專利名稱：氨甲蝶吟衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是關(guān)于新的氨甲蝶呤衍生物，更詳細(xì)地說是作為抗風(fēng)濕劑有用的氨甲蝶呤衍生物。
氨甲蝶呤衍生物很早以前是作為治療白血病的藥而使用著，但是自從1951年Gubner等報告了該物質(zhì)可有效地用于治療慢性關(guān)節(jié)風(fēng)濕(RA)癥和干癬病以來，在歐美一直作為RA的治療藥被使用著。最近，對其用法，用量進(jìn)行了詳細(xì)的研究，明確地發(fā)現(xiàn)了使用低量的氨甲蝶呤療法其付作用比較少，而且還可充分地發(fā)揮其藥效作用?？墒且膊荒芎鲆曈捎诜冒奔椎识鴮Ω喂φ系K和肺纖維化等產(chǎn)生的作用，因此希望能有付作用更少，而且藥效更高的藥物問世。
本發(fā)明者們經(jīng)過銳意的研究，在氨甲蝶呤衍生物中，得到了作為風(fēng)濕病治療藥的更為優(yōu)良的化合物，因此完成了本發(fā)明。
本發(fā)明提供了以下通式(Ⅱ)表示的氨甲蝶呤衍生物， 。
此外，本發(fā)明還涉及到這些化合物作為抗風(fēng)濕劑上的應(yīng)用。本發(fā)明的抗風(fēng)濕劑中，含有一部分公知化合物。具體的是含有3-甲氨基蝶呤(Cancer Research Vol.20，NO.10，698-733，1960)，但是此種化合物作為抗風(fēng)濕劑使用還鮮為人知。


圖1、圖2、圖3表示試驗(yàn)藥物在不同濃度時的3H-UdR溶取量(比例)本發(fā)明的化合物按以下方法合成。
(方法A)
(式中，R1、R2、R3、R4、R5及n表示與上述相同的定義，R1表示碳數(shù)1～4的低級烷基、A1表示保護(hù)基、X表示鹵原子。)(方法B)
(式中，R1、R2、R3、R4、R5及n表示與上述相同的定義，A2表示保護(hù)基、X表示鹵原子。)
(式中，R11、R12、R13及1表示與上述相同的定義、A3表示保護(hù)基、X表示鹵原子)
(方法D)
(式中，R11、R12、R13及1表示與上述相同的定義、A3表示保護(hù)基、X表示鹵原子)(方法E)
(式中，R15、R16及K表示與上述相同的定義，X表示四原子)在方法A中，由通式(1)的化合物制備通式(2)化合物的反應(yīng)，可在碳酸氫鈉、碳酸鈣、碳酸鉀等的存在下，在水-甲醇、水-乙醇、水-丙醇等的混合溶劑中，使通式(1)的化合物與用式X2表示的鹵素進(jìn)行反應(yīng)來進(jìn)行的。作為通式X2可舉出氟、氯、溴、碘等。在通式(1)的化合物中，當(dāng)R2或R3是三氟甲基時，反應(yīng)的鹵素最好是碘。
由通式(2)制備通式(3)化合物的反應(yīng)，是通過把通式(2)的化合物與醋酸酐在甲苯、苯、二甲苯、二噁烷、吡啶等的溶劑中進(jìn)行反應(yīng)來得到的。再者，從通式(1)的化合物制備通式(2)的化合物的工序和從通式(2)的化合物制備通式(3)的化合物的工序也可以反過來進(jìn)行。
由通式(3)的化合物制備通式(4)的化合物的反應(yīng)，可將通式(3)的化合物和氰化銅在如N-甲基吡咯烷酮、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲基亞丙基脲、六甲基磷酸三酰胺等溶劑中進(jìn)行反應(yīng)來得到。
由通式(4)的化合物制備通式(5)化合物的反應(yīng)，可通過使通式(4)的化合物與12N鹽酸、50%氫氧化鈉水溶液進(jìn)行反應(yīng)來得到。
由通式(5)的化合物和通式(6)的化合物制備通式(7)的化合物的反應(yīng)，可在甲醇、乙醇等的醇中，在鹽酸或硫酸的存在下進(jìn)行反應(yīng)來達(dá)到。另外，在醇中也可在含有亞硫酰氯的條件下進(jìn)行。式中R1所表示的烷基最好是甲基、乙基等。
由通式(7)化合物和通式(8)化合物制備通式(9)化合物的反應(yīng)是將通式(7)的化合物溶解在吡啶等溶劑中或者在氫化鈉的存在下懸浮在四氫呋喃、二甲基甲酰胺、二甲氧基乙烷、二噁烷、甲苯等溶劑中，再加入通式(8)化合物，進(jìn)行攪拌而完成的。式中用A′表示的保護(hù)基可舉出對甲苯磺?；?、芐氧羰基、乙酰基等。
由通式(9)化合物和通式(10)的化合物制備通式(11)化合物的反應(yīng)是將通式(9)的化合物溶解在如無水二甲基甲酰胺、四氫呋喃、二甲氧基乙烷、二噁烷等溶劑中，在冰冷卻下加入氫化鈉、在10℃～120℃，最好在室溫下攪拌后，加入通式(10)的化合物，然后在10℃～120℃最好在室溫下進(jìn)行攪拌來完成的。
由通式(11)的化合物制備通式(12)化合物的反應(yīng)是將通式(11)的化合物溶解在甲醇、乙醇、四氫呋喃等的溶劑中，在氫氧化鉀、氫氧化鈉等水溶液的存在下，在10℃～100℃，最好在室溫下進(jìn)行反應(yīng)來完成的。
由通式(12)的化合物制備通式(13)化合物的反應(yīng)是將通式(12)化合物懸浮在亞硫酰氯、草酰氯等的酰鹵化劑中，在催化劑量的二甲基甲酰胺等的存在下，在室溫下進(jìn)行的。
由通式(13)的化合物和通式(14)的化合物制備通式(15)化合物的反應(yīng)是通過將通式(13)化合物溶解在二氯甲烷中，并在冰冷卻或水冷卻下將其加入到通式(14)化合物的水溶液中，在碳酸鉀、氫氧化鈉、碳酸鈉等無機(jī)鹽的存在下在室溫下攪拌來進(jìn)行的。
從通式(15)的化合物制備通式(16)化合物的反應(yīng)通過將通式(15)化合物加到溶解有苯甲醚和苯酚等的溴化氫-醋酸的溶液中，在10℃～60℃，最好在室溫下進(jìn)行攪拌來進(jìn)行的。另外，當(dāng)A′是乙氧甲酰基時，由通式(15)的化合物制備通式(16)化合物的反應(yīng)也可以通過將通式(15)的化合物溶解在甲醇或乙醇、醋酸等的溶劑中，加入鈀-碳后，在氫氣氛下，室溫下進(jìn)行攪拌來完成。
由通式(16)的化合物和通式(17)的化合物制備通式(18)化合物的反應(yīng)，可通過將通式(16)的化合物和通式(17)的化合物溶解在二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺等的溶劑中，在0℃～100℃最好50℃～60℃下進(jìn)行攪拌來完成的。特別是當(dāng)R4是氫原子時，可將1N氫氧化鈉水溶液加到甲醇或乙醇、四氫呋喃等的溶劑中，在0℃～60℃最好35℃下進(jìn)行攪拌可得到目的產(chǎn)物。
在方法B中，由通式(5)的化合物和通式(19)化合物制備通式(20)化合物的反應(yīng)，可通過將通式(5)的化合物和通式(19)的化合物的懸浮液，在0℃～100℃最好在室溫下進(jìn)行反應(yīng)來完成的。式中作為用A2表示的保護(hù)基可舉出三氟乙?；?、乙?；取?br> 由通式(20)的化合物和通式(21)的化合物制備通式(22)化合物的反應(yīng)是通過在通式(20)化合物和通式(21)的化合物的丙酮溶液中加入氫氧化鉀，在0℃～55℃最好是45℃～53℃進(jìn)行攪拌來完成的。
由通式(22)的化合物制備通式(32)的化合物的反應(yīng)是通過使通式(22)的化合物在水中與氫氧化鉀或氫氧化鈉進(jìn)行反應(yīng)來完成的。這里，也可以用上述的通式(11)的化合物代替通式(22)的化合物。
由通式(23)的化合物和通式(17)的化合物制備通式(24)的化合物反應(yīng)是通過將通式(23)的化合物和通式(17)的化合物，在二甲基乙酰胺或二甲基甲酰胺等的溶劑中，在0℃～100℃、最好在40～55℃下進(jìn)行攪拌來完成的。
由通式(24)的化合物和通式(14)的化合物制備通式(18)化合物的反應(yīng)是通過將通式(24)的化合物與二乙基磷酸氰化物或二環(huán)己基碳化二亞胺和1-羥基苯并三唑等共存下，在二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷二酮等的溶劑中攪拌，分別調(diào)制成活性酯、混合酸酐后，向其中加入通式(14)的化合物，在0℃～200℃，最好在10℃～80℃下進(jìn)行攪拌來完成的。或者，通過向通式(24)化合物中加入三乙胺，接著加入氯甲酸異丁酯，在二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷二酮等的溶劑中攪拌，再加入通式(14)的化合物，在-20℃～50℃，最好-10℃～0℃下進(jìn)行攪拌來完成的。特別是R4是氫原子時，進(jìn)而，可在其甲醇或乙醇等的溶劑中，加入1N氫氧化鈉水溶液，在0℃～60℃最好在室溫下攪拌后，可得到目的產(chǎn)物。
在方法C中，由通式(25)的化合物制備通式(26)化合物的反應(yīng)是通過將通式(25)的化合物在醋酸酐中回流來進(jìn)行的。
由通式(26)的化合物制備通式(27)的化合物的反應(yīng)是通過使通式(26)的化合物的醋酸溶液與用式X2表示的鹵素進(jìn)行反應(yīng)來完成的。作為式X2可舉出氟、氯、溴、碘等。
由通式(27)的化合物制備通式(28)的化合物的反應(yīng)是通過將通式(27)的化合物和氰化銅在如N-甲基吡咯烷二酮、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲基亞丙基脲、六甲基磷酸三酰胺等的溶劑中，在100℃～250℃，最好200℃下進(jìn)行反應(yīng)來完成的。
由通式(28)的化合物制備通式(29)的化合物的反應(yīng)是通過通式(28)的化合物和濃鹽酸或50%氫氧化鈉水溶液等進(jìn)行反應(yīng)來完成的。
由通式(29)的化合物和通式(30)的化合物制備通式(31)的化合物的反應(yīng)是通過向氫氧化鈉水溶液中加入通式(29)的化合物的乙醚后，再加入通式(30)的化合物的乙醚溶液來進(jìn)行的。式中作為A3表示的保護(hù)基可以舉出對甲苯磺?；?、芐氧羰基、乙?；?。
由通式(31)的化合物制備通式(32)化合物的反應(yīng)是通過將通式(31)的化合物懸浮在亞硫酰氯、草酰氯等的鹵化劑中，在催化劑量有二甲基甲酰胺等的存在下，在室溫下攪拌來進(jìn)行的。
由通式(32)的化合物和通式(33)的化合物制備通式(34)化合物的反應(yīng)是通過將通式(32)的化合物溶解在二氯甲烷等的溶劑中后，再加入通式(33)的化合物的水溶液，在碳酸鉀，氫氧化鈉、碳酸氫鈉等無機(jī)堿的存在下，在室溫下進(jìn)行攪拌來完成的。
由通式(34)的化合物制備通式(35)的化合物的反應(yīng)是通過將通式(34)的化合物加入溶解有苯甲醚或苯酚等的溴化氫-醋酸溶液中，在10℃～60℃最好在室溫下進(jìn)行攪拌來完成的。另外，A3是芐氧羰基時，從通式(34)的化合物制備通式(35)化合物的反應(yīng)也可通過將通式(34)化合物溶解在甲醇、乙醇、醋酸等的溶劑中，加入鈀碳后，在氫氣氛下，進(jìn)行攪拌來完成。
由通式(35)化合物和通式(17)化合物制備通式(36)化合物的反應(yīng)是通過將通式(35)化合物和通式(17)化合物，在二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺等的溶劑中，在0℃～100℃，最好在50℃～60℃下進(jìn)行攪拌來完成的。特別是R12及R14是氫原子時，進(jìn)而在甲醇、乙醇、四氫呋喃等溶劑中加入1N氫氧化鈉水溶液，在0℃～60℃，最好在35℃攪拌后，得到目的產(chǎn)物。
由通式(36)化合物制備通式(37)化合物的反應(yīng)可通過將通式(36)化合物溶解在碳酸氫鈉水溶液等的溶劑中，在亞硝基二磺酸鉀水溶液等的存在下進(jìn)行攪拌，或者是將通式(36)化合物懸浮在二噁烷等中，在二氯二氰基苯醌等的存在下進(jìn)行攪拌、或者將通式(36)化合物加到醋酸錳(Ⅲ)的醋酸溶液中，進(jìn)行攪拌等方法來完成。
在方法(D)中，由通式(29)化合物和通式(17)化合物制備通式(38)化合物的反應(yīng)是通過將通式(29)化合物和通式(17)化合物，在二甲基乙酰胺和二甲基甲酰胺等的溶劑中，在0℃～100℃，最好40℃～55℃下進(jìn)行攪拌來完成的。
由通式(38)化合物和通式(33)化合物制備通式(36)化合物的反應(yīng)，可通過將通式(38)化合物在與二乙基磷酸氰化物、二環(huán)己基碳化二亞胺和1-羰基苯并三唑等的共存下，在二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷二酮等的溶劑中進(jìn)行攪拌后，加入通式(33)化合物，在0℃～200℃，最好在10℃～80℃下進(jìn)行攪拌來完成的。另外，也可通過向通式(38)化合物中加入三乙胺，接著加入氯甲酸異丁酯，在二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷二酮等的溶劑中攪拌后加入通式(33)化合物，在-20℃～50℃，最好-10℃～0℃下進(jìn)行攪拌來完成的。特別是R12是氫原子時，進(jìn)而在甲醇、乙醇等溶劑中，加入1N氫氧化鈉水溶液，在0℃～60℃，最好在室溫下進(jìn)行攪拌，可得到目的產(chǎn)物。
在方法E中，由式(39)化合物制備式(40)化合物的反應(yīng)是通過將式(39)化合物懸浮在亞硫酰氯、草酰氯等的酰鹵化劑中，在催化劑量的二甲基甲酰胺的存在下，在室溫下進(jìn)行攪拌來完成的。
由通式(40)化合物和通式(41)化合物制備通式(42)化合物的反應(yīng)是通過將通式(40)的化合物溶解在二氯甲烷等的溶劑中，然后向其中加入通式(41)的化合物，在水和碳酸鉀、氫氧化鈉、碳酸氫鈉等無機(jī)堿的存在下，在室溫下進(jìn)行攪拌來完成的。
由通式(42)，制備通式(43)化合物的反應(yīng)是通過將通式(42)化合物溶解在醋酸等溶劑中，在冰冷卻下，加入鋅粉末，在室溫下進(jìn)行攪拌來完成的?；虼朔磻?yīng)也可以在乙醇-鹽酸中，使用鐵粉末，在甲醇、乙醇和四氫呋喃中使用鈀-碳在氫氣霧下通過接觸還原來完成。
由通式(43)化合物和通式(17)化合物制備通式(44)化合物的反應(yīng)可通過將通式(43)化合物和通式(47)化合物，在二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺等的溶劑中，在0℃～100℃，最好在50℃～60℃下進(jìn)行攪拌來完成。式中作為X表示鹵原子時，可以是氯、溴等。特別是R15及R16是氫原子時，進(jìn)而，在甲醇、乙醇、四氫呋喃等的溶劑中，加入1N氫氧化鈉水溶液，在0℃～60℃，最好20℃～30℃下進(jìn)行攪拌，即可得到目的產(chǎn)物。
用本發(fā)明得到的用通式(Ⅱ)表示的化合物具有抗風(fēng)濕作用。這種作用可通過以下表示的試驗(yàn)例“對于人體末梢血淋巴細(xì)胞的增殖抑制作用”加以證實(shí)。
試驗(yàn)例“對來自人體末梢血淋巴細(xì)胞的增殖抑制作用”(方法)從人體末梢血，使用Ficoll-PaqueR分離出淋巴細(xì)胞，其中的105個淋巴細(xì)胞和適量的稀釋藥物與PHA(0.3μg/ml)一同在96穴的培養(yǎng)板(Culture Plate)中培養(yǎng)2天。培養(yǎng)終了的前5小時，加入3H-UdR(1μci/穴)使用閃爍計數(shù)器測定向淋巴細(xì)胞中的3H-UdR的溶取量。
(此處，PHA表示植物血球凝集素，UdR表示脫氧尿苷)此外，所使用的藥物如下。
對照例2(氨基蝶啶)
在圖1、圖2、圖3中將非添加藥劑PHA刺激淋巴細(xì)胞溶取3H-UdR量以100%的比例表示。從圖1、圖2、圖3明顯地看出，本發(fā)明化合物比對照化合物具有優(yōu)良的抑制淋巴細(xì)胞增殖作用(抗風(fēng)濕癥作用)。
參考例1N-芐酯基-4-氨基-3-甲基苯甲酸的合成將4-氨基-3-甲基苯甲酸(5.0g)懸浮在水(80ml)中后，在冰冷卻下，向此懸浮液中交替地加入芐酯基氯(3.7g)的乙醚溶液(20ml)和碳酸氫鈉(3.6g)。在室溫下連續(xù)攪拌2.5小時后，進(jìn)而在冰冷卻下交替加入芐酯基氯(3.7g)的乙醚溶液(95ml)和碳酸氫鈉(7.2g)，在室溫下攪拌1.5小時。反應(yīng)液用4N鹽酸酸化后，過濾取出析出的不溶物。得到的固體用真空干燥后，得到目的產(chǎn)物(2.8g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)2.38(3H，s)，5.20(2H，s)，7.41(5H，m)，7.97(3H，m)
參考例2N-芐酯基-N-甲基-4-氨基-3-甲基苯甲酸甲酯的合成將氫化鈉(1.4g)懸浮在二甲基甲酰胺(10ml)中后，在0℃下向此懸浮液中緩慢地加入?yún)⒖祭?化合物(2.8g)的二甲基甲酰胺溶液(10ml)。在室溫下，將反應(yīng)液攪拌1小時后，進(jìn)而緩慢地加入甲基碘，在室溫下攪拌2小時。接著將反應(yīng)液加入飽和碳酸氫鈉水溶液中，用甲苯萃取。用硫酸鈉干燥后，在減壓下蒸出溶劑。將得到的殘余物用硅膠柱色譜分離，使用氯仿作為洗脫溶劑，得到目的產(chǎn)物(1.8g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)2.19(3H，s)，3.19(3H，s)，3.87(3H，s)，5.09(2H，s)，7.21(6H，m)，7.85(2H，m)參考例3N-芐酯基-N-甲基-4-氨基-3-甲基苯甲酸的合成向參考例2的化合物(1.8g)的乙醇(15ml)溶液中加入2N氫氧化鈉水溶液(15ml)，進(jìn)行回流2小時。接著在減壓下將反應(yīng)液濃縮到10ml。用4N鹽酸酸化后，用氯仿萃取，用硫酸鈉干燥。在減壓下蒸出溶劑后得到目的產(chǎn)物(1.5g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)2.02(3H，s)，3.04(3H，s)，4.69(2H，s)，7.08(6H，m)，7.77(2H，m)參考例4N-(N′-芐酯基-N′-甲基-4-氨基-3-甲基苯甲?；?-L-谷氨酸二乙酯的合成將參考例3的化合物(820mg)加入到亞硫酰氯(5ml)中后，進(jìn)而加入催化劑量的二甲基甲酰胺，在室溫下攪拌2小時。接著在減壓下將反應(yīng)液濃縮干涸。將得到的固體物溶解在二氯甲烷(20ml)中，向此溶液中加入谷氨酸二乙酯鹽酸鹽(700mg)和碳酸鉀(1.4g)，進(jìn)而加入水(20ml)，在室溫下激烈攪拌12小時。接著將反應(yīng)液置于水中，用氯仿萃取，用1N鹽酸洗滌后，用硫酸鈉干燥。減壓下蒸出溶劑。將得到的殘余物用硅膠色譜柱分離，使用氯仿∶甲醇＝100∶3作為洗脫溶劑，得到目的的產(chǎn)物(700mg)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)1.1-1.5(6H，m)，2.0-2.7(4H，m)，2.18(3H，s)，3.19(3H，s)，3.9-4.4(4H，m)，4.80(1H，m)，5.10(2H，s)，7.0-7.5(6H，m)，7.63(2H，m)參考例5N-[N′-甲基-(4-氨基-3-甲基苯甲?；?]-L-谷氨酸二乙酯的合成向含有苯甲醚(700mg)的30%-溴化氫-醋酸(7ml)溶液中加入?yún)⒖祭?的化合物(700mg)，在室溫下，攪拌4小時。接著向反應(yīng)液中加入乙醚(200ml)時，沉淀出紅褐色的油狀物。除去大部分的醚層后，將油狀物懸浮在氯仿中，用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌此懸浮液，分離有機(jī)層。有機(jī)層用硫酸鈉干燥后，在減壓下蒸出溶劑，得到目的產(chǎn)物(360mg)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)1.0-1.5(6H，m)，2.11(3H，s)，2.90(3H，s)，2.1-2.7(4H，m)，3.9-4.4(4H，m)，4.80(1H，m)，6.54(1H，d，J＝8Hz)，6.80(1H，d，J＝7Hz)，7.61(2H，m)實(shí)施例1N-｛4-[N′-(2，4-二氨基-6-喋啶基)甲基-N′-甲氨基]-3-甲基苯甲酰基｝-L-谷氨酸二乙酯的合成將參考例5的化合物(360mg)和6-溴甲基-2，4-二氨基喋啶氫溴酸鹽異丙醇加合物(407mg)懸浮在二甲基乙酰胺(6ml)中，在55-60℃下攪拌4小時。冷卻后，向此反應(yīng)液中加入含有三乙胺(248mg)的水(30ml)，攪拌，接著用氯仿萃取。用硫酸鈉干燥氯仿層后，減壓下蒸出溶劑，將得到的殘余物用硅膠色譜柱分離，使用氯仿∶甲醇＝10∶1的混合溶劑作洗脫液，得到目的產(chǎn)物(280mg)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)1.2-1.4(6H，m)，2.0-2.6(4H，m)，2.41(3H，s)，2.73(3H，s)，4.0-4.3(4H，m)，4.32(2H，s)，4.76(1H，m)，7.06(1H，d，J＝8.3Hz)，7.41(1H，d，J＝7.8Hz)，7.65(2H，m)，8.79(1H，s)實(shí)施例2N-｛4-[N′-(2，4-二氨基-6-喋啶基)甲基-N′-甲氨基]-3-甲基苯甲?；?L-谷氨酸(化合物1)的合成向?qū)嵤├?的化合物(280mg)的乙醇(20ml)溶液中加入1N氫氧化鈉水溶液(1.6ml)，在35℃下攪拌4小時。接著在25℃下攪拌20小時后，向反應(yīng)液加入水(2ml)，在減壓下使反應(yīng)液干涸。此時外部溫度不要超過30℃。將得到的黃色固體物溶解在水(10ml)中，用1N鹽酸調(diào)節(jié)pH＝3.7，在冰箱中放置2小時。過濾析出的沉淀物，得到目的產(chǎn)物(180mg)。
1H-NMR(DMSO-d6，δ值)1.9-2.2(2H，m)，2.35(2H，t，J＝8.0Hz)，2.42(3H，s)，2.73(3H，s)，4.34(2H，s)，4.41(1H，m)，7.10(1H，d，J＝8.3Hz)，7.72(2H，m)，8.38(1H，d，J＝7.8Hz)，8.65(1H，s)參考例6N-芐酯基-N-乙基-4-氨基-3-甲基-苯甲酸乙酯的合成在氮?dú)夥障?，將氫化鈉(164mg)懸浮在二甲基甲酰胺(2ml)中，并使之成為0℃。向此懸浮液中緩慢地加入N-芐氧羰基-4-氨基-3-甲基苯甲酸(650mg)的二甲基甲酰胺溶液(2ml)后，進(jìn)而，在0℃下，緩慢加入碘乙烷(730μl)。在室溫下，攪拌2.5小時后，反應(yīng)溶液加入碳酸氫鈉溶液中，用甲苯萃取。用硫酸鎂干燥甲苯層，在減壓下蒸出溶劑，得到目的產(chǎn)物(680mg)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)0.91-1.63(6H，m)，2.16(3H，s)，3.35-.90(2H，m)，4.10-4.55(2H，m)，5.07(2H，bs)，6.95-7.35(6H，m)，7.68-7.95(2H，m)參考例7N-芐氧羰基-N-乙基-4-氨基-3-甲基苯甲酸的合成向參考例6的化合物(680mg)的乙醇(5ml)溶液中，加入2N氫氧化鈉水溶液(5ml)，回流2小時。接著冷卻到室溫，在減壓下使反應(yīng)液干涸。將得到的殘余物溶解在少量的水中，用乙醚洗滌后，使用濃鹽酸使pH＝3。用氯仿萃取析出的沉淀物，用硫酸鈉干燥。減壓下蒸出溶劑，得到的目的產(chǎn)物(540mg)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)1.16(3H，t，J＝5.4Hz)，1.20(3H，s)，3.38-3.94(2H，m)，5.12(2H，bs)，6.93-7.44(6H，m)，7.72-8.08(2H，m)參考例8N-[N′-乙基-3-甲基-(4-氨基苯甲酰基)]-L-谷氨酸二乙酯的合成將參考例7的化合物(500mg)加到亞硫酰氯(3ml)中后，進(jìn)一步添加催化劑量的二甲基甲酰胺，在室溫下攪拌2小時。接著，在減壓下將反應(yīng)液濃縮干涸。將得到的固體物溶解在二氯甲烷(13ml)中，向此溶液中加入谷氨酸二乙酯(382mg)、碳酸鉀(448mg)，進(jìn)而加入水，在室溫下激烈攪拌12小時。將反應(yīng)液置于飽和碳酸氫鈉水溶液中，用氯仿萃取，用1N鹽酸洗滌后，用硫酸鈉干燥。減壓下蒸出溶劑，得到無色油狀物質(zhì)(830mg)。接著，向得到的殘余物(830mg)中，加入30%溴化氫-醋酸(10ml)和苯甲醚(830mg)的混合溶液，在室溫下攪拌3小時。反應(yīng)后，將大量的乙醚加入的反應(yīng)液中時，沉淀出暗褐色的油狀物。除去大部分的醚層，將油狀物懸浮在氯仿中，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌此懸浮液。分離有機(jī)層，用硫酸鎂干燥后，減壓下蒸出溶劑，得到目的產(chǎn)物(360mg)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)1.03-4.18(9H，m)，1.83-2.62(7H，m)，2.96-3.43(2H，m)，3.83-4.40(4H，m)，4.48-4.98(1H，m)，6.33-6.92(2H，m)，7.34-7.73(2H，m)實(shí)施例3N-｛4-[N′-(2，4-二氨基-6-喋啶基)甲基-N′-乙氨基]-3-甲基苯甲酰基｝-L-谷氨酸二乙酯的合成在60℃下，對參考例8的化合物(360mg)玫6-溴甲基-2，4-二氨基喋啶氫溴酸鹽，異丙醇加合物(342mg)的二甲基甲酰胺懸浮液(10ml)攪拌4小時后，進(jìn)而加入6-溴甲基-2，4-二氨基喋啶氫溴酸鹽。異丙醇加合物(342mg)，在70℃下攪拌1.5小時。接著，將反應(yīng)液置于飽和碳酸氫鈉水溶液中，用氯仿萃取。用硫酸鎂干燥氯仿層后，減壓下蒸出溶劑，將得到的殘余物用硅膠柱色譜進(jìn)行分離，使用氯仿∶甲醇＝10∶1的混合溶劑作為洗脫溶劑，得到目的產(chǎn)物(167mg)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)1.06(3H，t，J＝8.0Hz)，1.15-1.42(6H，m)，1.76(3H，s)，2.37-2.54(4H，m)，3.08(2H，q，J＝8.0Hz)，4.10(2H，q，J＝8.0Hz)，4.24(2H，q，J＝8.0Hz)，4.38(2H，s)，4.70-4.88(1H，m)，5.32(2H，bs)，6.94(1H，d，J＝7.4Hz)，7.05(1H，d，J＝8.8Hz)，7.56(1H，d，J＝5.2Hz)，7.67(1H，bs)，8.80(1H，s)實(shí)施例4N-｛4-[N′-(2，4-二氨基-6-喋啶基)甲基-N′-乙氨基]-3-甲基苯甲酰基｝-L-谷氨酸(化合物2)的合成向?qū)嵤├?的化合物(150mg)的乙醇(11ml)溶液中加入1N氫氧化鈉水溶液(0.84ml)并在35℃下攪拌4小時。進(jìn)而在25℃下攪拌20小時后，向反應(yīng)液中加水(1ml)，在減壓下使此反應(yīng)液干涸。此時，外部溫度不要超過30℃。將得到的黃色固體物溶解在水(5ml)中，用1N鹽酸調(diào)節(jié)pH＝3.7，并在冰箱中放置2小時。過濾出析出的沉淀物，得到目的產(chǎn)物(121mg)。
1H-NMR(DMSO，δ值)1.04(3H，t，J＝6.8Hz)，1.85-2.28(2H，m)，2.30-2.48(5H，m)，3.04(2H，q，J＝6.8Hz)，4.39(2H，s)，6.57(2H，bs)，7.10(1H，d，J＝8.3Hz)，7.61(1H，d，J＝8.3Hz)，7.72(1H，s)，8.34(1H，d，J＝7.8Hz)，8.57(1H，s)參考例9N-(N′-芐酯基-N′-甲基-4-氨基-3-甲基苯甲?；?-L-2-氨基己二酸二甲酯的合成將參考例3的化合物(8.4g)加到亞硫酰氯(29ml)中后，進(jìn)而添加催化劑量的二甲基甲酰胺，在室溫下攪拌2小時。接著，在減壓下將反應(yīng)液濃縮干涸。將得到的固體物溶解在二氯甲烷(150ml)中，向此溶液中加入L-2-氨基己二酸二甲酯鹽酸鹽(6.6g)、碳酸鉀(10g)、進(jìn)而加入水(150ml)，在室溫下激烈攪拌12小時。將反應(yīng)液加入水中，用氯仿萃取，用1N鹽酸洗滌后，用硫酸鈉干燥。減壓下蒸出溶劑。得到的殘余物加入硅膠柱色譜柱中，使用氯仿∶甲醇＝100∶3作為洗脫溶劑進(jìn)行分離，得到目的產(chǎn)物(9.7g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)1.45-2.55(9H，m)，3.15(3H，s)，3.60(3H，s)，3.72(3H，s)，4.45-4.95(1H，m)，5.05(2H，bs)，6.80-7.35(7H，m)，7.45-7.95(2H，m)參考例10N-[N′-甲基-(4-氨基-3-甲基苯甲?；?]-L-2-氨基己二酸二甲酯的合成將參考例9的化合物(9.5g)加到含有苯甲醚(9.5g)30%-溴化氫-醋酸(100ml)溶液中，在室溫下，攪拌4小時，接著向反應(yīng)液中加入大量乙醚時，沉淀出紅褐色的油狀物。除去大部分的醚層，將油狀物懸浮在氯仿中，用飽和碳酸鈉水溶液洗滌此懸浮液，用氯仿萃取，用硫酸鈉干燥氯仿層，減壓下蒸出溶劑，得到目的產(chǎn)物(4.0g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)1.43-2.00(4H，m)，2.03(3H，s)，2.34(2H，t，J＝6Hz)，2.90(3H，s)，3.13(3H，s)，3.23(3H，s)，4.03-5.03(1H，m)，6.33-6.80(2H，m)，7.38-7.68(2H，m)實(shí)施例5N-｛4-[N′-(2，4-二氨基-6-喋啶基)甲基-N′-甲氨基]-3-甲基｝苯甲酰基-L-2-氨基己二酸二甲酯的合成將參考例10的化合物(3.83g)和6-溴甲基-2，4-二氨基喋啶氫溴酸鹽異丙醇加合物(4.06g)懸浮在二甲基乙酰胺(75ml)中，在55-60℃下攪拌4小時。冷卻后，將反應(yīng)液置于飽和碳酸氫鈉水溶液中，用氯仿萃取，用硫酸鈉干燥氯仿層后，減壓下蒸出溶劑，將得到的殘余物用硅膠柱色譜進(jìn)行分離，使用氯仿∶甲醇＝10∶1的混合溶劑作為洗脫溶劑，得到目的產(chǎn)物(3.41g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)1.55-1.95(4H，m)，2.26-2.46(5H，m)，2.74(3H，s)，3.67(3H，s)，3.79(3H，s)，4.33(2H，s)，4.70-4.85(1H，m)，5.34(2H，bs)，6.78(1H，d，J-6.8Hz)，7.05(1H，d，J＝8.4Hz)，7.61(1H，d，J＝7.8Hz)，7.68(1H，s)，8.85(1H，s)實(shí)施例6N-｛4-[N′-(2，4-二氨基-6-喋啶基)甲基-N′-甲氨基]-3-甲基｝苯甲酰基-L-2-氨基己二酸(化合物3)的合成將1N氫氧化鈉水溶液(18ml)加到實(shí)施例5的化合物(3.0g)的乙醇(160ml)溶液中，并在35℃下攪拌4小時。進(jìn)行在25℃攪拌20小時后，向反應(yīng)液中加入水(20ml)，在減壓下使反應(yīng)液干涸。此時外部溫度不要超過30℃。將得到的黃色固體物溶解在水(50ml)中，用1N鹽酸調(diào)節(jié)pH＝3.7，在冰箱中放置2小時。過濾出析出的沉淀物，得到目的產(chǎn)物(2.3g)。
1H-NMR(DMSO-d6，δ值)1.40-1.88(4H，m)，2.24(2H，t，J＝7.8Hz)，2.41(3H，s)，2.72(3H，s)，4.23-4.43(4H，m)，6.64(2H，bs)，7.11(1H，d，J＝8.8Hz)，7.66(1H，d，J＝8.3Hz)，7.74(1H，s)，8.38(1H，d，J＝8.2Hz)，8.64(1H，s)
參考例114-2，4-[N′-(二氨基-6-喋啶基)甲基]-N′-甲氨基-3-甲基苯甲酸的合成在氮?dú)夥障拢瑢?-溴甲基-2，4-二氨基喋啶氫溴酸鹽異丙醇加合物(3.8g)和4-甲氨基-3-甲基苯甲酸(4.8g)懸浮在二甲基乙酰胺(50ml)中，在40℃下，攪拌4天后，在55℃下攪拌2天。將反應(yīng)液加入水(500ml)中，用1N氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)pH＝5，過濾出產(chǎn)生的沉淀，用水、丙酮洗凈，得到目的產(chǎn)物(3.3g)。
1H-NMR(DMSO-d6，δ值)2.40(3H，s)，2.74(3H，s)，4.36(2H，s)，7.10(1H，d，J＝8.3Hz)，7.6-7.8(2H，m)，8.64(1H，s)實(shí)施例7N-｛4-[N′-(2，4-二氨基-6-喋啶基)甲基-N′-甲氨基]-3-甲基｝苯甲?；?L-高胱氨酸銨鹽的合成在氮?dú)夥障?，?℃下將三乙胺(2.7ml)和氯甲酸異丁酯(0.85ml)加到參考例11的化合物(2.4g)的二甲基乙酰胺(250ml)懸浮液中，攪拌5分鐘后，再加入氯甲酸異丁酯(0.12ml)，攪拌5分鐘。向此溶液中加入L-高胱氨酸甲酯鹽酸鹽(1.5g)，攪拌30分鐘后，同樣地加入三乙胺(1.35ml)、氯甲酸異丁酯(0.42ml)、L-高胱氨酸甲酯鹽酸鹽(0.75g)，攪拌30分鐘。慢慢升到室溫，攪拌45分鐘后，在浴溫不超過40℃下減壓蒸出溶劑，向殘余物中加入0.1N氫氧化鈉水溶液(400ml)，在室溫下攪拌2小時后，進(jìn)而，加入1N氫氧化鈉水溶液(8ml)攪拌20分鐘。凍結(jié)干燥反應(yīng)液，將得到的殘余物用硅膠柱色譜進(jìn)行分離，使用氯仿∶甲醇∶氨水＝5∶4∶1作為洗脫溶劑，將得到的粗產(chǎn)物再加在DEAE纖維柱上，用水洗凈后，用3%碳酸氫銨水溶液洗脫，得到目的產(chǎn)物(1.1g)。
1H-NMR(D2O，δ值)2.15-2.25(1H，m)，2.3-2.4(1H，m)，2.4(3H，s)，2.8(3H，s)，2.9-3.1(2H，m)，4.4-4.5(1H，m)，4.5(2H，s)，7.1(1H，d，J＝8.5Hz)，7.6(1H，d，J＝8.5Hz)，7.7(1H，m)，8.6(1H，s)參考例12N-對甲苯磺?；?4-氨基-3-乙基苯甲酸甲酯的合成將對甲苯磺酰氯(3g)加到3-乙基-4-氨基苯甲酸甲酯(1.86g)的吡啶(30ml)溶液中，并在室溫下攪拌3小時。反應(yīng)后在減壓下蒸出溶劑，向殘余物中加入氯仿和1N鹽酸，攪拌后分取有機(jī)層用硫酸鎂干燥有機(jī)層后，減壓下蒸出溶劑，將得到的殘余物用硅膠色譜進(jìn)行分離，使用己烷∶醋酸乙酯＝4∶1的混合溶劑作為洗脫溶劑，得到目的產(chǎn)物(3g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)1.10(3H，t)，2.40(3H，s)，2.1-2.6(2H，m)，3.90(3H，s)，6.6-7.9(7H，m)
參考例13N-對甲苯磺?；?N-甲基-4-氨基-3-乙基苯甲酸甲酯的合成在冰冷卻下將氫化鈉(1.3g)加到參考例12的化合物(3g)的無水二甲基甲酰胺(50ml)溶液中，在室溫下攪拌10分鐘。接著向此反應(yīng)液中加入甲基碘(3.8g)，升室溫后攪拌2小時。反應(yīng)后向此反應(yīng)液中加水，用醋酸乙酯萃取。用硫酸鎂干燥醋酸乙酯層后，減壓下蒸出溶劑，將得到的殘余物用硅膠柱色譜進(jìn)行分離，使用氯仿作為洗脫溶劑，得到目的產(chǎn)物(1.56g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)1.25(3H，t)，2.45(3H，s)，2.7-3.1(2H，m)，3.15(3H，s)，3.90(3H，s)，6.6-8.1(7H，m)參考例14N-對甲苯磺?；?N-甲基-4-氨基-3-乙基苯甲酸的合成將1N氫氧化鈉水溶液(60ml)加到參考例13化合物(1.56g)的甲醇(60ml)溶液中，在回流下，攪拌進(jìn)行2小時。把水浴的溫度保持在30℃以下，在減壓下濃縮溶劑。向此溶液中加入1N鹽酸調(diào)節(jié)pH＝2.5，過濾出析出的沉淀物，得到目的產(chǎn)物(1.33g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)1.25(3H，t)，2.45(3H，s)，2.7-3.1(2H，m)，3.15(3H，s)，6.6-8.2(7H，m)
參考例15N-(N′-對甲苯磺?；?N′-甲基-4-氨基-3-乙基苯甲?；?-L-谷氨酸二乙酯的合成將參考例14的化合物(1.33g)加到亞硫酰氯(5ml)中后，進(jìn)而添加催化劑量的二乙基甲酰胺，在室溫下攪拌2小時。接著在減壓下濃縮干涸反應(yīng)液。得到的固體物溶解在二氯甲烷(35ml)中，向此溶液中加入谷氨酸二乙酯鹽酸鹽(900mg)、碳酸鉀(1.4g)，進(jìn)而加入水(15ml)，在室溫下激烈攪拌一夜。將反應(yīng)液加入水中，用氯仿萃取，用飽和碳酸氫鈉水溶液、1N鹽酸洗滌氯仿層，用硫酸鎂干燥。在減壓下蒸出溶劑，得到目的產(chǎn)物(1.5g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)1.0-1.4(9H，m)，2.0-3.0(6H，m)，2.45(3H，s)，3.10(3H，s)，3.9-4.4(4H，m)，4.5-5.0(1H，m)，6.5-7.9(7H，m)參考例16N-(N′-甲基-4-氨基-3-乙基苯甲酰)-L-谷氨酸二乙酯的合成將參考例15化合物(1.5g)加到苯甲醚(1.5g)的30%溴化氫-醋酸(15ml)溶液中，在室溫下攪拌4.5小時。接著向反應(yīng)液中加入乙醚(300ml)，沉淀出紅褐色的油狀物。除去大部分的醚層，將油狀物懸浮在氯仿中，然后用飽和碳酸氫鈉鈉水溶液洗滌后，分離有機(jī)層。用硫酸鎂干燥有機(jī)層，在減壓下蒸出溶劑，得到目的產(chǎn)物(1.0g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)1.0-1.4(9H，m)，2.0-3.0(6H，m)，2.85(3H，s)，3.7-4.3(4H，m)，4.5-4.9(1H，m)，6.4-7.7(3H，m)實(shí)施例8N-｛4-[N′-(2，4-二氨基-6-喋啶基)甲基-N′-甲氨基]-3-乙基苯甲?；?L-谷氨酸二乙酯的合成將參考例16的化合物(1.0g)和6-溴甲基-2，4-二氨基喋啶氫溴酸鹽、異丙醇加合物(1.1g)懸浮在二甲基乙酰胺(10ml)中，在60℃下攪拌6小時。冷卻后，將反應(yīng)液加入飽和碳酸氫鈉水溶液中，用氯仿萃取。有機(jī)層用硫酸鎂干燥后，減壓下蒸出溶劑。將得到的殘余物用硅膠柱色譜進(jìn)行分離，使用氯仿∶甲醇＝10∶1的混合溶劑作為洗脫溶劑，得到目的產(chǎn)物(671mg)。
1H-NMR(CD3OD，δ值)1.0-1.4(9H，m)，2.0-3.0(6H，m)，2.75(3H，s)，3.9-4.7(7H，m)，7.1-7.8(3H，m)，8.70(1H，s)實(shí)施例9N-｛4-[N′-(2，4-二氨基-6-喋啶基)甲基-N′-甲氨基]-3-乙基苯甲?；?L-谷氨酸(化合物4)的合成將1N氫氧化鈉水溶液(1.78ml)加到實(shí)施例8的化合物(640mg)的乙醇(22ml)溶液中，在35℃下，攪拌4.5小時。進(jìn)而在25℃下攪拌20小時后，將水(2ml)加入反應(yīng)液中。接著在冰水冷卻下用1N鹽酸將反應(yīng)液的pH值調(diào)節(jié)到3.7，并在冷處放置一夜。濾出析出的沉淀物，得到目的產(chǎn)物(340mg)。
1H-NMR(DMSO-d6，δ值)1.26(3H，m)，1.9-2.5(4H，m)，2.69(3H，s)，2.80(2H，m)，4.29(2H，s)，4.39(1H，m)，7.22(1H，m)，7.71(2H，m)，8.64(1H，s)參考例17N-芐酯基-4-氨基-3，5-二甲基苯甲酸乙酯的合成在氮?dú)夥障?，向氫化鈉(0.82g)的四氫呋喃(THF)的懸浮液中，加入4-氨基-3，5-二甲基苯甲酸乙酯(2.0g)，在室溫下攪拌30分鐘。接著向懸浮液中加入芐酯基氯(4.4ml)并攪拌1夜。向此反應(yīng)液中加入少量水后，置于冰水中，用醋酸乙酯萃取。水洗、干燥(用硫酸鎂)后，減壓下蒸出溶劑。加入乙醇過濾出析出的結(jié)晶，真空干燥后，得到目的產(chǎn)物(3.2g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)1.39(3H，t，J＝7Hz)，2.05(6H，s)，4.35(2H，q，J＝7Hz)，5.15(2H，s)，7.23(5H，m)，7.75(2H，s)參考例18N-芐酯基-N-甲基-4-氨基-3，5-二甲基苯甲酸乙酯的合成在氮?dú)夥障拢瑢浠c(1.2g)懸浮在二甲基甲酰胺(50ml)中，并攪拌。在室溫下，將參考例17的化合物(3.2g)加到懸浮液中，攪拌30分鐘后加入甲基碘(1.8ml)，進(jìn)而在室溫下攪拌一夜。接著在冰冷卻下向反應(yīng)液中加入數(shù)滴水，并將反應(yīng)液置于冰水中。用醋酸乙酯萃取，用硫酸鎂干燥。減壓下蒸出溶劑，將得到的殘余物用硅膠柱色譜進(jìn)行分離，使用己烷∶醋酸乙酯＝9∶1作為洗脫劑，得到目的產(chǎn)物(1.47g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)1.38(3H，t，J＝7Hz)，2.21(6H，s)，3.17(3H，s)，4.42(2H，q，J＝7Hz)，5.13(2H，s)，7.0-7.6(5H，m)，7.80(2H，s)參考例19N-芐酯基-N-甲基-4-氨基-3，5-二甲基苯甲酸的合成向參考例18的化合物(1.47g)的THF(30ml)溶液中加入1N氫氧化鈉水溶液(12ml)、在60℃下加熱6小時，進(jìn)而在室溫下攪拌一夜。接著用3N鹽酸將反應(yīng)液pH值調(diào)節(jié)到5、減壓下濃縮。pH值到約2時，用THF萃取，用硫酸鎂干燥。減壓下蒸出溶劑，得到目的產(chǎn)物(1.34g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)2.18(6H，s)，3.14(3H，s)，5.04(2H，s)，6.9-7.5(5H，m)，7.76(2H，s)參考例20N-(N′-芐酯基-N′-甲基-4-氨基-3，5-二甲基苯甲酰基)-L-谷氨酸二乙酯的合成將參考例19化合物(1.34g)加到亞硫酰氯(10ml)中后，進(jìn)而添加催化劑量的二甲基甲酰胺，在室溫下攪拌3小時。接著在減壓下濃縮干涸反應(yīng)液。將得到的固體物溶解在二氯甲烷(25ml)中，向此溶液中加入谷氨酸二乙酯鹽酸鹽(1.0g)的水溶液(25ml)和碳酸鉀(1.2g)，進(jìn)而使用碳酸鉀將反應(yīng)液的pH調(diào)到約10后，在室溫下激烈攪拌一夜。分離二氯甲烷層，依次用1N鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥。減壓下蒸出溶劑，得到目的產(chǎn)物(2.14g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)1.23(3H，t，J＝7Hz)，1.31(3H，t，J＝7Hz)，2.1-2.7(4H，m)，2.17(6H，s)，3.13(3H，s)，4.13(2H，q，J＝7Hz)，4.25(2H，q，J＝7Hz)，4.73(1H，m)，5.07(2H，s)，6.94(1H，d，J＝8Hz)，7.1-7.5(5H，m)，7.51(2H，s)參考例21N-[N′-甲基-(4-氨基-3，5-二甲基苯甲?；?-L-谷氨酸二乙酯的合成向參考例20的化合物(2.1g)的苯甲醚(2.4ml)溶液中加入30%溴化氫-醋酸(24ml)溶液，在室溫下攪拌3小時。接著向反應(yīng)液中加入約200ml的乙醚，沉淀出紅褐色的油狀物。除去大部分醚層，將油狀物懸浮在氯仿中，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌此懸浮液，分離有機(jī)層。有機(jī)層用硫酸鈉干燥后，減壓下蒸出溶劑，得到目的產(chǎn)物(1.2g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)1.21(3H，t，J＝7Hz)，1.29(3H，t，J＝7Hz)，2.0-2.8(4H，m)，2.29(6H，s)，2.87(3H，s)，3.11(1H，s)，4.11(2H，q，J＝7Hz)，4.23(2H，q，J＝7Hz)，4.83(1H，m)，6.83(1H，d，J＝8Hz)，7.43(2H，s)實(shí)施例10N-｛4-[N′-(2，4-二氨基-6-喋啶基)甲基-N′-甲氨基]-3，5-二甲基苯甲?；?L-谷氨酸二乙酯的合成將參考例21的化合物(1.2g)和6-溴甲基-2，4-二氨基蝶啶氫溴酸鹽異丙酮加合物(1.0g)，懸浮在二甲基乙酰胺(20ml)中，在60℃攪拌12小時。冷卻后，向反應(yīng)液中加入水，并攪拌，接著用氯仿萃取。用硫酸鈉干燥氯仿層后，減壓下蒸出溶劑，將得到的殘余物用硅膠柱色譜進(jìn)行分離，使用氯仿∶甲醇＝99∶1～95∶5的混合溶劑作為洗脫劑，得到目的產(chǎn)物(0.64g)。
1H-NMR(CDCl3，+CD3OD，δ值)1.25(3H，t，J＝7Hz)，1.32(3H，t，J＝7Hz)，2.0-2.7(4H，m)，2.42(6H，s)，2.82(3H，s)，4.18(2H，q，J＝7Hz)，4.28(2H，q，J＝7Hz)，4.42(2H，s)，4.78(1H，m)，7.53(2H，s)，8.89(1H，s)
實(shí)施例11N-｛4-[N′-(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基-N′-甲氨基]-3，5-二甲基苯甲?；?L-谷氨酸(化合物5)的合成將實(shí)施例10的化合物(0.59g)溶解在乙醇(40ml)和THF(20ml)的混合溶劑中，進(jìn)而加入1N氫氧化鈉水溶液(3.5ml)，在室溫下攪拌一夜。減壓下蒸出溶劑，得到的黃色固體物溶解在水(20ml)中，在冰冷卻下用1N鹽酸調(diào)節(jié)pH＝3.7，過濾出析出的沉淀物。依次用水、丙酮洗滌后，真空干燥，得到目的產(chǎn)物(0.47g)。
1H-NMR(DMSO-d6，δ值)1.8-2.2(2H，m)，2.3-2.5(2H，m)，2.34(6H，s)，2.73(3H，s)，4.3-4.5(1H，m)，4.36(2H，s)，6.66(2H，s)，7.55(2H，s)，8.40(1H，d，J＝6Hz)，8.74(1H，s)參考例224-甲氨基-3-三氟甲基苯甲酸的合成將4-氨基-3-三氟甲基苯甲酸(3.6g)懸浮在無水三氟醋酸(90ml)中，攪拌一夜。減壓下蒸出溶劑，得到的殘余物溶解在丙酮(30ml)中。向此溶液中加入甲基碘(9.9g)，加熱到45℃，一邊激烈攪拌，一邊慢慢地加入粉末狀的氫氧化鉀(6.8g)。在此溫度下再連續(xù)攪拌1小時后，在減壓下蒸出溶劑。得到的殘余物溶解在水(50ml)中，加熱回流2小時。在冰冷卻下，使用1N鹽酸調(diào)節(jié)pH＝3.5。過濾取出白色沉淀物，用少量的水洗滌后，真空干燥，得到目的產(chǎn)物(2.2g)。
1H-NMR(CDCl3∶CD3OD＝1∶1，δ值)2.95(3H，s)，6.74(1H，d，J＝9.0Hz)，7.96-8.12(2H，m)參考例234-甲氨基-3-三氟甲基苯甲酸甲酯的合成在冰冷卻下，將鹽酸氣體吹入到參考例22的化合物(2.2g)的甲醇溶液(25ml)中，在室溫下連續(xù)攪拌4小時。減壓下蒸出溶劑，得到的殘余物溶解在醋酸乙酯中，用飽和碳酸氫鈉的水溶液洗滌此溶液，用無水硫酸鎂干燥后，減壓下蒸出溶劑。將得到的殘余物用硅膠柱色譜進(jìn)行分離，使用醋酸乙酯∶正己烷＝1∶3作為洗脫劑，得到目的產(chǎn)物(1.3g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)2.91(3H，s)，3.83(3H;g)，4.63(1H，bs)，6.65(1H，d，J＝9.0Hz)，7.92-8.99(2H，m)參考例244-[N-(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基-N-甲基]氨基-3-三氟甲基苯甲酸的合成向參考例23的化合物(1.3g)的六甲基磷酸三酰胺溶液(20ml)加，在冰冷卻和氮?dú)夥障录尤霘浠c(0.26g)，攪拌30分鐘。向此反應(yīng)液中，加入6-溴甲基-2，4-二氨基蝶啶氫溴酸鹽1/3異丙醇加合物(2.8g)后，攪拌30分鐘，進(jìn)而，在70℃下攪拌6小時，在室溫下攪拌2天。將反應(yīng)液加入稀鹽酸中，用飽和碳酸氫鈉水溶液中和，過濾出得到的褐色固體沉淀物。真空干燥后，懸浮在氯仿∶甲醇＝1∶1的混合溶劑中，加入回流1小時。過濾出不溶物，在減壓下濃縮干涸溶液。得到的殘余物溶解在甲醇(50ml)中，加入1N氫氧化鈉水溶液(20ml)，在60℃下攪拌1小時。減壓下蒸出甲醇后，過濾出不溶物。冰冷卻下，用1N鹽酸調(diào)節(jié)pH＝4。過濾出橙色沉淀物，真空干燥后，用硅膠色譜柱進(jìn)行分離，使用醋酸乙酯作為洗脫溶劑，接著使用氯仿∶甲醇∶28%氨水＝5∶4∶1洗脫溶劑。在減壓下濃縮干涸目的流份，將得到的殘余物溶解在水中。冰冷卻下，用1N鹽酸調(diào)節(jié)pH＝4后，過濾出黃色沉淀物，真空干燥，提到目的產(chǎn)物(102mg)。
1H-NMR(DMSO-d6∶CDCl3＝7∶1，δ值)2.79(3H，s)，4.42(2H，s)，7.61(1H，d，J＝8.3Hz)，8.11-8.17(2H，m)，3.69(1H，s)實(shí)施例12N-｛4-[N′-(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基-N′-甲基]氨基-3-三氟甲基苯甲?；?L-2-氨基己二酸的合成(L-2-｛4-[N′-(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基-N′-甲基]氨基-3-三氟甲基苯甲?；被憾岬暮铣?在冰冷卻和氮?dú)夥障?，將羥基苯并三唑(36mg)、二環(huán)己基碳化二亞胺(55mg)加到參考例24的化合物(88mg)的六甲基磷酸三酰胺溶液(2ml)中，攪拌30分鐘。接著，加入L-2-氨基己二酸二甲酯鹽酸鹽(63mg)、N-甲基嗎啉(34mg)后，慢慢升到室溫，攪拌2天。將反應(yīng)液用硅膠柱色譜進(jìn)行分離，使用氯仿作為洗脫溶劑，接著使用氯仿∶甲醇＝19∶1作為洗脫溶劑。在減壓下濃縮干涸目的級份，并溶解在甲醇(2ml)中。在冰冷卻和氮?dú)夥障?，加?N氫氧化鈉水溶液(0.4ml)，攪拌5小時。減壓下蒸出溶劑，得到的殘余物溶解在水中。過濾出不溶物后，使用1N鹽酸調(diào)節(jié)pH＝3.5。過濾出黃色沉淀物，用少量水洗滌后，真空干燥。將此粗生成物加在分離用薄層色譜(硅膠)上，使用氯仿∶甲醇∶28%氨水＝5∶4∶1作為展開溶劑進(jìn)行分離。在減壓下濃縮干涸洗脫液后，溶解在碳酸氫鈉水溶液中，過濾出不溶物后，使用1N鹽酸調(diào)節(jié)pH＝3.5。過濾出淡黃色沉淀物，真空干燥后，得到目的產(chǎn)物(18mg)。
1H-NMR(DMSO-d6∶CDCl3＝7∶1，δ值)1.53-1.93(4H，m)，2.25(2H，t，J＝7.3Hz)，2.75(3H，s)，4.34-4.45(3H，m)，6.91(2H，bs)，7.63-7.67(2H，m)，7.95(1H，bs)，8.16(1H，d，J＝8.3Hz)，8.22(1H，s)，8.72(1H，s)，8.79(1H，d，J＝7.8Hz)
參考例251-乙?；?7-甲基吲哚滿的合成將7-甲基吲哚滿(10.2g)的醋酸酐(25ml)溶液回流30分鐘。反應(yīng)液被冷卻后，置于冰水(250ml)中，吸濾析出的結(jié)晶，加熱真空干燥，得到目的產(chǎn)物(11.7g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)2.24(3H，s)，2.25(3H，s)，2.99(2H，t，J＝7Hz)，4.06(2H，t，J＝7Hz)，7.01(2H，s)參考例265-溴-1-乙?；?7-甲基吲哚滿的合成在室溫下，向參考例25的化合物(11.5g)的醋酸(70ml)溶液中，滴入溴水(3.1ml)，并攪拌1小時。將反應(yīng)液置于冰水(600ml)中，加入Na2S2O3進(jìn)行脫色。吸濾析出物，溶解在熱甲醇中，再結(jié)晶，得到目的產(chǎn)物(10.8g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)2.24(6H，s)，2.98(2H，t，J＝7Hz)，4.06(2H，t，J＝7Hz)，7.14(2H，s)參考例275-氰基-1-乙酰基-7-甲基吲哚滿的合成在氮?dú)夥障?，將參考?6的化合物(10.8g)和氰化銅(5.5g)的N-甲基吡咯烷二酮(50ml)懸浮液，在約200℃下加熱4小時，冷卻后，將反應(yīng)液加入冷卻氨水(100ml)中，吸濾析出物。用氨水洗滌析出物直至蘭色消失為止后，溶解在熱氯仿(50ml)中，吸濾后用水、1N氫氧化鈉水溶液洗滌濾液，用硫酸鎂干燥后，濃縮，得到粗結(jié)晶。用乙腈使其重結(jié)晶，得到目的產(chǎn)物(4.9g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)2.24(3H，s)，2.27(3H，s)，3.05(2H，t，J＝7Hz)，4.08(2H，t，J＝7Hz)，7.30(2H，s)參考例287-甲基吲哚滿-5-羧酸的合成將參考例27的化合物(4.9g)和濃鹽酸(60ml)的混合物回流3小時，冷卻后置于冰水中，使用氫氧化鈉水溶液將pH值調(diào)節(jié)到大于12，進(jìn)行吸濾。在冷卻下用鹽酸調(diào)節(jié)濾液至pH約4，過濾出析出物，水洗、加熱真空干燥后，得到目的產(chǎn)物(3.4g)。
1H-NMR(DMSO-d6，δ值)2.05(3H，s)，2.96(2H，t，J＝8Hz)，3.54(2H，t，J＝8Hz)，7.42(2H，s)，11.83(1H，br s)參考例29N-芐氧羰基-7-甲基吲哚滿-5-羧酸的合成在氮?dú)夥障?，向氫氧化鈉(0.84g)的水溶液中加入?yún)⒖祭?8的化合物(3.3g)，加入乙醚(60ml)，用冰冷卻。接著，同時向其中滴入氫氧化鈉(3.3g)的水溶液(15ml)和芐氧羰基氯(6.8ml)的乙醚溶液后，在室溫下攪拌4小時。分離乙醚層，用乙醚洗滌水層，冰冷卻下用3N鹽酸調(diào)節(jié)pH為1～2。吸濾析出的結(jié)晶，水洗后，加熱干燥，得到目的產(chǎn)物(5.3g)。
1H-NMR(DMSO-d6，δ值)2.22(3H，s)，3.02(2H，t，J＝7Hz)，4.10(2H，t，J＝7Hz)，5.16(2H，s)，7.32(5H，s)，7.55(2H，s)參考例30N-(1-芐氧羰基-7-甲基吲哚滿-5-羰基)-L-α-氨基己二酸二甲酯的合成向參考例29的化合物(2.6g)中加入亞硫酰氯(15ml)使之成為懸浮液，進(jìn)而向此懸浮液中加入催化劑量的二甲基甲酰胺，在室溫下攪拌2小時。接著在減壓下使反應(yīng)液濃縮干涸。將得到的固體物溶解在二氯甲烷(50ml)中，向此溶液中加入L-α-氨基己二酸二甲酯鹽酸鹽(2.4)的水溶液(50ml)和碳酸鉀(2.3g)，進(jìn)而使用碳酸鉀將反應(yīng)液的pH值調(diào)節(jié)到10后，在室溫下，激烈攪拌一夜。分離二氯甲烷層，依次用1N鹽酸、飽和碳酸氫鈉溶液、飽和食鹽水洗滌，，用硫酸鈉干燥。減壓下蒸出溶劑，得到目的產(chǎn)物(4.2g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)1.5-2.1(4H，m)，2.2-2.6(2H，m)，2.29(3H，s)，3.00(2H，t，J＝7Hz)，3.64(3H，s)，3.76(3H，s)，4.14(2H，t，J＝7Hz)，4.5-5.0(1H，m)，5.18(2H，s)，6.67(1H，d，J＝8Hz)，7.32(5H，s)，7.44(2H，s)參考例31N-(7-甲基吲哚滿-5-羰基)-L-α-氨基己二酸二甲酯的合成向參考例30的化合物(4.2g)的苯甲醚(4.2ml)溶液中加入30%溴化氫-醋酸(42ml)溶液，在室溫下，攪拌4小時。接著向反應(yīng)液中加入約400ml的乙醚，沉淀出紅褐色的油狀沉淀物。除去大部分乙醚層，將油狀物懸浮在氯仿中，用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌此懸浮液，用氯仿萃取此懸浮液。用硫酸鈉干燥氯仿層，減壓下蒸出溶劑，得到目的產(chǎn)物(2.6g)。
1H-NMR(CD3OD，δ值)1.5-2.1(4H，m)，2.15(3H，s)，2.38(2H，t，J＝7Hz)，3.05(2H，t，J＝7Hz)，3.60(2H，t，J＝7Hz)，3.66(3H，s)，3.73(3H，s)，4.3-4.8(1H，m)，7.46(2H，s)實(shí)施例13N-｛1-[(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]-7-甲基吲哚滿-5-羰基｝-L-α-氨基己二酸二甲酯的合成將參考例31的化合物(2.6g)和6-溴甲基-2，4-二氨基喋啶氫溴酸鹽異丙醇加合物(3.0g)懸浮在二甲基乙酰胺(20ml)中，在60℃下攪拌12小時。冷卻后，向反應(yīng)液中加入水，攪拌，用碳酸氫鈉調(diào)節(jié)pH～8，過濾出不溶物。收集氯仿層，用硫酸鈉干燥后，減壓下蒸出溶劑，將得到的殘余物用硅膠柱色譜進(jìn)行分離，使用氯仿∶甲醇＝99∶1～95∶5的混合溶劑作為洗脫溶劑，得到目的產(chǎn)物(2.6g)。
1H-NMR(CDCl3+CD3OD，δ值)1.5-2.2(4H，m)，2.3-2.7(2H，m)，2.40(3H，s)，2.8-3.9(4H，m)，3.69(3H，s)，3.78(3H，s)，4.6-5.1(1H，m)，4.77(2H，s)，7.46(2H，s)，8.75(1H，s)實(shí)施例14N-｛1-[(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]-7-甲基吲哚滿-5-羰基｝-L-α-氨基己二酸的合成將實(shí)施例13的化合物(2.6g)溶解在乙醇(400ml)和四氫呋喃(500ml)的混合溶劑中，進(jìn)而加入1N氫氧化鈉水溶液(15ml)，在35℃下攪拌3小時，在室溫下攪拌一夜。減壓下蒸出溶劑，將得到的黃色固體物溶解在水(50ml)中，用活性炭處理，用硅藻土過濾。在冰冷卻下用1N鹽酸調(diào)節(jié)pH＝2，過濾出析出的沉淀物。水洗，丙酮洗滌后，真空下干燥，得到目的產(chǎn)物(1.4g)。
1H-NMR(DMSO-d6，δ值)1.4-2.0(4H，m)，2.23(2H，t，J＝7Hz)，2.34(3H，s)，2.97(2H，t，J＝8Hz)，3.56(2H，t，J＝8Hz)，4.32(1H，m)，4.72(2H，s)，6.87(2H，s)，7.44(1H，s)，7.49(1H，s)，8.14(1H，d，J＝8Hz)，8.72(1H，s)實(shí)施例15N-｛1-[(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]吲哚-5-羰基｝-L-α-氨基己二酸的合成制法1在冰冷卻下，向N-｛1-[(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]吲哚滿-5-羰基｝-L-α-氨基己二酸(11.0mg)的5%碳酸氫鈉水溶液(1.0ml)中滴加含有亞硝基二磺酸鉀(弗雷米鹽)(51.2mg)水溶液(1.0ml)，在室溫下，攪拌5小時，接著，向反應(yīng)液中加入5%碳酸氫鈉水溶液(1.0ml)后，放在高速液相色譜上。使用YMC paek A-322 ODS型柱，另外使用甲醇∶0.1M甲酸鈉緩沖液(pH4.5)＝25∶75的混合物作為洗脫溶劑，在流速2.5ml/min，柱溫度室溫，檢測波長303nm、注入容量200μl的條件下，分離出目的產(chǎn)物(3.9mg)1H-NMR(DMSO-d6，δ值)1.58(2H，m)，1.74(1H，m)，1.83(1H，m)，2.21(2H，t，J＝7.8Hz)，4.18(1H，m)，5.57(2H，s)，6.62(1H，m)，7.6-7.8(3H，m)，8.12(1H，s)，8.17(1H，d，J＝6.0Hz)，8.57(1H，s)
制法2向N-｛1-[(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]吲哚滿-5-羰基｝-L-α-氨基己二酸(20mg)的二噁烷懸浮液(20ml)中加入二氯二氰基苯醌(18mg)，在80℃攪拌3小時。減壓下蒸出溶劑后，向殘余物中加入5%碳酸氫鈉水溶液(5.0ml)，接著，在與制法1相同條件下，在高速液相色譜上，分離出目的產(chǎn)物(7.7mg)。
制法3向醋酸錳(Ⅲ)(15mg)的醋酸溶液(10ml)中滴加N-｛1-[(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]吲哚滿-5-羰基｝-L-α-氨基己二酸(20mg)的醋酸溶液(10ml)，在80℃下攪拌1小時。減壓下蒸出醋酸后，向殘余物中加入5%碳酸氫鈉水溶液(7.0ml)，接著在與制法1相同的條件下，在高速液相色譜上分離出目的產(chǎn)物(7.9mg)。
實(shí)施例16N-｛1-[(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]吲哚-5-羰基｝-L-高半胱氨酸銨鹽的合成使用N-｛1-[(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]吲哚滿-5-羰基｝-L-高半胱氨酸銨鹽(10.0mg)代替N-｛1-[(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]吲哚滿-5-羰基｝-L-α-氨基己二酸，進(jìn)行與實(shí)施例15的制法相同的操作，得到目的產(chǎn)物(4.4mg)。
1H-NMR(DMSO-d6，δ值)2.0-2.2(2H，m)，2.56(2H，t，J＝7.3Hz)，4.36(1H，m)，5.56(2H，s)，6.61(1H，m)，7.6-7.8(3H，m)，8.17(1H，s)，8.58(1H，s)，8.82(1H，m)實(shí)施例17N-｛1-[(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]吲哚-5-羰基｝-L-谷氨酸(化合物6)的合成使用N-｛1-[(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]吲哚滿-5-羰基｝-L-谷氨酸(20.0mg)代替N-｛1-[(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]吲哚滿-5-羰基｝-L-氨基己二酸進(jìn)行與實(shí)施例15的制法相同的操作得到目的產(chǎn)物(8.1mg)。
1H-NMR(DMSO-d6，δ值)1.9-2.0(2H，m)，2.2-2.5(2H，m)，4.38(1H，m)，5.57(2H，s)，6.62(1H，m)，7.6-7.8(3H，m)，8.14(1H，s)，8.25(1H，m)，8.56(1H，s)實(shí)施例18N-｛1-[(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]-7-甲基-吲哚-5-羰基｝-L-氨基己二酸的合成使用N-｛1-[(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]-7-甲基-吲哚滿-5-羰基｝-L-氨基己二酸(20mg)，進(jìn)行與實(shí)施例15制法相同的操作得到目的產(chǎn)物(8.4mg)。
1H-NMR(DMSO-d6，δ值)1.5-1.9(4H，m)，2.17(2H，m)，2.62(3H，s)，4.05(1H，m)，5.78(2H，s)，6.66(1H，d，J＝3.4Hz)，7.33(1H，s)，7.59(1H，d，J＝3.4Hz)，7.89(1H，m)，7.92(1H，s)，8.44(1H，s)參考例32N-(4-硝基-3-甲基苯甲?；?-L-谷氨酸二乙酯的合成將4-硝基-3-甲基苯甲酸(10g)懸浮在亞硫酰氯(30ml)中后，添加催化劑量的二甲基甲酰胺，回流2小時。冷卻后，在減壓下干涸反應(yīng)液。得到的固體物溶解在二氯甲烷(250ml)中，向此溶液中加入L-谷氨酸二乙酯鹽酸鹽(13.4g)、碳酸鉀(30g)，進(jìn)而加入水(250ml)。在室溫下激烈攪拌12小時。將反應(yīng)液加入水中使用氯仿萃取，用1N鹽酸洗滌后，用硫酸鈉干燥，減壓下蒸出溶劑。得到的殘余物用硅膠柱色譜進(jìn)行分離，使用氯仿∶甲醇＝100∶1作為洗脫溶劑，得到目的產(chǎn)物(10.0g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)1.2-1.4(6H，m)，2.0-2.4(2H，m)，2.4-2.6(2H，m)，2.62(3H，s)，4.14(2H，q，J＝7.3Hz)，4.25(2H，q，J＝7.2Hz)，4.76(1H，m)，7.44(1H，d，J＝7.3Hz)，7.76(1H，m)，7.81(1H，s)，7.98(1H，d，J＝8.3Hz)參考例33N-(4-氨基-3-甲基苯甲?；?-L-谷氨酸二乙酯的合成將參考例32的化合物(10.0g)溶解在醋酸(160ml)中，冰冷卻下慢慢加入鋅粉末(18g)。在室溫下攪拌2小時后，進(jìn)行過濾，減壓下濃縮濾液。將得到的濃縮液溶解在氯仿(200ml)中，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。用硫酸鈉干燥有機(jī)層，減壓下蒸出溶劑，得到目的產(chǎn)物(7.8g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)1.1-1.4(6H，m)，2.0-2.5(4H，m)，2.15(3H，s)，4.0-4.3(4H，m)，4.77(1H，m)，6.62(1H，d，J＝8.3Hz)，6.81(1H，d，J＝7.3Hz)，7.4-7.6(2H，m)實(shí)施例19N-｛4-[N′-(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲氨基]-3-甲基｝苯甲酰基-L-谷氨酸二乙酯的合成將參考例33的化合物(1.9g)和6-溴甲基-2，4-二氨基蝶啶氫溴酸鹽異丙醇加合物(1.0g)懸浮在二甲基乙酰胺(16ml)中，在55-60℃下攪拌5小時。冷卻后，將反應(yīng)液加入飽和碳酸氫鈉水溶液中，用氯仿∶甲醇＝1∶1的混合溶劑萃取。用硫酸鈉干燥有機(jī)層后，減壓下蒸出溶劑。得到的殘余物用硅膠色譜進(jìn)行分離，使用氯仿∶甲醇＝10∶1的混合溶劑作為洗脫溶劑，得到目的產(chǎn)物(580mg)。
1H-NMR(CDCl3+CD3OD，δ值)1.2-1.4(6H，m)，2.0-2.5(4H，m)，2.30(3H，s)，4.0-4.3(4H，m)，4.67(3H，m)，6.61(1H，d，J＝7.8Hz)，7.58(3H，m)，8.75(1H，s)實(shí)施例20N-｛4-[N′-(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲氨基]-3-甲基｝苯甲?；?L-谷氨酸(化合物7)的合成向?qū)嵤├?9的化合物(580mg)的乙醇(40ml)懸浮液中加入1N氫氧化鈉水溶液(3.5ml)，在35℃攪拌4小時。進(jìn)而，在25℃攪拌20小時后，向反應(yīng)液中加入水(5ml)，減壓下干涸。此時外部溫度不要超過30℃。將得到的黃色固體物溶解在水(10ml)中，用1N鹽酸調(diào)節(jié)pH＝3.7，在冰箱中放置2小時。用離心分離法(2000rpm，15分鐘)沉淀出析出物，除去上清液。此操作進(jìn)行5次，干燥得到的沉淀物，得到目的產(chǎn)物(331mg)。
1H-NMR(DMSO-d6，δ值)1.9-2.4(4H，m)，2.25(3H，s)，4.39(1H，m)，4.60(2H，d，J＝4.9Hz)，6.18(1H，m)，6.56(1H，d，J＝8.3Hz)，7.58(2H，m)，8.08(1H，d，J＝7.8Hz)，8.71(1H，s)
參考例34N-(3-甲基-4-硝基苯甲酰基)-L-2-氨基己二酸二甲酯的合成將3-甲基-4-硝基苯甲酸(3.4g)懸浮在亞硫酰氯(20ml)中后，添加催化劑量的二甲基甲酰胺，回流2小時。冷卻后，減壓下干涸反應(yīng)液。將得到的固體物溶解在二氯甲烷(80ml)中，向此溶液中加入L-2-氨基己二酸二甲酯鹽酸鹽(4.2g)、碳酸鉀(10g)，進(jìn)而加入水(80ml)，在室溫下激烈攪拌12小時。反應(yīng)液置于水中，用氯仿萃取，用1N鹽酸洗滌后，用硫酸鈉干燥。減壓下蒸出溶劑，將得到的殘余物用硅膠柱色譜進(jìn)行分離，使用氯仿∶甲醇＝100∶1作為洗脫溶劑，得到目的產(chǎn)物(6.0g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)1.6-2.4(4H，m)，2.39(2H，m)，2.62(3H，s)，3.68(3H，s)，3.80(3H，s)，4.79(1H，m)，7.13(1H，m)，7.79(2H，m)，7.98(1H，d，J＝8.3Hz)參考35N-(4-氨基-3-甲基苯甲酰基)-L-2-氨基己二酸二甲酯的合成將參考例34的化合物(5.9g)溶解在醋酸(100ml)中，在冰冷卻下，慢慢加入鋅粉末(11g)。在室溫下攪拌2小時后，進(jìn)行過濾，減壓下濃縮濾液。將得到的濃縮液溶解在氯仿(100ml)中，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。有機(jī)層用硫酸鈉干燥，減壓下蒸出溶劑，得到目的產(chǎn)物(7.8g)。
1H-NMR(CDCl3，δ值)1.6-2.1(4H，m)，2.19(3H，s)，2.36(2H，m)，3.66(3H，s)，3.77(3H，s)，4.79(1H，m)，6.63(2H，m)，7.55(2H，m)實(shí)施例21N-｛4-[N′-(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲氨基]-3-甲基｝苯甲?；?L-2-氨基己二酸二甲酯的合成將參考例35的化合物(2.73g)和6-溴甲基-2，4-二氨基蝶啶氫溴酸異丙醇加合物(1.51g)懸浮在二甲基乙酰胺(25ml)中，在55-60℃下攪拌5小時。冷卻后，反應(yīng)液加入飽和碳酸氫鈉水溶液中，用氯仿∶甲醇＝1∶1的混合溶劑萃取。用硫酸鈉干燥有機(jī)層后，減壓下蒸出溶劑。得到的殘余物用硅膠柱色譜進(jìn)行分離，使用氯仿∶甲醇＝10∶1的混合溶劑作為洗脫溶劑得到目的產(chǎn)物(760mg)。
1H-NMR(CDCl3+CD3OD，δ值)1.6-2.0(4H，m)，2.29(3H，s)，2.39(2H，m)，3.68(3H，s)，3.77(3H，s)，4.65(2H，s)，4.74(1H，m)，6.62(1H，d，J＝9.3Hz)，7.18(1H，d，J＝7.3Hz)，7.60(2H，m)，8.77(1H，s)
實(shí)施例22N-｛4-[N′-(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲氨基]-3-甲基｝苯甲?；?L-2-氨基己二酸的合成向?qū)嵤├?1的化合物(760mg)的甲醇(100ml)的懸浮液中，加入1N氫氧化鈉水溶液(4.6ml)，在35℃下攪拌4小時。進(jìn)而在25℃下攪拌20小時后，向反應(yīng)液中加入水(10ml)，減壓下干涸。此時，外部溫度不要超過30℃。將得到的黃色固體物溶解在水(20ml)中，用1N鹽酸調(diào)節(jié)pH＝3.7，在冰箱中放置2小時。用離心分離法(2000rpm，15分鐘)沉淀出析出物。進(jìn)行5次這樣的操作，干燥得到的沉淀物，得到目的產(chǎn)物(400mg)。
1H-NMR(DMSO-d6，δ值)1.5-1.9(4H，m)，2.24(5H，m)，4.34(1H，m)，4.58(2H，m)，6.21(1H，m)，6.56(1H，d，J＝8.8Hz)，7.59(2H，m)，8.05(1H，d，J＝7.3Hz)，8.70(1H，s)本發(fā)明的氨甲蝶呤衍生物與公知的化合物相比顯示了很優(yōu)良的抑制淋巴細(xì)胞的增殖作用，作為抗風(fēng)濕的治療藥是極其有用的。
權(quán)利要求
1.通式(1)表示的下列化合物，
[式中W表示下面通式的基
(式中R1表示碳數(shù)為1～4的低級烷基、R2表示碳數(shù)1～4的低級烷基或三氟甲基、R3表示氫原子、碳數(shù)1～4的低級烷基或三氟甲基、R4表示氫原子或碳數(shù)1～4的低級烷基、R5表示式為COOR5基(R5表示氫原子或碳數(shù)1～4的低級烷基)或式SO3H基，n為1～4的整數(shù))、W表示下面通式的基
(式中R7表示碳數(shù)1～4的低級烷基、R8表示氫原子或碳數(shù)1～4的低級烷基、R9表示式COOR10基(R10表示氫原子或碳數(shù)1～4的低級烷基)或式SO3H基、m為1～4的整數(shù))、W表示下面通式的基
(式中R11表示氫原子或碳數(shù)1～4的低級烷基、R12表示氫原子或碳數(shù)1～4的低級烷基、R13表示式COOR14基(其中R14表示氫原子或碳數(shù)1～4的低級烷基)或式SO3H基、1為1～4的整數(shù))，或W還可表示下面通式的基
(式中R15表示氫原子或碳數(shù)1～4的低級烷基、R16表示氫原子或碳數(shù)1～4的低級烷基)]。
2.一種抗風(fēng)濕劑，其中含有以下通式(Ⅱ)的化合物作為有效成分
[式中，W表示下面通式的基
(式中R1表示碳數(shù)為1～4的低級烷基、R2表示碳數(shù)1～4的低級烷基或三氟甲基、R3表示氫原子、碳數(shù)1～4的低級烷基或三氟甲基、R4表示氫原子或碳數(shù)1～4的低級烷基、R5表示為式COOR6基(R6表示氫原子或碳數(shù)1～4的低級烷基)或式SO3H基，n為1～4的整數(shù))、W表示下面通式的基
(式中R7表示碳數(shù)1～4的低級烷基、R8表示氫原子或碳數(shù)1～4的低級烷基、R9表示式COOR10基(其中R10表示氫原子或碳數(shù)1～4的低級烷基)或式SO3H基、m為1～4的整數(shù))、W表示下面通式的基
(式中R11表示氫原子或碳數(shù)1～4的低級烷基、R12表示氫原子或碳數(shù)1～4的低級烷基、R13表示式COOR14基(R14表示氫原子或碳數(shù)1～4的低級烷基)或式SO3H基、1為1～4的整數(shù))，或W還可表示下面通式的基
(式中R15表示氫原子或碳數(shù)1～4的低級烷基、R16表示氫原子或碳數(shù)1～4的低級烷基、K為2或3的整數(shù)。)]。
全文摘要
一種抗風(fēng)濕劑，其中含有以上式通式II表示的化合物作為有效成分。
文檔編號C07D475/08GK1077956SQ9310205
公開日1993年11月3日 申請日期1993年1月26日 優(yōu)先權(quán)日1992年1月27日
發(fā)明者松岡宏治, 鈴木裕史, 加藤伸明, 辻敬一郎, 黑木俊夫, 丸山典昭, 中込和巴 申請人:中外制藥株式會社