專利名稱：一種中壓柱快速分離油茶餅粕中黃酮苷的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及植物提取物技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種中壓快速分離方法從油茶餅粕中 制備黃酮苷類化合物。
背景技術(shù)：
油茶(Camellia oleifera Abel.)，別名茶籽樹、油茶樹、白花茶，屬山茶科 (Theacea)山茶屬(Camellia)植物，為多年生喬木或灌木，品種多達百余種。油茶是我國特 有的木本油料，在我國有2000多年的栽培歷史，現(xiàn)主要分布于我國淮河、長江流域及其以 南的14個省的1100多個縣。我國每年產(chǎn)毛茶油僅20萬噸，而榨油后剩余的茶籽粕每年約 50萬噸。經(jīng)榨油后的油茶餅粕中含有蛋白質(zhì)、粗纖維、糖類物質(zhì)、茶皂素、單寧、生物堿、黃酮 和少量的植酸以及多酚，具有很高的經(jīng)濟價值。油茶種植的發(fā)展必須重視油茶籽的綜合開 發(fā)利用，只有這樣才能使得油茶種植的綜合效益得到進一步體現(xiàn)。目前的現(xiàn)狀是大部分餅 粕當作燃料被燒掉，或廉價出口到日本、東南亞等國家和地區(qū)，這種局面應該得到改觀。茶 皂素是一種天然非離子型表面活性劑，具有良好的乳化、分散、濕潤、發(fā)泡、穩(wěn)泡和去污等性 能，可廣泛應用于日化、建材、食品等行業(yè)。其生物活性主要表現(xiàn)在溶血和魚毒性、抗?jié)B消 炎、止咳鎮(zhèn)痛、抗菌、殺蟲以及抑制酒精吸收、類生物激素性等方面。目前國內(nèi)外對茶籽餅粕 中茶皂素進行了大量的研究，并且在國內(nèi)外市場上也已經(jīng)有很多成品在出售。但是油茶餅 粕中還有其它有效成分如黃酮苷，黃酮及黃酮苷類是一大類天然化學產(chǎn)物，在植物界分布 廣泛，從植物中提取的該類化學產(chǎn)物具有保護心腦血管、抗炎、抗氧化、改善記憶，抗抑郁， 抗焦慮、中樞抑制和神經(jīng)保護等多種生理活性，它是許多中草藥的主要活性成分，其中有許 多被開發(fā)成新型植物藥，如銀杏總黃酮、大豆異黃酮等，獲得良好效果。國內(nèi)文獻有報道，俞斌等人采用硅膠柱層析從油茶枯餅中分離得到兩種主要黃酮 苷，并建立了它的液相色譜分析方法，但是普通的硅膠柱層析分離過程緩慢，得率低。利用 新的中壓柱快速分離方法制備油茶枯餅中的兩種黃酮苷，得到高含量高得率的黃酮苷化合 物，國內(nèi)沒有任何報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種利用中壓快速分離油茶餅粕中的黃酮苷類化合物的 方法，該方法工藝簡單，得到的產(chǎn)品含量高，適合大批量制備。本發(fā)明的技術(shù)方案為中壓柱快速分離油茶餅粕中黃酮苷的制備方法，包括以下 步驟第一步，脫脂油茶籽脫殼，籽破碎，采用石油醚、乙醚、正己烷、戊烷和正戊烷等有機溶劑脫脂， 茶籽質(zhì)量與有機溶劑的體積比例為1 15-35g/mL，溫度30°C -80°C，提取l_3h，提取1_4 次，過濾后得到濾渣，得到脫脂的油茶籽粕；第二步，提取
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將油茶籽粕以Ig原料加入15_30mL的不同濃度醇水溶液提取1_4次，提取溫度 60-80°C，提取時間l_3h，提取后，過濾，合并濾液，真空濃縮得到油茶粕黃酮苷粗提取物；第三步，萃取將提取物得到的浸膏用正丁醇等有機溶劑萃取2-5次，將水層濃縮，得到粗提物；第四步，中壓柱純化將油茶粕黃酮苷粗提取物與中壓柱填料按質(zhì)量比1 15-50吸附，洗脫劑為氯仿、 正丁醇、乙酸乙酯、甲醇、乙醇和水中的一種或幾種的混合溶液，中壓柱柱長20-300cm，柱直 徑2-30cm，柱壓為3-20MPa，檢測波長220_360nm，流速2-200mL/min，富集黃酮苷部位，室溫 真空回收溶劑，經(jīng)HPLC分析，制備得到90%以上黃酮苷化合物；第五步，HPLC制備分離以中壓制備得到的90%以上的黃酮苷混合物為原料，采用高效液相進行制備，在 此色譜條件下色譜柱XB-C18(010mmX250mm，5ym)；流動相甲醇水=2 3 (V/V)， 紫外270nm，流速3mL/min。制備得到兩種黃酮苷單體，分別為山奈酚3_0-[2_0-β -D-半 乳糖-6-0-α -L-鼠李糖]-D-葡萄糖苷(I )和山奈酚3-0-[2-0-β -D-木 糖-6-0-α-L-鼠李糖]-D-葡萄糖苷(II )，經(jīng)HPLC分析，含量在95%以上。本方法中采用醇溶液進行提取，經(jīng)過萃取，中壓柱快速分離得到90%以上的黃酮 苷化合物，再進一步通過高效液相制備分離得到兩種黃酮苷單體，經(jīng)過MS、IRjH-NMR和 13C-NMR鑒定為山奈酚3-0- [2-0- β -D-半乳糖-6_0_ α -L-鼠李糖]-β -D-葡萄糖苷(I ) 和山奈酚3-0-[2-0-β-D-木糖-6-0-α-L-鼠李糖]_ β _D_葡萄糖苷(II )，其結(jié)構(gòu)為
具體實施例方式以下實施例為本發(fā)明的一些舉例，不應被看做是對本發(fā)明的限定。實施例1第一步，脫脂油茶籽脫殼，籽破碎，采用石油醚脫脂，茶籽與石油醚的比例為1 30g/mL，溫度 60°C，提取2h，提取3次，過濾后得到濾渣，得到脫脂的油茶籽粕；
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第二步，提取將油茶籽粕以Ig原料加入20mL的70 %濃度醇-水溶液提取3次，提取溫度80°C， 提取時間2h，提取后，過濾，合并濾液，真空濃縮得到油茶粕黃酮苷粗提取物；第三步，萃取將提取物得到的浸膏用正丁醇萃取4次，將水層濃縮，得到相提物；第四步，中壓柱純化將油茶粕黃酮苷粗提取物與中壓柱填料300目的硅膠按質(zhì)量比1 40吸附，洗脫 劑為氯仿和甲醇混合溶液，中壓柱柱長40cm，柱直徑3cm，柱壓為3MPa，檢測波長220nm，流 速lOmL/min，富集黃酮苷部位，室溫真空回收溶劑，經(jīng)HPLC分析，制備得到90%以上黃酮苷 化合物；第五步，HPLC制備分離以中壓制備得到的90%以上的黃酮苷混合物為原料，采用高效液相進行制備，在 此色譜條件下色譜柱XB-C18(010mmX250mm，5ym)；流動相甲醇水=2 3 (V/V)， 紫外270nm，流速3mL/min。制備得到兩種黃酮苷單體，分別為山奈酚3_0-[2_0-β -D-半 乳糖-6-0-α -L-鼠李糖]-D-葡萄糖苷(I )和山奈酚3-0-[2-0-β -D-木 糖-6-0-α-L-鼠李糖]-D-葡萄糖苷(II )，經(jīng)HPLC分析，含量在95%以上。本方法中采用醇溶液進行提取，經(jīng)過萃取，中壓柱快速分離得到90%以上的黃酮 苷化合物，再進一步通過高效液相制備分離得到兩種黃酮苷單體，經(jīng)過MS、IRjH-NMR和 13C-NMR鑒定為山奈酚3-0- [2-0- β -D-半乳糖-6_0_ α -L-鼠李糖]-β -D-葡萄糖苷(I ) 和山奈酚3-0- [2-0- β -D-木糖-6-0- α -L-鼠李糖]-β -D-葡萄糖苷(II )。化合物I為淡黃色粉末，在紫外燈下顯黃色熒光，鹽酸-鎂粉反應呈陽性，Molish 反應呈陽性，提示該化合物為黃酮苷類化合物。經(jīng)薄層酸水解與標準品葡萄糖、半乳糖和 鼠李糖對照Rf值相同，說明所連的糖為這3種糖。經(jīng)過稀酸水解后，苷元的MS, NMR數(shù) 據(jù)與標準譜圖庫配匹配為山奈酚。MS m/z :[M+Na]+779，結(jié)合13C-NMR譜，確定分子式為 C33H40O200紅外譜圖中，3357CHT1為羥基的伸縮振動，1359CHT1為羥基的彎曲振動，2968CHT1 和2850cm-1為CH3的伸縮振動，2922CHT1為CH2的伸縮振動，1450cm"1為CH3和CH2的彎曲 振動，1607CHT1和1498CHT1為芳烴的骨架振動，1655CHT1為芳香酮的伸縮振動。其氫、碳 信號歸屬如下=1H-WR(CD3ODdOOmHz)譜中，δ 7. 9 (2Η, d, j = 9. OHz)和 6. 8 (2H, d, j = 9.0Hz)提示為 B 環(huán)上 H-2，，6，及 H-3，，5，的質(zhì)子信號，δ 6. 2 (1H，s，H-8)，δ6. 0(lH，d，J =1. 8Hz, H-6)，δ 5. 2(2H, d, J = 1. 8Hz, Glu H-I, Gla H_l)，δ 4. 79 (Rha d, J = 1. 8Hz, H-l)，δ 1. 3(Rha, d, J = 6. OHz, H-6)，δ 1. 0(Rha, d, H_5) ； 13C-WR(CD3OD, 125mHz)譜中， δ 179 (C-4)，δ 167 (C_7)，δ 161. 5 (C-5)，δ 160 (C_4，)，δ 158. 6 (C_2，C-9)，δ 134. 7 (C-3)， δ 132. 4(C_2，，6，)，δ 122. 9(C_1，)，δ 116. 3 (C_3，，C_5，)，δ 104. 5 (C-IO)，δ 100. 3(C_6)， δ 95. 1 (C-8), δ 102. 2(Glu C_l)，δ 82 (Glu C_2)，δ 77. 8(Glu C-3) , δ 77(Glu C-4), δ 78. 3(Glu C-5), δ 69. 73 (GluC-6)，δ 101. 2(Gla c_l)，δ 75. 4(Gla C_2)，δ 72. 3(Gla C-3), δ 71. 4(Gla C-4), δ 73. 8(Gla C-5), δ 62. 6(Gla C_6)，δ 100 (Rha C_l)，δ 72 (Rha C-2)，δ 71. 3 (Rha C-3)，δ 73. 8 (Rha C-4), δ 68. 3 (RhaC-5)，δ 17. 9 (Rha C-6)。故鑒定化合 物I為山奈酚3-0-[2-0-β -D-半乳糖-6-0-α -L-鼠李糖]-β -D-葡萄糖苷(Kaempferol 3-0-[2-0-β-D-galactopyranosyl-6-O-α-L-rhamnopyranosyl]- β -D-glucopyranosid
化合物II為淡黃色粉末，在紫外燈下顯黃色熒光，鹽酸_鎂粉反應呈陽性，Molish 反應呈陽性，提示該化合物為黃酮苷類化合物。經(jīng)薄層酸水解與標準品葡萄糖、木糖和鼠 李糖對照Rf值相同，說明所連的糖為這3種糖。經(jīng)過稀酸水解后，苷元的MS，NMR數(shù)據(jù)與 標準譜圖庫配匹配為山奈酚。HRESI-MS m/z :[M+Na]+749，結(jié)合13C-NMR譜，確定分子式為 C32H38O190紅外譜圖中，3346CHT1為羥基的伸縮振動，1357CHT1為羥基的彎曲振動，2977CHT1 和2844cm—1為CH3的伸縮振動，2925CHT1為CH2的伸縮振動，1447cm"1為CH3和CH2的彎曲 振動，1614cm—1，1570cm—1和1497cm—1為芳烴的骨架振動，1653cm—1為芳香酮的伸縮振動。其 氫、碳信號歸屬如下 ^H-WR(CD3ODdOOmHz)譜中，δ 7. 9 (2Η, d, j = 9. OHz)和 6. 8(2H, d, j = 9.0Hz)提示為 B 環(huán)上 H-2，，6，及 H-3，，5，的質(zhì)子信號，δ 6. 2 (1H，s，H_8)，δ 6. 0 (1H， d, J = 1. 8Hz, H-6)，δ 5. 2 (2H, d, J = 1. 8Hz, Glu H-I, Gla H_l)，δ 4. 79 (Rha d, J = 1. 8Hz, H-l)，δ 1. 3(Rha, d, J = 6. OHz，H-6)，δ 1. 1 (Rha, d, H_5) ； 13C-WR (CD3OD, 125mHz) 譜中，δ 179. 5(C-4), δ 166 (C-7) , δ 163 (C-5), δ 161. 4 (C-4，)，δ 158. 7 (C_2，C-9)， δ 134. 7(C-3)，δ 132. 8 (C—2，，6，)，δ 122. 9(C_1，)，δ 116. 2 (C—3，，C—5，)，δ 105. 2 (C-10)， δ 99. 9(C-6) , δ 94. 9 (C-8) , δ 102. 1 (Glu C—1)，δ 82 (Glu C—2)，δ 77.0 (Glu C—3)， δ 76. 9 (Glu C-4) , δ 78. 2 (Glu C—5)，δ 74. 7 (Glu C—6)，δ 102 (Xyl C—1)，δ 74. 7 (Xyl C-3)，δ 72. 3(Xyl C-2)，δ 71(XylC-4)，δ 66. 6 (Xyl C-5)，δ 100(Rha C-1)，δ 72. 1(Rha C-2)，δ 71. 4 (Rha C-3), δ 73. 8 (Rha C-4), δ 68. 1 (Rha C-5)，δ 17. 8 (Rha C-6)。故鑒定化 合物II為山奈酚3-0- [2-0- β -D-木糖-6-0- α -L-鼠李糖]-β _D_葡萄糖苷(Kaempferol 3-0-[2-0-β -D-xylopyranosyl-6-0-α -L-rhamnopyranosyl]- β -D-glucopyranoside)。實施例2第一步，脫脂油茶籽脫殼，籽破碎，采用石油醚脫脂，茶籽與石油醚的比例為1 30g/mL，溫度 60°C，提取2h，提取3次，過濾后得到濾渣，得到脫脂的油茶籽粕；第二步，提取將油茶籽粕以Ig原料加入20mL的50 %甲醇溶液提取3次，提取溫度80°C，提取 時間2h，提取后，過濾，合并濾液，真空濃縮得到油茶粕黃酮苷粗提取物；第三步，萃取將提取物得到的浸膏用丙酮萃取4次，將水層濃縮，得到粗提物；第四步，中壓柱純化將油茶粕黃酮苷粗提取物與中壓柱填料300目的硅膠按質(zhì)量比1 40吸附，洗脫 劑為氯仿和甲醇混合溶液，中壓柱柱長40cm，柱直徑3cm，柱壓為3MPa，檢測波長220nm，流 速lOmL/min，富集黃酮苷部位，室溫真空回收溶劑，經(jīng)HPLC分析，制備得到90%以上黃酮苷 化合物；第五步，HPLC制備分離以中壓制備得到的90%以上的黃酮苷混合物為原料，采用高效液相進行制備，在 此色譜條件下色譜柱XB-C18(010mmX250mm，5ym)；流動相甲醇水=2 3 (V/V)， 紫外270nm，流速3mL/min。制備得到兩種黃酮苷單體，分別為山奈酚3_0-[2_0-β-D-半 乳糖-6-0-α -L-鼠李糖]-D-葡萄糖苷(I )和山奈酚3-0-[2-0-β -D-木糖-6-0-α-L-鼠李糖]-D-葡萄糖苷(II )，經(jīng)HPLC分析，含量在95%以上。實施例3第一步，脫脂油茶籽脫殼，籽破碎，采用石油醚脫脂，茶籽與石油醚的比例為1 30g/mL，溫度 60°C，提取2h，提取3次，過濾后得到濾渣，得到脫脂的油茶籽粕；第二步，提取將油茶籽粕以Ig原料加入20mL的70 %乙醇溶液提取3次，提取溫度80°C，提取 時間2h，提取后，過濾，合并濾液，真空濃縮得到油茶粕黃酮苷粗提取物；第三步，萃取將提取物得到的浸膏用正丁醇萃取4次，將水層濃縮，得到粗提物；第四步，中壓柱純化將油茶粕黃酮苷粗提取物與中壓柱填料60A，40 60μπι的ODS C18按質(zhì)量比 1 40吸附，洗脫劑為甲醇和水混合溶液，中壓柱柱長40cm，柱直徑3cm，柱壓為3MPa，檢 測波長220nm，流速lOmL/min，富集黃酮苷部位，室溫真空回收溶劑，經(jīng)HPLC分析，制備得到 90%以上黃酮苷化合物；第五步，HPLC制備分離以中壓制備得到的90%以上的黃酮苷混合物為原料，采用高效液相進行制備，在 此色譜條件下色譜柱XB-C18(010mmX250mm，5ym)；流動相甲醇水=2 3 (V/V)， 紫外270nm，流速3mL/min。制備得到兩種黃酮苷單體，分別為山奈酚3_0-[2_0-β-D-半 乳糖-6-0-α -L-鼠李糖]-D-葡萄糖苷(I )和山奈酚3-0-[2-0-β -D-木 糖-6-0-α-L-鼠李糖]-D-葡萄糖苷(II )，經(jīng)HPLC分析，含量在95%以上。實施例4第一步，脫脂油茶籽脫殼，籽破碎，采用石油醚脫脂，茶籽與石油醚的比例為1 30g/mL，溫度 60°C，提取2h，提取3次，過濾后得到濾渣，得到脫脂的油茶籽粕；第二步，提取將油茶籽粕以Ig原料加入20mL的70 %乙醇溶液提取3次，提取溫度80°C，提取 時間2h，提取后，過濾，合并濾液，真空濃縮得到油茶粕黃酮苷粗提取物；第三步，萃取將提取物得到的浸膏用正丁醇萃取4次，將水層濃縮，得到粗提物；第四步，中壓柱純化將油茶粕黃酮苷粗提取物與中壓柱填料60A，40 60μπι的ODS C8按質(zhì)量比 1 40吸附，洗脫劑為甲醇和水混合溶液，中壓柱柱長40cm，柱直徑3cm，柱壓為3MPa，檢測 波長220nm，流速lOmL/min，富集黃酮苷部位，室溫真空回收溶劑，經(jīng)HPLC分析，制備得到 90%以上黃酮苷化合物；第五步，HPLC制備分離以中壓制備得到的90%以上的黃酮苷混合物為原料，采用高效液相進行制備，在 此色譜條件下色譜柱XB-C18(010mmX250mm，5ym)；流動相甲醇水=2 3 (V/V)， 紫外270nm，流速3mL/min。制 得到兩種黃酮苷單體，分別為山奈酚3_0-[2_0-β -D-半乳糖-6-0-a -L-鼠李糖]-D-葡萄糖苷(I )和山奈酚3-0-[2-0-β -D-木 糖-6-0-α-L-鼠李糖]-D-葡萄糖苷(II )，經(jīng)HPLC分析，含量在95%以上。實施例5第一步，脫脂油茶籽脫殼，籽破碎，采用石油醚脫脂，茶籽與石油醚的比例為1 30g/mL，溫度 60°C，提取2h，提取3次，過濾后得到濾渣，得到脫脂的油茶籽粕；第二步，提取將油茶籽粕以Ig原料加入20mL的70 %乙醇溶液提取3次，提取溫度80°C，提取 時間2h，提取后，過濾，合并濾液，真空濃縮得到油茶粕黃酮苷粗提取物；第三步，萃取將提取物得到的浸膏用正丁醇萃取4次，將水層濃縮，得到粗提物；第四步，中壓柱純化將油茶粕黃酮苷粗提取物與中壓柱填料S印hedex LH_20按質(zhì)量比1 40吸附， 洗脫劑為乙醇和水混合溶液，中壓柱柱長40cm，柱直徑3cm，柱壓為3MPa，檢測波長220nm， 流速lOmL/min，富集黃酮苷部位，室溫真空回收溶劑，經(jīng)HPLC分析，制備得到90%以上黃酮 苷化合物；第五步，HPLC制備分離以中壓制備得到的90%以上的黃酮苷混合物為原料，采用高效液相進行制備，在 此色譜條件下色譜柱XB-C18(010mmX250mm，5ym)；流動相甲醇水=2 3 (V/V)， 紫外270nm，流速3mL/min。制備得到兩種黃酮苷單體，分別為山奈酚3_0-[2_0-β-D-半 乳糖-6-0-α -L-鼠李糖]-D-葡萄糖苷(I )和山奈酚3-0-[2-0-β -D-木 糖-6-0-α-L-鼠李糖]-D-葡萄糖苷(II )，經(jīng)HPLC分析，含量在95%以上。
權(quán)利要求
一種中壓柱快速分離油茶餅粕中黃酮苷的制備方法，其特征在于由以下步驟組成第一步，脫脂油茶籽脫殼，籽破碎，采用石油醚、乙醚、正己烷、戊烷和正戊烷等有機溶劑脫脂，茶籽質(zhì)量與有機溶劑的體積比例為1∶15 35g/mL，溫度30℃ 80℃，提取1 3h，提取1 4次，過濾后得到濾渣，得到脫脂的油茶籽粕；第二步，提取將油茶籽粕以1g原料加入15 30mL的不同濃度醇 水溶液提取1 4次，提取溫度60 80℃，提取時間1 3h，提取后，過濾，合并濾液，真空濃縮得到油茶粕黃酮苷粗提取物；第三步，萃取將提取物得到的浸膏用正丁醇等有機溶劑萃取2 5次，將水層濃縮，得到粗提物；第四步，中壓柱純化將油茶粕黃酮苷粗提取物與中壓柱填料按質(zhì)量比1∶15 50吸附，洗脫劑為氯仿、正丁醇、乙酸乙酯、甲醇、乙醇和水中的一種或幾種的混合溶液，中壓柱柱長20 300cm，柱直徑2 30cm，柱壓為3 20MPa，檢測波長220 360nm，流速2 200mL/min，富集黃酮苷部位，室溫真空回收溶劑，經(jīng)HPLC分析，制備得到90％以上黃酮苷混合物；第五步，HPLC制備分離以中壓制備得到的90％以上的黃酮苷混合物為原料，采用高效液相進行制備，得到兩種黃酮苷單體，分別為山奈酚3 O [2 O β D 半乳糖 6 O α L 鼠李糖] β D 葡萄糖苷(Ⅰ)和山奈酚3 O [2 O β D 木糖 6 O α L 鼠李糖] β D 葡萄糖苷(Ⅱ)，經(jīng)HPLC分析，含量在95％以上。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種中壓柱快速分離油茶餅粕中黃酮苷的制備方法，其特征 在于步驟2中的不同濃度的醇-水溶液為乙醇、甲醇和水中的一種或幾種的混合溶液，優(yōu)選 60-90%的乙醇水溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種中壓柱快速分離油茶餅粕中黃酮苷的制備方法，其特征 在于步驟3中的有機溶劑為丙酮、乙酸乙酯和正丁醇或它們中的一種或者兩種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種中壓柱快速分離油茶餅粕中黃酮苷的制備方法， 其特征在于中壓柱填料可選擇200-500目的硅膠和氧化鋁中的一種或二種任意比，洗 脫劑為氯仿、乙酸乙酯、正丁醇和甲醇中的一種或幾種的混合溶液，優(yōu)選氯仿甲醇= 100 1-30 (ν/ν)混合溶劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種中壓柱快速分離油茶餅粕中黃酮苷的制備方法，其特征 在于中壓柱填料也可選擇孔徑為60Α，40-60 μ m的ODS C18、C8和S印hedex LH-20材料，洗 脫劑為甲醇、乙醇和水中的一種或幾種的混合溶液，優(yōu)選5% 50%的甲醇水溶液。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種中壓柱快速分離油茶餅粕中黃酮苷的制備方法，其特征 在于高效液相制備的條件為色譜柱乂8-(18沙1011111^250111111，511111)；流動相甲醇水= 2 3 (V/V)，紫外 270nm，流速3mL/min。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種中壓柱快速分離油茶餅粕中黃酮苷的制備方法，其特征 在于HPLC分析條件為色譜柱Hypersil 0DS2(O4. 6mmX 200mm, 5 μ m)；流動相甲醇水 =4:6 (V/V)，紫外 270nm，流速lmL/min。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種中壓柱快速分離油茶餅粕中黃酮苷的制備方法，包括以下步驟將茶籽脫殼破碎，用非極性溶性脫脂，再用乙醇水溶液進行提取，過濾濃縮得到粗提物浸膏，通過中壓柱快速分離得到90％以上的黃酮苷混合物，進一步采用高效液相色譜制備，得到95％以上的黃酮苷單體，分別為山奈酚3-O-[2-O-β-D-半乳糖-6-O-α-L-鼠李糖]-β-D-葡萄糖苷(Ⅰ)和山奈酚3-O-[2-O-β-D-木糖-6-O-α-L-鼠李糖]-β-D-葡萄糖苷(Ⅱ)。該方法可用于批量量制備.為油茶餅粕中黃酮苷藥物和保健功能產(chǎn)品開發(fā)提供了優(yōu)質(zhì)原料。
文檔編號C07H17/07GK101899070SQ201010229218
公開日2010年12月1日 申請日期2010年7月19日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月19日
發(fā)明者原姣姣, 葉建中, 周昊, 王成章, 陳虹霞 申請人:中國林業(yè)科學研究院林產(chǎn)化學工業(yè)研究所