專利名稱：基于蝶呤的炎性病癥療法的制作方法
基于蝶呤的炎性病癥療法交叉參考本申請(qǐng)要求2008年1月18日提交的美國(guó)專利臨時(shí)申請(qǐng)?zhí)?1/022，156的權(quán)益，其 通過(guò)引用而整體結(jié)合到本文中。發(fā)明概述對(duì)各種形式的蝶呤鈣有效性的體內(nèi)研究顯示，具有與(1 4mol mol)蝶呤鈣 [CaPterin]、(1 2mol mol)蝶呤鈣、二蝶呤基(dipterinyl)鈣五水合物(DCP)有關(guān)的顯 著抗腫瘤活性，且意料之外地顯示，氯化鈣二水合物溶液在MDA-MB-231異種移植裸小鼠中 有效。對(duì)9種血漿細(xì)胞因子和吲哚胺2，3-雙加氧酶(IDO)代謝物水平進(jìn)行逐步回歸分析， 發(fā)現(xiàn)與給予(1 4mol mol)蝶呤鈣相關(guān)的4種作用1)減少的IL_6，2)增加的IL-10， 3)減少的IFN-Y，和4)增加的犬尿氨酸。結(jié)論(1 4mol mol)蝶呤鈣[CaPterin]在 MDA-MB-231異種移植的裸小鼠中發(fā)揮顯著(按照Spearman等級(jí)相關(guān))劑量-反應(yīng)抗腫瘤 活性，且在某些血漿因子水平上維持炎性和抗炎變化。在由經(jīng)口給予具有MDA-MB-231異種移植腫瘤的裸小鼠抗腫瘤藥物 (1 4mol mol)蝶呤鈣(CaPterin)導(dǎo)致的細(xì)胞因子變化分析中，測(cè)得該形式的蝶呤鈣使 血漿IL-10增加、血漿IL-6減少和血漿IFN- γ減少(Moheno等，在出版中)。對(duì)前述第2個(gè) 實(shí)驗(yàn)中類似異種移植的裸小鼠的血漿細(xì)胞因子進(jìn)行分析(Moheno等，在出版中)。測(cè)量的細(xì) 胞因子包括:IL-1 β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-10、IL-12、IFN-γ、TNF-a ,IL-6 和 TGF-β 1。由 該數(shù)據(jù)分析中的主要發(fā)現(xiàn)是，DCP誘發(fā)與衍生的DCP抗腫瘤血漿細(xì)胞因子模式(DCP/APCP) 相關(guān)的顯著二次方程(quadratic)抗腫瘤響應(yīng)，該模式在40_46mg/(kg日)DCP劑量范圍內(nèi) 最佳。在給予DCP的上下文中，DCP/APCP顯示隨著相對(duì)腫瘤體積縮小，IL-12增加、IL-6減 少和IL-4增加。減少的血漿IL-6與DCP抗腫瘤效力相關(guān)的發(fā)現(xiàn)符合前期關(guān)于CaPterin 對(duì)血漿細(xì)胞因子作用的發(fā)現(xiàn)。DCP是新出現(xiàn)的有希望的新的細(xì)胞因子介導(dǎo)的抗腫瘤藥物。DCP還具有用于治療乙型肝炎感染療法的實(shí)用性。DCP誘導(dǎo)雌性HBV小鼠Log肝 臟HBV DNA(PCR)劑量-反應(yīng)顯著下降。在雄性小鼠中，DCP還使HBe抗原(ELISA)增加。 但是，除給予23. Omg/(kg日)色氨酸(Trp)的雄性HBV小鼠外，DCP不影響IDO代謝物、色 氨酸(Trp)和犬尿氨酸(Kyn)的血清濃度以及Kyn/Trp比率。然而，與雄性小鼠相比，雌性 小鼠中這3個(gè)IDO相關(guān)測(cè)定值寬范圍的升高。在雄性HBV小鼠中，2. 3mg/(kg日)DCP使趨 化因子RANTES血清濃度下降。在雌性小鼠中，7. 3mg/(kg日)DCP使血清細(xì)胞因子、IL-4、 IL-9 和 IL-12 升高?；贒CP對(duì)病毒復(fù)制的性別特異性抑制，和升高的IDO代謝物與獨(dú)立于DCP治療 的雌性HBV小鼠中減少的病毒參數(shù)相關(guān)性，有建議提出，通過(guò)IDO或TDO (色氨酸2，3-雙加 氧酶)途徑的免疫調(diào)節(jié)涉及轉(zhuǎn)基因小鼠中HBV表達(dá)的調(diào)節(jié)和DCP的抗HBV機(jī)制。在一個(gè)實(shí)施方案中，為治療癌癥的方法，該方法包括給予含蝶呤鈣的組合物。在另 一個(gè)實(shí)施方案中，為其中蝶呤鈣具有1 4/鈣蝶呤化學(xué)計(jì)量比(StoiChiometry)的方 法。在另一個(gè)實(shí)施方案中，為其中蝶呤鈣具有1 2/鈣蝶呤化學(xué)計(jì)量比的方法。在另一 個(gè)實(shí)施方案中，為其中所述蝶呤鈣為二蝶呤基鈣五水合物(DCP)的方法。
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在另一個(gè)實(shí)施方案中，為其中給予組合物導(dǎo)致下降的IL-6水平的方法。在另一個(gè) 實(shí)施方案中，為其中給予組合物導(dǎo)致增加的IL-10水平的方法。在另一個(gè)實(shí)施方案中，為其 中給予組合物導(dǎo)致下降的IFN-γ水平的方法。在另一個(gè)實(shí)施方案中，為其中給予組合物導(dǎo) 致增加的犬尿氨酸水平的方法。在另一個(gè)實(shí)施方案中，為其中給予組合物導(dǎo)致增加的IL-12 水平的方法。在另一個(gè)實(shí)施方案中，為其中給予組合物導(dǎo)致下降的IL-6水平的方法。在另 一個(gè)實(shí)施方案中，為其中給予組合物導(dǎo)致增加的IL-4水平的方法。在另一個(gè)實(shí)施方案中， 為其中給予組合物導(dǎo)致吲哚胺2，3-雙加氧酶抑制的方法。在另一個(gè)實(shí)施方案中，為方法，其中通過(guò)口服、腸胃外、靜脈內(nèi)、皮下、鞘內(nèi)、肌內(nèi)、 口頰、鼻內(nèi)、硬膜外、舌下、肺、局部、直腸或透皮給藥給予組合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，為方法，該方法還包括選自一種或多種以下方法的其它療 法放療、化療、高劑量化療加干細(xì)胞移植、激素療法和單克隆抗體療法。在另一個(gè)實(shí)施方案中，為方法，其中所述癌癥選自口腔癌、前列腺癌、直腸癌、非小 細(xì)胞肺癌、唇和口腔癌、肝癌、肺癌、肛門(mén)癌、腎癌、外陰癌、乳腺癌、口咽癌、鼻腔和鼻旁竇 癌、鼻咽癌、尿道癌、小腸癌、膽管癌、膀胱癌、卵巢癌、喉癌、下咽癌、膽囊癌、結(jié)腸癌、結(jié)腸直 腸癌、頭頸癌、甲狀旁腺癌、陰莖癌、陰道癌、甲狀腺癌、胰腺癌、食管癌、霍奇金淋巴瘤、白血 病相關(guān)疾病、蕈樣肉芽腫和骨髓增生異常綜合征。在另一個(gè)實(shí)施方案中，為調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的方法，該方法包括給予含蝶呤鈣的組合 物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，為治療炎性疾病或病癥(inflammatory-based disease or disorder)的方法，該方法包括給予含蝶呤鈣的組合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，為方法，其中 所述炎性疾病或病癥選自傳染病、神經(jīng)變性疾病、多發(fā)性硬化、HIV相關(guān)癡呆癥、AIDS癡呆 癥、早老性癡呆、中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥、肥胖癥、癡呆癥(各種形式)、冠心病、糖尿病(1型和 2型)、動(dòng)脈粥樣硬化、慢性炎性疾病、孤獨(dú)癥、新生兒發(fā)病多系統(tǒng)炎性疾病(又稱為N0MID、 慢性神經(jīng)性皮膚和關(guān)節(jié)綜合征或CINCA)、帕金森病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、腱炎、粘液 囊炎、炎性肺病、銀屑病、慢性阻塞性肺病、紅斑狼瘡、器官炎癥(例如心肌炎、哮喘、腎炎、 結(jié)腸炎)、炎性腸病(IBD)、自身免疫疾病、炎性腸綜合征(IBS)、節(jié)段性回腸炎、慢性潰瘍性 結(jié)腸炎、移植排斥、濃毒癥、彌漫性血管內(nèi)凝血(DIC)、敗血病性休克、銀屑病、肺氣腫和局部 缺血-再灌注損傷。在另一個(gè)實(shí)施方案中，為方法，其中通過(guò)口服、腸胃外、靜脈內(nèi)、皮下、鞘 內(nèi)、肌內(nèi)、口頰、鼻內(nèi)、硬膜外、舌下、肺、局部、直腸或透皮給藥給予組合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，為方法，其中所述炎性疾病或病癥為乙型肝炎病毒感染。在 另一個(gè)實(shí)施方案中，為方法，其中通過(guò)口服、腸胃外、靜脈內(nèi)、皮下、鞘內(nèi)、肌內(nèi)、口頰、鼻內(nèi)、 硬膜外、舌下、肺、局部、直腸或透皮給藥給予組合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，為方法，該方法 還包括選自以下一種或多種藥物的其它療法干擾素- α、聚乙二醇化干擾素α _2a、拉米 夫定、阿德福韋、替諾福韋、替比夫定和恩替卡韋。在另一個(gè)實(shí)施方案中，為方法，其中蝶呤 鈣為二蝶呤基鈣五水合物(DCP)。通過(guò)引用結(jié)合本說(shuō)明書(shū)中所提及的所有出版物、專利和專利申請(qǐng)通過(guò)引用結(jié)合到本文中，其程 度與各單獨(dú)出版物、專利或?qū)＠暾?qǐng)具體和單獨(dú)說(shuō)明通過(guò)引用而結(jié)合的程度相同。附圖簡(jiǎn)述
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本發(fā)明的新特征在權(quán)利要求中具體描述?？赏ㄟ^(guò)參考以下詳述和附圖，更好地理 解本發(fā)明的特征和優(yōu)點(diǎn)，在以下詳述中描述了其中利用本發(fā)明原理的示例性實(shí)施方案，在 附圖中

圖1 :A)蝶呤，B) (1 4mol mol)蝶呤鈣，和C) 二蝶呤基鈣五水合物(DCP) (SD045)的傅立葉轉(zhuǎn)換紅外光譜。圖2 =A)蝶呤鈣，和B) 二蝶呤基鈣五水合物(DCP)的X射線晶體結(jié)構(gòu)。圖3:(第1個(gè)實(shí)驗(yàn))在3-4周齡的23只無(wú)胸腺裸(nu/nu)雌性小鼠的各小鼠，在 右側(cè)腹皮下接種5X 106MDA-MB-231癌細(xì)胞。當(dāng)腫瘤大小達(dá)到3_5mm時(shí)，將20只小鼠分為 4個(gè)處理組，每組5只。然后將2只無(wú)腫瘤發(fā)生的小鼠排除。通過(guò)每日一次經(jīng)口管飼規(guī)定 的試驗(yàn)混懸液處理實(shí)驗(yàn)組。用無(wú)菌水處理對(duì)照組。總體AN0VA，相對(duì)于對(duì)照組，ρ = .0175 ； tp < · 0001。圖4:(第2個(gè)實(shí)驗(yàn))在3-4周齡的29只無(wú)胸腺裸(nu/nu)雌性小鼠各小鼠，在右 側(cè)腹皮下接種IOX 106MDA-MB-231癌細(xì)胞。當(dāng)腫瘤大小達(dá)到3_5mm時(shí)，將25只小鼠分為5 個(gè)處理組，每組5只小鼠。將4只小鼠分配至對(duì)照組。然后將4只無(wú)腫瘤發(fā)生的小鼠排除。 通過(guò)每日一次經(jīng)口管飼指定的試驗(yàn)混懸液或溶液處理實(shí)驗(yàn)組。不處理對(duì)照組。相對(duì)于對(duì)照 組，總體 ANOVA ρ < · 0001，t ρ < · 0001。圖5 在第1個(gè)實(shí)驗(yàn)(η = 14)中，小鼠的第60日相對(duì)腫瘤體積對(duì)(1 4mol mol) 蝶呤鈣(CaPterin)的劑量-反應(yīng)圖，Spearman等級(jí)相關(guān)，rs = -· 70，ρ = · 005。圖6 用第60日相對(duì)腫瘤體積對(duì)ACIP分?jǐn)?shù)(抗腫瘤細(xì)胞因子/IDO模式)作圖。圖7 用給予第1和第2實(shí)驗(yàn)中各組小鼠的鈣當(dāng)量對(duì)第42或43日處理時(shí)記錄的 相對(duì)腫瘤體積作圖。圖8 以Ca-Pterin劑量的函數(shù)顯示細(xì)胞因子。圖9 第1和第2實(shí)驗(yàn)合并的相對(duì)腫瘤生長(zhǎng)數(shù)據(jù)(Moheno等，在出版中)，用給予的 鈣當(dāng)量與處理第42、43日的相對(duì)腫瘤體積進(jìn)行比較。第42、43_日時(shí)間點(diǎn)代表最長(zhǎng)時(shí)間段， 其中所有圖1小鼠存活且無(wú)混淆的反應(yīng)。各處理組給予的鈣當(dāng)量作為參照給出。第2個(gè)實(shí) 驗(yàn)中未管飼的對(duì)照排除在該分析外。相對(duì)腫瘤體積的總體ANOVA :ρ = . 002。通過(guò)Donnett Τ3事后(Post Hoc)檢驗(yàn)，相對(duì)于對(duì)照，*p < . 05。圖10 第1和第2實(shí)驗(yàn)合并的血漿IL-12數(shù)據(jù)(Moheno等，在出版中)，用給予的 鈣當(dāng)量與處理后處死的血漿IL-12水平進(jìn)行比較。各處理組給予的鈣當(dāng)量作為參照給出。 第2個(gè)實(shí)驗(yàn)中未管飼的對(duì)照排除在該分析之外。血漿IL-12的總體ANOVA :p = . 001。通過(guò)Donnett T3事后檢驗(yàn)，相對(duì)于對(duì)照，*p < . 05圖11 在第42、43日，響應(yīng)給予DCP+對(duì)照小鼠的相對(duì)腫瘤體積和DCP/APCP水平。 對(duì)照(η = 3 ；第 1 實(shí)驗(yàn)的)；23mg/ (kg d)DCP (η = 5，第 2 實(shí)驗(yàn)的)；69mg/ (kg d)DCP (η = 4 ；第2實(shí)驗(yàn)的)。圖12 =DCP+對(duì)照小鼠的相對(duì)腫瘤體積和IL-12水平。圖13 =DCP+對(duì)照小鼠的響應(yīng)DCP給藥的IL-12水平。圖14 圖11的DCP+對(duì)照處理小鼠的相對(duì)腫瘤體積對(duì)DCP抗腫瘤血漿細(xì)胞因子模式。圖15 將HBV小鼠的處理組和性別組的平均Log[相對(duì)肝臟HBVDNA]值(通過(guò)
5定量PCR測(cè)量)作圖(ADV =阿德福韋二匹夫酯)。*(p < . 05)-平均Log[相對(duì)肝臟HBV DNA(PCR)]與相同性別的對(duì)照顯著不同。####(p彡.001)-不同性別的平均Log[相對(duì)肝臟 HBV DNA (PCR)]顯著不同。圖16 通過(guò)HBV小鼠的處理組和性別組對(duì)ELISA測(cè)量的平均HBe抗原(PEI單位/ ml)作圖(ADV =阿德福韋二匹夫酯)。*(p < · 05)-平均HBe ELISA與相同性別的對(duì)照顯 著不同。#(ρ<.05)，##(ρ<·01) ； ■ (ρ <.005)_不同性別組的平均HBe ELISA顯著不同。圖17 通過(guò)HBV小鼠的處理組和性別組，對(duì)平均血清RANTES作圖。* (ρ <. 05)-平 均血清RANTES濃度與相同性別的對(duì)照顯著不同。#(ρ < . 05)，-不同性別的平均血清RANTES 濃度顯著不同。圖18 用ADV、DCP和安慰劑處理的HBV轉(zhuǎn)基因小鼠中色氨酸、犬尿氨酸及其比值 (Kyn/Trp)。Α)平均血清色氨酸(μ M)，B)平均血清犬尿氨酸(μ Μ)，和C)平均血清Kyn/ Trp ( μ M/mM) 0 不同性別間相比，#(p < .05)，·(ρ < . 005)，####(ρ 彡.001)，與安慰劑處理 相比，***(ρ < . 005)。圖19 =Log[肝臟HBV DNA (PCR)]對(duì)DCP劑量的線性劑量-反應(yīng)圖，雌性(N = 40)、 雄性(Ν = 39)和所有HBV小鼠(N = 79)給出顯著值。n. s.=無(wú)顯著性。用于雌性的顯著 性回歸方程為 Log[肝臟 HBV DNA(PCR)] = 1. 59-0. 033DCP。圖20 用表 1 數(shù)據(jù)中的血漿 IL-6、IL-10、IL-2、IL-4、IL-1O、IL-12* IFN-γ 測(cè) 定值對(duì)第42、43天相對(duì)腫瘤體積進(jìn)行逐步回歸的標(biāo)準(zhǔn)化部分回歸圖。如表8所詳述。發(fā)明詳述本發(fā)明涉及新的蝶呤類似物二蝶呤基鈣五水合物(DCP)，該化合物具有有效的抗 腫瘤活性和有效的抗乙型肝炎活性。本發(fā)明涉及新的式I金屬蝶呤和蝶呤類似物絡(luò)合物(MXa)(蝶呤)2 (I)
權(quán)利要求
一種治療癌癥的方法，所述方法包括給予含蝶呤鈣的組合物。
2.權(quán)利要求1的方法，其中所述蝶呤鈣具有1 4/鈣蝶呤的化學(xué)計(jì)量比。
3.權(quán)利要求1的方法，其中所述蝶呤鈣具有1 2/鈣蝶呤的化學(xué)計(jì)量比。
4.權(quán)利要求1的方法，其中所述蝶呤鈣為二蝶呤基鈣五水合物(DCP)。
5.權(quán)利要求1的方法，其中所述組合物的給予導(dǎo)致減少的IL-6水平。
6.權(quán)利要求1的方法，其中所述組合物的給予導(dǎo)致增加的IL-10水平。
7.權(quán)利要求1的方法，其中所述組合物的給予導(dǎo)致減少的IFN-Y水平。
8.權(quán)利要求1的方法，其中所述組合物的給予導(dǎo)致增加的犬尿氨酸水平。
9.權(quán)利要求1的方法，其中所述組合物的給予導(dǎo)致增加的IL-12水平。
10.權(quán)利要求1的方法，其中所述組合物的給予導(dǎo)致減少的IL-6水平。
11.權(quán)利要求1的方法，其中所述組合物的給予導(dǎo)致增加的IL-4水平。
12.權(quán)利要求1的方法，其中所述組合物的給予導(dǎo)致吲哚胺2，3-雙加氧酶的抑制。
13.權(quán)利要求1的方法，其中通過(guò)口服、腸胃外、靜脈內(nèi)、皮下、鞘內(nèi)、肌內(nèi)、口頰、鼻內(nèi)、 硬膜外、舌下、肺、局部、直腸或透皮給藥給予所述組合物。
14.權(quán)利要求1的方法，所述方法還包括選自以下一種或多種的其它療法放療、化療、 高劑量化療加干細(xì)胞移植、激素療法和單克隆抗體療法。
15.權(quán)利要求1的方法，其中所述癌癥選自口腔癌、前列腺癌、直腸癌、非小細(xì)胞肺癌、 唇和口腔癌、肝癌、肺癌、肛門(mén)癌、腎癌、外陰癌、乳腺癌、口因癌、鼻腔和鼻旁竇癌、鼻咽癌、 尿道癌、小腸癌、膽管癌、膀胱癌、卵巢癌、喉癌、下咽癌、膽囊癌、結(jié)腸癌、結(jié)腸直腸癌、頭頸 癌、甲狀旁腺癌、陰莖癌、陰道癌、甲狀腺癌、胰腺癌、食管癌、霍奇金淋巴瘤、白血病相關(guān)病 癥、蕈樣肉芽腫和骨髓增生異常綜合征。
16.一種調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的方法，所述方法包括給予含蝶呤鈣的組合物。
17.一種治療炎性疾病或病癥的方法，所述方法包括給予含蝶呤鈣的組合物。
18.權(quán)利要求17的方法，其中所述炎性疾病或病癥選自傳染病、神經(jīng)變性疾病、多發(fā)性 硬化、HIV相關(guān)癡呆癥、AIDS癡呆癥、早老性癡呆、中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥、肥胖癥、癡呆癥(各 種形式)、冠心病、糖尿病(1型和2型)、動(dòng)脈粥樣硬化、慢性炎性疾病、孤獨(dú)癥、新生兒發(fā)病 多系統(tǒng)炎性疾病(又稱為N0MID、慢性神經(jīng)性皮膚和關(guān)節(jié)綜合征或CINCA)、帕金森病、類風(fēng) 濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、腱炎、粘液囊炎、炎性肺病、銀屑病、慢性阻塞性肺病、紅斑狼瘡、器 官炎癥(例如心肌炎、哮喘、腎炎、結(jié)腸炎)、炎性腸病(IBD)、自身免疫疾病、炎性腸綜合征 (IBS)、節(jié)段性回腸炎、慢性潰瘍性結(jié)腸炎、移植排斥、濃毒癥、彌漫性血管內(nèi)凝血(DIC)、敗 血病性休克、銀屑病、肺氣腫和局部缺血_再灌注損傷。
19.權(quán)利要求17的方法，其中所述炎性疾病或病癥為乙型肝炎病毒感染。
20.權(quán)利要求17的方法，其中通過(guò)口服、腸胃外、靜脈內(nèi)、皮下、鞘內(nèi)、肌內(nèi)、口頰、鼻內(nèi)、 硬膜外、舌下、肺、局部、直腸或透皮給藥給予所述組合物。
21.權(quán)利要求19的方法，其中通過(guò)口服、腸胃外、靜脈內(nèi)、皮下、鞘內(nèi)、肌內(nèi)、口頰、鼻內(nèi)、 硬膜外、舌下、肺、局部、直腸或透皮給藥給予所述組合物。
22.權(quán)利要求19的方法，所述方法還包括選自以下一種或多種藥物的其他療法干擾 素α、聚乙二醇化干擾素α _2a、拉米夫定、阿德福韋、替諾福韋、替比夫定和恩替卡韋。
23.權(quán)利要求19的方法，其中所述蝶呤鈣為二蝶呤基鈣五水合物(DCP)。
全文摘要
在本文中公開(kāi)了基于給予蝶呤鈣，來(lái)治療癌癥和炎性疾病和病癥例如乙型肝炎病毒傳染的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，為治療癌癥的方法，該方法包括給予二蝶呤基鈣五水合物(DCP)。在另一個(gè)實(shí)施方案癥，為治療乙型肝炎病毒感染的方法，該方法包括給予二蝶呤基鈣五水合物(DCP)。
文檔編號(hào)A61K31/505GK101977607SQ200980110607
公開(kāi)日2011年2月16日 申請(qǐng)日期2009年1月16日 優(yōu)先權(quán)日2008年1月18日
發(fā)明者A·賴因戈德, A·迪帕斯夸爾, D·富赫斯, P·莫赫諾, W·普夫萊德勒 申請(qǐng)人:桑爾克斯藥品公司