml)中。在30分鐘內(nèi)分批加入氰基硼氫化鈉(833mg，13.25mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4小時(shí)。將混合物冷卻至0℃，并緩慢加入飽和NaHCO3(100ml)。然后用乙酸乙酯(200ml)萃取產(chǎn)物，乙酸乙酯層用水(200ml)和鹽水(100ml)洗滌，用MgSO4干燥，濃縮并用色譜法分離(硅膠，用50%乙酸乙酯、50%己烷洗脫)。收集含產(chǎn)物的級(jí)分并濃縮，得到化合物B，為透明油狀物(2.0g，56%)。
C.(R＊)-N-[[2-[N-(3-巰基丙基)-L-丙氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸采用上述由化合物1G制備化合物1H的方法，由化合物B制得化合物C。
mp 81-82℃[α]D25＝-43.3°(c＝1.0，甲醇)，MS(M+H)+454+.
元素分析計(jì)算值C，46.82;H，5.89;N，7.12.
實(shí)測(cè)值C，46.83;H，5.52;N，7.05.
1H-NMR(CD3OD，270 MHz)δ(ppm)7.16(4H，m)，4.67(2H，m)，4.56(2H，m)，4.51(1H，m)，4.39(1H，m)，4.03(1H，m)，3.19(2H，m)，3.01(2H，m)，2.48(2H，m)，2.35(1H，m)，1.99(1H，m)，1.96(3H，s)，1.86(2H，m)，1.51(3H，m).
實(shí)施例8
(R＊)-N-[[2-[N-(3-巰基丙基)-N-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸 A.(R＊)-N-[[2-[N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-N-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯采用化合物7A的制備中所述方法對(duì)化合物1A(2.0g，4.733mmol)進(jìn)行N去保護(hù)。將得到的胺鹽酸化物溶于CH2Cl2(20ml)并冷卻至0℃。加入Fmoc-N-甲基-L-纈氨酸(1.67g，4.733mmol)、二(2-氧代-3-噁唑烷基)膦酰氯(2.41g，9.467mmol)和N，N-二異丙基乙胺(2.45g，3.3ml，18.9mmol)。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌4小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮并用色譜法分離(硅膠，用40%乙酸乙酯、60%己烷洗脫)，得到化合物A，為白色玻璃狀物(2.4g，78%)。
B.(R＊)-N-[[2-[N-[3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-N-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯在室溫下，將化合物A(1.20g，2.309mmol)在乙腈(30ml)和二乙胺(2.4ml)中攪拌1小時(shí)。將混合物濃縮，溶于CH2Cl2(50ml)，然后再濃縮。重復(fù)后一過程七次，得到胺，為透明玻璃狀物。在二氧六環(huán)(10ml)中，4NHCl將該胺轉(zhuǎn)化成鹽酸鹽。將所得溶液濃縮，溶于CH2CL2(50ml)，然后再濃縮。重復(fù)后一過程三次，得到胺鹽酸化物，為透明玻璃/油狀混合物。在室溫下，將該產(chǎn)物與化合物6B(1.33g，4.018mmol)溶于甲醇(35ml)和冰醋酸(0.6ml)中。在1小時(shí)內(nèi)分批加入氰基硼氫化鈉(253mg，4.018mmol)。將反應(yīng)混合物攪拌16小時(shí)。將混合物冷卻至0℃并緩慢加入飽和NaHCO3(50ml)。然后用乙酸乙酯(100ml)萃取產(chǎn)物。乙酸乙酯層用水(100ml)和鹽水(50ml)洗滌，用MgSO4干燥，并濃縮并用色譜法分離(硅膠，用95%二氯甲烷、5%甲醇洗脫)。收集含有所需化合物的級(jí)分并濃縮，得到化合物B，為透明油狀物(1.4g，52%)。
C.(R＊)-N-[[2-[N-(3-巰基丙基)-N-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸采用上述由化合物1G制備化合物1H的方法，由化合物B(1.3g，1.73mmol)制得化合物C(60%產(chǎn)率)。
mp 85-86℃[α]D25＝-31.9°(c＝0.7，甲醇)MS(M+H)+496+.
元素分析計(jì)算值C，49.38;H，6.17;N，6.59;F，9.84;
實(shí)測(cè)值C，49.50;H，6.39;N，6.41;F，9.70.
1H-NMR(CD3OD，270 MHz)δ(ppm)7.21(4H，m)，4.87(2H，m)，4.55(2H，m)，3.24(2H，m)，3.06(2H，m)，2.48(2H，m)，2.32(1H，m)，2.07(1H，m)，1.98(3H，s)，1.88(3H，m)，1.22(3H，d，J＝7.03Hz)，0.95(3H，d，J＝6.45Hz).
實(shí)施例9(R＊，R＊)-N-[[2-[2-[(3-巰基丙基)氨基]-3-甲基丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸 A.(R＊)-N-[[2-[2-[[3-[(三苯甲基)硫基]丙基]氨基]-3-甲基丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯采用上述由化合物7A制備化合物7B的二步法，由化合物5C(2.00g，3.95mmol)制得化合物A(1.7g，54%)，但在第二步中，僅用1.1當(dāng)量(4.34mmol)化合物6B和1.1當(dāng)量(4.34mmol)氰基硼氫化鈉。
B.(R＊，R＊)-N-[[2-[2-[(3-巰基丙基)氨基]-3-甲基丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸采用上述由化合物1G制備化合物1H的方法，由化合物A(1.6g，2.21mmol)制得化合物B(70%產(chǎn)率)。
mp 68-69℃[α]D25＝-19.2°(c＝0.6，甲醇)MS(M+H)+468+.
元素分析計(jì)算值C，49.40;H，6.25;N，6.78;F，11.49;
實(shí)測(cè)值C，49.40;H，6.50;N，6.60;F，11.33.
1H-NMR(CD3OD，270 MHz)δ(ppm)7.18(4H，m)，4.64(1H，m)，4.04(2H，m)，3.84(1H，m)，3.25(2H，m)，3.12(2H，m)，2.77(2H，m)，2.67(2H，m)，2.54(2H，m)，2.18(1H，m)，2.08(3H，s)，2.02(4H，m)，1.03(3H，d，J＝6.45Hz)，0.95(3H，d，J＝7.03Hz).
實(shí)施例10(R＊)-N-[[2-[N-(3-巰基丙基)-L-脯氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸 A.(R＊)-N-[[2-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-脯氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯采用上述由化合物1A制備化合物8A的二步法，由化合物1A(2.0g，4.73mmol)制得化合物A(1.2g，49%)，但第二步中用叔丁氧羰基-L-脯氨酸(2.04g，9.46mmol)代替Fmoc-N-甲基-L-纈氨酸。
B.(R＊)-N-[[2-[N-[3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-L-脯氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯采用上述由化合物7A制備化合物7B的方法，由化合物A(1.20g，2.31mmol)制得化合物B(透明油狀物，1.5g，89%)。
C.(R＊)-N-[[2-[N-(3-巰基丙基)-L-脯氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸采用上述由化合物1G制備化合物1H的方法，由化合物B(1.5g，2.04mmol)制得化合物C(70%產(chǎn)率)。
mp 54-55℃[α]D25＝-50.0°(c＝0.7，甲醇)MS(M+H)+480+.
元素分析計(jì)算值C，48.75;H，5.75;N，6.74;F，10.51;
實(shí)測(cè)值C，48.63;H，5.92;N，6.65;F，10.66.
1H-NMR(CD3OD，270 MHz)δ(ppm)7.18(4H，m)，4.67(2H，m)，4.53(2H，m)，4.41(1H，m)，4.30(1H，m)，3.72(1H，m)，3.24(4H，m)，2.70(1H，m)，2.46(2H，m)，2.34(1H，m)，2.11(2H，m)，1.98(2H，m)，1.96(3H，s)，1.87(4H，m).
實(shí)施例11(R＊)-N-[[2-[N-(2-巰基乙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸
A.2-[(三苯甲基)硫基]-N-甲氧基-N-甲基乙酰胺采用上述化合物6A的制備方法制得化合物A(6.0g，76%)，但用三苯甲基硫代乙酸(7.0g，20.96mmol)代替S-(三苯甲基)-3-巰基丙酸。
B.[(三苯甲基)硫基]乙醛采用上述由化合物6A制備化合物6B的方法，由化合物A(2.0g，5.3mmol)定量制得化合物B。
C.(R＊)-N-[[2-[N-[2-[(三苯甲基)硫基]乙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯采用上述由化合物6B制備化合物6C的方法，由化合物B(5.3mmol)和化合物1C(2.8g，5.3mmol)制得化合物C(490mg，12.8%)。
D.(R＊)-N-[[2-[N-(2-巰基乙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸采用上述由化合物6C制備化合物6D的方法，由化合物C(490mg，0.68mmol)制得化合物C(白色粉末，50%產(chǎn)率)。
mp 94-96℃[α]D25＝-36.7°(c＝0.81，甲醇)MS(M+H)+468+.
元素分析計(jì)算值C，48.38;H，5.87;N，7.05;F，9.57;
實(shí)測(cè)值C，48.39;H，6.09;N，7.14;F，9.60.
1H-NMR(CD3OD，270 MHz)δ(ppm)7.19(4H，m)，4.58(4H，m)，3.07(2H，m)，2.65(2H，m)，2.47(1H，m)，2.29(1H，m)，2.08(1H，m)，1.97(3H，s)，1.90(2H，m)，1.07(6H，m).
實(shí)施例12(R＊)-N-[[2-[N-(3-巰基-1-氧代丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯 向化合物4A(480mg，0.64mmol)在5mlCH2Cl2中的溶液中，交替滴加三乙基甲硅烷(223mg，3.06ml，1.9mmol)在10mlCH2Cl2中的溶液和三氟乙酸(10ml)。將反應(yīng)混合物在室溫和氮?dú)夥障聰嚢?0分鐘，然后真空濃縮。將殘余物用乙醚/戊烷研制，收集沉淀，用更多的乙醚和戊烷洗滌，然后用乙腈/0.5%三氟乙酸萃取。溶液用H2O/0.5%三氟乙酸稀釋，凍干后得到250mg(0.5mmol，77%)酯粗品，為白色固體。用反相HPLC純化(35-90%溶劑B在溶劑A中的濃度梯度，洗脫100分鐘;溶劑A0.05%的三氟乙酸水溶液;溶劑B0.05%的三氟乙酸的乙腈溶液)，得到105mg(0.21mmol，32%)純標(biāo)題化合物，為無(wú)定形白色粉末。
FAB-MS510MH+，508MH-.
1H-NMRδ7.3-7.4(m)，4.8-5.2(m)，3.83(s)，3.77(s)，3.2-3.7(m)，2.5-2.9(m)，2.2(s)，2.1(s)，1.2(m).
分析結(jié)果 C24H35N3O5S2·H2O理論值C，54.66;H，7.06;N，7.97;S，12.16;
實(shí)測(cè)值C，54.79;H，6.64;N，7.84;S，11.91.
實(shí)施例13(R＊，S＊)-2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-[3-(甲硫基)丙基]-3-異喹啉羧酰胺 A.(S)-2-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-1，2，3，4-四氫-N-[3-(甲硫基)丙基]-3-異喹啉羧酰胺向已氮吹洗且冰冷的N-叔丁氧羰基-L-(1，2，3，4-四氫)異喹啉-3-羧酸酯(3.0g，10.8mmol)和3-甲硫基丙胺(1.13g，10.8mmol)在40∶13的CH2Cl2/N-甲基吡咯烷酮中的懸浮液中，加入N，N-二異丙基乙胺(1.85ml，10.8mmol)和N-羥基苯并三唑(1.46g，10.8mmol)。在0℃下攪拌5分鐘后，加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸化物(2.07g，0.8mmol)，1小時(shí)內(nèi)得到透明溶液。使反應(yīng)混合物緩慢回到室溫并攪拌過夜。溶液逐次用飽和NaCl、檸檬酸、飽和NaHCO3和飽和NaCl洗滌，用MgSO4干燥，并真空濃縮。將所得殘余物溶于CHCl3并用飽和NaCl洗滌數(shù)次。有機(jī)層用MgSO4干燥并真空濃縮，得到化合物A(3.91g，10.2mmol，94%)，為無(wú)色油狀物。
B.(R＊)-2-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-[3-(甲硫基)丙基]-3-異喹啉羧酰胺在氮?dú)夥障?，將化合物A(10.2mmol)在40ml1∶1的三氟乙酸/CH2Cl2中攪拌1小時(shí)。將溶液真空濃縮。加入CH2Cl2，再將溶液濃縮。再重復(fù)后一過程兩次。將殘余物溶于CH2Cl2，用N，N-二異丙基乙胺(1.77ml，10.2mmol)處理，然后將其加入冰冷且氮吹洗(大約20分鐘)的N-叔丁氧羰基-L-纈氨酸(4.42g，20.4mmol)、二(2-氧代-3-噁唑烷基)膦酰氯(5.19g，20.4mmol)和N，N-二異丙基乙胺(3.55ml，20.4mmol)在CH2Cl2中的反應(yīng)混合物中。再加入0.9mlN，N-二異丙基乙胺將pH值調(diào)至6，然后將反應(yīng)混合物置于4℃的氮?dú)夥绽涫抑羞^夜。溶液逐次用飽和NaCl、50mM KHSO4、飽和NaHCO3和飽和NaCl洗滌。有機(jī)層用MgSO4干燥并真空濃縮，得到油狀殘余物。用閃色譜法純化(5×12硅膠柱。用12.5%至50%的乙酸乙酯/己烷洗脫)，得到化合物B(1.9g，4.1mmol)。
C.(R＊，S＊)-2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-[3-(甲硫基)丙基]-3-異喹啉羧酰胺在0℃下，將氮吹洗的化合物B(0.93g，2.0mmol)和甲硫醚(1.5ml，20mmol)在20ml1∶1的三氟乙酸-CH2Cl2中的溶液攪拌1小時(shí)。將混合物真空濃縮，溶于CH2Cl2，再次真空濃縮。重復(fù)后一過程數(shù)次，直至CH2Cl2溶液的pH值為4。將其最后一次濃縮。然后在氮?dú)夥障?，在無(wú)水甲醇中將其與化合物1F合并，并滴加N，N-二異丙基乙胺使溶液的pH值為7。分批加入固體NaBH3CN(160mg，2.8mmol)，使反應(yīng)混合物在室溫下反應(yīng)過夜。用4滴冰醋酸將pH值由9調(diào)至6，然后再將反應(yīng)混合物攪拌1.5小時(shí)。將混合物真空濃縮，將殘余物在冰上冷卻，并在冷乙酸乙酯和飽和NaHCO3中分配。有機(jī)相用飽和NaCl洗滌，用MgSO4干燥，并真空濃縮。將殘余物用閃色譜法純化(2×18硅膠柱，用25%以及40%的乙酸乙酯/己烷洗脫)，得到625mg(0.79mmol，40%)化合物C。
D.(R＊，S＊)-2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-[3-(甲硫基)丙基]-3-異喹啉羧酰胺向氮吹洗的化合物C(0.79mmol)在5mlCH2Cl2中的溶液中，交替滴加三氟乙酸(15ml)和三乙基甲硅烷(10ml)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時(shí)，真空濃縮并用乙醚和戊烷研制，得到固體殘余物。收集該固體，用乙醚和戊烷洗滌數(shù)次，然后用冰醋酸萃取。將酸溶液凍干，得到黑色油狀殘余物。將該殘余物溶于50∶50乙腈/0.5%三氟乙酸-H2O/0.5%三氟乙酸中，通過Norit過濾除去黑色，然后用制備HPLC純化，采用20%至50%B在A中的溶液梯度洗脫(A為0.05%的三氟乙酸水溶液，B為0.05%的三氟乙酸的乙腈溶液)。將含產(chǎn)物的級(jí)分凍干，得到27mg(0.06mmol，8%)標(biāo)題化合物，為白色無(wú)定形粉末。
FAB-MSMH+453.
1H NMR(CD3OD)δ7.0-7.2(m)，4.5-4.9(m)，3.9(d)，3.7(d)，2.9-3.5(m)，2.6-2.9(m)，2.3(dt)，1.9-2.2(m)，1.6(m)，1.4-1.5(m)，0.9-1.1(dd).
分析結(jié)果 C22H35N4O2S2·1.95 三氟乙酸·2.10H2O理論值C，43.70;H，5.83;N，7.87;S，9.01;F，15.61.
實(shí)測(cè)值C，43.67;H，5.52;N，7.55;S，8.67;F，15.83.
實(shí)施例14(R＊)-2-[N-(3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-[3-(甲硫基)丙基]-3-異喹啉羧酰胺 A.(R＊)-2-[N-[(三苯甲基)硫基]丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-[3-(甲硫基)丙基]-3-異喹啉羧酰胺在0℃下，將氮吹洗的化合物13B(0.95g，1mmol)、三氟乙酸(10ml)和甲硫醚(1.5ml，20mmol)在10mlCH2Cl2中的溶液攪拌1小時(shí)，然后真空濃縮。將殘余物溶于CH2Cl2并濃縮(重復(fù)此過程四次)。然后將胺鹽與化合物6B一起溶于15∶1的四氫呋喃-甲醇混合溶劑中。用N，N-二異丙基乙胺將pH值調(diào)至為7，然后在數(shù)分鐘內(nèi)分批加入固體NaBH3CN(160mg，2.8mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜，此時(shí)用數(shù)滴乙酸將pH值下調(diào)至6。補(bǔ)加NaBH3CN(80mg，1.4mmol)，然后將反應(yīng)混合物再攪拌24小時(shí)。將混合物冷卻至0℃，加入乙酸乙酯和飽和NaHCO3處理。分離各相，有機(jī)相用飽和NaCl洗滌，用MgSO4干燥并真空濃縮。將殘余物用閃色譜法純化(2×20cm硅膠柱，用25%以及40%的乙酸乙酯/己烷洗脫)，得到385mg(0.55mmol，28%)化合物A。
B.(R＊)-2-[N-(3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-[3-(甲硫基)丙基]-3-異喹啉羧酰胺在0℃和氮?dú)夥障?，將化合物A在95∶3∶1∶1的三氟乙酸-苯硫基甲烷-甲硫醚-乙二硫醇(50ml)溶液中攪拌3小時(shí)。真空除去揮發(fā)分，殘余物用HPLC分析剩余大量起始原料。在室溫下，重復(fù)用95∶3∶1∶1的三氟乙酸-苯硫基甲烷-甲硫醚-乙二硫醇的處理2小時(shí)。將混合物真空濃縮，殘余物用制備HPLC(C-18)純化。采用20-50%溶劑B在溶劑A中的濃度梯度洗脫，并將含產(chǎn)物的級(jí)分凍干(溶劑A為0.05%的三氟乙酸水溶液，溶劑B為0.05%的三氟乙酸的乙腈溶液)，得到標(biāo)題化合物(63.6mg，0.15mmol，27%)，為蓬松的白色無(wú)定形粉末。
FAB MSMH+438.
1H NMR(CD3OD)δ7.0-7.3(m)，4.5-4.9(m)，4.15(d)，2.8-3.4(m)，2.1-2.5(m)，1.7-2.1(m)，1.601.7(m)，1.4-1.5(m)，0.9-1.1(dd).20D(甲醇 )-27.8°.
分析結(jié)果 C22H34N3O2S2·三氟乙酸·H2O
理論值C，50.69;H，6.56;N，7.39;S，11.28;F，10.02;
實(shí)測(cè)值C，50.67;H，6.60;N，6.96;S，11.61;F，10.03.
實(shí)施例15(R＊)-N-[[2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-丙氨酸 在Applied Biosystems 430A型肽合成裝置上，利用N-甲基吡咯烷酮(NMP)HOBt t-Boc儀器內(nèi)設(shè)化學(xué)程序，通過固相方法逐步合成被保護(hù)的肽中間體。叔丁氧羰基-L-Ala-PAM樹脂(0.5g，0.23mmol)由市場(chǎng)購(gòu)得。氨基酸以它們的N-叔丁氧羰基衍生物的形式偶合，用對(duì)甲氧基芐基保護(hù)半胱氨酸的反應(yīng)性側(cè)鏈。相繼用33%和50%的三氟乙酸的CH2Cl2溶液處理10分鐘，在每一循環(huán)周期內(nèi)除去叔丁氧羰基。用10%的N，N-二異丙基乙胺的CH2Cl2溶液中和α-氨基。在室溫下，用DDC/HOBT在NMP/CH2Cl2混合物中的溶液偶合每個(gè)氨基酸。任何剩余的游離氨基均用10%乙酸酐/5%N，N-二異丙基乙胺的CH2Cl2溶液乙?；?0分鐘。最后的偶合之后，按上述方法除去N-叔丁氧羰基。干燥的、被保護(hù)的肽基樹脂重584mg(93%)。
將上面得到的全部產(chǎn)物同時(shí)去保護(hù)，并用無(wú)水液態(tài)HF按如下方法處理而將其從樹脂上裂解下來(lái)將肽基樹脂(584mg)放入帶有攪拌棒的Kel-F HF反應(yīng)器中，用0.75ml苯硫基甲烷、0.25ml乙二硫醇和0.25ml甲硫醚處理。在HF裝置中，將反應(yīng)器抽空并在干冰/乙醇浴中冷卻。將約10ml HF由鋼瓶中蒸入反應(yīng)器，并用冰水浴代替干冰浴。將反應(yīng)混合物在4℃下攪拌1.5小時(shí)，然后真空排除HF30分鐘。將產(chǎn)物沉淀并用乙醚洗滌，然后溶于15%的乙酸水溶液，并經(jīng)過濾與樹脂分開。將濾液在干冰上冷凍并凍干，得到103mg肽產(chǎn)物粗品。將等分試樣(10mg)加入YMC ODS-AQ C18柱(10×250mm，5m)中，在下述條件下操作反相HPLC溶劑A0.05%的三氟乙酸水溶液，溶劑B0.05%的三氟乙酸的乙腈溶液;10-50%溶劑B在溶劑A中的線性濃度梯度，洗脫40分鐘;流速8ml/分。合并含有在30.2分洗脫的主峰(220nm)級(jí)分并凍干，得到7mg標(biāo)題化合物，為白色蓬松的粉末。分析HPLCYMC ODS-AQ C18(4.6×250mm);220nm，1.0ml/分5%至60%溶劑B在溶劑A中的線性濃度梯度，洗脫40分鐘(溶劑A0.05%的三氟乙酸水溶液;溶劑B0.05%的三氟乙酸的乙腈溶液)，保留時(shí)間21.7分鐘。
H.I.; ＞98%.
MS451+(M+H)+.
1H NMR(CD3OD，270 MHz)δ(ppm)7.12(m，Ar-H)，5.60-5.90(m)，4.22(m)，3.95(m)，3.08(J＝5.9Hz)，2.07(J＝11.1Hz)，1.86(J＝16.4Hz)，1.27(J＝7.0Hz)，1.17(J＝7.0Hz)，1.06(J＝7.6Hz)，1.00(J＝6.0Hz)，0.94(J＝6.5Hz).
實(shí)施例16(R＊，R＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-4-羥基-1-氧代丁基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸 采用實(shí)施例15中所述的固相方法，制得標(biāo)題化合物(6mg，白色蓬松粉末)，但作如下改動(dòng)N-叔丁氧羰基-L-Met-PAM樹脂(0.59g，0.25mmol)從市場(chǎng)購(gòu)得。高絲氨酸的反應(yīng)性側(cè)鏈以芐基醚的形式保護(hù)。
MS(M+H)+509+.
1H NMR(CD3OD，270 MHz)δ(ppm)7.52(m)，7.24(m)，5.14(m)，5.02(m)，5.06(m)，5.09(m)，4.7(m)，4.5(m)，3.78(m)，3.64(m)，3.19(m)，2.72(m)，2.39(m)，1.92(m)，1.12(m)，1.03(m).
觀察到旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體實(shí)施例17(R＊，R＊)-2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-[1-羥甲基-3-(甲硫基)丙基]-3-異喹啉羧酰胺
采用實(shí)施例15所述的固相方法，制得標(biāo)題化合物(5.5mg，玻璃狀固體)，但作如下改動(dòng)N-叔丁氧羰基-L-Met-PAM樹脂(1.0g，0.42mmol)從市場(chǎng)購(gòu)得。
用LiBH4處理，將四肽產(chǎn)物從樹脂上裂解下來(lái)。在0℃下，在1小時(shí)內(nèi)，向0.788g(0.26mmol)四肽樹脂在30ml無(wú)水四氫呋喃中的懸浮液中，分四批滴加LiBH4(28mg，1.30mmol)在5ml無(wú)水四氫呋喃中的溶液，將混合物升溫至室溫并攪拌1小時(shí)。加入冰醋酸(4×1ml)處理反應(yīng)。補(bǔ)加冰醋酸(5ml)，隨后加入15%的乙酸水溶液(10ml)。通過過濾將產(chǎn)物由樹脂中分離，并逐次用冰醋酸、15%乙酸和水洗滌。將濾液凍干，得到被保護(hù)的肽醇粗品，為玻璃狀固體。
將被保護(hù)的肽醇懸浮在15mlCH2Cl2中，并在室溫下用1.5ml苯硫基甲烷、0.5ml乙二硫醇、0.5ml甲硫醚和19ml三氟乙酸處理。將混合物在室溫下攪拌2小時(shí)，然后真空濃縮。殘余物用乙醚洗滌并傾析(4×15ml)。將該殘余物溶于冰醋酸(2ml)和15%乙酸(45ml)中，然后凍干。按實(shí)施例15所述方法將凍干物(20mg)用反相HPLC純化，得到5.5mg標(biāo)題化合物。
MS(M+H)+497+.
1H NMR(400MHz，d6 DMSO，30℃)δ(ppm)8.70(m，可置換)，8.13(br s，可置換)，7.50(m，可置換)，7.17(m，5H，Ar-H)，6.49(br s，可置換，CONH)，4.50-5.15(m，a-H＇s)，4.15(br，可置換)，3.69(br，可置換)，3.01(d，J＝6.4Hz)，2.75-2.95(m)，2.32(m)，2.16(m)，1.99(s)，1.77(m)，1.50(m)，1.24(s)，1.02(d，J＝6.84Hz)，0.96(d，J＝6.4Hz).
實(shí)施例18(R＊)-N-[[2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-苯丙氨酸 A.(R＊)-2-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉羧酸，苯甲酯將(S)-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸芐酯(S)-扁桃酸鹽(按B.O.T.Kammermeier等，Synthesis，1157(1992)所述方法制備)(80g，0.19mol)在2l乙酸乙酯和1l 0.9M的碳酸氫鈉之間分配。有機(jī)層用硫酸鎂干燥并蒸發(fā)，得到油狀物。將油狀物溶于600ml二氯甲烷中，將溶液在氮?dú)夥障吕鋮s至5℃。逐次用N-叔丁氧羰基-L-纈氨酸(46g，0.21mol)、N，N-二異丙基乙胺(60ml，44.5g，0.35mol)和二(2-氧代-3-噁唑烷基)膦酰氯(58.3g，0.23mol)處理，每次加料后均冷卻使之回到5℃。將混合物在5℃下攪拌過夜，得到稀漿狀物。將混合物傾入2l乙酸乙酯中，并逐次用1.5l鹽酸、1l水、1.5l 1N碳酸氫鈉和1l鹽水洗滌。將水溶液的第二份1l乙酸乙酯萃取液與第一份合并。第三份萃取液主要含有極性較強(qiáng)的物質(zhì)，不予合并。合并含產(chǎn)物的萃取液并蒸發(fā)，得到油狀物。真空抽吸至恒重，得到82.3g(93%產(chǎn)率)產(chǎn)物，為無(wú)色粘稠油狀物，靜置時(shí)該油狀物部分固化。
B.(R＊)-2-L-纈氨酰-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉羧酸，苯甲酯在室溫下，將化合物A(7.94g，0.017mol)在1M HCl/乙酸(34ml)中的溶液攪拌2小時(shí)。補(bǔ)加1M HCl的乙酸溶液(23.5ml)。將反應(yīng)混合物再攪拌1.5小時(shí)，真空除去溶劑。加入乙酸乙酯，將反應(yīng)混合物真空濃縮。殘余物用己烷研制并真空干燥，得到化合物B(6.26g，99%)。
mp80-83℃TLCRf＝0.65(9∶1∶0.05 氯仿/甲醇/乙酸用硫酸鈰銨顯色)MS(M+H)+367.
C.(R＊)-2-[N-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-S-三苯甲基-L-半胱氨酰]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉羧酸，苯甲酯在0℃和氮?dú)夥障?，向N-叔丁氧羰基-S-三苯甲游基-L-半胱氨酸(7.78g，16.8mmol)在二甲基甲酰胺(80ml)中的溶液中，加入苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)氟磷酸鏻(7.42g，16.8mmol)和N，N-二異丙基乙胺(2.92ml，16.8mmol)。攪拌30分鐘后，加入化合物B(6.96g，16.8mmol，1當(dāng)量)和N，N-二異丙基乙胺(2.92ml，16.9mmol)。在0℃下攪拌16小時(shí)后，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(500ml)稀釋，并隨后用飽和NaHCO3(100ml)和10%LiCl(4×100ml)洗滌。有機(jī)層用Na2SO4干燥，干涉并真空濃縮。殘余物用硅膠色譜法純化(400ml，用1∶4至3∶7的乙酸乙酯/己烷洗脫)，得到化合物C(10.46g，77%)。
mp85-87℃TLCRf＝0.40(2∶1己烷/乙酸乙酯，用硫酸鈰銨顯色)D.(R＊)-2-[N-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-S-(三苯甲基)-L-半胱氨酰]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉羧酸在0℃下的化合物C(8.61g，10.6mmol)的四氫呋喃/甲醇(40ml，3∶1)溶液中，加入1N LiOH(15.9ml，15.9mmol)。在0℃下攪拌1小時(shí)并在室溫下攪拌1小時(shí)后，用水(20ml)稀釋反應(yīng)混合物，并加入1N鹽酸(pH＝2)。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(2×100ml)萃取。合并有機(jī)層，用Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮，得到化合物D(8.54g，73%(HPLC))。
MS(M-H)-720.
1H NMR 400 MHz(CD3OD)0.89(d，3H，J＝5.86)，1.00(d，3H，J＝5.86)，1.45(s，9H)，2.03(m，1H)，2.22(m，1H)，2.61(m，1H)，2.92(m，1H)，3.14(m，1H)，3.93(m，1H)，4.62-5.41(m，4H)，7.27(m，19H).
13C NMR 100 MHz(CD3OD)17.4，19.0，28.0，30.2，31.0，33.6，45.5，51.5，54.1，64.6，66.5，79.8，126.0，126.6，126.8，126.9，127.2，127.8，128.2，129.3，131.4，131.8，140.6，144.1，154.9，170.5，171.7，173.6.
E.(R＊)-N-[[2-[N-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-S-三苯甲基-L-半胱氨酰]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-苯丙氨酸，甲酯在0℃和氮?dú)夥障?，向化合物D(573mg，0.70mmol，88wt%)二甲基甲酰胺(3ml)溶液中，加入L-苯丙氨酸甲酯(181mg，0.84mmol)、N-甲基嗎啉(184ml，1.68mmol)和苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)氟磷酸鏻(371mg，0.84mmol)。在0℃下攪拌16小時(shí)后，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(100ml)稀釋，并隨后用飽和NaHCO3(30ml)、1%KHSO4(30ml)和10%LiCl(3×30ml)洗滌。有機(jī)層用Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物在Merck硅膠上純化(100ml，用3∶1至2∶1的己烷/乙酸乙酯洗脫)，得到化合物E(458mg，76%)。
mp88-92℃TLCRf＝0.15(2∶1己烷/乙酸乙酯，用硫酸鈰銨顯色)F.(R＊)-N-[[2-[N-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-S-三苯甲基-L-半胱氨酰]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-苯丙氨酸在0℃下，向化合物E(376mg，0.426mmol)的四氫呋喃(5ml)溶液中加入1N NaOH(0.853ml，0.853mmol)。攪拌3小時(shí)后，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(100ml)和水(50ml)稀釋，用1N鹽酸(pH＝2)調(diào)節(jié)pH值。分離各層，水層用乙酸乙酯(2×100ml)萃取。合并有機(jī)層，用Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮，得到化合物F(0.354g，96%)。
mp125-129℃TLCRf＝0.65(9∶1∶0.05氯仿/甲醇/乙酸，用硫酸鈰銨顯色)G.(R＊)-N-[[2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-苯丙氨酸(實(shí)施例18G中所用的所有溶劑均經(jīng)脫氣處理。)在0℃和氮?dú)夥障拢蚧衔颋(377mg，0.434mmol)的二氯甲烷(2ml)溶液中加入三乙基甲硅烷(0.69ml，4.34mmol)和三氟乙酸(2ml)。在0℃下攪拌1小時(shí)并在室溫下攪拌1小時(shí)后，真空除去溶劑。將殘余物溶于甲醇(5ml)，加入水(3ml)。過濾沉淀，將一半濾液用制備HPLC純化(YMC ODS S-10，30×500mm，21ml/分，36-90%CH3OH水溶液/0.1%三氟乙酸的濃度梯度)，得到標(biāo)題化合物(54mg，40%)。
mp127-142℃TLCRf＝0.32(4∶1∶1丁醇/乙酸/水，用硫酸鈰銨顯色)MS(M+H)+527.D＝-9.9°[c＝0.102，CH3OH]1H NMR 400 MHz(CD3OD)0.096-1.74(m，6H)，2.06-2.20(m，2H)，2.88-3.42(m，6H)，4.07，4.23(dd，1H，J＝5.13，5.55)，4.44-5.00(m，5H，也是水峰)，7.06-7.26(m，9H).
13C NMR 100 MHz(CD3OD)18.3，18.6，19.7，19.9，26.5，26.9，31.4，31.6，31.7，32.3，37.6，38.4，44.0，47.3，47.5，54.9，55.3，55.5，55.8，56.0，56.9，57.0，57.6，127.1，127.2，127.6，127.8，127.9，128.0，128.8，129.4，130.4，130.5，131.0，132.9，133.3，134.8，134.9，138.0，138.6，168.4，169.2，171.5，172.8，173.1，173.3，174.2，175.1.
實(shí)施例19(R＊)-N-[[2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-絲氨酸 用類似于上述由化合物18D制備化合物18G的三步法，由化合物L(fēng)-絲氨酸甲酯和化合物18D(574mg)制得標(biāo)題化合物(137mg，37%;無(wú)色固體)。
MS467(M+H)+實(shí)施例20(R＊)-N-[[2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N-羥基-L-蛋氨酰胺 A.O-四氫吡喃-2-基羥胺在室溫和氮?dú)夥障?，向N-羥基鄰苯二甲酰亞胺(20g，0.2123mol)的四氫呋喃(350ml)溶液中加入二氫呋喃(17.0ml，0.187mol)和對(duì)甲苯磺酸單水合物(400mg)。8小時(shí)和24小時(shí)后補(bǔ)加二氫吡喃(5.6ml，0.062mol)。將反應(yīng)混合物過濾并濃縮至150ml。然后加入二氫吡喃(11.2ml，0.125mol)和對(duì)甲苯磺酸單水合物(800mg)。攪拌16小時(shí)后，將反應(yīng)混合物真空濃縮。將殘余物溶于乙酸乙酯(400ml)中并用飽和NaHCO3(3×150ml)洗滌。有機(jī)層用Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物用己烷(3×200ml)研制，得到N-羥基鄰苯二甲酰亞胺的四氫吡喃基醚(23.9g，78%)。
mp＞210℃TLCRf＝0.81(3∶7己烷/乙酸乙酯，用UV254nm顯色)MS(M+H)+248向上面制備的中間體(23.64g，0.095mol)的甲苯(60ml)溶液中，加入甲肼(5.59ml，0.105mol)。在80℃加熱1小時(shí)后，真空除去溶劑。殘余物用乙醚(20ml)研制并過濾。將固體溶于己烷中，用活性炭處理，用硅藻土過濾，將濾液濃縮至50ml。將晶體過濾并干燥，得到化合物A(5.542g，50%)。
mp33-38°TLCRf＝0.67(1∶4己烷/乙酸乙酯，用硫酸鈰銨顯色)。
MS(M+H)+118.
1H 400 MHz(CDCl3)1.53-1.78(m，6H)，3.57(m，1H)，3.91(m，1H)，4.71(m，1H)，5.49(br s，2H).
13C 100 MHz(CDCl3)19.6，25.3，28.8，62.5，102.5B.(R＊)-N-[[2-[N-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-S-三苯甲基-L-半胱氨酰]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N-四氫吡喃-2-基氧基-L-蛋氨酰胺在0℃和氮?dú)夥障?，向化合?B(400mg，0.469mmol)的二甲基甲酰胺(3ml)溶液中連續(xù)加入化合物A(55mg，0.469mmol)、N，N-二異丙基乙胺(81.5ml，0.469mmol)和苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)氟磷酸鏻(207mg，0.469mmol)。在0℃下攪拌18小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(70ml)稀釋，并順次用飽和NaHCO3(30ml)、1%KHSO4(30ml)和10%LiCl(3×30ml)洗滌。有機(jī)層用Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮，得到化合物B(427mg，96%)。
mp113-115℃TLCRf＝0.85(9∶1∶0.05氯仿/甲醇/乙酸，用硫酸鈰銨顯色)MS(M+H)+952C.(R＊)-N-[[2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N-羥基-L-蛋氨酰胺采用類似于上述由化合物18F制備化合物18G的方法，由化合物B(323mg，0.340mmol)制得化合物C(72mg，33%)。
mp135-139℃TLCRf＝0.17(9∶1∶0.05氯仿/甲醇/乙酸，用硫酸鈰銨顯色)MS(M+H)+526.
1H NMR 400 MHz(CD3OD)1.06(m，6H)，1.99，2.05(s，3H)，1.89-2.45(m，5H)，2.90-3.18(m，4H)，4.00-5.20(m，6H)，7.22(b m，4H).
實(shí)施例21(R＊)-N-[[2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-3-(2-噻吩基)-D，L-丙氨酸 A.3-(2-噻吩基)-D，L-丙氨酸，甲酯在0℃下，在R，S-α-氨基-2-噻吩丙酸(2g，11.68mmol)和甲醇(75ml)的淤漿中鼓泡通入無(wú)水HCl，直至溶液成為均相。將混合物在室溫下攪拌16小時(shí)，回流3小時(shí)，然后真空濃縮。將固體溶于水(50ml)中，用CH2Cl2(3×50ml)萃取。水層用10%NaHCO3堿化并用CH2Cl2(4×50ml)萃取。合并堿性部分的有機(jī)萃取液，用MgSO4干燥，過濾并真空濃縮，得到化合物A(2.0g，93%)。
TLCRf＝0.51(9/1/0.05氯仿/甲醇/乙酸，用硫酸鈰銨/鉬酸銨/硫酸/水顯色)MS(M+H)+186B.(R＊)-N-[[2-[N-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-S-三苯甲基-L-半胱氨酰]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-3-(2-噻吩基)-D，L-丙氨酸，甲酯將N，N-二異丙基乙胺(0.130ml，0.748mmol)加入化合物18D(0.539g，0.748mmol)、化合物A(0.138g，0.748mmol)、苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)氟磷酸鏻(0.331g，0.748mmol)的乙腈(15ml)/二甲基甲酰胺(3ml)溶液中，并在室溫下攪拌16小時(shí)。反應(yīng)混合物用1N HCl(100ml)處理，并用乙酸乙酯(3×100ml)萃取。合并有機(jī)層，順次用10%NaHCO3(2×100ml)和10%LiCl(2×100ml)洗滌，用MgSO4干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物用閃色譜法純化(用4/1的己烷/丙酮洗脫)，得到化合物B(0.616g，93%)。
mp51-56℃TLCRf＝0.56(2/1己烷/丙酮，用硫酸鈰銨/鉬酸銨/硫酸/水顯色)MS(M+H)+889C.(R＊)-N-[[2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-3-(2-噻吩基)-D，L-丙氨酸采用類似于上述由化合物18E制備化合物18G的二步法，由化合物B(0.61g，0.687mmol)制得化合物C(57%)。
mp140-147℃TLCRf＝0.28(9/1/0.05氯仿/甲醇/乙酸，用硫酸鈰銨/鉬酸銨/硫酸/水顯色)MS(M+H)+533.D22＝-20.0°(c 0.05，CH3OH)1H (CD3OD)0.98(d，1.5H，J＝5.3)，1.00(d，1.5H，J＝6.4)，1.03(d，1.5H，J＝7.1)，1.05(d，1.5H，J＝6.4)，2.20-2.40(m，1H)，2.91-3.35(m，6H)，4.05-4.13(m，1H)，4.58-5.10(m，5H)，6.72-6.92(m，2H)，7.14-7.50(m，5H)元素分析計(jì)算值 C25H32N4O5S2·0.55H2O.
C2HF3O2C，49.39;H，5.23;N，8.53;S，9.77;F，8.68.
實(shí)測(cè)值C，49.64;H，5.32;N，8.60;S，9.57;F，8.25.
實(shí)施例22(R＊)-N-[[2-[N-(L-半胱氨酰)甘氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸 A.(R＊)-N-[(1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯在室溫和氬氣氛下，將HCl/二氧六環(huán)(無(wú)水，4M，0.18ml，0.007mmol)加入化合物1A(1.5g，3.55mmol)在CH3OH/四氫呋喃(20/3ml)中的懸浮液中。15小時(shí)后，將反應(yīng)混合物真空濃縮。將殘余物用乙醚研制數(shù)次，將固體干燥，得到化合物A(1.14g，100%)。
B.(R＊)-N-[[2-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]甘氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯在0℃和氬氣氛下，將二(2-氧代-3-噁唑烷基)膦酰氯(1.08g，4.24mmol)加入攪拌下的化合物A(1.14g，3.53mmol)、N-叔丁氧羰基甘氨酸(0.68g，3.88mmol)和N，N-二異丙基乙胺(2.02mol，1.50g，11.6mmol)的CH2Cl2(14ml)溶液中。攪拌2.5天后，將反應(yīng)混合物在乙酸乙酯(35ml)和10%HCl(10ml)之間分配。水層用乙酸乙酯(2×30ml)萃取。合并有機(jī)萃取液，順次用10%HCl(2×10ml)、水(2×20ml)、飽和NaHCO3(2×10ml)和飽和NaCl(2×20ml)洗滌。有機(jī)層用MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到化合物B(1.7g，100%)，B不經(jīng)進(jìn)一步提純而直接使用。
MS[M+H]+480+TLCRf＝0.75(乙酸乙酯，用紫外、鉬酸鈰銨顯色)C.(R＊)-N-[[2-[N-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-S-三苯甲基)-L-半胱氨酰]甘氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯采用上述由化合物1A制備化合物B的二步法，由化合物B(1.64g，3.41mmol)制得化合物C(82%)，但第二步中用N-叔丁氧羰基-S-三苯甲游基-L-半胱氨酸(0.78g，1.67mmol)代替N-叔丁氧羰基甘氨酸。
TLCRf＝0.69(乙酸乙酯，用紫外、鉬酸鈰銨顯色)D.(R＊)-N-[[2-[N-(L-半胱氨酰)甘氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸采用類似于上述由化合物1G制備化合物1H的方法，由化合物C(1.09g，1.58mmol)制得化合物D(39%)，但標(biāo)題化合物用硅膠色譜法(用CHCl3和CHCl3/CH3OH(9/1)洗脫)和制備HPLC純化。
mp95-99℃TLCRf＝0.3(9/1/0.1 CHCl3/CH3OH/CH3COOH，用紫外、鉬酸鈰銨顯色)MS[M+H]+469+
實(shí)施例23(R＊)-N2-[[2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺 A.(R＊)-N2-[[2-[N-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-S-三苯甲基-L-半胱氨酰]甘氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，1，1-二甲基乙酯向冷卻的(4℃)化合物18D(722mg，0.5mmol)的溶液中加入L-谷氨酰胺叔丁酯(120mg，0.5mmol)、4-甲基嗎啉(137ml，1.25mmol)的二甲基甲酰胺(2.5ml)溶液和苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)氟磷酸鏻(332mg，0.75mmol)。將混合物在4℃下攪拌18小時(shí)。使之升至室溫，再攪拌24小時(shí)。將混合物傾入鹽酸(50ml，0.5N)中，并用乙酸乙酯(3×100ml)萃取。合并有機(jī)萃取液，用NaHCO3(50ml，飽和水溶液)洗滌，用MgSO4干燥并真空濃縮，得到化合物A(510mg，68%產(chǎn)率，60%純度)，A不經(jīng)進(jìn)一步提純而直接使用。
B.(R＊)-N2-[[2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺將化合物A(470mg，0.52mmol)、三乙基甲硅烷(832ml，5.2mmol)、三氟乙酸(5ml)和CH2Cl2(5ml)的溶液攪拌2小時(shí)，真空濃縮，得到棕色油狀物，將其用制備HPLC純化(YMC S-15 ODS 50×500mm柱，以10-90%的甲醇水溶液梯度(含0.1%三氟乙酸)、35ml/分的流速洗脫1小時(shí)，在215nm處紫外檢測(cè))。合并適當(dāng)?shù)募?jí)分(由分析HPLC測(cè)定)，真空濃縮，并凍干除去水，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(80mg，0.11mmol，22%)。
mp 145-150℃[α]D22＝-27.5°(c 0.10，CH3OH).
實(shí)施例24(R＊)-N-[[2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-H-組氨酸 采用上述由化合物18D和化合物21A制備化合物21C的三步法，由化合物18D(0.60g)和L-組氨酸甲酯鹽酸化物制得標(biāo)題化合物(0.196g，30%)，但省去第一步中1N HCl的處理過程。
mp130-137℃TLCRf＝0.16(6/3/1正丙醇/氯氧化銨/水，用硫酸鈰銨/鉬酸銨/硫酸/水顯色)MS(M+H)+516.
1H (CD3OD)1.03(d，3H，J＝6.5)，1.08(d，3H，J＝6.5)，2.20-2.28(m，1H)，2.93(d，2H，J＝5.3)，3.00-3.42(m，4H)，4.15(t，1H，J＝5.9)，4.59-5.13(m，5H)，7.17-7.40(m，6H).
實(shí)施例25(R＊)-N-[[2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-3-苯甲基-L-丙氨酸 A.3-苯甲基-L-丙氨酸，甲酯在氬氣氛下，向L-高苯丙氨酸(0.99g，5.53mol)的無(wú)水甲醇(50ml)溶液中加入p-TsOH·H2O(2.09g，11.0mmol)，將混合物加熱回流6小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻并真空濃縮。將殘余物用乙醚研制，得到化合物A(2.0g，90%)。
B.(R＊)-N-[[2-[N-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-S-三苯甲基)-L-半胱氨酰]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-3-苯甲基-L-丙氨酸，甲酯向化合物18D(360mg，0.5mmol)的CH2Cl2(5ml)(含0.5ml二甲基甲酰胺)冷(0℃)溶液中，加入化合物A(292mg，0.8mmol)、二(2-氧代-3-噁唑烷基)膦酰氯(128mg，0.5mmol)和N-甲基嗎啉(0.22ml，2.0mmol)。2小時(shí)后，使反應(yīng)混合物升至5℃并攪拌過夜(16小時(shí))。將混合物用氯仿(10ml)稀釋，并依次用各10ml的1N HCl、飽和NaHCO3和鹽水洗滌。有機(jī)層用MgSO4干燥，過濾并真空濃縮。用硅膠閃色譜法純化(用30%乙酸乙酯/己烷洗脫)，得到化合物B(330mg，73%)。
TLCRf＝0.46(40%乙酸乙酯/己烷，用鉬酸鈰銨顯色)MS(FAB)(M+H)+897+C.(R＊)-N-[[2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-3-苯甲基-L-丙氨酸采用上述由化合物18E制備化合物18G的二步法，由化合物B(195mg)制得標(biāo)題化合物(60%產(chǎn)率)。
mp120-123℃MS(FAB)(M+H)+＝541.D22＝-34.7°(c＝0.426，甲醇)元素分析(%) C28H36N4O5S·0.8H2O.1.13三氟乙酸計(jì)算值C，53.14;H，5.71;N，8.19;F，9.42;
實(shí)測(cè)值C，53.14;H，5.68;N，8.19;F，9.44.
實(shí)施例26
(R＊)-N-[[2-[N-(L-絲氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸 采用實(shí)施例15所述的固相方法制得標(biāo)題化合物(6mg，白色蓬松粉末)，但作如下改動(dòng)N-叔丁氧羰基-L-Met-PAM樹脂(0.59g，0.25mmol)由市場(chǎng)購(gòu)得。絲氨酸的反應(yīng)性側(cè)鏈以芐酯的形式保護(hù)。
MS(M+H)+495+.
1H NMR(CD3OD)δ(ppm)7.23(m)，5.03(m)，4.95(m)，4.71(m)，4.46(m)，4.22(m)，4.06-3.69(m)，3.44(m)，3.38(m)，3.16(m)，2.39(m)，2.24(m)，2.08(m)，2.04(s)，1.94(m)，1.29(m)，1.09(J＝6.4Hz)，1.00(m).(觀察到旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)實(shí)施例27(R＊，R＊)-2-[N-(3-巰基-1-氧代丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-[3-甲硫基-1-(1H-四唑-5-基)丙基]-3-異喹啉羧酰胺
A.N-(2-氰乙基)-N2-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-蛋氨酸在室溫和氬氣氛下，將1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺鹽酸化物(16.24g，85mmol)、3-氨基丙腈(10.9g，85mmol，富馬酸鹽)、N，N-二異丙基乙胺(17.9ml，100mmol)加入N-叔丁氧羰基-L-蛋氨酸(19.9g，80mmol)和N-羥基苯并三唑(13.0g，85mmol)的四氫呋喃(150ml)溶液中。反應(yīng)混合物變得很粘稠，并出現(xiàn)沉淀。補(bǔ)加四氫呋喃(80ml)和二甲基甲酰胺(50ml)。7小時(shí)后，補(bǔ)加胺鹽(2g)和N，N-二異丙基乙胺(3ml)，將混合物再攪拌18小時(shí)。將反應(yīng)混合物在飽和氯化銨(100ml)和乙酸乙酯(110ml)之間分配。有機(jī)層依次用1N HCl(100ml)和NaHCO3(100ml)洗滌，用MgSO4干燥，過濾并濃縮。所得油狀物用硅膠柱色譜法純化(用50%乙酸乙酯/己烷的濃度梯度洗脫)，得到化合物A(11.2g，47%)。
MS(CI)(M+H)+320TLCRf＝0.11(50%乙酸乙酯/己烷，用UV和鈣酸鈰銨顯色)B.(R)-[1-[1-(2-氰基乙基)-1H-四唑-5-基]-3-(甲硫基)丙基]氨基甲酸，1，1-二甲基乙酯在室溫和氬氣氛下，向化合物A(10g，33.2mmol)的四氫呋喃(300ml)溶液中依次加入三苯膦(18g，69.8mmol)、偶氮二羧酸二乙酯(10.99ml，69.8mmol)和疊氮基三甲基甲硅烷(9.26ml，69.8mmol)。72小時(shí)后，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去揮發(fā)分(旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀前置安全罩)。殘余物用硝酸鈰銨處理(3g/50ml)。蒸發(fā)出氣體的同時(shí)，有沉淀生成。加入水(50ml)，水層用CH2Cl2(100ml)萃取。有機(jī)層用MgSO4干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物在硅膠閃色譜柱(50×300mm)上純化(用40%乙酸乙酯/己烷洗脫)，得到化合物B的晶體(長(zhǎng)針狀)(7.2g，66%)。
MS(CI)(M+H)+327TLCRf＝0.3(50%乙酸乙酯/己烷，用UV和鈣酸鈰銨顯色)C.(R＊)-2-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉羧酸向化合物18A(3.1g，6.66mmol)在50ml甲醇中的溶液中加入150mg Pd(OH)2(載于碳上，20%)。將混合物在氫氣氛下(氣球)攪拌1.5小時(shí)。將混合物通過硅藻土過濾，將濾液真空濃縮，得到化合物C，為白色固體(2.3g，92%)。
mp89℃MS(M+H)+377D.(R＊，R＊)-2-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-[3-甲硫基-1-[1-(2-氰基乙基)-1H-四唑-5-基]丙基]-3-異喹啉羧酰胺在室溫和氬氣氛下，將無(wú)水HCl(4M 二氧六環(huán)溶液，1ml，4mmol)和三乙基甲硅烷(0.3ml)加入固體化合物B(64mg，0.2mmol)中，攪拌過夜(16小時(shí))后，生成白色沉淀。用吸管移去上層二氧六環(huán)，將固體用乙醚研制并真空干燥，得到固體(120mg)。
(MS(M+H)+227+)在室溫和氬氣氛下，將該物質(zhì)(120mg)溶于CH2Cl2(1.5ml)中，并依次用化合物C(90mg，0.25mmol)、N-甲基嗎啉(0.08ml，0.75mmol)和苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)氟磷酸鏻(105mg，0.25mmol)處理。攪拌過夜(16小時(shí))后，將混合物用乙酸乙酯(5ml)稀釋，并用1N HCl、飽和NaHCO3和鹽水(各5ml)洗滌。有機(jī)層用MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到油狀物。用硅膠閃色譜法純化(用40%乙酸乙酯/己烷洗脫)，得到化合物D(101mg，85%)。
MS(CI)(M+H)+585+TLCRf＝0.67(80%乙酸乙酯/己烷，用UV和鉬酸鈰銨顯色)E.(R＊，R＊)-2-[N-[3-[(三苯甲基)硫基]-1-氧代丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-[3-甲硫基-1-[1-(2-氰基乙基)-1H-四唑-5-基]丙基]-3-異喹啉羧酰胺采用上述由化合物B制備化合物D的二步法，由化合物D制得化合物E，但第二步中用S-三苯甲游基-3-巰基丙酸代替化合物C。
TLCRf＝0.48(80%乙酸乙酯/己烷，用鉬酸鈰銨顯色)MS(FAB)(M+H)+815F.(R＊，R＊)-2-[N-[3-[(三苯甲基)硫基]-1-氧代丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-[3-甲硫基-1-(1H-四唑-5-基)丙基]-3-異喹啉羧酰胺在室溫和氬氣氛下，向化合物E(180mg，0.22mmol)的四氫呋喃(1.5ml)溶液中加入LiOH溶液(0.44ml，0.44mmol)。加入甲醇(0.4ml)使反應(yīng)混合物成為均相，并向溶液中鼓泡通入氬氣2分鐘。1小時(shí)后，將混合物用1N HCl(5ml)稀釋，并用乙酸乙酯(2×10ml)萃取。合并有機(jī)萃取液，用MgSO4干燥并真空濃縮，得到化合物F(160mg，95%)，為泡沫狀固體。
TLCRf＝0.05(70%乙酸乙酯/己烷，用鉬酸鈰銨顯色)MS(FAB)(M+H)+762G.(R＊，R＊)-2-[N-(3-巰基-1-氧代丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-[3-甲硫基-1-(1H-四唑-5-基)丙基]-3-異喹啉羧酰胺(在由化合物F制備化合物G的過程中，除三氟乙酸外，所用的所有溶劑在使用前均鼓入氬氣進(jìn)行脫氧處理。)在室溫和氬氣氛下，向化合物F(150mg，0.2mmol)的CH2Cl2(2ml)溶液中加入三氟乙酸(0.1ml)。5分鐘后，滴加水(5ml)，接著滴加飽和NaHCO3，直至pH＝8，然后用1N HCl(1ml)再酸化。將所得混合物用氯仿(2×10ml)萃取。合并有機(jī)層，用MgSO4干燥，過濾并濃縮。殘余物用制備HPLC純化(YMC，S10，C18，30×500mm柱，用50-90%甲醇水溶液洗脫)。收集適當(dāng)?shù)募?jí)分，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上除去甲醇，將水溶液凍干，得到標(biāo)題化合物。
mp102℃TLCRf＝0.49(氯仿∶甲醇∶乙酸，9∶1∶0.1，用鉬酸鈰銨顯色)MS(FAB)(M+H)+＝520.
元素分析(%) C23H33N7O3S2·0.6H2O計(jì)算值C，52.07;H，6.50;N，18.48;
實(shí)測(cè)值C，52.07;H，6.38;N，18.24.
實(shí)施例28(R＊，S＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-N-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸 A.(R＊)-N-[[2-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-N-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯采用類似于制備化合物8A的二步法，由化合物1A(2.0g，4.73mmol)制得化合物A(透明油狀物，3.0g，99%)，但第二步中用N-叔丁氧羰基-N-甲基-L-纈氨酸(1.80g，7.78mmol)代替N-Fmoc-N-甲基-L-纈氨酸。
MS(M+H)+536B.(R＊，S＊)-N-[[2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-N-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯采用類似于上述制備化合物7B的二步法，由化合物A(2.5g，4.73mmol)制得化合物B(透明油狀物，200mg，5%)，但作如下變動(dòng)在第二步中，用化合物1F(2.2g，4.92mmol)代替化合物6B，且僅用1當(dāng)量氰基硼氫化鈉(298mg，4.73mmol)。
MS(M+H)+867C.(R＊，S＊)-N-[[2-[N-(2-氨基)-3-巰基丙基]-N-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸采用上述由化合物1G制備化合物1H的方法，由化合物B(200mg，0.231mmol)制得化合物C(26mg，22%)。
mp 59-60℃[α]D25＝-12.0°(c＝0.1，CH3OH)MS(M+H)+511+.
1H-NMR (CD3OD，270MHz)δ(ppm)7.18(4H，m)，4.43(1H，m)，4.28(1H，m)，3.55(1H，m)，3.15(4H，br m)，2.69(2H，m)，2.48(2H，m)，2.40(1H，m)，2.27(3H，m)，2.20(2H，m)，1.95(3H，d)，1.85(3H，m)，0.91(6H，m).
實(shí)施例29(R＊，R＊，S＊)-N-[[2-[2-[(2-氨基-3-巰基丙基)氨基]-3-甲基丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸
A.(R＊，R＊，S＊)-N-[[2-[2-[[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基]硫基)丙基]氨基]-3-甲基丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯采用類似于上述制備化合物7B的二步法，由化合物5C(2.30g，4.54mmol)制得化合物A(1.2g，32%)，但作如下變動(dòng)在第二步中，用化合物1F(2.2g，4.92mmol)代替化合物6B，且僅用1當(dāng)量氰基硼氫化鈉(285mg，4.54mmol)。
MS(M+H)+839B.(R＊，R＊，S＊)-N-[[2-[2-[(2-氨基-3-巰基丙基)氨基]-3-甲基丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸采用上述由化合物1G制備化合物1H的二步法，由化合物A(1.2g，1.43mmol)制得化合物B(50%產(chǎn)率)。
mp 72-73℃[α]D25＝-30.0°(c＝0.18，CH3OH)MS(M+H)+483.
1H-NMR (CD3OD，270MHz)δ(ppm)7.28(4H，m)，4.68(1H，m)，4.19(1H，m)，3.66(1H，m)，3.42(2H，m)，3.24(2H，m)，3.03(2H，m)，2.94(2H，d，J＝4.28Hz)，2.60(2H，m)，2.20(2H，m)，2.10(3H，s)，2.07(3H，m)，1.01(3H，d，J＝7.03Hz)，0.93(3H，d，J＝7.04Hz).
實(shí)施例30(R＊)-N-[[1-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-2，3-二氫-1H-吲哚-2-基]羰基]-L-蛋氨酸 A.(R＊)-1-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨酰]-2，3-二氫-1H-吲哚-2-羧酸，乙酯在0℃和氬氣氛下，向N-叔丁氧羰基-L-纈氨酸(2.17g，10mmol)的CH2Cl2(30ml)溶液(含1ml二甲基甲酰胺)中，加入二(2-氧代-3-噁唑烷基)膦酰氯(2.54g，10mmol)、(S)-2，3-二氫-1H-吲哚-2-羧酸乙酯(1.15g，5mmol)[參見Stanton等，J.Med.Chem.，26，1267(1983)]和N-甲基嗎啉(2.2ml，20.0mmol)。使反應(yīng)混合物在2小時(shí)內(nèi)升溫至5℃，并攪拌過夜(20小時(shí))。將反應(yīng)混合物用1N HCl(30ml)和10%LiCl(30ml)洗滌，用MgSO4干燥，過濾并濃縮。將得到的油狀物用硅膠柱色譜法純化(用10%丙酮/己烷洗脫)，溶于乙醚(30ml)，并用1N HCl(3×20ml)洗滌。將有機(jī)層真空濃縮，得到化合物A(880mg，47%)，為油狀物。
MS(CI)(M+H)+391+TLCRf＝0.6(20%乙酸乙酸/氯仿，用UV和鉬酸鈰銨顯色)
B.(R＊)-2-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨酰]-2，3-二氫-1H-吲哚-2-基羧酸采用上述由化合物18C制備化合物18D的方法，由化合物A(840mg，2.15mmol)制得化合物B(650mg，83%)。
MS(CI)(M+H)+363+C.(R＊)-N-[[1-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨酰]-2，3-二氫-1H-吲哚-2-基]羰基]-L-蛋氨酸，1，1-二甲基乙酯采用類似于上述制備化合物23A的方法，由化合物B(300mg，0.83mmol)制得化合物C(340mg，74%)，但作如下變動(dòng)用L-蛋氨酸叔丁酯鹽酸化物(242mg，1.0mmol)代替L-谷氨酰胺叔丁酯鹽酸化物，且產(chǎn)物用硅膠柱色譜法純化(用30%乙酸乙酯/己烷洗脫)。
mp79-81℃MS(CI)(M+H)+550+TLCRf＝0.2(30%乙酸乙酯/已烷，用UV、鉬酸鈰銨顯色)D.(R＊)-N-[[1-(L-纈氨酰)-2，3-二氫-1H-吲哚-2-基]羰基-L-蛋氨酸，1，1-二甲基乙酯在室溫和氬氣氛下，向化合物C(130mg，0.24mmol)的甲酸(98%，0.5ml)溶液中加入三乙基甲硅烷(0.08ml)，并用TLC分析監(jiān)測(cè)反應(yīng)進(jìn)程。9小時(shí)后，向混合物中加入飽和NaHCO3(5ml)，并在氯仿(2×5ml)萃取。合并有機(jī)萃取液，用MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到化合物D(100mg，92%)。
MS(CI)(M+H)+450+
E.(R＊)-N-[[1-[N-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-S-三苯甲基-L-半胱氨酰]-L-纈氨酰]-2，3-二氫-1H-吲哚-2-基]羰基]-L-蛋氨酸，1，1-二甲基乙酯在0℃和氬氣氛下，向化合物D(100mg，0.22mmol)的CH2Cl2(1ml)中依次加入N-叔丁氧羰基-S-三苯甲游基-L-半胱氨酸(122mg，0.26mmol)、N-甲基嗎啉(0.033ml，0.3mmol)和苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)氟磷酸鏻(115mg，0.26mmol)。使反應(yīng)混合物在2小時(shí)內(nèi)升至室溫，然后攪拌過夜(16小時(shí))。將反應(yīng)混合物用氯仿(5ml)稀釋，并依次用1N HCl、飽和NaHCO3和鹽水(各5ml)洗滌。用硅膠閃色譜法純化(用30%乙酸乙酯/己烷洗脫)，得到化合物E(160mg，81%)。
TLCRf＝0.11(70%乙酸乙酯/已烷，用UV、鉬酸鈰銨顯色)MS(FAB)(M+H)+895+F.(R＊)-N-[[1-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-2，3-二氫-1H-吲哚-2-基]羰基]-L-蛋氨酸在0℃和氬氣氛下，向化合物E(140mg，0.16mmol)的CH2Cl2(1.5ml)溶液中加入三乙基甲硅烷(0.2ml，1.25mmol)和三氟乙酸(0.5ml)。2小時(shí)后，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去揮發(fā)分，殘余物用制備HPLC純化(C-18，S10，30×500mm柱，用10-90%甲醇水溶液(含0.1%三氟乙酸)線性梯度洗脫)。收集適當(dāng)?shù)募?jí)分，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去甲醇，將水溶液凍干，得到標(biāo)題化合物(56mg，70%)。
m.p.72-74℃MS(M+H)+＝497+.D＝-49.8°(c＝0.49，CH3OH)HPLC(C-18，S3，6×150mm 柱)，1.5mL/分鐘，220
nm10-90% 甲醇水溶液，含 0.2% H3PO4;
RT＝18.06分.
元素分析 (%) C23H33N7O3S2·0.6H2O計(jì)算值C，52.07;H，6.50;N，18.48;
實(shí)測(cè)值C，52.07;H，6.38;N，18.24.
實(shí)施例31(S＊，R＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯，三氟乙酸(1∶2)鹽 A.(S＊，R＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯，三氟乙酸(1∶2)鹽向180mg(0.211mol)化合物G在3mlCH2Cl2中的溶液中，加入0.20ml(1.27mmol)三乙基甲硅烷將所得溶液冷卻至0℃并用氬氣吹洗。向其中加入1ml三氟乙酸。使混合物升至室溫并攪拌2小時(shí)。真空除去溶劑，殘余物用己烷研制。殘余物用HPLC純化(YMC S-10 ODS 30×500mm，220nm，28ml/分，40-90%甲醇水溶液(含0.1%三氟乙酸))。收集適當(dāng)?shù)募?jí)分并真空濃縮，凍干后，得到標(biāo)題化合物(70mg)，為白色凍干物。
mp56-68℃MS(M+H)+511實(shí)施例32[3S-[2[R＊(S＊)]，3R＊(R＊)]]-2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-(四氫-2-氧代-3-呋喃基)-3-異喹啉羧酰胺，三氟乙酸(1∶2)鹽 A.(S＊)-N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-L-纈氨酸，甲酯將乙酸(2.6ml，44mmol)加入化合物1F(20g，44.7mmol)和L-纈氨酸甲酯鹽酸化物(9.0g，53.7mmol)的甲醇(50ml)溶液中。將混合物在室溫下攪拌30分鐘。滴加氰基硼氫化鈉(2.8g，44.7mmol)的四氫呋喃(50ml)溶液，并將混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。反應(yīng)用NaHCO3(3.75g，44.7mmol)水(20ml)溶液處理，并真空濃縮。將殘余物溶于10%NaHCO3(10ml)中并用CH2Cl2(3×100ml)萃取。合并有機(jī)層，用Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮。殘余物用閃色譜法純化(用9∶1己烷/丙酮洗脫)，得到化合物A(17.7g，70%)。
TLCRf＝0.25(8/1已烷/丙酮，用UV顯色)MS(M+H)+563IR(CH2Cl2膜)1491，1715cm-1B.(S＊)-N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-L-纈氨酸，甲酯在0℃下，將氯代甲酸芐酯(約90%，3.2ml，20.3mmol)加入化合物A(3.8g，6.76mmol)和二異丙基乙胺(3.8ml，21.6mmol)CH2Cl2(20ml)溶液中。將混合物升至室溫并攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物用CH2Cl2(100ml)稀釋，并依次用1N HCl(2×100ml)和10%NaHCO3(2×100ml)洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，過濾并真空濃縮。殘余物用閃色譜法純化(用8/1己烷/丙酮洗脫)，得到化合物B(4.3g，92%)，為白色固體。
mp48-52℃TLCRf＝0.35(4/1己烷/丙酮，用UV顯色)MS(M-H)-695C.(S＊)-N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-L-纈氨酸將LiOH(2N，1.5ml，3.0mmol)逐滴加入化合物B(0.696g，1.0mmol)在四氫呋喃(5ml)和甲醇(3.5ml)中的溶液中。將均相反應(yīng)溶液升至室溫并攪拌16小時(shí)。將混合物真空濃縮，用1N HCl(30ml)稀釋并用CH2Cl2(3×50ml)萃取。合并有機(jī)萃取液，用MgSO4干燥，過濾并真空濃縮，得到化合物C(0.68g，100%)。
mp66-72℃TLCRf＝0.61(9/1/0.05氯仿/甲醇/乙酸，用UV顯色)MS(M-H)-681D.[3S-[2[R＊(S＊)]-3R＊]]-2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉羧酸，甲酯將二異丙基乙胺(19.7ml，113mmol)加入化合物C(24.15g，35.4mmol)、(S)-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸甲酯鹽酸化物(9.66g，42.5mmol)和苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)氟磷酸鏻鹽酸化物(10.8g，42.5mmol)的CH2Cl2(200ml)溶液中。將混合物在0℃下攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物用1N HCl(300ml)處理，并用CH2Cl2(3×100ml)萃取。合并有機(jī)萃取液，用10%NaHCO3(100ml)洗滌，干燥、過濾并真空濃縮。殘余物用閃色譜法純化(用4/1己烷/丙酮洗脫)，得到化合物D(21.8g，72%)，為白色固體。
mp66-70℃TLCRf＝0.28(4/1己烷/丙酮，用UV顯色)MS(M+H)+856E.[3S-[2[R＊(S＊)]，3R＊]]-2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉羧酸按實(shí)施例32C中所述方法，由化合物D(12.5g，14.6mmol)制得化合物E(12.3g，100%)，為白色固體。
mp88-94℃TLCRf＝0.52(9/1/0.05氯仿/甲醇/乙酸，用UV顯色)MS(M-H)-840F.[3S-[2[R＊(S＊)]，3R＊(R＊)]]-2-[2-[N-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-(四氫-2-氧代-3-呋喃基)-3-異喹啉羧酰胺將二異丙基乙胺(0.651ml，3.74mmol)加入化合物E(1.5g，1.78mmol)、L-高絲氨酸內(nèi)酯鹽酸化物(0.245g，1.78mmol)和苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)氟磷酸鏻(0.789g，1.78mmol)在乙腈(3ml)和二甲基甲酰胺(1ml)中的溶液中。然后將混合物在室溫下攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物用1N HCl(50ml)處理，用乙酸乙酯(3×75ml)萃取。合并有機(jī)萃取液，用10%LiCl(2×50ml)洗滌，干燥、過濾并真空濃縮。殘余物用閃色譜法純化(用2/1己烷/丙酮洗脫)，得到化合物F(1.45g，88%)，為膠狀物。
TLCRf＝0.61(1/1己烷/丙酮，用UV顯色)MS(M-H)-923G.[3S-[2[R＊(S＊)]，3R＊(R＊)]]-2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-(四氫-2-氧代-3-呋喃基)-3-異喹啉羧酰胺，三氟乙酸(12)鹽將三氟乙酸(4.3ml，55.8mmol)加入化合物F(0.8g，0.866mmol)在CH2Cl2(9ml)和三乙基甲硅烷(1.4ml，8.66mmol)中的溶液中。將所得溶液在室溫下攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物真空濃縮，殘余物用己烷(3×10ml)研制，充去己烷層。在另外的燒瓶中，在0℃下，用苯硫基甲烷(1ml，8.5mmol)和1，2-乙二硫醇(0.726ml，8.66mmol)處理三氟乙酸(17ml，220mmol)。將該溶液加入研制后的殘余物中，隨后滴加溴代三乙基甲硅烷(1.1ml，4.3mmol)。將溶液在0℃下攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物用乙醚(40ml)處理，將所得沉淀離心。分出上層清液并棄去，固體用乙醚(3×40ml)、乙酸乙酯(2×40ml)和乙醚(1×40ml)洗滌并離心。將固體用制備HPLC純化(YMC S-10 ODS 30×500mm，220nm，35ml/分，10-90%甲醇水溶液(含0.1%三氟乙酸)梯度)。將合適的級(jí)分在室溫下真空濃縮，將殘余物凍干，得到標(biāo)題化合物(0.13g，26%)。
mp95-107℃TLCRf＝0.68(6/3/1正丙醇/氫氧化銨/水，用硫酸鈰銨/鉬酸銨/硫酸/水顯色)MS(M+H)+449 游離堿IR(KBr)，1678，1773，2974 cm-1元素分析C26H34N4F6S1O6·2.56H2OC H N S計(jì)算值45.21 5.71 8.11 4.64實(shí)測(cè)值45.26 5.25 8.06 4.831H(CD3OD)1.06-1.13(m，6H)，2.11-2.46(m，5H)，2.85-2.89(m，3H)，3.12-3.20(m，2H)，3.50-3.80(m，1H)，4.25-4.91(m，6H)，7.28(s，4H)[α]D＝-6.7°，c＝0.76(甲醇)實(shí)施例33(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N-羥基-L-蛋氨酰胺，三氟乙酸(1∶2)鹽 A.(S＊，R＊)-N-[[2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯按實(shí)施例32F中描述的方法，用化合物32E(1.00g，1.19mmol)和蛋氨酸甲酯鹽酸化物(237mg，1.19mmol)制得化合物A(707mg，產(chǎn)率60%)。
mp77-79℃TLCRf＝0.72(1∶1己烷/乙酸乙酯，用磷鉬酸顯色)MS(M+H)+987B.(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N-(四氫吡喃-2-基氧基)-L-蛋氨酰胺在0℃下，在化合物A(600mg，0.608mmol)的四氫呋喃(3ml)溶液中加入1N的氫氧化鋰(0.912ml，0.912mmol)。攪拌2小時(shí)后，加入1N鹽酸(0.912ml，0.912mmol)，將反應(yīng)混合物濃縮至1ml。混合物用二氯甲烷(100ml)和1N鹽酸(100ml)稀釋。分層，水層用二氯甲烷(1×100ml)和乙酸乙酯(100ml)萃取，干燥、過濾并濃縮，得到酸粗品(500mg，產(chǎn)率85%)。HPLC表明混合物含有7∶3比例的所需要的酸和對(duì)應(yīng)的蛋氨酸亞砜。此產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步提純而直接用于下一步。
MS(M+Li)+979和(M-H)-971(M+Li)+997和(M-H)-987在0℃，氮?dú)夥障?，向上述產(chǎn)物(500mg，0.514mmol)的二甲基甲酰胺(3ml)溶液中加入化合物20A(60mg、0.514mmol)、二異丙基乙胺(89ml，0.514mmol)和苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)氟磷酸鏻(227mg，0.514mmol)。在0℃攪拌20小時(shí)后，向反應(yīng)中添加二異丙基乙胺(30μl，0.171mmol)、化合物20A(20mg，0.171mmol)和苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)氟磷酸鏻(45mg，0.102mmol)。溫?zé)嶂潦覝夭嚢?小時(shí)后，混合物用乙酸乙酯(100ml)稀釋，依次用飽和碳酸氫鈉(50ml)、1%硫酸氫鉀(50ml)和10%氯化鋰(3×50ml)洗滌，干燥、過濾并真空濃縮。殘余物在硅膠(20ml，用4∶1至0∶1的己烷/乙酸乙酯洗脫)上純化，得到化合物B(300mg，產(chǎn)率54%)。
mp150-151℃TLCRf＝0.37(2∶1己烷/丙酮，用磷鉬酸顯色)MS(M+H)+1072C.(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N-羥基-L-蛋氨酰胺，三氟乙酸(1∶2)鹽用實(shí)施例32G中所述方法，由化合物B(250mg，0.233mmol)制得化合物C(57mg，33%)。
mp94-97℃TLCRf＝0.14(氯仿∶甲醇∶乙酸 9∶1∶0.05，用硫酸鈰銨顯色)MS(M+)+512IR(KBr)1676，1206 cm-1[α]D＝-31.5°[c＝0.260，甲醇]1H NMR 400 MHz(CDCl3)0.92-1.23(m，6H)，1.72-2.50(m，10H)，2.73-3.21(m，4H)，3.55(m，1H)，4.22-4.72(m，5H)，7.26(m，4H)13C 100 MHz(CDCl3)15.3，17.9，18.1，19.6，19.9，25.6，25.7，30.6，30.9，31.1，32.2，32.4，32.6，33.3，46.0，47.6，48.4，48.6，48.8，49.0，49.2，49.4，49.7，51.5，51.7，53.2，53.5，57.3，57.7，59.1，65.9，66.0，126.9，127.7，128.3，128.6，128.8，129.0，129.3，129.7，130.9，133.6，134.0，135.3，135.4，170.4，170.8，172.4，173.3，173.5，173.8元素分析C23H37N5O4S2·1.71H2O·2.0 CF3CO2HC H N S F計(jì)算值42.09 5.55 9.09 8.32 14.79實(shí)測(cè)值42.19 5.20 8.73 8.35 15.24實(shí)施例34[R-(R＊，S＊)]-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，三氟乙酸(1∶2)鹽
A.(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，1，1-二甲基乙酯按實(shí)施例32F中所述方法，用化合物32E(1.0g，1.19mmol)和L-谷氨酰胺叔丁酯鹽酸化物(0.284g，1.19mmol)制得化合物A(1.0g，90%)，為白色固體。
mp80-86℃TLCRf＝0.82(9/1氯仿/甲醇，UV顯色)MS(M+H)+1026B.[R-(R＊，S＊)]-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，三氟乙酸(1∶2)鹽按實(shí)施例32G中所述方法，用化合物A(1.0g，0.976mmol)制得標(biāo)題化合物(0.425g，56%)，為白色凍干物。
mp65-75℃TLCRf＝0.69(6/3/1正丙醇/氫氧化銨/水，用硫酸鈰銨顯色)MS(M+H)+494，游離胺IR(KBr)，1202，1670，2567cm-11H(CD3OD)1.07，1.08，1.09(d，6H，J＝7.6)，1.93(br m，1H)，2.12-2.31(m，6H)，2.78-3.49(m，5H)，4.23，4.25，4.38，(br m，2H)，4.64-4.91(m，3H)，7.22-7.33(m，4H)[α]D＝-21.4°(c＝0.69，甲醇)實(shí)施例35[R-(R＊，S＊)]-2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-(四氫-2-氧代-3-噻吩基)-3-異喹啉羧酰胺，三氟乙酸(2∶5)鹽 A.[3S-[2(S＊)，3R＊]]-2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-(四氫-2-氧代-3-噻吩基)-3-異喹啉羧酰胺按實(shí)施例32F中所述的方法，用D，L-高半胱氨酸硫代內(nèi)酯鹽酸鹽(0.16g，1.04mmol)和化合物32E(0.88g，1.04mmol)制得化合物A(0.62g，63%)。
TLCRf＝0.37(1/1己烷/乙酸乙酯，用UV、PMA顯色)MS[M-H]-939-B.[R-(R＊，S＊)]-2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-(四氫-2-氧代-3-噻吩基)-3-異喹啉羧酰胺，三氟乙酸(2∶5)鹽按實(shí)施例32G中所述方法，用化合物A(0.40g，0.42mmol)制得標(biāo)題化合物(0.056g，57%)，為異構(gòu)體混合物。
(異構(gòu)體“A”)元素分析C22H32N4O3S21.71水·2.50三氟乙酸C H N計(jì)算值 41.55 4.90 7.18實(shí)測(cè)值 41.55 4.60 7.18TLCRf0.5(9/1/.1，三氯甲烷/甲醇/乙酸，用UV、PMA顯色HPLC Rt13.12分鐘(96%)，10-90%含0.2%磷酸緩沖液的甲醇水溶液，30分鐘梯度洗脫，1.5mL/分鐘，220nm，C18(6.0×150mm)柱IR(KBr)2928，1684，1643，1206，1140.cm-1MS[M+H]+465+(異構(gòu)體“B”)元素分析C22H32N4O3S21.40H2O·2.20 三氟乙酸C H N計(jì)算值 42.81 5.03 7.56實(shí)測(cè)值 42.64 4.81 7.85
TLCRf0.4(6/3/1 正丙醇/氫氧化胺/水，用UV、PMA顯色)HPLC Rt14.0分鐘(99%)，10-90%含0.2%磷酸緩沖液的甲醇水溶液，30分鐘梯度洗脫，1.5mL/分鐘，C18(6.0×150mm)柱IR(KBr)2971，1682，1645，1206，1136;723cm-1.
MS[M+H]+465+實(shí)施例36(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-天冬酰胺，三氟乙酸(1∶2)鹽 A.(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-天冬酰胺，1，1-二甲基乙酯。
按實(shí)施例32F中所述方法，用化合物32E(1.25g，1.5mmol)和L-天冬酰胺叔丁酯(0.282g，1.5mmol)制得化合物A(1.4g，93%)，為白色固體。
mp88-96℃TLCRf＝0.34(2/1己烷/丙酮，用UV顯色)
MS(M+H)+1012B.(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-天冬酰胺，三氟乙酸(1∶2)鹽按實(shí)施例32G中所述方法，用化合物A(1.14g，1.13mmol)制得標(biāo)題化合物(0.14g，18%)，為白色凍干物。
mp95-110℃TLCRf＝0.50(6/3/1正丙醇/氫氧化銨/水，用硫酸鈰銨顯色)MS(M+H)+480，游離胺IR(KBr)，1204，1674，3424cm-11H (CD3OD)1.02，1.04，1.15(d，6H，J＝6.84，7.27)，1.98，2.20(br m，1H)，2.51-2.89(m，5H)，3.08-3.51(m，5H)，4.65-4.89(m，4H)，7.22-7.24(m，4H)[α]D＝-16.1°(c＝0.54，甲醇)實(shí)施例37(S＊，R＊)-N-[[2-[(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-正亮氨酸，三氟乙酸(1∶2)鹽
A.(S＊，R＊)-N-[[2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-正亮氨酸，甲酯按實(shí)施例32F中所述方法，用化合物32E(1.39g，1.65mmol)、正亮氨酸甲酯鹽酸化物(0.3g，1.65mmol)和苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)氟磷酸鏻(0.73g，1.65mmol)在乙腈(9ml)和二甲基甲酰胺(3ml)中制得化合物A(1.265g，79%)，為白色固體。
mp58-68℃TLCRf0.37(4/1己烷/丙酮，用UV顯色)MS(M+H)+969B.(S＊，R＊)-N-[[2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-正亮氨酸按實(shí)施例32C中所述方法，用化合物A(1.14g，1.18mmol)制得化合物B(1.1g，98%)，為吸濕性固體。
mp86-94℃TLCRf＝0.53(9/1/0.05氯仿/甲醇/乙酸，用硫酸鈰銨/鉬酸銨/硫酸/水顯色)MS(M+H)+995C.(S＊，R＊)-N-[[2-[(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-正亮氨酸，三氟乙酸(1∶2)鹽按實(shí)施例32G中所述方法，用化合物B(1.0g，1.05mmol)制得標(biāo)題化合物(0.248g，33%)，為白色凍干物。
mp80-90℃TLCRf＝0.69(6/3/1正丙醇/氫氧化銨/水，用硫酸鈰銨顯色)MS(M+H)+479，游離胺IR(KBr)，1674，3435cm-1元素分析C28H40N4F6S·1.29H2OC H N S F計(jì)算值46.07 5.88 7.68 4.39 15.62實(shí)測(cè)值46.39 5.82 7.36 4.45 15.531H(CD3OD)0.83-1.31(m，13H)，1.49-1.82(m，4H)，2.10，2.21(br m，1H)，2.75-3.77(m，5H)，4.06-4.34(m，2H)，4.51-4.89(m，3H)，7.22-7.29(m，4H).D＝-27.7°(c＝0.43，甲醇).
實(shí)施例38(S＊，R＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-γ-(氨基磺酰基)-L-α-氨基丁酸，三氟乙酸(2∶5)鹽
A.(S)-4-(氨基磺?；?-2-氨基丁酸，甲酯，鹽酸化物在室溫下，使氯化氫氣體在(S)-4-(氨基磺?；?-2-氨基丁酸(0.50g，2.7mmol)在甲醇(100ml)中的溶液中鼓泡。將反應(yīng)混合物攪拌13小時(shí)，并濃縮。殘余物用乙醚研制，得到固體化合物A(0.55g，100%)。
B.(S＊，R＊)-γ-(氨基磺酰基)-N-[[[2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-α-氨基丁酸，甲酯按實(shí)施例32F中所述方法，用化合物A(0.123g，0.61mmol)和化合物32E(0.51g，0.61mmol)制得化合物B(0.428g，68%)。
元素分析C55H65N5O10S2·2.73H2OC H N計(jì)算值 61.77 6.64 6.55實(shí)測(cè)值 61.72 6.11 6.52C.(S＊，R＊)-γ-(氨基磺酰基)-N-[[2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-α-氨基丁酸向化合物B(0.40g，0.39mmol)在甲醇(2ml)中的溶液中加入氫氧化鈉(1N，0.47ml，0.018g，0.47mmol)。在室溫下攪拌13小時(shí)后，用10%鹽酸(10ml)和乙酸乙酯(20ml)處理反應(yīng)，分層，水層用乙酸乙酯(2×20ml)萃取。合并有機(jī)層，用10%鹽酸(1×10ml)和鹽水(1×20ml)洗滌。有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到酸。產(chǎn)物用制備HPLC(YMC S-10，ODS，30×500mm，C18柱)提純，用含0.1%三氟乙酸的10-90%甲醇水溶液在30分鐘內(nèi)洗脫。將含產(chǎn)物的級(jí)分濃縮，并凍干，得到酸化合物(0.065g)。
D.[S＊，R＊]-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-γ-(氨基磺?；?-L-α-氨基丁酸，三氟乙酸(2∶5)鹽按實(shí)施例32G中所述方法，用化合物C(0.100g，0.095mmol)制得標(biāo)題化合物(0.0329g，63%)。
元素分析C22H35N5O6S20.75H2O.2.5 TFAC H N計(jì)算值 39.16 4.75 8.46實(shí)測(cè)值 39.15 5.00 8.36Rf＝0.6(6/3/1正丙醇/氫氧化銨/水，用UV、PMA顯色)HPLC Rt11.05分鐘(97%)，含0.2%磷酸緩沖液的10～90%甲醇水溶液，30分鐘梯度洗脫，1.5mL/分鐘，220nm，C18(6.0×150mm)柱IR(KBr)3439，1678，1653，1437，1206，1142，723cm-1MS[M+H]+530+[α]D＝-16.3°(c＝0.19，甲醇)
實(shí)施例39(S＊，R＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酸，三氟乙酸鹽 A.L-谷氨酸，1，1-二甲基乙酯向N-[(苯甲氧基)羰基]-L-谷氨酸1，1-二甲基乙酯、二環(huán)己基胺鹽(2.3g，4.43mmol)在乙醚(50ml)中的漿狀物中加入碳酸氫鈉水溶液(10%，150ml)。水層用3N鹽酸(pH＝2)酸化，并用乙酸乙酯萃取(3×50ml)。合并由酸洗物中萃取出來(lái)的有機(jī)萃取液，并真空濃縮，將殘余物溶于甲醇(10ml)，用10%氫氧化鈀/C(150mg)處理，然后在室溫和氫氣氛下攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾，將濾液真空濃縮，得到化合物A(0.700g，78%)，化合物A不經(jīng)進(jìn)一步提純而直接用于下一步。
MS(M+H)+2041H(CD3OD)1.52(s，9H)，2.00-2.43(m，2H)，2.41(t，2H，J＝6.41)，3.87-3.90(m，1H)B.(S＊，R＊)-N-[[2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酸，1，1-二甲基乙酯將1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸化物(0.228g，1.19mmol)加入化合物32E(1.0g，1.19mmol)和N-羥基琥珀酰亞胺(0.137g，1.19mmol)在二甲基甲酰胺(10ml)中的溶液中，并在0℃下，攪拌1小時(shí)。將碳酸氫鈉(0.084g，1.0mmol)加到化合物A(0.201g，1.0mmol)在水(1ml)中的溶液中，將所得溶液加到活化的酯中。然后將混合物在室溫?cái)嚢?6小時(shí)。反應(yīng)用1N鹽酸(50ml)處理，并用乙酸乙酯萃取(3×50ml)。合并有機(jī)萃取液，用10%氯化鋰(3×100ml)洗滌、干燥(硫酸鎂)，過濾并真空濃縮。殘余用閃色譜法純化(用1/1己烷/丙酮洗脫)，得到化合物B(0.55g，54%)，為白色固體。
mp78-88℃TLCRf0.68(1/1己烷/丙酮，用UV顯色)MS(M+H)+1027C.(S＊，R＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酸，三氟乙酸鹽按實(shí)施例32G中所述方法，用化合物B(0.5g，0.487mmol)制得標(biāo)題化合物(0.123g，35%)。
mp115-125℃TLCRf＝0.40(6/3/1正丙醇/氫氧化銨/水，用硫酸鈰銨顯色)MS(M+H)+495，游離胺IR(KBr)，1431，1672，2976，3428 cm-1元素分析C23H34N4O6S·1.4H2O.1.8TFAC H N S F計(jì)算值 44.06 5.37 7.73 4.42 14.15實(shí)測(cè)值 44.13 5.21 7.60 4.45 14.021H(CD3OD)1.026-1.15(m，6H)，1.89-2.37(m，6H)，2.71-3.31(m，6H)，3.60，4.05，4.27，4.61(br m，2H)，4.67-4.91(m，3H)，7.22-7.27(m，4H)[α]D＝-41.8°(c＝0.33，甲醇)實(shí)施例40[S＊，R＊]-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N5-羥基-L-谷氨酰胺，三氟乙酸(1∶2)鹽 A.(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N5-(四氫吡喃-2-基氧基)-L-谷氨酰胺，1，1-二甲基乙酯按實(shí)施例32F中所述方法，用化合物39B(0.5g，0.487mmol)和化合物20A(0.057g，0.487mmol)制得化合物A(0.50g，91%)，為白色固體。
mp70-80℃TLCRf0.75(1/1己烷/丙酮，用UV顯色)MS(M+H)+1126.5B.[S＊，R＊]-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N5-羥基-L-谷氨酰胺，三氟乙酸(1∶2)鹽按實(shí)施例32G中所述方法，用化合物A(0.471g，0.419mmol)制得標(biāo)題化合物(0.050g，16%)，為白色凍干物。
mp95℃以上分解TLCRf＝0.52(6/3/1正丙醇/氫氧化銨/水，用硫酸鈰銨顯色)MS(M+H)+510，游離胺IR(KBr)，1204，1676，2976，3430cm-1元素分析C23H35N5O6S·1.0H2O.2.15 TFAC H N S F計(jì)算值42.43 5.11 9.06 4.15 15.86實(shí)測(cè)值42.46 4.96 8.99 4.41 15.851H(CD3OD)1.07-1.25(m，6H)，1.97-2.30(m，7H)，2.75-3.40(m，5H)，3.80，3.95，4.40(br m，2H)，4.60-5.00(m，3H)，7.22-7.35(m，4H).D＝-23.2°(c＝0.22，甲醇)
實(shí)施例41[R-(R＊，S＊)]-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酰胺，三氟乙酸(1∶2)鹽 A.(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酰胺按實(shí)施例32F中所述方法，用化合物32E(841mg，1.00mmol)和L-蛋氨酰胺鹽酸化物(185mg，1.00mmol)制得化合物A(633mg，65%)。
B.[R-(R＊，S＊)]-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酰胺，三氟乙酸(1∶2)鹽按實(shí)施例32G中所述方法，用化合物A(0.579g，0.596mmol)制得標(biāo)題化合物(0.13g，45%)。
元素分析C23H37N5O3S21.30H2O. 2.0 TFAC H N計(jì)算值 43.39 5.61 9.37實(shí)測(cè)值 43.39 5.64 9.44TLCRf0.5(6∶3∶1，正丙醇/氫氧化銨/水)，用UV、PMA顯色)HPLC Rt14.1分鐘(96%)，含0.2%磷酸緩沖液的10～90%甲醇水溶液，30分鐘梯度洗脫，1.5mL/分鐘，220nm，C18(6.0×150mm)柱IR(KBr)3435，2972，1678，1435，1206，1140，841，723cm-1MS[M+H]+496+[α]D＝-23.6°(c＝0.44，甲醇)實(shí)施例42N-[[(S)-2-[N-[(R)-2-氨基-3-巰基丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-2-甲基-D，L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶2)鹽 A.2-甲基-D，L-蛋氨酸，甲酯用鹽酸氣飽和D，L-α-甲基蛋氨酸(0.500g，3.06mmol)在20ml甲醇中的溶液，在室溫下攪拌48小時(shí)，然后加熱回流12小時(shí)。將混合物真空濃縮。殘余物溶于50ml二氯甲烷并用10%碳酸氫鈉(50ml)洗滌。有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮，得到320mg(59%)化合物A。
B.N-[[(S)-2-[N-[(R)-2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-D，L-蛋氨酸，甲酯按實(shí)施例32F中所述方法，用化合物32E(0.841g，1.00mmol)和化合物A(0.195g，1.10mmol)制得化合物B(0.766g，77%)，為白色固體。
C.N-[[(S)-2-[N-[(R)-2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-D，L-蛋氨酸按實(shí)施例32C中所述方法，用化合物B(0.74g，0.740mmol)制得化合物C(0.716g，98%)。
D.N-[[(S)-2-[N-[(R)-2-氨基-3-巰基丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-2-甲基-D，L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶2)鹽按實(shí)施例32G中所述方法，用化合物C(0.400g，0.406mmol)制得標(biāo)題化合物(0.095g，29%)，為白色凍干物。
mp95-110℃MS(M+H)+511
實(shí)施例43(S＊，R＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-丙氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸 A.(S＊，R＊)-N-[[2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-L-丙氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯按實(shí)施例7B中所述的兩步法，用化合物7A(1.50g，3.04mmol)和化合物1F(2.10g，4.74mmol)制得化合物A(700mg，28%)，為透明油狀物。
B.(S＊，R＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-丙氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，按實(shí)施例1H中所述的兩步法，用化合物A(700mg，0.85mmol)制得標(biāo)題化合物(96mg，15%)。
m.p.89-90℃，純度＞98%，[α]D25＝-32.1°(c＝1.0，甲醇)，MS(M+H)+469+，分析1.90三氟乙酸·3.17H2O的計(jì)算值C，40.12;H，5.46;N，7.55;F，14.59;實(shí)測(cè)值C，40.12;H，5.05;N，7.31;F，14.241H-NMR(CD3OD，270 MHz)d(ppm) 7.16(4H，m)，4.71(2H，m)，4.57(2H，m)，4.43(1H，m)，4.32(1H，m)，3.98(1H，m)，3.56(1H，m)，3.33-3.02(2H，m)，2.84(2H，m)，2.37(1H，m)，1.98(2H，m)，1.89(1H，m)，2.10-1.76(3H，m)，1.57(2H，m)，1.43(1H，m)實(shí)施例44[S＊，R＊]-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-亮氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶2)鹽 A.(R＊)-N-[[2-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-亮氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯將N-叔丁氧羰基-L-亮氨酸(1.0g，4.01mmol)和化合物1B(鹽酸化物，1.43g，4.01mmol)溶于二氯甲烷(10ml)。加入溴-三吡咯烷子基氟磷酸鏻(2.10g，4.41mmol)和4-二甲氨基吡啶(100mg，0.815mmol)。滴加N，N-二異丙基乙胺(1.49g，2.0ml，11.5mmol)。在室溫下將反應(yīng)混合物攪拌2小時(shí)，濃縮并用色譜法純化(硅膠，5.0×15cm，40%乙酸乙酯、60%己烷)。收集含有所需化合物的級(jí)分并濃縮，得到化合物A，為透明油狀物(2.0g，93%)。
(M+H)+536+B.(S＊，R＊)-N-[[2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-L-亮氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯按實(shí)施例7B中所述的二步法，用化合物A(1.5g，2.81mmol)和化合物1F(1.43g，2.81mmol)制得化合物B，為透明油狀物(600mg，25%)。
(M+H)+867+C.[S＊，R＊]-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-亮氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶2)鹽按實(shí)施例1H中所述的二步法，用化合物B(600mg，0.693mmol)制得標(biāo)題化合物(200mg，38%)。
M.P.85-86℃，純度＞98.4%，[α]D25＝-35.3°(c＝0.15，甲醇)MS(M+H)+511+，分析結(jié)果三氟乙酸·0.95H2O 計(jì)算值1.95C，44.67;H，5.62;N，7.47實(shí)測(cè)值C，44.36;H，5.75;N，8.091H-NMR(CD3OD，400 MHz)d(ppm) 7.26(4H，m)，4.68(2H，m)，4.51(1H，m)，4.40(1H，m)，4.24(1H，m)，3.62(1H，m)，3.34(2H，m)，3.10(2H，m)，2.82(2H，m)，2.46(2H，m)，2.06(3H，m)，1.90(2H，m)，1.72(1H，m)，1.62(1H，m)，1.46(1H，m)，1.03(6H，m)
實(shí)施例45[R＊-[R＊(S＊)]]-N-[[2-[2-[(2-氨基-3-巰基丙基)氨基]-1-氧代丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶1)鹽 A.(S)-2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基丁酸將(S)-(+)-2-氨基丁酸(5.0g，48.5mmol)、氫氧化鈉小球(2.0g，50mmol)、水(5ml)、叔丁醇(20ml)和二碳酸二叔丁酯(11.0g，50mmol)的混合物在25℃下攪拌18小時(shí)，然后將混合物傾入水中，并用乙醚洗滌。水層用稀鹽酸酸化，并用乙酸乙酯萃取(2×)。將萃取物干燥并濃縮，得到化合物A，為無(wú)色油狀物(10.3g，＞100%)，此化合物不經(jīng)進(jìn)一步純化而直接用于下一步。
B.(R＊，R＊)-N-[[2-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-1-氧代丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯將化合物A(550mg，2.7mmol)、化合物1B鹽酸化物(895mg，2.5mmol)、二異丙基乙胺(0.70ml，4mmol)、4-二甲氨基吡啶(61mg，0.5mmol)和溴-三吡咯烷子基氟磷酸鏻(1.86g，4mmol)在二氯甲烷(10ml)中的混合物在25℃下攪拌20小時(shí)。然后將混合物傾入1N鹽酸溶液中，并用乙酸乙酯萃取。萃取物用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，干燥并真空濃縮。殘余物用硅膠(300g，EM)閃色譜法純化，用己烷∶乙酸乙酯(1∶1)洗脫，得到化合物B(600mg，47%)，為透明油狀物。
C.[R＊-[R＊(S＊)]]-N-[[2-[2-[[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]氨基]-1-氧代丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯將用氯化氫(10ml)飽和的化合物B(600mg，1.18mmol)在乙酸中的溶液在25℃攪拌1小時(shí)，然后真空濃縮得到化合物B(450mg，94%)。向此物質(zhì)(433mg，1.0mmol)在甲醇(2ml)中的溶液中加入化合物1F(445mg，1.0mmol)。30分鐘以后，加入乙酸(0.2ml)和氰基硼氫化鈉(63mg，1.0mmol)，所得混合物在25℃攪拌48小時(shí)。然后將混合物傾入過量1N鹽酸中，并用乙酸乙酯萃取。加入碳酸氫鈉使水層堿化，再用乙酸乙酯萃取。合并萃取液，干燥并真空濃縮。殘余物用硅膠(60g，EM)閃色譜法提純，用己烷∶乙酸乙酯(1∶1)洗脫，得到高Rf值產(chǎn)物(BOC-三苯甲游基-半胱氨醇)，隨后得到化合物C(100mg.12%)。
D.[R＊-[R＊(S＊)]]-N-[[2-[2-[(2-氨基-3-巰基丙基)氨基]-1-氧代丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶1)鹽將化合物C(100mg)、氫氧化鈉(1ml 1N的水溶液)、四氫呋喃(2ml)和甲醇(2ml)的混合物在25℃攪拌2小時(shí)，然后傾入過量1N鹽酸中，并用乙酸乙酯萃取。將萃取液干燥、濃縮，得到玻璃狀物(90mg)。將玻璃狀物溶于三氟乙酸(2ml)中，加入三乙基甲硅烷(0.2ml)。將混合物在25℃攪拌1小時(shí)，然后真空濃縮。殘余物用制備HPLC(YMCS-10ODS柱，30×500mm，用含0.1%三氟乙酸的10%～90%甲醇水溶液以50ml/分鐘經(jīng)30分鐘線性梯度洗脫)純化。檢測(cè)各級(jí)分在200nm處的紫外吸收。合并洗出的含第一批主要產(chǎn)物的級(jí)分并濃縮。將殘余物凍干，得到標(biāo)題化合物，為吸濕性白色固體(30mg，52%)。
mp85-95℃，[α]D＝-31°(c＝0.1，乙醇)IR(KBr)3435，2924，1674，1431cm-1MS483+(M+H)+1H NMR(CD3OD)1.1(6H，m)，1.97&2.07(3H，s(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體))，1.8-4.9(20H，m)，7.25(4H，m).
TLCRf0.15，EM 硅膠，2∶1乙酸乙酯[吡啶 20∶乙酸 6∶水 11]，UV+PMA染色HPLC＞90% 在14.9分鐘，(YMC S3 ODS柱，6.0×150mm，用含0.2%磷酸的甲醇水溶液經(jīng)30分鐘由10%至90%的線性梯度洗脫，在220nm處監(jiān)測(cè))分析結(jié)果計(jì)算值C22H34N4O4S2. 1.90三氟乙酸·1.5H2O計(jì)算值C＝42.66 H＝5.40，N＝7.71，S＝8.83，F(xiàn)＝14.91實(shí)測(cè)值C＝42.81，H＝5.32，N＝7.77，S＝8.99，F(xiàn)＝14.81
實(shí)施例46(S＊，R＊)-N-[[2-[2-[(2-氨基-3-巰基丙基)氨基]-4-甲基戊基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(2∶3)鹽 A.N2-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-N-甲氧基-N-甲基-L-亮氨酰胺將N-叔丁氧基羰基-L-亮氨酸(3.0g，12.05mmol)和N，O-二甲基鹽酸胲(1.3g，13.25mmol)溶于二氯甲烷(100ml)中。加入溴-三吡咯烷子基氟磷酸鏻(6.18g，13.25mmol)和4-二甲氨基吡啶(300mg，2.45mmol)。滴加N，N-二異丙基乙胺(3.71g，5.0ml，28.65mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4小時(shí)。濃縮，并用色譜法純化(硅膠，5.0×15cm，40%乙酸乙酯、60%己烷)。收集含有所需化合物的級(jí)分，經(jīng)濃縮得到化合物A(2.8g，80%)，為淡黃色的油狀物。
(M+H)+275+B.(1-甲?；?3-甲基丁基)氨基甲酸，1，1-二甲基乙酯按實(shí)施例1F中所述方法，用化合物A(2.8g，9.61mmol)制得透明油狀化合物B(2.1g，99%)，該化合物不經(jīng)進(jìn)一步純化而直接用于下一步。
C.(R＊，R＊)-N-[[2-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-4-甲基戊基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯將化合物1A(3.0g，7.11mmol)在甲硫醚(1.0ml)和4N鹽酸的二氧六環(huán)溶液(20ml)中攪拌30分鐘。將混合物濃縮，溶于二氯甲烷(30ml)并濃縮。此步驟重復(fù)5次，得到透明玻璃狀胺。將此胺和化合物B(2.1g，9.60mmol)溶于甲醇(20ml)和冰醋酸(0.4ml)中。分批經(jīng)30分鐘加入氰基硼氫化鈉(447mg，7.11mmol)。將反應(yīng)混合物攪拌16小時(shí)。將混合物冷至0℃，并緩慢加入飽和碳酸氫鈉溶液(100ml)。然后用乙酸乙酯(100ml)萃取產(chǎn)物。乙酸乙酯層用水(200ml)和鹽水(100ml)洗滌，干燥(硫酸鎂)，濃縮并用色譜法純化(硅膠，4.1×15cm，25%乙酸乙酯、75%己烷)。收集含有所需化合物的級(jí)分并濃縮，得到化合物C(2.3g，62%)，為透明油狀物。
(M+H)+522+D.[R＊[R＊(S＊)]]-N-[[2-[2-[[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]氨基]-4-甲基戊基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯按實(shí)施例46C中所述兩步法，用化合物C(1.3g，2.49mmol)和化合物1F(5.1g，11.4mmol)制得化合物D(500mg，25%)，為透明玻璃狀物。
M+H)+853+E.(S＊，R＊)-N-[[2-[2-[(2-氨基-3-巰基丙基)氨基]-4-甲基戊基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(2∶3)鹽按實(shí)施例1H中所述兩步法，用化合物D(500mg，0.587mmol)制得標(biāo)題化合物(35mg，24%)。
M.P.118-119℃，純度＞98%[α]D25＝-29.2°(c＝0.1，2甲醇)，MS (M+H)+497+分析結(jié)果計(jì)算值 2.80 三氟乙酸·3.50 水C，40.44;H，5.71;N，6.37;
實(shí)測(cè)值C，40.47;H，5.35;N，6.521H-NMR(CD3OD，400 MHz)d(ppm)7.14(4H，m)，4.53(1H，m)，4.10(2H，m)，3.87(1H，m)，3.60(1H，m)，3.09(4H，m)，2.85(4H，m)，2.42(1H，m)，2.31(1H，m)，2.08(1H，m)，1.98(3H，s)，1.92(1H，m)，1.53(2H，m)，1.30(1H，m)，0.84(6H，m)實(shí)施例47(R)-N-[[2-[1-[(2-氨基-3-巰基丙基)-L-脯氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶2)鹽
A.(R＊)-N-[[2-[1-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-脯氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯在二氯甲烷(40ml)中，化合物1B(鹽酸化物，1.88g，4.1mmol)與N-叔丁氧羰基-L-脯氨酸(0.881g，4.1mmol)、溴-三吡咯烷子基氟磷酸鏻(1.91g，4.1mmol)和二異丙基乙胺(2.1ml，12.3mmol)結(jié)合。此體系在室溫下攪拌2小時(shí)，然后真空濃縮。殘余物用色譜法純化(硅膠，7.1×20cm，50%乙酸乙酯、50%己烷)，收集含有所需化合物的級(jí)分，并濃縮，得到化合物A(1.88g，72%)，為玻璃狀物。
MS(M+H)+520+B.(S＊，R＊)-N-[[2-[1-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-L-脯氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯按實(shí)施例7B中所述二步法，用化合物A(1.38g，2.66mmol)、化合物1F(1.28g，2.88mmol)和氰基硼氫化鈉(167mg，2.6mmol)制得化合物B(5.21mg，25%)。
(M+H)+851+Rf 0.75(氯仿，甲醇，乙酸，85∶10∶5)C.(R)-N-[[2-[1-[(2-氨基-3-巰基丙基)-L-脯氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶2)鹽按實(shí)施例1H中所述二步法，用化合物B(520mg，0.61mmol)制得標(biāo)題化合物(70mg，15%)，為白色粉末。
(M+H)+495+mp 69-71℃，1H-NMR (CD3OD，400 MHz)d(ppm)7.15(4H，m)，4.91(1H，t)，4.63(4H，m)，4.40(1H，m)，4.20(1H，dd)，3.85(1H，m)，3.65(4H，m)，3.42(1H，dd)，3.27(1H，m)，3.08(1H，dd)，2.80(2H，m)，2.40(1H，m)，2.18(1H，m)，2.00(1.5H，s)，1.99(3H，m)，1.89(1.5H，s).
元素分析 C23H34N4O4S2·2.35C2HF3O2，0.65水;
計(jì)算值C 42.97，H 4.90，N 7.24，S 8.28，F(xiàn) 17.30實(shí)測(cè)值C 42.67，H 4.78，N 7.05，S 8.63，F(xiàn) 17.13[α]D25＝-60.4°(c＝0.5，甲醇).
＞98% 在13.1分鐘(YMC S3-ODS柱 6.0×150mm，含0.2%磷酸的甲醇水溶液經(jīng)30分鐘由10%至90%的線性梯度洗脫，1.5mL/分鐘，在220nm處監(jiān)測(cè))實(shí)施例48[R＊[S＊(S＊)]]-N-[[2-[[1-(2-氨基-3-巰基丙基)-2-甲基-2-吡咯烷基]羰基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶2)鹽
A.(S＊，R＊)-N-[[2-[[1-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-2-甲基-2-吡咯烷基]羰基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯在二氯甲烷(40ml)中，(R)-2-甲基-1，2-吡咯烷羧酸，1-(1，1-二甲基乙)酯(參見D.Seeback等，J.Am.Chem.Soc.，1983，105，5390)(0.27g，1.18mmol)和化合物1D(1g，2.7mmol)、溴-三吡咯烷子基氟磷酸鏻(1.2g，2.6mmol)、二甲氨基吡啶(0.2g)和二異丙基乙胺(0.8ml，5.2mmol)結(jié)合。此體系攪拌16小時(shí)，然后真空濃縮。殘余物用色譜法純化(硅膠，4.5×21cm，50%乙酸乙酯、50%己烷)。收集含所需化合物的級(jí)分并濃縮，得到化合物A(508mg，81%)，為玻璃狀物。
MS(M+H)+534+B.[R＊[S＊(S＊)]]-N-[[2-[[1-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-2-甲基-2-吡咯烷基]羰基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸按實(shí)施例7B中所述兩步法，用化合物A(0.5g，0.93mmol)和化合物1F(1.31g，2.88mmol)制得化合物B(270mg，34%)。
MS(M+H)+865+C.[R＊[S＊(S＊)]]-N-[[2-[[1-(2-氨基-3-巰基丙基)-2-甲基-2-吡咯烷基]羰基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶2)鹽向10ml甲醇中加入化合物B(180mg，0.21mmol)及2N氫氧化鈉，以調(diào)至pH＝12。體系攪拌至原料定量消失(4小時(shí))。調(diào)至pH＝3～4(用1N硫酸氫鉀)。并加入乙酸乙酯(30ml)。分層，水層用乙酸乙酯洗滌(3×30ml)。收集有機(jī)萃取液，干燥(硫酸鎂)并濃縮。
將殘余物(179mg，0.21mmol)與三氟乙酸(5ml)、二氯甲烷(10ml)和三乙基甲硅烷(0.25ml，1.56mmol)結(jié)合。溶液攪拌1小時(shí)后進(jìn)行真空濃縮。加入二氯甲烷，再將溶液濃縮并在真空中徹底干燥。將殘余物置于YMC C18柱(S-10，ODS 30×500mm)上(在220nm處檢測(cè))。按下列條件進(jìn)行HPLC純化溶劑A0.1%三氟乙酸水溶液;溶劑B0.1%三氟乙酸甲醇溶液;20～50%B在A中的溶液，經(jīng)40分鐘洗脫。收集出主峰的級(jí)分，并凍干得到25mg標(biāo)題化合物，為白色粉末。
MS(M+H)+509+MP 107-108℃1H-NMR (CD3OD，400 MHz)δ(ppm)7.29(4H，m)，4.60(4H，m)，3.40(1H，m)，3.22(1H，m)，3.14(1H，m)，2.97(1H，m)，2.97(1H，m)，2.78(2H，m)，2.59(1H，m)，2.33(2H，m)，2.21(1H，m)，2.11(1H，m)，2.05(3H，s)，1.92(2H，m)，1.80(1H，m)，1.53(3H，s).
元素分析 C24H36N4O4S2·2.3C2HF3O2，3H2OC H N計(jì)算值 41.63 5.41 6.79實(shí)測(cè)值 41.31 4.98 6.64[α]D25;+26.3°(c＝0.38 甲醇)＞99% 在 13.9分鐘(YMC S3-ODS柱 6.0×150mm，含0.2%磷酸的甲醇水溶液，經(jīng)30分鐘由10%至90%的線性梯度洗脫，1.5mL/分鐘，在220nm處監(jiān)測(cè))實(shí)施例49
(S＊，R＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶2)鹽 A.N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-3-甲基-L-纈氨酸向0℃的L-叔亮氨酸(1.0mg，7.6mmol)在二氧六環(huán)(10ml)中的懸浮液中加入1N氫氧化鈉(7.6ml，7.6mmol)和水(7ml)。向所得的透明溶液中加入叔丁氧羰基酐(1.86mg，8.5mmol)，并撤去冷浴。1小時(shí)后，將反應(yīng)混合物濃縮至一半，并在強(qiáng)攪拌下加入乙酸乙酯(15ml)和1N鹽酸(10ml)。分出水層并用乙酸乙酯萃取(10ml)。合并有機(jī)層;干燥(硫酸鎂)，過濾并真空濃縮，得到化合物A(2.0g)。
MS(FAB)，(M+H)+＝232+B.(R＊)-N-[[2-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯在0℃、氬氣氛下，向化合物A(0.4g，1.7mmol)在二氯甲烷(5ml)中的溶液中依次加入溴-三吡咯烷子基氟磷酸鏻(0.79g，1.7mmol)、二異丙基乙胺(0.72ml，5.1mmol)和二甲氨基丙胺(22mg，0.2mmol)。5分鐘后，加入化合物1B的鹽酸化物(0.6mg，1.68mmol)。將反應(yīng)體系溫?zé)嶂潦覝亍?小時(shí)后，反應(yīng)混合物逐次用1N鹽酸、飽和碳酸氫鈉和鹽水(各5ml)洗滌。每一次洗滌的水層用氯仿(5ml)萃取。合并有機(jī)層，干燥(硫酸鎂)，過濾并濃縮。殘余物用硅膠閃色譜法純化，用30%乙酸乙酯/己烷洗脫，得到化合物B(430mg，48%)。
MS(CI)，(M+H)+＝536+C.(S＊，R＊)-N-[[2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯在室溫、氬氣氛下，向化合物B固體(400mg，0.75mmol)中加入無(wú)水氫氯酸(4M二氧六環(huán)溶液，1ml，4mmol)和三乙基甲硅烷(0.24ml，1.5mmol)。攪拌2小時(shí)后，濃縮反應(yīng)混合物。殘余物用乙醚研制，并真空干燥，得到325mg物料(MS(M-H)-＝434-)。向此三肽(310mg，0.66mmol)的甲醇(2ml)溶液中加入化合物1F(0.3g，0.6mmol)在甲醇(1ml)和乙酸(0.1ml)中的溶液。5分鐘后，加入固體氰基硼氫化鈉(33mg，0.6mmol)。1小時(shí)后，再加入乙醛(0.3g，0.6mmol)在甲醇(1ml)中的溶液和氰基硼氫化鈉(67mg，1.2mmol)。30分鐘后，加入乙醛(0.3g，0.6mmol)在甲醇(1ml)中的溶液。再過1小時(shí)后，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(5ml)和乙醚(5ml)稀釋，并用飽和碳酸氫鈉溶液(10ml)洗滌。有機(jī)層用鹽水(10ml)洗滌，干燥(硫酸鎂)，過濾并真空濃縮。殘余物用硅膠閃色譜法純化，用30%、50%的乙酸乙酯/己烷進(jìn)行梯度洗脫，得到化合物C(540mg，95%)，為白色泡沫狀物。
MS(FAB)(M+H)+＝867+
D.(S＊，R＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶2)鹽向0℃的化合物C(0.3g，0.34mmol)在甲醇(1.5ml)中的溶液中加入1N氫氧化鈉水溶液(0.4ml，0.4mmol)。形成沉淀，并加入四氫呋喃(0.8ml)使它溶解。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝亍?小時(shí)后，加入1N鹽酸(1ml)，混合物用乙酸乙酯(5ml)萃取。干燥有機(jī)層(硫酸鎂)，過濾并真空濃縮，得到白色固體(0.28g，98%)。
MS(M-H)-＝851-向室溫、氬氣氛下的該固體(270mg，0.31mmol)在二氯甲烷(1.5ml)中的溶液中加入三乙基甲硅烷(0.5ml)和三氟乙酸(1.5ml)。1.5小時(shí)后，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除去揮發(fā)組分，殘余物溶于5%的脫氧甲醇水溶液中。形成的沉淀經(jīng)0.45μ尼龍濾器過濾，濾液用RP HPLC(YMC，S10，C18，30×500mm柱)純化，用含0.1%三氟乙酸的26%～66%甲醇水溶液經(jīng)1小時(shí)線性梯度洗脫。收集適宜的級(jí)分，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮除去甲醇，然后凍干，得到標(biāo)題化合物(153mg，63%)，為白色凍干物。
m.p.87-90℃MS(FAB);(M+H)+＝511+IR(KBr); 1676，1204cm-1[α]D＝-27°(c＝0.46，甲醇)HPLCYMC，S3，C18(6×150mm)柱，220nm，1.5mL/分鐘，含0.2%磷酸的0～90%甲醇水溶液，經(jīng)30分鐘梯度洗脫，保留時(shí)間17.5分鐘元素分析 C24H38N4O4S2. 1.5H2O. 1.85三氟乙酸
C H N S F20 計(jì)算值 44.44 5.77 7.48 8.57 14.08實(shí)測(cè)值 44.38 5.47 7.39 8.50 14.131H NMR(CD3OD，400 MHz)d 7.35-7.20(4H，m)，5.0-4.55(5H，m)，3.45-3.1(2H，m)，2.90-2.45(5H，m)，2.07，2.03(3H，2s，旋轉(zhuǎn)異構(gòu)的)，2.2-1.95(2H，m)，25 1.12，1.06(9H，2s，旋轉(zhuǎn)異構(gòu)的)實(shí)施例50[R＊[R＊(S＊)]]-N-[(2-[[(2-氨基-3-巰基丙基)氨基)苯乙酰基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶2)鹽 A.α-氨基苯乙酸，甲酯，鹽酸化物向α-氨基苯乙酸(5.00g，33.0mmol)在甲醇(100ml)中的溶液中鼓泡通入鹽酸氣。攪拌6天后，濃縮反應(yīng)混合物，用醚研制殘余物，濾出固體并風(fēng)干，得到化合物A(5.8g，85%)。
B.[R-[R＊，S＊)]]-α-[[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)巰基]丙基]氨基]苯乙酸，甲酯在室溫、氬氣氛下，向化合物1F(0.30g，0.67mmol)和化合物A(0.144g，0.87mmol)的溶液中加入乙酸(0.5ml)。攪拌30分鐘后，加入氰基硼氫化鈉(0.050g，0.87mmol)，并在室溫下攪拌反應(yīng)混合物13小時(shí)。反應(yīng)混合物用碳酸氫鈉(10ml)和乙酸乙酯(20ml)稀釋，并分層。水層用乙酸乙酯(2×20ml)萃取。合并有機(jī)層，用鹽水(1×20ml)洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。殘余物在硅膠色譜柱上純化，用9/1，8/2己烷/乙酸乙酯洗脫，得到化合物B(0.22g，56%)。
C.[R＊-(R＊，S＊)]]-α-[[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]氨基]苯乙酸向化合物B(0.22g，0.37mmol)在甲醇(2ml)中的溶液中加入氫氧化鈉(1N，0.47ml，0.019g，0.47mmol)。在室溫下攪拌13小時(shí)后，反應(yīng)混合物用10%鹽酸(10ml)和乙酸乙酯(20ml)處理。分層，水層用乙酸乙酯(2×20ml)萃取。合并有機(jī)層，用10%鹽酸(1×10ml)和鹽水(1×20ml)洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到酸化合物C(0.21g，94%)。
D.[R＊[R＊(S＊)]]-N-[[2-[N-[[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]氨基]苯乙?；鵠-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯將苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)氟磷酸鏻鹽酸化物(0.093g，0.36mmol)加入到氬氣氛下的化合物C(0.21g，0.36mmol)、化合物1B鹽酸化物(0.14g，0.40mmol)和二異丙基乙胺(0.13ml，0.10g，0.80mmol)在二氯甲烷(2ml)中的溶液中。將此反應(yīng)混合物在室溫下攪拌13小時(shí)。反應(yīng)混合物用10%鹽酸(10ml)和乙酸乙酯(20ml)稀釋。水層用乙酸乙酯萃取(2×20ml)。合并有機(jī)層，用10%鹽酸(2×10ml)、水(1×10ml)、碳酸氫鈉(2×10ml)和鹽水(2×20ml)洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。產(chǎn)物在硅膠閃色譜柱上純化，用7/3、1/1的己烷/乙酸乙酯洗脫，得到化合物D(0.087g，28%)。
E.[R＊[R＊(S＊)]]-N-[(2-[[(2-氨基-3-巰基丙基)氨基)苯乙?；鵠-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶2)鹽按實(shí)施例49D中所述二步法，用化合物D(0.09g，0.10mmol)制得標(biāo)題化合物(0.03g)。
元素分析 C26H34N4O4S22.5水 2.1三氟乙酸C H N計(jì)算值 44.50 5.08 6.87實(shí)測(cè)值 44.30 4.75 6.90TLCRf0.6(6/3/1，正丙醇/氫氧化銨/水)，用UV，PMA顯色HPLC Rt18.6分鐘(92%)，含0.2%磷酸緩沖液的10%～90%甲醇水溶液，經(jīng)30分鐘梯度洗脫，1.5mL/分鐘，220nm，C18(6.0×150mm)柱IR(KBr)3435，2924，1680，1645，1206，1134cm-1MS[M+H]+531+實(shí)施例51[R＊[R＊(S＊)]]-N-[[2-[2-[(2-氨基-3-巰基丙基)氨基]-2-環(huán)己基乙?；鵠-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶2)鹽
A.(S)-α-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]環(huán)己烷乙酸按實(shí)施例49A中所述方法，用L-環(huán)己基丙氨酸(1.6g，10.1mmol)[P.J.Corringer等J.Med.Chem.1993.36，166]制得化合物A(3.5g)。
MS(FAB)，(M+H)+＝258+B.(R＊，R＊)-N-[[2-[環(huán)己基[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]乙?；鵠-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯。
按實(shí)施例49B中所述方法，用化合物A(0.77g，3.01mmol)和化合物1B的鹽酸化物制得化合物B(430mg，48%)。
MS(CI)，(M+H)+＝562+C.[R＊[R＊(S＊)]]-N-[[2-[環(huán)己基[[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]氨基]乙?；鵠-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯按實(shí)施例49C中所述兩步法，用化合物B(250mg，0.44mmol)和化合物1F(0.2g，0.4mmol)制得化合物C(230mg，59%)，為白色泡沫狀物。
MS(FAB)(M+H)+＝893+D.[R＊[R＊(S＊)]]-N-[[2-[2-[(2-氨基-3-巰基丙基)氨基]-2-環(huán)己基乙酰基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶2)鹽按實(shí)施例49D中所述兩步法，用化合物C(0.22g，0.25mmol)制得標(biāo)題化合物(55mg，50%)，為白色凍干物。
m.p.100-105℃MS(FAB);(M+H)+＝537+IR(KBr)2934，1676，1434，1204cm-1HPLCYMC，S3，C18(6×150mm)柱，220nm，1.5mL/分鐘含0.2%磷酸的0～90%的甲醇水溶液，經(jīng)30分鐘梯度洗脫，保留時(shí)間20.3分鐘[α]D＝-31°(c＝0.3，甲醇)元素分析 C26H40N4O4S2. 1.8水. 2.0三氟乙酸C H N S計(jì)算值 45.20 5.77 7.03 8.04實(shí)測(cè)值 45.29 5.49 6.98 7.761H NMR(CD3OD，400 MHz)d 7.30-7.15(4H，m)，4.90-4.50(5H，m)，3.40(1H，m)，3.15(1H，m)，3.00-2.70(3H，m)，2.60-2.40(2H，m)，2.20-1.50(16H，m)，2.06，2.00(3H，2s，旋轉(zhuǎn)異構(gòu)的)，1.40-1.10(6H，m)實(shí)施例52(S＊，R＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯，三氟乙酸(1∶2)鹽
A.(S＊，R＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯，三氟乙酸(1∶2)鹽向化合物49C(0.180g，0.207mmol)和三氟乙酸(0.4ml)在二氯甲烷(0.8ml)中的溶液中加入三乙基甲硅烷(0.066ml，0.048g，0.415mmol)。攪拌3小時(shí)后，將反應(yīng)混合物濃縮得到固體，用制備HPLC(YMC，S-10，ODS，30×500mm，柱)提純，用含0.1%三氟乙酸的30～90%甲醇水溶液經(jīng)30分鐘梯度洗脫。含產(chǎn)物的級(jí)分濃縮并凍干，得到標(biāo)題化合物(0.036g，23%)。
元素分析 C25H40N4O4S2. 0.73H2O. 2.0三氟乙酸C H N計(jì)算值 45.48 5.72 7.31實(shí)測(cè)值 45.48 5.71 7.37HPLCRt19.85分鐘(99%)，含0.2%磷酸緩沖液的10～90%甲醇水溶液，30分鐘梯度洗脫，1.5mL/分鐘，220nm，C18(6.0×150mm)柱IR(KBr)3435，2924，1437，1682，1636，1208，1134cm-1MS[M+H]+525+[α]D＝-32°(c＝0.25，甲醇)實(shí)施例53(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N5-甲基-L-谷氨酰胺，三氟乙酸(1∶2)鹽
A.N2-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-N5-甲基-L-谷氨酰胺，1，1-二甲基乙酯在室溫、氬氣氛下，向N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-谷氨酸1-(1，1-二甲基乙)酯(3.03g，10mmol)在二氯甲烷(40ml)中的溶液中加入苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)氟磷酸鏻(4.42g，10mmol)和二異丙基乙胺(7.1ml，40mmol)。15分鐘后，加入鹽酸甲胺(2.01g，30mmol)。攪拌過夜(18小時(shí))后，反應(yīng)混合物依次用1N鹽酸(30ml)和碳酸氫鈉(30ml)洗滌。水洗滌各自用氯仿(30ml)萃取，干燥(硫酸鎂)，過濾并濃縮。所得油狀產(chǎn)物用硅膠柱色譜法純化，用30%丙酮-己烷洗脫，得到化合物A(2.8g，88%)。
MS(CI)，(M+H)+＝317B.N5-甲基-L-谷氨酰胺，1，1-二甲基乙酯在室溫、氬氣氛下，向化合物A(0.6g，1.9mmol)在二氯甲烷(2ml)中的溶液中加入2，6-二甲基吡啶(0.49ml，4.2mmol)，再加入叔丁基二甲基甲硅烷基三氟酸(0.52ml，2.28mmol)。30分鐘后，反應(yīng)混合物用飽和氯化銨(2×5ml)洗滌，并用氯仿(5ml)萃取。有機(jī)層真空濃縮(產(chǎn)物在硅膠TLC板上部分分解)。將所得到的油狀物溶于四氫呋喃(3ml)和1N鹽酸(2ml)中。將混合物劇烈攪拌20分鐘，用乙醚(5ml)洗滌。往水層加入飽和碳酸氫鈉溶液，使它堿化至pH＝8.5，用乙醚洗滌(2×5ml)，并真空濃縮。在殘余物中加入乙腈并濃縮(2×5ml)。往所得固體中加入氯仿和甲醇(1∶1)，濾去不溶的無(wú)機(jī)物。濾液真空濃縮，將固體懸浮于乙腈(5ml)中并真空濃縮得到化合物B(0.37g)，該化合物不再純化而直接用于下一步。
C.3-甲基-N-[(苯甲氧基)羰基]-L-纈氨酸向0℃的L-叔亮氨酸(10.2g，77.6mmol)在氫氧化鈉水溶液(2N，40ml)中的溶液中經(jīng)30分鐘分5次交替加入氯甲酸苯甲酯(12.1ml，85.4mmol)和氫氧化鈉(2N，40ml)。撤去冷浴，1小時(shí)后，將混合物的pH值調(diào)到10?；旌弦河靡颐?2×50ml)萃取。將水層冷卻至0℃，用5N鹽酸酸化(pH＝2)，并用乙醚萃取(3×70ml)。將有機(jī)層干燥(硫酸鎂)并真空濃縮，得到化合物C(18.2g，88%)，為稠油狀物。
MS(CI)(M+H)+＝226+D.(S)-1，2，3，4-四氫-2-[3-甲基-N-[(苯甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-3-異喹啉羧酸，甲酯在0℃、氬氣氛下，向化合物C(5.31g，20mmol)在二氯甲烷(80ml)中的溶液中順序加入二異丙基乙胺(10.6ml，60mmol)、苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)氟磷酸鏻(5.08g，20mmol)和(S)-1，2，3，4-四氫-異喹啉-3-羧酸甲酯鹽酸化物(5.68g，25mmol)。反應(yīng)混合物經(jīng)2小時(shí)溫?zé)嶂?℃，然后攪拌過夜(16小時(shí))?；旌衔镉?N鹽酸、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌(各50ml)。有機(jī)層干燥(硫酸鎂)、過濾并濃縮得到油狀物，用硅膠閃色譜法純化(用20%乙酸乙酯-己烷洗脫)得到化合物D(4.0g，45%)。
MS(CI)(M+H)+＝439+E.(S)-1，2，3，4-四氫-2-[3-甲基-N-[(苯甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-3-異喹啉羧酸向室溫下的化合物D(830mg，1.9mmol)在四氫呋喃/甲醇(4ml/5ml)中的溶液中加入氫氧化鋰(1N，1.9ml)。1小時(shí)后，加入氫氧化鋰(1N，1.5ml)。2小時(shí)后，加入氫氧化鈉(1N，1.9ml)。再過1小時(shí)后，除去溶劑，殘余物在1N鹽酸和乙酸乙酯(各10ml)之間分配。有機(jī)層干燥(硫酸鎂)并真空濃縮，得到化合物E(820mg)。
F.(R＊)-N5-甲基-N2-[[1，2，3，4-四氫-2-[3-甲基-N-[(苯甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，1，1-二甲基乙酯在0℃、氬氣氛下，向化合物B(370mg，1.71mmol)和化合物E(800mg，1.88mmol)在二甲基甲酰胺四氫呋喃(2ml∶1ml)混合物中的溶液中加入1-羥基苯并三唑(290mg，1.9mmol)，再加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸化物(363mg，1.9mmol)。反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?經(jīng)1小時(shí))，然后攪拌過夜(18小時(shí))?；旌衔镉靡宜嵋阴?10ml)稀釋，并用1N鹽酸、飽和碳酸氫鈉和鹽水(各10ml)洗滌。用30%丙酮-己烷進(jìn)行硅膠柱色譜法純化得到化合物F(585mg，55%)，為白色泡沫狀固體。
MS(CI)(M+H)+＝623G.(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N5-甲基-L-谷氨酰胺，1，1-二甲基乙酯在室溫、氬氣氛下，向化合物F(300mg，0.48mmol)在二氯甲烷(2ml)中的溶液中加入三乙基甲硅烷(115μl，0.72mmol)、二異丙基乙胺(14μl，0.1mmol)和乙酸鈀(11mg，0.05mmol)。形成黑色沉淀。1小時(shí)后，硅膠TLC分析表明無(wú)化合物F而有極性較低、在TLC板上部分分解的產(chǎn)物存在?；旌衔锝?jīng)硅藻土過濾，濾液真空濃縮，產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步提純而繼續(xù)使用。
在室溫下，向殘余物(約0.48mmol)在甲醇(1.5ml)中的溶液中加入乙酸(0.5ml)。制備醛化合物1F(447mg，1.0mmol)在甲醇(1.5ml)中的溶液。20分鐘后，加入上述醛溶液(0.8ml)。5分鐘后，加入氰基硼氫化鈉(20mg，0.33mmol)。剩余的醛溶液和氰基硼氫化鈉(各20mg)分兩批經(jīng)20分鐘間隔加入。再經(jīng)20分鐘后，真空除去揮發(fā)組分，殘余物在乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉(各20ml)之間分配。分出水層并用乙酸乙酯(15ml)萃取，合并有機(jī)層，干燥(硫酸鎂)并真空濃縮。殘余物用80%乙酸乙酯-己烷在小型硅膠柱上進(jìn)行色譜法純化，得到化合物G(310mg)。
MS(FAB)(M+H)+＝920H.(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N5-甲基-L-谷氨酰胺，三氟乙酸(1∶2)鹽在氬氣氛下，向化合物G(270mg，0.29mmol)在干燥二氯甲烷(2ml)中的溶液中加入三氟乙酸(2ml)和三乙基甲硅烷(0.5ml)。2小時(shí)后，真空除去揮發(fā)組分。向殘余物中加入甲醇水溶液(50%，1.5ml，除氧)。經(jīng)尼龍過濾器濾去白色沉淀，濾液用制備RP HPLC(EM Science E8，50×250mm，S12 lichrosphere)純化(用含0.1%三氟乙酸的30～74%甲醇水溶液洗脫)并凍干，得到標(biāo)題化合物(177mg，75%)。
MS(FAB)(M+H)+＝522IR(KBr)3432，1678，1647，120，1138cm-1[α]D＝-15°(c＝0.92，甲醇)HPLC(YMC S3 ODS 6×150mm，C18柱，60℃);含0.2%磷酸的70%～90%甲醇水溶液，保留時(shí)間13.9分鐘元素分析 C25H39N5O5S·2.31三氟乙酸·1.39H2OC H N S F計(jì)算值 43.95 5.48 8.65 3.96 16.26實(shí)測(cè)值 43.95 5.29 8.68 3.98 16.26實(shí)施例54(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，三氟乙酸(1∶2)鹽 A.(R＊)-N2-[(1，2，3，4-四氫-2-[3-甲基-N-[(苯甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，1，1-二甲基乙酯按實(shí)施例32F中所述方法，用化合物53E(0.9g，2.1mmol)和L-谷氨酰胺叔丁酯鹽酸化物(0.501g，2.1mmol)制得化合物A(1.1g，87%)。
mp60-68℃B.(R＊)-N2-[[1，2，3，4-四氫-2-(3-甲基-L-纈氨酰)-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，1，1-二甲基乙酯，鹽酸化物向含有1N鹽酸(1.5ml)的化合物A(0.914g，1.5mmol)在四氫呋喃(9.1ml)中的溶液中加入載在碳上的氫氧化鈀(10%，0.091g)。反應(yīng)連接有氫氣球，混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。反應(yīng)體系經(jīng)硅藻土過濾，并真空濃縮得到化合物B(0.767g，100%)，該化合物不再提純而直接使用。
mp128℃以上起泡并釋放出氣體C.(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，1，1-二甲基乙酯向化合物B(0.464g，0.91mmol)、化合物1F(0.609g，1.4mmol)和乙酸(0.135ml)在甲醇(4.5ml)中的溶液中分批加入氰基硼氫化鈉(0.077g，1.22mmol)，并在室溫下攪拌2.25小時(shí)。反應(yīng)用水(100ml)處理，并用二氯甲烷(3×100ml)萃取。合并有機(jī)萃取液，干燥(硫酸鎂)、過濾并真空濃縮。殘余物用閃色譜法純化(用乙酸乙酯洗脫)，得到化合物C(0.55g，67%)，為膠狀物。
MS(M+H)+906D.(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，三氟乙酸(1∶2)鹽向0℃的化合物C(0.487g，0.538mmol)和三乙基甲硅烷(0.843ml，5.38mmol)在二氯甲烷(5ml)中的溶液中加入三氟乙酸(5ml，65mmol)，溫?zé)嶂潦覝兀瑪嚢?小時(shí)。加入氯仿(10ml)，并將反應(yīng)混合物真空濃縮。殘余物用己烷研制(棄去己烷層)并真空濃縮。殘余物用制備HPLC純化(EM S-12 Lichrosphere Select B，50×250mm，220nm，40ml/分鐘，含0.1%四氫呋喃的10-90%甲醇水溶液梯度洗脫)。殘余物的合適級(jí)分經(jīng)濃縮后，溶于水中，微孔過濾并凍干，得到標(biāo)題化合物(0.28g，71%)。
mp在97℃以上分解TLCRf＝0.55(6/3/1正丙醇/氫氧化銨/水，用硫酸鈰銨顯色)MS(M+H)+508IR(KBr)，1431，1674，2972，3437 cm-1元素分析C28H39N5O9SF6·1.07 水C H N S F計(jì)算值 44.54 5.49 9.28 4.25 15.10實(shí)測(cè)值 44.56 5.17 9.26 4.23 15.48[α]D＝-17.6°(c＝0.33，甲醇)1H(DMSO)1.00(s，9H)，1.81-1.96(m，2H)，2.08-2.13(m，2H)，2.35-2.47(m，2H)，2.72(br m，1H)，2.96(br m，2H)，3.34(br m，2H)，4.18-4.20(m，1H)，4.52-4.59(m，1H)，4.85-5.02(m，3H)，7.17(s，4H)實(shí)施例55(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，甲酯，三氟乙酸(1∶2)鹽 A.N2-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-谷氨酰胺，甲酯向-10℃的(1∶1)乙醚/50%氫氧化鉀水溶液混合物(200ml)中分批加入1-甲基-3-硝基-1-亞硝基胍(9g，61.0mmol)。傾析有機(jī)層，用氫氧化鈉固體干燥。在另外的燒瓶中，將N2-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-谷氨酰胺(5.0g，20.3mmol)溶于-10℃的四氫呋喃(15ml)中。向酸溶液中分批加入重疊甲烷溶液，直至黃色持久。反應(yīng)用乙酸(3ml)處理，用乙醚(100ml)稀釋，用10%碳酸氫鈉(100ml)洗滌。水層用乙酸乙酯萃取(3×150ml)，合并有機(jī)萃取液，干燥(硫酸鎂)，過濾并真空濃縮，得到化合物A(2.0g，38%)，該化合物不再經(jīng)提純而直接使用。
MS(M+H)+261B.L-谷氨酰胺，甲酯，鹽酸化物向化合物A(2.0g，7.7mmol)中加入氯化氫在二氧六環(huán)中的溶液(4M，20ml)，并在室溫下攪拌0.5小時(shí)。反應(yīng)體系在真空下濃縮得到化合物B(1.4g，93%)。
MS(M+H)+161C.(R＊)-N2-[[1，2，3，4-四氫-2-[3-甲基-N-[(苯甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，甲酯按實(shí)施例32F中所述方法，用化合物B(0.26g，3.2mmol)和化合物52E(0.90g，2.1mmol)制得化合物C(1.05g，88%)，為白色固體。
m.p55-60℃D.(R＊)-N2-[[1，2，3，4-四氫-2-(3-甲基-L-纈氨酰)-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，甲酯，鹽酸化物按實(shí)施例54B中所述方法，用化合物C(0.95g，1.68mmol)制得化合物D(0.715g，91%)。
mp100℃以上起泡并釋放出氣體E.(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，甲酯按實(shí)施例54C中所述方法，用化合物D(0.645g，1.38mmol)和化合物1F(0.925g，2.07mmol)制得化合物E(1.25g，70%)。
F.(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基]-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，甲酯，三氟乙酸(1∶2)鹽按實(shí)施例54D中所述方法，用化合物E(0.55g，0.649mmol)制得標(biāo)題化合物(0.291g，60%)。
mp67-77℃TLCRf＝0.73(6/3/1正丙醇/氫氧化銨/水，用硫酸鈰銨顯色)MS(M+H)+522IR(KBr)，1431，1674，2972，3437 cm-1元素分析C25H39N5O5S. 2.45三氟乙酸·0.59H2OC H N S F計(jì)算值 44.25 5.29 8.63 3.95 17.20實(shí)測(cè)值 44.25 5.20 8.51 3.80 17.21[α]D＝-22.7°(c＝0.30，甲醇)1H(DMSO)1.00(s，9H)，1.78-1.99(m，2H)，2.01-2.13(m，2H)，2.44(br m，2H)，2.72(br m，3H)，2.97(br m，1H)，3.33(br m，1H)，3.51，3.55(s，3H)，4.20-4.28(m，1H)，4.51-4.60(m，1H)，4.85-4.96(m，2H)，5.02-5.04(m，1H)，7.15-7.18(s，4H)實(shí)施例56[R＊[R＊(S＊)]]-N-[[2-[2-[(2-氨基-3-巰基丙基)氨基]-3-甲基丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N-甲基-L-蛋氨酸，
A.N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-N-甲基-L-蛋氨酸，苯甲酯將氫化鈉(60%的礦物油懸浮液，3.37g，84.2mmol)在己烷(3×50ml)中成漿并沉降。傾析出己烷并加入四氫呋喃(100ml)。在0℃下，向氫化鈉溶液中加入N-叔丁氧羰基-L-蛋氨酸(7.00g，28.1mmol)在四氫呋喃(120ml)中的溶液，并滴加甲基碘(12.0g，5.24ml，84.2mmol)進(jìn)行處理?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?0小時(shí)，用乙酸乙酯(100ml)稀釋并用水(50ml)處理。分出有機(jī)層并用飽和碳酸氫鈉(3×100ml)萃取，合并碳酸氫鈉層，用硫酸氫鉀酸化至pH＝2。向酸性溶液中加入飽和氯化鈉，產(chǎn)物用乙酸乙酯(3×100ml)萃取。合并乙酸乙酯萃取液，干燥(硫酸鎂)并濃縮得到所需產(chǎn)物(5.43g，73%)，為淡黃色油狀物。
MS(M+H)+264+在上述得到的油狀物(2.00g，7.60mmol)和碳酸鉀(1.16g，8.36mmol)在二甲基甲酰胺(12ml)中的溶液中加入芐基溴(1.43g，1.00ml，8.36mmol)?；旌衔飻嚢?8小時(shí)，并在水(100ml)和乙酸乙酯(100ml)之間分配。乙酸乙酯層用飽和碳酸氫鈉(3×50ml)、水(3×50ml)和鹽水(2×50ml)洗滌，干燥(硫酸鎂)并濃縮，得到化合物A(2.32g，86%)，為透明油狀物。
MS(M+H)+354+B.(R＊)-N-[[2-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N-甲基-L-蛋氨酸，苯甲酯將化合物A(1.5g，4.234mmol)在甲硫醚(0.6ml)和4N鹽酸在二氧六環(huán)(10ml)中的溶液中攪拌30分鐘。將混合物濃縮，溶于二氯甲烷(30ml)，再濃縮。重復(fù)這個(gè)步驟5次，得到透明玻璃狀胺的鹽酸化物。將胺溶于二氯甲烷(20ml)并冷至0℃。加入叔丁氧羰基-L-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸(1.76g，6.35mmol)、二(2-氧代-3-噁唑烷基)膦酰氯(3.23g，12.7mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.64g，2.22ml，12.7mmol)。將反應(yīng)混合物在0℃攪拌24小時(shí)。補(bǔ)加二(2-氧代-3-噁唑烷基)膦酰氯(1.61g，6.35mmol)和N，N-二異丙基乙胺(820mg，1.1ml，6.35mmol)，將反應(yīng)混合物在0℃再攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮并用色譜法純化(硅膠，4.1×20cm，40%乙酸乙酯、60%己烷)。收集含有所需化合物的級(jí)分并濃縮，得到化合物B(2.4g，99%)，為透明油狀物。
(M+H)+513+C.(R＊，R＊)-N-[[2-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-甲基丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N-甲基-L-蛋氨酸，苯甲酯按實(shí)施例7B中所述兩步法，用化合物B(1.4g，2.64mmol)和化合物5B(770mg，3.84mmol)制得化合物C(800mg，50%)，為透明油狀物。
(M+H)+598+D.[R＊[R＊(S＊)]]-N-[[2-[2-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-3-甲基丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N-甲基-L-蛋氨酸，苯甲酯按實(shí)施例7B中所述兩步法，用化合物C(600mg，1.00mmol)和化合物1F(890mg，2.00mmol)制得化合物D(150mg，16%)，為透明油狀物。
E.[R＊[R＊(S＊)]]-N-[[2-[2-[(2-氨基-3-巰基丙基)氨基]-3-甲基丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N-甲基-L-蛋氨酸按實(shí)施例1H中所述兩步法，用化合物D(150mg，0.161mmol)制得標(biāo)題化合物(28mg，19%)。D25＝-20.0°(c＝0.1，甲醇)MS(M+H)+497+分析結(jié)果計(jì)算值2.70三氟乙酸·5.50H2OC，39.08;H，5.99;N，6.20;F，17.03;
實(shí)測(cè)值C，39.12;H，5.38;N，6.22;F，17.03.
1H-NMR(CD3OD，270 MHz)d(ppm)7.19(4H，m)，4.28(4H，m)，3.46(1H，m)，3.32(2H，m)，2.82(2H，m)，2.61(2H，m)，2.49(2H，m)，2.25(1H，m)，2.12(1H，m)，2.11(3H，s)，2.01(3H，s)，1.97(1H，m)，0.88(6H，m)實(shí)施例57(S＊，R＊)-N-[[2-[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)甲基氨基]-3-甲基丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(2∶3)鹽
A.(S)-(1-甲?；?2-甲基丙基)甲氨基甲酸，1，1-二甲基乙酯按實(shí)施例1F中所述方法，用N2-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-N-甲氧基-N，N2-二甲基-L-纈氨酰胺(4.0g，14.62mmol)制得化合物A(1.8g，58%)。
(M+H)+522+B.(R＊)-N-[[2-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]甲基氨基]-3-甲基丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯按實(shí)施例7B中所述兩步法，用化合物1A(6.0g，14.22mmol)和化合物A(1.8g，8.43mmol)制得化合物B(1.9g，60%)，為透明油狀物。
(M+H)+522C.[R＊[R＊(S＊)]]-N-[[2-[2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]甲基氨基]-3-甲基丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯按實(shí)施例7B中所述兩步法，用化合物B(1.9g，3.64mmol)和化合物1F(8.4g，18.8mmol)制得化合物C(1.1g，35%)，為透明油狀物。
(M+H)+853+D.(S＊，R＊)-N-[[2-[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)甲基氨基]-3-甲基丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(2∶3)鹽按實(shí)施例1H中所述方法，用化合物C(500mg，0.587mmol)制得標(biāo)題化合物(380mg)。
M.P.113-114℃，純度＞98%，[α]D25＝-38.0°(c＝0.1，甲醇)，MS(M+H)+497+，分析結(jié)果計(jì)算值1.90 三氟乙酸·1.00H2OC，45.72;H，5.92;N，7.67;
實(shí)測(cè)值C，45.75;H，5.94;N，7.99.
1H-NMR(CD3OD，400 MHz)d(ppm)7.27(4H，m)，4.64(1H，m)，4.39(1H，m)，4.29(2H，m)，3.56(1H，m)，3.39(3H，m)，3.01(2H，m)，2.85(4H，m)，2.60(2H，m)，2.56(3H，s)，2.18(1H，m)，2.09(3H，s)，1.94(2H，m)，0.99(3H，d，J＝6.8Hz)，0.82(3H，d，J＝6.4Hz)實(shí)施例58(S＊，R＊)-N-[[2-[N-乙?；?N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶1)鹽
A.(S＊，R＊)-N-[[2-[N-乙酰基-N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯室溫下，將化合物1G(700mg，0.821mmol)在乙酸酐(5.41g，53.0mmol)和N，N-二異丙基乙胺(3.70g，5.0ml，28.6mmol)中攪拌24小時(shí)。將混合物濃縮，溶于二氯甲烷(30ml)中，再濃縮。后一步驟重復(fù)5次，得到粗產(chǎn)物(700mg，混合物)，為棕色油狀物。
MS(M+H)+895+B.(S＊，R＊)-N-[[2-[N-乙?；?N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶1)鹽按實(shí)施例1H中所述兩步法，用化合物A(700mg，約0.82mmol)制得標(biāo)題化合物(41mg)。
純度＞98%，[α]D25＝-38.0°(c＝0.1，甲醇)MS(M+H)+539+分析結(jié)果計(jì)算值1.10 三氟乙酸·1.30H2OC，47.52;H，6.11;N，8.15.
實(shí)測(cè)值C，47.52;H，6.07;N，8.09.
1H-NMR(CD3OD，270 MHz)δ(ppm)7.19(4H，m)，5.47-5.13(2H，m)，4.58(2H，m)，4.45(2H，m)，4.20(1H，m)，3.92-3.58(2H，m)，3.42(2H，m)，3.18(1H，m)，2.84-2.55(2H，m)，2.43(1H，m)，2.31(1H，m)，2.11(3H，s)，1.98(3H，m)，1.85(1H，m)，0.75-1.13(6H，m)實(shí)施例59(S＊，R＊)-N-[[2-[N-[3-巰基-2-(甲氨基)丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(2∶3)鹽 A.N-甲基-L-半胱氨酸如Blondeau等在Can.J.Chem.45，49，1967中所報(bào)導(dǎo)的那樣，將鈉金屬加到(R)-4-噻唑烷羧酸(22.0g，165.2mmol)在液氨中的溶液中并在-30℃的丙酮/干冰浴中冷卻。得到藍(lán)色溶液，保持20分鐘。反應(yīng)用氯化銨處理，直至反應(yīng)混合物透明。用氮?dú)饬髡舭l(fā)氨，得到紫色殘余物，用濃鹽酸酸化至pH＝0。將反應(yīng)混合物濃縮，并用熱乙醇(2×50ml)萃取。萃取液濃縮得到化合物A(19.8g，89%)。
MS(M+H)+136+B.N-甲基-S-(三苯甲基)-L-半胱氨酸向化合物A(1.00g，7.39mmol)在三氟乙酸(10ml)中的溶液中加入三苯甲醇(1.93g，7.39mmol)，并在氬氣氛中攪拌。反應(yīng)混合物濃縮后，殘余物用己烷研制，并用三氯甲烷(2×10ml)萃取。有機(jī)層濃縮得到化合物B(1.6g.57%)。
TLCRf0.16(乙酸乙酯)，用UV、鉬酸鈰銨顯色
C.N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-N-甲基-S-(三苯甲基)-L-半胱氨酸向0℃的化合物B(2.0g，5.29mmol)在四氫呋喃和碳酸氫鈉水溶液(10ml，飽和)中的溶液中滴加二碳酸二叔丁酯(1.50g，6.88mmol)在四氫呋喃(5ml)中的溶液。將反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝?，并攪?5小時(shí)。將反應(yīng)混合物傾入鹽水(25ml)和二氯甲烷(50ml)的混合液中。分層，水層用二氯甲烷(2×50ml)萃取。合并有機(jī)層，并用10%硫酸氫鈉(2×20ml)和鹽水(25ml)洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮得到油狀物，在硅膠閃色譜柱上提純，用三氯甲烷/甲醇/乙酸(9∶1∶0.1)洗脫，得到化合物C(1.82g，72%)。
MS[M-H]-476-D.(R)-N-[1-甲酰基-2-[(三苯甲基)硫基]乙基]甲基氨基甲酸，1，1-二甲基乙酯按實(shí)施例1E和F中所述兩步法，用化合物C(1.0g，2.09mmol)制得化合物D(0.55g，57%)。
MS[M+H]+521+E.(S＊，R＊)-N-[[2-[N-[2-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]甲基氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯向0℃、攪拌下的實(shí)施例1的化合物D(0.17g，0.41mmol)和化合物D(0.14g，0.31mmol)在乙酸(1ml)和甲醇(1ml)中的溶液中，滴加在甲醇(0.5ml)中形成溶液的氰基硼氫化鈉(0.023g，0.37mmol)。將混合物緩慢溫?zé)嶂潦覝兀瑪嚢?5小時(shí)。反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉在0℃稀釋，并用乙酸乙酯(3×20ml)萃取。合并萃取液，用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。產(chǎn)物在硅膠閃色譜柱上純化，用7/3，1/1己烷/乙酸乙酯洗脫，得到化合物E(0.141g，63%)。
MS[M+H]+867+IR(KBr)2926，1636，702cm-1F.(S＊，R＊)-N-[[2-[N-[3-巰基-2-(甲氨基)丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(2∶3)鹽向化合物E(0.23g，0.26mmol)在甲醇(2ml)中的溶液中加入氫氧化鈉(1N，0.32ml，0.012g，0.31mmol)。在室溫下攪拌3小時(shí)后，反應(yīng)用10%鹽酸(15ml)和乙酸乙酯(20ml)處理。分層，水層用乙酸乙酯(2×20ml)萃取。合并有機(jī)層，用10%鹽酸(1×10ml)和鹽水(1×20ml)洗滌。有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮得到酸。產(chǎn)物用制備HPLC(YMC S-10，ODS，30×500mm，C18柱)純化，用含0.1%三氟乙酸的10-90%甲醇水溶液進(jìn)行30分鐘梯度洗脫。含產(chǎn)物的級(jí)分濃縮，凍干(0.13g，59%)。固體用實(shí)施例34D中所述方法轉(zhuǎn)化為化合物F(0.072g，39%)。
元素分析C24H38N4O4S2. 0.35H2O. 1.6 三氟乙酸C H N S F計(jì)算值 46.71 5.81 8.01實(shí)測(cè)值 46.71 5.88 7.84TLCRf0.32(9/1/0.1，三氯甲烷/甲醇/乙酸)用UV、PMA顯色HPLC Rt17.15分鐘(99%)，
含0.2%磷酸緩沖液的10～90%甲醇水溶液，30分鐘梯度洗脫，1.5mL/分鐘，220nm，C18(6.0×150mm)柱IR(KBr)2421，1670，1435，1202，1136，721cm-1MS[M+H]+511+[α]D＝-25.5°(c＝0.2，甲醇)實(shí)施例60(S＊，R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[3-巰基-2-[(苯甲基)氨基]丙基]-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(2∶3)鹽 A.(S＊，R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-[(苯甲基)氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯將化合物1G(400mg，0.469mmol)在三氟乙酸(7.5g，5.0ml，65.8mmol)和二氯甲烷中攪拌30分鐘?；旌衔餄饪s后溶于二氯甲烷(50ml)并再濃縮。后一步驟重復(fù)5次，得到透明玻璃狀物。將該物質(zhì)和苯甲醛(50mg，0.05ml，0.469mmol)溶于甲醇(10ml)和冰醋酸(0.2ml)中。在15分鐘內(nèi)分批加入氰基硼氫化鈉(30mg，0.469mmol)。將反應(yīng)混合物攪拌16小時(shí)。將混合物冷卻至0℃，緩慢加入飽和碳酸氫鈉(10ml)。產(chǎn)物然后用乙酸乙酯(60ml)萃取。乙酸乙酯層用水(100ml)和鹽水(100ml)洗滌，并干燥(硫酸鎂)，濃縮并用色譜法純化(硅膠，4.1×15cm，95%二氯甲烷，5%甲醇)。收集含所需產(chǎn)物的級(jí)分并濃縮得到化合物A(270mg，68%)，為透明油狀物。
(M+H)+843+B.(S＊，R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[3-巰基-2-[(苯甲基)氨基]丙基]-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(2∶3)鹽按實(shí)施例1H中所述兩步法，用化合物A(270mg，0.32mmol)制得標(biāo)題化合物(40mg)。
純度＞94%，[α]D25＝-18.0°(c＝0.1，甲醇)MS(M+H)+587+分析結(jié)果計(jì)算值 1.69 三氟乙酸·2.18H2OC，48.97;H，5.91;N，6.84實(shí)測(cè)值C，48.96;H，5.57;N，6.711H-NMR(CD3OD，270 MHz)δ(ppm)7.42(5H，m)，7.21(4H，m)，4.93(1H，m)，4.73(1H，m)，4.51(2H，m)，4.28(1H，m)，3.52(1H，m)，3.43(1H，m)，3.18(4H，m)，2.87(3H，m)，1.98(2H，m)，1.94(3H，s)，1.87(2H，m)，1.67(1H，m)，1.06(3H，d)，0.97(3H，d)實(shí)施例61(S＊，R＊)-N-[[2-[N-[2-(乙酰氨基)-3-巰基丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(4∶5)鹽
A.(S＊，R＊)-N-[[2-[N-[2-氨基-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯將化合物1G(230mg，0.469mmol)在三氟乙酸(7.5g，5.0ml，65.8mmol)和二氯甲烷(5.0ml)中攪拌30分鐘。將混合物濃縮，溶于二氯甲烷(50ml)，再濃縮，后一步驟重復(fù)進(jìn)行5次，得到化合物A(200mg，99%)，為透明玻璃狀物。
(M+H)+753+B.(S＊，R＊)-N-[[2-[N-[2-(乙?；被?-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯將化合物A(200mg，0.266mmol)溶于二氯甲烷(10ml)。加入N，N-二異丙基乙胺(74mg，0.1ml，0.574mmol)和乙酐(55mg，0.1ml，0.541mmol)。將混合物攪拌2小時(shí)，濃縮并用色譜法純化(硅膠，4.1×15cm，50%乙酸乙酯、50%己烷)。收集含有所需化合物的級(jí)分并濃縮，得到化合物B(100mg，47%)，為透明油狀物。
(M+H)+795+
C.(S＊，R＊)-N-[[2-[N-[2-(乙酰氨基)-3-巰基丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(4∶5)鹽按實(shí)施例1H中所述方法，用化合物B(100mg，0.126mmol)制得標(biāo)題化合物(38mg)。
M.P. 98-99℃，純度＞98.9%[α]D25＝-41.0°(c＝0.1，甲醇)MS(M+H)+539+分析結(jié)果計(jì)算值1.25 三氟乙酸·0.96水C，47.28;H，5.94;N，8.02;
實(shí)測(cè)值C，47.28;H，5.60;N，7.811H-NMR(CD3OD，400 MHz)δ(ppm) 7.28(4H，m)，4.84(2H，m)，4.65(1H，m)，4.52(2H，m)，4.31(1H，m)，4.09(1H，d，J＝6.4Hz)，3.63(1H，m)，3.48(2H，m)，3.14(1H，m)，2.68(2H，m)，2.38(2H，m)，1.99(3H，m)，1.92(1H，m)，1.89(3H，s)，1.77(1H，m)，1.66(1H，m)，1.14(6H，m)實(shí)施例62[R＊[S＊(S＊)]]-N-[[2-[N-[2-氨基-3-[(2-氨基-2-羧乙基)聯(lián)硫基]丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四
A.[R＊[S＊(S＊)]]-N-[[2-[N-[2-氨基-3-[(2-氨基-2-羧乙基)聯(lián)硫基]丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸在2ml 0.2M的調(diào)至pH＝7.4的Hepes緩沖液中，胱氨酸(59mg，0.24mmol)與化合物1H(30mg，0.06mmol)結(jié)合。將溶液靜置5小時(shí)，然后用HPLC純化(YMC S-10，ODS 30×500mm，于220nm處檢測(cè)，流速20ml/分鐘。30～50%B，45分鐘)，收集適當(dāng)級(jí)分并凍干，得到14mg(38%)標(biāo)題化合物。
mp 130-132℃MS(M+H)+616+1H-NMR(CD3OD，270 MHz)δ(ppm)7.14(4H，m)，4.71(1H，m)，4.60(1H，m)，4.45(1H，d)，4.30(1H，d)，4.07(2H，m)，3.70(1H，m)，3.55(1H，m)，3.47(1H，m)，3.07(2H，dd)，2.87(1H，m)，2.75(1H，m)，2.6(1H，m)，2.40(1H，m)，2.1-1.75(2H，m)，1.95(3H，2s)，0.99(6H，m)元素分析C26H41N5O6S3. 4C2HF3O2，1.3水:
計(jì)算值C 37.28，H 4.38，N 6.39，實(shí)測(cè)值C 37.6，H 4.81，N 6.70[α]D25-84°(c＝0.05，甲醇)C-18(YMC ODS，5 micron，120A，6×150mm)，220nm，含0.2%磷酸的10～90%甲醇水溶液，經(jīng)30分鐘洗脫，1.5mL/分鐘，在220nm處監(jiān)測(cè)RT 15.05分鐘HI＝＞98%
實(shí)施例63(S＊，R＊)-N，N′-聯(lián)硫基二(2-氨基-3，1-丙二基)二[N-[[2-(L-纈氨酰)-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸。
A.(S＊，R＊)-N，N′-聯(lián)硫基二(2-氨基-3，1-丙二基)二[N-[[2-(L-纈氨酰)-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸。
將化合物1H(70mg，0.141mmol)溶于0.1%三氟乙酸的水(10ml)溶液中。溶液于室溫下靜置72小時(shí)并凍干。固體粗品經(jīng)制備HPLC純化(YMC-C18柱，2.2×25cm，5微米，120埃;溶劑A，0.1%三氟乙酸水溶液;溶劑B，0.1%三氟乙酸的乙腈溶液;30～40%B/A經(jīng)40分鐘洗脫，流速9ml/分鐘，在220nm UV檢測(cè))。合并含有所需產(chǎn)物的級(jí)分并凍干得到標(biāo)題化合物(30mg，43%)。
M.P.115-116℃純度＞96%[α]D25＝-42.2°(c＝0.09，甲醇)MS(M+H)+991+分析結(jié)果計(jì)算值4.0 三氟乙酸·3.71 水C，42.83;H，5.42;N，7.40;
實(shí)測(cè)值C，42.83;H，5.28;N，7.471H-NMR(CD3OD，400 MHz)δ(ppm)7.26(8H，m)，4.84(8H，m)，4.55(2H，m)，4.38(2H，m)，3.80(2H，m)，3.57(2H，m)，2.95(4H，m)，2.72(2H，m)，2.48(2H，m)，2.31(2H，m)，2.13(4H，m)，2.05(6H，m)，1.96(4H，m)，1.07(12H，m)實(shí)施例64(S＊，R＊)-N-[[2-[N-[2-氨基-3-(甲基聯(lián)硫基)丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶2)鹽 A.(S＊，R＊)-N-[[2-[N-[2-氨基-3-(甲基聯(lián)硫基)丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶2)鹽在0℃、氬氣氛下，向化合物1H(100mg，0.20mmol)在甲醇/水(0.5/0.3ml，脫氧)混合液中的溶液中加入甲基硫代磺酸甲酯(36μl，0.35mmol)。反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?℃并在此溫度下攪拌過夜(16小時(shí))。真空下除去揮發(fā)組分。殘余物用制備RP HPLC(YMC，S10，30×500mm，C18柱)純化，用36～70%甲醇水溶液經(jīng)1小時(shí)洗脫。收集適當(dāng)級(jí)分并凍干得到標(biāo)題化合物(65mg)，為白色凍干物。
m.p.77-80℃MS(FAB)(M+H)+＝543IR(KBr)2974，1676，1431，1204，1140cm-1[α]D＝-45.9°(c＝0.18，甲醇)HPLCYMC，S3，C18(6×150mm)柱，220nm，1.5mL/分鐘，含0.2%磷酸的10～90%甲醇水溶液，經(jīng)30分鐘線性梯度洗脫，保留時(shí)間18.8分鐘元素分析 for C24H38N4O4S3. 1.6H2O，2.1三氟乙酸C H N S F計(jì)算值 41.76 5.38 6.91 11.86 14.76實(shí)測(cè)值 41.75 5.23 6.77 11.88 14.701H NMR(CDCl3，with 5% CD3OD，400 MHz)δ7.29-7.20(4H，m)，4.92(1H，d，J＝16.7Hz)，4.77(1H，m)，4.56(1H，d，J＝16.7Hz)，4.48(1H，m)，3.50-2.90(6H，m)，2.44和2.34(3H，兩個(gè)s)，1.80-1.60(3H，m)，1.11(3H，d，J＝6.8Hz)，1.09(6H，d，J＝6.4Hz)實(shí)施例65N-[[(S)-1，2，3，4-四氫-2-[N-[[(4R)-2-甲基-4-噻唑烷基]甲基]-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶2)鹽
A.N-[[(S)-1，2，3，4-四氫-2-[N-[[(4R)-2-甲基-4-噻唑烷基]甲基]-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶2)鹽將化合物1H(60mg，0.121mmol)溶于二氯甲烷(10ml)中。溶液冷卻至0℃，加入乙醛(0.39g，0.50ml，8.94mmol)。反應(yīng)混合物在0℃攪拌1小時(shí)。在氮?dú)饬飨抡舭l(fā)溶劑至半，過濾固體，在真空下干燥5小時(shí)，得到標(biāo)題化合物(35mg，55%)。
M.P.156-157℃純度＞93%[α]D25＝-8.0°(c＝0.1，甲醇)MS(M+H)+523+分析結(jié)果計(jì)算值 1.90 三氟乙酸·1.25 水C，45.40;H，5.61;N，7.35;
實(shí)測(cè)值C，45.39;H，5.47;N，7.001H-NMR(CD3OD，400 MHz)d(ppm)7.27(4H，m)，4.75(2H，m)，4.65(1H，m)，4.11(1H，m)，4.03(1H，m)，3.21(1H，m)，3.16(3H，m)，3.00(1H，m)，2.75(1H，m)，2.55(2H，m)，2.42(1H，m)，2.14(1H，m)，2.07(3H，m)，1.93(1H，m)，1.43(3H，m)，1.19(3H，d，J＝6.8Hz)，1.14(3H，d，J＝7.3Hz)
實(shí)施例66[S＊，R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-(4-噻唑烷基甲基)-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶5)鹽 A.(R)-4-[(N-甲氧基-N-甲基氨基)羰基]-3-噻唑烷羧酸，1，1-二甲基乙酯(R)-3，4-噻唑烷羧酸3-(1，1-二甲基乙基)酯(1g，4.97mmol)，溴-三吡咯烷子基氟磷酸鏻(5.1g，10.93mmol)和二甲氨基吡啶(200mg，1.6mmol)溶于二氯甲烷(20ml)中。加入N，O-二甲基鹽酸胲(1.07mg，10.93mmol)和N，N-二異丙基乙胺(4.5ml，25.7mmol)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，并濃縮，用色譜法純化(硅膠，7.1×20cm，40%乙酸乙酯，60%己烷)。收集含有所需化合物的級(jí)分并濃縮，得到化合物A(700mg，51%)，為白色固體。
(M+H)+277+B.(R)-4-甲?；?3-噻唑烷羧酸，1，1-二甲基乙酯按實(shí)施例1F中所述方法，用化合物A(0.7g，2.5mmol)制得化合物B(500mg，92%)，為白色玻璃狀物。
C.(S＊，R＊)-N-[[2-[N-[[3-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-4-噻唑烷基]甲基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯按實(shí)施例1G中所述方法，用化合物B(0.5g，2.3mmol)和化合物1D(1.6g，2.5mmol)制得化合物C(400mg，25%)。
MS(M+H)+622+D.(S＊，R＊)-N-[[2-[N-[[3-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-4-噻唑烷基]甲基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸在25ml甲醇中，加入化合物C(300mg，0.48mmol)及2N氫氧化鈉以調(diào)至pH＝12。攪拌，直至定量形成所需化合物為止(以tlc檢測(cè)，氯仿，甲醇，乙酸/85∶10∶5)(3小時(shí))。用1N硫酸氫鉀調(diào)pH值至3～4，并加入乙酸乙酯(30ml)。分層，水層用乙酸乙酯洗滌(3×30ml)。收集有機(jī)萃取液，干燥(硫酸鎂)并濃縮得到312mg化合物D(98%)。
MS(M+H)+609+E.(S＊，R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-(4-噻唑烷基甲基)-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶5)鹽化合物D250mg(0.41mmol)與三氟乙酸(10ml)、二氯甲烷(5ml)和甲硫醚(0.5ml)結(jié)合。溶液攪拌1小時(shí)，然后在真空下濃縮。加入二氯甲烷，再濃縮溶液，然后在真空下徹底干燥。得到殘余物240mg(定量產(chǎn)量)。在下述條件下進(jìn)行HPLC純化溶劑A;0.1%三氟乙酸溶液，溶劑B，0.1%三氟乙酸甲醇溶液(YMC S-10，ODS 30×500mm，在200nm處檢測(cè)，流速20ml/分鐘，30-50%B，45分鐘)。收集出峰(220nm)的級(jí)分，凍干得到標(biāo)題化合物194mg(67%)，為白色粉末。
MS(M+H)+509+1H-NMR(CD3OD，270MHz)d(ppm)7.17(4H，m)，4.67(4H，m)，4.20(2H，m)，3.28(2H，m)，3.06(2H，m)，2.89(1H，q)，2.40(1H，m)，2.08(1H，m)，1.95(2H，s)，1.89(1H，s)，1.09(6H，m)元素分析C24H36N4O4S2·1.4C2HF3O2，1.53水計(jì)算值C 46.26，H 5.86，N 8.05，S 9.21 F 11.47實(shí)測(cè)值C 46.26，H 5.70，N 7.82，S 9.03，F(xiàn) 11.46[α]D25-30°(c＝0.94，甲醇)C-18(YMC ODS，5 微米，120A，6×150mm)，220nm，含0.2%磷酸的10～90%甲醇水溶液，30分鐘，1.5mL/分鐘，在220nm處監(jiān)測(cè)RT 17.34分鐘HI＝＞97%實(shí)施例67(S＊，R＊)-N-[[2-(N-[2-(乙?；被?-3-(乙酰硫基)丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(2∶3)鹽
A.(S＊，R＊)-N-[[2-(N-[2-(乙?；被?-3-(乙酰硫基)丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(2∶3)鹽將化合物1H(70mg，0.141mmol)溶于二氯甲烷(10ml)。加入N，N-二異丙基乙胺(74mg，0.1ml，0.574mmol)和乙酐(55mg，0.1ml，0.541mmol)。混合物攪拌2小時(shí)，濃縮并用制備HPLC純化(YMC S-10 ODS柱，30×500mm;溶劑A，0.1%三氟乙酸在90%水、10%甲醇中的溶液;溶劑B，0.1%三氟乙酸在/10%水、90%甲醇中的溶液50～100%B，70分鐘，流速20ml/分鐘，在220nm處UV檢測(cè))。合并含所需化合物的級(jí)分凍干得到標(biāo)題化合物(30mg)。
M.P.91-92℃純度＞97.9%[α]D25＝-37°(c＝0.1，甲醇)MS(M+H)+581+分析結(jié)果計(jì)算值 1.50 三氟乙酸·0.13H2OC，47.78;H，5.58;N，7.43;
實(shí)測(cè)值C，47.78;H，5.78;N，7.551H-NMR(CD3OD，400MHz)δ(ppm)7.28(4H，m)，4.89-4.68(2H，m)，4.53(2H，m)，4.32(1H，m)，4.12(1H，d，J＝7.3Hz)，3.66(1H，m)，3.49(1H，d，J＝12.8Hz)，3.34(1H，d，J＝10.7Hz)，3.18-3.00(3H，m)，2.40(3H，s)，2.35(1H，m)，2.01(1H，m)，1.95(3H，s)，1.89(3H，s)，1.85(1H，m)，1.71(1H，m)，1.61(1H，m)，1.13(6H，m)實(shí)施例68N-[[(S)-1，2，3，4-四氫-2-[N-(2-羥基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶1)鹽 A.[[(三苯甲基)硫基]甲基]環(huán)氧乙烷將三苯甲基硫醇(2.76g，10mmol)，(±)-表氯醇(1ml，12mmol)和碳酸鈰(4.87g，15mmol)的混合物在二甲基甲酰胺(25ml)中于25℃攪拌4小時(shí)，然后傾入水中，用乙酸乙酯萃取。萃取液干燥，液縮得到油狀物。油狀物用硅膠(300g)閃色譜法純化，用4∶1己烷∶乙酸乙酯洗脫，得到油狀物。用含數(shù)滴乙醚的石油醚研制，得到化合物A(2.0g，60%)，白色固體。
B.N-[[(S)-1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-羥基-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯化合物A(500mg，1.5mmol)、化合物1D(640mg，1.4mmol)和三乙胺(0.28ml，2.0mmol)的混合物在甲醇(7ml)中加熱回流15小時(shí)，然后進(jìn)行真空濃縮。殘余物在乙酸乙酯和碳酸氫鈉溶液間進(jìn)行分配。水層再用乙酸乙酯(3×)萃取。合并萃取液，干燥并濃縮。殘余物用硅膠(300g)閃色譜法純化，用20∶20∶1至0∶10∶1的己烷∶乙酸乙酯∶(吡啶20∶乙酸6∶水11]體系進(jìn)行分級(jí)梯度洗脫，得到化合物B(540mg，51%)，為金黃色油狀物。
C.N-[[(S)-1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-羥基-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸化合物B(400mg，0.53mmol)、四氫呋喃(10ml)、甲醇(10ml)和1N氫氧化鈉溶液(2ml)的混合物在25℃攪拌30分鐘，然后傾入過量的1N鹽酸中，并用乙酸乙酯萃取。萃取液干燥，濃縮后得到化合物C(350mg，89%)。
D.N-[[(S)-1，2，3，4-四氫-2-[N-(2-羥基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶1)鹽化合物C(330mg，0.45mmol)、三氟乙酸(20ml)和三乙基甲硅烷(1ml)的混合物在25℃攪拌1小時(shí)，然后進(jìn)行真空濃縮。殘余物用制備HPLC進(jìn)行純化(YMC S-10柱，30×500mm，用含0.1%三氟乙酸的32%～90%甲醇水溶液，以50ml/分鐘流速進(jìn)行30分鐘線性梯度洗脫)。各級(jí)分在220nm處進(jìn)行紫外吸收檢測(cè)。合并含第一個(gè)主要產(chǎn)物的級(jí)分并濃縮。殘余物凍干得到標(biāo)題化合物(100mg，42%)，為吸濕性白色固體。
mp91-105℃[α]D-33°(c＝0.6，乙醇)IR(KBr)3432，2974，2575，1672，1437cm-1MS498+(M+H)+1H NMR(CD3OD)1.18(6H，m)，2.07(3H，s)，1.8-4.9(17H，m)13C NMR(CD3OD)174.8，173.3，168.2，168.2，135.4，135.3，129.3，129.2，128.4，128.2，126.9，126.8，69.8，68.7，64.1，63.3，57.5，51.7，51.6，32.5，31.7，31.0，29.6，29.3，18.8，18.5，18.3，18.2，18.0，15.2ppmTLCRf0.67，EM硅膠，1∶1乙酸乙酯[吡啶 20∶乙酸 6∶水 11]，UV+PMA染色]HPLC＞97% at 17.8分鐘(YMC S3 ODS柱，6.0×150mm，用含0.2%磷酸的10%～90%甲醇水溶液，經(jīng)30分鐘線性梯度洗脫，在220nm處監(jiān)測(cè))分析結(jié)果 C23H35N3O5S21.00三氟乙酸. 0.5H2OC H N S F計(jì)算值 43.38 6.01 6.77 10.33 9.18實(shí)測(cè)值 43.38 6.18 6.67 10.48 9.29實(shí)施例69(S＊，R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[3-巰基-2-[(3-苯基丙基)氨基]丙基]-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶2)鹽
A.(S＊，R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-[(3-苯丙基)氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯按實(shí)施例5C中所述方法，用化合物61A(450mg，0.598mmol)和氫化肉桂醛(80mg，0.080ml，0.598mmol)制得化合物A(300mg，58%)，為透明油狀物。
(M+H)+871+B.(S＊，R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[3-巰基-2-[(3-苯基丙基)氨基]丙基]-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，三氟乙酸(1∶2)鹽按實(shí)施例1H中所述兩步法，用化合物A(300mg，0.34mmol)制得標(biāo)題化合物(57mg，20%)。
純度＞99%(YMC S3 ODS 柱，6×150mm，220nm，1.5mL/分鐘，0-100%B在A中經(jīng)30分鐘(A，0.2%H3PO4在90%H2O，10%甲醇中;B，0.2%H3PO4在90%甲醇，10%H2O中)，RT 22.96分鐘，HI＞99%)，[α]D25＝-41.0°(c＝0.1，甲醇)，MS(M+H)+615+，分析結(jié)果計(jì)算值 1.80TFA·0.55H2OC，51.52;H，5.94;N，6.75 實(shí)測(cè)值C，51.54;H，5.77;
N，6.65.
1H-NMR(CD3OD，270MHz)δ(ppm)7.33-7.16(9H，m)，4.84(2H，m)，4.72(1H，m)，4.69-4.59(2H，m)，4.55(1H，m)，4.37(1H，m)，3.36(2H，m)，3.16-2.97(3H，m)，2.85(2H，m)，2.80-2.68(2H，m)，2.48(1H，m)，2.29(1H，m)，2.21-2.08(2H，m)，2.02(3H，s)，1.99(2H，m)，1.90(1H，m)，1.15-0.92(6H，m).
實(shí)施例70(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N-羥基-N-甲基-L-蛋氨酰胺，三氟乙酸(1∶2)鹽 A.(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N-甲基-N-羥基-L-蛋氨酰胺向化合物1G(9.8g，0.176mmol)在四氫呋喃∶甲醇(70ml，5∶2)中的溶液中加入2N氫氧化鋰(15ml，30mmol)。攪拌20小時(shí)后，再加入2N氫氧化鋰(7.5ml，15mmol)。再攪拌20小時(shí)后，加入1N鹽酸(40ml，40mmol)，將反應(yīng)混合物濃縮至60ml。水溶液用氯仿(3×200ml)萃取，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮得到白色固體(9.30g，100%)。
在0℃、氬氣氛下，向這種固體(400mg，0.477mmol)在二甲基甲酰胺(2ml)中的溶液中加入N-甲基鹽酸胲(40mg，0.477mmol)，二異丙基乙胺(166μl，0.984mmol)和苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)氟磷酸鏻(211mg，0.477mmol)。在0℃下攪拌20小時(shí)后，反應(yīng)用乙酸乙酯(100ml)稀釋，依次用飽和碳酸氫鈉(40ml)、10%檸檬酸(40ml)和10%氯化鋰(3×40ml)洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。殘余物在硅膠(100ml)上純化(用5∶2∶0至1∶1∶0.01的己烷∶丙酮∶甲醇洗脫)。得到化合物A(288mg，70%，白色固體)。
MP83-86℃MS(M+H)+868+B.(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N-羥基-N-甲基-L-蛋氨酰胺，三氟乙酸(1∶2)鹽在0℃、氮?dú)夥障?，向化合物A(288mg，0.332mmol)在三氟乙酸(3ml)中的溶液中滴加三乙基甲硅烷，直至黃色消失。在0℃攪拌30分鐘后，混合物進(jìn)行真空濃縮。殘余物用制備HPLC進(jìn)行純化(YMC ODS S-10，30×500mm，22ml/分鐘，10-90%甲醇水溶液，0.1%三氟乙酸，60分鐘)。合并合適的級(jí)分，濃縮至1/4體積并凍干，得到標(biāo)題化合物(85mg，32%)。
mp103-105℃MS(M+H)+526+IR(KBr)1678，1653，1520，1433，1204，1184cm-1TLCRf＝0.18(氯仿∶甲醇∶乙酸 9∶1∶0.05，用硫酸鈰銨顯色)[α]D＝-30.2°(c＝0.24，甲醇)HPLC96.6%在11.2分鐘，YMC S3 ODS，6.0×150mm，λ＝220nm，27%甲醇水溶液，0.2%H3PO4，1.5ml/分鐘
1H NMR 270MHz(CD3OD)1.15-1.38(m，6H)，1.87-2.62(m，8H)，2.92-3.86(m，11H 加 CD3OD)，4.42-5.23(m，4H 加水)，7.32-7.42(m，4H)13C NMR 100MHz(CD3OD)15.5，15.6，17.4，17.6，17.9，18.2，18.4，19.8，20.2，25.9，26.1，31.3，31.5，32.3，32.5，32.6，32.8，33.0，33.7，36.9，37.0，46.3，47.7，50.6，51.1，53.2，57.6，57.7，57.8，66.3，66.4，127.2，127.8，128.2，128.9，129.0，129.1，129.5，129.7，133.9，134.3，134.6，135.8，171.7，172.6，173.4，173.5，173.8元素分析C24H39N5O4S2·1.00 H2O·2.25 CF3CO2HC H N S F計(jì)算值 42.77 5.45 8.75 8.01 16.02實(shí)測(cè)值 42.86 5.14 8.51 7.97 16.23實(shí)施例71(S＊，R＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-O-甲基-L-高絲氨酸，三氟乙酸(1∶2)鹽
A.O-甲基-L-高絲氨酸，甲酯，鹽酸鹽向0℃的N-叔丁氧羰基-L-高絲氨酸(1.0g，4.56mmol)在四氫呋喃(20ml)中的溶液中加入氫化鈉(60%，0.365g，9.12mmol)。反應(yīng)在0℃攪拌30分鐘，加入碘代甲烷(1.14ml，18.2mmol)，反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝夭嚢?6小時(shí)。反應(yīng)用1N鹽酸(50ml)處理并用乙酸乙酯(4×50ml)萃取。合并有機(jī)萃取液，干燥(硫酸鎂)，過濾并真空濃縮，得到1.0g膠狀物，該物不再提純而直接使用。
MS(M+H)+234向0℃的這種膠狀物(1.0g，4.29mmol)在甲醇(60ml)中的溶液中加入無(wú)水氯化氫。反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝夭嚢?2小時(shí)。真空濃縮溶液得到膠狀化合物A(0.788g，100%)，該物不再提純而直接使用。
MS(M+H)+148游離胺B.(S＊，R＊)-N-[[2-[N-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-O-甲基-L-高絲氨酸，甲酯向化合物A(0.394，2.15mmol)、化合物32E(1.81g，2.15mmol)和苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)氟磷酸鏻(0.951g，2.15mmol)在乙腈(30ml)和二甲基甲酰胺(10ml)中的溶液中，加入二異丙基乙胺(1.12ml，6.45mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?6小時(shí)。反應(yīng)用1N鹽酸(50ml)處理，并用乙酸乙酯(4×50ml)萃取。合并有機(jī)萃取液，用10%氯化鋰(3×100ml)洗滌，干燥，過濾，并真空濃縮。殘余物用閃色譜法(用3/1己烷/丙酮洗脫)純化，得到化合物B(1.16g，56%)，為白色固體。
mp57-65℃TLCRf0.85(1/1己烷/丙酮，用鈰染色劑顯色)MS(M+H)+971C.(S＊，R＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-O-甲基-L-高絲氨酸，三氟乙酸(1∶2)鹽向化合物B(0.50g，0.52mmol)在甲醇(15ml)中的溶液中緩慢加入氫氧化鈉(1N，1.02ml，1.96mmol)并攪拌16小時(shí)?；旌衔镞M(jìn)行真空濃縮，用1N HCl(100ml)稀釋，并用二氯甲烷(3×100ml)進(jìn)行萃取。合并有機(jī)萃取液，干燥(硫酸鎂)、過濾并真空濃縮，得到0.497克白色固體。
TLCRf＝0.37(9/1氯仿/甲醇，用UV顯色)MS(M+H)+979在0℃下，向上述固體(0.5g，0.523mmol)在二氯甲烷(5ml)和三乙基甲硅烷(0.836ml，5.23mmol)中的溶液中加入三氟乙酸(2.6ml，34mmol)。所得溶液溫?zé)嶂潦覝?，攪?小時(shí)，真空濃縮反應(yīng)物，殘余物用己烷研制(2×20ml)。棄去己烷層。在另一個(gè)燒瓶中，用苯硫基甲烷(0.614ml，5.23mmol)、1，2-乙二硫醇(0.439ml，5.23mmol)和對(duì)-甲苯硫酚(0.649g，5.23mmol)在0℃處理三氟乙酸(10.3ml，133mmol)。此溶液加入到已研制的殘余物中，然后滴加溴代三甲基甲硅烷(0.552ml，4.18mmol，8)。溶液在0℃攪拌1.5小時(shí)。反應(yīng)用乙醚(30ml)處理，離心所得沉淀。除去上層清液并棄去，固體用乙醚(2×30ml)、乙酸乙酯(1×30ml)和乙醚(1×30ml)洗滌、離心。固體用制備HPLC純化(YMC S-15 ODS 50×500mm，220nm50ml/分鐘，含0.1%三氟乙酸的26%～74%甲醇水溶液梯度洗脫)。室溫下，真空濃縮適宜級(jí)分，殘余物凍干得到標(biāo)題化合物(0.197g，53%)。
mp78-88℃TLCRf＝0.65(6/3/1 正丙醇/氫氧化銨/水，用硫酸鈰銨/鉬酸銨/硫酸/水顯色)MS(M+H)+481 游離堿IR(KBr)，1204，1431，1676，2974cm-1元素分析C22H36N4S1O52.4 TFA 0.3 H2OC H N S F計(jì)算值 43.95 5.17 7.38 4.22 18.01實(shí)測(cè)值 43.95 5.28 7.59 4.45 18.011H (DMSO-d6，@125℃)0.93(d，3H，J＝6.45)，1.00(d，3H，J＝6.45)，1.75-1.80(m，2H)，1.88-1.93(m，3H)，2.72-3.00(m，5H)，3.17(s，3H)，3.23-3.29(m，2H)，3.50(br m，1H)，4.23-4.25(m，1H)，4.53-4.96(m，3H)，7.16，17.18(s，4H).D＝-19.1°，c＝0.22(甲醇)
權(quán)利要求
1.一種下式的化合物、或其對(duì)映體、非對(duì)映體、可藥用的鹽、前體藥物或溶劑化物 其中，A1和A2各自獨(dú)立地為H、烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、苯基或取代的苯基；G1為S或O；G2為H、-C(O)OH、-C(O)NH2、5-四唑基、-C(O)N(R7)OH或-CH2OH；X為O或R8N；Y和Z各自獨(dú)立地為-CH2-或-C(O)-；R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7各自獨(dú)立地為H或烷基；R1也可為烷?；?；R1和A1可共同構(gòu)成-(CH2)m；R8為H、烷基、苯基、苯烷基、取代的苯基、(取代的苯基)烷基或-C(O)R9；R9為H、烷基、苯基、苯烷基、取代的苯基或(取代的苯基)烷基；m為3或4；n為0、1或2；p為0、1或2；和q為0或1，但當(dāng)p為0時(shí)，則q亦為0。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中A1和A2各自獨(dú)立地為H或D-，L-或DL- -CH3，-CH(CH3)2，-CH2CH(CH3)2，-CH(CH3)CH2CH3，-C(CH3)3，-CH2OH，-CH2CH2OH，-CH2CH2CH2OH，-CH(OH)CH3， ，-CH2C(O)OH，-CH2CH2C(O)OH，-CH2C(O)NH2，-CH2CH2C(O)NR11R12(其中R11和R12各自獨(dú)立地為H、烷基或苯基，且R11和R12可共同構(gòu)成-(CH2)o-(其中o為2至6))、-CH2CH2C(O)NHOH，-CH2SH，-CH2CH2SH，-CH2CH2S(O)2NH2，-CH2CH2OCH3或-CH2CH2SCH3.
3.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中A1和A2各自獨(dú)立地為H或L- -CH3，-CH(CH3)2，-CH2CH(CH3)2，-CH(CH3)CH2CH3，-C(CH3)3，-CH2OH，-CH2CH2OH，-CH2CH2CH2OH，-CH(OH)CH3， ，-CH2C(O)OH，-CH2CH2C(O)OH，-CH2C(O)NH2，-CH2CH2C(O)NR11R12(其中R11和R12各自獨(dú)立地為H、烷基或苯基，且R11和R12可共同構(gòu)成-(CH2)o-(其中o為2至6)，-CH2CH2C(O)NHOH，-CH2SH，-CH2CH2SH，-CH2CH2S(O)2NH2，-CH2CH2OCH3or -CH2CH2SCH3.
4.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中A1為L(zhǎng)- -CH3，-CH(CH3)2，-CH2CH(CH3)2，-C(CH3)3，-CH(CH3)CH2CH3，-CH2OH 或 -CH(OH)CH3;和A2為L(zhǎng)- -CH3，-CH2CH2SCH3，-CH2CH2OH，-CH2CH2CH2OH，CH2CH2C(O)NR11R12(其中R11和R12各自獨(dú)立地為H、烷基或苯基，且R11和R12可共同構(gòu)成-(CH2)o-(其中o為2至6))、-CH2CH2OCH3或-CH2CH2SH。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中n為1。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R8為H。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中A1為L(zhǎng)-CH3，-CH(CH3)2，-CH2CH(CH3)2，-C(CH3)3，-CH(CH3)CH2CH3，-CH2OH或-CH(OH)CH3;A2為L(zhǎng)-CH2CH2SCH3，-CH2CH2OH，-CH2CH2CH2OH，-CH2CH2C(O)NR11R12(其中R11和R12各自獨(dú)立地為H、烷基或苯基，且R11和R12可共同構(gòu)成-(CH2)o-(其中o為2至6)、-CH2CH2OCH3或-CH2CH2SH;G1為S;G2為-C(O)OH;X為R8N;Y為-CH2-;R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7和R8各自為H;n為1;p為1。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的下式的化合物、或其對(duì)映體、非對(duì)映體、可藥用的鹽、前體藥物或溶劑化物 其中A1和A2各自獨(dú)立地為H、烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、苯基或取代的苯基;G1為S或O;G2為H、-C(O)OH、-C(O)NH2、-C(O)N(R7)OH或-CH2OH;X為O或R8N;R1、R2、R3、R4和R7各自獨(dú)立地為H或烷基;R1也可為烷酰基;R1和A1可共同構(gòu)成-(CH2)m;R8為H、烷基、苯基、苯烷基、取代的苯基、(取代的苯基)烷基或-C(O)R9;R9為H、烷基、苯基、苯烷基、取代的苯基或(取代的苯基)烷基;m為3或4;n為0、1或2;p為0、1或2;和q為0或1，但如p為0，則q也為0。
9.按權(quán)利要求1的下式化合物或其對(duì)映體、非對(duì)映體、可藥用的鹽、前體藥物或溶劑化物 其中，A1和A2各自獨(dú)立地為H、烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、苯基或取代的苯基;X為O或R8N;Y和Z各自獨(dú)立地為-CH2-或-C(O)-;R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7各自獨(dú)立地為H或烷基;R1也可為烷?；?R1和A1可共同構(gòu)成-(CH2)m;R8為H、烷基、苯基、苯烷基、取代的苯基、(取代的苯基)烷基或-C(O)R9;R9為H、烷基、苯基、苯烷基、取代的苯基或(取代的苯基)烷基;m為3或4;n為0、1或2;p為0、1或2;和q為0或1，但如p為0，則q也為0。
10.按權(quán)利要求9的化合物，其中A1為L(zhǎng)--CH3，-CH(CH3)2，-CH2CH(CH3)2，-C(CH3)3，-CH(CH3)CH2CH3，-CH2OH 或 -CH(OH)CH3;A2為L(zhǎng)--(CH2)2SCH3，-CH2CH2OH，-CH2CH2CH2OH，-CH2CH2C(O)NR11R12(其中R11和R12各自獨(dú)立地為H、烷基或苯基，且R11和R12可共同構(gòu)成-(CH2)o-(其中o為2至6))、-CH2CH2OCH3或-CH2CH2SH;Y為-CH2-;Z為-C(O)-;X為R8N;R1、R2、R3、R4、R5、R6和R8為H;n為1;p為1。
11.按權(quán)利要求1的化合物，選自(R＊，S＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(R＊)-N-[[2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(R＊)-N-[[2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯，(R＊)-N-[[2-[N-[3-巰基-1-氧丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(R＊，R＊)-N-[[2-[2-(L-半胱氨酰氨基)-3-甲基丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(R＊)-N-[[2-[N-(3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(R＊)-N-[[2-[N-(3-巰基丙基)-L-丙氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(R＊)-N-[[2-[N-(3-巰基丙基)-N-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(R＊，R＊)-N-[[2-[N-(3-巰基丙基)氨基]-3-甲基丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(R＊)-N-[[2-[N-(3-巰基丙基)-L-脯氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(R＊)-N-[[2-[N-(2-巰基乙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(R＊)-N-[[2-[N-(3-巰基-1-氧丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯，(R＊，S＊)-2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-[3-(甲硫基)丙基]-3-異喹啉羧酰胺，(R＊)-2-[N-(3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-[3-(甲硫基)丙基]-3-異喹啉羧酰胺，(R＊)-N-[[2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-丙氨酸，(R＊，R＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-4-羥基-1-氧丁基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(R＊，R＊)-2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-(1-(羥甲基)-3-(甲硫基)丙基]-3-異喹啉羧酰胺，(R＊)-N-[[2-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-苯丙氨酸，(R＊)-N-[[2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-絲氨酸，(R＊)-N2-[[2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N-羥基-L-蛋氨酰胺，(R＊)-N-[[2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-3-(2-噻吩基)-DL-丙氨酸，(R＊)-N-[[2-[N-(L-半胱氨酰)甘氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(R＊)-N2-[[2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，(R＊)-N-[[2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-組氨酸，(R＊)-N-[[2-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-3-(苯甲基)-L-丙氨酸，(R＊)-N-[[2-[N-(L-絲氨酰)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(R＊，R＊)-2-[N-(3-巰基-1-氧丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-[3-(甲硫基)-1-(1H-四唑-5-基)丙基]-3-異喹啉羧酰胺，(R＊，S＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-N-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(R＊，S＊，S＊)-N-[[2-[2-[(2-氨基-3-巰基丙基)氨基]-3-甲基丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(R＊)-N-[[1-[N-(L-半胱氨酰)-L-纈氨酰]-2，3-二氫-1H-吲哚-2-基]羰基]-L-蛋氨酸，(S＊，R＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯[3S-[2[R＊(S＊)]，3R＊(R＊)]]-2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-(四氫-2-氧代-3-呋喃基)-3-異喹啉羧酰胺，(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N-羥基-L-蛋氨酰胺，[R-(R＊，S＊)]-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，[R-(R＊，S＊)]-2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-N-(四氫-2-氧代-3-噻吩基)-3-異喹啉羧酰胺，(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-天冬酰胺，(S＊，R＊)-N-[[2-[(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-正亮氨酸，(S＊，R＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-γ-(氨基磺?；?-L-α-氨基丁酸，(S＊，R＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酸，(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N5-羥基-L-谷氨酰胺，[R-(R＊，S＊)]-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酰胺，N-[[(S)-2-[N-[(R)-2-氨基-3-巰基丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-2-甲基-DL-蛋氨酸，(S＊，R＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-丙氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(S＊，R＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-亮氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，[R＊[R＊(S＊)]]-N-[[2-[2-[(2-氨基-3-巰基丙基)氨基-1-氧丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(S＊，R＊)-N-[[2-[2-[(2-氨基-3-巰基丙基)氨基]-4-甲基戊基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(R)-N-[[2-[1-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-脯氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，[R＊[S＊(S＊)]]-N-[[2-[(1-(2-氨基-3-巰基丙基)-2-甲基-2-吡咯烷基]羰基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(S＊，R＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，[R＊[R＊(S＊)]]-N-[(2-[[(2-氨基-3-巰基丙基)氨基]苯乙?；鵠-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，[R＊[R＊(S＊)]]-N-[[2-[2-[(2-氨基-3-巰基丙基)氨基]-2-環(huán)己基乙?；鵠-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(S＊，R＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，甲酯，(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N5-甲基-L-谷氨酰胺，(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，甲酯，[R＊[R＊(S＊)]]-N-[[2-[2-[(2-氨基-3-巰基丙基)氨基]-3-甲基丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-N-甲基-L-蛋氨酸，(S＊，R＊)-N-[[2-[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)甲基氨基]-3-甲基丁基]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(S＊，R＊)-N-[[2-[N-乙?；?N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(S＊，R＊)-N-[[2-[N-[3-巰基-2-(甲氨基)丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(S＊，R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[3-巰基-2-[(苯甲基)氨基]丙基]-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(S＊，R＊)-N-[[2-[N-[2-(乙酰氨基)-3-巰基丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，[R＊(S＊(S＊)]]-N-[[2-[N-[2-氨基-3-[(2-氨基-2-羧乙基)聯(lián)硫基]丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(S＊，R＊)-N，N′-聯(lián)硫基二(2-氨基-3，1-丙二基)二[N-[[2-(L-纈氨酰)-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(S＊，R＊)-N-[[2-[N-[2-氨基-3-(甲基聯(lián)硫基)丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，N-[[(S)-1，2，3，4-四氫-2-[N-[[(4R)-2-甲基-4-噻唑烷基]甲基]-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(S＊，R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-(4-噻唑烷基甲基)-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(S＊，R＊)-N-[[2-[N-[2-(乙酰氨基)-3-(乙酰硫基)丙基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，N-[[(S)-1，2，3，4-四氫-2-[N-(2-羥基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(S＊，R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[3-巰基-2-[(3-苯基丙基)氨基]丙基]-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-蛋氨酸，(S＊，R＊)-N2-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]-羰基]-N-羥基-N-甲基-L-蛋氨酰胺，和(S＊，R＊)-N-[[2-[N-(2-氨基-3-巰基丙基)-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-O-甲基-L-高絲氨酸。
12.抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的方法，包括給哺乳動(dòng)物受治者施以有效抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的量的按權(quán)利要求1的化合物。
13.抑制異戊二烯基轉(zhuǎn)移酶的方法，包括給哺乳動(dòng)物受治者施以有效抑制異戊二烯基轉(zhuǎn)移酶的量的按權(quán)利要求1的化合物。
14.抑制腫瘤的方法，包括給哺乳動(dòng)物受治者施以有效抑制腫瘤的量的按權(quán)利要求1的化合物。
15.治療與通過Ras的信號(hào)傳導(dǎo)途徑有關(guān)的疾病的方法，包括給哺乳動(dòng)物受治者施以有效地治療所述疾病的量的按權(quán)利要求1的化合物。
16.治療與經(jīng)法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶后翻譯改性的蛋白質(zhì)有關(guān)的疾病的方法，包括給哺乳動(dòng)物受治者施以有效地治療所述疾病的量的按權(quán)利要求1的化合物。
17.一種下式的化合物、它的對(duì)映體、非對(duì)映體、可藥用的鹽、前體藥物和溶劑化物 其中A1和A2各自獨(dú)立地為H或天然D-、L-或DL-氨基酸側(cè)鏈中的任何一種;W為CH-R4;X為O或R5N;Y為S或O;Z為H、C(O)OH、四唑基、C(O)N(R7)OH或C(O)CH2OH;R1、R2、R3、R4和R7各自獨(dú)立地為H或烷基;R1和A1可共同構(gòu)成(CH2)m;R5為H、烷基、苯基、苯烷基或C(O)R6，其中苯基和苯烷基可在苯環(huán)上被任選取代;R6為H、烷基、苯基或苯烷基，其中苯基和苯烷基可在苯環(huán)上被任選取代;m為3或4;n為0、1或2;p為1或2;和q為0或1。
18.一種下式的化合物或其對(duì)映體、非對(duì)映體、可藥用的鹽、前體藥物或溶劑化物 其中，A1和A2各自獨(dú)立地為H、烷基、取代的烷基、苯基或取代的苯基;G1為S或O;G2為H、-C(O)OH、-C(O)NH2、5-四唑基、-C(O)N(R7)OH或-CH2OH;X為O或R8N;Y和Z各自獨(dú)立地為-CH2-或-C(O)-;R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7各自獨(dú)立地為H或烷基;R1和A1可共同構(gòu)成-(CH2)m;R8為H、烷基、苯基、苯烷基、取代的苯基、(取代的苯基)烷基或-C(O)R9;R9為H、烷基、苯基、苯烷基、取代的苯基或(取代的苯基)烷基;m為3或4;n為0、1或2;p為0、1或2;和q為0或1，但如p為0，則q也為0。
全文摘要
可抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的上式化合物、它的對(duì)映體、非對(duì)映體、可藥用的鹽、前體藥物或溶劑化物(其中各代號(hào)意義詳見說(shuō)明書)。
文檔編號(hào)C07K5/103GK1098408SQ94103570
公開日1995年2月8日 申請(qǐng)日期1994年3月31日 優(yōu)先權(quán)日1993年4月2日
發(fā)明者D·V·帕特爾, T·B·克萊恩, C·A·邁耶斯, K·列瑟里斯, R·S·拜德 申請(qǐng)人:布里斯托爾-邁爾斯斯奎布公司