專利名稱：雜環(huán)抗病毒化合物的制作方法
雜環(huán)抗病毒化合物本發(fā)明涉及抗病毒治療領域，并且特別涉及用于治療人免疫缺陷病毒(HIV-I)介 導的疾病、包括AIDS和ARC(AIDS相關綜合征)的非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑。本發(fā)明提供了 新的IH-吡唑并[3，4-c]噠嗪基、IH-吡唑并[3，4-b]吡啶基、IH-吡唑并[3，4_c]吡啶基 和吲唑基化合物、包含這些化合物的藥物組合物、應用所述化合物在單一治療或組合治療 中治療或預防HIV-I介導的疾病的方法。當口服施用時，本發(fā)明化合物提供了高血中水平 的HIV-I逆轉(zhuǎn)錄酶(HIVRT)抑制劑。本發(fā)明涉及抗病毒治療領域，并且特別涉及抑制HIV逆轉(zhuǎn)錄酶和用于治療HIV-I 介導的疾病的非核苷化合物。本發(fā)明提供了新的式I的雜環(huán)化合物，其用于治療或預防 HIV-I介導的疾病、AIDS或ARC，在單一治療或組合治療中應用所述化合物。人免疫缺陷病毒HIV是獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)的致病因素，該疾病的特征 在于免疫系統(tǒng)、特別是CD4+T-細胞的破壞，伴有對機會性感染的易感性。HIV感染還與前體 ARC綜合征有關，該綜合征的特征在于例如持續(xù)性全身淋巴結(jié)病、發(fā)熱和體重減輕等癥狀。與其它逆轉(zhuǎn)錄病毒一樣，HIV基因組編碼稱作gag和gag-pol的蛋白質(zhì)前體，它們 被病毒蛋白酶加工而提供蛋白酶、逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)、內(nèi)切核酸酶/整合酶，并且使病毒核心的 結(jié)構(gòu)蛋白成熟。阻斷該加工能夠阻止正常的感染性病毒的產(chǎn)生。人們已經(jīng)付出了大量的努 力，意在通過抑制病毒編碼的酶來控制HIV。對于HIV-I化學治療而言，已經(jīng)深入研究了兩種酶HIV蛋白酶和HIV逆轉(zhuǎn)錄 酶(J. S. G. Montaner 等人，Antiretroviral therapy 'the state ofthe art，(抗逆轉(zhuǎn) 錄病毒治療‘本領域的狀態(tài)，)，Biomed & Pharmacother. 1999 53 :63_72 ；R. W. Shafer 禾口 D. A. Vuitton, Highly active retroviraltherapy(HAART) for the treatment of infection with humanimmunodeficiency virus type (用于治療人免疫缺陷病毒類型 感染的高活性逆轉(zhuǎn)錄病毒治療(HAART))，Biomed. & Pharmacother. 199953 :73_86 ；E. De Clercq,New Developments in Anti-HIV Chemotherap (Jfi-HIV^ifiiM). Curr. Med. Chem. 20018 :1543_1572)。已經(jīng)鑒定了兩大類RTI抑制劑核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑 (NRTI)和非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑。目前，CCR5和CXCR4共同受體已經(jīng)顯示為抗-HIV-I化 學治療的潛在靴標(D. Chantry, Expert Opin. Emerg. Drugs 2004 9(1) 1-7 ；C. G. Barber, Curr. Opin. Invest. Drugs 2004 5(8) 851-861 ；D.Schols, Curr. Topics Med. Chem. 2004 4(9) 883-893 ；N. A. Meanwell 禾口 J. F. Kadow，Curr. Opin. Drug Discov. Dev. 2003 6(4) 451-461)。B. Crescenzi 等人在 2003 年 5 月 1 日公布的 W02003/035077 中公開了 HIV-1 整 合酶的N-取代的嘧啶酮酰胺抑制劑并且MK-0518接近批準。NRTI典型地為2’，3’_ 二脫氧核苷(ddN)類似物，其必須在與病毒RT相互作用前 被磷酸化。相應的三磷酸酯作為病毒RT的競爭性抑制劑或可選擇的底物起作用。在摻入核 酸后，核苷類似物終止鏈延長過程。HIV逆轉(zhuǎn)錄酶具有DNA編輯能力，該能力使耐藥株能通 過斷裂核苷類似物并且繼續(xù)延長來克服阻斷。目前臨床應用的NRTl包括齊多夫定(AZT)、 去羥肌苷(ddl)、扎西他濱(ddC)、司他夫定(d4T)、拉米夫定(3TC)和替諾福韋(PMPA)。NNRTI于1989年被首次發(fā)現(xiàn)。NNRTI為變構(gòu)抑制劑，其在HIV逆轉(zhuǎn)錄酶上的非底物-結(jié)合位點上可逆性地結(jié)合，從而改變活性位點的形狀或者阻斷聚合酶活性 (R. W. Buckheit, Jr.，Non-nucleoside reversetranscriptase inhibitors !perspectives for novel therapeutic compounds andstrategies for treatment of HIV infection(非 核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑用于新的治療化合物的前景及治療HIV感染的策略)，EXpert Opin. Investig. Drugs2001 10 (8) 1423-1442 ；Ε.De Clercq, The role of non-nucleoside reversetranscriptase inhibitors (NNRTIs) in the therapy of HIV infection (非核苷 逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NNRTI)在治療HIV感染中的作用)，Antiviral Res. 199838 153-179 ； E. De Clercq, New Developments in Anti-HIV Chemotherapy ( Jfi -HIV it^^aff 進展)，Current Med. Chem. 2001 8 (13) : 1543-1572 ;G. Moyle，The Emerging Roles of Non-Nucleoside Reverse TranscriptaseInhibitors in Antiviral Therapy (非核苷逆轉(zhuǎn) 錄酶抑制劑在抗病毒治療中的新作用)，Drugs 2001 61(1) 19-26)。盡管在實驗室中已經(jīng) 鑒定了超過30種結(jié)構(gòu)類型的NNRTI，但是僅3種化合物已經(jīng)被批準用于HIV治療依法韋 侖、奈韋拉平和地拉韋啶。NNRTI最初被視為有前景的化合物類型，體外和體內(nèi)研究迅速顯示，其對HIV耐 藥株和種類_特異性毒性的出現(xiàn)存在低障礙。耐藥性常常因為僅在RT中有單點突變而發(fā) 生。盡管與NRTI、PI和NNRTI的組合治療在許多情況下已經(jīng)顯著降低了病毒載量并且減緩 了疾病進程，但是仍有大量的治療問題(R. M. Gulick, Eur. Soc. Clin. Microbiol, and inf. Dis. 20039(3) 186-193)。雞尾酒治療并非對所有患者有效，經(jīng)常出現(xiàn)潛在的嚴重的不良反 應，并且已經(jīng)證實快速復制的HIV病毒熟練地產(chǎn)生野生型蛋白酶和逆轉(zhuǎn)錄酶的突變耐藥變 體。對針對HIV野生型和通常出現(xiàn)的HIV-I耐藥株具有活性的更安全的藥物仍存在需求。式I化合物，其中R3是H，是有效的HIVRT抑制劑，但是，其應用受到有限的生物利 用度的限制。HIV-I的有效治療需要提供持續(xù)高水平的化合物以將耐藥株的出現(xiàn)機會降至 最低限度的化合物。
US20080045511中描述，將該文獻全部內(nèi)容并入本文作為參考。發(fā)明概述本發(fā)明涉及式I化合物或其可藥用鹽，其中X1和X2獨立地是CH或N ；R1是氟或氫；R2是氫、鹵素、Cp6烷基、C3_7環(huán)烷基、CV6鹵代烷基、C1^6烷氧基或Cp6烷基磺?；?；Ar是被1至3個基團取代的苯基，所述基團在每次出現(xiàn)時獨立地選自氫、鹵素、氰
6基、C1^6烷基、CV6烷氧基、C1^6鹵代烷基和C3_7環(huán)烷基；R3在每次出現(xiàn)時獨立地選自CH2OH,CH2O-C ( = 0) (CH2) nC02R4，其中 η 是 2 至 5，
CH2O-C ( = 0) CH2OCH2CO2R4,CH2OCOR5,CH2OC ( = 0) CHR6NH2,C( = 0)R5，和CH2OP ( = 0) (OH) 2 ；R4是氫或C1,烷基；R5是氫或C1,烷基、C1^鹵代烷基、C1^10氨基烷基、CV3烷基氨基-C1,烷基、CV3
鏈烯基、c3_7環(huán)烷基、C1^6烷氧基、C1,氨基烷氧基、C1^3烷基氨 基-C1,烷氧基、Ch 二烷基氨基-C1J烷氧基、NR7aR7b、苯基或吡啶基，所述苯基或吡啶基環(huán) 任選獨立地被1至3個取代基取代，所述取代基選自鹵素、C1,烷基、Cu烷氧基、硝基和氰 基；R6是Cp6烷基或天然存在的氨基酸的側(cè)鏈；R7a和R7b獨立地是氫、C1^6烷基、C1^氨基烷基、CV3烷基氨基-C1,烷基、C^3 二烷 基氣基"C1^q焼基。式I化合物抑制HIVRT并且提供了預防和治療HIV-I感染和治療AIDS和/或ARC 的方法。本發(fā)明化合物，其中R3如本概述中所述，快速并且有效地被吸收進入循環(huán)并且提 供了具有有效的廣譜抗-HIV-I活性的高水平的化合物。本發(fā)明還涉及包含式I化合物的 組合物，其用于預防和治療HIV-I感染和治療AIDS和/或ARC。本發(fā)明還涉及用于單一治 療或與其它抗病毒藥組合治療的式I化合物。

圖1用圖解示例了比較3-[6-溴-2-氟-3-(1H-吡唑并[3，4_c]噠嗪_3_基甲 基)-苯氧基]-5-氯-芐腈(R-73)的4種前藥在大鼠和狗中的生物利用度的藥物動力學 試驗結(jié)果。圖2用圖解示例了比較3-氯-5-[6-氯-2-氟-3-(1H-吡唑并[3，4_c]噠嗪_3_基 甲基)-苯氧基]-芐腈(R-73a)的4種前藥在大鼠和狗中的生物利用度的藥物動力學試驗結(jié)果。圖3提供了比較5-[6-溴-2-氟-3-(1H-吡唑并[3，4_c]噠嗪_3_基甲基)-苯 氧基]-異鄰苯二甲腈(R-77)的前藥1-2在大鼠中的生物利用度的藥物動力學試驗結(jié)果示 意圖。式I化合物，其中R3是氫，是具有對突變株廣譜活性的有效HIVRT抑制劑，所述突 變株對其它非核苷RT抑制劑具有耐藥性。有效抗病毒治療需要血樣中高水平的活性成分， 以將耐藥株出現(xiàn)減少到最低限度。令人遺憾的是，這些化合物顯示有限的胃腸道吸收。其 次，化合物的亞最適物理特性限制了可以用于增強活性成分遞送的制劑選擇。Albert引入了術語前藥來描述缺乏內(nèi)在生物活性、但能夠代謝轉(zhuǎn)化為活性藥物的 (A. Albert, Selective Toxicity, Chapman and Hall，London，1951) 。了
前藥(P. Ettmayer 等人，J. Med Chem. 200447 (10) :2393_2404 ；K. Beaumont 等人，Curr. DrugMetab. 20034 461-485 ；H. Bundgaard, Design of Prodrugs :Bioreversible derivatives for variousfunctional groups and chemical entities in Design of Prodrugs (前藥 的設計前藥設計中的多種官能團和化學實體的生物可逆衍生物)，H. Bundgaard(編輯) Elsevier Science Publishers, Amersterdam 1985 ；G. Μ· Pauletti 等人A dv. Drug Deliv. Rev.1997 27 :235_256 ；R.J. Jones 和 N. Bischofberger, Antiviral Res. 199527 ；1-15 和 C. R. Wagner等人，Med. Res. Rev. 2000 20 417-45)。盡管代謝轉(zhuǎn)化可以被特異性酶、通常為 水解酶催化，但是活性化合物也可以通過非特異性化學過程再生?？伤幱们八幹傅氖峭ǔ＞哂杏邢薜幕驘o內(nèi)在生物活性、但可以在宿主中被代謝例 如水解或氧化以形成生物活性化合物的化合物。前藥的典型的實例包括具有與活性化合物 官能團連接的生物不穩(wěn)定保護基的化合物。母體化合物的烷基化、?；蚱渌H脂性修飾 已經(jīng)用于產(chǎn)生具有最佳物理特性的化合物的前藥，它們可有效地轉(zhuǎn)化為母體化合物。限制口服生物利用度的因素通常是從胃腸道吸收以及腸壁和肝的首過排泄。通過 GI道跨細胞吸收的優(yōu)化需要D(,4)大于0。但是，分配系數(shù)的優(yōu)化確保了成功。前藥可能必 須要避免在腸細胞中的活性流出轉(zhuǎn)運蛋白。腸細胞中的細胞內(nèi)代謝可以通過流出泵返回至 腸腔導致代謝物的被動轉(zhuǎn)運或主動轉(zhuǎn)運。前藥還必需要抵抗血液中不期望的生物轉(zhuǎn)化，然 后達到靶細胞或受體。量D(,4)指的是分配系數(shù)，其中將水相緩沖至pH 7. 4。分配系數(shù)是所有形式的化合 物(離子化的+非離子化的)在兩相中的每一項中濃度總和之比。Log D被定義為溶質(zhì)的 多種形式在一種溶劑中濃度的總和與其形式在另一種溶劑中濃度的總和之比的對數(shù)。盡管推定的前藥有時可以合理地基于存在于分子中的化學官能度得到關注，但是 發(fā)現(xiàn)前藥仍然保持實踐經(jīng)驗。有關來自體內(nèi)轉(zhuǎn)化的速率和產(chǎn)物的預測充滿了不確定性?；?性化合物的化學修飾產(chǎn)生了完全新的分子實體，它可以顯示母體化合物中不存在的不期望 的物理、化學和生物特性。如果多種途徑產(chǎn)生大量代謝物，則對鑒定代謝物的調(diào)節(jié)需求可能 提出了挑戰(zhàn)。因此，鑒定前藥仍然是不確定和挑戰(zhàn)性的實踐。另外，評價潛在前藥的藥物動 力學特性是一個具有挑戰(zhàn)性的和昂貴的任務。從動物模型產(chǎn)生的藥物動力學結(jié)果可能難以 推至人體。本發(fā)明的目的是提供用于治療感染HIV-I的宿主的新化合物、方法和組合物。本文所用的術語“一個”或“一種”實體指的是一個(種)或多個(種)該實體；例 如，一種化合物指的是一種或多種化合物或至少一種化合物。因此，術語“一個”(“一種”)、 “一個(種)或多個(種)”和“至少一個(種)”在本文中能互換應用。短語“如上文所定義”指的是在發(fā)明概述中或最寬的權利要求中所提供的每個基 團的最寬定義。在下文所提供的所有其它實施方案中，能存在于每個實施方案中的并且未 明確定義的取代基保持在發(fā)明概述中所提供的最寬定義。本文所用的術語“任選的”或“任選地”指的是隨后描述的事件或情況可以發(fā)生， 但是不必須發(fā)生，并且該描述包括所述事件或情況發(fā)生的情形以及所述事件或情況不發(fā)生 的情形。例如，“任選取代的”指的是任選取代的基團可以包括氫或取代基。除非另有定義，否則本文所用的技術和科學術語具有本發(fā)明所屬技術領域的技 術人員通常理解的含義。本文參考本領域技術人員已知的多種方法和材料。給出藥理 學的一般原理的標準參考著作包括Goodman和Gilman的The Pharmacological Basis
8of Therapeutics (治療的藥理學基礎)，第 10 版，McGraw Hill Companies Inc.，New York(2001)。在實施本發(fā)明時可以應用本領域技術人員已知的任何適合的材料和/或方 法。但是，描述了優(yōu)選的材料和方法。除非另有說明，否則下面的描述和實施例中所提及的 材料、試劑等可從商業(yè)來源獲得。無論是在連接詞還是在權利要求的主體中，本說明書中所應用的術語“包含”和 “包括”應當被解釋為具有開放的含義。也就是說，該術語應當與術語“至少具有”或“至少 包括”作相同解釋。當在方法的上下文中應用時，術語“包括”指的是該方法至少包括所述 的步驟，但也可以包括另外的步驟。當在化合物或組合物的上下文中應用時，術語“包括”指 的是該化合物或組合物至少包括所述的特征或成分，但是也可以包括另外的特征或成分。本文所用的術語“約”指的是近似、在......左右、大致或在......周圍。當術
語“約”與數(shù)值范圍聯(lián)用時，它通過將界限擴展至高于或低于所給出的數(shù)值來調(diào)整該范圍。 通常，本文所用的術語“約”用于將數(shù)值調(diào)整至高于或低于所述數(shù)值的20 %。本文所用的變量數(shù)值范圍的描述指定含義是可以應用等于該范圍內(nèi)任意值的變 量實施本發(fā)明。因此，對內(nèi)部分散的變量而言，該變量可以等于所述數(shù)值范圍內(nèi)的任意整數(shù) 值，包括該范圍的端點。類似地，就內(nèi)部連續(xù)的變量而言，該變量可以等于所述數(shù)值范圍內(nèi) 的任意實際值，包括該范圍的端點。作為實例，描述為0至2之間的值的變量可以是0、1或 2，對該變量而言是內(nèi)部分散的，并且可以是0. 0,0. 1,0. 01,0. 001或任意其它實際值，對該 變量而言是內(nèi)部連續(xù)的?？梢岳斫獗景l(fā)明化合物所施用的個體不一定患有具體的創(chuàng)傷狀態(tài)。實際上，可以 在任何癥狀發(fā)生前以預防方式施用本發(fā)明化合物。術語“治療”、“治療地”和這些術語的變 換用于包括治療、緩解和預防應用。因此，本文所用的“治療或緩解癥狀”指的是與不接受 這種施用的個體相比減輕、預防和/或逆轉(zhuǎn)施用本發(fā)明化合物的個體的癥狀。當任何變量(例如R1、R4\ Ar、X1或Het)在描繪和描述本發(fā)明應用或請求保護的 化合物的組成或任意式上一次以上出現(xiàn)時，其每次出現(xiàn)的定義與其另一次出現(xiàn)的定義彼此 獨立。另外，如果這種化合物產(chǎn)生穩(wěn)定化合物，則取代基和/或變量的組合是允許的。鍵末端的符號“ *，，或穿過鍵所繪的“------，，各自指的是官能團或其它化學基團
與分子(所述官能團或其它化學基團是該分子的一部分)的其余部分的連接點。因此，例 如
“雜烷基芳基”、“鹵代烷基雜芳基”、“芳基烷基雜環(huán)基”、“烷基羰基”、“烷氧基烷基”等。當 術語“烷基”作為后綴用在另一個術語后面時，如在“苯基烷基”或“羥基烷基”中，這旨在指 的是被1至2個選自其它特別命名的基團的取代基取代的如上文所定義的烷基。因此，例 如“苯基烷基”指的是具有1至2個苯基取代基的烷基，并且因此包括芐基、苯基乙基和聯(lián) 苯基?！巴榛被榛笔蔷哂?至2個烷基氨基取代基的烷基?！傲u基烷基”包括2-羥基 乙基、2-羥基丙基、1-(羥基甲基)-2_甲基丙基、2-羥基丁基、2，3-二羥基丁基、2-(羥基甲 基)、3_羥基丙基等。因此，本文所用的術語“羥基烷基”用于定義下文所定義的雜烷基的亞類。術語_(芳)烷基指的是未取代的烷基或芳烷基。術語(雜)芳基指的是芳基或雜方基。本發(fā)明的一個實施方案提供了式I化合物及其可藥用鹽，其中R1、! 2、! 3、! 4、! 5、! 6、 R7a> R7\ Ar、X1、X2和η如上文所定義。本發(fā)明在第二個實施方案中提供了式I化合物，其中X1是N ;Χ2是CH。對本實施 方案和如下實施方案中的取代基定義，在說明書實施方案中沒有特別限制的，其保持發(fā)明 概述中定義的最寬泛的范圍。另外，所有實施方案均包括式I化合物的可藥用鹽。本發(fā)明在第三個實施方案中提供了式I化合物，其中X1是N ；X2是CH ；Ar是被2 個基團取代的苯基，所述基團在每次出現(xiàn)時獨立地選自鹵素、氰基和CV6鹵代烷基；R1是氟； 并且 R3 選自:(i) CH2O-C ( = 0) (CH2)nCO2R4,其中 η是2 至 5，(ii) CH2OCOR5 ；禾口 (iii)C( = 0) R5。本發(fā)明在第四個實施方案中提供了式I化合物，其中X1是N ；X2是CH ；Ar是被2 個基團取代的苯基，所述基團在每次出現(xiàn)時獨立地選自鹵素、氰基和CV6鹵代烷基；R1是氟； 并且 R3 是 CH2O-C( = 0) (CH2)nCO2R4 ；η 是 2。本發(fā)明在第五個實施方案中提供了式I化合物，其中X1是N ;Χ2是CH ;Ar是3，5_二 氰基-苯基、3-氯-5-氰基-苯基或3-氰基-5- 二氟甲基-苯基；R1是氟；R2是溴、氯或 CV6 烷基；R3 是選擇的 CH2O-C ( = 0) (CH2)nCO2R4 并且 η 是 1 至 4。本發(fā)明在第六個實施方案中提供了式I化合物，其中X1和X2是N。本發(fā)明在第七個實施方案中提供了式I化合物，其中X1和X2是N ；Ar是被2個基 團取代的苯基，所述基團在每次出現(xiàn)時獨立地選自鹵素、氰基和鹵代烷基；R1是氟；并 且 R3 選自:(i)CH2O-C( = 0) (CH2)nCO2R4,其中 η 是 2 至 5 ； (ii)CH2OCOR5 ；和(iii)C( = 0) R5。本發(fā)明在第八個實施方案中提供了式I化合物，中X1和X2是N ；Ar是被2個基團 取代的苯基，所述基團在每次出現(xiàn)時獨立地選自鹵素、氰基和C^6鹵代烷基；R1是氟；R3是 CH2O-C( = 0) (CH2)nCO2R4 ；η 是 2。本發(fā)明在第九個實施方案中提供了式I化合物，其中X1和X2是N ;Ar是3，5_ 二氰 基-苯基、3-氯-5-氰基-苯基或3-氰基-5- 二氟甲基-苯基；R1是氟；R2是氯、溴或CV6 烷基；R3 是 CH2O-C( = 0) (CH2)nCO2R4 并且 η 是 2 至 5。本發(fā)明在第十個實施方案中提供了式I化合物，其選自琥珀酸單-{3-[4_溴-3-(3_氯-5-氰基-苯氧基)-2_氟-芐基]-吡唑并[3， 4-b]吡啶-1-基甲基}酯；琥珀酸單-{3-[4-溴-3-(3，5-二氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3,4-b]吡啶-ι-基甲基}酯；琥珀酸單-{3-[4_溴-3-(3_氯-5-氰基-苯氧基)-2_氟-芐基]-吡唑并[3， 4-c]噠嗪-1-基甲基}酯；琥珀酸單-{3-[4-溴-3-(3，5-二氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3,4-c] 噠嗪-1-基甲基}酯；琥珀酸單-{3-[4-氯-3-(3-氯_5_氰基-苯氧基)_2_氟-芐基]-吡唑并[3， 4-c]噠嗪-1-基甲基}酯；3-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4_c]噠嗪甲 酸甲酯；戊二酸單-{3-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)_2_氟-芐基]-吡唑并[3， 4-c]噠嗪-1-基甲基}酯；乙酸3-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4_c]噠 嗪-1-基甲基酯；(S) -2-氨基-3-甲基-丁酸3-[4-溴_3_(3-氯_5_氰基-苯氧基)_2_氟-芐 基]-吡唑并[3，4-c]噠嗪-1-基甲基酯；{3-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4_c]噠嗪基 甲氧基羰基甲氧基}-乙酸；3-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4_c]噠嗪甲 酸乙酯；3-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4_c]噠嗪甲 酸異丙酯；琥珀酸單-{3-[4-氯-3-(3，5-二氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3,4-c] 噠嗪-1-基甲基}酯；3-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4_c]噠嗪甲 酸2- 二甲基氨基-1-甲基-乙基酯；戊二酸單-{3-[4-氯-3-(3-氯_5_氰基-苯氧基)_2_氟-芐基]-吡唑并[3， 4-c]噠嗪-1-基甲基}酯；己二酸單-{3-[4_溴-3-(3_氯-5-氰基-苯氧基)-2_氟-芐基]-吡唑并[3， 4-c]噠嗪-1-基甲基}酯；3-[3-(1-乙?；?IH-吡唑并[3，4_c]噠嗪_3_基甲基)_6_溴_2_氟-苯氧 基]-5-氯-芐腈；3-{6_溴-2-氟-3-[1-(吡啶-3-羰基)-1Η-吡唑并[3,4-c]噠嗪_3_基甲基]-苯 氧基}-5-氯-芐腈3-[6_溴-2-氟-3-(l-異丁?；?IH-吡唑并[3,4-c]噠嗪_3_基甲基)-苯氧 基]-5-氯-芐腈；3-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4_b]吡啶甲 酸(2-氨基-乙基)-甲基-酰胺；3-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4_b]吡啶甲 酸(2-氨基-乙基)-酰胺；
磷酸單-{3-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4_b] 吡啶-1-基甲基}酯；和磷酸單-{3-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4_c] 噠嗪-1-基甲基}酯。在本發(fā)明的第十一個實施方案中提供了治療HIV-I感染或預防HIV-I感染或者治 療AIDS或ARC的方法，該方法包括給需要的宿主施用治療有效量的式I化合物，其中R1、! 2、 R3、R4、R5、R6、R7a、R7b、Ar、X1, X2 和 η 如上文所定義。在本發(fā)明的第十二個實施方案中提供了治療HIV-I感染、預防HIV-I感染或者治 療AIDS或ARC的方法，該方法包括給需要的宿主共同施用治療有效量的至少一種選自HIV 蛋白酶抑制劑、核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、整合酶抑制劑、CCR5拮抗劑 和病毒融合抑制劑的化合物以及式I化合物，其中R\R2,R3,R\R5,R6,R7\R7\Ara\X2和 η如上文所定義。在本發(fā)明的第十三個實施方案中提供了治療HIV-I感染、預防HIV-I感染或者治 療AIDS或ARC的方法，該方法包括給需要的宿主共同施用治療有效量的至少一種選自齊 多夫定、拉米夫定、去羥肌苷、扎西他濱、司他夫定、emtricibine、阿巴卡韋、替諾福韋、依 法韋侖、奈韋拉平、地拉韋啶、依曲韋林(etravirine)、沙奎那韋、利托那韋、奈非那韋、茚 地那韋、氨普那韋、阿扎那韋(atazanavir)、洛匹那韋、恩夫韋地(enfuvirtide)、馬拉維若 (maraviroc)和 raltegravin 的化合物以及式 I 化合物，其中 R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7a、R7b、 ArJ1J2和η如上文所定義。在本發(fā)明的第十四個實施方案中提供了在感染HIV-I的宿主中抑制HIVRT的方 法，該方法包括給需要的宿主施用治療有效量的式I化合物，其中R1、R2> R3> R4> R5> R6> R7a、 R7\Ar,X\X2和η如上文所定義。在本發(fā)明的第十五個實施方案中提供了在感染HIV-I的宿主中抑制HIVRT的方 法，其中所述HIVRT與野生型HIVRT相比具有至少一種突變，該方法包括給需要的宿主施用 治療有效量的式I化合物，其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7a> R7b、Ar、X1、X2和η如上文所定義。在本發(fā)明的第十六個實施方案中提供了在感染HIV-I的宿主中抑制HIVRT的方 法，其中所述HIVRT與野生型HIVRT相比具有至少一種突變并且顯示對奈韋拉平、地拉韋 啶、依法韋侖和依曲韋林的敏感性降低，該方法包括給需要的宿主施用治療有效量的式I 化合物，其中 R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7a、R7b、Ar、X1、X2 和 η 如上文所定義。在本發(fā)明的第十七個實施方案中提供了藥物組合物，該藥物組合物包含式I化合 物和至少一種可藥用載體、賦形劑或稀釋劑。本文所用的術語“烷基”指的是含有1至10個碳原子的無支鏈的或支鏈的飽和的 單價烴殘基。術語“低級烷基”指的是含有1至6個碳原子的直鏈或支鏈烴殘基。本文所用 的"C1,烷基”指的是包含1至10個碳的烷基。烷基的實例包括但不限于低級烷基，包括甲 基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基或戊基、異戊基、新戊基、己基、庚基和辛基。當術語“烷基”用作下列其它術語的后綴時，例如在“苯基烷基”或“羥基烷基”中， 它旨在指的是被1至2個選自其它特別命名的基團的取代基取代的如上文所定義的烷基。 因此，例如“苯基烷基”指的是基團R’ R”-，其中R’是苯基，并且R”是本文中所定義的亞烷 基，可以理解，苯基烷基的連接點在亞烷基上。芳基烷基的實例包括但不限于芐基、苯基乙基、3-苯基丙基。術語“芳基烷基”或“芳烷基”可以作同樣的解釋，除了 R’為芳基?！巴榛?氨基烷基”是具有1至2個烷基氨基取代基的烷基?！傲u基烷基”包括2-羥基乙基、2-羥基 丙基、1_(羥基甲基)-2_甲基丙基、2-羥基丁基、2，3-二羥基丁基、2_(羥基甲基)、3_羥基 丙基等。因此，本文中所用的術語“羥基烷基”用于定義下面所定義的雜烷基的亞類。除非另外說明，本文中所用術語“亞烷基”指的是具有1至10個碳原子的 二價飽和線性烴基(例如(CH2)n)或具有2至10個碳原子的支鏈飽和二價烴基(例 如-CHMe-或-CH2CH(i-Pr) CH2-)。除了亞甲基(-CH2-)的情況，亞烷基的開放的化合價并非 在相同的原子上。亞烷基的實例包括但不限于亞甲基、亞乙基、亞丙基、2-甲基-亞丙基、1， 1- 二甲基-亞乙基、亞丁基、2-乙基亞丁基。本文所用的術語“鏈烯基”指的是具有2至10個碳原子的具有一個或兩個烯雙鍵 [優(yōu)選一個烯雙鍵]的未取代的烴鏈基團。本文所用的“C2_1(l鏈烯基”指的是包含2至10 個碳的鏈烯基。實例是乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基(烯丙基)或2- 丁烯基(巴豆基)。本文所用的術語“環(huán)烷基”指的是含有3至8個碳原子的飽和碳環(huán)，即環(huán)丙基、環(huán) 丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基或環(huán)辛基。本文所用的“C3_7環(huán)烷基”指的是在碳環(huán)中包含3-7 個碳的環(huán)烷基。本文中所用術語“鹵代烷基”指的是如上文所定義的非支鏈或支鏈的烷基，其中1、 2、3或更多的氫原子被鹵素取代。實例為1-氟甲基、1-氯甲基、1-溴甲基、1-碘甲基、二氟 甲基、三氟甲基、三氯甲基、三溴甲基、三碘甲基、1-氟乙基、1-氯乙基、1-溴乙基、1-碘乙 基、2-氟乙基、2-氯乙基、2-溴乙基、2-碘乙基、2，2- 二氯乙基、3-溴丙基或2，2，2-三氟乙基。本文中所用術語“烷氧基”指的是-0-烷基，其中烷基如上文所定義，例如甲氧基、 乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、己氧基，包括它們的 異構(gòu)體。本文中所用術語“低級烷氧基”指的是具有如前所定義的“低級烷基”的烷氧基。 本文中所用術語"C1,烷氧基”指的是-0-烷基，其中烷基是C1,。本文所用的術語“烷基磺酰基”和“芳基磺?；敝傅氖鞘?s( = 0)2R基團，其中 R分別是烷基或芳基，并且烷基和芳基如本文所定義。本文中所用術語“鹵素”或“鹵代”指的是氟、氯、溴或碘。本文中所用術語“氰基”指的是通過三鍵與氮連接的碳，即-C E N。本文所用的術 語“硝基”指的是基團-no2。本文所用的術語“氨基烷基”、“烷基氨基烷基”和“二烷基氨基烷基”分別指的是 NH2 (亞烷基)-、RHN(亞烷基)-和R2N(亞烷基)-，其中R是烷基，并且亞烷基和烷基是均如 本文所定義。本文所用的"C1-^l烷基氨基”指的是氨基烷基，其中烷基是C1,。本文所用的 "C1^10烷基-氨基-c2_6烷基”指的是C1,烷基氨基(亞烷基)2_6，其中烷基是C1,并且亞烷基 是(CH2)2_6。當亞烷基包含三個或三個以上碳原子時，亞烷基可以是直鏈的，例如-(CH2)4-; 或支鏈的，例如-(CMe2CH2)-。本文所用的術語“天然存在的氨基酸”指的是天然存在的氨基酸的L-異構(gòu)體。天 然存在的氨基酸是甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、絲氨酸、甲硫氨酸、蘇氨酸、 苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、半胱氨酸、脯氨酸、組氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、谷氨酰 胺、Y-羧基谷氨酸、精氨酸、鳥氨酸和賴氨酸。除非另有說明，否則本申請中涉及的所有氨基酸均是L-型。本文所用的術語“疏水性氨基酸”指的是甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨 酸、異亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、色氨酸或脯氨酸。天然存在的氨基酸的側(cè)鏈(其應用不 意味著在連接分子其余部分的點上存在任何立體化學構(gòu)型)包括氫；甲基；異丙基；異丁 基；仲丁基；-CH2OH ；-CH(OH) CH3 ；-CH2SH ；-CH2CH2SMe ；-(CH2)pC0R，其中 R 是-OH 或-NH2 并且 ρ 是 1 或 2 ；- (CH2) ΓΝΗ2，其中 q 是 3 或 4 ；- (CH2) 3_NHC ( = NH) NH2 ；-CH2C6H5 ；-CH2-p-C6H4-OH ； (3-二氫吲哚基)亞甲基；(4-咪唑基)亞甲基。A-M. Vandamme ^A (Antiviral Chemistry & Chemotherapy，19989 187-203) 開了在人中進行的HIV-I感染的目前HAART臨床治療，其包括至少三種藥物組合。高活性 的抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療(HAART)通常由具有核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NRTI)、非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑 制劑(NNRTI)和蛋白酶抑制劑(PI)的組合治療組成。這些化合物抑制病毒復制所需的生 物化學過程。盡管HAART已經(jīng)顯著地改變了 HIV感染的人的預后，但是目前的治療仍然存 在許多缺陷，包括非常復雜的劑量方案和可能極為嚴重的副作用(A. Carr和D. A. Cooper, Lancet 2000 356(9239) =1423-1430) 0另外，這些多藥物治療無法消除HIV-I并且長期治 療通常導致多藥耐藥性，因此，限制了它們在長期治療中的應用。開發(fā)能夠與NRTI、NNRTI、 PI和病毒融合抑制劑組合應用的新治療以提供更好的HIV-I治療仍然是優(yōu)先考慮的。典型的適合的NRTI包括齊多夫定(AZT ； RETROVIR )；去羥肌苷(ddl ； VIDEX )；扎西他濱(ddc ； HIVID )；司他夫定(d4T ； ZERIT )；拉米夫定 (3TC ； EPIVIR )；阿巴卡韋(ZIAGEN );阿德福韋二 匹伏酯[雙-(POM) -PMEA ； PREVON ]；洛布卡韋(BMS-180194)，即 EP-0358154 和 EP-O736533 中公開 的核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑；BCH-10652，即BiochemPharma研發(fā)中的逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑 (BCH-10618 和 BCH-10619 的外消旋混合物形式)；Triangle Pharmaceuticals 研發(fā)中 的 emitricitabine[(-)-FTC] ；Vion Pharmaceuticals 獲得許可的 β -L-FD4 (也稱作 3-L-D4C和命名的 3-L-2，，3，_雙脫氧(dicleoxy)-5_氟-胞苷(cytidene)) ；EP-0656778 中公開和Triangle Pharmaceuticals獲得許可的DAPD、嘌呤核苷、(-)-β-D-2，6-二氨 基-嘌呤二氧戊環(huán)；和洛德腺苷(FddA)、9_(2，3-雙脫氧-2-氟-β-D-蘇型-呋喃戊糖基) 腺嘌呤，即U. S. Bioscience Inc.研發(fā)的酸穩(wěn)定的基于嘌呤的逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑。典型的適合的NNRTI包括奈韋拉平(BI-RG-587 ； VIRAMUNE )；地拉韋啶 (BHAP, U-90152 ；RESCRIPTOR )；依法韋侖(DMP-266 ；SUSTIVA )；和依曲韋 林(TMC-125，INTELENCI )。其它研究中的 NNRTI 包括但不限于 PNU-142721、Pfizer 研發(fā)中的呋喃并吡啶-硫代-嘧啶；AG-1549(在先的Shionogi # S-1153) ；WO 96/10019中 公開的碳酸5-(3，5- 二氯苯基)-硫代-4-異丙基-l-(4-吡啶基)甲基-IH-咪唑-2-基 甲酯；MKC-442(l-(乙氧基-甲基)-5-(1-甲基乙基)_6_ (苯基甲基)-(2，4 (1H，3H)-嘧啶 二酮)；和(+)_ 胡桐素(calanolide)A(NSC-675451)和 B，即美國專利 US 5，489，697 中公 開的香豆素衍生物。典型的適合的PI包括沙奎那韋(Ro 31-8959 ； INVIRASE ； FORTOVASE )；利托那韋(ABT-538 ； NORVIR )；茚地那韋(MK-639 ； CRIXIVAN )；奈非那韋(nelfnavir) (AG-1343 ； VIRACEPT )；氨普那 韋(141W94 ； AGENERASE )；拉西那韋(BMS-234475) ；DMP-450, S卩 Triangle Pharmaceuticals 研發(fā)中的環(huán)脲；BMS-2322623，即 Bristol-MyersSquibb 研發(fā)中的
14作為第2代HIV-I PI的氮雜肽；Abbott研發(fā)中的ABT-378 ；和AG-1549，即Agouron Pharmaceuticals, Inc.研發(fā)中的咪唑氨基甲酸酯。其它抗病毒藥包括羥基脲、利巴韋林、IL-2、IL-12、噴他夫西。羥基脲(Droxia)， 即顯示對去羥肌苷活性具有協(xié)同作用并且與司他夫定一起研究的核糖核苷三磷酸還原酶 抑制劑。IL-2(阿地白介素；PROLEUKIN )公開在 Ajinomoto EP-0142268、Takeda EP-0176299 和 Chiron U. S. Pat. Nos. RE 33，653、4，530，787、4，569，790、4，604，377、 4，748，234,4, 752，585 和 4，949，314 中。噴他夫西(FUZEON )，即抑制 HIV-I 與靶膜 融合的36-氨基酸合成肽。將噴他夫西(3-100mg/天)作為連續(xù)皮下輸注或與依法韋侖和 2PI 一起給對三種組合治療頑固性的HIV-I陽性患者注射給予；優(yōu)選應用IOOmg/天。利巴 韋林，即Ι-β-D-呋喃核糖基-1H-1，2，4-三唑-3-甲酰胺。術語“羧基CV7烷基”或"(V7羧基烷基”或表示如上述定義的Cw烷基，其中烷基 的至少一個氫原子被羧基代替。常用縮略語包括乙酰基(Ac)、大氣壓(Atm)、叔丁氧基羰基(Boc)、焦碳酸二叔丁 酯或boc酸酐(BOC2O)、芐基(Bn)、丁基(Bu)、化學文摘登記號(CASRN)、芐基氧基羰基(CBZ 或 Z)、l，5-二氮雜二環(huán)[4.3.0]壬-5-烯(DBN)、1，8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十——7-烯 (DBU)、N，N，-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)、1，2-二氯乙烷(DCE)、二氯甲烷(DCM)、偶氮二甲 酸二乙酯(DEAD)、二異丙基乙基胺(DIPEA)、二異丙基偶氮二甲酸酯(DIAD)、二異丁基氫 化鋁(DIBAL或DIBAL-H)、N, N- 二甲基乙酰胺(DMA)、4_N，N- 二甲基氨基吡啶(DMAP)、N， N-二甲基甲酰胺(DMF)、1_(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDCI)、二甲亞 砜(DMSO)、乙基(Et)、乙酸乙酯(EtOAc)、乙醇(EtOH)、2_乙氧基-2H-喹啉-1-甲酸乙酯 (EEDQ)、乙醚(Et2O)、0-(7_氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N，N，-四甲基脲鐺六氟磷酸鹽乙酸 (HATU)、乙酸(HOAc)、1-N-羥基苯并三唑(HOBt)、高壓液相色譜法(HPLC)、異丙醇(IPA)、 甲醇(MeOH)、熔點(mp)、MeSO2-(甲磺?；騇s)、甲基(Me)、乙腈(MeCN)、間-氯過苯甲 酸(MCPBA)、質(zhì)譜(ms)、甲基叔丁基醚(MTBE)、N-甲基嗎啉(NMM)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、 苯基(Ph)、丙基(Pr)、異丙基(i-Pr)、每平方英寸的磅數(shù)(psi)、吡啶(pyr)、室溫(rt或 RT)、叔丁基二甲基甲硅烷基或t-BuMe2Si (TBDMS)、三乙胺(TEA或Et3N)、三氟甲磺酸酯或 CF3SO2-(Tf)、三氟乙酸(TFA)、0-苯并三唑-1-基-N，N, N，，N，-四甲基脲鐺四氟硼酸鹽 (TBTU)、薄層色譜法(TLC)、四氫呋喃(THF)、三甲基甲硅烷基或Me3Si (TMS)、一水合對-甲 苯磺酸(TsOH或pTsOH)、4-Me-C6H4S02-或甲苯磺?；?Ts)、N-尿烷-N-羧基酸酐(UNCA)。 常規(guī)命名法包括前綴正(η)、異(i_)、仲(sec-)、叔(tert-)和新-在用于烷基時具有其通 常的含義(J. Rigaudy 禾口 D. P. Klesney, Nomenclature in Organic Chemistry (有機化學命 名法)，IUPAC 1979 Pergamon Press, Oxford.)。化合物和制備在下表中提供了本發(fā)明所包括的或?qū)儆诒景l(fā)明范圍內(nèi)的代表性化合物的實例。提 供下面這些實例和制備能使本領域技術人員更清楚地理解和實施本發(fā)明。不應將它們視為 對本發(fā)明范圍的限制，而僅僅是本發(fā)明的舉例說明和代表。通常，本申請中應用的命名法基于AUT0N0M v. 4. 0_用于生成IUPAC系統(tǒng)命名的 Beilstein Institute計算機系統(tǒng)。如果在描述的結(jié)構(gòu)與指定該結(jié)構(gòu)的名稱之間存在不一 致，則應當以描述的結(jié)構(gòu)為準。另外，如果結(jié)構(gòu)或結(jié)構(gòu)的一部分的立體化學未應用例如粗體或虛線表示，則該結(jié)構(gòu)或結(jié)構(gòu)的一部分被解釋為包括其所有立體異構(gòu)體。
本發(fā)明化合物可以通過下文所示的和所述的舉例說明性的合成反應流程圖中 描述的多種方法制備。用于制備這些化合物的原料和試劑通?？色@自商業(yè)供應商例如 Aldrich Chemical Co.或通過本領域技術人員已知的方法按照參考文獻中所給出的方法 制備，所述參考文獻例如 Fieser 禾口 Fieser' sReagents for Organic Synthesis(有機 合成試劑)；Wiley & Sons :New York,第 1—21 卷；R. C. LaRock, Comprehensive Organic 通過用甲醛處理稠合的吡唑而形成醇A-2，然后用酰基鹵化物、酸酐或活化的羧 酸衍生物酰化得到A-3來制備式I化合物的N-?；趸谆苌?A-3)，其中R’是羧
基_C2-5焼基、Ch0焼基、CH0 鹵代烷基、C1
19
Transformations (綜合有機轉(zhuǎn)化)，第 2 版 ffiley-VCH, New York 1999 ；Comprehensive OrganicSynthesis (綜合有機合成)，B. Trost 和 I. Fleming (編輯)第 1-9 卷 Pergamon， Oxford, 1991 ；Comprehensive Heterocyclic Chemistry (綜合雜環(huán)化學)，A. R. Katritzky 禾口 C.W.Rees(編輯)Pergamon, Oxford 1984,第 1-9 卷；Comprehensive Heterocyclic Chemistry II (綜合雜環(huán)化學 II)，A. R. Katritzky 和 C. W. Rees (編輯)Pergamon，Oxford 1996，第 1-11 卷；和 Organic Reactions (有機反應)，Wiley & Sons :New York，1991，第 1-40卷。下列合成反應流程圖僅僅是對可以合成本發(fā)明化合物的某些方法的舉例說明，并 且可以對這些合成反應流程圖進行多種調(diào)整，并且本領域技術人員參照本申請中所包含的 公開內(nèi)容將得到啟示。如果需要，可以應用常規(guī)技術分離和純化合成反應流程圖中的原料和中間體，所 述常規(guī)技術包括但不限于過濾、蒸餾、結(jié)晶、色譜法等。此類物質(zhì)可以應用常規(guī)方法表征，所 述常規(guī)方法包括物理常數(shù)和光譜數(shù)據(jù)。除非有相反的說明，否則本文中所述的反應優(yōu)選在惰性氣氛中、在大氣壓下、在反 應溫度范圍為約_78°C至約150°C、更優(yōu)選約0°C至約125°C、最優(yōu)選并且通常在約室溫(或 環(huán)境溫度)、例如約20°C下進行。下面流程圖中的某些化合物是用通用取代基描述的；但是，本領域技術人員將立 即理解，R基團的性質(zhì)可以加以改變以得到本發(fā)明中所涵蓋的多種化合物。另外，反應條件 是舉例性的，并且作為代替選擇的條件是眾所周知的。下面的實例中的反應順序不意味著 限制權利要求中所給出的本發(fā)明的范圍。流程圖A
^H,CH2OH/CH20C(=0)R'
N-NN-N ^-Ν
1 2 Vux
1 2 XMX
XMX
A-3
A-2
A-]
ΟΥ Y
OM P.
O
1
■ 2 XMX基-C1 -10 焼基、C2-I0 鏈烯基、c3_7環(huán)烷基、Ch6烷氧基、C1 -10孰基焼執(zhí)基、Cl—3焼基孰基_。1—10焼 氧基、CV3 二烷基氨基-C1,烷氧基、NR7aR7b、任選取代的苯基或任選取代的吡啶基或者C (= 0)R’包含α-氨基酸。類似地制備N-?；苌?Α-4)，但取消甲醛處理，并且用?；u化 物、酸酐或活化的羧酸衍生物?；吝虻?。通過用二烷基磷酸二酯代替得到Α-6，其中Y是 烷基，進一步脫烷基化得到Α-6，其中Y是氫、堿或堿陽離子鹽，由相應氯甲基化合物(Α-5) 制備磷?；趸谆苌?Α-6)。必需的為前體的式A-I的吡唑由J. Kennedy-Smith等 人在2007年8月15日提交的美國順序號US11/893，349中描述，并且將該文獻全部內(nèi)容并 入本文作為參考。制備式A-I化合物的方法可以在本文包含的參考實施例中找到。已經(jīng)廣泛研究了可以用于制備本發(fā)明化合物的活化的羧酸用于肽偶聯(lián)反應，并且 任何多種可代替選擇是適合的。由相應的氯甲基衍生物制備羥基甲基磷酸酯衍生物，用磷 酸二烷基酯處理，得到相應的膦酸二烷基酯，將其脫烷基化，得到本發(fā)明化合物。生物學測定可以通過實施例9中公開的酶抑制測定法測定體內(nèi)產(chǎn)生的稠合的_吡唑(A-I)抑 制HIVRT的能力。待解決的問題是遞送足量的HIV-I轉(zhuǎn)錄酶抑制劑以阻斷病毒復制和抑制 耐藥株的形成。實施例10和11中的藥物動力學測定用于評價口服劑量的前藥后全身循環(huán) 中形成的吡唑水平。劑量和施用可以將本發(fā)明化合物配制成多種口服施用劑型和載體?？诜┯每梢允瞧瑒?、包 衣片劑、錠劑、硬和軟明膠膠囊劑、溶液劑、乳劑、糖漿劑或混懸劑的形式。本發(fā)明化合物在 通過其它施用途徑施用時是有效的，包括連續(xù)(靜脈內(nèi)滴注)、局部、非腸道、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、 皮下、透皮(可以包括滲透促進劑)、口含、鼻部、吸入和栓劑施用等施用途徑。優(yōu)選的施用 方式通常是應用方便的每日劑量方案口服，可以根據(jù)疾病程度和患者對活性成分的響應進 行調(diào)整。本發(fā)明的一種化合物或多種化合物以及它們的可藥用鹽可以與一種或多種常規(guī) 賦形劑、載體或稀釋劑一起制成藥物組合物形式和單位劑量。所述藥物組合物和單位劑型 可以包含常規(guī)比例的常規(guī)成分，含有或不含有另外的活性化合物或成分，并且單位劑型可 以含有與將要應用的預期日劑量范圍相當?shù)娜魏芜m當?shù)挠行Я康幕钚猿煞?。藥物組合物可 以以如下形式應用對于口服應用而言，固體例如片劑或填充膠囊劑、半固體、散劑、緩釋制 劑或液體例如溶液劑、混懸劑、乳劑、酏劑或填充膠囊劑；或者對于直腸或陰道施用而言，栓 劑的形式；或者對于非腸道應用而言，無菌可注射溶液劑的形式。典型的制劑將含有約5% 至約95%的一種或多種活性化合物(w/w)。術語“制劑”或“劑型”旨在包括活性化合物的 固體和液體制劑，并且本領域技術人員將理解的是，活性成分可以存在于不同的制劑中，這 取決于靶器官或組織以及所需的劑量和藥物動力學參數(shù)。本文中所用的術語“賦形劑”指的是可用于制備藥物組合物的、通常是安全的、無 毒的并且無生物學上和其它方面不需要的性質(zhì)的化合物，并且包括對獸用和人類藥用而言 是可接受的賦形劑。本發(fā)明化合物可以單獨施用，但通常以與一種或多種適合的根據(jù)預期 施用途徑或標準藥物實踐選擇的藥物賦形劑、稀釋劑或載體的混合物的形式施用?；钚猿煞值摹翱伤幱名}”形式也可以初始賦予活性成分在非鹽形式中不存在的合 乎需要的藥物動力學特性，并且甚至可以在其體內(nèi)治療活性方面積極地影響活性成分的藥效學。短語化合物的“可藥用鹽”指的是藥學上可接受的并且具有母體化合物的所需藥理學 活性的鹽。此類鹽包括(1)與無機酸和有機酸形成的酸加成鹽，所述無機酸例如鹽酸、氫 溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；所述有機酸例如乙酸、丙酸、己酸、環(huán)戊烷丙酸、乙醇酸、丙酮酸、 乳酸、丙二酸、琥珀酸、蘋果酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、3-(4_羥基苯甲酰 基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1，2-乙烷-二磺酸、2-羥基乙磺酸、苯磺酸、 4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟腦磺酸、4-甲基二環(huán)[2. 2. 2]-辛-2-烯-1-甲酸、 葡庚糖酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、十二烷基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、羥基萘甲 酸、水楊酸、硬脂酸、粘康酸等；或者(2)母體化合物中存在的酸性質(zhì)子被金屬離子代替或 與有機堿配合而形式的鹽，所述金屬離子例如堿金屬離子、堿土金屬離子或鋁離子；所述有 機堿例如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨基丁三醇、N-甲基葡糖胺等。應當理解的是，所有 涉及的可藥用鹽包括本文定義的相同酸加成鹽的溶劑加成形式(溶劑化物)或晶型(多晶 型物)?！翱伤幱玫摹敝傅氖强捎糜谥苽渌幬锝M合物的部分，所述藥物組合物通常是安全 的、無毒的，并且無生物學上和其它方面不需要的性質(zhì)。固體形式的制劑包括散劑、片劑、丸劑、膠囊劑、扁囊劑、栓劑和可分散顆粒劑。固 體載體可以是一種或多種物質(zhì)，它們也可以用作稀釋劑、矯味劑、增溶劑、潤滑劑、助懸齊U、 粘合劑、防腐劑、片劑崩解劑或包囊材料。在散劑中，載體通常是精細粉碎的固體，它是與精 細粉碎的活性成分的混合物。在片劑中，活性組分通常與具有必需的粘合能力的載體以適 合的比例混合，并且壓制成所需的形狀和大小。適合的載體包括但不限于碳酸鎂、硬脂酸 鎂、滑石粉、糖、乳糖、果膠、糊精、淀粉、明膠、西黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、低熔 點蠟、可可脂等。除了活性成分以外，固體形式的制劑還可以含有著色劑、矯味劑、穩(wěn)定劑、 緩沖齊 、人工和天然甜味齊 、分散劑、增稠劑、增溶劑等。液體制劑也適于口服施用，液體制劑包括乳劑、糖漿劑、酏劑、水性溶液劑和水性 混懸劑。這些包括用于在應用前短時間內(nèi)轉(zhuǎn)化成液體形式制劑的固體形式制劑。乳劑可以 制備成溶液，例如水性丙二醇溶液，或者可以含有乳化劑，例如卵磷脂、脫水山梨醇單油酸 酯或阿拉伯膠。水性溶液可以如下制備將活性成分溶于水中并且加入適合的著色劑、矯味 劑、穩(wěn)定劑和增稠劑。水性混懸劑可以通過將精細粉碎的活性成分分散在含有粘稠物質(zhì)的 水中來制備，所述粘稠物質(zhì)例如天然或合成的膠、樹脂、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和其 它眾所周知的助懸劑。本發(fā)明化合物可以配制成用于非腸道施用(例如通過注射例如推注或連續(xù)輸 注)，并且可以以單位劑量形式存在于安瓿、預填充的注射器、小容量輸液或加有防腐劑的 多劑量容器中。組合物可以是例如混懸劑、溶液或者在油性或水性介質(zhì)中的乳劑之類的形 式，例如在水性聚乙二醇中的溶液劑。油性或非水性載體、稀釋劑、溶劑或介質(zhì)的實例包括 丙二醇、聚乙二醇、植物油(例如橄欖油)和可注射的有機酯(例如油酸乙酯)，并且可以 含有制劑物質(zhì)，例如防腐劑、潤濕劑、乳化劑或助懸劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑?？蛇x擇的是， 活性成分可以是粉末形式，所述粉末是通過無菌分離無菌固體或者通過冷凍干燥溶液得到 的，在應用前用適合的介質(zhì)例如無菌無熱原的水構(gòu)建?？梢詫⒈景l(fā)明化合物配制成可用于對表皮局部施用，例如軟膏劑、乳膏劑或洗劑， 或者配制成透皮貼劑。可以例如用水性或油性基質(zhì)、加入適合的增稠劑和/或膠凝劑配制
21軟膏劑和乳膏劑?？梢杂盟曰蛴托曰|(zhì)配制洗劑，通常還包含一種或多種乳化劑、穩(wěn)定 劑、分散劑、助懸劑、增稠劑或著色劑。適合在口腔中局部施用的制劑包括包含在矯味基質(zhì) 通常是蔗糖和阿拉伯膠或黃蓍膠中的活性劑的錠劑；包含在惰性基質(zhì)例如明膠和甘油或蔗 糖和阿拉伯膠中的活性成分的軟錠劑；和包含在適合的液體載體中的活性成分的漱口劑。本發(fā)明化合物可以配制成用于以栓劑形式施用。首先將低熔點蠟例如脂肪酸甘油 酯或可可脂的混合物熔化，并且例如通過攪拌將活性成分均勻分散。然后將熔化的均勻混 合物傾倒入適合大小的模具中，使其冷卻并且固化。本發(fā)明化合物可以配制成用于陰道施用。除了活性成分以外，子宮托、衛(wèi)生栓、乳 膏劑、凝膠劑、糊劑、泡沫劑或噴霧劑還可以含有本領域中已知的適合的那些載體。本發(fā)明化合物可以配制成用于鼻腔施用。通過常規(guī)方法例如用滴管、移液管或噴 霧器將溶液劑或混懸劑直接應用于鼻腔?？梢砸詥蝿┝炕蚨鄤┝啃问教峁┲苿?。在后面的 滴管或移液管的情況中，這可以由給患者施用適合的預定體積的溶液劑或混懸劑而實現(xiàn)。 在噴霧器的情況中，例如可以通過計量霧化噴霧泵而實現(xiàn)。本發(fā)明化合物可以配制成用于氣霧劑施用，特別是對呼吸道施用，并且包括鼻內(nèi) 施用?；衔锿ǔ＞哂欣缂s五(5)微米或以下級的小粒度。可以通過本領域公知的方式 例如通過微粉化得到這種粒度。將活性成分提供在具有適合的拋射劑的加壓包裝中，所述 拋射劑例如是氯氟碳(CFC)，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷或二氯四氟乙烷或二氧化碳或 其它適合的氣體。氣霧劑還可以方便地包含表面活性劑例如卵磷脂?？梢杂糜嬃块y控制藥 物劑量?？蛇x擇的是，可以以干粉形式提供活性成分，例如化合物在適合的粉末基質(zhì)例如乳 糖、淀粉、淀粉衍生物例如羥丙基甲基纖維素和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)中的粉末混合物。粉 末載體可以在鼻腔中形成凝膠。粉末組合物可以以單位劑型存在，例如明膠或泡罩包裝的 膠囊或藥筒，可以通過吸入器從其中施用粉末。當需要時，可以用適合活性成分的緩釋或控釋施用的腸包衣制備制劑。例如，本發(fā) 明化合物可以配制在透皮或皮下藥物遞送裝置中。當需要化合物緩釋并且當治療方案的患 者順應性為關鍵時，這些遞送系統(tǒng)是有利的。透皮遞送系統(tǒng)中的化合物通常附著于具有皮 膚粘性的固體支持物上。有關的化合物也可以與滲透增強劑組合，所述的滲透增強劑例如 月桂氮丨革酮(1-十二烷基氮雜_環(huán)庚烷-2-酮)。緩釋遞送系統(tǒng)通過外科或注射的方法皮 下插入至皮下層。皮下植入物是將化合物包封在脂溶性膜中制成，所述的脂溶性膜例如硅 酮橡膠或生物可降解的聚合物，例如聚乳酸。適合的制劑以及藥用載體、稀釋劑和賦形劑均描述于Remington =TheScience and Practice of Pharmacy (雷明頓藥學的科學與實踐)1995，Ε. W. Martin 編輯，Mack Publishing Company，第19版，Easton，Pennsylvania。專業(yè)制劑科學家可以在說明書教導 的范圍內(nèi)修飾制劑，以提供用于特別施用途徑的多種制劑但不會使得本發(fā)明的組合物不穩(wěn) 定或者不會降低其治療活性。為了使其在水中或其它載體中更為穩(wěn)定，可以對本發(fā)明化合物進行修飾，例如通 過較小的修飾(成鹽、酯化等)即可完成，這對本領域技術人員而言是熟知的。本領域技術 人員也可以容易地改變特別化合物的施用途徑和劑量方案，從而控制本發(fā)明化合物的藥物 動力學使其在患者中達到最大有益效果。本文中所用的術語“治療有效量”指的是在個體中減輕疾病癥狀所需要的量。劑量在每個特別病例中均應調(diào)整以符合個體的需要。劑量可以在較寬的范圍內(nèi)改變，它取決于 多種因素，例如待治療疾病的嚴重程度、患者的年齡和一般健康情況、患者在治療中應用的 其它藥物、施用的途徑和形式以及參與治療的醫(yī)師的偏好和經(jīng)驗。對于口服施用而言，在單 一治療和/或組合治療中，日劑量在每天約0. 01至約1000mg/kg體重之間應當是適合的。 優(yōu)選的日劑量在每天約0. 1至約500mg/kg體重之間，更優(yōu)選在0. 1至約100mg/kg體重之 間并且最優(yōu)選在1. 0至約10mg/kg體重之間。因此，對于70kg的人的施用而言，每天的劑 量范圍在約7mg至0. 7g之間。日劑量可以以單劑量或分劑量施用，典型地在每天1至5次 劑量之間。通常，治療開始時采用較小的劑量，它小于化合物的最佳劑量。然后，逐漸小量 增加劑量直至達到個體患者的最佳效果。在本文中所述疾病的治療中，技術人員無需過多 試驗并且根據(jù)個人的知識、經(jīng)驗和本申請的公開能夠確定對于給定的疾病和患者的本發(fā)明 化合物的治療有效量。在本發(fā)明的實施方案中，活性化合物或鹽可以與其它抗病毒藥物組合施用，所述 的其它抗病毒藥物例如核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、另外的非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、蛋白酶抑制 劑、整合酶抑制劑或者CCR5或CXCR4拮抗劑。另外，阻斷病毒?？吭冖?的化合物已經(jīng)被鑒 定并且可以與本發(fā)明化合物一起應用。當活性化合物或其衍生物或鹽與另外的抗病毒藥物 組合施用時，活性可以得到增加，超過母體化合物。當治療是組合治療時，此類施用可以與 所述核苷衍生物的施用同時進行或順序進行。因此，本文中所用的“同時施用”包括在相同 的時間或不同的時間施用藥物。兩種或多種藥物的同時施用可以通過含有兩種或多種活性 成分的單一制劑完成，或者通過單一活性成分的兩種或多種劑型的基本同時施用完成。另 外，本文所用的HIV-I感染的治療還包括治療或預防與HIV-I感染相關的疾病或病癥或由 其介導的疾病或病癥或者其臨床癥狀。實施例1琥珀酸單-{3-[4_溴-3-(3_氯_5_氰基-苯氧基)_2_氟-芐基]-吡唑并[3， 4-b]吡啶-1-基甲基}酯(I-I) 步驟1步驟1 在60°C、惰性氣氛中，將R_54(l. 6g)、37%甲醛水溶液和MeOH的混合物攪 拌過夜。將MeOH蒸發(fā)并且將產(chǎn)生的溶液用H2O稀釋，并且將產(chǎn)生的沉淀過濾，用H2O洗滌并 且風干，得到1.63g的10。步驟2 在室溫下，在 10(0. 488, lmmol)、璁珀酸酐(0. 15g，1. 5匪ol)、DMAP (6. lmg， 0. 05mmol)和DCM(IOmL)的懸浮液中加入DIPEA (0. 28mL, 1. 63mmol)并且將產(chǎn)生的混合物在 室溫下攪拌。該溶液在10分鐘內(nèi)變均勻。1小時后，將反應用另外的DCM(20mL)稀釋并且 用10% HCl水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，過濾并且蒸發(fā)。將膠狀殘留物與EtOAc —起研磨并 且超聲，得到白色粉末，將其過濾，用EtOAc洗滌并且干燥，得到0. 4g的I-I。從母液中又回收第二批 0. Igo 對 C25H17BrClFN4O5 分析的計算值C，51. 09 ；H, 2. 92 ；N, 9. 53 ；實測值=C, 51. 01 ；H, 2. 93 ；N, 9. 52。類似制備1-2，除了在步驟1中應用5-[6_溴-2-氟-3_(1H-吡唑并[3，4_c]噠 嗪-3-基甲基)_苯氧基]-異鄰苯二甲腈(R-58)代替R-54。實施例2琥珀酸單-{3-[4_溴-3-(3_氯_5_氰基-苯氧基)_2_氟-芐基]_吡唑并[3， 4-c]噠嗪-1-基甲基}酯(1-3)步驟1 將3- Γ6-溴-2-氟-3- (IH-吡唑并[3，4_c]噠嗪_3_基甲基)-苯氧 基]-5-氯-芐腈(R_73，1.32g，2. 88mmol)、37% 甲醛水溶液(IOOmL)和 MeOH(IOOmL)的懸 浮液在67°C下攪拌35小時。將揮發(fā)性溶劑蒸發(fā)并且將殘留物用H2O稀釋并且將產(chǎn)生的沉 淀過濾，用H2O洗滌并且風干，得到1. 27g的3-[6-溴-2-氟_3_(1_羥基甲基-IH-吡唑并 [3,4-c]噠嗪-3-基甲基)-苯氧基]-5-氯-芐腈(12)。步驟2 將 12(1. 28g，2. 62mmol)、琥珀酸酐(0. 39g，3. 93mmol)、DMAP (16mg， 0. 13mmol)、DIPEA(0. 73mL，4. 19mmol)和DCM(65mL)的混合物在室溫、惰性氣氛下攪拌 3小時。將揮發(fā)性溶劑蒸發(fā)并且將粗殘留物通過SiO2色譜法純化，用MeOH/DCM梯度(1 至4% MeOH)洗脫，得到0.75g的1_3，為棕色固體，將其在110°C下真空干燥過夜。對 C24H16BrClFN5O5 計算的分析值=C, 48. 29 ；H, 2. 85 ；N, 11. 73 ；實測值=C, 48. 31 ；H, 2. 68 ；N, 11. 57。類似制備1-4，除了在步驟1中將R-73用5-[6_溴-2-氟-3_(1H-吡唑并[3,4-c] 噠嗪-3-基甲基)-苯氧基]-異鄰苯二甲腈(R-77)代替。類似制備1-5，除了在步驟1中將R-73用5-[6_氯-2-氟-3_(1H-吡唑并[3，4_c] 噠嗪-3-基甲基)-苯氧基]-5-氯-芐腈(R-73a)代替。類似制備1-7，除了在步驟2中將琥珀酸酐用二氫_吡喃-2，6_ 二酮(戊二酸酐)代替。類似制備1-10，除了在步驟2中將琥珀酸用1，4_ 二噁烷-2，6-二酮(CASRN 4480-83-5)代替。類似制備1-12，除了在步驟1中將R-73用5_[6_氯_2_氟-3_(1H-吡唑并[3， 4-c]噠嗪-3-基甲基)-苯氧基]-異鄰苯二甲腈(R-73b)代替。類似制備1-14，除了在步驟1中將R-73用3_[6_氯_2_氟-3_(1H-吡唑并[3， 4-c]噠嗪-3-基甲基)-苯氧基]-5-氯-芐腈(R-73a)代替，并且在步驟2中將琥珀酸酐 用戊二酸酐代替。類似制備1-15，除了在步驟2中將琥珀酸酐用2，7-氧雜環(huán)庚烷二酮(己二酸酐， CASRN 2035-75-8)代替。實施例3乙酸3-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4_c]噠 嗪-1-基甲基酯(1-8)
24 在12(0. Ig,0. 2mmo)和 DCM(3mL)的溶液中加入吡啶(0. 08mL, 1. Ommol)和乙酸 酐(612mg，6mmol)。將產(chǎn)生的溶液在室溫、惰性氣氛下攪拌過夜。原料仍然存在并且再加 入等份的吡啶(0.08mL)和Ac20(0.612g)并且將產(chǎn)生的混合物在55°C下攪拌約5小時。 將揮發(fā)性內(nèi)容物蒸發(fā)并且將殘留物在制備型SiO2 TLC板上分兩批純化，用包含TEA的 60% EtOAc/己烷展開。將產(chǎn)物從板上洗脫并且從DCM/己烷中結(jié)晶，得到0. 076g的1_8 對 C22H14BrClFN5O3 分析的計算值C，49. 79 ；H, 2. 66 ；N, 13. 20 ；實測值=C, 49. 87 ；H, 2. 63 ；N, 12. 92。實施例4 (S) -2-氨基-3-甲基-丁酸3-[4-溴_3_ (3-氯_5_氰基-苯氧基)_2_氟-芐
基]-吡唑并[3，4-c]噠嗪-1-基甲基酯；鹽酸鹽(1-9) 步驟1 在12 (0. 200g, 0. 4mmol)和無水DMF (5mL)的溶液中加入TEA (0. 2當量)和 (S)-纈氨酸-N-羧基酸酐(0. 117g，0.48mmol)。將產(chǎn)生的溶液在室溫下攪拌2小時。將產(chǎn) 生的溶液在等體積的EtOAc和H2O之間分配并且分離EtOAc相。將水相用EtOAc萃取并且 將合并的萃取物干燥(MgSO4)，過濾并且蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物在制備型TLC板上純化，用包含 TEA的3. 5% MeOH/DCM展開，得到250mg的13，為粘稠黃色油狀物。步驟2 在用Ar氣流沖洗的包含13(55mg，0. 07mmol)、Et2O (ImL)和攪拌棒的小瓶 中加入1. OM HCVEt2O(0. 2ImL)。除去Ar管線，將小瓶封蓋并且攪拌3. 5小時。將固體離 心并且輕輕倒出液體。將固體懸浮于EtOAc/己烷中兩次，離心并且輕輕倒出液體。樣品仍 然包含某些原料并且重復該過程，除了再加入等份的HCl/ 二噁烷(2. 5當量)并且將溶液 攪拌6小時。類似制備第二批50mg并且將產(chǎn)物合并。將粗產(chǎn)物在真空烘箱中干燥，得到 64mg 的 1-9。實施例53-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4_c]噠嗪甲 酸甲酯(1-6)
2 在R-73 (0. 200g，0. 44mmol)的無水 THF(IOmL)溶液中加入 Me3SiCN (0. 19mL, 1.54mm0l)，然后加入0.95mL氯甲酸甲酯(0. 105g)和MeCN(2mL)的溶液。將產(chǎn)生的溶液在 室溫下攪拌1小時。將反應混合物在H2O和EtOAc之間分配并且將水層分離，并且再次用 EtOAc萃取。將合并的萃取物干燥(MgSO4),過濾，蒸發(fā)并且加入EtOAc/己烷，產(chǎn)生固體沉 淀。將固體反復與Et2O/己烷一起研磨，得到0.061的1-6，為黃色固體，將其在真空烘箱中 干燥過夜。類似制備1-9和1-20，除了將氯甲酸甲酯分別用氯甲酸乙酯和氯甲酸異丙酯代替。實施例63-[3-(1-乙?；?IH-吡唑并[3，4_c]噠嗪_3_基甲基)_6_溴_2_氟-苯氧 基]-5-氯-芐腈(1-16)在R-73 (0. 050g，0. llmmol)和干燥的 MeCN(3mL)的溶液中加入 Me3SiCN(0. ImL, 7 當量)和乙酰氯(0. 013g，0. 48mL的27mg AcCl和1. OmL MeCN的溶液)。在室溫下攪拌15 分鐘后，依次加入H20(20mL) ,EtOAc (30mL)和5% NaHCO3水溶液(5mL)。將EtOAc相分離并 且蒸發(fā)。將殘留物溶于DCM中，干燥(MgSO4),過濾并且蒸發(fā)，并且將產(chǎn)物通過從DCM/己烷 中重結(jié)晶純化，得到0. 39g的1-16，為淡棕色粉末。類似制備3-{6-溴-2-氟-3-[1_(卩比啶-3-羰基)-IH-吡唑并[3，4_c]噠嗪_3_基 甲基]-苯氧基}-5_氯-芐腈，除了將乙酰氯用煙酰氯代替，得到1-17 對C25H13BrClFN6O2 分析的計算值=C, 53. 26 ；H, 2. 32 ；N, 14. 91 ；實測值=C, 53. 31 ；H, 2. 22 ；N, 14. 72。實施例73-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4_b]吡啶甲 酸(2-氨基-乙基)_甲基-酰胺；鹽酸鹽(1-19)步驟1 在烘箱干燥的小瓶中加入DIPEA(0. 44mL, 2. 5mmol)、氨基甲酸叔丁 基-2-(甲基氨基)乙基酯(132. 4mg，0. 76mmol，CASRN122734-32-l)和 DCM(2mL)。在烘箱 干燥的微波燒瓶中加入碳酸雙-三氯甲基酯(0.090g)和DCM(4mL)并且冷卻至0°C。歷經(jīng) 約2分鐘，通過注射器將上述溶液加入至冷卻的碳酸化溶液中并且在0°C下攪拌5分鐘并且 將其溫至室溫。在產(chǎn)生的溶液中加入R_54(0.350g)，然后加入吡啶(0.2mL)。將產(chǎn)生的混 合物在密封試管中在70°C下加熱約16小時。將固體物質(zhì)過濾。固體和濾液均包含原料和 預期的脲。將粗產(chǎn)物應用三個制備型tic板純化，用75% EtOAc/己烷展開。將從板中回收 的產(chǎn)物應用至另一制備型tic板，并且依次用45% EtOAc/己烷、然后50% EtOAc/己烷展 開，然后從板上洗脫。將產(chǎn)生的產(chǎn)物與Et2O/己烷一起研磨并且過濾，得到0. OlSg的相應 的 Boc 脲(14)。步驟2 在 14(0. 035g，0. 053mmol)、DCM(2mL)、EtOAc (6 滴)和 MeOH(3 滴)的溶 液中加入IM HCVEt2O(0. 13mL)并且攪拌1小時，然后再加入等份的IM HCl/Et20。1小時后，幾乎沒有反應顯現(xiàn)，并且加入IMHCl/ 二噁烷(0. ImL)。攪拌1小時后，將揮發(fā)性溶劑蒸 發(fā)并且將殘留物與Et2O/己烷(1 1) 一起研磨，過濾并且在真空烘箱中干燥，得到31mg的 1-19，為白色粉末。實施例83-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4_c]噠嗪甲 酸2- 二甲基氨基-1-甲基-乙基酯；鹽酸鹽(1-13)步驟1 在烘箱干燥的小瓶中混合1- 二甲基氨基-2-丙醇(0. 73mL,6mmol)、干燥 的吡啶(0. 5mL,0. 5當量)和DCM(2. 5mL)。在第二個烘箱干燥的燒瓶中加入光氣(0. 6mL, 1當量，20%的甲苯溶液)和干燥的DCM(IOmL)并且將溶液在N2下維持并且冷卻至-40°C。 滴加小瓶中的內(nèi)容物并且將產(chǎn)生的溶液在-40°C下攪拌5分鐘，然后將其溫至室溫。在產(chǎn) 生的溶液中加入R_73(0. 225g，0. 49mmol)并且將產(chǎn)生的混合物攪拌3小時。將溶液用Et2O 稀釋并且從產(chǎn)生的沉淀中輕輕倒出液相。將固體用Et20(2X20mL)洗滌兩次，并且將上清 液合并并且蒸發(fā)。將殘留物在EtOAc (30mL)和2. 5% NaHCO3 (30mL)之間分配。將EtOAc溶 液用等體積的鹽水洗滌，干燥，過濾并且蒸發(fā)。將酯溶于DCM(2mL)中并且加入0.5mL HCl/ Et2O溶液(IM)。將產(chǎn)生的溶液攪拌10分鐘，輕輕倒出Et20/DCM上清液，將殘留物溶于Et2O 中，蒸發(fā)并且在真空烘箱中干燥，得到0. IlSg的1-13，其包含約12% R-73。實施例9磷酸單-{3-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4_c] 噠嗪-1-基甲基}酯(1-18)步驟1 在10 (1. 24g，2. 54mmol)和DCM(IOOmL)的懸浮液中加入亞硫酰氯 (2mL)。將產(chǎn)生的溶液攪拌1小時，然后蒸發(fā)并且再懸浮于苯中并且再蒸發(fā)，得到1. 32g的 3- [6-溴-3- (1-氯甲基-IH-吡唑并[3，4-b]吡啶3-基甲基)-2-氟-苯氧基]_5_氯-芐 腈(16)，為黃色泡沫狀物，將其用于下一步而無需另外純化。步驟2 在 16(1. 28g，2. 54mmol)、磷酸二叔丁酯(1. 06g，5. 08mmol)在 MeCN(70mL) 中的混合物中加入Ag2O(0. 59g，2. 54mmol)并且將產(chǎn)生的混合物在室溫下攪拌1天。將 產(chǎn)生的混合物通過CELITE 過濾，將濾液蒸發(fā)并且將粗產(chǎn)物通過SiO2色譜法純化，用 MeOH/DCM梯度(0至l%MeOH)洗脫，得到1. Ig的磷酸3_[4_溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧 基)-2_氟-芐基]-吡唑并[3，4-b]吡啶-1-基甲基酯二叔丁酯(18)步驟3 在18(0. 179g)的DCM(2mL)溶液中加入TFA(ImL)并且將產(chǎn)生的溶液在室 溫下攪拌1分鐘。用N2氣流將溶劑除去，同時維持該溶液在室溫或低于室溫。在殘留物中 加入苯(IOmL)并且真空除去苯，同時維持浴在室溫或低于室溫。將殘留物在無水MeCN中攪 拌并且加入1. OONNaOH(0. 53mL)，產(chǎn)生白色固體。將懸浮液攪拌5分鐘，然后過濾，用MeCN 洗滌并且將固體在真空干燥器中干燥并且在高真空下干燥過夜，得到0. 129g的1-18，為白 色固體:nmr (D2O) δ 4. 32 (2Η, s, CH2)，5. 95 (2H, d, CH2O)，7. 07-7. 41 (6H, m, Ar)，8. 01 (1H, d, Ar), 8. 47 (1H, d, Ar)。實施例10雜聚物HIV逆轉(zhuǎn)錄酶測定抑制劑IC5tl測定HIV-IRT 測定在 96-孔 Millipore MultiScreen MADVN0B50 培養(yǎng)板中應用總體積 為50 μ L的純化的重組酶和聚(rA)/寡(dT)16模板-引物進行。測定成分是50mM Tris/
27HCl、50mM NaClUmM EDTA、6mM MgCl2、5yM dTTP、0. 15 μ Ci [3H] dTTP、預先退火至 2. 5 μ g/ mL寡(dT)16的5μ g/mL聚(rA)和在終濃度為10% DMSO中的一定范圍抑制劑濃度。通過 加入4nM HIV-IRT啟動反應，并且在37°C下溫育30分鐘后，通過加入50 μ L冰冷的20% TCA終止，并且將其在4°C下沉淀30分鐘。將沉淀物通過給培養(yǎng)板施加真空收集并且依次 用3Χ200μ L的10% TCA和2X200 μ L的70%乙醇洗滌。最終，將培養(yǎng)板干燥并且在每孔 加入25 μ L閃爍液后用Packard TopCounter計數(shù)放射性。通過繪制％抑制與Iogltl抑制劑 濃度的關系圖計算IC5tl’ S。有代表性的IC5tl數(shù)據(jù)如表2所示。
實施例11 大鼠中藥物動力學參數(shù)測定應用重200_250g 的完整雄性 IGS Wistar Han Rats Crl :WI (GLx/BRL/Han) IGS BR(Hanover-Wistar)大鼠。將2只大鼠的組用于試驗化合物的各劑量水平。在整個試驗中， 允許動物正常取食和飲水。將試驗物質(zhì)配制成包含5mg羥丙甲纖維素2910，USP(50cps)； 4mg聚山梨酯80，NF ；9mg芐醇，NF ；適量無菌注射用水，USP 2或25mg/kg的R-73的水性 懸浮液，并且通過管飼法口服施用。在0. 083,0. 25,0. 5、1、2、4、6和8小時從處理大鼠的頸 靜脈套管和在24小時通過心臟穿刺采集血樣(0. 3mL)。將樣品收集在包含草酸鉀/NaF的 試管中并且在取樣過程中貯存在冰上。在_4°C下盡可能快地在冷凍離心機中旋轉(zhuǎn)樣品并 且將血漿樣品貯存在-80°C的冰箱中直至分析為止。將等份的血漿(0.05mL)與0. 15mL包 含200ng/mL內(nèi)標的乙腈混合。通過將來自未處理大鼠的0. 05-mL等份血漿與0. 15mL包含 200ng/mL內(nèi)標的乙腈混合制備一組校準標準品。將各血漿樣品和校準標準品劇烈渦旋，然 后以3500rpm離心20分鐘以沉淀蛋白質(zhì)。將來自離心的上清液(各150yL)轉(zhuǎn)移至96-孔 培養(yǎng)板中用于LC/MS/MS分析。樣品分析將前藥應用高效液相色譜法與串聯(lián)質(zhì)譜法(HPLC/MS/MS)進行分析。在 用于分離的ACE C18 50X2. Imm柱(5mm)前放置BDS C18保護柱。將電噴霧離子(ESI)用 于電離過程。流動相A包含5mM乙酸銨的水溶液與0. 1 %甲酸，并且流動相B包含50 50 MeOH 乙腈與0.1%甲酸。應用下列梯度與0.3mL/分鐘的流速進行洗脫。
將本發(fā)明化合物的有代表性的數(shù)據(jù)制成表3。實施例12狗中的藥物動力學參數(shù)測定應用重8_13kg的完整雌性Marshall Farm Beagle狗。將2只狗的組用于試驗 化合物的各劑量水平。在整個試驗中允許動物正常取食和飲水。將試驗物質(zhì)配制成包含 5mg羥丙甲纖維素2910，USP(50cps) ；4mg聚山梨酯80，NF ；9mg芐醇，NF ；適量無菌注射用 水，USP 2或25mg/kg R-73的水性懸浮液，并且通過管飼法口服施用。在0. 25、0. 5、1、2、 4、6、8和24小時從處理狗的頸靜脈采集血樣(1. OmL)。將樣品收集在包含草酸鉀/NaF的 試管中并且在取樣過程中貯存在冰上。在_4°C下盡可能快地在冷凍離心機中旋轉(zhuǎn)樣品，并 且將血漿樣品貯存在-80°C的冰箱中直至分析為止。將等份的血漿(0.05mL)與0. 15mL包 含200ng/mL內(nèi)標的乙腈混合。通過將來自未處理大鼠的0. 05-mL等份血漿與0. 15mL包含 200ng/mL內(nèi)標的乙腈混合制備一組校準標準品。將各血漿樣品和校準標準品劇烈渦旋，然 后以3500rpm離心20分鐘以沉淀蛋白質(zhì)。將來自離心的上清液(各150yL)轉(zhuǎn)移至96-孔 培養(yǎng)板中用于LC/MS/MS分析。如上述實施例所述進行樣品分析。 實施例13用于通過幾種途徑施用的目標化合物的藥物組合物如下面實施例所述制備?？诜┯玫慕M合物⑷
活性成分
乳糖 硬脂酸錢
20.0% 79.5% 0.5%將成分混合并且分配至膠囊中，每粒膠囊含有約IOOmg ；—粒膠囊約為總?cè)談┝俊？诜┯玫慕M合物(B) 將成分混合并且應用溶劑例如甲醇制粒。然后將制劑干燥并且用適合的壓片機制 成片劑(含有約20mg活性化合物)?？诜┯玫慕M合物(C) 將成分混合以形成用于口服施用的混懸液c非腸道制劑(D)
30 將活性成分溶于部分注射用水中。然后在攪拌下加入足量的氯化鈉使得溶液等 滲。用剩余的注射用水將溶液調(diào)整至足量，通過0. 2微米膜濾器過濾并且在無菌條件下包裝。栓劑(E)
將成分一起熔融并且在蒸氣浴上混合，并且傾倒入模具中，包含總重為2. 5g。 局部制劑(F) 將除水外的全部成分合并并且在攪拌下加熱至約60°C。然后在劇烈攪拌下加入足 量的約60°C的水以乳化成分，然后加入適量水至約100g。鼻腔噴霧劑(G)將包含約0. 025-0. 5%活性化合物的幾種水性混懸液制備成鼻腔噴霧劑。這些制 劑任選包含非活性成分，例如微晶纖維素、羧甲基纖維素鈉、右旋糖等?？梢约尤臌}酸以調(diào) 節(jié)pH?？梢酝ㄟ^鼻腔噴霧計量泵、典型地每次遞送約50-100微升制劑遞送鼻腔噴霧劑。典 型的劑量方案是每4-12小時噴2-4次。
參考實施例A 3-芳基氧基苯基乙酸Γ4-氯-3-(3_氯-5-氰基-苯氧基)_2_氟-苯基乙酸(R-1)和 「4-氯,-3- (3-氯,-5-氰某-苯氧某)-2-氟-苯某1 -乙酰氯,(R-2) 步驟1 在氮氣流下,在IOOmL圓底燒瓶中加入3，5_ 二氯芐腈(R_3a，7.0g， 40. 69mmol)和無水DMF (75mL)。在溶液中加入甲醇鈉(2. 26g，44. 76mmol)并且將產(chǎn)生的溶 液在室溫下進一步攪拌24小時。當反應完成時，在反應容器中滴加10% HCl水溶液。將 粗混合物用EtOAc萃取并且依次用水性酸、水和鹽水洗滌。將EtOAc萃取物干燥(Na2SO4)， 過濾并且將溶劑真空除去，得到粗固體，將其從己烷/丙酮中重結(jié)晶，得到5. 9g(86% )的 R-3b。步驟2 在 250mL 饒瓶中加入 R-3b(7. Og, 41. 766mmol)和 2，4，6-可力丁(IOOmL)。 將混合物加熱至170°C并且加入LiI (16. 76g，125. 298mmol)并且將反應混合物加熱4小時。 當R_3b耗盡時，將反應冷卻至室溫并且用10% HCl水溶液猝滅。將產(chǎn)生的混合物用EtOAc 萃取并且用水和鹽水洗滌。將EtOAc萃取物經(jīng)(Na2SO4)干燥并且過濾。將溶劑真空除去，得 到黃色油狀物，將其通過硅膠色譜法純化，用EtOAc/己烷(10 90)洗脫，得到6.0g(94%) 的 R_3c。步驟3 在 250mL 圓底燒瓶中加入 R_3c (6. Og, 39. 070mmol)和無水 THF (IOOmL)并 且將溶液冷卻至0°C。在冷卻的溶液中加入叔丁醇鈉(46.89g，4. 51mmol)并且將產(chǎn)生的溶 液攪拌1小時。滴加2，3，4-三氟-硝基-苯(6.928，39.070讓01)，同時維持反應在01， 直至苯酚完全耗盡。通過加入10% HCl水溶液將混合物猝滅并且將產(chǎn)生的混合物再攪拌1 小時。將混合物用EtOAc萃取并且用水和鹽水洗滌。將EtOAc干燥(Na2SO4)并且過濾。將 溶劑真空除去，得到黃色油狀物，將其通過SiO2柱色譜法純化，用己烷/EtOAc (92 8)洗 脫，得到 IOg (82% )的 R-4a。步驟4 將叔丁基乙基丙二酸酷(10. 31g，54. 80mmol)和無水NMP (200mL)的溶 液冷卻至0°C并且在氮氣氣氛下攪拌。在溶液中加入在礦物油中的NaH 40% (1. 84g， 76. 70mmol)。將混合物在0 °C下再攪拌1小時。然后，將雙-芳基醚R_4a(15. 00g，49. SOmmol)加入至反應容器中并且在氮氣、室溫下攪拌直至反應完成。通過在室溫下加入 10% HCl水溶液將混合物猝滅。將混合物用EtOAc萃取并且用水和鹽水洗滌。將EtOAc干 燥(Na2SO4)并且過濾。將溶劑真空除去，得到R_4b，為黃色油狀物，將其用于下一步而無需 任何進一步純化。步驟5 將二酯 R-4b(24. Og, 50. 117mmol)溶于二氯乙燒(300mL)和 TFA(6. 29g, 55. 13mmol)中并且加熱至75°C達24小時。將混合物冷卻至室溫并且將溶劑和過量的TFA 真空除去。將粗油狀物再溶于DCM中并且冷卻至0°C，并且加入NaHCOyK溶液。將混合物用 DCM萃取并且用水和鹽水洗滌。將DCM干燥(Na2SO4)，過濾并且將溶劑真空除去，得到黃色油 狀物。將粗油狀物通過SiO2色譜法純化，用己烷/EtOAc (90 10)洗脫，得到15.0g(80%) 的 R_4c。步驟6 在250mL圓底燒瓶中加入R_4c (8. 0，21. 12mmol)和無水EtOH。在反應容 器中加入氯化銨(2. 26g，42. 244mmol)、水(30mL)和鐵(1. 17g，21. 12mmol)。將反應攪拌并 且加熱至80°C達4小時。當R-4c耗盡時，將不均勻的混合物通過CELITE 墊過濾并且 將濾餅用EtOAc洗滌。將水性濾液用EtOAc萃取并且用水和鹽水洗滌。將合并的EtOAc萃 取物干燥(Na2SO4)并且過濾。將溶劑真空除去，得到淡黃色油狀物，將其通過SiO2色譜法 純化，用己烷/EtOAc (85 15)洗脫，得到6. 0g(87% )的R-5a。步驟7 在連續(xù)氮氣流下，在IOOmL圓底燒瓶中加入無水MeCN(15mL)。在該混合 物中加入 Cu(II)Cl2(0. 083g，0. 624mmol)和亞硝酸叔丁酯(0. 064g，0. 624mmol)。將混合 物加熱至70°C達30分鐘。在該混合物中一次性加入R_5a(0. 100g,0. 624mmol)并且再持 續(xù)攪拌2小時。在原料耗盡時，將混合物冷卻至室溫并且將反應混合物用10% HCl水溶液 猝滅。將混合物用EtOAc萃取并且將合并的萃取物用水和鹽水洗滌。將EtOAc萃取物干燥 (Na2SO4)并且過濾。將溶劑真空除去，得到淡棕色油狀物，將其通過SiO2色譜法純化，用己 烷 /EtOAc (96 4)洗脫，得到 0. 080g(76% )的 R_5b.步驟8 在IOOmL圓底燒瓶中鼓入氮氣并且加入溶于THF(20mL)中的R_5b (2. Og ； 5. 43mmol)并且在氮氣流下攪拌。在反應容器中加入Li0H(0. 46g ;10. 86mmol)，然后加入 5mL去離子水。將反應在連續(xù)氮氣流下攪拌1小時。在0°C下將均勻混合物用10% HCl水 溶液猝滅。將反應混合物再攪拌15分鐘。將粗混合物用EtOAc萃取并且用水和鹽水洗滌。 將有機萃取物干燥(Na2SO4)并且過濾。將溶劑真空除去并且應用粗酸R-I而無需任何進一 步純化。步驟9 在IOOmL圓底燒瓶中加入R-I (0. 200g, 0. 520mmol)和5mLDCM并且在室溫、 氮氣下攪拌溶液。在溶液中滴加入亞硫酰氯(0.061g，0. 520mmol)，然后加入1滴DMF。將 反應在室溫下攪拌1小時。將過量的溶劑和亞硫酰氯真空除去，得到羧酸R-2，為粗黃色油 狀物，將其用于下一反應而無需任何進一步純化。制備苯基乙酸叔丁酯的通用方法在冰冷的取代的苯基乙酸的乙基或甲基酯的THF中的溶液中加入LiOH. H2O水溶 液(1. 5當量)。將反應混合物在室溫下攪拌并且水解進行后是tic或hplc。當反應完成 時，加入IM HCl和EtOAc并且將有機相用鹽水洗滌，干燥，過濾并且蒸發(fā)，得到相應的羧酸。在維持在惰性氣氛下的羧酸的叔丁醇溶液中加入DMAP (0. 3當量)和二碳酸二叔 丁酯(Boc酸酐，2當量)。將反應在室溫下攪拌直至氣體放出停止并且反應完成。將溶劑真空除去并且將產(chǎn)物通過SiO2色譜法純化。4-氯-3- (3, 5- 二氰基二 苯氧基)_2_ 氟 二 苯基 1 -乙酸(R-7)和 4_ 氯 _3_ (3, 5_ 二 氰某-苯氧某)-2-氟-苯某1 -乙酰氯，(R-8) 步驟1&2 2,3~ 二氟硝基苯基乙酸乙酯(R_9b)在氮氣氣氛下，在冷卻至0°C的冰冷的乙基丙二酸叔丁酯(AlfaAesar) (31. 2g， 166mmol)的NMP(300mL)溶液中加入NaH(60%油分散液，13. lg，218mmol)，同時維持溫度低 于20°C。加入完成后，將溶液老化20分鐘。在溶液中滴加入在NMP(50mL)中的2，3，4_三 氟硝基苯(R-6, Oakwood Products Inc.) (26. 6g，163mmol)，同時維持溫度低于 20°C (高度 放熱)。在加入完成時，將反應在室溫下老化2小時。將溶液加入至NH4Cl水溶液(1. 5L) 中，用EtOAc (3X200mL)萃取，用水(400mL)洗滌5次，干燥(MgSO4)并且蒸發(fā)。應用粗取 代的丙二酸酯R_9a而無需進一步純化。將酯R-9a溶于DCM(400mL)中并且加入TFA(IOOmL)，將該溶液在40°C下加熱16 小時。將反應混合物冷卻至室溫并且將溶劑蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物溶于EtOAc (400mL)中，依次用 NaHCO3水溶液、水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并且蒸發(fā)。將殘留的油狀物通過SiO2色譜法純 化，用5% EtOAc/己烷洗脫，得到R_9b，為金色油狀物(11. 9g) (30% )，將其靜置結(jié)晶。步驟3 將冷卻至0°C的無水THF (IOOmL)和R-IO (10. OOg, 69. 38mmol)的溶液用叔 丁醇鈉(7. 34g,76. 32mmol)處理。將混合物在0°C下攪拌30分鐘，然后加入R_9b (17. 01， 69. 38mmol)并且攪拌3小時。將反應用10% HCl水溶液猝滅。將粗混合物用EtOAc萃取并 且將合并的萃取物用水和鹽水洗滌。將有機相干燥(Na2SO4)并且過濾。將溶劑真空除去， 得到粗油狀物，將其通過SiO2色譜法純化，用己烷/EtOAc (90 10)洗脫，得到20g(78%) 的 R-Ila。如制備R-I的步驟6&7中所述(上文)進行氯取代基的引入(步驟4&5)。通過制 備R-I的步驟8&9中所述的方法進行酯的水解和酰氯的形成(步驟7&8)，得到R-7和R-8。Γ4-氯,-3- (3-植某-5- 二氟甲氧某-苯氧某)_2_氟-苯某1 -乙酸乙酯(R12) 步驟1 將乙酸酐(30mL，4當量)加入至冷卻至0°C的R_13a (10. 36g，77mmol)的 無水吡啶(60mL)溶液中并且覆蓋氮氣。將反應溫至室溫并且攪拌16小時。將揮發(fā)性物 質(zhì)真空除去，并且將殘留的油狀物溶于EtOAc中，用水、5% HCl溶液、鹽水洗滌并且干燥 (MgSO4)。將揮發(fā)性物質(zhì)除去，得到14. 5g(86% )的二乙酸酯。將二乙酸酯(14g,64mmol)溶 于EtOH(IOOmL)和苯(IOOmL)的混合物中并且冷卻至0°C。滴加KOH(3. 6g，1當量)的EtOH 溶液。1小時后，將溶液加入至冰冷的飽和氯化銨的溶液中，用醚萃取并且用鹽水洗滌。將 Et2O萃取物濃縮并且通過SiO2色譜法純化，用己烷/EtOAc梯度(0%至25% EtOAc)洗脫， 得到 IOg 的 R-13b (88% )。步驟2 將(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基)_甲基-氯(2.2mL，l. 1當量)加入至 冷卻至 0°C 的 R_13b(2. Og，11. 3mmol)和 DIPEA (2. 4mL，1. 2 當量)的 DCM(50mL)溶液中。將 溶液溫至室溫，攪拌16小時，并且傾倒入飽和NaHCO3溶液中。將水溶液用DCM萃取，并且將 合并的有機萃取物用水和鹽水洗滌并且干燥(MgS04)。將溶劑真空除去并且將乙?；漠a(chǎn) 物溶于水(8mL)和THF(32mL)的混合物中。加入LiOH. H2O (0. 71g，1. 5當量)。將混合物攪 拌2小時，酸化至pH 5并且用醚萃取。將有機層干燥(MgSO4)并且蒸發(fā)，得到2. 5g(80% ) 的 R13-C。步驟3 將 F2ClCCO2Na (2. 84g，2. 3 當量)加入至 Cs2CO3 (3. 69g, 1. 4 當量)、 R-13c(2. 26g，8. 09mmol)、DMF(32mL)和水(2mL)的溶液中。將溶液加熱至100°C達2小時， 冷卻至室溫，并且傾倒入飽和NH4Cl溶液。將溶液用EtOAc和己烷的混合物萃取，并且將有 機層用鹽水洗滌并且干燥(MgSO4)。將粗產(chǎn)物通過SiO2色譜法純化，用EtOAc/己烷梯度 (0% 至 10% )洗脫，得到 1.83g(70% )的 R-14a。將二氟甲基醚 R_14a 溶于 Me0H(30mL) 中，并且加入5. 6mL 1. OM HCl溶液。將溶液加熱至50°C達5小時，并且在室溫下攪拌16小 時。將揮發(fā)性物質(zhì)蒸發(fā)，并且將水性殘留物在DCM和水之間分配。將水層用DCM萃取，并且 將合并的萃取物用水和鹽水洗滌。將揮發(fā)性物質(zhì)真空除去，得到780mg(73%)的R_14b。R-14b和R_9b的縮合是通過制備R_7的步驟3中所述的方法進行的。通過制備 R-2的步驟6-9中所述的方法進行硝基的還原(步驟5)、胺的重氮化和用氯化物代替(步 驟6)、酯的水解以及酸向酰氯的轉(zhuǎn)化。以類似方法制備「4-氯-3- (3-氰基-5-甲氧基-苯氧基)_2_氟-苯基1 -乙酸乙 塵，除了在步驟4中，用3-氰基-5-甲氧基-苯酚(CAS Reg. No. 124993-53-9)代替R_14b。Γ4-氯,-3- (3-氰某-5- 二氟甲某-苯氧某)_2_氟-苯某1 -乙酸乙酯(R-IBa) 步驟1 在-78°C下，將BBr3溶液(29. ImL的1. OM的DCM溶液，29. Immol)緩慢加 入至維持在 N2 下的 R-17a(2. 5g，11. 62mmol，CASRN262450-65-7)的無水 DCM(25mL)溶液 中。將橙色溶液溫至室溫，攪拌2小時，并且傾倒在冰上。將混合物用DCM(IOOmL)萃取，并 且將有機層用H20(50mL)和鹽水(50mL)洗滌。將溶劑蒸發(fā)，并且將殘留的油狀物通過SiO2 色譜法純化，用EtOAc/己烷梯度(0%至20% EtOAc)洗脫，得到預期的苯酚。在氬氣下，在 該苯酚的吡啶溶液(IOmL)中緩慢加入乙酸酐(0.6mL，6. 33mmol)。2小時后，將揮發(fā)性物質(zhì) 除去，得到乙酸3-溴-5-甲酰基-苯基酯(R-17b，1.02g，40% )。^Ml:在NALGENE 瓶中包含的氮氣下，將DAST(L02mL，7.69謹oi)加入 至乙酸3-溴-5-甲?；?苯基酯(R-17b，l. lg，4. 52mmol)的DCM(5mL)溶液中。加入 EtOH(0. 013mL,0. 23mmol)，并且將混合物攪拌16小時。然后將反應混合物緩慢加入至 NaHCOJg和水溶液中。在發(fā)泡停止后，加入DCM(50mL)并且將各層分離。將有機層用鹽 水(30mL)洗滌并且干燥(MgSO4)。將溶劑除去，得到黃色油狀物，將其置于THF (15mL)和 H2O(4mL)的混合物中。加入一水合Li0H(474mg，ll. 3mmol)，并且將反應混合物在室溫下攪 拌2小時。然后將溶液滴加至5% HCl水溶液(50mL)中，并且將混合物用EtOAc (3 X 30mL) 萃取。將合并的有機級分用鹽水(30mL)洗滌，并且干燥(MgS04)。將揮發(fā)性物質(zhì)蒸發(fā)，得 到油狀物，將其通過SiO2色譜法純化，用EtOAc/己烷梯度(0%至25% EtOAc)洗脫，得到 800mg(79% )的 R-18。苯酚R-18與R_9b的縮合(步驟3)是通過制備R_7的步驟3中所述的方法進行 的。通過制備R-2的步驟6和7中所述的方法進行硝基的還原(步驟4)、胺的重氮化和用 氯化物代替(步驟5)，得到R-19c。步驟6 在氮氣下，將 R-19c(757mg，1. 73mmol)、Pd[P(Ph) J4(O) (300mg，0. 26mmol) 和氰化鋅(122mg，1. (Mmmol)的DMF(8mL)溶液加熱至80°C達4小時。將反應混合物冷卻至 室溫并且加入至2M NH4OH水溶液中。將溶液用1 IEtOAc/己烷(3X30mL)萃取，并且將 合并的有機級分用H2O(3X20mL)洗滌并且干燥(MgSO4)。將溶劑蒸發(fā)，并且將殘留的油狀 物通過SiO2色譜法純化，用EtOAc/己烷梯度(0%至25% EtOAc)洗脫，得到580mg(87% ) 的 R-16。如制備R-2的步驟8-9中所述進行乙酯的水解和向酰氯的轉(zhuǎn)化?！?-(3-溴-5-氰基-苯氧基)-4-氯-2-氟-苯基1-乙酸乙酯(R_20c) 步驟1 在N2氣氛下，將n-BuLi (2. 6mL的1. 6M溶液，1. 1當量)緩慢加入至冷卻 至-78°C 的 R_21a(l. 0g，3. 8mmol，CAS Reg. No. 74137-36-3)的 Et20(20mL)溶液中。將溶 液攪拌45分鐘，并且通過注射器加入DMF。將溶液緩慢溫至室溫，加入至飽和氯化銨中，并 且用醚萃取。將有機相用鹽水洗滌并且干燥(MgSO4),過濾并且蒸發(fā)，得到0.80g(98%)的 R-21b。步驟2 將酵 R-21b (12. Og, 56mmol)、鹽酸羥胺(19. 4g，5 當量)、Et0H(100mL)和吡 啶(IOmL)的溶液加熱至65°C達16小時。將混合物冷卻至室溫，并且在50% EtOAc/己烷和 水之間分配。將有機層用鹽水洗滌并且干燥(MgSO4)。將揮發(fā)性物質(zhì)蒸發(fā)，得到12. 4g(97%) 肟。將該物質(zhì)溶于無水二噁烷(IOOmL)和吡啶(26mL，6當量)中。將溶液冷卻至0°C，加入 TFAA(15mL, 2當量)，并且將混合物溫至室溫。將溶液攪拌2天，并且溫至60°C達1小時。 將混合物冷卻至室溫，并且小心加入至冰水中。將混合物用DCM萃取，并且將合并的有機層 用水、IM HCl和鹽水洗滌。將有機層干燥(MgSO4)并且蒸發(fā)，得到10. 4g(90% )的R_21c。步驟3 將無水可力丁 (IOOmL)加入至包含 R_21c (10. 4g，49mmol)和 LiI (19. 6g，3 當量)的干燥燒瓶中。將溶液在氮氣下加熱至150°C過夜，冷卻至室溫，并且傾倒入冰冷的 IM HCl溶液中。將混合物用1 IEtOAc/己烷溶液萃取，用水洗滌，并且干燥(MgS04)。真 空濃縮，得到8. 7g(89% )的R-22。苯酚R-22與R_9b的縮合(步驟4)通過制備R_7的步驟3中所述的方法進行。通 過制備R-2的步驟6和7中所述的方法進行硝基的還原(步驟5)、胺的重氮化和用氯化物 代替(步驟6)，得到R-20c。應用制備R-31中所述的方法(下文)，通過用Pd (dppf)Cl2、DIBAL-H(1M，在甲苯 中)、二乙基鋅處理R-20c的THF溶液制備Γ4-氯-3- (3-氰基-5-乙基-苯氧基)-2-氟-苯 基1-乙酸乙酯(R_20d)。Γ4-溴-3-(3_氯-5-氰基-苯氧基)-2_氟-苯基1-乙酸乙酯(R_23a)和 「4-溴-3- (3- M -5-氰基-苯氧基)-2-氟-苯基1 -乙酸(R-23b) 在150mL三頸圓底燒瓶中加入MeCN(50mL)、CuBr2 (2. 8g，12. 61mmol)和亞硝酸叔 丁酯(1.4g，13.76mm0l)，脫氣并且在Ar氣氛下維持，并且加熱至70°C。在混合物中滴加 入溶于MeCN(20mL)的R_5a(4. 0g，11. 47mmol)的溶液。將反應混合物在70°C下攪拌4小時，然后冷卻至0°C。將反應通過加入10% HCl (30mL)猝滅并且用EtOAc萃取。將合并的 萃取物依次用10% HCl和鹽水洗滌。將有機萃取物干燥(Na2SO4),過濾并且將揮發(fā)性溶劑 真空除去，得到黑色油狀物，將其通過SiO2色譜法純化，用己烷/EtOAc (95 5)洗脫，得到 2. 5g(52. 8%)的R_23a。通過實施例1的步驟8中所述的方法將乙酯水解，得到羧酸R_23b。通過制備R-5a的步驟6中所述的硝基的還原和如R_23所述的胺的重氮化和用溴 代替，由R-Ilb制備「4-溴-3-(3, 5-二氰基-苯氧基)-2-氟-苯基1-乙酸乙酯(R-24)。Γ4-溴-3- (3-氰某-5- 二氟甲某-苯氧某)氟-苯某1 -乙酸乙酯(R-25) 步驟1 將 R-27a(CASRN 1435-51-4),MeONa(1 當量)和 DMF 的溶液在 N2 氣氛、室 溫下攪拌過夜。將揮發(fā)性溶劑真空除去，并且將殘留物在Et2O和水之間分配。將有機相用 5% NaOH、水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾并且蒸發(fā)，得到R_27b。步驟2 歷經(jīng)30分鐘，在冷卻至-78 °C并且在Ar氣氛下維持的R_27b (60g， 0. 2256mol)和無水 Et2O (IL)的溶液中滴加入 n-BuLi (lOOmL, 0. 2482mol，2. 5M，在己燒 中)。將黃色溶液在_78°C下攪拌20分鐘。歷經(jīng)15分鐘，在反應混合物中滴加入干燥的 DMF(19mL，248. 2mmol)并且將反應在_78°C下攪拌10分鐘，然后除去冷卻浴并且歷經(jīng)30分 鐘將反應溫至_30°C。將反應容器置于冰水浴中并且溫至-10°C。將混合物緩慢加入至冰 冷的飽和NH4Cl水溶液(400mL)中。將有機層分離并且將水相用Et2O萃取三次。將合并的 萃取物用水洗滌，干燥(MgSO4),過濾并且蒸發(fā)，得到油狀物，將其靜置固化。將粗產(chǎn)物通過 SiO2色譜法純化，用己烷/EtOAc梯度(3至5% EtOAc)洗脫，得到R-28。步驟3 如制備R-16的步驟6中所述(上文)用Zn (CN) 2、Pd (PPh3) 4 (0)和DMF氰 化 R-28，得到 R-29a。步驟4 將DAST(21.04mL，519讓ol)加入至氮氣下NAJLGENE 瓶中包含的 R-29a(15. lg,94mmol)和 DCM(IOOmL)的溶液中。加入 Et0H(0. 013mL，0. 23mmol)，并且將混 合物攪拌16小時。然后將反應混合物緩慢加入至NaHCOJg和水溶液中。在發(fā)泡停止后，加 入DCM(50mL)并且將各層分離。將有機層用鹽水(30mL)洗滌并且干燥(MgSO4)。將溶劑除 去并且將粗產(chǎn)物通過兩次快速SiO2色譜純化，用EtOAc/己烷梯度(0%至10% EtOAc)洗 脫，得到R_59b，為白色固體。步驟5 將甲基醚R_59b在48 % HBr水溶液中去甲基化，并且將冰HOAc加熱至 120°C直至去甲基化完成。將揮發(fā)性物質(zhì)除去并且在水和DCM之間分配，得到R-26。通過制備R-7的步驟3中所述的方法進行R-26和R_9b的縮合。如制備R_2的步 驟6中所述進行硝基的還原。如R-23所述進行重氮化和用溴代替二唑，得到R-25?！?-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-4-甲基-苯基]-乙酸乙酯R-31) 在脫氣的冰冷的THF(15mL)、Pd (dppf) Cl2 (0. 09g，0. 121mmol)溶液中加入 DIBAL-H(0. 012mmol, IM的甲苯溶液)。將反應混合物溫至室溫。加入R-23 (1. Og, 2. 42mmol) 溶液，然后加入二甲基鋅(1M，在THF中，4. 240mmol)。將反應加熱至65°C達4小時，冷卻至 室溫并且用NH4Cl水溶液猝滅。將產(chǎn)生的混合物用EtOAc萃取并且依次用NH4Cl和鹽水洗 滌。將EtOAc萃取物干燥(Na2SO4),過濾并且將揮發(fā)性溶劑真空除去，得到深棕色油狀物， 將其通過SiO2色譜法純化，用己烷/EtOAc (95 5)洗脫，得到0. 50g(59% )的R-31。應用上述R-31所述的方法由R-25制備[3_ (3_氰基_5_ 二氟甲基-苯氧 基)-2-氟-4-甲基-苯基]-乙酸乙酯(R-33)。應用上述R-31所述的方法由R-24制備「3_ (3, 5- 二氰基-苯氧基)_2_氟_4_甲 基-苯基1-乙酸乙酯(R-34)。應用R-31所述的方法由R-23制備「3_(3_氯_5_氰基-苯氧基)_4_乙 某-2-氟-苯某1-乙酸乙酯(R-32)，除了用二乙基鋅代替二甲基鋅。應用R-31所沭的方法由R-24制備「3_ (3, 5- 二氰基-苯氧基)_4_乙基_2_氟-苯 基1-乙酸乙酯(R-36),除了用二乙基鐸代替二甲基鐸。應用R-31所述的方法由R-25制備「3_(3_氰基二氟甲基-苯氧基)乙 基-2-氟-苯基1-乙酸乙酯(R-37)，除了用二乙基鋅代替二甲基鋅。「3- (3-氯-5-氰基-苯氧基)-4-環(huán)丙基氟-苯基1 -乙酸乙酯(R-38) 步驟1 通過注射器在 R-24 (0. 80g, 1. 99mmol)、Pd (PPh3) 4 (0. 23g，0. 10 當量)和甲 苯(IOmL)的溶液中加入三丁基乙烯基錫(0.635mL，l. 1當量)并且將溶液回流5小時。將 反應冷卻至室溫并且傾倒入NH4Cl飽和水溶液中并且用EtOAc萃取。將有機層用H2O和鹽 水洗滌，干燥(MgSO4)并且蒸發(fā)。將產(chǎn)生的淡灰棕色固體通過SiO2色譜法純化，用EtOAc/ 己烷梯度(0-25% EtOAc)洗脫，得到 0. 60g(85% )的 R-40。步驟2 在錐形瓶中將乙醚(18mL)、H2O(IOmL)和固體K0H(3g)合并并且冷卻至 0°C。分批加入亞硝基脲(1. 17g，10當量)并且攪拌1小時。將醚層輕輕倒在KOH床上并且 在0°C下維持。在單獨的燒瓶中，將酯R-40 (0. 4g，1. 14mmol)和Pd (OAc) 2 (0. Olg, 0. 05當量) 溶于Et2O(IOmL)和DCM(5mL)中并且冷卻至0°C。在該混合物中加入輕輕倒出的重氮甲烷的 醚溶液并且攪拌3小時。將溶液通過CELITE 和SiO2過濾并且濃縮，得到0. 40g(95% ) 的 R-41。類似制備Γ3-(3-氯-5-氰某-苯氧某)-4_環(huán)丙某氟-苯某乙酸乙酯 (R-41a),除了應用[4-溴-3- (3-氯-5-氰基-苯氧基)_2_氟-苯基]-乙酸乙酯(R_23a)代替R-24。Γ3- (3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-4-甲氧基-苯基1 -乙酸(R_42b) 步驟1 歷經(jīng)15分鐘，在冷卻至-78°C并且在N2下維持的二異丙基胺(150mL， 108. 3g, 1. 07mol)的 THF(500mL)溶液中加入 n-BuLi (lOOmL, 1. OOmol，10M,在己烷中)。 將產(chǎn)生的混合物在_78°C下攪拌30分鐘。以維持內(nèi)部反應溫度低于-50°C的速率加入 R-43a(45mL,52. 110g,0. 457mol)和氯三甲基硅燒(130. OmL, 111. 28g, 1. 024mol)的混合 物。將溶液在_78°C下攪拌1小時。在_78°C下通過加入IM H2SO4將反應猝滅，用MTBE稀 釋并且將混合物用固體NaCl飽和。將各相分離并且將水相用MTBE(300mL)萃取。將合并的 有機萃取物干燥(MgSO4),過濾并且將溶劑蒸發(fā)，得到118g(100% )的R_43b，為白色固體。步驟2 在在冰浴中冷卻至O V的純Br2 (76. 9mL, 1. 50mol)中分批加入固體 R-43b(126. 23g，0. 500mol)，同時維持內(nèi)部溫度為20_45°C之間(注意放熱!)。將反應混 合物在58°C下攪拌2小時。1小時該期限過去后，再加入溴(45.48g)并且用環(huán)己烷(IOmL) 沖洗加液漏斗。將反應混合物冷卻至0°C并且緩慢傾倒入冰冷的飽和NaHSO3溶液中。加入 后，將產(chǎn)生的混合物用固體NaCl飽和并且用MTBE(500mL和200mL)萃取，干燥(MgSO4)并 且真空濃縮，得到191g的R-43c。將反應混合物在約60mbar下蒸餾，得到161. 53g無色液 體，其在110°C下沸騰并且包含約11%的一溴衍生物。在約50mbar下，通過氣泡球柱重蒸 餾產(chǎn)物，得到141.3(78. 5% )的R-43c，其沸點為93-94°C, > 99. 6純度。步驟3 異-PrMgCl. LiCl的制備在高度真空下，將LiCl樣品(4. 56g，107. 6mmol) 應用熱噴槍干燥10分鐘。在N2氣氛、23°C下，在干燥的固體中加入異-PrMgCl (53. 8mL， 107. 6mmol,2M的THF溶液)，并且將產(chǎn)生的混合物在23°C下攪拌3天。在在-40°C下的R_43c(l. 29mL，IOmmol)的THF (5mL)溶液中以維持反應溫度 低于 _30°C 的速率加入異-PrMgCl. LiCl 溶液(5. 5mL，Ilmmol，2· OM,在 THF 中)。在-35 至_30°C下持續(xù)攪拌1小時，然后再溫至_7。C達1小時。將反應混合物冷卻至_30°C并且 一次性加入DMF(1. OOmL, 13mmol)(溫度升至-23°C )，并且在-25至+15°C下持續(xù)攪拌3. 5 小時。將反應混合物傾倒入IM H2SO4和冰中并且將產(chǎn)生的混合物用固體NaCl飽和，并且用 MTBE萃取兩次。將合并的萃取物干燥(MgSO4),過濾并且真空濃縮，得到2. 17g(98%)的 R-43d，為白色固體。步驟4 在3-氯-5-羥基-芐腈(3. 84g) ,K2CO3粉末(4. 2g)和正丁基腈的溶液中 加入R_43d (5. 57g)。將反應混合物加熱至回流達4. 5小時，此時通過gc/ms顯示反應完成。將反應混合物冷卻并且傾倒入水中，然后加入EtOAc。將產(chǎn)生的混合物靜置直至各層分離。 在界面上存在某些晶體，沿上層壁過濾，并且用水和己烷洗滌。將濾液真空蒸發(fā)，將殘留物 溶于IPA中并且再蒸發(fā)。將固體與己烷一起研磨并且過濾。將母液蒸發(fā)并且將殘留物通過 SiO2色譜法純化，用己烷/EtOAc (80 20)洗脫。將產(chǎn)物與IPA—起研磨，過濾并且用己烷 洗滌，并且將產(chǎn)物級分合并，得到1. 45g(83% )的R-44a。步驟5 將三氟乙酸酐(8. 88，4. 231mmol)加入至IOOmL圓底燒瓶中并且在0°C下 攪拌。然后將30%過氧化氫(0. 290,8. 46mmol)滴加至反應容器中并且在0°C下攪拌2小 時，得到三氟過乙酸(TFPA)。在在0 °C下攪拌的R-44a(2. 0，5. 64mmol)的DCM(20mL)溶液中力卩入 KH2PO4 (15. 35g,112. 82mmol) 0在0°C下，在該懸浮液中滴加TFPA。將反應攪拌48小時。在 原料耗盡時，將反應混合物冷卻至0°C，并且用鹽水稀釋，并且用10%亞硫酸氫鈉水溶液猝 滅。將產(chǎn)生的混合物用DCM萃取并且用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾并且將溶劑真空除去， 得到黃色固體，將其通過SiO2色譜法純化，用己烷/EtOAc (92 8)洗脫，得到1. 8g (94% ) 的 R-44b。步驟6 在 R-44b(l. 8g，5. 26mmol)的 DMF(15mL)溶液中加入 Cs2CO3 (3. 43， 10. 52mmol)和碘甲烷(0. 74g，5. 26mmol)。將反應混合物在85°C下攪拌12小時。當R_44b 耗盡時，將反應混合物冷卻至室溫并且將粗混合物用EtOAc萃取，并且將合并的萃取物用 水和鹽水洗滌。將EtOAc干燥(Na2SO4),過濾并且真空濃縮，得到R-44c，為黃色油狀物，將 其用于下一步而無需進一步純化。步驟7 將干燥的IOOmL圓底燒瓶中鼓入氮氣并且加入R-44c(1.6g，4. 50mmol) 和無水THF(20mL)。將混合物冷卻至_20°C并且滴加入異-PrMgCl. LiCl溶液(5. 40mL, 5. 40mol，2M，在THF中，參見步驟3)。將反應在_20°C下攪拌2小時，并且加入CuCN LiCl 溶液(0. IOOmL,0. IOOmol, 1M，在THF中)并且在_20°C下持續(xù)攪拌。在該混合物中加入烯 丙基溴(1. 08g，9. Ommol)并且將混合物再攪拌2小時。將反應通過加入NH4Cl水溶液猝滅。 將混合物用EtOAc萃取并且用水和鹽水洗滌。將萃取物干燥(Na2SO4),過濾并且將溶劑真 空除去，得到黃色油狀物。將粗產(chǎn)物通過SiO2色譜法純化，用己烷/EtOAc (95 5)洗脫， 得到 lg(70% )的 R-42a。步驟8 在 R-42a(0. 100g，0. 315mmol)、Et0Ac(2mL)、MeCN(2mL)和水(3mL)的溶液 中加入NaIO4 (0. 437g，2. 050mmol)和 RuCl3 (0. 001g，0. 006mmol)。當 R_42a耗盡時，將粗混合 物通過墊過濾，用Et0Ac洗滌并且將合并的EtOAc用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)， 過濾并且真空蒸發(fā)，得到0.090g(85%)的R_42b，為黃色固體。用乙酸乙酯萃取，并且用鹽 水洗滌。將乙酸乙酯部分經(jīng)硫酸鈉干燥并且過濾。將溶劑真空除去，得到R_42b，為黃色固 體(0. 090g,85% )?？梢灶愃浦苽鋄3- (3，5- 二氰基-苯氧基)-2-氟-4-甲氧基-苯基]-乙酸(R-45) 和[3- (3-氰基-5- 二氟甲基-苯氧基)-2-氟-4-甲氧基-苯基]-乙酸(R-46)，除了分別 應用R-IO和R-26代替3-氯-5-羥基-芐腈。參考實施例B3-氯-5-「6-氯-2-氟-3_(1H-吲嗶-3-基甲基)-苯氧基芐腈(R-52) 可以通過用二硼烷還原R_5b制備3-氯-5- [6_氯_2_氟_3_ (2_氧代-乙基)-苯 氧基]-芐腈(R-50)，并且可以將產(chǎn)生的醇用CrO3-吡啶再氧化成R-50。步驟1 將i-PrMgCl (1. 7mL的2M溶液，1. 1當量)加入至冷卻至0°C的2_氟-溴苯 (0. 33mL, 1當量)的THF (2mL)溶液中。將溶液在0°C下攪拌1. 25小時，然后冷卻至-78°C, 并且滴加R-50(0.99g，3mmol)的THF(2mL)溶液。將反應混合物緩慢溫至0°C，并且加入至 冷的NH4Cl水溶液中。將溶液用醚萃取，并且將合并的有機部分洗滌，干燥，過濾并且真空 濃縮。將粗殘留物通過SiO2色譜法純化，用EtOAc/己烷梯度(0%至25% EtOAc)洗脫，得 到0. 57g(44% )的鄰-氟-苯基加合物。將部分加合物(0. 26g，0. 62mmol)溶于DCM (3mL) 中，并且一次性加入Dess-Martin過碘烷(periodinane) (0. 32g，1. 2當量)。4小時后，將 反應加入至Na2S2OJg和水溶液中。將混合物用DCM萃取，洗滌，干燥，并且濃縮。將粗產(chǎn)物 通過SiO2色譜法純化，用EtOAc/己烷梯度(0%至20% EtOAc)洗脫，得到0. 23g(87% )的 R-51。步驟2 將胼(0. 24mL, 10 當量)加入至 R-51 (0. 32g，0. 77mmol)在二噁烷(3. 6mL) 和Et0H(0.4mL)的混合物中的溶液中。2小時后，將揮發(fā)性物質(zhì)除去，并且將殘留物通過 HPLC 純化，得到 0. 04g(13% )的 R-52。由R-25和2-氟苯甲酸類似制備3_[6_溴_2_氟_3-(1Η_吲唑_3_基甲基)-苯 氧基]-5- 二氟甲基-芐腈(R-53)，應用Claisen縮合/胼環(huán)化順序。3-「6-溴-2-氟-3-(1Η-吡嗶并「3，4_bl吡啶基甲基)-苯氧基1_5_氯-芐 腈(R-54) 步驟1 在 2-氯煙酸(1. 96g，12. 5mmol)的 DMF(63mL)溶液中加入 CDI (2. 02g， 12. 5mmol)并且將溶液加熱至50°C。2小時后，將反應混合物冷卻至-10°C，并且在其中依次 加入R-55(4. 51g, 11. 3mmol)的DMF(46mL)溶液和固體NaH(l. 45g，36. 2mmol)。(通過R_23a 所述的方法制備甲酯R-55，除了應用叔丁基丙二酸甲酯代替叔丁基丙二酸乙酯)。將反應混合物在-10°C下攪拌15分鐘，然后溫至室溫并且攪拌14小時。將反應混合物在NH4Cl和 EtOAc之間分配。將水層用EtOAc萃取并且將合并的有機萃取物用IN HC1、鹽水洗滌，干燥 (MgSO4)，過濾并且真空濃縮。將粗產(chǎn)物通過SiO2柱色譜法純化，用EtOAc/己烷梯度(25至 30% EtOAc)洗脫，得到 3. 25g(53% )的 R_56a。步驟2 將 R-56a (3. 25g, 6. 04mmol)在 DMSO (35mL)和 H2O (1. 7mL)中的溶液在預熱 1500C的油浴中加熱30分鐘。將反應混合物在EtOAc和飽和NaHCO3水溶液之間分配。將 水相用Et0Ac(3X50mL)萃取并且將合并的有機萃取物干燥(MgSO4)，過濾并且真空濃縮，得 到2. 45g(85% )的R_56b，為黃色油狀物。步驟3 在 R-56b(2. 3g，4. 8mmol)在二噁烷(41mL)和 EtOH(6mL)中的溶液中加入 胼(1.50mL，10當量)并且將反應混合物加熱至100°C。2小時后，將反應混合物冷卻至室 溫并且將溶劑除去。將殘留物在10% MeOH/DCM和飽和NaHCO3水溶液之間分配。將水層用 10% MeOH/DCM反萃取，并且將合并的有機萃取物干燥(MgSO4)，過濾并且真空濃縮，得到黃 色固體，將其與30% EtOAc/己烷研磨，得到1.91g(87% )的R-54，為白色固體。由[4-氯-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-苯氧基]-乙酸乙酯(R_5b)類似 制備3-氯-5-[6-氯-2-氟-3-(1Η-吡唑并[3，4-b]吡啶_3_基甲基)-苯氧基]-芐腈 (R-57)。由[4-溴-3-(3，5_ 二氰基-苯氧基)-2_氟-苯基]-乙酸乙酯(R-24)類似制 備5-[6_溴-2-氟-3-(1Η-吡唑并[3，4-b]吡啶_3_基甲基)-苯氧基]_異鄰苯二甲腈 (R-58)。由[3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-4-甲基-苯基]-乙酸乙酯(R-31)類似 制備3-氯-5- [2-氟-6-甲基-3- (1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-基甲基)-苯氧基]-芐腈 (R-59)。由[4-環(huán)丙基-3-(3，5-二氰基-苯氧基)-2-氟-苯基]-乙酸乙酯(R-41)類似 制備5-[6-環(huán)丙基-2-氟-3-(1!1-吡唑并[3，4-b]吡啶_3_基甲基)-苯氧基]-異鄰苯二 甲腈(R-60)。由[3- (3-氯-5-氰基-苯氧基)-4-乙基_2_氟-苯基]-乙酸乙酯(R-32)類似 制備3-氯-5-[6-乙基-2-氟-3-(1Η-吡唑并[3，4-b]吡啶_3_基甲基)-苯氧基]-芐腈 (R-61)。由3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-4-環(huán)丙基-2-氟-苯基]-乙酸乙酯(R-41)類似 制備3-氯-5-[6-環(huán)丙基-2-氟-3- (1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-基甲基)-苯氧基]-芐 腈(R-62)。 由[4-氯-3- (3-氰基-5- 二氟甲基-苯氧基)_2_氟-苯基]-乙酸乙酯(R-16) 類似制備3-[6-氯-2-氟-3-(1H-吡唑并[3，4-b]吡啶_3_基甲基)-苯氧基]-5-二氟甲 基-芐腈(R-63)。由[4-溴-3-(3-氰基-5-二氟甲基-苯氧基)-2-氟-苯基]-乙酸乙酯(R-25) 類似制備3-[6-溴-2-氟-3-(1H-吡唑并[3，4-b]吡啶_3_基甲基)-苯氧基]-5-二氟甲 基-芐腈(R-64)。由[3- (3-氰基-5- 二氟甲基-苯氧基)-2-氟_4_甲基-苯基]-乙酸乙酯(R-33) 類似制備3-二氟甲基-5-[2-氟-6-甲基-3-(1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-基甲基)-苯氧基]-芐腈(R-65)。由[3- (3，5- 二氰基-苯氧基)-4-乙基_2_氟-苯基]-乙酸乙酯(R-36)類似制 備5-[6_乙基-2-氟-3-(1Η-吡唑并[3，4-b]吡啶_3_基甲基)-苯氧基]-異鄰苯二甲腈 (R-66)。3-「6-溴-2-氟-3-(1H-吡唑并「3,4_cl吡啶基甲基)-苯氧基1_5_氯-芐 腈(R-67) 通過用二硼烷還原R_23a并且將產(chǎn)生的醇用CrO3-吡啶再氧化為R-68來制備 3-氯-5- [6-溴-2-氟-3- (2-氧代-乙基)-苯氧基]-芐腈(R-68)。步驟1 將i-PrMgCl的THF溶液(1當量的2M溶液)滴加至冷卻至_40°C并且維 持在N2下的4-氯-3-氟-吡啶(1當量)的THF溶液中。將溶液攪拌30分鐘，并且滴加 R-68 (1當量)的THF溶液。將反應混合物溫至0°C，老化1小時，并且滴加至pH 7的緩沖水 溶液中。將水性混合物用EtOAc萃取，將合并的萃取物用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并且真空 濃縮。將粗產(chǎn)物通過SiO2色譜法純化，用EtOAc/己烷梯度洗脫，得到0. 21g(45% )R_69a。步驟2 在冷卻至0°C的R_69a的DCM溶液中加入Dess-Martin過碘烷(1. 2當量)。 將混合物攪拌4小時，用NaHCO3猝滅并且將有機相分離并且蒸發(fā)。將殘留物通過SiO2色譜 法純化，用EtOAc/己烷梯度洗脫，得到R_69b。步驟3 將胼(0. 288mL, 5 當量)加入至 R_69b (0. 85g，1. 8mmol)在二噁烷(9mL) 和Et0H(0. 5mL)中的溶液中。將溶液加熱至80°C達3小時。將溶液在EtOAc和水之間分 配。分離有機層并且蒸發(fā)殘留物，得到油狀物，將其通過SiO2色譜法純化，用MeOH/DCM梯 度(0%至 5% MeOH)洗脫，得到 0. 24g(29% )的 R-67。從[4-溴-3-(3，5-二氰基-苯氧基)-2-氟-苯基]-乙酸乙酯(R-24)開始類似 制備5-[6-溴-2-氟-3-(1!1-吡唑并[3，4-c]吡啶_3_基甲基)-苯氧基]-異鄰苯二甲腈 (R-70)。從[4-溴-3- (3-氰基-5- 二氟甲基-苯氧基)_2_氟-苯基]-乙酸乙酯(R-25) 開始類似制備3-[6-溴-2-氟-3-(1H-吡唑并[3，4-c]吡啶_3_基甲基)-苯氧基]-5-二 氟甲基-芐腈(R-71)。由[4-氯-3- (3-氰基-5- 二氟甲基-苯氧基)_2_氟-苯基]-乙酸乙酯(R-16) 類似制備3-[6-氯-2-氟-3-(1H-吡唑并[3，4-c]吡啶_3_基甲基)-苯氧基]-5-二氟甲 基-芐腈(R-72)。3-「6-溴-2-氟-3-(1H-吡唑并「3,4_cl噠嗪基甲基)-苯氧基1_5_氯-芐 腈(R-73) 步驟1 通過移液管，在冷卻至0°C的3，6- 二氯-4-羧基-噠嗪(R_74a，7. 5g， 38. 9mmol, Aldrich)在DCM(30mL)和MeOH(IOmL)中的溶液中緩慢加入(三甲基甲硅烷 基)重氮甲烷溶液(2. 0M，在己烷中)，直至觀察到持續(xù)黃色。加入完成后，將溶劑真空除 去。將粗產(chǎn)物通過SiO2色譜法純化，用EtOAc/己烷梯度(10至25% EtOAc)洗脫，得到 3. 89g(86% )的R_74b，為棕色油狀物，將其靜置固化。步驟2 在N2氣氛下，將氫化鈉(1. 53g，38. 27mmol)懸浮于干燥的THF(70mL)中， 冷卻至0°C并且通過注射器滴加2，4-二氟苯酚(3. 31mL，34.94mmol)。加入完成后，將混 合物攪拌15分鐘，然后除去冷卻浴達30分鐘，并且最終將溶液再冷卻至0°C。通過套管加 入R-74b(6.89g，33. 28mmol)的干燥的THF(20mL)溶液。將產(chǎn)生的混合物在室溫下攪拌過 夜，然后加熱至50°C達3小時。將反應冷卻至室溫并且加入飽和NH4Cl (40mL)，然后加入水 (60mL)。將混合物用EtOAc萃取三次，干燥(MgSO4),過濾并且蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物通過SiO2色 譜法純化，用EtOAc/己烷梯度(10至20% EtOAc)洗脫，得到8. 15g(82% )的R_74c，為淡 黃色油狀物。步驟3 在 R-74c (8. 15g, 127. llmmol)的 MeOH(40mL)溶液中加入甲酸銨(8. 55g,
1.1當量)，然后加入10% Pd-C (500mg)。將混合物加熱至50°C達20分鐘，然后加熱至60°C 達35分鐘。將混合物冷卻至室溫并且通過2cmCELITE 墊過濾，用MeOH充分沖洗。將 揮發(fā)性溶劑蒸發(fā)并且將殘留物在DCM(SOmL)與H2O之間分配。將DCM層分離并且將水層用 DCM和水(SOmL)萃取兩次。將合并的萃取物干燥(MgSO4)，過濾并且蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物通過 SiO2色譜法純化，用EtOAc/己烷梯度(10 M 50% EtOAc)洗脫，得到5. 5g(76% )R_75a，為 半粘稠黃色油狀物。步驟4 在 R-75a(5g，18. 78mmol)在 THF(40mL)禾口 MeOH(IOmL)中的溶液中加入 LiOH水溶液(21.6!1^，說溶液)。將混合物攪拌15分鐘，此時通過TLC分析測定反應完成。 將混合物濃縮并且將殘留物用H20(25mL)和THF(20mL)稀釋，然后用10% HCl調(diào)節(jié)至pH 2-3。將產(chǎn)生的固體通過過濾收集，用水(50mL)和EtOAc (30mL)洗滌，得到4. 08g(86% )的 R_75b，為白色粉末。步驟5 在 R-75b(605mg，2. 4mmol)的 DMF(IOmL)溶液中加入 CDI (410mg，
2.5mmol)。在Ar氣氛下，將混合物加熱至50°C達1. 5小時。將溶液冷卻至_10°C并且通過 注射器加入R-55 (lg，2. 5mmol)的DMF(5mL)溶液。在劇烈攪拌的同時歷經(jīng)20分鐘分3批加入NaH(336mg，8. 4mmol)。將橙色溶液再攪拌10分鐘，然后除去冷卻浴。將混合物在室溫 下攪拌1小時。將反應混合物用飽和NH4Cl溶液(20mL)、水(30mL)和EtOAc (50mL)稀釋并 且攪拌。將EtOAc相用鹽水(50mL)洗滌并且將鹽水溶液用EtOAc (2 X 30mL)萃取。將合并 的萃取物干燥(MgSO4)，過濾并且蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物通過SiO2色譜法純化，用EtOAc/己烷梯 度(40至100% EtOAc)洗脫，得到685mg(45% ) R_76a，為橙色泡沫狀物。步驟6 在 R-76a(670mg，1. 06mmol)的 DMS0(8mL)溶液中加入水(0. 4mL)和鹽水 (10滴)。在Ar氣氛下，將混合物加熱至145°C (油浴溫度)達10分鐘。將溶液冷卻至室 溫并且加入水(60mL)、EtOAc (30mL)和Et2O (30mL)。將混合物攪拌并且加入NaCl (2gm)。 將混合物再次攪拌并且收集有機相，用鹽水溶液(50% )洗滌并且將鹽水溶液用EtOAc/ Et20(l l，2X50mL)反萃取。將合并的有機相干燥(MgSO4)，過濾并且蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物通 過制備型TLC純化，用40% EtOAc/己烷展開，得到380mg(62% )的R_76b，為淡黃色泡沫狀 物。步驟7 在R-76b(100mg,0. 17mmol)的MeOH(2mL)溶液中加入胼基甲酸叔丁酯 (45mg, 2當量)，然后加入冰HOAc (0. 03mL)。將混合物在60°C下加熱5小時，然后在室溫下 攪拌過夜。將混合物在DCM(20mL)與5% NaHCO3 (2OmL)之間分配。將水相用DCM(2X20mL) 反萃取并且將合并的有機萃取物干燥(MgSO4),過濾并且蒸發(fā)。在微波小瓶中，將殘留物溶 于THF (4mL)中，加入DBU (0. 04mL, 1. 5當量)，將產(chǎn)生的溶液在150°C下在微波中加熱10至 12分鐘。將混合物在Et0Ac(40mL)、水(30mL)和飽和NH4Cl水溶液(5mL)之間分配。將有 機相分離并且將水相用EtOAc (2 X 30mL)反萃取。將合并的萃取物干燥(MgSO4),過濾并且 蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物通過制備型TLC純化，用6% MeOH/DCM展開，得到45mg(58% )的R-73，產(chǎn) 物為類白色粉末。類似制備5-[6-溴-2-氟-3-(1H-吡唑并[3，4_c]噠嗪_3_基甲基)-苯氧基]-異 鄰苯二甲腈；三氟乙酸鹽(R-77)，除了在步驟5中將R-55用R-24代替。類似制備5-[6_乙基-2-氟-3_(1H-吡唑并[3，4_c]噠嗪_3_基甲基)-苯氧 基]-異鄰苯二甲腈(R-78)，除了在步驟5中將R-55用R-36代替。類似制備3-氯-5-[6-乙基-2-氟-3-(1H-吡唑并[3，4_c]噠嗪_3_基甲基)-苯 氧基]-芐腈(R-79)，除了在步驟5中將R-55用R-32代替。類似制備3-氯-5-[6-環(huán)丙基-2-氟-3_(1H-吡唑并[3，4_c]噠嗪_3_基甲 基)-苯氧基]-芐腈(R-80)，除了在步驟5中將R-55用R-38代替。類似制備5-[6-環(huán)丙基-2-氟-3-(1H-吡唑并[3，4_c]噠嗪_3_基甲基)-苯氧 基]-異鄰苯二甲腈(R-81)，除了在步驟5中將R-55用R-41代替。類似制備3-[6-氯-2-氟-3-(1H-吡唑并[3，4_c]噠嗪_3_基甲基)-苯氧 基]-5-氯-芐腈(R_73a)，除了在步驟5中將R-55用R_5b代替。類似制備5-[6-氯-2-氟-3-(1H-吡唑并[3，4_c]噠嗪_3_基甲基)-苯氧基]-異 鄰苯二甲腈；三氟乙酸鹽(R_73b)，除了在步驟5中將R-55用R-Ilc代替。3-氯-5-「6-二氟甲基-2-氟-3_(1H-吡嗶并「3，4_cl噠嗪-3-基甲基)-苯氧 基1-芐腈(R-82) 步驟1 在 R-44a(3. 2g，9. 04mmol)的 DCM(12mL)溶液中依次加入 DAST(3. 2g，2. 2 當量)和Et0H(0. 02g，0. 05當量)，并且將反應混合物攪拌16小時。將反應混合物在NaHCO3 水溶液和DCM之間分配。將有機層依次用水和鹽水洗滌，干燥(Na2SO4),過濾并且蒸發(fā)，得 到 1. 9g(56% )的 R-83a。步驟2 在室溫下,在 R-83a(l. 9g，5. 045mmol)和 Pd(O) [P(tert-Bu)3]2(0. 39g， 0. 15當量)的二噁烷(30mL)溶液中加入2-叔丁氧基-2-氧代乙基氯化鋅(25mL ；0. 5M的 醚溶液)，并且將產(chǎn)生的溶液在室溫下攪拌6小時。將反應在HCl水溶液和EtOAc之間分 配。將有機層依次用水和鹽水洗滌，干燥(Na2SO4),過濾并且蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物通過SiO2色譜 法純化，用EtOAc/己烷梯度(2-12% EtOAc)洗脫，得到0. 65g(30% )的R_83b。步驟3 在 R-75b (0. 088g, 1· 1 當量)和 DMF (ImL)的溶液中加入 CDI (0. 06g, 1.15當量)并且將溶液加熱至50°C達1小時。將反應混合物冷卻至_25°C并且加入 R-83b (0. 13g，0. 316mmol)和DMF(ImL)的溶液以及NaH(0. 04g，3. 2當量)。將反應混合物緩 慢溫至室溫并且攪拌6小時。將反應混合物在飽和NaHCO3水溶液和EtOAc/己烷(1 1)之 間分配。將有機層依次用H2O和鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾并且蒸發(fā)，得到0. 200g (98% ) 的 R-84a。步驟4 將 R-84a(0. 2r,0. 31mmol)和 p_Ts0H(0· 015g，0· 25 當量)的甲苯(2. 5mL) 溶液在130°C下加熱2小時。將反應冷卻并且傾倒入碳酸氫鈉中并且用EtOAc萃取。將有 機層依次用水和鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾并且蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物通過SiO2色譜法純化， 用 EtOAc/ 己烷梯度(15-50% EtOAc)洗脫，得到 0. 15g(89% )的 R_84b。步驟5 將 R~84b (0. 15g，0. 274mmol)、p_Ts0H(0· 10g，2 當量)和胼(0. 03mL, 2 當 量)的IPA(2mL)溶液加熱至800Cii 16小時。將反應冷卻至0°C并且加入H2O(2. 6mL)。將 產(chǎn)生的溶液的PH用20% Na2CO3調(diào)節(jié)至約9，然后進一步用H2O (5mL)稀釋并且溫至室溫達1 小時。將渾濁的混合物傾倒入EtOAc中并且將有機層依次用水和鹽水洗滌，干燥(Na2SO4), 過濾并且蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物通過3102色譜法純化，用MeOH/DCM梯度(2. 5_10% MeOH)洗脫。 將回收的物質(zhì)與EtOAc/己烷一起研磨，得到0. 040g(34% )的R-82。3-氯-5-「2-氟-6-甲磺?；?3_(1H-吡嗶并「3，4_cl噠嗪基甲基)-苯氧 基1-芐腈(R-85) 步驟1 在R-86a(4. 03g，9. 15mmol)的間-二甲苯(60mL)溶液中加入K2CO3(846mg， 6. 12mmol)、Pd2 (dba) 3 (840mg，0. 92mmol)、Xantphos (600mg，1. 04mmol, CASRN 161265-03—8) 和NaSMe (810mg，11. 56mmol)。將混合物脫氣，然后在氬氣囊中加熱至135 °C達20小時。 將反應冷卻至室溫并且加入鹽水(80mL)。將混合物用EtOAc(SOmL)萃取。將水相用 Et0Ac(2X70mL)反萃取并且干燥(MgSO4)，過濾并且真空濃縮。將粗產(chǎn)物通過SiO2色譜法 純化，用EtOAc/己烷梯度(5-20% EtOAc)洗脫，得到2. 3的R_86b，為黃色油狀物。步驟2 在冷卻至 O °C (冰浴)的 R-86b (2. 4g, 5. 88mmol)在 MeOH (60mL)和 THF(8mL)中的溶液中滴加入溶于水(22mL)的OXONE (7. 35g, 11. 96mmol)溶液。加 入完成后，將混合物攪拌15分鐘，然后除去冷卻浴。將產(chǎn)生的混合物攪拌過夜，然后加熱至 50°C達4小時。將反應冷卻至室溫并且滴加NaHCO3飽和水溶液直至不再觀察到起泡。加 入水(20mL)并且將混合物用EtOAc (40mL)萃取。將萃取物用鹽水(40mL)洗滌并且將鹽水 用EtOAc (2 X 30mL)反萃取。將合并的EtOAc萃取物干燥(MgSO4)，過濾并且真空濃縮，得到 2. 5g的R-86c，為淺白色-黃色固體。步驟3 在 R-75b (274mg, 1. Immo 1)的干燥 DMF (8mL)溶液中加入 CDI (188mg, 1.2mm0l)。將混合物加熱至50°C達2小時，然后冷卻至-10°C。通過注射器加入 R-86c(500mg, 1. 14mmol)的DMF(5mL)溶液。歷經(jīng)20分鐘分三批在冷卻的混合物中加入 NaH(152mg,3. 81mmol，60%，在礦物油中)。加入完成后，將混合物攪拌15分鐘，然后除去冷 卻浴并且持續(xù)攪拌1小時。在溶液中小心加入NH4Cl飽和水溶液(5mL)，然后加入水(30mL) 和EtOAc (40mL)。將混合物攪拌并且將EtOAc相分離。將水相用EtOAc (2 X 30mL)反萃取。 將合并的萃取物干燥(MgSO4)，過濾并且蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物通過SiO2色譜法純化，用EtOAc/己 烷梯度(50至100% EtOAc)洗脫，得到0. 256g的R-87，為黃色泡沫狀固體。步驟4 在R-87a(256mg,0. 38mmol)的茴香醚(5mL)溶液中加入硼酸酐粉末 (133mg)。將混合物加熱至140°C達1小時，然后冷卻至室溫。將混合物真空濃縮。將殘留 物冷卻(冰浴)并且在水(25mL)和Et0Ac(25mL)之間分配。將混合物在室溫下攪拌1小 時，然后攪拌。將EtOAc相用鹽水(25mL)洗滌并且將水溶液用EtOAc (2X20mL)反萃取。將 合并的有機萃取物干燥(MgSO4)，過濾并且濃縮，得到0. 215g的R-87b，為淡橙色-黃色固 體。步驟5 在 R-87b(215mg，0. 38mmol)的 IPA (2mL)溶液中加入 p_TsOH(144mg)和水 合胼(0. 04mL,85% )。在N2氣氛下將混合物加熱至80°C達18小時。將反應混合物冷卻至 室溫并且依次加入水(3. 5mL) ,20% Na2CO3水溶液(0. 5mL)、再加入水(1. 5mL)。將混合物攪 拌5分鐘，然后靜置1.5小時。將產(chǎn)生的沉淀(65mg)通過過濾收集。從濾液中回收第二批 產(chǎn)物(130mg)。將這些半純的產(chǎn)物合并并且吸附在SiO2制備型TLC板上，并且用EtOAc展 開，得到0. 055g的R-85，為淡白色-橙色固體。
3-「6-氯-2-氟-3-(1H-吡唑并「3,4_cl噠嗪基甲基)-苯氧基1_5_ 二氟甲 基-芐腈(R-90) 步驟1 用LiOH在THF水溶液中通過在室溫下攪拌3小時將R-16水解為相應的 羧酸。常規(guī)處理得到酸，將其通過攪拌酸的叔-BuOH溶液、Boc-酸酐和DMAP達2小時轉(zhuǎn)化 為叔丁酯。將粗產(chǎn)物通過SiO2色譜法純化，用5% EtOAc/己烷洗脫，得到R-88。步驟2 在火焰干燥的燒瓶中的R_75b(0. 485g，1. 92mmol)和DMF(9mL)的溶液中 加入⑶1(0. 326g，2.01mmol)并且將溶液溫熱至50°C達65分鐘，然后冷卻至0°C。加入 R-88 (0. 720g，l. 75mmol)在少量 DMF 中的溶液，然后加入 NaH (0. 189g，4. 72mmol，50%礦物 油分散液)。將反應攪拌1小時，然后加入至飽和NH4Cl水溶液中。將固體沉淀收集，用水 洗滌并且真空干燥，得到0. 978g的R-89a，為棕色固體。步驟3 在R_89a(0. 978g，1. 51mmol)的茴香醚(7. 5mL)溶液中加入硼酸酐 (0. 527g，7. 57mmol)并且將產(chǎn)生的溶液加熱至140°C達2小時。將反應混合物在冰浴中冷 卻并且將溶液在EtOAc和H2O之間分配。將有機相分離，用鹽水洗滌，干燥，過濾并且真空 濃縮。將粗產(chǎn)物通過SiO2色譜法純化，用1 % MeOH/DCM洗脫，得到0. 580g的R_89b。步驟4 將 R-89b(0. 580g, 1. 06mmol)和對甲苯磺酸(0. 404g，2. 13mmol)在 IPA (5mL)中的懸浮液在室溫下攪拌20分鐘。將溶液在80°C下攪拌直至反應完成。將反應 混合物在冰浴中冷卻，然后依次加入H2O(10. 6mL) ,20% Na2CO3水溶液(2mL)和吐0(5. 3mL)， 并且將產(chǎn)生的混合物在室溫下攪拌1小時。將產(chǎn)生的沉淀收集，用H2O洗滌并且真空干燥， 得到89mg的R-90。在前面的描述或下面的權利要求中所公開的、以其具體形式表示的或者以實施所 公開的功能的方法或達到所公開的結(jié)果的方法或過程所表示的特征適當?shù)乜梢苑謩e或者 以這些特征的任何組合用于以其多種形式實現(xiàn)本發(fā)明。為了使前述發(fā)明清楚和可以理解，已經(jīng)通過舉例說明和實施例對其進行了詳細描 述。對本領域技術人員而言顯而易見的是，可以在所附權利要求的范圍內(nèi)實施多種變化和 修飾。因此，應當理解的是，以上描述旨在用于舉例說明而非限制。因此，本發(fā)明的范圍不 應當參考以上描述來確定，而應當參考下面所附的權利要求以及所述權利要求的等價物的 完整范圍來確定。本文提及的專利、公布的申請和科學文獻確立了本領域技術人員的知識，將其全 部內(nèi)容并入本文作為參考，其引入程度就如同將它們各自具體地和逐一地并入作為參考一 樣。本文引用的任何參考文獻與本說明書的具體教導之間的任何矛盾之處應以后者為準。 同樣，本領域理解的單詞或短語的定義與本說明書中具體教導的該單詞或短語的定義之間的任何矛盾之處應以后者為準。
權利要求
式I化合物或其可藥用鹽其中X1和X2獨立地是CH或N；R1是氟或氫；R2是氫、鹵素、C1 6烷基、C3 7環(huán)烷基、C1 6鹵代烷基、C1 6烷氧基或C1 6烷基磺?；?；Ar是被1至3個基團取代的苯基，所述基團在每次出現(xiàn)時獨立地選自氫、鹵素、氰基、C1 6烷基、C1 6烷氧基、C1 6鹵代烷基和C3 7環(huán)烷基；R3在每次出現(xiàn)時獨立地選自(i)CH2OH，(ii)CH2O C(＝O)(CH2)nCO2R4，其中n是2至5，(iii)CH2O C(＝O)CH2OCH2CO2R4，(iv)CH2OCOR5，(v)CH2OC(＝O)CHR6NH2，(vi)C(＝O)R5，和(vii)CH2OP(＝O)(OH)2；R4是氫或C1 10烷基；R5是氫或C1 10烷基、C1 10鹵代烷基、C1 10氨基烷基、C1 3烷基氨基 C1 10烷基、C1 3二烷基氨基 C1 10烷基、C2 10鏈烯基、C3 7環(huán)烷基、C1 6烷氧基、C1 10氨基烷氧基、C1 3烷基氨基 C1 10烷氧基、C1 3二烷基氨基 C1 10烷氧基、NR7aR7b、苯基或吡啶基，所述苯基或吡啶基環(huán)任選獨立地被1至3個取代基取代，所述取代基選自鹵素、C1 10烷基、C1 3烷氧基、硝基和氰基；R6是C1 6烷基或天然存在氨基酸的側(cè)鏈；R7a和R7b獨立地是氫、C1 6烷基或C1 10氨基烷基、C1 3烷基氨基 C1 10烷基、C1 3二烷基氨基 C1 10烷基。FPA00001160829900011.tif
2.權利要求1的化合物，其中X1是N并且X2是CH。
3.權利要求2的化合物，其中Ar是被2個基團取代的苯基，所述基團在每次出現(xiàn)時獨立地選自鹵素、氰基和Cp6鹵代 燒基；R1是氟； R3選自(i)CH2O-C( = 0) (CH2)nCO2R4,其中 η 是 2 至 5，(ii)CH2OCOR5,禾口(iii)C(= 0)R5。
4.權利要求3的化合物，其中R3是CH2O-C(= 0) (CH2)2CO2R40
5.權利要求3的化合物，其中Ar是3，5-二氰基-苯基、3-氯-5-氰基-苯基或3-氰 基-5- 二氟甲基-苯基；R2是溴、氯或CV6烷基；并且R3是CH2O-C ( = 0) (CH2)nCO2R40
6.權利要求1的化合物，其中X1和X2是N。
7.權利要求6的化合物，其中Ar是被2個基團取代的苯基，所述基團在每次出現(xiàn)時獨立地選自鹵素、氰基和Cp6鹵代 燒基；R1是氟；R3在每次出現(xiàn)時獨立地選自(i)CH2O-C( = 0) (CH2)nCO2R4,其中 η 是 2 至 5，(ii)CH2OCOR5,禾口(iii)C(= 0)R5。
8.權利要求7的化合物，其中R3是CH2O-C(= 0) (CH2)2CO2R40
9.權利要求7的化合物，其中Ar是3，5-二氰基-苯基、3-氯-5-氰基-苯基或3-氰 基-5- 二氟甲基-苯基；R2是溴、氯或CV6烷基；并且R3是CH2O-C ( = 0) (CH2)nCO2R40
10.權利要求1的化合物，該化合物選自琥珀酸單-{3-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2_氟-芐基]-吡唑并[3，4-b] 吡啶-1-基甲基}酯；琥珀酸單-{3-[4_溴-3-(3，5-二氰基-苯氧基)-2_氟-芐基]-吡唑并[3，4-b]吡 啶-1-基甲基}酯；琥珀酸單_ {3-[4-溴-3- (3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4-c] 噠嗪-1-基甲基}酯；琥珀酸單-{3-[4-溴-3-(3，5- 二氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3,4-c]噠 嗪-1-基甲基}酯；琥珀酸單-{3-[4-氯-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2_氟-芐基]-吡唑并[3，4-c] 噠嗪-1-基甲基}酯；3-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4-c]噠嗪-1-甲酸 甲酯；戊二酸單-{3-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2_氟-芐基]-吡唑并[3，4-c] 噠嗪-1-基甲基}酯；乙酸3-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4-c]噠嗪基 甲基酯；(S) -2-氨基-3-甲基-丁酸3- [4-溴-3- (3-氯-5-氰基-苯氧基)_2_氟-芐基]-吡 唑并[3，4-c]噠嗪-1-基甲基酯；{3-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4-c]噠嗪-1-基 甲氧基羰基甲氧基}-乙酸；3-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4-c]噠嗪-1-甲酸 乙酯；3-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4-c]噠嗪-1-甲酸 異丙酯；琥珀酸單-{3-[4_氯-3-(3，5-二氰基-苯氧基)-2_氟-芐基]-吡唑并[3,4-c]噠 嗪-1-基甲基}酯；3-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4-c]噠嗪-1-甲酸 2- 二甲基氨基-1-甲基-乙基酯；戊二酸單-{3-[4-氯-3- (3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4-c] 噠嗪-1-基甲基}酯；己二酸單-{3-[4-溴-3- (3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4-c] 噠嗪-1-基甲基}酯；3-[3-(1-乙?；?IH-吡唑并[3，4-c]噠嗪-3-基甲基)_6_溴_2_氟-苯氧 基]-5-氯-芐腈；3-{6-溴-2-氟-3-[1-(卩比啶-3-羰基)-IH-吡唑并[3，4_c]噠嗪-3-基甲基]-苯氧 基}-5_氯-芐腈3- [6-溴-2-氟-3- (1-異丁?；?IH-吡唑并[3，4-c]噠嗪-3-基甲基)-苯氧 基]-5-氯-芐腈；3-[4-溴-3- (3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3,4-b]吡啶-I-甲酸 (2-氨基-乙基)_甲基-酰胺；3-[4-溴-3-(3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3,4-b]吡啶-I-甲酸 (2-氨基-乙基)-酰胺；磷酸單_ {3- [4-溴-3- (3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4_b]吡 啶-1-基甲基}酯；和磷酸單_ {3- [4-溴-3- (3-氯-5-氰基-苯氧基)-2-氟-芐基]-吡唑并[3，4-c]噠 嗪-1-基甲基}酯。
11.權利要求1至10任一項的化合物，其用作藥物。
12.權利要求1至10任一項的化合物，其用于治療HIV-I感染、預防HIV-I感染或者治 療 AIDS 或 ARC。
13.權利要求1至10任一項的化合物在制備用于治療HIV-I感染、預防HIV-I感染或 者治療AIDS或ARC的藥物中的用途。
14.藥物組合物，該藥物組合物包含治療有效量的權利要求1至10任一項的化合物和 至少一種載體、賦形劑或稀釋劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)化合物或其可藥用鹽，其中R1、R2、R3、X1、X2和Ar如本文所定義，抑制HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶并且提供了預防和治療HIV-1感染和治療AIDS和/或ARC的方法。本發(fā)明還涉及包含式(I)化合物的組合物，其可用于預防和治療HIV-1感染和治療AIDS和/或ARC。
文檔編號C07D487/04GK101903382SQ200880121582
公開日2010年12月1日 申請日期2008年12月11日 優(yōu)先權日2007年12月21日
發(fā)明者R·J·比萊多, Z·K·斯威尼 申請人:弗·哈夫曼-拉羅切有限公司