專利名稱：5(6)取代的羅丹明異構體的拆分合成方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種通過羅丹明螺內(nèi)酰胺拆分5(6)取代的羅丹明異構體的方法。
背景技術：
羅丹明染料是一類非常重要的熒光染料，其被廣泛用于有機激光、生物分子標記和熒光探針等領域。與其他類別的熒光染料相比，羅丹明染料具有優(yōu)異的光穩(wěn)定性、 良好的水溶性、光譜可調(diào)節(jié)范圍寬(500-700nm)、較高的發(fā)光效率(Φ =0.9-0.5)以及pH(4.0-10.0)不敏感。目前，大部分羅丹明的衍生物在5或6位都帶有活性基團。三種常見的用于標記的羅丹明衍生物，在5或6位帶有琥珀酰亞胺酯、異硫氰酸酯、碘乙酰胺基。這些活性基團均能夠和氨基反應，不但可以與生物分子如蛋白、抗體、核甘酸等的氨基反應，實現(xiàn)對生物分子的熒光標記，而且還可以與其他帶有氨基的功能性分子如硅膠納米顆粒、有機聚合物、量子點等進行共價鍵鍵合，構建多功能的分子體系。5位取代和6位取代的羅丹明在合成制備過程中會同時得到，采用常規(guī)的柱色譜無法進行二者的分離。目前對于這兩個異構體的拆分，主要借助于儀器一高效制備液相來實現(xiàn)，但是這無形中增加了熒光染料的生產(chǎn)成本，造成純的5位取代的羅丹明染料和純的6位羅丹明染料的價格昂貴。對于5 (6)取代的羅丹明混合物的拆分非常有必要，典型的例子是，蛋白組學中常用的毛細管電泳技術，如果用異構體混合物標記，不僅標記反應速率和效率不同，而且同一蛋白質(zhì)標記染料產(chǎn)生不同的電泳速度，從而使定性、定量分析檢測的結果更復雜化。為此，急需尋找一種簡單便捷的合成路線，可以大量制備5位和6位不同取代的羅丹明染料

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明中提供了一種通過羅丹明螺內(nèi)酰胺拆分5(6)取代羅丹明異構體的方法。本發(fā)明中5(6)取代的羅丹明異構體的反應式分為三類第一類5(6)取代的羅丹明異構體的反應式為
權利要求
1.5(6)取代的羅丹明異構體的拆分合成方法，其特征在于， 第一類5(6)取代的羅丹明異構體的反應式為
2.權利要求I所述的拆分合成方法制備過程中得到的5(6)取代的羅丹明螺內(nèi)酰胺，其結構通式是
3.如權利要求I所述的拆分合成方法，其特征在于，所用的柱層析填料為專用硅膠和氧化鋁。
4.如權利要求I所述的拆分合成方法，其特征在于，展開劑為石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、丙酮中的一種或其混合物。
5.如權利要求I所述的拆分合成方法，其特征在于，該水解試劑是過渡金屬離子或氧化劑。
6.如權利要求5所述的拆分合成方法，其特征在于，所述的過渡金屬離子包括Hg2+、Fe2+、Fe3+、Cu2+、Pb2+、Pd2+ 或 Zn2+。
7.如權利要求5所述的拆分合成方法，其特征在于，所述的氧化劑包括雙氧水、一氧化氮或次氯酸。
全文摘要
本發(fā)明涉及5(6)取代的羅丹明異構體的拆分合成方法，通過5(6)羅丹明螺內(nèi)酰胺拆分5(6)取代的羅丹明異構體的方法。制備時，先將5(6)取代的羅丹明溶于干燥甲醇中，加入氯化亞砜，加熱回流，將反應液抽濾，減壓干燥，將得到的固體重新溶于甲醇中，再加入水合肼或羥胺，制備得到5(6)取代的羅丹明螺內(nèi)酰胺混合物。經(jīng)柱層析提純得到5取代的羅丹明螺內(nèi)酰胺和6取代的羅丹明螺內(nèi)酰胺；再在水解試劑的作用下，制備得到5取代的羅丹明和6取代的羅丹明。本發(fā)明的有益效果是制備方法簡單，所用的原料方便易得、價格低廉，可以同時大量制備5取代的羅丹明和6取代的羅丹明。
文檔編號C07D491/147GK102634225SQ20121008085
公開日2012年8月15日 申請日期2012年3月24日 優(yōu)先權日2012年3月24日
發(fā)明者于海波, 肖義 申請人:大連理工大學