專(zhuān)利名稱(chēng)：3-取代型巖大戟內(nèi)酯類(lèi)化合物的制備方法、生物活性及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及由穿心蓮內(nèi)酯合成3-取代型巖大戟內(nèi)酯(Jolkinolide)類(lèi)化合物的合成方法和以此類(lèi)化合物為活性成分的藥物組合在抗腫瘤方面的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
在藥物化學(xué)研究領(lǐng)域，天然產(chǎn)物因結(jié)構(gòu)復(fù)雜多變并具有特定的生物學(xué)功能，發(fā)展 至今仍然是活性先導(dǎo)物的重要來(lái)源。源自中藥材穿心蓮(Andrographis paniculata)的穿心蓮內(nèi)酯(Andrographolide)為一類(lèi)半日花燒二職化合物。它具有清熱解毒、涼血消腫等功用，在臨床上有著廣泛的應(yīng)用?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明穿心蓮內(nèi)酯及其衍生物具有消炎抗菌、抗病毒、抗腫瘤、抗糖尿病、保肝利膽以及抗生育等生物活性。作為天然產(chǎn)物，穿心蓮內(nèi)酯骨架存在很大的改造空間，因此，近年來(lái)以穿心蓮內(nèi)酯為原料進(jìn)行的結(jié)構(gòu)改造或半合成，是獲得活性更強(qiáng)先導(dǎo)物的重要途徑。巖大戟內(nèi)酯(Jolkinolide)類(lèi)化合物為大戟屬(Euphorbia)大戟科(Euphorbiaceae)植物中主要藥效成分之一。該屬植物資源豐富，適應(yīng)性強(qiáng)，分布于不同的生態(tài)環(huán)境，從熱帶到亞熱帶，陸地到沙漠均有分布。《中藥大辭典》和《中草藥匯編》記載該屬植物中分別有32種和35種入藥，民間常用作通便、利尿、治療水腫、結(jié)核、牛皮癬、疥瘡和無(wú)名腫毒，尤其是除疣、抗腫瘤等。研究發(fā)現(xiàn)大戟科植物中的狼毒大戟(EuphorbiafischerianaSteud)的根部分布有多種的該類(lèi)化合物，直接用其根入藥具有逐水祛痰和破積殺蟲(chóng)的功效,主治水腫腹脹,痰食蟲(chóng)積，心腹疼痛,慢性氣管炎，咳嗽,氣喘，淋巴結(jié)、皮膚、骨、結(jié)核，疥癬，痔瘺等?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)和中醫(yī)學(xué)研究均發(fā)現(xiàn)巖大戟內(nèi)酯類(lèi)化合物具有多種生物活性，如抗腫瘤、抗菌消炎以及除蟲(chóng)活性，其中抗腫瘤活性最為顯著。(Evans F. J,Schmidt R. J. Phytochemistry 1976,15(2), 333-335 ；Fred J. Evans, RichardJ. Schmidt. Phytochemistry,1976,15(2) :333-335 ;Mitsuru H, Hajime 0, Yoshinori
0.Agric. Biol. Chem,1980,44,1351-1356 ；Liliana Betancur-Galvis, Emilio Palomares,J.Alberto Marco. Journal of Ethnopharmacology,2003,85(2-3) :279-282.)現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明大戟屬植物具有雙重生理活性，既有抗菌、抗炎、抗病毒、抗結(jié)核、抗腫瘤以及神經(jīng)生長(zhǎng)因子促進(jìn)作用等生理活性(He Y.F,Xie X.J，Wang Μ. Y. J. HenanUniv Sci Tech，2004，22，79-80)，又表現(xiàn)出對(duì)皮膚、口腔及胃腸道粘膜強(qiáng)烈的刺激性和致炎、致癌的毒性作用。最近報(bào)道該屬植物尚具有改變大鼠胎盤(pán)形態(tài)的毒性作用(SilvaA. C. P, Faria D.Ε.P.D, Borges N. B. D. Ε. S. Journal of Ethnopharmacology,2007,110,154-159.)，大量研究表明這種雙重生理活性與所含有的大戟二萜醇酯類(lèi)成分密切相關(guān)。迄今為止，國(guó)內(nèi)外學(xué)者已從大戟屬及近緣植物中分離鑒定出大約300多種大戟二萜醇酯類(lèi)化合物(Oksuz S, Shieh H. L. Planta Med, 1993, 59,472 ；Tsukasa M, Cyong J. C,Haruki Y. Planta Med,1992,58, 255-258 ;Liliana B. G,Emilio P,Marco J. A. Journal ofEthnopharmacology, 2003,85, 279-282.),分屬于20余種結(jié)構(gòu)類(lèi)型，且不斷有新的結(jié)構(gòu)類(lèi)型的化合物被發(fā)現(xiàn)。其中研究比較廣泛的分別有巨大戟燒型二職酯類(lèi)(Iagenane type)、松香燒型酯類(lèi)(Abietane type)、假白欖燒型酯類(lèi)(Jatrophone type)、千金二職燒型酯類(lèi)(Lathyrane type)、曼西醇二職酯類(lèi)(Myrsinol type)這五種類(lèi)型的化合物和17-輕基-Jolkinolide B(17_HJB)。巖大戟內(nèi)酯(Jolkinolide)類(lèi)化合物結(jié)構(gòu)骨架為松香烷內(nèi)酯型結(jié)構(gòu)，有A，B, C，D四個(gè)環(huán)組成，其中在C(12)與C(15)之間形成α，β-不飽和-Y-內(nèi)酯環(huán)即D環(huán)，酯羰基與α, β位之間的不飽和鍵組成共軛基團(tuán)。在其母環(huán)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上，分子中不同的位點(diǎn)會(huì)出現(xiàn)多種氧化型取代基團(tuán)，如不飽和鍵，羥基，羰基，環(huán)氧基。目前該類(lèi)化合物研究最為廣泛的是C，D環(huán)上氧化取代型的化合物即巖大戟內(nèi)酯(Jolkinolide)A, B, C，D，Ε。
權(quán)利要求
1.具有下列結(jié)構(gòu)通式為(I)和(II)的新穎3-取代型巖大戟內(nèi)酯類(lèi)化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽。
2.如權(quán)利要求I所述的結(jié)構(gòu)通式(I)和(II)類(lèi)化合物制備方法，其特征在于 A、通式(I)中，當(dāng)R1為-OH, R2為-CH2OH, R3為-CH3，命名為3，19- 二羥基巖大戟內(nèi)酯A，其制備方法如下 [1]穿心蓮內(nèi)酯投入反應(yīng)瓶中，加入二氯甲烷溶解，再加入氯化鋅和乙酸酐，攪拌加熱回流2-50h后，停止反應(yīng)，反應(yīng)液冷卻至室溫，二氯甲烷萃取，分別用飽和碳酸氫鈉溶液和飽和食鹽水洗滌兩次，無(wú)水硫酸鈉干燥，蒸干得3，14，19-三乙?；┬纳弮?nèi)酯； [2]3，14，19-三乙酰基穿心蓮內(nèi)酯投入反應(yīng)瓶中，加入甲醇溶解，緩慢加入硼氫化鉀，室溫反應(yīng)2-10h后處理，反應(yīng)液中加入稀鹽酸攪拌15-40min后，蒸去溶劑得白色固體3，19- 二乙酰基-14-脫氧穿心蓮內(nèi)酯； [3]3，19- 二乙酰基-14-脫氧穿心蓮內(nèi)酯投入反應(yīng)瓶中，加入二氯甲烷溶解，在_78°C下向反應(yīng)液中通入臭氧，_78°C恒溫反應(yīng)2-10h后處理,待反應(yīng)液升溫至室溫,加入30%雙氧水，攪拌5-20h后，向反應(yīng)液中加入稀鹽酸調(diào)PH值至I，二氯甲烷萃取，用飽和食鹽水洗滌兩次，無(wú)水硫酸鈉干燥，蒸干，加入乙酸酐溶解，加入催化量醋酸鈉，加熱回流反應(yīng)2. 5-15h后處理，蒸去部分溶劑，乙酸乙酯萃取，分別用飽和碳酸氫鈉溶液和飽和食鹽水洗滌兩次，無(wú)水硫酸鈉干燥，蒸干，加入有機(jī)溶劑溶解，降溫至-30°C，氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下，向反應(yīng)液中緩慢加入甲基化試劑，攪拌反應(yīng)2-10h后處理，反應(yīng)液中加入淬滅溶液，乙酸乙酯萃取，分別用飽和碳酸氫鈉溶液和飽和食鹽水洗滌兩次，無(wú)水硫酸鈉干燥，蒸干得黃色油狀化合物，力口入甲醇溶解，加入適量的堿或稀酸，攪拌加熱回流2-10h后處理。用乙酸乙酯萃取，分別用飽和碳酸氫鈉溶液和飽和食鹽水洗滌兩次，無(wú)水硫酸鈉干燥，蒸干，柱層析得化合物3，16- 二羥基-A8(14)-P0dOCarpen-13-酮。其中，有機(jī)溶劑為乙醚、四氫呋喃、乙腈、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、1，4_ 二氧六環(huán)、4-甲基四氫呋喃、苯、甲苯中的一種；甲基化試劑為甲基鋰、格式試劑、Wittig試劑、Wittig-horner試劑、二甲基鎘、二甲基銅鋰中的一種；淬滅溶液為5 20%稀鹽酸、飽和氯化銨、飽和硫酸銨、飽和碳酸銨、飽和硫酸氫銨、飽和碳酸氫銨、水、5 20%稀硫酸中的一種；堿為5 20%氫氧化鉀溶液，5 20%氫氧化鈉溶液，5 20%碳酸鉀溶液，5 20%碳酸氫鉀溶液，5 20%碳酸鈉溶液，5 20%碳酸氫鈉溶液，批啶，三乙胺，N，N-二甲基氨基吡啶，以及脂肪胺和芳香胺中的一種；稀酸可以是5 20%稀鹽酸，5 20%稀硫酸，硫酸氫銨中的一種； [4]3,16- 二輕基-A8(14)-Podocarpen-13-酮投入反應(yīng)瓶中，加入二氯甲燒溶解,加入2，2- 二甲氧基丙烷，再加入催化量對(duì)甲苯磺酸吡啶嗡鹽，反應(yīng)液加熱回流反應(yīng)I. 5-12h后處理，二氯甲烷萃取，分別用飽和碳酸氫鈉溶液和飽和食鹽水洗滌兩次，無(wú)水硫酸鈉干燥，蒸干，柱層析得3,16-異亞丙氧基-Δ 8(14)-Podocarpen-13-酮； [5]3,16-異亞丙氧基-A8(14)-Podocarpen-13-酮投入反應(yīng)瓶中，加入甲醇溶解,緩慢加入30%雙氧水，攪拌反應(yīng)5-10h后，蒸去部分溶劑，乙酸乙酯提取，飽和食鹽水洗滌兩次，干燥，柱層析得無(wú)色透明油狀3,16-異亞丙氧基-8,14-環(huán)氧基-13-Podocarpanone ； [6]3,16-異亞丙氧基-8,14-環(huán)氧基-13-Podocarpanon投入反應(yīng)瓶中，加入反應(yīng)試齊U，加入N，N-二甲基甲酰胺溶解，加熱80°C反應(yīng)3-20h，冷卻至室溫，反應(yīng)液加水，乙酸乙酯萃取，干燥，蒸干得淡黃色固體，加入二氯甲烷溶解，加入四苯基卟啉，外溫降至-78°C，向反應(yīng)瓶中通入氧氣，恒溫反應(yīng)5-40h后處理，直接柱層析得無(wú)色透明油狀3，16-異亞丙氧基-13-輕基-8,14-環(huán)氧基-13-Podocarpanone,其中，反應(yīng)試劑可以為叔丁氧基雙二甲氨基甲燒，N, N- 二甲基-二甲氧基甲烷，甲氧基雙二甲氨基甲烷中的一種； [7]3,16-異亞丙氧基-13-輕基-8,14-環(huán)氧基-13-Podocarpanon投入反應(yīng)瓶中，加入二氯甲燒溶解，分別加2- (Diethylphosphono) propanoic acid, 二環(huán)己基碳二亞胺，4_ 二甲氨基吡啶，室溫反應(yīng)4-20h，反應(yīng)液過(guò)濾,濾液分別用10%鹽酸，飽和碳酸氫鈉溶液洗滌兩次，干燥，柱層析得無(wú)色透明油狀物，加入四氫呋喃溶解，加入鈉氫，室溫反應(yīng)2-20h，冰水浴條件下，向反應(yīng)液中滴加飽和氯化銨溶液，蒸去部分溶劑，乙酸乙酯萃取，飽和碳酸氫鈉溶液洗滌兩次，干燥，柱層析得3，19-異亞丙氧基巖大戟內(nèi)酯A ； [8]3，19-異亞丙氧基巖大戟內(nèi)酯A投入反應(yīng)瓶中，加入四氫呋喃溶解，加入10%醋酸 溶液，加熱回流反應(yīng)I. 5-12h后處理，乙酸乙酯萃取，飽和碳酸氫鈉溶液洗滌兩次，干燥，柱層析得化合物3，19- 二羥基巖大戟內(nèi)酯A ； B、通式(II)中，當(dāng)R1為-0H，R2為-CH2OH,R3為-CH3，命名為3，19-二羥基巖大戟內(nèi)酯B，其制備方法如下 [I]化合物3，19- 二羥基巖大戟內(nèi)酯A投入反應(yīng)瓶中，加入二氯甲烷溶解，加入85%間氯過(guò)氧苯甲酸，室溫反應(yīng)7-10h。蒸去部分溶劑，乙酸乙酯萃取，飽和碳酸氫鈉溶液洗滌兩次，干燥，柱層析得化合物3，19- 二羥基巖大戟內(nèi)酯B ； C、通式(I)中，當(dāng)R1為-OAc，R2為-CH2OAc,R3為-CH3，其制備方法如下 [I]化合物3，19-二羥基巖大戟內(nèi)酯A投入反應(yīng)瓶中，加入四氫呋喃溶解，加入乙酸酐，再分別加入三乙胺，-二甲氨基吡啶，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)2-15h后處理，乙酸乙酯萃取，飽和碳酸氫鈉溶液洗滌兩次，干燥，柱層析得化合物3，19- 二乙酰氧基巖大戟內(nèi)酯A ； D、通式(II)中，當(dāng)R1為-OAc,R2為-CH2OAc, R3為-CH3，其制備方法如下 [I]化合物3，19-二乙酰氧基巖大戟內(nèi)酯A投入反應(yīng)瓶中，加入二氯甲烷溶解，加入85%間氯過(guò)氧苯甲酸，室溫反應(yīng)7-14h。蒸去部分溶劑，乙酸乙酯萃取，飽和碳酸氫鈉溶液洗滌兩次，干燥，柱層析得化合物3，I- 二乙酰氧基巖大戟內(nèi)酯B。
3.如權(quán)利要求I所述的結(jié)構(gòu)通式(I)和(II)類(lèi)化合物作為藥物的主要成分與其他輔料或載體結(jié)合，制備成各種劑型，用于癌癥的治療 A、制成膠囊劑通式(I)中，當(dāng)R1為-OH, R2為-CH2OH, R3為-CH3，命名為3，19- 二羥基巖大戟內(nèi)酯A. 處方列舉
全文摘要
本發(fā)明涉及由穿心蓮內(nèi)酯合成3-取代型巖大戟內(nèi)酯類(lèi)化合物的合成方法、生物活性和以此類(lèi)化合物為活性成分的藥物組合用作抗腫瘤藥物?；衔镉媒Y(jié)構(gòu)通式(I)和(II)表示，其中R1、R2、R3的定義見(jiàn)說(shuō)明書(shū)。本發(fā)明公開(kāi)了這類(lèi)化合物的制備方法、初步生物活性，以及以該類(lèi)化合物作為主要成分與各種輔料或載體結(jié)合形成的制劑用作抗腫瘤藥物，以及1H-NMR、13C-NMR、MS、IR等結(jié)構(gòu)鑒定的物理數(shù)據(jù)。
文檔編號(hào)C07D493/04GK102653543SQ20121010759
公開(kāi)日2012年9月5日 申請(qǐng)日期2012年4月13日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月13日
發(fā)明者華維一, 吳家強(qiáng), 吳曉明, 周彬, 張大永, 施連勇, 王可 申請(qǐng)人:中國(guó)藥科大學(xué)