專利名稱：：螺環(huán)酮乙酰基-CoA羧化酶抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種被取代的1'-(苯甲?；?螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮化合物，其作為乙?；?CoA羧化酶的抑制劑，并且本發(fā)明涉及了上述化合物在治療肥胖中的用途。
背景技術(shù)：
：過度肥胖在美國以及其它國家是一種重要疾病。其并發(fā)癥包括明顯降低預(yù)期壽命的高血壓、糖尿病、冠心病、中風(fēng)、充血性心力衰竭、靜脈疾病、多發(fā)性骨科疾病以及肺動(dòng)脈瓣關(guān)閉不全。各種醫(yī)學(xué)療法，包括飲食療法、精神療法、藥物療法以及行為療法，在多項(xiàng)試驗(yàn)中獲得極差結(jié)果。已經(jīng)試驗(yàn)了數(shù)種手術(shù)療法，它們減小小腸的吸收面積或致力于通過分割或支路來縮小胃的大小。己證實(shí)這些過程在病態(tài)肥胖患者中執(zhí)行不僅非常危險(xiǎn)而且存在多種危及生命的術(shù)后并發(fā)癥。而且，這種手術(shù)過程通常難以逆轉(zhuǎn)。乙酰基-CoA羧化酶(ACC)是一類存在于大多數(shù)物種中的酶，其催化乙酰基-CoA生成丙二?；?CoA從而與脂肪酸的合成和代謝相關(guān)。已經(jīng)確定了在哺乳動(dòng)物中的ACC酶的兩種異型體(isoform)。ACC1在諸如脂肪和肝臟的脂肪形成組織中大量表達(dá)，其控制長鏈脂肪酸生物合成中的首要關(guān)鍵步驟。如果乙?；?CoA未被羧基化形成丙二?；?CoA，那么這種乙?；?CoA通過Krebs循環(huán)進(jìn)行代謝。ACC2是肝ACC中的次要組分但是心臟和骨骼肌中的主要異型體形式，其催化丙二?；?CoA在線粒體的胞內(nèi)表面(cystolicsurface)上生成，通過抑制肉堿棕櫚?；D(zhuǎn)移酶調(diào)節(jié)多少脂肪酸被用在/5-氧化中。因而，通過提高脂肪酸的利用率并且通過防止脂肪酸全程合成的增加，長期服用ACC-I也可以減少食用高脂肪飲食或低脂肪飲食的肥胖患者中的肝臟和脂肪組織的TG儲(chǔ)量，從而使身體脂肪選擇性消耗。目前，沒有acc1或acc2抑制劑被用作減肥藥物。因此，對(duì)于含有acc1抑制劑和acc2抑制劑的藥物具有持續(xù)的需求，這些抑制劑分別通過抑制脂肪酸的合成和通過增加脂肪酸的氧化來治療肥胖。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明涉及一種具有式(1)結(jié)構(gòu)的化合物0,(1)R8r7或其藥學(xué)上可接受鹽，其中(a)W是H、0h、鹵素、氰基、d.3烷基、Q—3垸氧基、d.3鹵代垸基、d.3鹵代烷氧基、Cw烷基磺酰基、-CO(O)H、-C(O)OCw烷基或苯基，其中，所述苯基可選地被1至5個(gè)r1q取代；(b)每個(gè)111()獨(dú)立地是OH、鹵素、氰基、3垸基、d.3垸氧基、Cw鹵代垸基、Cw鹵代垸氧基；(c)R2和R3各自獨(dú)立地是H、OH、鹵素、氰基、3烷基、d.3垸氧基、Cw鹵代垸基、Cw鹵代烷氧基、Cw烷基磺?；?、-CO(O)H、-C(O)OCw垸基、-C(0)NRHrU或笨基，其中，所述苯基可選地被1至5個(gè)r"取代；(d)R"和R^是單獨(dú)的且它們各自獨(dú)立地是H或d.3烷基，或者R"和R12與它們連接的氮連在一起形成4-7元雜環(huán)垸基；(e)I^是H、鹵素、氰基、Cw烷基或d-3鹵代垸基；(f)RS是單獨(dú)的，其是H、OH、鹵素、Q.3烷基、Q.3烷氧基、d.3鹵代烷基或Cw鹵代烷氧基；(g)R7是單獨(dú)的，其是H、0H、鹵素、Q—3烷基、C,—3垸氧基、C,.3鹵代烷基或Cl3鹵代烷氧基；(h)RS是單獨(dú)的，其是可選地被鹵素、Cw烷基、d.3烷氧基、Cw烷基-OH、Cw鹵代烷基或d—3取代的4-7元雜芳基；或者(i)W與RS或R"連在一起以及與115和W或R7所連接的苯基連在一起，從而形成具有含氮環(huán)的多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)，其中至少一個(gè)氮原子鍵合到所述苯基的碳原子上，所述含氮環(huán)可選地與環(huán)己烯、5,6-二氫-吡啶或5，6-二氫-lH-吡疲-2-酮稠合，并且所述含氮環(huán)可選獨(dú)立地被一個(gè)至兩個(gè)氧代基；鹵素、Cw垸基、d-3烷氧基、d.3烷基-OH、d-3鹵代垸基、d—3鹵代烷氧基、4-7元雜芳基、4-7元雜環(huán)垸基或苯基取代，其中，所述苯基可選地被1至5個(gè)R"取代，附加條件是RS未與116連在一起形成苯并三唑基或苯并噁二唑基，RS未與f連在一起形成苯并噁二唑基；以及(j)R8和W獨(dú)立地是H、OH、鹵素、d—3垸基、d—3垸氧基、d.3鹵代烷基或Cl3鹵代烷氧基，附加條件是所述化合物不是l'-(lH-l,2，3-苯并三唑-5-基羰萄-5-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-4(3H)-酮、6-氯-7-甲基-r-[3-(lH-吡唑-4-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮、6,7-二甲基-l'-[3-(m-吡唑-4-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮或6，7-二甲基-l'-[3-(m-吡唑-4-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌錠]-4(3H)-酮或其藥學(xué)上可接受鹽。本發(fā)明還涉及一種藥物組合物，其包含具有式(1)的化合物或者以下化合物的其中一種l'-(lH-l，2，3-苯并三唑-5-基羰基)-5-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮、6-氯-7-甲基-l'-[3-(lH-吡唑-4-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-4(3H)-酮、6，7-二甲基-l'-[3-(m-吡唑-4-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮和6,7-二甲基-r-[3-(lH-吡唑-4-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮，或者上述化合物的藥學(xué)上可接受鹽；并且還包含藥學(xué)上可接受載劑、媒劑、稀釋劑或賦形劑。本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種治療需要治療的哺乳動(dòng)物中的超重病癥的方法，所述方法包括施與所述哺乳動(dòng)物治療有效量的式(1)化合物或r-(m-l,2，3-苯并三唑-5-基羰基)-5-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮、6-氯-7-甲基-l'-[3-(lH-吡唑-4-基)苯甲酰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮、6,7-二甲基-l'-[3-(lH-吡唑-4-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-4(3H)-酮或6,7-二甲基-r-[3-(m-吡唑-4-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮或其藥學(xué)上可接受鹽。本發(fā)明的化合物、鹽和藥物組合物用于治療2型糖尿病、胰島素抵抗、代謝綜合征、動(dòng)脈粥樣硬化、高脂血癥、低脂血癥(dislipidemia)、充血性心力衰竭、冠心病、中風(fēng)和癌癥。優(yōu)選地，本發(fā)明的化合物、鹽和藥物組合物用于治療用于治療哺乳動(dòng)物中的超重或肥胖病癥。具體實(shí)施例方式用于描述本發(fā)明的術(shù)語在本文中具有如下含義。在本文中，根據(jù)IUPAC(國際純粹和應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(huì))推薦的有機(jī)化學(xué)品的命名法以及CAS索引號(hào)規(guī)則對(duì)本發(fā)明的化合物和中間體進(jìn)行命名。在本文中，各種含烴片段的碳原子含量可由表示該片段中碳原子最少個(gè)數(shù)和最多個(gè)數(shù)的前綴來表示，例如前綴(Ca-Cb)垸基和Ca—b垸基表示含有整數(shù)"a"至"b"個(gè)碳原子的烷基片段，并包括端點(diǎn)"a"和"b"。從而，例如(CVQ)烷基和d—6烷基指含有1至6個(gè)碳原子的烷基。術(shù)語"被取代的"意指，基團(tuán)中的碳原子、氮原子或硫原子上的氫原子被不同的原子或基團(tuán)替代。替代氫原子的原子或分子也被稱為"取代基"。術(shù)語"基團(tuán)"指一組原子，其作為化學(xué)反應(yīng)中的單一反應(yīng)物，例如有機(jī)基團(tuán)是賦予含有該有機(jī)基團(tuán)的化合物特征性質(zhì)的一組原子，或者所述基團(tuán)在一系列反應(yīng)或變換中保持不變。術(shù)語"垸基"指線性或支化的飽和碳原子鏈。烷基的實(shí)例包括但不限于甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基和叔丁基。術(shù)語"垸氧基"指線性或支化、一價(jià)的飽和碳原子鏈，其鍵合到氧原子上。烷氧基的實(shí)例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丁氧基、叔丁氧基等等。術(shù)語"鹵素"指氯、氟或溴。術(shù)語"齒代烷基"指這樣的烷基，其中一個(gè)或多個(gè)碳被齒素基取代。鹵代烷基的實(shí)例包括但不限于二氟甲基、三氟甲基和1，2-二氟乙基。術(shù)語"4-7元雜環(huán)垸基"指具有含有4-7個(gè)環(huán)原子的非芳族環(huán)的基團(tuán)，該基團(tuán)包含1個(gè)氮，可選包含1-2個(gè)選自O(shè)、N和S的額外雜原子。所述4-7元雜環(huán)烷基環(huán)的實(shí)例包括但不限于氮雜環(huán)丁烷、吡咯烷、哌啶、氮雜環(huán)庚烷、吡咯啉、咪唑啉、咪唑烷、吡哇烷、嗎啉、硫代嗎啉和哌嗪。術(shù)語"4-7元雜芳基"指具有含有4-7個(gè)環(huán)原子的單環(huán)芳族環(huán)的基團(tuán)，所述環(huán)原子由碳和1-3個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子組成。上述雜芳基的實(shí)例包括但不限于吡咯、吡唑、吡啶、咪唑、噁二唑、嘧啶、噁唑、異噁唑、三唑、四唑、噠嗪、吡嗪、噻唑和噻二唑。本發(fā)明的雜芳基可選地被獨(dú)立地選自鹵素、Cw烷基、d.3垸氧基、d.3垸基-OH、C，.3鹵代烷基和Cw鹵代烷氧基的取代基取代1-2次。術(shù)語"多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)"指含有苯環(huán)的二環(huán)或三環(huán)雜環(huán)基團(tuán)，基團(tuán)中含有的苯環(huán)與芳族或非芳族5-6元含氮環(huán)稠合，其中所述含氮環(huán)含有一個(gè)鍵合到所述苯基的碳原子上的氮原子，并且包含額外一個(gè)到兩個(gè)選自N、O和S的雜原子。多環(huán)雜環(huán)的含氮環(huán)可選地與選自環(huán)己烯和5，6-二氫-lH-吡啶-2-酮的第三環(huán)稠合。多環(huán)雜環(huán)的實(shí)例包括但不限于1H-吲唑、1H-苯并咪唑、喹啉、1,2,3,4-四氫喹啉、喹喔啉、lH-吲哚、2,3-二氫-lH-苯并咪唑和lH-苯并[d][l,2,3]三唑、6,7,8,9-四氫-5H-咔唑、2,3,4,9-四氫-lH-卩比啶并[l,2,3]三唑基、6,7,8,9-四氫-5H-咔唑基、2，3，4,9-四氫-lH-吡啶并-[3,4-b]吲哚基或苯并噁唑基。所述多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)的含氮環(huán)可選地被取代。在這個(gè)實(shí)施方式中，甚至更優(yōu)選地，多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)是可選地被取代的1H』引唑基、iH-苯并咪唑基、lH-吲哚基或2，3,4，9-四氫-lH-吡啶并[3，4-b]吲哚基。然而甚至更優(yōu)選地，對(duì)于其中W與W連在一起的化合物和鹽，W是H、鹵素、CH3或OCH3;R是H、鹵素、CH3或OCH3;R4是H。在其中W與RS連在一起的式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受鹽的另一實(shí)施方式中，可選地被取代的含氮環(huán)可選包含第二N、O或S雜原子。所述含氮環(huán)可選地與環(huán)己烯、5,6-二氫-吡啶或5，6-二氫-lH-吡啶-2-酮稠合。更優(yōu)選地，對(duì)于其中115與W連在一起的化合物和鹽，所述多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)是1H-B引唑基、1H-苯并咪唑基、1H-吲哚基或2,3-二氫-lH-苯并咪唑基。所述多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)的含氮環(huán)可選地被取代。在這個(gè)實(shí)施方式中，甚至更優(yōu)選地，多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)是可選地被取代的1H』引唑基。然而甚至更優(yōu)選地，對(duì)于其中W與R"連在一起的化合物和鹽，R/是H、鹵素、CH3或OCH3;R是H、鹵素、CH3或OCH3;R4是H。13當(dāng)Rs單獨(dú)時(shí)，優(yōu)選的Rs是可選地被取代的雜芳基，其選自吡唑基、咪唑基、噁二唑基和嘧啶基。更優(yōu)選地，R5是可選地被取代的雜芳基，其選自吡唑基和咪唑基。甚至更優(yōu)選地，R/是H、鹵素、CH3或OCH3;R3是H、卣素、CH3或OCH3;R4是H。本發(fā)明的化合物可以包含立體形成中心(stereogeniccenters)。這些化合物可以以對(duì)映異構(gòu)體混合物的形式存在或者以純對(duì)映異構(gòu)體的形式存在。在化合物包含立體形成中心的情況下，可以通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的方法將化合物拆分成純對(duì)映異構(gòu)體，例如通過如下方法形成可以被分離的非對(duì)映異構(gòu)鹽，例如通過結(jié)晶；形成可以被分離的立體異構(gòu)體的衍生物或復(fù)合物，例如通過結(jié)晶、氣液色譜或液相色譜；使一種對(duì)映異構(gòu)體與對(duì)映異構(gòu)體特異試劑進(jìn)行選擇性反應(yīng)，例如酶酯化；或者在手性環(huán)境中，例如在具有結(jié)合手性配體的手性載體(例如硅石)上或者在手性溶劑的存在下，進(jìn)行氣液色譜法或液相色譜法。應(yīng)當(dāng)認(rèn)識(shí)到，在通過上述分離過程的其中之一將所需立體異構(gòu)體轉(zhuǎn)化成另一化學(xué)實(shí)體的情況下，需要進(jìn)一步的步驟來釋放所需對(duì)映異構(gòu)形式?；蛘呖梢酝ㄟ^如下合成特定的立體異構(gòu)體采用光學(xué)活性原料；采用光學(xué)活性試劑、底物、催化劑或溶劑進(jìn)行不對(duì)稱合成；或者通過不對(duì)稱轉(zhuǎn)化將一種立體異構(gòu)體轉(zhuǎn)化成另一種立體異構(gòu)體。某些式(1)化合物可以以各種不同的穩(wěn)定構(gòu)象形式存在，這些構(gòu)象形式是可分離的。扭轉(zhuǎn)不對(duì)稱由于圍繞不對(duì)稱單鍵的旋轉(zhuǎn)受限(例如由于空間位阻或環(huán)張力)，因而其可以允許不同的構(gòu)象形式分離。本發(fā)明的化合物進(jìn)一步包括式(1)化合物的每個(gè)構(gòu)象異構(gòu)體及其混合物。本文中所用與本發(fā)明化合物相關(guān)的藥學(xué)上可接受鹽包括所述化合物的藥學(xué)上可接受無機(jī)鹽和有機(jī)鹽。這些鹽可以在化合物的最終分離和純化期間原位制備，或者可以通過如下制備使化合物或其前體分別與適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)酸或無機(jī)酸反應(yīng)，然后分離由此形成的鹽。具有代表性的鹽包括但不限于氫溴酸鹽、氫氯酸鹽、氫碘酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、硝酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、草酸鹽、苯磺酸鹽、棕櫚酸鹽、撲酸鹽(pamoate)、丙二酸鹽、硬脂酸鹽、月桂酸鹽、蘋果酸鹽、苯甲酸鹽、乳酸鹽、磷酸鹽、六氟磷酸鹽、苯磺酸鹽、甲苯磺酸鹽、甲酸鹽、檸檬酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、萘酸鹽、甲磺酸鹽、葡庚糖酸鹽、乳糖酸鹽和十二烷基磺酸鹽等等。這些還可以包含基于如下的陽離子堿金屬和堿土金屬，諸如鈉、鋰、鉀、鈣、鎂等等；以及非毒性銨、季銨和胺陽離子，包括但不限于銨、四甲基銨、四乙基銨、甲基銨、二甲基銨、三甲基銨、三乙基銨、以及銨等等。對(duì)于其它實(shí)施例，參見例如Berge等人的J.Pharm.Sci"66,1-19(1977)。本發(fā)明的化合物和鹽可以以非溶劑化和溶劑化兩種形式存在。本文中所用術(shù)語"溶劑化物"指含有本發(fā)明的化合物和一種或多種藥學(xué)上可接受溶劑分子(例如乙醇)的分子復(fù)合物。當(dāng)所述溶劑是水時(shí)，使用術(shù)語"水合物"。藥學(xué)上可接受溶劑化物包括水合物和其它溶劑化物，其中結(jié)晶溶劑可被同位素取代，例如為D20、(16-丙酮、d6-DMSO(二甲基亞砜)。某些式(1)化合物及其鹽可以以一種以上晶體形式存在。式(1)所表示化合物的多晶型構(gòu)成本發(fā)明的一部分，其可以通過如下制備在不同條件下使式(1)化合物結(jié)晶。例如，使用各種不同的溶劑或各種不同溶劑的混合物進(jìn)行重結(jié)晶；在不同的溫度下進(jìn)行結(jié)晶；在結(jié)晶過程中使用各種冷卻模式，所述冷卻模式在非常快速至非常緩慢的范圍內(nèi)。還可以通過如下得到多晶型加熱或熔融式(1)化合物，然后逐步冷卻或快速冷卻。多晶型的存在可以通過固體探針核磁共振(NMR)譜、紅外(IR)光譜、差示掃描量熱、粉末X射線衍射或其它技術(shù)來測定。本發(fā)明還包括被同位素標(biāo)記的化合物，這些化合物與式(1)所述那些化合物相同，但其中一個(gè)或多個(gè)原子被原子數(shù)或質(zhì)量數(shù)與自然界中通常存在的原子叔或質(zhì)量數(shù)不同的原子替代。可以摻入本發(fā)明的化合物中的同位素的實(shí)例包括氫、碳、氮、氧、硫和氟的同位素，分別諸如為211、3H、13C、14C、15N、180、170、35S、36C1、125I、1291和18F。含有上述同位素以及/或者含有其它原子的其它同位素的本發(fā)明的化合物和本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受鹽也包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)。本發(fā)明的某些被同位素標(biāo)記的化合物，例如其中摻入諸如^和"C的放射性同位素的那些化合物，可用在藥物中和/或用在底物組織分布試驗(yàn)中。氚(即3H)和碳-14(即14C)同位素由于易于制備且可探測因而特別優(yōu)選。而且，采用諸如氖(即210的較重同位素取代由于具有較高的代謝穩(wěn)定性因而可能提供某些治療益處，例如提高了體內(nèi)半衰期或降低了劑量需求，因而在某些情況下是優(yōu)選的。本發(fā)明的被同位素標(biāo)記的式(1)化合物及其鹽通常通過如下制備實(shí)施在以下示意圖中以及/或者在以下實(shí)施例中公開的過程，其中用易于得到的被同位素標(biāo)記的試劑替代未被同位素標(biāo)記的試劑。本發(fā)明的化合物可被分離然后原樣使用，或者可以以其藥學(xué)上可接受鹽的形式使用。根據(jù)本發(fā)明，具有多個(gè)堿性氮原子的化合物可以與各種數(shù)量當(dāng)量("eq.")的酸形成鹽。本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解到，所有上述鹽都落在本發(fā)明的范圍內(nèi)。本發(fā)明進(jìn)一步包括式(1)化合物的前藥。式(1)化合物的前藥可以是以常規(guī)方式形成的化合物，其具有官能團(tuán)，諸如具有氨基、羥基或羧基。術(shù)語"前藥"指在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成式(1)化合物或所述化合物的藥學(xué)上可接受鹽的一種化合物。所述轉(zhuǎn)化可以通過各種機(jī)理發(fā)生，諸如通過在血液中水解。T.Higuchi和W.Stella在"Pro-drugsasNovelDeliverySystems,"Vol.14，A.C.S.SymposiumSeries中以及在BioreversibleCarriersinDrugDesign,EdwardB.Roche編車葺,AmericanPharmaceuticalAssociationandPergamonPress,1987中討論了前藥的使用。例如當(dāng)本發(fā)明化合物中的一些具有胺官能團(tuán)時(shí)，前藥可以采用諸如R-羰基、RO-羰基、NRR'-羰基的基團(tuán)替代氨基中的氫原子來形成，所述基團(tuán)中，R和R，各自獨(dú)立地是(CVdQ)烷基、(C3-C7)環(huán)垸基、芐基，或者R-羰基是天然的a-氨基?；⑻烊坏腶-氨基?；?天然的a-氨基?；?C(OH)C(O)OY，(其中Y,是H、(Q-C6)垸基或芐基)、-C(OY晶(其屮Yo是(d-C()烷基，Y!是(d-C6)烷基、羧基(d-C6)烷基、氨基(Ci-C4)垸基或單-N-或二-N,N-(d—C6)燒基氨基烷基)、-C(Y2)Y3(其中Y2是H或甲基，Y3是單-N-或二-N,N-(Q-C6)垸基氨基、嗎啉代基、哌啶-l-基或吡咯烷-l-基)。類似地，如果本發(fā)明的化合物包含醇官能團(tuán)，那么前藥可以采用諸如(C廣C6)烷?；跫谆-((Q-C6)垸?；?乙基、l-甲基-l-((C廣C6)烷?；?乙基、(CrC6)垸氧基羰基氧甲基、N-(d-C6)垸氧基羰基氨基甲基、琥珀?；?、(CrQ)垸?；-氨基(d-C4)垸?；?、芳基?；蚢-氨基?；騝c-氨基酰基-a-氨基?；?其中每個(gè)a-氨基酰基基團(tuán)獨(dú)立地選自天然存在的L氨基酸)、P(0)(OH)2、-P(0)(0(d-C6)烷基)2或糖基(從碳水化合物的半縮酸形式中除去羥基所獲得的基團(tuán))的基團(tuán)替代醇基中的氫原子來形成。如果本發(fā)明的化合物包含羧酸官能團(tuán)，那么前藥可以包含通過如下形成的酯采用諸如(d-C8)垸基、(C2-d2)烷酰基氧甲基、具有4-9個(gè)碳原子的l-(垸?；?乙基、具有5-10個(gè)碳原子的l-甲基-l-(烷?；?-乙基、具有3-6個(gè)碳原子的垸氧基羰基氧甲基、具有4-7個(gè)碳原子的l-(烷氧基羰基氧)乙基、具有5-8個(gè)碳原子的l-甲基-l-(烷氧基羰基氧)乙基、具有3-9個(gè)碳原子的N-(烷氧基羰基)氨基甲基、具有4-10個(gè)碳原子的l-(N-(烷氧基羰基)氨基)乙基、3-苯并呋喃酮基、4-巴豆內(nèi)酯基、7-丁基內(nèi)酉旨-4-基、二-N,N-(CrC2)垸基氨基(C2-C3)烷基(諸如(3-二甲基氨基乙基)、氨基甲?；?(CrC2)烷基、N,N-二(d-Q)烷基氨基甲?；?(d-C2)烷基和哌啶代(C2-C3)烷基、吡咯烷(C2-C3)垸基或嗎啉代(C2-C3)烷基的基團(tuán)替代羧酸的氫原子。合成一般而言，根據(jù)本文所含有的說明內(nèi)容，可以通過包括化學(xué)領(lǐng)域已知工藝的方法來制備本發(fā)明的式(1)化合物。以下反應(yīng)示意圖闡明了用于制備本發(fā)明的式(1)化合物的某些方法。其它方法在實(shí)驗(yàn)部分進(jìn)行描述。正如本文所述，還制備了用在示意圖和實(shí)施例中所述反應(yīng)中的一些起始化合物。如以下示意圖A所示，可以制備式(1)化合物，其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9如上定義。示意圖A<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>在示意圖A中，式(1)化合物通過如下形成使螺環(huán)酮(2)與羧酸在溶液中偶聯(lián)。螺環(huán)酮(2)與羧酸(3)可以通過如下偶聯(lián)在活化試劑(諸如N,N-二異丙基乙基胺(DIEA))的存在下使羧酸(3)與諸如2-(7-氮雜-lH-苯并三唑-l-基)-l,l，3,3-四甲基脲六氟磷酸鹽(HATU)的肽偶聯(lián)劑進(jìn)行接觸，從而形成活化的羧酸酯；然后使活化的羧酸酯與螺環(huán)酮(2)接觸，從而形成式(1)化合物?；蛘呤?1)化合物可以通過如下形成首先將羧酸(3)轉(zhuǎn)化成酰氯，例如通過與亞硫酰氯反應(yīng)；然后使酰氯與螺環(huán)酮(2)反應(yīng)，從而形成式(1)化合物。如示意圖B-E所述，可以制備式(2)化合物及其起始原料。示意圖BR4(2)為了制備螺環(huán)酮(2)，將被取代的或未被取代的l-(2-羥苯基)乙酮(5)、4-氧代哌啶-l-羧酸叔丁酯和吡咯烷(1:1:1摩爾比)在諸如甲醇的溶劑中的溶液在溫度范圍在室溫至回流之間的溫度下攪拌24小時(shí)，并蒸發(fā)，從而得到N-Boc-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮(4)。然后，向N-Boc-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮(4)在諸如二氯甲烷、異丙醇或二氧雜環(huán)己烷的溶劑中的溶液添加諸如HC1或三氟乙酸的酸，然后攪拌，從而通過除去BOC(叔丁基氧羰基)基使胺脫保護(hù)，由此形成螺環(huán)酮(2)。19示意圖C(54)或者，可以如示意圖C所示對(duì)N-Boc-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮進(jìn)行衍生。例如，在適當(dāng)催化劑(諸如二氯二(三苯基膦)鈀II)、堿(諸如三乙胺)的存在下并且在醇溶劑(諸如甲醇)的存在下，用一氧化碳對(duì)N-Boc-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮(其中R1、R2、113或114的其中之一是溴基)(14)進(jìn)行處理，從而得到N-Boc-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮甲酯衍生物(24)。另一種制法需要在適當(dāng)堿(諸如吡啶)的存在下用三氟甲磺酸酐對(duì)羥基-N-Boc-螺環(huán)[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-4(3H)-酮(34)衍生化合物在諸如二氯甲垸的惰性溶劑中的溶液進(jìn)行處理，從而得到所需N-Boc-螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮的三氟甲磺酸鹽衍生物(44)。在適當(dāng)堿(諸如三乙胺)的存在下并且在醇(諸如甲醇)的存在下，用適當(dāng)催化劑混合物(諸如乙酸鈀和l,l，-二(二苯基膦)二茂鐵)以及用一氧化碳對(duì)三氟甲磺酸鹽在諸如二甲基甲酰胺的溶劑中的溶液進(jìn)行處理，從而得到所需甲酯(54)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>如示意圖D所述，通過示意圖B和C所述方法制成的螺環(huán)酯可被進(jìn)一步衍生成酰胺、酯和酸。在酸媒介下，從甲酯中除去N-Boc保護(hù)基團(tuán)得到酯衍生螺環(huán)(12)。或者，使被N-Boc保護(hù)的螺環(huán)皂化，從而得到羧酸中間體(64)。利用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的方法可以將胺偶聯(lián)到羧酸上，從而得到酰胺衍生物(74)，當(dāng)用酸處理該酰胺衍生物時(shí)，得到所需螺環(huán)胺(22)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>如示意圖E所述，由示意圖B和C所述方法制成的螺環(huán)酯可利用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的各種方法被進(jìn)一步衍生成相應(yīng)的醛。通過Tanaka,A.等人在J.Med.Chem.1998,41,2390—2410中所述的方法，將所述醛可以轉(zhuǎn)化成各種五元雜環(huán)?；蛘呖梢圆捎靡阎桨?Buchwald,S.L.等人，Org.Lett.2006，在線預(yù)出版)將芳基溴直接轉(zhuǎn)化成Weinreb酰胺?？梢圆捎帽绢I(lǐng)域普通技術(shù)人員己知的方法將所得Weinreb酰胺轉(zhuǎn)化成所需酮?？梢酝ㄟ^Tanaka，A.等人在J.Med.Chem.1998,41,2390—2410中所述的方法將所得酮轉(zhuǎn)化成各種五元雜環(huán)。示意圖F1)AcCI/溶液<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>為了制備鄰-羥基苯乙酮(5)，將諸如乙酰氯和乙酸酐的乙?；噭┘尤氡椒?6)中，然后將反應(yīng)混合物在介于室溫和回流的溫度下攪拌。真空除去過量乙?；噭?，然后將O-乙?；谋椒佑肁lCl3處理，接著加熱至高溫，諸如180°C。然后將反應(yīng)混合物冷卻，用水性酸，諸如稀釋的鹽酸淬滅，接著過濾，從而得到所需鄰-羥基苯乙酮。本發(fā)明的藥物組合物包含治療有效量的式(1)化合物或所述化合物的藥學(xué)上可接受鹽，以及藥學(xué)上可接受載劑、媒劑、稀釋劑或賦形劑。在本發(fā)明的藥物組合物的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式(其中115和RJ連在一起)中，所述多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)是1H』引唑基、1H-苯并咪唑基、喹啉基、1,2,3,4-四氫喹啉基、喹喔啉基、1H-吲哚基、2,3-二氫-lH-苯并咪唑基、lH-苯并-[d][l，2,3]三唑基、6，7，8，9-四氫-5H-咔唑基、2,3，4，9-四氫-lH-吡啶并-[3,4-b]吲哚基或苯并噁唑基。所述多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)的含氮環(huán)可選地被取代。在本發(fā)明的藥物組合物的另一優(yōu)選實(shí)施方式(其中115和116連在一起)中，所述多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)是與環(huán)己烯、5,6-二氫-吡啶或5，6-二氫-lH-吡啶-2-酮稠合的1H-吲唑基、lH-苯并咪唑基、1H-吲哚基或2,3-二氫-lH-苯并咪唑基。所述多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)的含氮環(huán)可選地被取代。在本發(fā)明的藥物組合物的另一優(yōu)選實(shí)施方式中，RS是單獨(dú)的，其是可選地被取代的吡唑基、咪唑基、噁二唑基或嘧啶基。然后，通過組合本發(fā)明的化合物以及藥學(xué)上可接受載劑、媒劑或稀釋劑所形成的藥物組合物易于以各種藥劑形式服用，所述藥劑形式諸如為片劑、散劑、錠劑、酏劑、可注射溶液等等。如果需要，這些藥物組合物還可以包含額外成分，諸如調(diào)味劑、粘合劑、賦形劑等等。由此，對(duì)于經(jīng)口服用，可以將含有各種賦形劑(諸如檸檬酸鈉、碳酸鈣和/或磷酸鈣)的片劑連同各種崩解劑(諸如淀粉、硅藻酸和/或某些復(fù)合硅酸鹽)以及粘合劑(諸如聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖、凝膠和/或阿拉伯樹膠)一起使用?；蛘?，諸如硬脂酸鎂、月桂基硫酸鈉和滑石的潤滑劑也常用于制片目的。類似形式的固體組合物可以被用在軟質(zhì)凝膠膠囊和硬質(zhì)凝膠膠囊中作為填料。對(duì)于這點(diǎn)的優(yōu)選材料包括乳糖(lactose或milk23sugar)或高分子量聚乙二醇。當(dāng)經(jīng)口服用需要水性懸浮液或酏劑時(shí)，可以將本文中活性藥學(xué)試劑與各種甜味劑或調(diào)味劑、著色物質(zhì)或染料、乳化劑或懸浮劑(如果需要)連同諸如水、乙醇、丙二醇、丙三醇及其/或其組合的稀釋劑進(jìn)行組合。對(duì)于胃腸外施予，可以采用本發(fā)明的化合物或組合物在芝麻油或花生油、水性丙二醇中的溶液，或者在無菌水溶液中的溶液。如果需要，應(yīng)當(dāng)適當(dāng)緩沖上述水溶液，并且用足夠的鹽水或葡萄糖首先對(duì)液體稀釋劑進(jìn)行等壓處理。這些特定水溶液尤其適于靜脈內(nèi)給藥、肌肉內(nèi)給藥、皮下給藥和腹膜內(nèi)給藥。以這種方式，所用無菌水性介質(zhì)都易于通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)獲得。對(duì)于鼻內(nèi)施予或者通過吸入施予，本發(fā)明的化合物或組合物通?？梢砸匀芤夯驊腋∫盒问接苫颊邤D壓或抽吸的泵噴霧容器來進(jìn)行輸送，或者可以以氣霧劑噴霧形式由加壓的容器、霧化器(其中可使用合適的推進(jìn)劑，諸如二氯二氟甲垸、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其它合適的氣體)來進(jìn)行輸送。在加壓氣霧器的情況下，通過提供輸送定量藥物的閥來確定劑量單位。加壓的容器或霧化器可以包含本發(fā)明化合物的溶液或懸浮液。在吸入器或吹入器中使用的膠囊或彈藥筒(例如由凝膠制成)可被配制成含有本發(fā)明的化合物和合適粉末基質(zhì)(諸如乳糖或淀粉)的粉末混合物。用于制備各種含有一定量的活性成分的藥物組合物的方法對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是已知的，或者對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說根據(jù)本發(fā)明公開的內(nèi)容是明顯的。用于制備藥物組合物的方法的實(shí)例，參見Remington'sPharmaceuticalSciences,MackPublishingCompany,Easton,Pa.,第19版(1995)。本發(fā)明還涉及一種用于治療或防止哺乳動(dòng)物(包括人類)中的超重或肥胖病癥的治療方法，其中，將本發(fā)明的式(1)化合物或其鹽作為所設(shè)計(jì)的適當(dāng)劑量方案的一部分進(jìn)行施用，從而獲得治療益處。適當(dāng)?shù)膭┝糠桨浮⑺玫膯未蝿┝恳约盎衔飫┝恐g的間隔取決于所使用的本發(fā)明的式(1)化合物、所使用的藥物組合物的類型、被治療研究對(duì)象的特征以及病癥的嚴(yán)重程度。一般而言，對(duì)于本發(fā)明化合物和鹽而言，活性化合物在單一劑型或多次劑型中的有效劑量在0.001毫克(mg)/kg/天至100mg/kg/天的范圍內(nèi)，優(yōu)選在0.01mg/kg/天至10mg/kg/天的范圍內(nèi)。然而，根據(jù)被治療研究對(duì)象的病癥可對(duì)劑量進(jìn)行一些必要變化。無論如何，開具藥方的個(gè)體將決定個(gè)體研究對(duì)象的適當(dāng)劑量。技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到，"kg"指所測定患者的重量，以kg計(jì)。對(duì)于人類使用，普通的劑量在10-300mg/kg的范圍內(nèi)。具有較高療效和/或改進(jìn)藥物動(dòng)力學(xué)的化合物具有較低的劑量需求，通常為0.1-10mg/kg。本發(fā)明的化合物或組合物可以單一劑量(例如每天一次)或多次劑量形式服用，或者可以通過持續(xù)輸注施與。本發(fā)明的化合物還可以以單一劑量或多次劑量形式單獨(dú)服用，或者以單一劑量或多次劑量形式與藥學(xué)上可接受載劑、媒劑或稀釋劑組合服用。適當(dāng)?shù)乃帉W(xué)載劑、媒劑和稀釋劑包括惰性固體稀釋劑或填料、無菌水溶液和各種有機(jī)溶劑。本發(fā)明的化合物或組合物可以通過各種常規(guī)施與方式施與需要治療的研究對(duì)象，所述施與方式包括經(jīng)口施與和胃腸外施與(例如靜脈內(nèi)施與、皮下施與和腹膜內(nèi)施與)。而且，本發(fā)明的藥物組合物可以通過鼻內(nèi)施與、作為栓劑施與、或者通過使用"快速"制劑施與(即將藥物溶于嘴中而不需用水)。實(shí)施例以下在本文中闡述的實(shí)施例僅僅為了說明目的。組合物、方法以及木文所記載的各種參數(shù)僅僅為了舉例說明本發(fā)明的各個(gè)方面以及實(shí)施方式，并不意欲以任何方式限制本發(fā)明所要求保護(hù)的范圍。除非另有聲明，所有反應(yīng)物均從商業(yè)途徑獲得。根據(jù)Still等人在J.Org.Chem.,1978,43,2923中描述的方法進(jìn)行快速色譜。采用含有KP-SIL硅石(40-63AtM,60埃)的40M或40SBiotage⑧柱(BioatgeAB;Uppsala,Sweden)進(jìn)行本文所述的所有Biotage⑧純化。采用填充RediSep⑧硅石的柱子利用CombiFlashCompanion系統(tǒng)(TeledyneIsco;Lincoln,Nebraska)進(jìn)行本文所述的戶萬有Combiflash⑧純化。在Waters(WatersCorp.;Milford,MA)MicromassPlatformII光譜儀上記錄質(zhì)譜。除非另有聲明，在Waters(Milford,MA)MicromassPlatformII光譜儀上記錄質(zhì)譜。所列舉的質(zhì)子NMR化學(xué)位移從四甲基硅烷幵始向低場以份/百萬(ppm)計(jì)，并且在VarianUnity400MHz(megaHertz)光譜儀(VarianInc.;PaloAlto,CA)上進(jìn)行記錄。所列舉的NMR化學(xué)位移從四甲基硅垸(對(duì)于質(zhì)子)開始或從氟三氯甲垸(對(duì)于氟)開始向低場以份/百萬(ppm)計(jì)。以下制法被用在在以下實(shí)施例中進(jìn)一步舉例說明本發(fā)明的化合物的合成中。螺環(huán)酮螺環(huán)酮被用于制備本發(fā)明的示例性化合物，采用以下螺環(huán)酮制法1-25中的其中一個(gè)方法制備螺環(huán)酮。螺環(huán)酮的制法17-甲氧基螺環(huán)「苯并吡喃-2,4，-哌啶l-4(3HV酮向l-(2-羥基-4-甲氧基苯基)乙酮(AcrosOrganicsUSA,MorrisPlains,NJ)(83毫克(mg)，0.5毫摩爾(mmol))在甲醇(1毫升(mL))中的溶液添加4-氧代哌啶-l-羧酸叔丁酯(111mg，0.56mmol)和吡咯烷(42.5微升O(L)，0.51mmol)。將混合物加熱回流過夜。將混合物冷卻至室溫、濃縮并用Biotage色譜(8%丙酮/庚烷)純化，從而得到黃色固體狀N-Boc-7-甲氧基螺環(huán)-[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮(89mg，51%)，248(M-Boc,ES+)。向N-Boc-7-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌咬]-4(3H)-酮(58mg,0.17mmol)在甲醇(lmL)中的溶液添加在二氧雜環(huán)己烷(0.40mL)中的4NHC1。將混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。將混合物濃縮從而得到7-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-4(3H)-酮鹽酸鹽，其直接使用不需進(jìn)一步純化(45mg,95%)，248(ES+)。螺環(huán)酮的制法26-甲氧基螺環(huán)f苯并吡喃-2,4'-哌啶l-4(3HV酮向l-(2-羥基-5-甲氧基苯基)乙酮(831mg，5.0mmol)在甲苯(5mL)中的溶液添加4-氧代哌啶-l-羧酸叔丁酯(1.20克(g)，6.0mmo1)禾口吡咯垸(356mg，5.0mmol)。將混合物加熱回流過夜。將混合物冷卻至室溫、濃縮并用Biotage色譜(8%丙酮/庚垸)純化，從而得到黃色固體狀N-Boc-6-甲氧基螺環(huán)-[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-4(3H)-酮(1.27g，70%)。&NMR(CDC13)57.27(d,J=3,1H),7.10(dd,J=9，3，1H),6.91(d,J=9,1H),3.84(m,2H),3.78(s,3H),3.18(t,J=12,2H),2.68(brs,2H),2.01(d,J=13,2H),1.57(m,2H)，1.44(s,9H)。向N-Boc-6-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮(42mg,0.12mmol)在甲醇(lmL)中的溶液添加在二氧雜環(huán)己烷(0.30mL)中的4NHC1。將混合物在室溫下攪拌90分鐘。將混合物濃縮從而得到6-氯-7-甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮，其直接使用不需進(jìn)一步純化(34mg,100%)。螺環(huán)酮的制法36-氯-7-甲基螺環(huán)「苯并吡喃-2,4'-哌啶l-4(3H)-酮向1-(5-氯-2-羥基-4-甲基苯基)乙酮(371mg，2.0mmol)在苯(2mL)中的溶液添加4-氧代哌啶-l-羧酸叔丁酯。將混合物加熱回流過夜。將混合物冷卻至室溫、濃縮并用Biotage色譜(10%丙酮/庚烷)純化，從而得到黃色固體狀N-Boc-6-氯-7-甲基螺環(huán)-[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮，91%。iHNMR(CDCl3)57.79(s,lH),6.87(s,lH),3.88(m,2H),3.17(m,2H)，2.66(s，2H),2.42(m，1H),2.36(s,3H),1.98(m,2H)，1.58(m,2H)，1.44(s,9H)。向N-Boc-6-氯-7-甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮(60mg,0.16mmol)在MeOH(lmL)中的溶液添加在二氧雜環(huán)己烷(0.40mL)中的4NHC1。將混合物在室溫下攪拌4小時(shí)。將混合物濃縮從而得到6-氯-7-甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮鹽酸鹽，其直接使用不需進(jìn)一步純化(50mg,100%)，266(ES+)。螺環(huán)酮的制法45,6，7-三甲氧基螺環(huán)「苯并吡喃-2,4，-哌啶l-4〖3HV酮向l-(6-羥基-2，3,4-三甲氧基苯基)乙酮(452mg，2.0mmol)在苯(2mL)中的溶液添加4-氧代哌啶-l-羧酸叔丁酯(438mg，2.2mmol)和吡咯烷(0.2mL，2mmol)。將混合物加熱回流過夜。將混合物冷卻至室溫、濃縮并用Biotage色譜(15%丙酮/庚烷)純化，從而得到黃棕色固體狀N-Boc-5，6,7-三甲氧基螺環(huán)-[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮(203mg，33%),308(ES+)。向N-Boc-5，6，7-三甲氧基螺環(huán)-[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-4(3H)-酮(60mg，0.15mmol)在甲醇(1mL)中的溶液添加在二氧雜環(huán)己烷(0.40mL)中的4NHC1。將混合物在室溫下攪拌4小時(shí)。將混合物濃縮從而得到5,6,7-三甲氧基螺環(huán)-[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮鹽酸鹽，其直接使用不需進(jìn)一步純化(53mg，100%),308(ES+)。螺環(huán)酮的制法56-氯-5-甲氧基螺環(huán)「苯并吡喃-2,4'-哌啶l-4(3HV酮在(TC下，向2-羥基-6-甲氧基苯乙酮(500mg,3.0mmol)在二乙醚(4.5mL)中的溶液滴加磺酰氯(0.27mL,3.4mmol)。將所得混合物加熱回流4小時(shí)，然后冷卻至室溫。將二乙醚溶液用水洗滌兩次，然后將有機(jī)相分離并濃縮。用Biotage色譜(40S柱子，6%丙酮/庚烷)純化所得物質(zhì)，從而得到黃色液體狀1-(3-氯-6-羥基-2-甲氧基苯基)乙酮(563mg,93%)。ES-m/z199(M-,100%),iHNMR(CDC13)S12.68(s,1H)，7.41(d,J=9.2,1H),6.72(d,J=9.2，1H),3.92(s,3H),2.74(s,3H)。28向1-(3-氯-6-羥基-2-甲氧基苯基)乙酮(5'63mg,2.8mmol)在甲醇(3mL)中的溶液添加4-氧代哌啶-l-羧酸叔丁酯(623mg，3.13mmol)和吡咯烷(0.24mL，2.9mmo1)。將混合物加熱回流過夜。將混合物冷卻至室溫、濃縮并用Biotage色譜(7-10%丙酮/庚烷)純化，從而得到紅色色固體狀N-Boc-6-氯-5-甲氧基螺環(huán)-[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮(670mg,63%)。NMR(CDC13)57.45(d，J=9，1H)，6.74(d,J=9，1H),3.88(s，3H)，3.18(m,3H)，2.68(s，3H)，2.43(t,J=5，1H),1.97(brd，J=13，2H)，1.60(m,4H),1.44(s,9H)。向N-Boc-6-氯-5-甲氧基螺環(huán)-[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮(64mg,0.17mmol)在MeOH(lmL)中的溶液添加在二氧雜環(huán)己烷(0.40mL)中的4NHC1。將混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。將混合物濃縮從而得到6-氯-5-甲氧基螺環(huán)-[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-4(3H)-酮，其直接使用不需進(jìn)一步純化(59mg,100%)，282(ES+)。螺環(huán)酮的制法64-氧代-3,4-二氫螺環(huán)「苯并吡喃-2,4'-哌啶l-6-羧酸甲酯鹽酸鹽(步驟1)向1-(5-溴-2-羥基苯基)乙酮(2.0g,9.3mmol)在甲醇(20mL)中的溶液添加吡咯烷(0.8mL,9.6mmol)和4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.91g,9.6mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜。將反應(yīng)混合物濃縮并用Biotage色譜(40M柱子，8%-20%乙酸乙酯/庚烷梯度液)純化，從而得到黃色固體狀6-溴-4-氧代-3,4-二氫-l，H-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-r-羧酸叔丁酯(3.09g,84%)。&NMR(CDC13)S7.96(d,J=2.5,1H),7.56(dd,J=8.7,2.5,1H),6.89(d,J=8.7，1H)，2.70(s,2H),1.44(s,9H)。(步驟2)向6-溴-4-氧代-3,4-二氫-rH-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-r-羧酸叔丁酯(0.8g,2mmol)在甲醇(60mL)中的溶液添加三乙胺(0.32mL)和二氯二(三苯基膦)鈀11(144mg，0.21mmol)。將反應(yīng)混合物在8(TC、50psi一氧化碳下加熱2天。將混合物冷卻至室溫，在硅藻土上過濾并用Biotage色譜純化(40S柱，15%EtoAc/庚烷)，從而得到黃色固體狀]^-8004-氧代-3,4-二氫螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-6-羧酸甲酯(677mg,90%)。&NMR(CDC13)58.55(d,J=2.1,1H),8.16(dd,J=8.8,2.1,1H),7.04(d,J=8.7，1H),3.90(s,3H)，2.76(s，2H),1.46(s,9H)。(步驟3)向N-Boc-4-氧代-3,4-二氫螺環(huán)[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-6-羧酸甲酯(225mg,0.60mmol)在甲醇(4mL)中的溶液添加在二氧雜環(huán)己烷(1.5mL)中的4NHC1。將混合物在室溫下攪拌3小時(shí)，濃縮從而得到黃色固體狀標(biāo)題化合物(195mg,100%)。MS(ACPI)m/z276(M+H)+,HPLC保留時(shí)間("RT")1.0分鐘。螺環(huán)酮的制法7l-(叔-丁氧基羰基V4-氧代-3,4-二氫螺環(huán)f苯并吡喃-2，4'-哌啶l-6-羧酸向由螺環(huán)酮制法6得到的N-Boc-4-氧代-3,4-二氫螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-6-羧酸甲酯鹽酸鹽(375mg,1.0mmol)在甲醇/水(l:l，5mL)中的溶液添加氫氧化鋰(49mg)。將混合物在5(TC下加熱2小時(shí)，然后冷卻至室溫。將混合物濃縮、用水稀釋并用KHS04酸化至pH3。將由此形成的沉淀物用EtOAc提取、在Na2S04上干燥、過濾并濃縮，從而得到黃色固體狀標(biāo)題化合物(260mg,72%)。MS(ACPI)m/z360(M陽H)-,HPLCRT2.4分鐘。NMR(CDC13)S8.63(2.0,1H),8.20(dd,J=8.7，2.5,1H),6.69(d,J=8.8,1H),2.76(s，2H)，1.45(s,9H)。螺環(huán)酮的制法86-(吡咯烷-l-基羰基)螺環(huán)「苯并吡喃-2,4，-哌啶l-4(3H)-酮(步驟l)向l-(叔-丁氧基羰基)-4-氧代-3,4-二氫螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-6-羧酸酯(54mg,0.15mmol)在CH2C12(1mL)中的溶液添加吡咯烷(17mg,20mL，0.24mmol)、0-(7-氮雜苯并三唑-l-基)-n,n,n，,n，-四甲基脲六氟磷酸鹽(HATU)(60mg,0.16mmol)和三乙胺(50/zL，0.36mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜。然后將混合物濃縮，接著將粗制材料溶于EtOAc中，用水洗滌，然后將有機(jī)萃取物濃縮，從而得到粘膠狀標(biāo)題化合物(79mg)，其直接使用無需進(jìn)一步純化。MS(ACPI)m/z415(M+H)+,HPLCRT2.3分鐘。(步驟2)向4-氧代-6-(吡咯烷-1-基羰基)-3,4-二氫-沮-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-1-羧酸叔丁酯(62mg，0.15mmol)在甲醇(0.5mL)中的溶液添加在二氧雜環(huán)己垸(0.15mL)中的4NHCl。將混合物在室溫下攪拌2小時(shí)，然后添加三乙胺(80/zL)以中和酸，然后將混合物濃縮，從而得到粗制產(chǎn)物，其直接使用無需進(jìn)一步純化。MS(ACPI)m/z315(M+H)+，HPLCRT0.3分鐘。螺環(huán)酮的制法9N-異丙基-4-氧代-3,4-二氫螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶l-6-羧酸酯按照螺環(huán)酮制法8中所述的過程，但換作異丙基胺，從而得到膠狀6-[(異丙基氨基)羰基]-4-氧代-3,4-二氫-lH-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-l-羧酸叔丁酯(89mg)，其直接使用無需進(jìn)一步純化。MS(ACPI)m/z403(M+H)+,HPLCRT2.5分鐘。根據(jù)螺環(huán)酮制法8(步驟2)中所述，由6-[(異丙基氨基)羰基]-4-氧代-3+二氫-lH-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-l-羧酸叔丁酯制備標(biāo)題化合物。MS(ACPI)m/z303(M+H)+,HPLCRT0.6分鐘。螺環(huán)酮的制法10N，N-二甲基-4-氧代-3,4-二氫螺環(huán)f苯并吡喃-2,4'-哌啶l-6-羧酸酯鹽酸鹽按照螺環(huán)酮制法8中所述的過程，但換作二甲基胺，從而得到黃色固體狀6-[(二甲基氨基)羰基]-4-氧代-3,4-二氫-lH-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-1-羧酸叔丁酯(58mg)，其直接使用無需進(jìn)一步純化。MS(ACPI)m/z389(M+H)+,HPLCRT2.2分鐘。根據(jù)螺環(huán)酮制法8(步驟2)中所述，由6-[(二甲基氨基)羰基]-4-氧代-3,4-二氫-lH-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-l-羧酸叔丁酯制備標(biāo)題化合物。MS(ACPI)m/z289(M+H)+，HPLCRT0.2分鐘。螺環(huán)酮的制法ll6-(嗎啉-4-基羰基)螺環(huán)「苯并吡喃-2,4'-哌啶l-4GHV酮31按照螺環(huán)酮制法8中所述的過程，但換作嗎啉，從而得到黃色固體狀6-(嗎啉-4-基羰基)-4-氧代-3,4-二氫-lH-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-l-羧酸叔丁酯(56mg)，其直接使用無需進(jìn)一步純化。MS(ACPI)m/z431(M+H)+，HPLCRT2.3分鐘。根據(jù)螺環(huán)酮制法8(步驟2)中所述，但未添加三乙胺，由6-(嗎啉-4-基羰基)-4-氧代-3,4-二氫-lH-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-l-羧酸叔丁酯制備標(biāo)題化合物。MS(ACPI)m/z331(M+H)+,HPLCRT0.3分鐘。螺環(huán)酮的制法12N-甲基-4-氧代-3,4-二氫螺環(huán)「苯并吡喃-2,4'-哌啶l-6-碳酰胺按照螺環(huán)酮制法8中所述的過程，但換作甲胺，從而得到黃色固體狀6-[(甲氨基)羰基]-4-氧代-3，4-二氫-lH-螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-l-羧酸叔丁酯，其直接使用無需進(jìn)一步純化(52mg)。MS(ACPI)m/z375(M+H)+,HPLCRT1.8分鐘。根據(jù)螺環(huán)酮制法8(步驟2)中所述，由6-[(甲氨基)羰基]-4-氧代-3,4-二氫-lH-螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-l-羧酸叔丁酯制備標(biāo)題化合物。MS(ACPI)m/z275(M+H)+,HPLCRT0.3分鐘。螺環(huán)酮的制法134-氧代-3,4-二氫螺環(huán)成并吡喃-2,4'-哌啶l-6-碳酰胺向小瓶中加入根據(jù)螺環(huán)酮制法6(步驟2)中所述制成的N-Boc-4-氧代-3,4-二氫螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-6-羧酸甲酯(56mg，0.15mmol)和氫氧化銨(lmL)。將混合物在65"C下加熱過夜。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫并濃縮，從而得到6-(氨基羰基)-4-氧代-3,4-二氫-111-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-1-羧酸叔丁酯(56mg,100%)。MS(ACPI)m/z361(M+H)+。根據(jù)螺環(huán)酮制法8(步驟2)中所述，由6-(氨基羰基)-4-氧代-3,4-二氫-lH-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-l-羧酸叔丁酯制備標(biāo)題化合物。MS(ACPI)m/z261(M+H)+,HPLCRT1.1分鐘。螺環(huán)酮的制法146-異丙氧基螺環(huán)「苯并吡喃-2,4'-哌啶l-4(3HV酮鹽酸鹽制備1-(2,5-二羥基苯基)乙酮(3.82g，25.1mmol)、4-氧代呃啶-l-羧酸叔丁酯(5.0g，25.1mmol)和吡咯垸(2.1mL,25.1mmol)在甲醇(100mL)中的溶液。將混合物在6(TC下加熱2天，然后濃縮并用Biotage色譜純化，從而得到黃色固體狀6-羥基-4-氧代-3,4-二氫-l'H-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-l'-羧酸叔丁酯(7.80g,93%)。將6-羥基-4-氧代-3，4-二氫-l'H-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-r-羧酸叔丁酯(l.OOg，3.00mmol)、丙酮(5.0mL)、異丙基碘化物(3.06g,1.80mL,18mmol)和K2C03(1.24g，9.0mmol)的混合物在密封試管中、在7(TC下加熱過夜。通過真空過濾除去固體，并濃縮濾液。將殘余物通過Biotage色譜純化，從而得到6-異丙氧基-4-氧代-3，4-二氫-l'H-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(890mg，79%)。將6-異丙氧基-4-氧代-3,4-二氫-l'H-螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-l'-羧酸叔丁酯(890mg,2.37mmol)、甲醇(5.0mL)和濃HC1的混合物在室溫下攪拌過夜，從而得到6-異丙氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-4(3H)-酮鹽酸鹽(750mg，100%)。螺環(huán)酮的制法156-乙氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶l-4(3HV酮鹽酸鹽將根據(jù)螺環(huán)酮制法14中所述制成的6-異丙氧基-4-氧代-3,4-二氫-l'H-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-l'-羧酸叔丁酯(l.OOg,3.00mmol)、丙酮(5.0mL)、碘代乙烷(2.81g，1.45mL,18mmol)和K2C03(1.24g,9.0mmol)在密封試管中、在7(TC下加熱過夜。通過真空過濾除去固體，并濃縮濾液。將殘余物通過Biotage色譜純化，從而得到6-乙氧基-4-氧代-3,4-二氫-l'H-螺環(huán)[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-l'-羧酸叔丁酯(l.OOg，92%)。將6-乙氧基-4-氧代-3,4-二氫-rH-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-l'-羧酸叔丁酯(l.OOg,2.77mmol)、甲醇(5.0mL)和濃HC1的混合物在室溫下攪拌過夜，從而得到6-乙氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮鹽酸鹽(830mg,100%)。螺環(huán)酮的制法165-氯-7-甲氧基螺環(huán)f苯并吡喃-2,4，-哌啶卜4(3H)-酮鹽酸鹽向3-氯-5-甲氧基苯酚(4.00g,25.2mmol)添加乙酰氯(9.0mL，5.0mmol)，然后將混合物在6(TC下加熱過夜。在減壓下除去乙酰氯，接著加入A1C13(1.96g，14.7mmol)，然后將混合物在18(TC下加熱1小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫。向其中緩緩添加38%HCl/水(30mL/100mL)，然后劇烈攪動(dòng)4h。過濾混合物，從而得到l-(2-氯-6-羥基-4-甲氧基苯基)乙酮和1-(4-氯-2-羥基-6-甲氧基苯萄乙酮的混合物(5.38g)。向l-(2-氯-6-羥基-4-甲氧基苯基)乙酮和l-(4-氯-2-羥基-6-甲氧基苯基)乙酮的混合物(5.38g,26.8mmol)添加4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(5.34g,26.8mmol)、甲醇(100mL)、吡咯烷(1.9g，2.2mL，27mmol)。將混合物在60°C下加熱過夜。在減壓下除去溶劑，然后用CombiFlash[硅膠色譜]純化，從而得到7-氯-5-甲氧基-4-氧代-3,4-二氫-1'11-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(2.32g)和5-氯-7-甲氧基-4-氧代-3,4-二氫-l'H-螺環(huán)[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(1.40g)。將5-氯-7-甲氧基-4-氧代-3，4-二氫-l'H-螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-r-羧酸叔丁酯(500mg,1.31mmol)在甲醇(5.0mL)和濃HCl(6.6mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應(yīng)混合物濃縮，從而得到標(biāo)題化合物(425mg,100%)。螺環(huán)酮的制法177-氯-5-甲氧基螺環(huán)「苯并吡喃-2,4，-哌淀l-4(3H)-酮將7-氯-5-甲氧基-4-氧代-3,4-二氫-l'H-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-r-羧酸叔丁酯(根據(jù)螺環(huán)制法16中所述制備)(500mg,1.31mmol)在甲醇(5.0mL)和濃HC1(6.6mL)中的溶液在室溫下攪拌過夜。濃縮反應(yīng)混合物，從而得到標(biāo)題化合物(420mg,100%)。螺環(huán)酮的制法187-甲氧基-5-甲基螺環(huán)「苯并吡喃-2,4'-哌啶l-4〖3H)-酮鹽酸鹽向1-(2-羥基-4-甲氧基-6-甲基苯基)乙酮(0.81g,4.5mmol)在甲醇(15mL)中的溶液添加吡咯烷(0.38mL，4.5mmol)和4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(896mg,4.5mmol)。將混合物在6CTC下攪拌過夜。除去溶劑，并將殘余物用CombiFlash[硅膠色譜]純化，從而得到7-甲氧基-5-甲基-4-氧代-3,4-二氫-^H-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-^-羧酸叔丁酯(960mg,59%)。向7-甲氧基-5-甲基-4-氧代-3,4-二氫-1'11-螺環(huán)[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(960mg,2.66mmol)在甲醇(5.0mL)中的混合物添加2MHC1(13.3mL)。將混合物在室溫下攪拌過夜，然后濃縮，從而得到標(biāo)題產(chǎn)物(780mg,99%)。螺環(huán)酮的制法19螺環(huán)「苯并吡喃-2,4'-哌啶l-4(3H)-酮將l-(2-羥基苯基)乙酮(100g,0.74mo1)、4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(146g,0.74mol)和吡咯烷(61mL,0.74mol)在甲醇(600mL)中的溶液攪拌24小時(shí)，然后蒸發(fā)。使殘余物在硅膠上進(jìn)行色譜分離(己垸/乙酸乙酯100:0—90:10)，從而得到N-Boc-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，產(chǎn)率97%(225g),218(M-Boc;ES+)。將純?nèi)宜?80mL)加入[N-Boc-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮或4-氧代-3,4-二氫-l'H-螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-l'-羧酸叔丁酯](40g,0.126mol)在二氯甲烷(250mL)中的溶液。然后，將溶液攪拌過夜，然后蒸發(fā)。將水(約300mL)加入殘余物，用10NNaOH將所得溶液堿化至pH為約14。然后，用氯仿萃取產(chǎn)物。將萃取物在Na2S04上干燥，然后蒸發(fā)，從而得到螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮，產(chǎn)率為93.7%(25.6g),218(ES+)。螺環(huán)酮的制法207-氟螺環(huán)「苯并吡喃-2,4'-哌啶l-4(3H)-酮鹽酸鹽水合物將1-(4-氟-2-羥基苯基)乙酮(200g，1.3mol)、4-氧代哌啶-l-羧酸叔丁酯(258g，1.3mol)和吡咯垸(108mL,1.3mol)在甲醇(800mL)中的溶液攪拌24小時(shí)，然后蒸發(fā)。接著將殘余物溶于乙酸乙酯中，用水、0.5NHC1、NaHC03溶液和飽和NaCl水溶液洗滌，接著通過薄層Si02和Na2S04。蒸發(fā)濾液，將殘余物用己垸/乙酸乙酯(9:l)混合物洗滌，接著進(jìn)行色譜分離(己烷/乙酸乙酯90:10—80:20)，從而得到N-Boc-7氟螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮，產(chǎn)率為33。/。(144g)，236(M-Boc;ES+)。將HC1(90mL)加入N-Boc-7氟螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮(44.2g,0.132mol)在異丙醇(150mL)中的溶液中。然后將得到的混合物回流3小時(shí)。此后，蒸發(fā)混合物，接著將殘余物與異丙醇共蒸發(fā)兩次，用醚洗滌，然后干燥，從而得到7-氟螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮鹽酸鹽水合物，產(chǎn)率99。/。(35.8g)，236(API+)。螺環(huán)酮的制法216-甲基螺環(huán)「苯并吡喃-2,4'-哌啶l-4(3HV酮將1-(2-羥基-5-甲基苯基)乙酮(100g,0.67mol)、4-氧代哌啶-l-羧酸叔丁酯(133g,0.67mol)和吡咯垸(55.8mL,0.67mol)在甲醇(600mL)中的溶液攪拌24小時(shí)，然后過濾。將分離出的晶體用己烷/乙酸乙酯(9:l)混合物洗滌，然后與己垸(150mL)回流，然后再次通過過濾分離。將晶體最終干燥，從而得到6-甲基-4-氧代-3,4-二氫-l'H-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-r-羧酸叔丁酯，產(chǎn)率89%(195.5g)。iHNMR(DMSO-d6)57.48(s,1H),7.36(dd,J=3，8,1H),6.94(d,J=8,1H)，3.67(m,2H),3.08(m,2H),2.76(s,2H)，2.23(s，3H)，1.82(m,2H),1.56(m,2H)，1.36(s,9H)。將純?nèi)宜?80mL)加入6-甲基-4-氧代-3,4-二氫-l'H-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(40g，0.12mol)在二氯甲烷(300mL)中的溶液。將由此得到的溶液攪拌過夜，然后蒸發(fā)。然后將水(200mL)和氯仿(200mL)加入殘余物中，用19NNaOH將所得溶液堿化至pH為約12。然后，用氯仿萃取產(chǎn)物。將萃取物通過薄層Si02和Na2S04，然后蒸發(fā)，從而得到6-甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，產(chǎn)率為96%(26.7g),232(ES+)。螺環(huán)酮的制法226,7-二甲基螺環(huán)「苯并吡喃-2,4'-哌啶l-4(3HV酮將1-(2-羥基-4,5-二甲基苯基)乙酮(150g,0.914mol)和吡咯烷(76.3mL,0.914mol)在甲醇(lL)中的溶液攪拌15分鐘。然后，添加4-氧代哌啶-l-羧酸叔丁酯(182.2g,0.914mol)，并將混合物攪拌24小時(shí)。將形成的沉淀物通過過濾分離，用己烷洗滌，然后干燥，從而得到245g純6,7-二甲基-4-氧代-3,4-二氫-l'H-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-l'-羧酸叔丁酯。將合并的濾液蒸發(fā)，將殘余物在一些己烷中結(jié)晶，從而得到另外一部分產(chǎn)物(21g)?？偖a(chǎn)率為77.1%(266g)。&NMR(CDC13)57.58(s,1H),6.76(s,1H),3.84(brd，J=13，2H)，3.18(m，2H),2.64(s,2H),2.25(s,3H)，2.19(s,3H),1.99(brd，J=12,2H),1.59(m,2H),1.44(s,9H),344(API-)。在用冷水冷卻的情況下，將純?nèi)宜?80mL)加入6,7-二甲基-4-氧代-3，4-二氫-l'H-螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-l'-羧酸叔丁酯(50g，0.145mol)在二氯甲烷(300mL)中的溶液。將混合物在室溫下攪拌過夜，然后蒸發(fā)揮發(fā)物。將殘余物溶于水中，將水層用醚洗滌兩次，然后用NaOH堿化至pH為約14。將產(chǎn)物用CHCl3萃取，干燥(Na2S04)并濃縮，從而得到產(chǎn)物(27.9g;78.6%)。力麗R(DMSO-d6)57.49(s,1H),6.94(s，1H),3.34(brs,6H),3.95(brd,J=12,1H)，3.82(t，J=12,1H)，2.82(s,1H),2.24(s，2H),2.18(s,2H),2.59(d，J=15，1H),2.34(t,Ml，1H)。LC/MSAPI+246(MH+)。螺環(huán)酮的制法236-氯螺環(huán)「苯并吡喃-2,4'-哌啶l-4GHV酮將l-(5-氯-2-羥基苯基)乙酮(ASDIInc.,Newark,DE)(103.9g,0.609mol)、4-氧代哌啶-l-羧酸叔丁酯(2;121.2g,0.609mol)和吡咯烷(50.8mL,0.609mol)在甲醇(500mL)中的溶液攪拌24小時(shí)，然后將沉淀出的晶體通過過濾分離，并用己垸/乙酸乙酯(9:l)混合物洗滌。然后添加己烷(150mL)回流；接著將所得混合物回流，然后過濾。將分離出的晶體干燥，從而得到N-Boc-6-氯螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3印-酮，產(chǎn)率72%(153g)。將純?nèi)宜?80mL)加入N-Boc-6-氯螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮(50g,0.14mol)在二氯甲垸(300mL)中的溶液。將混合物攪拌24小時(shí)，然后蒸發(fā)。將水(200mL)和氯仿(200mL)加入殘余物中，然后用19NNaOH將所得混合物堿化至pH為約12。用氯仿萃取產(chǎn)物。將萃取物通過薄層Si02和Na2S04，從而得到6-氯螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3印-酮，產(chǎn)率為88%(30.8g)，252/254(ES+)。螺環(huán)酮的制法245-甲氧基螺環(huán)f苯并吡喃-2,4'-哌腔l-4(3HV酮將1-(2-羥基-6-甲氧基苯基)乙酮(40.5g，0.244mol)和吡咯烷(20.3mL,0.244mol)在甲醇(250mL)中的溶液攪拌15分鐘。然后，添加4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(48.6g,0.244mol)。將混合物進(jìn)一步攪拌24小時(shí)，然后過濾。將分離出的沉淀物用己烷洗滌，然后干燥，從而得到N-Boc-5-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，產(chǎn)率83.5%(70.7g)，248(M-Boc;ES+)。將純?nèi)宜?80mL)加入在二氯甲烷(200mL)中的N-Boc-5-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-4(3H)-酮(50g,0.144mol)的溶液中，然后將混合物在室溫下攪拌過夜，接著蒸發(fā)。將殘余物用水(500mL)稀釋，然后用10NNaOH堿化至pH14。用氯仿萃取產(chǎn)物，然后將萃取物在Na2S04上干燥并蒸發(fā)。將殘余物在硅膠上進(jìn)行色譜分離(氯仿/甲醇/三乙胺100:0'.0—91:9~>0:86:14)，從而得到5-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，產(chǎn)率為84.7%(30g)，248(ES+)。螺環(huán)酮的制法25向在適當(dāng)溶劑(諸如甲醇、苯或甲苯)中的鄰-羥基苯乙酮或2-羥基苯甲酰胺和吡咯烷(0.75-l當(dāng)量)的混合物添加4-氧代哌啶-l-羧酸叔丁酯(138當(dāng)量)，然后將混合物在介于室溫和回流的溫度下攪拌18-48小時(shí)。通過過濾分離產(chǎn)物，可選在水處理后用硅膠色譜純化。在室溫下，使N-Boc-螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮在諸如二氯甲烷、二氧雜環(huán)己烷或甲醇的適當(dāng)溶劑中的溶液用諸如三氟乙酸或在二氧雜環(huán)己垸中的4NHC1進(jìn)行處理，直到反應(yīng)完成。蒸發(fā)揮發(fā)物，從而得到所需產(chǎn)物的鹽。所述產(chǎn)物呈現(xiàn)鹽的形式，或者當(dāng)制備游離堿時(shí)通過如下進(jìn)行處理將產(chǎn)物溶于水中，將水層用醚洗滌，接著用NaOH將水相堿化至pH為約14。將產(chǎn)物用CHCl3萃取，干燥(Na2S04)并濃縮，從而得到所需產(chǎn)物的游離堿。采用這種方法，由如下可商購鄰-羥基苯乙酮制備螺環(huán)酮2'-羥基-4'-甲基苯乙酮(Sigma-Aldrich,St.Louis,MO)、l-(4-氯-2-羥基-苯基)乙酮(WakoPureChemicalIndustries,Ltd.,Osaka,Japan)、l-(3-羥基-聯(lián)苯-4-基)乙酉同(Bradsher,C.K.;etal，J.Am.Chem.Soc.1954，76,2357-2362)、1-(2-羥基-3,5-二甲基-苯基)乙酮(OakwoodProducts,Inc.，WestColumbia,SC)、l-(2-羥基-5-三氟甲氧基-苯基)乙酮(ApoUoScientificLtd.,Cheshire,UK)、3-乙?；?4-羥基-芐腈(RamidusAB，Lund，Sweden)、4'，5'-二甲氧基-2'-羥基苯乙酮(IndofmeChemicalCompany,Inc.,Hillsborough,NJ)、l-(3,5-二氯-2-羥基苯基)乙酮(ASDIInc.,Newark,DE)、3-乙?；?4-羥基苯甲酸(PrincetonBioMolecularResearchInc.，MonmouthJunction,NJ)、l-(2-羥基-5-(甲磺?；?苯基)乙酮(CiventiChem,ResearchTrianglePark,NC)和l-(2-羥基-5-異丙基苯基)乙酮(AstaTech，Inc.,Bristol,PA)。另外，采用螺環(huán)酮制法25，使用如后文所述制成的以下鄰-羥基苯乙酮也可制成螺環(huán)酮4'-氯-2'-羥基-5'-甲基苯乙酮、4'-氯-2'-羥基苯乙酮、4'，5'-二氯-2'-羥基苯乙酮、4-乙?；?3-羥基-芐腈、l-(2-羥基-5-三氟甲基-苯基)乙酮、l-(5-氯-4-氟-2-羥基苯基)乙酮、l-(4-氯-5-氟-2-羥基苯基)乙酮、l-(5-溴-2-羥基-4-甲基苯基)乙酮、l-(2，4-二氯-6-羥基苯基)乙酮、1-(3-氯-6-羥基_2,4-二甲基苯基)乙酮和1-(2-氟-6-羥基-3-甲氧基苯基)乙酮。鄰-羥基苯乙酮采用以下羥基苯乙酮制法1-6的其中一種方法制備鄰-羥基苯乙酮，其被用于制備本發(fā)明的示例性化合物。鄰-羥基苯乙酮的制法11-(4-氯-2-羥基-5-甲基苯基〗乙酮向3-氯-4-甲基苯酚(1.97g,13.8mmol)中添加乙酰氯(1.15g,1.04mL,14.6mmol)，然后將所得混合物在60。C下加熱2小時(shí)。向其中添加A1C13(1.84g,13.8mmol)，然后將混合物在18(TC下加熱30分鐘。然后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后用38%HCl/水(8mL/17mL)緩緩淬滅并攪拌30分鐘。將固體通過過濾除去，用水洗滌，濃縮并干燥，從而得到黃色固體狀標(biāo)題化合物(1.97g,77%)。^NMR(CDC13)S11.21(s,1H)，7.54(s,1H),7.00(s，1H)，2.59(s,3H),2.32(s,3H)。鄰-羥基苯乙酮的制法2l-(2-羥基-5-三氟甲基-苯基)乙酮將4-三氟甲基-2-溴苯酚(1.00g,4.15mmol)、甲苯(20mL)、(l-乙氧基乙烯基)三丁基錫烷(1.65g,4.56mmol)和二氯二(三苯基膦)鈀(146mg,0.207mmol)的混合物在IO(TC下加熱過夜，然后冷卻至室溫。向該混合物中添加1NHC1(6mL)，然后將混合物劇烈攪拌約90分鐘。將有機(jī)相用水(30mL)、飽和NaCl水溶液洗滌，在Na2SCU上干燥，然后濃縮，從而得到黑色油。將產(chǎn)物用Biotage色譜(EtOAc/庚烷梯度液)純化，從而得到淺黃色油狀標(biāo)題化合物(335mg，39.5%)。鄰-羥基苯乙酮的制法31-(2-羥基-6-甲氧基-4-甲基苯基)乙酮向5-甲基-環(huán)己烷-1，3-二酮(1.01g,8.0mmol)在CH2C12(15mL)中的溶液先后添加三乙胺(1.2mL,8.6mmol)和乙酰氯(0.6mL,8.4mmol)。將混合物在室溫下攪拌3小時(shí)，然后用水洗滌(2x)。用EtOAc反萃取水相。將合并的有機(jī)萃取物濃縮并用Biotage(40S柱，15%丙酮/庚烷)純化，從而得到乙酸5-甲基-3-氧代環(huán)己-1-烯基酯(1.2g,89%)。40將乙酸5-甲基-3-氧代環(huán)己-1-烯基酯(1.2g，7.1mmol)、CH3CN(15mL)、三乙胺(2.1mL)和氰化鈉(7mg，0.1mmol)的混合物在室溫下攪拌過夜。將混合物濃縮，再次溶于EtOAc中，然后用1NHC1酸化。分離出有機(jī)相，然后將其濃縮并用Biotage色譜(40S柱，8%丙酮/庚烷)純化，從而得到2-乙酰基-5-甲基環(huán)己垸-1，3-二酮(0.96g，96%)將2-乙酰基-5-甲基環(huán)己烷-1，3-二酮(0.96g,5,7mmol)在含有碘(2.90g，11.4mmol)的甲醇中的溶液加熱回流過夜。將混合物冷卻至室溫，然后濃縮。將材料溶于CH2C12中，然后用水性Na2S203洗滌，接著用EtOAc反萃取水相(2X)。將合并的有機(jī)萃取物濃縮，并用Biotage色譜(40M柱,10%丙酮/庚垸)純化，從而的淺黃色固體狀標(biāo)題化合物(550mg,53%)。鄰-羥基苯乙酮的制法4l-(2-氟-6-羥基-3-甲氧基苯基)乙酮向1，4-二甲氧基-2-氟苯(1.56g,10mmol)在THF(15mL)中的-78。C溶液中添加n-BuLi(5.0mL的2.5M己烷溶液，12mmol)。將混合物攪拌30分鐘，然后緩緩添加乙醛(0.79mL,14mmol)。將反應(yīng)混合物攪拌額外30分鐘，然后通過添加甲醇和飽和NH4C1水溶液終止反應(yīng)。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，然后用EtOAc萃取。合并有機(jī)萃取物，然后用Biotage色譜(40S柱，15%丙酮/庚垸)純化，從而得到1-(2-氟-3,6-二甲氧基苯基)乙醇(1.57g,79%)。向1-(2-氟-3,6-二甲氧基苯基)乙醇(1.57g,7.84mmol)在丙酮(23mL)中的冰冷溶液中緩緩添加Jones試劑(其通過將在1.6mL濃112804中的1.57g&03添加到4.7mL冰冷的水中來制成)。將混合物攪拌30分鐘，然后去除冷卻浴并添加異丙醇(2mL)。通過在硅藻土上過濾除去所得綠色沉淀物，然后用乙酸乙酯("EtOAc")洗滌硅藻土。將濾液濃縮并再次溶于EtOAc中，用飽和NaHC03水溶液、飽和NaCl水溶液洗滌，接著用Biotage色譜(40S柱，8%丙酮/庚烷)純化，從而得到黃色油狀標(biāo)題化合物(1.06g,68%)。鄰-羥基苯乙酮的制法5向苯酚中添加諸如乙酰氯(1.0-2.0)或乙酸酐的乙?；噭缓髮⒎磻?yīng)混合物在介于室溫和回流的溫度下攪拌2-18小時(shí)。真空除去過量乙酰化試劑，然后將0-乙?；椒佑肁lCl3(1.0-1.25eq)進(jìn)行處理，接著加熱至諸如18(TC下的高溫長達(dá)30-60分鐘。然后將反應(yīng)混合物冷卻，用水性酸淬滅接著過濾，從而得到所需鄰-羥基苯乙酮。采用羥基苯乙酮制法5的方法由以下可商購試劑制成羥基苯乙酮由3-羥基芐腈制成4-乙酰基-3-羥基芐腈；由4-氯-3-氟苯酚制成1-(5-氯-4-氟-2-羥基苯基)乙酮；3-氯-4-氟苯酚制成1-(4-氯-5-氟-2-羥基苯基)乙酮；由4-溴-3-甲基苯酚制成1-(5-溴-2-羥基-4-甲基苯斷乙酮；由3,5-二氯苯酚制成l-(2，4-二氯-6-羥基苯基)乙酮；由4-氯-3,5-二甲基苯酚制成1-(3-氯-6-羥基-2,4-二甲基苯基)乙酮。鄰-羥基苯乙酮的制法6l-(4,5-二氯-2-羥基苯基)乙酮在室溫下，向3，4-二氯苯酚(2.00g;12.3mmol)中添加乙酰氯(1.02g,13mmol)，接著在30分鐘后，將反應(yīng)混合物加熱至60°C，耗時(shí)45分鐘。然后添加A1C13(1.64g，12.3匪ol)，接著將反應(yīng)混合物在18(TC下加熱30分鐘。允許反應(yīng)混合物冷卻，然后用38。/。的HCl/H2O(30mL/100mL)淬滅，接著攪拌2.5小時(shí)。過濾所得沉淀物，然后用水洗滌，在高真空下干燥，從而得到灰白色固體狀產(chǎn)物(2.07g;82%產(chǎn)率)。&NMR(CDC13)512.16(s，1H),7.78(s,1H)7.11(s,1H),2.61(s,3H);LC陽MSm/z@203,205，207(ES-)。羧酸以下可商購羧酸被用于制備本發(fā)明的示例性式(1)化合物2-乙基-l-(3-甲氧基-苯基)-lH-苯并咪唑-5-羧酸(DiscoveryLabLtd.,Russia)、1H-口引唑國5-羧酸(TygerScientific,Inc.,Ewing,NJ)、1H-吲唑-6-羧酸(SinovaInc.,Bethesda,MD)、l-甲基-lH-卩引哚-5-羧酸(ASDIInc.,Newark,DE)、lH-苯并咪哇-5-羧酸(Infarmatik,Inc.,Newark,DE)、2-吡啶-2-基-lH-苯并咪唑-5-羧酸(AuroraFineChemicalsLtd.,Graz,Austria)、2-三氟甲基-lH-苯并咪唑-5-羧酸(OakwoodProducts,Inc.,WestColumbia,SC)、2-甲基-lH-苯并咪唑-5-羧酸(AcrosOrganicsUSA,MorrisPlains,NJ)、1H』引唑-4-羧酸和1H』引哚-7-羧酸(J&WPharmLabLLC,Morrisville,PA)、lH』引哚-6-羧酸(Sigma-Aldrich,St.Louis,MO)、l-甲基-lH-吲哚-4-羧酸(Maybridge，Cornwall,UK)、2-吡啶-4-基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(Infarmatik,Inc.,Newark,DE)、2-羥基甲基-lH-苯并咪唑-4-羧酸(MatrixScientific,Columbia,SC)、lH-苯并咪唑-4-羧酸(Infa謹(jǐn)tik,Inc.,Newark,DE)、2-甲基-lH-苯并咪唑-4-羧酸(Infarmatik,Inc.,Newark,DE)、l-甲基-2-氧代-2，3-二氫-lH-苯并咪唑-5-羧酸(Chemstep,CarbonBlanc,France)、喹啉-6-羧酸(AlfaAesar,WardHill,MA)、1H-苯并三唑-5-羧酸(Sigma-Aldrich,St.Louis,MO)、l-甲基-lH-苯并三唑-5-羧酸(RyanScientific,Mt.Pleasant,SC)、3-(lH-吡唑-3-基)-苯甲基(Maybridge.Cornwall,UK)、3-吡唑-l-基-苯甲基(ASDIInc.,Newark,DE)、-1H-吲哚-4-羧酸(MatrixScientific,Columbia,SC)、l-甲基-lH-苯并咪唑-5-羧酸(AmbinterSari,Paris,France)、3-(5-甲基-[l,2,4]噁二唑-3-基)-苯甲酸(ASDIInc.Newark,DE)、1-氧代-2，3,4,4&，9,9&-六氫-111-/3-咔啉-6-羧酸(J&WPharmLabLLC，Morrisville,PA)、2-苯基-1H-苯并咪唑-6-羧酸(FluorochemLtd.,Derbyshire,UK)、1-(2,3,4,9-四氫-1H-咔唑-6-基)乙酮(MatrixScientific,Columbia,SC)、lH-苯并咪唑-6-羧酸(ASDIInc.,Newark,DE)、2,3-二甲基-lH』引哚-5-羧酸(MatrixScientific,Columbia,SC)、苯并三唑-5-羧酸(Sigma-Aldrich,St.Louis,MO)、2，3-二甲基-lH』引哚-5-羧酸(MatrixScientific,Columbia,SC)、5-羧基卩引哚(ApolloScientificLtd.,Cheshire,UK)、1,2-二甲基-lH-苯并咪唑-5-羧酸(MatrixScientific,Columbia:SC)、5-苯并咪唑羧酸Sigma-Aldrich,StLouis，MO)、苯并三唑-5-羧酸(Sigma-Aldrich，StLouis，MO)、l-異丙基苯并三唑-5-羧酸(FhiorochemLtd.,Derbyshire,UK)、2-氧代-l,2,3,4-四氫喹啉-6-羧酸(AuroraFineChemicalsLtd.,Graz,Austria)和喹喔啉-6-羧酸(RyanScientific,Inc.,MountPleasant,SC)。通過先前公開的方式制備以下羧酸—廠其被用于制備本發(fā)明實(shí)施例中所述的化合物2-甲基-lH』引哚-6-羧酸(JournalofOrganicChemistry(1980),45(8),1546-7,實(shí)施例7,1547頁)、l-異丙基-lH-苯并咪唑-4-羧酸(US2005/020626,17頁，制法11)、3-(lH-咪唑-2-基)-苯甲酸(US2003/0232860，14頁，實(shí)施例l勺和1，3-苯并噁唑-5-羧酸(Sawada,Y.等人的PestManagementScience(2003)，59(1),25-35)。另外，根據(jù)如下酸制法所述制成的羧酸也被用于制備本發(fā)明實(shí)施例中所述的化合物酸的制法17-甲基-m-吲唑-5-羧酸在室溫下，向5-溴-7-甲基吲唑(購自PharmaLab,Morrisville,PA)(2.00g,9.47mmol)在無水THF(50ml)中的溶液添加NaH(570mg,14.25mmol;60%的礦物油懸浮液)。20分鐘后，將混合物冷卻至-78'C，然后滴加仲丁基鋰(1.4M的環(huán)己烷溶液，17ml;23.8mmol)，接著將所得混合物攪拌4小時(shí)。然后干C02鼓泡通過反應(yīng)混合物1小時(shí)，同時(shí)允許其溫?zé)嶂潦覝?。然后將混合物在室溫下攪拌過夜。添加1NHC1，然后用EtOAc萃取溶液。將有機(jī)層用飽和NaCl水溶液洗滌，干燥(MgS04)，然后過濾并濃縮。將殘余物再次溶于MeOH中，過濾，然后濃縮，從而得到棕色固體狀產(chǎn)物(1.445g,86.6%)。力NMR(DMSO-d6)S8.23(s,1H),8.17(s，1H)，7.65(s,1H),2.46(s,3H).LC/MSES+177(MH+)。酸的制法21H-吲唑-7-羧酸將2-氨基-3-甲基苯甲酸(15.2g,0.10mol)、二甲基甲酰胺(333mL)和CsC03(49g，0.15mol)的混合物在室溫下攪拌約40分鐘，然后滴加在二甲基甲酰胺("DMF')(115mL)中的碘代甲烷(14.2g，6.2mL,0.10mol)。將混合物在室溫下攪拌過夜。將混合物用水(lL)稀釋，然后用二乙醚萃取。用二乙醚反萃取水相。將合并的有機(jī)萃取物用飽和NaCl水溶液洗滌，在MgS04上干燥，過濾并濃縮。將所得材料在室溫/0.5mmHg下干燥，從而得到2-氨基-3-甲基苯甲酸甲酯(17g，100%)。向2-氨基-3-甲基苯甲酸甲酯(16.5g，0.10mol)在CHC13(286mL)中的溶液添加乙酸酐(23.5g，21.7mL,0.23mol)，保持內(nèi)部溫度<40。C。將混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，然后添加乙酸鉀(2.94g,30mmol)和異戊基亞硝酸鹽(25.8g，30mL,0.22mo1)。將所得混合物加熱回流過夜。然后向其中添加甲醇(94mL)和6NHC1(94mL)，接著將混合物攪拌過夜。濃縮反應(yīng)混合物，從而得到桔色固體，該固體被乙酸乙酯研磨粉碎，然后通過真空過濾分離固體。將固體在室溫/0.5mmHg下干燥，從而得到1H』引唑-7-羧酸甲酯(15.4g,88%)。將lH-吲唑-7-羧酸甲酯(14.96g,84.9mmol)在甲醇(180mL)中的溶液冷卻至0"C，然后添加29%的氫氧化鉀水溶液(36mL)。除去冰浴，然后將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。用濃HCl將pH調(diào)節(jié)至5.5。通過真空過濾除去揮發(fā)物，然后將所得材料懸浮于水(IOOmL)和乙酸乙酯(200mL)。通過真空過濾分離所得沉淀物，然后用乙酸乙酯進(jìn)行沖洗。將固體在室溫/0.5mmHg下干燥，從而得到標(biāo)題化合物(7.54g,55。/。)。酸的制法32-甲基-2H-吲唑-6-羧酸根據(jù)J.Med.Chem.2000,43(1),41-58(實(shí)施例12b,49頁)中公開的過程制備lH』引唑-6-羧酸己酯。在標(biāo)準(zhǔn)條件(六甲基二甲硅烷鈉，THF,碘代甲烷，回流)下進(jìn)行垸基化，從而得到2-甲基-211-吲唑-6-羧酸甲酯(44%)。在標(biāo)準(zhǔn)條件(lNNaOH)下進(jìn)行皂化，從而得到標(biāo)題產(chǎn)物(53%)。酸的制法43-(5-三氟甲基-lH-吡唑-3-基)-苯甲酸在氮?dú)夥障?，將氫化鈉(60%油溶液，2.20g，55mmol)置于烘箱干燥過的反應(yīng)燒瓶中，然后用lOmL己垸洗滌兩次，通過傾倒除去己烷。然后，在攪拌的同時(shí)，將氫化鈉懸浮于30mL的無水1,2-二甲氧基乙烷("DME")中。在40分鐘內(nèi)滴加9.0mL(75mmol)的純?nèi)宜嵋阴ズ?.63g(25mmol)的3-氰基苯乙酮(Aldrich)在40mLDME中的溶液。將反應(yīng)混合物攪拌額外60分鐘，此后通過添加甲醇(約3mL)來破壞過量氫化物。通過在真空下蒸發(fā)除去揮發(fā)組分，然后將殘余物懸浮于30mL水中。用70mL的1M鹽酸對(duì)混合物進(jìn)行酸化，然后用醚萃取。將醚用水、飽和的NaCl水溶液洗滌，干燥(MgS04)并蒸發(fā)，從而得到7.02g含有一些殘余三氟乙酸的3-(4，4,4-三氟-3-氧代-丁酰基)-苯甲酸的固體殘余物。將步驟1的產(chǎn)物(3.71g,15mmol)溶于30mL甲醇中，然后加熱至回流，此刻一次性加入0.97mL的無水肼(31mmol)。持續(xù)加熱90分鐘，此后，將混合物在真空下濃縮。將殘余物用水和醚進(jìn)行處理，將醚用1M鹽酸、水、飽和NaCl水溶液洗滌，干燥(MgS04)并蒸發(fā)。加入乙腈并重復(fù)蒸發(fā)，從而得到白色固體，將其溶于15mL的冰醋酸中，加熱回流20分鐘，然后在真空下濃縮，從而得到3.12g白色固體狀3-(5-三氟甲基-2H-吡唑-3-基)-芐腈。將步驟2的產(chǎn)物(3.12g,13mmol)溶于20mL的l-丙醇中。加入4.33g的氫氧化鉀在8mL水中的溶液，然后將混合物加熱回流2小時(shí)。將混合物冷卻，并在真空下蒸發(fā)。將殘余物溶于75mL水中，加熱至沸騰，然后用濃鹽酸酸化。允許混合物冷卻，然后將沉淀物過濾，用水洗滌并干燥，從而得到3.21g白色固體狀標(biāo)題化合物。酸的制法57-氯-lH-吲唑-5-羧酸向4-氨基-3-氯-5-甲基芐腈(3.00g，18.0mmol)在CHC13(50mL)中的溶液添加乙酸酐(3.9mL,41.4mmo1)。將混合物在室溫下攪拌過夜，然后加熱回流5小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后添加乙酸鉀(530mg,5.40mmol)和異戊基亞硝酸鹽(5.28mL,39.6mmol)。將混合物加熱回流3天。將反應(yīng)混合物用飽和的NaHC03水溶液洗滌，在Na2S04上干燥并濃縮。向其中先后添加甲醇、水(25mL)和38。/。HCl(25mL)。將混合物在室溫下攪拌過夜。將反應(yīng)混合物濃縮，然后將pH調(diào)節(jié)至約7。通過過濾分離固46體，然后用水(2x30mL)和庚垸(2x30mL)洗滌固體。用Biotage色譜(CH2Cl2-庚烷(l:l)/MeOH梯度液)純化，從而得到白色固體狀7-氯-lH-吲唑墨5-甲腈(585mg，18%)。向7-氯-lH-吲唑-5-甲腈(250mg,1.41mmol)在乙醇/水(3:l，15mL)中的溶液添加氫氧化鉀(395mg,7.04mmol)，然后將混合物加熱回流。3小時(shí)后，蒸餾掉大部分乙醇，添加額外的氫氧化鉀(614mg)，接著繼續(xù)加熱過夜。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用Et2O(3x20mL)洗滌，然后用1NHC1酸化有機(jī)萃取液。通過真空過濾分離所得沉淀物，然后將沉淀物用水(約15mL)和庚垸(約15mL)洗滌，在室溫/0.5mmHg下干燥，從而得到標(biāo)題化合物(221mg，79.7%)。酸的制法65-溴-lH-吲唑-7-羧酸在0。C下，向2-氨基-3-甲基苯甲酸(5.00g，33.1mmol)在乙酸(110mL)中的溶液滴加溴(1.7mL,33mmol)和乙酸(50mL)的混合物，耗時(shí)約5分鐘。添加完成后，除去冷卻浴，然后將混合物在室溫下攪拌30分鐘，接著在減壓下除去乙酸。將混合物用CH2Cl2稀釋，然后用飽和Na2C03水溶液洗滌。用CH2Cl2反萃取水相。用濃HC1將水相酸化至pH為7.2，其中觀察到劇烈起泡。形成大量沉淀物，然后將形成的沉淀物通過真空過濾分離。用濃HCl將濾液進(jìn)一步酸化至pH為6.3，然后收集第二批沉淀物。將合并的固體在65°C/0.5mmHg下干燥，從而得到2-氮基-5-溴-3-甲基苯甲酸(6.43g，85%)。將2-氨基-5-溴-3-甲基苯甲酸(6.43g,27.9mmol)在含有碳酸銫(13.7g,41.9mmol)的DMF(93mL)中的溶液在室溫下攪拌40分鐘，然后滴加碘化甲烷(1.7mL，28mmol)在DMF(21mL)中的溶液。將混合物在室溫下攪拌2天。將該混合物用水(300mL)稀釋，然后用EtOAc(2x100mL)萃取。將合并的有機(jī)萃取物在MgS04上干燥，過濾并濃縮，從而得到棕色油，其在室溫/0.5mmHg下千燥后被凝固成淺褐色固體，從而得到2-氨基-5-溴-3-甲基苯甲酸甲酯(5.45g，80%)。向2-氨基-5-溴-3-甲基苯甲酸甲酯(5.45g,22.3mmol)在CHC13(64mL)中的溶液以一定的速率添加乙酸酐(4.9mL)，從而保持內(nèi)部溫度低于40°C。將所得混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，然后添加乙酸鉀(0.66g,6.7mmol)和異戊基亞硝酸鹽(6.6mL,49mmol)。將反應(yīng)混合物加熱回流過夜，然后冷卻至室溫并濃縮。將殘余物溶于甲醇(22mL)和6NHC1(22mL)中，然后在室溫下攪拌約4小時(shí)。通過真空過濾分離黃色固體，并用水沖洗該黃色固體。將固體在65。C/0.5mmHg下干燥，從而得到5-溴-lH-吲唑-7-羧酸甲酯(4.90g,86。/。)。在(TC下，向5-溴-lH-吲唑-7-羧酸甲酯(250mg,0.98mmol)在甲醇(2mL)中的溶液添加30%的KOH水溶液(0.15gKOH在0.5mL水中)。將混合物在室溫下攪拌2天。通過真空過濾分離所得固體，并用MeOH沖洗所得固體。將固體物質(zhì)在65°C/0.5mmHg下干燥從而得到淺黃色固體狀標(biāo)題化合物(182mg，67%)。酸的制法73-甲基-lH-吲唑-6-羧酸將2-氟-4-甲氧基苯乙酮(2.0g,12mmol)在肼(30mL)中的溶液加熱回流2天。將混合物冷卻至室溫，倒入水中，然后用EtOAc(3x)萃取。將合并的有機(jī)萃取物濃縮，溶于最小量的CH2C12，然后過濾，從而得到黃色固體狀6-甲氧基-3-甲基-lH』引唑(620mg,32%)。在(TC下，向6-甲氧基-3-甲基-lH』引唑(620mg,3.82mol)在CH2C12(25mL)中的溶液添加三溴化硼的二氯甲烷溶液(17mL的1M溶液)。將混合物在室溫下攪拌過夜。將溶液緩緩倒入冰冷的飽和NaHC03水溶液中，從而小心淬滅。分離各相，然后用EtOAc(3x)萃取水相。濃縮合并的有機(jī)萃取物，然后將粗制材料用Biotage色譜(40S柱，丙酮/庚垸45%500mL和60%150mL)純化，從而得到桔色固體狀3-甲基-lH』引唑-6-醇(458mg,81%)。將3-甲基-lH-吲唑-6-醇(458mg,3.1mmol)在THF(30mL)中的溶液用氫化鈉(0.50g的60%油分散液)進(jìn)行處理。在最初冒泡減少后，將溶液加熱至50°C，耗時(shí)1小時(shí)，然后冷卻至室溫并添加N-苯基三氟甲烷-磺酰亞胺(2.50g,7.0mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時(shí)，然后倒入水中。用EtOAc(3x)萃取水相。濃縮合并的有機(jī)萃取物，然后將粗制材料用Biotage色譜(40M柱，12%丙酮/庚垸)純化，從而得到桔色固體狀3-甲基-lH』引唑-6-醇(458mg，81%)，從而得到3-甲基-l-(三氟甲磺?；?-lH-吲唑-6-基三氟甲磺酸酯(1.13g,89%)。將3-甲基-l-(三氟甲磺酰基)-lH-吲唑-6-基三氟甲磺酸酯(0.61g,1.5mmol)在DMF(6mL)中的溶液用二氧化碳沖洗5分鐘。向其中添加乙酸鈀(68mg,0.30mmo1)、1,1，-二(二苯基膦)二茂鐵(167mg，0.30mmol)、三乙胺(0.33g,0.45mL，3.2mmol)和甲醇(4mL)。將溶液在室溫下、在CO氣氛下攪拌過夜。將溶液倒入水中，用EtOAc(3x)萃取。將合并的有機(jī)萃取物濃縮并用Biotage色譜(40S柱，8%EtOAc/庚烷)純化，從而得到3-甲基-l-(三氟甲磺?；?-lH-吲唑-6-羧酸甲酯(330mg，69%)。向3-甲基-l-(三氟甲磺?；?-lH-吲唑-6-羧酸甲酯(590mg,1.83mmol)在MeOH/7jC(3:l，72mL)中的溶液添加碳酸鉀(1.01g,7.31mmol)，然后將混合物加熱回流2小時(shí)。將混合物冷卻至室溫，然后在減壓下除去甲醇。用KHS04將水溶液酸化至pH3-3.5。將由此形成的白色沉淀物通過真空過濾分離，溶于EtOAc中，然后用水洗滌。將有機(jī)萃取物在MgS04上干燥、過濾、濃縮并干燥，從而得到白色固體狀標(biāo)題化合物(259mg,80y。)。酸的制法87-乙基-lH-吲唑-5-羧酸在0"C下，向2-乙基-6-甲基苯胺(2.03g,15mmol)在DMF(50mL)中的溶液添加N-溴琥珀酰亞胺(2.66g,14.9mmol)。將混合物在室溫下攪拌10分鐘，然后添加到飽和NaCl水溶液中。用EtOAc萃取混合物，將有機(jī)相用飽和NaCl水溶液(2x)洗滌然并濃縮，然后將粗制物質(zhì)用Biotage色譜(40M,15%EtOAc/庚垸)純化，從而得到紅棕色液體狀4-溴-2-乙基-6-甲基苯胺(3.21g,100%)。4將4-溴-2-乙基-6-甲基苯胺(3.21g,15mmol)在乙酸(50mL)中的溶液攪拌3小時(shí)，然后添加亞硝酸鈉的2M溶液(llmL,22.5mmo1)。將所得混合物在室溫下攪拌過夜。濃縮溶液，然后將固體溶于EtOAc中并用飽和NaCl(3x)水溶液洗滌。將有機(jī)萃取物在Na2S04上干燥，過濾并濃縮。粗制物質(zhì)用Biotage色譜(40M，15-30%EtOAc/庚烷)純化，從而得到5-溴-7-乙基-lH-卩引唑(l.llg,33。/。)和5-溴-3，7-二甲基-lH-卩引唑(0.84g,25%)。向5-溴-7-乙基-lH』引唑(225mg,1.00mmol)在二氧雜環(huán)己烷(1.5mL)中的溶液添加六羰基鉬(132mg,0.50mmol)、Herrmann催化劑(反式-雙(乙酸)二[鄰-(二鄰甲苯基膦)芐基]二鈀)(46.9mg，0.05mmol)和碳酸鈉(318mg,3.00mmol)在水(2mL)中的溶液。密封懸浮液，然后在165°C的微波下輻射15分鐘(高吸收設(shè)置)。打開小瓶，在硅藻土上過濾，用EtOAc洗絲，然后濃縮，從而得到標(biāo)題化合物(140mg，74Q/0)。酸的制法93-氯-lH-吲哚-5-羧酸向吲哚-6-羧酸在二氯甲垸(40mL)和DMF(4mL)中的溶液添加N-氯琥珀酰亞胺，然后將其在室溫下攪拌3小時(shí)。將反應(yīng)混合物在減壓下濃縮，然后將粗制物質(zhì)在二氯甲垸(100mL)中攪拌2小時(shí)，過濾，干燥過夜，從而得到標(biāo)題化合物(1.15g,95%)。酸的制法10_3.7-二甲基-lH-吲唑-5-羧酸向含有重新純化的5-溴-3,7-二甲基-lH-吲唑(根據(jù)酸的制法8中所述制備，285mg,1.27mmol)在二氧雜環(huán)己烷(1.3mL)中的溶液的反應(yīng)容器中添加六羰基鉬(264mg，1.0mmol)、Herrmann催化劑(93mg,0.1mmol)和Na2C03在水中的溶液(636mg在2mL水中)。將懸浮液在165。C的微波下輻射15分鐘(高吸收)。打開小瓶，用1NHC1酸化(至pH2)。將反應(yīng)混合物在硅藻土上過濾，用EtOAc洗滌，然后將有機(jī)層用飽和NaCl(3x)水溶液洗滌。濃縮有機(jī)萃取物，從而得到粉色固體狀標(biāo)題化合物(65mg，17%)。酸的制法lll-甲基-H』引哚-6-羧酸向N-甲基吲哚-6-羧酸甲酯在3mL的1:1:1:1乙腈/THF/水/MeOH中的溶液添加LiOH，并將其在室溫下攪拌整個(gè)周末。將反應(yīng)混合物在減壓下濃縮，然后添加EtOAc和水。分離有機(jī)相，將其用1NHC1進(jìn)行水性酸化并用EtOAC萃取(3x50mL)，接著用水、飽和NaCl水溶液洗滌，在MgS04上干燥，過濾并在減壓下濃縮。將物質(zhì)在減壓下濃縮，從而得到標(biāo)題化合物(0.16g,86%)。酸的制法12l-甲基-2-吡咯烷-l-基-lH-苯并咪唑-5-羧酸在攪拌下，將3-硝基-4-氯苯甲酸甲酯(72.01g,0.334mol)懸浮于新蒸餾的乙腈(360mL)中。在劇烈攪拌下，將無水乙酸鈉(4Ug,0.5mol)和30%的甲基胺的水溶液(69mL，0.67mol)加入上述懸浮液中。將所得混合物回流7小時(shí)，然后放置過夜，其中用TCL進(jìn)行監(jiān)測(氯仿/CCU1:2)。通過過濾分離黃色沉淀物，然后將其與K2C03(25g)在水(500mL)中的溶液混合。將混合物攪拌30分鐘并過濾。將黃色沉淀物用水洗滌至pH7。將濾液在減壓下濃縮至體積為約200mL，然后將其與K2C03(5g)在水(100mL)中的溶液混合。將混合物攪拌30分鐘，然后過濾。將黃色沉淀物用水洗滌至pH7。合并上述兩種沉淀物并干燥，從而得到黃色粉末狀4-(甲基氨基)-3-硝基苯甲酸甲酯(67.63g,96%)。在劇烈攪拌下，將4-(甲基氨基)-3-硝基苯甲酸甲酯(63.06g,0.3mol)懸浮于甲醇(700mL)中。將Raney鎳(15g，通過用2NNaOH溶液處理鎳-鋁50/50合金而新制成)在甲醇(30mL)中的懸浮液加入上述懸浮液中。在劇烈攪拌下，將所得混合物加熱至40-45°C，然后將肼一水合物(60mL,1.2mol)在低于55"C的溫度下滴加到上述懸浮液中，耗時(shí)3小時(shí)。將混合物在50-55"C下攪拌3小時(shí)，然后保持在室溫下過夜。在劇烈攪拌下，將反應(yīng)混合物再次加熱至40-45°C。然后將額外的肼水合物(5mL)加入上述混合物中。在劇烈攪拌下，將懸浮液回流2小時(shí)，冷卻，并用氯仿(iL)稀釋。將混合物通過硅藻土(上層2cm,直徑17cm)和硅膠(下層5cm)，從而除去Raney鎳。將各層用氯仿/甲醇混合物(l:l，5x600mL)洗滌。將濾液在減壓下濃縮。將殘余物用苯(IOOmL)稀釋，然后將混合物在減壓下濃縮，從而除水。重復(fù)上述操作，從而得到棕色結(jié)晶固體狀3-氨基-4-(甲基氨基)苯甲酸甲酯(53.6g,99%)，該產(chǎn)物直接用在下一步中無需進(jìn)一步純化。將3-氨基-4-(甲基氨基)苯甲酸甲酯(53.6g，0.3mol)溶于無水二氯甲烷(700mL)中。在攪拌下，將羰基二咪唑(CDI,62.59g,0.386mol)以數(shù)次小批量加入上述溶液中，耗時(shí)2小時(shí)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。通過過濾分離形成的沉淀物，然后將沉淀物用冷醚(3x50mL)洗滌并干燥，從而得到淺粉色晶體狀l-甲基-2-氧代-2，3-二氫-lH-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(49.75g，81%)。將磷酰溴(P0Br3,102.4g,0.357mol)溶于二氯乙烷(400mL)中。在攪拌下，將l-甲基-2-氧代-2,3-二氫-lH-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(36.7g，0.178mol)以數(shù)次小批量加入上述溶液中，然后使所得懸浮液回流，其中采用TLC監(jiān)測(氯仿/l,2-二甲基乙垸10:1)。反應(yīng)完成(約19小時(shí))后，將反應(yīng)混合物在冰浴中冷卻，然后用水(50mL)、用Na2C03(100g)在水(800mL)中的溶液(其中觀察到劇烈起泡)中和3小時(shí)。用氯仿(2L)萃取淬滅后的混合物。分離各層，然后用氯仿(500mL)再次萃取水層。合并有機(jī)層，然后將合并的有機(jī)層用水(3x250mL)洗滌，在CaCl2上干燥。在減壓下濃縮有機(jī)溶液。所得灰白色固體在乙腈中重結(jié)晶，從而得到白色固體狀2-溴-l-甲基-lH-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(37.1g,77.5%)。將2-溴-l-甲基-lH-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(40.0g,0.149mol)、吡咯烷(25.37g，30mL，0.357mol)、氟化銫CsF(31.61g，0.208mol)和DMSO(240mL)的混合物置于微波反應(yīng)器(MILESTONEMicrowaveLabstation;Shelton，CT)中。將反應(yīng)混合物在攪拌下用微波輻射進(jìn)行處理S小時(shí)，其中內(nèi)部溫度為115°C，然后將其冷卻并倒入冰冷的水(lL)中。通過過濾分離形成的沉淀物，然后將沉淀物用冷水(2x50mL)、己烷(2x100mL)洗滌，接著干燥。將產(chǎn)物與醚(250mL)和乙腈(20mL)混合，然后將混合物置于超聲浴中1.5小時(shí)。通過過濾分離沉淀物，然后將沉淀物用醚(2x50mL)洗滌，接著干燥，從而得到l-甲基-2-吡咯烷-l-基-lH-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(28.82g,75%)。將l-甲基-2-吡咯烷-l-基-lH-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(28.8g,0.111mol)在甲醇(200mL)中的懸浮液與KOH(12.44g,0.222mol)在水(200mL)中的溶液混合。將混合物回流3小時(shí)，然后保持在室溫下過夜。將反應(yīng)混合物在減壓下濃縮，從而除去甲醇。將殘余物與KHS04(30.21g，0.222mol)在水(200mL)中的溶液混合，然后將混合物攪拌1小時(shí)。在減壓下將反應(yīng)混合物濃縮至干燥，然后用氯仿和異丙醇的溫?zé)峄旌衔?l:l,約7L)從固體殘余物中提取產(chǎn)物。將所得提取物在減壓下濃縮，然后將殘余物溶于二氯甲烷和異丙醇的沸騰混合物(l:l，500mL)中。將溶液回流30分鐘，然后在冰箱中冷卻。通過過濾分離由此形成的沉淀物，然后將沉淀物干燥，從而得到黃灰色結(jié)晶固體狀的l-甲基-2-吡咯烷-l-基-lH-苯并咪唑-5-羧酸(18.3g，67%)。酸的制法133-氯-lH-吲哚-6-羧酸向lH-吲哚-5-羧酸在二氯甲垸(20mL)和DMF(2mL)中的溶液添加N-氯琥珀酰亞胺，然后將其在室溫下攪拌3小時(shí)。在減壓下濃縮反應(yīng)混合物。將粗制物質(zhì)在二氯甲垸(IOOmL)中攪拌過夜，過濾并干燥，從而得到標(biāo)題產(chǎn)物(0.439g，72%)。酸的制法14l-甲基-lH-吲唑-6-羧酸根據(jù)J.Med.Chem.2000，43(1),41-58(實(shí)施例12b，49頁)中公開的過程制備1H-吲唑-6-羧酸甲酯。在標(biāo)準(zhǔn)條件(六甲基二甲硅烷鈉，THF,碘代甲烷，回流)下進(jìn)行烷基化，從而得到l-甲基-lH-吲唑-6-羧酸甲酯(43。/。)。在標(biāo)準(zhǔn)條件(lNNaOH)下進(jìn)行皂化，從而得到標(biāo)題產(chǎn)物(96%)。酸的制法15U-二甲基-lH-吲唑-6-羧酸根據(jù)國際申請WO2005/090305(實(shí)施例40a)所述制備甲磺酸2-乙?；?5-溴苯酯。然后，將甲磺酸2-乙?；?5-溴苯酯用甲基肼和乙酸銨回流處理6天，從而得到6-溴-l，3-二甲基-lH』引唑(60。/。)。將6-溴-1,3-二甲基-1H-吲唑在THF中的溶液先后用正-BuLi和二氧化碳進(jìn)行處理，從而得到標(biāo)題化合物(1.23g,60%)。酸的制法163-乙基-l-甲基-lH-吲唑-6-羧酸將甲磺酸5-溴-2-丙酰基苯酯用甲基肼和乙酸銨回流處理6天，從而得到6-溴-3-乙基-l-甲基-lH-吲唑(33。/。)。將6-溴-3-乙基-l-甲基-lH-吲唑在THF中的溶液先后用正-BuLi和二氧化碳進(jìn)行處理，從而得到標(biāo)題化合物(66%)。酸的制法172-氟-5-(lH-吡唑-3-基V苯甲酸將5-溴-2-氟苯甲酸(100g,0.457mol)加入HC1在甲醇中的溶液(400mL;約11%)。將懸浮液回流8小時(shí)，然后真空蒸發(fā)。將殘余物溶于苯(500mL)中，然后將溶液用K2C03水溶液(2x50mL)和水(3x100mL)洗滌，在Na2S04上干燥，并真空蒸發(fā)，從而得到黃色油狀5-溴-2-氟苯甲酸甲酯，產(chǎn)率88%(93.7g)。在氬氣氛下，將5-溴-2-氟苯甲酸甲酯(154.2g,0.66mol)、無水苯(450mL)、乙炔基(三甲基)硅烷(78.0g,0.79mol)、二異丙基銨(IOOg,0.99mol)和四(三苯基膦)鈀(20.0g,0.017mol)置于安裝有磁力攪拌和溫度計(jì)的1升三口圓底燒瓶中。將混合物攪拌30分鐘，然后冷卻至10°C。加入碘化酮(12.5g,0.066mol)，然后將所得懸浮液在2(TC下攪拌2.5小時(shí)，在6(TC下攪拌3小時(shí)，最后在室溫下靜置過夜。此后，用醚(200mL)稀釋混合物，然后通過過濾分離沉淀物，并將沉淀物用醚(2x100mL)洗滌。將所得有機(jī)溶液(800mL)用NH4C1和NaCl的飽和水溶液洗滌，在Na2S04上干燥并蒸發(fā)。將粗制產(chǎn)物在硅膠柱上通過色譜(己烷/乙酸乙酯10:1)純化，從而得到含有13%的5-溴-2-氟苯甲酸甲酯的2-氟-5-(2-三甲基甲硅烷基)乙炔基苯甲酸甲酯，產(chǎn)率為約80%(148.1g)。將2-氟-5-(2-三甲基甲硅烷基)乙炔基苯甲酸甲酯(171.1g,0.684mol)、二乙酸滎(2+)(12.0g,0.051mol)在THF(400mL)和濃H2S04(74mL,1.37mol)中的懸浮液在50-60"C下攪拌2小時(shí)。然后將混合物冷卻，并在真空下蒸發(fā)THF(350mL)。將殘余物用醚(700mL)稀釋并過濾，從而除去汞鹽，將汞鹽用酸洗滌。然后，將醚溶液在Na2S04上干燥并濃縮。將粗制產(chǎn)物(125g)在硅膠柱上通過色譜純化，首先用己烷/乙酸乙酯混合物(10:l)洗脫，從而除去5-溴-2-氟苯甲酸甲酯，然后用己烷/乙酸乙酯(l:l)洗脫，從而得到5-乙?；?2-氟苯甲酸甲酯，產(chǎn)率75%(90.0g)。將(二甲氧基甲基)二甲基胺(92mL,0.69mol)加入5-乙酰基-2-氟苯甲酸甲酯(90.0g,0.46mol)在甲苯(90mL)中的懸浮液中。將混合物回流7小時(shí)，該過程中蒸餾掉形成的甲醇。然后，將溶液真空濃縮，接著將殘余物(115.2g)通過結(jié)晶純化，從而得到黃色棱晶狀5-(3-(二甲基氨基)丙烯酰基)-2-氟苯甲酸甲酯，產(chǎn)率80y。(93.9g)。將5-(3-(二甲基氨基)丙烯?；?-2-氟苯甲酸甲酯(50g,0.2mol)、肼水合物(ll.Og,0.22mol)在甲醇(500mL)中的混合物在20。C下靜置48小時(shí)。然后蒸發(fā)溶劑，接著將殘余物在硅膠柱上通過色譜(乙酸乙酯/己烷l:2)純化，從而得到22.0g含有雜質(zhì)的2-氟-5-(lH-吡唑-3-基)苯甲酸甲酯。將產(chǎn)物在乙醇中通過結(jié)晶純化，從而得到黃色棱晶狀2-氟-5-(lH-吡唑-3-基)苯甲酸甲酯，產(chǎn)率45%(19.9§)。將2-氟-5-(lH-吡唑-3-基)苯甲酸甲酯(25.2g,0.115mol)在濃HC1(150ml)中回流2小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物冷卻并過濾。將分離出的沉淀物用乙醇洗滌，干燥，然后在水(200mL)中回流30分鐘從而除去痕量甲酯和HC1，接著冷卻并過濾。將分離的沉淀物用水洗滌，然后干燥，從而得到標(biāo)題化合物，產(chǎn)率90.7%(21.4g)。酸的制法182-氯-5-(lH-吡唑-3-某)-苯甲酸在Ar氣氛下，將5-溴-2-氯苯甲酸乙酯(100g,0.38mol)、無水苯(450mL)、乙炔基(三甲基)硅垸(44.7g，0.45mo1)、哌啶(38.3g,0.45mol)和四(三苯基膦)鈀(22.0g，0.019mol)置于安裝有磁力攪拌和溫度計(jì)的1升三口圓底燒瓶中。將混合物攪拌30分鐘，然后冷卻至0°C。添加碘化銅(7.23g，0.038mol),然后將所得懸浮液在30-35匸下進(jìn)一步攪拌2.5小時(shí)并過濾。將分離出的沉淀物用苯洗滌，然后將合并的濾液用NH4C1和NaCl的飽和水溶液洗滌，在Na2S04上干燥并蒸發(fā)。將粗制產(chǎn)物在硅膠柱上通過色譜(己烷/乙酸乙酯10:1)純化，從而得到2-氯-5-(2-(三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯甲酸乙酯，產(chǎn)率95。/。(101g)。將2-氯-5-(2-(三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯甲酸乙酯(101g，0.36mo1)、二乙酸汞(2+)(8.6g，0.027mol)在THF(250mL)和濃H2S04(40mL)中的懸浮液在6(TC下攪拌3小時(shí)。然后，將混合物冷卻，用醚(500mL)稀釋，然后洗滌至中性介質(zhì)。然后，將溶液在Na2S04上干燥并蒸發(fā)。將殘余物在硅膠柱上通過色譜(己烷/乙酸乙酯4:1)純化，從而得到5-乙?；?2-氯苯甲酸乙酯，產(chǎn)率70。/。(57g)。將(二甲氧基甲基)二甲基胺(40mL)加入5-乙酰基-2-氯苯甲酸乙酯(57g,0.25mol)在甲苯(60mL)中的懸浮液中。將混合物回流9小時(shí)，該過程中蒸餾掉形成的甲醇。然后，將溶液真空濃縮，接著將殘余物在硅膠柱上通過色譜(乙酸乙酯)純化，從而得到黃色棱晶狀2-氯-5-(3-(二甲基氨基)丙烯酰基)苯甲酸乙酯，產(chǎn)率80%(57.6g)。將肼水合物(5.5g,0.11mol)加入2-氯-5-(3-(二甲基氨基)丙烯?；?苯甲酸乙酯(28g,0.1mol)在乙醇(100mL)中的懸浮液中。將反應(yīng)混合物置于20。C下過夜，然后濃縮。將殘余物在硅膠柱上通過色譜(乙酸乙酯/己烷1:2)純化，從而得到2-氯-5-(lH-吡唑-3-基)苯甲酸乙酯，產(chǎn)率94。/。(22.9g)。將化合物2-氯-5-(lH-吡唑-3-基)苯甲酸乙酯(22.9g,0.091mol)、甲基化鈉(7.4g，0.14mol)在乙醇(250mL)中的懸浮液回流IO分鐘。分離由此形成的沉淀物，并將其溶于水(lL)中。將所得水性溶液用濃HC1酸化至pH為約2，從而造成沉淀。通過過濾分離沉淀物，將沉淀物用水洗滌，并干燥，從而得到黃色晶體狀2-氯-5-(lH-吡唑-3-基)-苯甲酸，產(chǎn)率92%(18.9g)。酸的制法192-羥基-5-(lH-吡唑-3-基V苯甲酸在攪拌下，將5-乙?；?2-羥基苯甲酸甲酯(l;20g,0.1341mol)、(氯甲基)苯(17.82g,0.1410mol)和Na2C03(17.1g,0.1613mol)在DMF(50mL)中的混合物加熱(110-115。C)2小時(shí)。然后，將反應(yīng)混合物冷卻，然后將殘余物通過過濾分離并用DMF(15mL)洗滌。將合并的濾液真空蒸發(fā)，然后將水(IOOmL)加入殘余物中。將所得混合物真空蒸發(fā)，從而除去(氯甲基)苯。然后通過在真空下與甲苯(2x100mL)共蒸發(fā)除去痕量水。用己烷(IOOmL)研磨粉碎殘余物，通過過濾分離并干燥，從而得到5-乙?；?2-(芐氧基)苯甲酸甲酯，產(chǎn)率84.7%(27.17g)。將(二甲氧基甲基)二甲基胺(28.70g，32.0mL，0.241mol)加入5-乙?；?2-(芐氧基)苯甲酸甲酯(27.17g,0.1135mol)在DMF(30mL)中的懸浮液中。在攪拌下，將混合物加熱(110-115'C)8小時(shí)，該過程中蒸餾掉形成的甲醇。然后，將溶液真空濃縮，接著將殘余物用無水醚(150mL)進(jìn)行處理，過濾分離并用無水醚(30mL)再次進(jìn)行洗滌，從而得到黃色棱晶狀2-(芐氧基)-5-(3-(二甲基氨基)-丙烯?；?苯甲酸甲酯，產(chǎn)率82.1%(31.63g)。將2-(節(jié)氧基)-5-(3-(二甲基氨基)-丙烯酰基)苯甲酸甲酯(68.1g,0.20mol)和肼水合物(ll.Og，0.22mol)在甲醇(600mL)中的混合物在室溫下靜置48小時(shí)。然后除去溶劑，并將殘余物在硅膠柱上通過色譜(乙酸乙酯)純化，從而得到2-(芐氧基)-5-(lH-吡唑-3-基)苯甲酸甲酯，產(chǎn)率70%(43.0g)。將2-(節(jié)氧基)-5-(lH-吡唑-3-基)苯甲酸甲酯(43.0g,0.139mol)的懸浮液在濃HC1(250mL)中回流2.5小時(shí)，除去芐基氯。然后冷卻反應(yīng)混合物，并通過過濾分離所形成的沉淀物，接著將沉淀物用水洗滌，干燥，從而得到標(biāo)題化合物，產(chǎn)率75.4%(27.0g)。酸的制法202-氯-5"l-甲基-lH-吡啤-3-基V苯甲酸將2-氯-5-(3-(二甲基氨萄丙烯酰)苯甲酸乙酯(在制法15中制成，31.7g,0.13mol)、甲基肼(12.44g,0.32mol)在甲醇(120mL)中的混合物在室溫下靜置24小時(shí)。然后除去溶劑，并將殘余物在硅膠柱上通過色譜(乙酸乙酯/己烷l:2)純化，從而得到2-氯-5-(l-甲基-lH-吡唑-3-基)苯甲酸乙酯，產(chǎn)率28o/o(9.6g)。將2-氯-5-(l-甲基-lH-吡唑-3-基)苯甲酸乙酯(9.6g,0.046mol)、甲基化鈉(4.8g,0.07mol)在乙醇(150mL)中的懸浮液回流30分鐘。通過過濾分離沉淀物，然后將沉淀物溶于水中。將水性溶液用濃HC1酸化至pH為約2，從而造成沉淀。通過過濾分離沉淀物，然后將沉淀物用水洗滌并干燥，從而得到晶體狀標(biāo)題化合物，產(chǎn)率為92%。酸的制法213-嘧啶-4-基-苯甲酸在氬氣氛下，將3-溴苯甲酸甲酯(110g,0.51mol)、無水乙腈(500mL)、乙炔基(三甲基)硅烷(60.0g，0.61mol)、二異丙基胺(62.0g,0.61mol)和四(三苯基膦)鈀(23.6g,0.02mol)置于安裝有磁力攪拌和溫度劑的1升三口圓底燒瓶中。將混合物攪拌30分鐘，然后冷卻至1(TC。添加碘化銅(9.7g,0.06mol)，然后將所得懸浮液在2(TC下進(jìn)一步攪拌2.5小時(shí)，最后在60'C下攪拌3小時(shí)。然后，將混合物在室溫下靜置過夜并過濾。將氫溴酸鹽的沉淀物用醚進(jìn)行洗滌，然后將合并的濾液用NH4C1和NaCl的飽和水溶液進(jìn)行洗滌，在Na2S04上干燥并蒸發(fā)。粗制產(chǎn)物在硅膠柱上通過色譜(己垸)純化，從而得到3-(2-(三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯甲酸甲酯，產(chǎn)率為95%(112.8g)。58將3-(2-(三甲基甲硅垸基)乙炔基)苯甲酸甲酯(112.8g,0.48mol)、二乙酸滎(2+)(16.2g，0.005mol)在THF(350mL)和濃H2S04(40mL)中的懸浮液在6(TC下攪拌3小時(shí)。然后，將混合物冷卻，用醚(500mL)稀釋，然后過濾以除去沉淀的汞鹽，并洗滌至中性介質(zhì)。然后，將溶液在Na2S04上干燥并蒸發(fā)。將殘余物在硅膠柱上通過色譜(己垸/乙酸乙酯4:1)純化，從而得到3-乙?；郊姿峒柞?，產(chǎn)率75。/。(65.2g)。將(二甲氧基甲基)二甲基胺(90mL)加入3-乙酰基苯甲酸甲酯(65.2g,0.27mol)在甲苯(90mL)中的懸浮液中。將混合物回流9小時(shí)，該過程中蒸餾掉形成的甲醇。然后，將溶液真空濃縮，接著將殘余物在醚中通過結(jié)晶純化，從而得到黃色棱晶狀3-(3-(二甲基氨基)丙烯?；?苯甲酸甲酯，產(chǎn)率為8。o/"68.1g)。將酰亞胺甲酰胺乙酸酯(imidoformamideacetate)(20.3g,0.19mol)力口入3-(3-(二甲基氨基)丙烯?；?苯甲酸甲酯(30.3g，0.13mol)在甲苯(300mL)中的懸浮液中。將反應(yīng)混合物回流20小時(shí)，該過程中蒸餾掉甲苯和二甲基胺乙酸酯。然后，再次添加酰亞胺甲酰胺乙酸酯(6.7g)和甲苯(175mL)，8小時(shí)后真空蒸發(fā)混合物。將殘余物在硅膠柱上通過色譜(乙酸乙酯/己烷3:1)純化，從而得到3-(嘧啶-4-基)苯甲酸甲酯，產(chǎn)率為70。/。(19.5g)。將3-(嘧啶-4-基)苯甲酸甲酯(19.5g,0.091mol)、甲基化鈉(7.6g,0.14mol)在乙醇(250mL)中的懸浮液回流30分鐘。然后將反應(yīng)混合物冷卻，接著通過過濾分離形成的沉淀物，并將其溶于水中。用濃HC1將所得溶液酸化至pH為約2，從而造成沉淀。通過過濾沉淀物，并將其用水洗滌，干燥，從而得到晶體狀標(biāo)題化合物，產(chǎn)率為94y。(17.2g)。酸的制法22卜甲基-2-吡咯烷小基-lH-苯并咪唑-5-羧酸攪拌下，將3-硝基-4-氯苯甲酸甲酯(72.01g,0.334mol)懸浮于新蒸餾的乙腈(360mL)中。在劇烈攪拌下，將無水乙酸鈉(41.1g,0.5mol)和甲基胺的30%水溶液(69mL,0.67mol)加入該懸浮液中。將所得混合物回流7小時(shí)，然后保持過夜，其用TLC監(jiān)測(氯仿/CCU1:2)。通過過濾分離黃色沉淀物，然后將其與K2CO3(25g)在水(500mL)中的溶液混合。將混合物攪拌30分鐘，然后過濾。將黃色沉淀物用水洗滌至pH7。將濾液在減壓下濃縮至體積為約200mL，并與K2C03(5g)在水(100mL)中的溶液混合。將混合物攪拌30分鐘并過濾。將黃色沉淀物用水洗滌至pH7。合并以上兩種沉淀物，并將沉淀物干燥，從而得到黃色粉末狀4-(甲基氨基>3-硝基苯甲酸甲酯，產(chǎn)率為96%(67.63g)。將4-(甲基氨基)-3-硝基苯甲酸甲酯(63.06g，0.3mol)在劇烈攪拌下懸浮于甲醇(700mL)中。將Raney鎳(15g，用2NNaOH溶液對(duì)鎳-鋁50/50合金進(jìn)行處理而新制成)在甲醇(30mL)中的溶液加入上述懸浮液中。在劇烈攪拌下，將所得混合物加熱至40-45°C，然后在低于55'C的溫度下，將阱一水合物(60mL,1.2mol)滴加入上述懸浮液中，耗時(shí)3小時(shí)。將混合物在50-55'C下攪拌3小時(shí)，并保持在室溫下過夜。在劇烈攪拌下，將反應(yīng)混合物再次加熱至40-45°C，然后將額外量的阱水合物(5mL)加入上述混合物中。在劇烈攪拌下，將懸浮液回流2小時(shí)，冷卻并用氯仿(lL)稀釋。將混合物通過硅藻土(上層2cm,直徑17cm)和硅膠(下層5cm)，從而除去Raney鎳。將各層用氯仿/甲醇混合物(l:l，5x600mL)洗滌。將濾液在減壓下濃縮。將殘余物用苯(IOOmL)稀釋，然后將混合物在減壓下濃縮，從而除水。重復(fù)上述操作，從而得到棕色結(jié)晶固體狀3-氨基-4-(甲基氨基)苯甲酸甲酯，產(chǎn)率為99%(53.6g)。3-氨基-4-(甲基氨基)苯甲酸甲酯被直接用在下一步中無需進(jìn)一步純化。將3-氨基-4-(甲基氨基)苯甲酸甲酯(53.6g，0.3mol)溶于無水二氯甲烷(700mL)中。在攪拌下，將羰基二咪唑(CDI,62.59g,0.386mol)以數(shù)次小批量加入上述溶液中，耗時(shí)2小時(shí)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。通過過濾分離形成的沉淀物，然后將沉淀物用冷醚(3x50mL)洗滌并干燥，從而得到淺粉色晶體狀l-甲基-2-氧代-2,3-二氫-lH-苯并咪唑-5-羧酸甲酯，產(chǎn)率為81%(49.75g)。將磷酰溴(P0Br3，102.4g,0.357mol)溶于二氯乙垸(400mL)中。在攪拌下，將l-甲基-2-氧代-2，3-二氫-lH-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(36.7g,0.178mol)以數(shù)次小批量加入上述溶液中，然后使所得懸浮液回流，其中采用TLC監(jiān)測(氯仿/l,2-二甲基乙垸10:1)。反應(yīng)完成(約19小時(shí))后，將反應(yīng)混合物在冰浴中冷卻，然后用水、用Na2C03(100g)在水(800mL)中的溶液(其中觀察到劇烈起泡)中和3小時(shí)。用氯仿(2L)萃取所得混合物。分離各層，然后用氯仿(500mL)再次萃取水層。合并有機(jī)層，然后將合并的有機(jī)層用水(3x250mL)洗滌，在CaCl2上干燥。在減壓下濃縮有機(jī)溶液。所得灰白色固體在乙腈中重結(jié)晶，從而得到白色固體狀2-溴-l-甲基-lH-苯并咪唑-5-羧酸甲酯，產(chǎn)率為77.5%(37.1g)。將2-溴-l-甲基-lH-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(40.0g,0.149mol)、吡咯烷(25.37g,30mL,0.357mol)、氟化銫CsF(31.61g,0.208mol)和DMSO(240mL)的混合物置于微波反應(yīng)器中。將反應(yīng)混合物在攪拌下用微波輻射進(jìn)行處理8小時(shí)，其中內(nèi)部溫度為115°C，然后將其倒入冰冷的水(lL)中。通過過濾分離形成的沉淀物，然后將沉淀物用冷水(2x50mL)、己烷(2x100mL)洗滌，接著干燥。將產(chǎn)物與醚(250mL)和乙腈(20mL)混合，然后將混合物置于超聲浴中1.5小時(shí)。通過過濾分離沉淀物，然后將沉淀物用醚(2x50mL)洗滌，接著干燥，從而得到1-甲基-2-吡咯烷-1-基-111-苯并咪唑-5-羧酸甲酯，產(chǎn)率為75%(28.82g)。將l-甲基-2-吡咯垸-l-基-lH-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(28.8g,0.111mol)在甲醇(200mL)中的懸浮液與KOH(12.44g，0.222mol)在水(200mL)中的溶液混合。將混合物回流3小時(shí)，然后保持在室溫下過夜。將反應(yīng)混合物在減壓下濃縮，從而除去甲醇。將殘余物與KHS04(30.21g,0.222mol)在水(200mL)中的溶液混合，然后將混合物攪拌1小時(shí)。在減壓下將反應(yīng)混合物濃縮至干燥，然后用氯仿和異丙醇的溫?zé)峄旌衔?l:l,約7L)從固體殘余物中提取產(chǎn)物。將所得提取物在減壓下濃縮，然后將殘余物溶于氯仿和異丙醇的沸騰混合物(l:l，500mL)中。將溶液回流30分鐘，然后在冰箱中冷卻。通過過濾分離由此形成的沉淀物，然后將沉淀物干燥，從而得到黃灰色結(jié)晶固體狀的l-甲基-2-吡咯烷-l-基-lH-苯并咪唑-5-羧酸，產(chǎn)率為67%(18.3g)。酸的制法237-氯-4-甲氧基-2-甲基-lH-苯并咪唑-5-羧酸向在冰/丙酮浴中冷卻的濃硫酸(10mL)添加可商購4-(乙?；被?-5-氯-2-甲氧基苯甲酸甲酯(500mg,2.0mmol)，然后攪拌5分鐘。向其中滴加發(fā)煙硝酸(2mL),耗時(shí)10分鐘，同時(shí)將溫度保持在低于l(TC。將反應(yīng)混合物在0。C下攪拌額外20分鐘。將反應(yīng)混合物小心倒入冰(30mL)中，然后通過過濾分離所得固體并將其真空干燥，從而得到4-(乙酰基氨基)-5-氯-2-甲氧基-3-硝基苯甲酸甲酯(497mg，85%)。在30磅每平方英寸(psi)氫氣下、在室溫下，將4-(乙?；被?-5-氯-2-甲氧基-3-硝基苯甲酸甲酯(5.53g,18.3mmol)和Raney鎳(500mg)在乙醇(95mL)和水(5mL)中的混合物攪拌5小時(shí)。將反應(yīng)混合物通過arbocel過濾，然后將濾液在真空下濃縮，從而得到4-(乙酰基氨基)-3-氨基-5-氯-2-甲氧基苯甲酸甲酯(4.60g,92%)。將4-(乙酰基氨基)-3-氨基-5-氯-2-甲氧基苯甲酸甲酯(4.60g,16.9mmol)和對(duì)甲苯磺酸(290mg,1.69mmol)溶于甲苯中，然后加熱回流1小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，然后將其在CH2Cl2和NaHC03飽和水溶液中進(jìn)行分配。濃縮有機(jī)萃取物，從而得到7-氯-4-甲氧基-2-甲基-lH-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(4.21g,98%)。將7-氯-4-甲氧基-2-甲基-lH-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(2.00g,7.85mmol)在含有1MNaOH的THF(12mL)中的混合物加熱回流3小時(shí)。如果該反應(yīng)未完成，那么添加額外的1MNaOH(6mL)，接著將反應(yīng)混合物加熱回流額外4小時(shí)。蒸發(fā)THF，然后將所得溶液用濃HC1(1.4mL)小心中和。攪拌10分鐘后出現(xiàn)白色沉淀物。在室溫下繼續(xù)攪拌10分鐘，然后通過真空過濾過濾，并用水洗滌。在真空下干燥固體，其中殘余水與甲醇共沸，從而得到7-氯-4-甲氧基-2-甲基-lH-苯并咪唑-5-羧酸(1.89g,100%)。實(shí)施例式(1)化合物的制備采用適當(dāng)羧酸和螺環(huán)酮通過以下六種方法的其中之一制備式O)化合物。方法A:向10x75mm的培養(yǎng)試管中添加500(1當(dāng)量("eq"))的適當(dāng)羧酸在無水DMF中的0.2M溶液。向其中添加500pL(0.10mmol)的螺環(huán)胺6,7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮在無水二甲基甲酰胺(DMF)中的0.2M溶液。向其中添加200(1eq)的三乙胺在無水DMF中的0.5M溶液。向其中添加200(1eq)的0-(7-氮雜苯并三唑-l-基)-N,N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸鹽(HATU)在無水DMF中的0.5M溶液。蓋上試管，然后將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16小時(shí)。在55。C下采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)系統(tǒng)除去試管中的揮發(fā)物，耗時(shí)4小時(shí)。將二甲基亞砜(1540mL，含有0.01%的2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT))加入各個(gè)試管中(最終理論濃度為0.05M)。用玻璃紙蓋上試管，然后攪動(dòng)5分鐘或者直到各個(gè)試管中的產(chǎn)物溶解。用LC/MS分析產(chǎn)物。在方法A中可替換地，可采用如下分析和純化方法(此后稱為"方法Al")。在方法Al過程中，所用溶劑是A:水；B:乙腈；C:1%水性三氟乙酸。[體積百分率]。在4.6x30mmWaters(WatersCorp.)X-BridgeC18,5/rni柱中進(jìn)行預(yù)純化分析，其中流速為2.5mL/分鐘，注射體積為2pL，在DMSO中，以如下梯度5%乙腈/95%水至95%乙腈/5%水，耗時(shí)3.0分鐘，保持1%水性三氟乙酸/99%水為1%。所用探測儀包括二極管陣列探測儀(DAD);蒸發(fā)光散射探測儀(ELSD);和飛行時(shí)間質(zhì)譜儀電子噴射正離子模式(TOFMS:ES(+))。在19x50WatersX-BridgeC-18,5ym柱上進(jìn)行制備色譜純化，其中注射體積為900iiL，在DMSO(10-30mg)中，梯度根據(jù)采用DAD、MS:ES(+)探測儀預(yù)純化分析中獲得的保留時(shí)間確定，級(jí)分收集通過選擇離子記錄MS來觸發(fā)；每次注射一個(gè)試管。預(yù)純化保留時(shí)間純化方法(min)0.4-0.7聚焦梯度l0.7-1.0聚焦梯度21.0-1.4聚焦梯度31.4-1.8聚焦梯度4631.8-2.4聚焦梯度2.4-3.0聚焦梯度6時(shí)間(min)%A/B/C0.090/5/5聚焦梯度l2.085/10/54.05/90/50.090/5/5聚焦梯度22.070/25/54.05/卯/50.085/10/5聚焦梯度32.055/40/54.05/90/50.070/25/5聚焦梯度42.040/55/54.05/90/50.055/40/5聚焦梯度52.025〃0/54.05/90/50.040/55/5聚焦梯度62.010/85/54.05/90/5在4.6x30mmWatersX-BridgeC8,5fim柱上進(jìn)行后純化分析，其中注射體積為2pL，流速為2.5mL/分鐘，在DMSO中，梯度為4%B至95%B，耗時(shí)3.0分鐘，保持C為1%。所用探測儀包括DAD、ELSD、TOFMS:ES(+)模式。方法B:向燒瓶中添加適當(dāng)量的胺或胺鹽酸鹽(l當(dāng)量)、DMF或CH2Cl2(約0.1M)、羧酸、N,N-二異丙基乙基胺(D正A)(4-6當(dāng)量)或三乙基胺(TEA)(4-6當(dāng)量)禾口HATU(1-1.3當(dāng)量)。在室溫下攪拌混合物，直到LC/MS測定反應(yīng)完成。將混合物用乙酸乙酯稀釋，然后用NaHC03飽和水溶液(2x)和NaCl飽和水溶液洗滌。將有機(jī)萃取物在MgS04上干燥，過濾并濃縮。將粗制物質(zhì)用液相色譜純化，從而得到產(chǎn)物。另一種方式(此后稱為"方法B1")，濃縮粗制反應(yīng)混合物，然后如方法Al所示通過色譜直接純化。方法C:向方法B制成的螺環(huán)酮在MeOH/水(約0.1M;V:V2:1)中的溶液添加LiOH(1-5eq.)。將溶液在5(TC下加熱3小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物冷卻，濃縮并通過柱色譜純化。方法D:向1dram小瓶中添加260/iL的溶于1M三乙胺在CH2C12中溶液中的胺的0.25M溶液。向其中添加260/iL的羧酸在02(312中的0.25M溶液。將混合物進(jìn)行旋渦攪拌，然后向其中添加260AtL的HATU在CH2Cl2中的溶液。使小瓶進(jìn)行旋渦攪拌，然后在室溫下?lián)u動(dòng)16小時(shí)。將粗制反應(yīng)混合物通過液相色譜純化，從而得到所需產(chǎn)物。方法E:向96深孔板中的2.2mL孔中添加羧酸溶液(0.5mL的0.5MDMF溶液)、胺溶液(0.5mL的0.5MDMF溶液)和HATU溶液(0.5mL的0.5MDMF溶液)。向其中添加三乙胺(3當(dāng)量)。將板密封并攪動(dòng)16小時(shí)。通過在減壓下離心蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物溶于CH2Cl2(1mL)中，然后依次用K2C03(2x0.7mL的0.5M溶液)和水(0.7mL)洗滌，然后轉(zhuǎn)移到收集板中。將最終的水性廢液用CH2C12(0.5mL)再次萃取，并與首次CH2Cl2萃取物合并，然后蒸發(fā)至干燥。方法F:向螺環(huán)酮在MeOH/水(約0.1M;V:V2:1)中的溶液添加LiOH(1-5eq.)。將溶液保持在5CTC下3小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物冷卻下來，濃縮并用柱色譜純化。在HPLC色譜上分離含有TFA的水相得到三氟乙酸鹽作為最終產(chǎn)物。實(shí)施例(Ex.)A1-A35Ex.方R1R2R3R4ACC1ACC1ACC2ACC2法ic50ic50n沐65<table>tableseeoriginaldocumentpage66</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage67</column></row><table>、n是試驗(yàn)進(jìn)行的次數(shù)。Ex.Al:如下采用方法Bl形成6,7-二甲基-r-[(7-甲基-lH-吲唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-4(3H)-酮。將6,7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌疲]-4(3H)-酮(300mg，0.83mmol)在CH2C12(5mL)中的溶液用三乙胺(0.70mL，5.0mmol)禾口0-(7-氮雜苯并三唑-l-基)-N,N,N，,N，-四甲基脲六氟磷酸酯("HATU")(317mg,0.84mmol)進(jìn)行處理。將混合物在室溫下攪拌6小時(shí)，然后在減壓下除去溶液，接著通過色譜純化，從而得到標(biāo)題化合物(50mg,48%)。&NMR(CDC13)S8.24(brs,1H)，7.71(s，1H),7.59(s,1H)，7.33(s,1H),6.80(s,1H)，2.66(m，3H),2.26(s,3H),2.20(s,3H)。Ex.A2:如下采用方法A形成6,7-二甲基-l'-[(7-甲基-lH-吲唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-4(3H)-酮三氟乙酸鹽。向10x75mm的培養(yǎng)試管中添加400AtL(0.08mmol)的6,7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮在無水二甲基甲酰胺(DMF)中的0.2M溶液，接著加入磁力棒。向其中添加400(1eq)的適當(dāng)羧酸在無水DMF中的0.2M溶液。向其中添加160(1叫)的三乙胺在無水DMF中的0.5M溶液。向其中添加160/IL(1eq)的HATU在無水DMF中的0.5M溶液。用玻璃紙蓋上試管，然后將反應(yīng)混合物攪拌16小時(shí)。采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)系統(tǒng)除去試管中的揮發(fā)物，其中進(jìn)行中度加熱。將二甲基亞砜(1540^L，含有0.01%的2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT))加入各個(gè)試管中(最終理論濃度為0.05M)。用玻璃紙蓋上試管，然后攪動(dòng)5分鐘或者直到各個(gè)試管中的產(chǎn)物溶解。MS(ACPI)m/z404(M+H)+，HPLCRT1.56分鐘，^NMR(CDC13)S8.24(brs,1H)，7.71(s,1H)，7.59(s,1H),7.33(s,1H),6.80(s,1H)，2.66(m,3H),2.26(s，3H),2.20(s，3H)。Ex.A3:6-異丙氧基-1'-[(7-甲基-111-吲唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z(M+H)+434，HPLCRT2.4.&NMR(CDC13)58.14(s,IH)，7.69(s，IH),7.32(d,1H),7,27-7.28(m，2H),7.10-7.12(dd,IH)，6.94-6.96(d,IH)，4.49-4.54(m,IH),2.75(brs，2H),2.59(s,3H),1.32-1.33(d,6H)。Ex.A4:6-乙氧基-r-[(7-甲基-lH-吲唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)陽酮，MS(ACPI)m/z(M+H)+420HPLCRT2.4.HNMR(CDC13)S8.14(s，IH),7.69(s，IH),7.30-7.31(d，IH)，7.12-7.14(dd,IH)，6.95-6.97(d,IH),4.01-4.05(m,2H),2.75(brs，2H),2.60(s,3H),1.40-1.43(t,3H)。Ex.A5:N-甲基-l'-[(7-甲基-lH-吲唑-5-基)羰基]-4-氧代-3,4-二氫螺環(huán)[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-6-碳酰胺，MS(ACPI)m/z(M+H)+433HPLCRT1.7。Ex.A6:5-氯-7-甲氧基-r-[(7-甲基-m-吲唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z(M+H)+440.!HNMR(CDC13)58.13(s,IH)，7.68(s,IH)，7.25(s,IH),6.68(m,IH),6.53-6.54(d,IH)，3.91(s，3H),2.73(s,2H),2.5S(s，3H)。Ex.A7:6-甲氧基-l'-[(7-甲基-lH-吲唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮三氟乙酸鹽，MS(ACPI)m/z406(M+H)+,IHNMR(CDC13)58.24(s，IH),7.76(s，IH),7.35(s,IH),7.32(d,J=3，IH),7.15(dd，J=3，8,8,IH):6.96(d,風(fēng)8,IH),2.77(brs,2H),2.63(s,3H)。Ex.A8:6-溴-7-甲基-1'-[(7-甲基-111-吲唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z486(M+H)+,HPLCRT2.64分鐘。Ex.A9:5-氟-6-甲氧基-r-[(7-甲基-lH-吲唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z424(M+H)+,HPLCRT2.1分鐘。Ex.A10:r-[(7-甲基-lH-吲唑-5-基)羰基]-4-氧代-3,4-二氫螺環(huán)[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-6-碳酰胺，MS(ACPI)m/z(M+H)+419HPLCRT1.6。Ex.All:l'-[(7-甲基-lH-吲唑-5-基)羰基]-4-氧代-3，4-二氫螺環(huán)[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-6-羧酸甲酉旨，MS(ACPI)m/z434(M+H)+,HPLCRT2.15分鐘。Ex.A12:r-[(7-甲基-lH-吲唑-5-基)羰基]-6-(三氟甲氧基)螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)w/z460(M+H)+,HPLCRT2.5分鐘，LHNMR(CDC13)S8.13(s,1H),7.69-7.74(m,2H),7.38(dd,J=2.6,9.3,1H)，7.07(d，J=8.8,1H)，2.80(s,2H),2.59(s,3H)。Ex.A13:6-氯-7-甲基-l'-[(7-甲基-m-吲唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z424(M+H)+,HPLCRT2.5分鐘，HNMR(CDC13)59.40(s，IH),8.25(s,IH),7.79-7.81(m，IH),7.72(s,IH),7.34(s,IH)，6.91(s,IH)，2.72(s,2H)。Ex.A14:6，7-二氯-1'-[(7-甲基-115-吲唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z444(M+H)+,HPLCRT2.6分鐘，^NMR(CDC13)58.20(s，IH)，7.95(s，IH),7.72(s,IH)，7.32(s,IH),7.22(s，IH),2.78(s,2H),2.65(s,3H)。Ex.A15:6-甲基-l'-[(7-甲基-lH-吲唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2，4'-哌接]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z390(M+H)+，&NMR(CDC13)S8.13(s，IH),7.68-7.69(m，2H)，7.34(dd，J=2.6，8.3,IH),7.27(s,IH)，6.93(d,J=8.8),2.75(s，2H),2.60(s,3H),2.32(s，3H)。Ex.A16:6-甲氧基-1'-[(7-甲基-111-吲唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z406(M+H)+，HPLCRT2.1分鐘，力NMR(CDC13)S8.13(s,IH)，7.74(s,IH),7.27(d，J=3.1,IH),7.25(s,IH),7.18(d,J=3.3,IH)，7.16(d,J=3.1,IH)，7.04(s,IH)，7.02(s,IH),4.91(s,2H),3.78(s,3H),2.60(s,3H)。Ex.A17:7-氯-l'-[(7-甲基-lH』引唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z410(M+H)+,^NMR(CDC13)S8.13(s,IH)，7.82(d，J=8.2,IH)，7.69(s,IH),7.26(s,IH),7.07(s，IH),7.02-7.03(m,IH),2.77(s，2H),2.58(s,3H)。Ex.A18:6-氯-5，7-二甲基-l'-[(7-甲基-m』引唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)w/z438(M+H)+,HPLCRT2.7分鐘。Ex.A19:7-氯-5-甲氧基-r-[(7-甲基-lH』引唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)陽酮，MS(ACPI)m/z(M+H)+440。&NMR(CDC13)58.13(s1H),7.69(s,1H),7.26(s,1H)，6.64(m,1H),6.43-6.44(m,1H),3.86(s,3H)，2.76(s,2H)，2.59(s，3H)。Ex.A20:1'-[(7-甲基-111-吲唑-5-基)羰基]-6-(三氟甲基)螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z444(M+H)+,HPLCRT2.5分鐘，&NMR(CDC13)58.18(s,1H),8.13(s,1H),7.76(dd,J=2,0,8.8,1H),7.70(s，IH),7.27)s，1H),7.15(d,J=8.8，1H)，2.83(s，2H),2.59(s，3H)。Ex.A21:6-氯-7-氟-1'-[(7-甲基-111-吲唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z426(M-町,HPLCRT2.4分鐘，NMR(CDC13)58.13(s,1H),7.95(d，J=8.3,1H)，7,69(s,1H),7.27(s,1H)，6.85(d，J=3.1,1H)，2.77(s,2H),2.59(s，3H)。Ex.A22:7-氯-6-氟-r-[(7-甲基-lH-吲哇-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m々428(M+H)+,HPLCRT2.4分鐘，&NMR(CDC13)58.17(s,1H),7.71(s，1H)，7.62(d,J=8.3,1H),7.30(s,1H),7.14(d，J=5.7,1H)，2.78(s,2H),2.62(s，3H)。Ex.A23:6-異丙基-1'-[(7-甲基-1^吲唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z418(M+H)+，HPLCRT2.5分鐘。Ex.A24:7-甲氧基-1'-[(7-甲基-111』引唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m々406(M+H)+，HPLCRT2.0分鐘，&NMR(CDC13)58.14(s,1H),7.82(d,J=8.8,1H),7.69(s,1H),7.27(s,1H),6.59(dd，J=8.8,2.6,1H)，6.47(dd,J-2.0,1H)，3.87(s，3H),2.73(s,2H)，2.60(s,3H)。Ex.A25:5-甲氧基-1'-[(7-甲基-111』引唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z406(M+H)+，HPLCRT1.9分鐘，！HNMR(CDC13)S8.15(s,1H),7.69(s，1H),7.41(t,J=8.3,1H),6.62(d,J=8.8,1H),6.53(d，J=8.3，IH),3.92(s,3H)，2.75(s,2H)，2.60(s，3H)。Ex.A26:6-氯-l'-[(7-甲基-lH-吲唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z410(M+H)+，&NMR(CDC13)S8.16(s，IH),7.84(d,J=2.6，IH),7.70(s,IH),7.46(dd,J=8.8，3.1,IH),7.00(d,J=8.8,IH),2.78(s,2H),2.61(s,3H)。70Ex.A27:N,N-二甲基-l'-[(7-甲基-lH』引唑-5-基)羰基]-4-氧代-3,4-二氫[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-6-碳酰胺，MS(ACPI)m/z(M+H)+447HPLCRT1.7。Ex.A28:7-甲氧基-5-甲基-l'-[(7-甲基-lH-吲唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌咬]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z(M+H)+420HPLCRT2.3。&NMR(CDC13)S8.13(s,1H),7.69(s，1H),7.27(s,IH)，6.36-6.38(m,2H),3.85(s,3H)，2.71(s,2H)，2.62(s,3H),2.59(s,3H)。Ex.A29:5,7-二甲基-^-[(7-甲基-lH-吲唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z404(M+H)+，HPLCRT2.5分鐘。Ex.A30:5,7-二氯-1'畫[(7-甲基-111』引唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z444(M+H)+,HPLCRT2.5分鐘。Ex.A31:r-[(7-甲基-lH-吲唑-5-基)羰基]-4-氧代-3，4-二氫[苯并吡喃-2,4，-哌咬]-6-甲腈，MS(ACPI)m/z401(M+H)+,HPLCRT1.9分鐘，'HNMR(CDC13)58.21-8.23(m,2H)，7.77(dd,J=8.8,IH)，7.74(s，1H),7.34(s,1H),7.15(d,J=8.8,IH)，2.85(s,2H),2.66(s,3H)。Ex.A32:l'-[(7-甲基-lH-吲唑-5-基)羰基]-4-氧代-3,4-二氫[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-7-甲腈，MS(ACPI)m/z401(M+H)+,HPLCRT2.3分鐘，'HNMR(CDC13)58.17(s,1H),7.97(d,J=7.7，1H),7.71(s,1H),7.38(m,1H),7.30-7.32(m,1H),2.84(s,2H)，2.62(s，3H)。Ex.A33:采用方法C制備r-[(7-甲基-lH-吲唑-5-基)羰基]-4-氧代-3,4-二氫[苯并吡喃-2,4，-哌錠]-6-羧酸三氟乙酸鹽。向方法B制成的1'-[(7-甲基-1H』引唑-5-基)羰基]-4-氧代-3,4-二氫螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-6-羧酸甲酯在MeOH/水(1.4mL,2:1)中的溶液添加LiOH(7.5mg)。將該溶液在5CTC下加熱3小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物冷卻、濃縮并用柱色譜純化。MS(ACPI)m/z420(M+H)+,HPLCRT2.0分鐘。MS(ACPI)m/z420(M+H)+,HPLCRT1.85分鐘。Ex.A34:l'-[(7-甲基-lH』引唑-5-基)羰基]-7-苯基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z452(M+H)+,HPLCRT2.6分鐘。Ex.A35:1'-[(7-甲基-111』引唑-5-基)羰基]-6-(甲磺酰基)螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，畫哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z454(M+H)+,HPLCRT1.85分鐘，^71NMR(CDC13)S8.47(d,J=2.6,1H),8.15(s，1H),8.07(dd，J=1.3,8.8，1H),7.70(s,1H),7.27(s,1H),7.22(d,J=8.8，IH)，3.08(s,3H)，2.86(s,2H),2.60(s,3H)。實(shí)施例B1-B14<formula>formulaseeoriginaldocumentpage72</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage72</column></row><table>Ex.Bl:l'-[(7-氯-m-吲唑-5-基)羰基]-6，7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4卿-酮^NMR(CDC13)S8.16(s,1H),7.75(s,1H),7.59(s,1H)，7.48(s,1H),6.80(s,1H),5.29(s,1H),2.70(s,2H)，2.26(s,3H)，2.20(s,3H)。Ex.B2:r-[(7-氯-lH-吲唑-5-基)羰基]-6-異丙氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮&NMR(CDC13)S8.18(s,1H),7.78(s,1H),7.50(s,1H),7.32-7.33(d，1H),7.10-7.12(dd,1H),6.94-6.96(d,1H),4.49-4.54(m,1H),2.84(brs,2H),2.75(brs，2H)，1.32-1.34(d,6H)。Ex.B3:l'-[(7-氯-lH-吲唑-5-基)羰基]-6-乙氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮&NMR(CDC13)S8.18(s,1H),7.78(s,1H),7.50(s,1H)，7.30-7.31(d,1H),7.12-7.15(dd,1H)，6.95-6.97(d,1H),4.01-4.05(q,2H),2.84(s,2H),2.75(s，2H),1.40-1.43(t,3H)。Ex.B4:6-氯-7-甲氧基-1'-[(7-氯-11-吲唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)陽酮NMR(CDC13)58.16(s,1H)，7.81(s,1H),7.74(s,1H),7.47(s，1H),6.91(s，1H),2.72(s,2H),2.38(s，3H)。Ex.B5:r-[(7-氯-lH-吲唑-5-基)羰基]-6-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮&NMR(CDC13)38.16(s,1H),7.75(m,1H),7.48(m,1H),7.28-7.30(m,1H),7.10-7.14(m，1H),6.91-6.95(m，1H),3.79(s,3H)，2.73(s,2H)。Ex.B6:l'-[(7-氯-lH-吲唑-5-基)羰基]-5-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]隱4(3H)國酮&NMR(CDC13)58.19(s，1H),7.78(s,1H)，7.51(s,1H),7.41-7.44(m，1H),6.63(d,J=8.3,1H),6.54(d,J=8.3,IH),3.93(s,3H),2.75(s,2H)。Ex.B7:l'-[(7-氯-m-吲唑-5-基)羰基]-7-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮，iHNMR(CDC13)S8.18(s,1H),7.83(d，J=5.2,1H),7.78(s,1H),7.50(s，1H)，6.59-6.62(m,1H),6.47-6.48(m,1H),3.87(s,3H),2.73(s,2H)。Ex.B8:6-氯-1'-[(7-氯-111-吲唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮，&畫R(CDC13)58.19(s,1H),7.85(d,J=3.1,1H),7.78(s，1H),7.51(s,1H),7.47(dd,J=8.8，2.5,1H)，7.00(d,J=8.8,1H),2.78(s，2H)。73Ex.B9:5，7-二氯-l'-[(7-氯-lH-吲唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮，&NMR(CDC13)S8.18(s，1H)，7.77(s,1H),7.50(s，1H),7.08(d，J=2.1,1H),7.01(d，J=1.5,1H)，2.81(s，1H)。Ex.B10:7-氯-l'-[(7-氯-lH-吲唑-5-基)羰基]-6-氟螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]國4(3H)-酮，&NMR(CDC13)58.18(s,1H),7.78(s,1H),7.63(d,J-8.3,1H),7.50(s，1H),7.15(d,J=5.7,1H),2.78(s,2H)。Ex.Bll:1'-[(7-氯-111-吲唑-5-基)羰基]-5-氟-6-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮。Ex.B12:1'-[(7-氯-111-吲唑-5-基)羰基]-6-(三氟甲基)螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮，&NMR(CDC13)S8.19(s，2H),7.79(s，1H),7.76(dd，J=8.3,2.1，1H),7.51(s，1H)，7.16(d，J=8.9,1H),2.84(s,2H)。Ex.B13:6-氯-l'-[(7-氯-lH-吲唑-5-基)羰基]-7-氟螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，&NMR(CDC13)S8.15(s,1H),7.90-7.93(m,1H),7.75(d,J=1.2,1H),7.47(d,J=1.2,IH),6.83(d,J=9.6，IH),2.75(s,2H)。Ex.B14:r-[(7-氯-lH-吲唑-5-基)羰基]-4-氧代-3,4-二氫[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-6-甲腈。實(shí)施例Cl-C5<table>tableseeoriginaldocumentpage74</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage75</column></row><table>、n是試驗(yàn)進(jìn)行的次數(shù)。Ex.Cl:r-[(7-乙基-lH-吲唑-5-基)羰基]-6,7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮。Ex.C2:l'-[(7-乙基-m-吲唑-5-基)羰基]-6-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮。Ex.C3:l'-[(7-乙基-lH-吲唑-5-基)羰基]-5-甲氧基-7-甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮。Ex.C4:6-氯-r-[(7-乙基-lH-吲唑-5-基)羰基]-7-甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮。Ex.1'-[(7_乙基-111-吲唑-5-基)羰基]-4-氧代-3,4-二氫[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-6-羧酸甲酯。實(shí)施例Dl-D3<table>tableseeoriginaldocumentpage75</column></row><table>、n是試驗(yàn)進(jìn)行的次數(shù)。<table>tableseeoriginaldocumentpage76</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage77</column></row><table>*-11是試驗(yàn)進(jìn)行的次數(shù)。Ex.Fl:6，7-二甲基-r-[(3-甲基-lH-吲唑-6-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮。Ex.F2:6-甲氧基-l'-[(3-甲基-lH-吲唑-6-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮。Ex.F3:6-氯-7-甲基-l'-[(3-甲基-lH-吲唑-6-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮。Ex.F4:l'-[(3-甲基-lH-吲唑-6-基)羰基]-4-氧代-3,4-二氫[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-6-羧酸甲酯。Ex.F5:使用方法C形成l'-[(3-甲基-lH-吲唑-6-基)羰基]-4-氧代-3,4-二氫[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-6-羧酸三氟乙酸鹽。使用方法B制備1'-[(3-甲基-1H』引唑-6-基)羰基]-4-氧代-3,4-二氫[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-6-羧酸甲酯。向l'-[(3-甲基-lH-吲唑-6-基)羰基]-4-氧代-3,4-二氫[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-6-羧酸甲酯在MeOH/水(1.4mL，2:1)中的溶液添加LiOH(7.5mg)。將溶液在5CTC下加熱3小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物冷卻、濃縮并通過柱色譜純化(16.6mg,33%)。實(shí)施例Gl-G5<formula>formulaseeoriginaldocumentpage78</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage78</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage79</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage80</column></row><table>*-11是試驗(yàn)進(jìn)行的次數(shù)。Ex.H1:使用方法D形成l'-(lH-吲唑-7-基羰基)-6，7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮。具體地，向1dram小瓶中添加260的溶解在1M三乙胺的CH2Cl2溶液中的6，7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮的0.25M溶液。向其中添加260/xL的1H-吲唑-7-羧酸在CH2C12中的0.25M溶液。將混合物進(jìn)行旋渦攪拌，然后向其中添加260/zL的HATU在CH2Cl2中的溶液。使小瓶呈旋渦，然后在室溫下?lián)u動(dòng)16小時(shí)。將粗制反應(yīng)混合物通過液相色譜純化，從而得到標(biāo)題產(chǎn)物。Ex.H2:7-氯-1'-(111-吲唑-7-基羰基)-6-甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮。Ex.H3:6-溴-r-(m-吲唑-7-基羰基)-7-甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4,-酮。Ex.H4:r-(lH』引唑-7-基羰基)-5-甲氧基-7-甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮。Ex.H5:6-氯-r-(lH』引唑-7-基羰基)-7-甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4卿-酮。Ex.H6:5-氟-r-(lH-吲唑-7-基羰基)-6-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4卿-酮。Ex.H7:1'-(1&吲唑-7-基羰基)-6-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4卿-酮。Ex.H8:6-氯-l'-(lH-吲唑-7-基羰基)-5，7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮。Ex.H9:r-(lH-吲唑-7-基羰基)-6-甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮。Ex.H10:1'-(111-吲唑-7-基羰基)-6-異丙基螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮。Ex.Hll:l'-(lH』引唑-7-基羰基)-5,6,7-三甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮。Ex.H12:1'-(111-卩引唑-7-基羰基)-7-甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-4卿-酮。Ex.H13:使用方法E形成l'-(lH-吲唑-7-基羰基)-6,8-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮。向96深孔板中的2.2mL孔中添加1H-吲唑-7-羧酸溶液(0.5mL的0.5MDMF溶液)、6,8-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮溶液(0.5mL的0.5MDMF溶液)和HATU溶液(0.5mL的0.5MDMF溶液)。向其中添加三乙胺(3當(dāng)量)。將板密封并攪動(dòng)16小時(shí)。通過在減壓下離心蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物溶于CH2Cb(lmL)中，然后依次用K2C03(2x0.7mL的0.5M溶液)和水(0.7mL)洗滌，然后轉(zhuǎn)移到收集板中。將最終的水性廢液用CH2C12(0.5mL)再次萃取，并與首次012(:12萃取物合并，然后蒸發(fā)至干燥。MS(ACPI)w々390.(M+H)+,HPLCRT3.4分鐘。Ex.H14:6-氯-1'-(111-吲唑-7-基羰基)螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3印-酮。Ex.H15:5，7-二氯-r-(lH-吲唑-7-基羰基)螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)誦酮。Ex.H16:r-(lH-吲唑-7-基羰基)-5-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮。Ex.H17:6-氯-l'-(lH-吲唑-7-基羰基)-5-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮。Ex.H18:1'-(111-吲唑-7-基羰基)-7-苯基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮。Ex.H19:7-氟-r-(lH-吲唑-7-基羰基)螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮。Ex.H20:1'-(111-吲唑-7-基羰基)-5-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮,&NMR(CDC13)S8.11(s，1H)，7.85(d,J=7.9,1H),7.37-7.42(m,2H)，7.14-7.18(m，1H),6.61(d，J=8.3，1H),6.52(d,J=8.3,1H)，3.90(s，3H),2.72(s，2H)。Ex.H21:r-(lH-吲唑-7-基羰基)-7-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮。Ex.H22:6,8-二氯-l'-(lH-B引唑-7-基羰基)螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶〗-4(3H)-酮。Ex.H23:l'-[(lH-吲哇-7-基)羰基]-6-氯-7-甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮。Ex.H24:r-[(lH』引唑-7-基)羰基]-6-氯-7-甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮。實(shí)施例Jl-J382<formula>formulaseeoriginaldocumentpage83</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage84</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage85</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage86</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage87</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage88</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage89</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage90</formula>Ex.L10:l'-[(3-氯-lH-吲哚-5-基)羰基]-5-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z425(M+H)+,HPLCRT1.54。Ex.Lll:r-[(2,3-二甲基-lH-吲哚-5-基)羰基]-5-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z419(M+H)+,HPLCRT1.68。Ex.L12:6-氯-r-[(2,3-二甲基-lH-吲哚-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z423(M+H)+,HPLCRT1.88。Ex.L13:6,7-二甲基-l'-[(2-氧代-2,3-二氫-lH-吲哚-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m々405(M+H)+,HPLCRT1.45。Ex.L14:r-(lH-吲哚-4-基羰基)-6,7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮三氟乙酸鹽，MS(ACPI)m/z389(M+H)+,HPLCRT1.7771分鐘。Ex.L15:6,7-二甲基-1'-[(1-甲基-111-吲哚-4-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)w/z403(M+H)+,HPLCRT1.88分鐘。Ex.L16:5-甲氧基-r-(2,3,4,9-四氫-lH-咔唑-6-基羰基)螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z445(M+H)+,HPLCRT1.7。.Ex.L17:l'-(lH-苯并咪唑-4-基羰基)-6，7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮三氟乙酸鹽,MS(ACPI)m/z390(M+H)+,HPLCRT1.24分鐘。Ex.L18:l'-(lH-苯并咪唑-4-基羰基)-6-氯-7-甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z410(M+H)+，HPLCRT2.2分鐘，&NMR(DMSO-d6)S8.61(s,1H),7.72(d,J=8.3,1H),7.64(s,1H),7.34(t,J=7.8,1H)，7.29(d，J=7.3，1H)，7.16(s，1H)，2.86(s,2H),2.35(s，3H)。Ex.L19:6,7-二甲基-l'-[(2-甲基-lH-苯并咪唑-4-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮三氟乙酸鹽，MS(ACPI)w/z404(M+H)+，HPLCRT1.28分鐘。Ex.L20:1'-{[2-(羥甲基)-111-苯并咪唑-6-基]羰基}-6,7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮三氟乙酸鹽，MS(ACPI)m/z420(M+H)+,HPLCRT1.17分鐘。Ex.L21:l'-[(l-異丙基-lH-苯并咪唑-4-基)羰基]-6,7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮三氟乙酸鹽，MS(ACPI)w/z432(M+H)+,HPLCRT1.38分鐘。Ex.L22:l'-(lH-苯并咪唑-5-基羰基)-6,7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮三氟乙酸鹽，MS(ACPI)m/z390(M+H)+,HPLCRTU7分鐘。Ex.L23:6,7-二甲基-l'-[(l-甲基-lH-苯并咪唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮三氟乙酸鹽，MS(ACPI)m/z404(M+H)+,HPLCRT1.21分鐘。Ex.L24:6,7-二甲基-l'-[(2-甲基-lH-苯并咪唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮三氟乙酸鹽，MS(ACPI)m/z404(M+H)+，HPLCRT1.18分鐘。Ex.LA6，7-二甲基-1'-{[2-(三氟甲基)-111-苯并咪唑-5-基]羰基}螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮三氟乙酸鹽，MS(ACPI)m/z458(M+H)+,HPLCRT1.68分鐘。Ex.L26:6,7-二甲基-l'-[(2-吡啶-2-基-lH-苯并咪唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮三氟乙酸鹽，MS(ACPI)m/z467(M+H)+,HPLCRT1.47分鐘。Ex.L27:l'-[(4-氯-7-甲氧基-2-甲基-lH-苯并咪唑-6-基)羰基]-6,7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z474(M+H)+,HPLCRT1.45分鐘。Ex.L28:l'-[(l,2-二甲基-lH-苯并咪唑-5-基)羰基]-6,7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z344,HPLCRT1.21分鐘。Ex.L29:6,7-二甲基-r-[(l-甲基-2-吡咯烷-l-基-lH-苯并咪唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z473(M+H)+，HPLCRT1.33分鐘。Ex.L30:l'-([2-乙基-l-(3-甲氧基苯基)-lH-苯并咪唑-5-基]羰基〉螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)w/z496(M+H)+,HPLCRT2.4分鐘。Ex.L31:1'-{[2-乙基-1-(3-甲氧基苯基)-lH-苯并咪挫-5-基]羰基》-5-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z526(M+H)+，HPLCRT2.1分鐘。Ex.L32:6,7-二甲基-l'-[(l-甲基-2-氧代-2，3-二氫-lH-苯并咪唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z420(M+H)+，HPLCRT1.46分鐘。Ex.L33:l'-(lH-苯并咪唑-6-基羰基)-6，7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)w/z390(M+H)+,HPLCRT1.16。Ex.L34:1'-(111-苯并咪唑-5-基羰基)-6-氯螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z396(M+H)+，HPLCRT1.13。Ex.L35:5-甲氧基-1'-[(2-苯基-111-苯并咪唑-6-基)-羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z468(M+H)+，HPLCRT1.12。Ex.L36:6,7-二甲基-l'-[(2-吡啶-4-基-lH-苯并咪唑-6-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮三氟乙酸鹽，MS(ACPI)m/z467(M+H)+,HPLCRT1.30分鐘。Ex.L37:l'-(m-l，2，3-苯并三唑-5-基羰基)-6，7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，陽哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z391(M+H)+,HPLCRT1.57分鐘。Ex.L38:1'-(lH-l，2,3-苯并三唑-5-基羰基)-6-氯螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m々397(M+H)+,HPLCRT1.47分鐘。Ex.L39:l'-(m-l,2，3-苯并三唑-5-基羰基)-6,7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮三氟乙酸鹽，MS(ACPI)m/z391(M+H)+,HPLCRT1.46分鐘。Ex.L40:r-(m-l,2,3-苯并三唑-5-基羰基)-6-氯-7-甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮，1HNMR(DMSO-d6)58.11(s，1H),7.83(s,1H),7.64(s,1H),7.16(s,1H),2.87(s,2H),2.35(s，3H);MS(ACPI)m/z411(M+H)+,HPLCRT2.4分鐘。Ex.L41:6,7-二甲基-l'-[(l-甲基-lH-l，2,3-苯并三唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z405(M+H)+,HPLCRT1.53分鐘。Ex.L42:6-氯-l'-[(l-異丙基-lH-l,2，3-苯并三唑-5-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z439(M+H)+,HPLCRT1.72分鐘。93Ex.L43:6,7-二甲基-1'-(喹啉-6-基羰基)螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮三氟乙酸鹽，MS(ACPI)m/z401(M+H)+,HPLCRT1.38分鐘。Ex.L44:6,7-二甲基-l'-[(2-氧代-l,2,3,4-四氫喹啉-6-基)羰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m々419(M+H)+,HPLC1.49分鐘。Ex.L45:6,7-二甲基-1'-(喹喔啉-6-基羰基)螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z402(M+H)+,HPLC1.53分鐘。Ex.L46:l'-(l,3-苯并噁唑-5-基羰基)-6-氯-7-甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z(M+H)+411.&NMR(CDC13)<58.74(s,1H),8.26(s,1H),7.84(s,1H),7.70(s,1H)，6.99-7.01(m,1H),6.94(s,1H),6.79-6.81(d,1H),2.74(s,2H)，2.41(s,3H)。實(shí)施例M1-M36.0<table>tableseeoriginaldocumentpage94</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage95</column></row><table>Ex.Ml:5-甲氧基-7-甲基-l'-[3-(lH-吡唑-3-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z432(M+H)+，HPLCRT2.1分鐘。Ex.M2:6,7-二甲基-l'-[3-(lH-吡唑-3-基)苯甲酰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z416(M+H)+,HPLCRT2.5分鐘。Ex.M3:6-氯-7-甲基-1'-[3-(111-吡唑-3-基)苯甲酰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z436(M+H)+,HPLCRT2.58分鐘。Ex.M4:N-甲基-4-氧代-r-[3-(lH-吡唑-3-基)苯甲酰基]-3,4-二氫[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-6-碳酰胺，MS(ACPI)m/z445(M+H)+,HPLCRT1.7分鐘。Ex.M5:4-氧代-1'-[3-(111-吡唑-3-基)苯甲?；鵠-3,4-二氫[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-6-碳酰胺，MS(ACPI)m/z431(M+H)+,HPLCRT1.6分鐘。Ex.M6:6-甲氧基-l'-[3-(lH-吡唑-3-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z418(M+H)+,HPLCRT2.2分鐘。Ex.M7:7-氯-6-甲基-1'-[3-(lH-吡唑-3-基)苯甲酰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z436(M+H)+,HPLCRT2.59分鐘。Ex.M8:6,7-二氯-l'-[3-(lH-吡唑-3-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z456(M+H)+,HPLCRT2.6分鐘，^NMR(CDC13)57.95(s，IH),7.87(s，IH)，7.85(s，IH)，7.69(d,J=2.6，IH),7.49(t，J=7.8,IH),7.38(d,J=7.8,IH)，7.21(s，IH),6.68(d,J=2.6,IH)，2.77(s,2H)。Ex.M9:l'-[3-(lH-吡唑-3-基)苯甲?；鵠-6-(吡咯烷-l-基羰基)螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)w/z485(M+H)+,HPLCRT1.9分鐘。Ex.M10:6-溴-7-甲基-1'-[3-(111-吡唑-3-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌咬]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z480(M+H)+,HPLCRT2.6分鐘。Ex.Mil:4-氧代-l'-[3-(lH-吡唑-3-基)苯甲?；鵠-3,4-二氫[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-6-羧酸甲酉旨，MS(ACPI)m/z446(M+H)+，HPLCRT2.3分鐘。Ex.M12:7-甲基-l'-[3-(lH-吡唑-3-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z402(M+H)+，HPLCRT2.4分鐘。Ex.M13:r-[3-(lH-吡唑-3-基)苯甲酰基]-6-(三氟甲氧基)螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌徒]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z472(M+H)+,HPLCRT2.6分鐘，'HNMR(CDC13)S8.03(s,IH)，7.92(s,IH),7.89(d，J=7.8,IH)，7.80(m,IH),7.73-7.74(m,1H),7.49-7.55(m，1H)，7.43-7.44(m，1H),7.38-7.39(m，1H),7.07(d,J=9.4,1H),6.72(brs，1H)，2.81(s,2H)。Ex.M14:5-氟-6-甲氧基-r-[3-(lH-吡唑-3-基)苯甲酰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z436.(M+H)+,HPLCRT2.2分鐘。Ex.M15:7-氯-1'-[3-(111-吡唑-3-基)苯甲酰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z422(M+H)+，HPLCRT2.5分鐘，^NMR(CDC13)S7.84-7.85(m，3H),7.82(d,J=8.8，1H),7.50(t,J=7.8,1H)，7.41(d,J=7.8，1H)，7.01-7.08(m,2H)，6.70(s，1H),2.80(s,2H)。Ex.M16:5,7-二氯-1'-[3-(m-吡唑-3-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)w/z456(M+H)+,HPLCRT[2.6]分鐘。Ex.M17:N-異丙基-4-氧代-l'-[3-(lH-吡唑-3-基)苯甲?；鵠-3,4-二氫[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-6-碳酰胺，MS(ACPI)w/z473(M+H)+,HPLCRT2.0分鐘。Ex.M18:6-氯-5-甲氧基-r-[3-(lH-吡唑-3-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)w/z452.(M+H)+,HPLCRT2.3分鐘。Ex.M19:1'-[3-(1&吡唑-3-基)苯甲?；鵠-6-(三氟甲基)螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z456(M+H)+,HPLCRT2.6分鐘，！H麗R(CDC13)58.18(d，J=2.0,1H),7.85-7.87(m，2H),7.75-7.77(m,1H),7.65-7.66(m,1H),7.47-7.50(m,1H),7.37-7.39(m,1H),7.15(d，J=8.3,1H),6.66(d，J=2.6,1H)，2.82(s,2H)。Ex:M20:6-(甲磺酰基)-l'-[3-(lH-吡哇-3-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)w/z456(M+H)+,HPLCRT1.7分鐘，NMR(CD3OD)S8.37(d,J=2.1，1H)，8.10(dd,J=2.6,8.8,1H),7.88(brs,2H),7.73(brs，1H)，7.53(brs,1H),7.34(d,J=8.8,1H),6.75(s，1H),5.51(s,1H)，3.32(s,3H),3.13(s,2H)。Ex.M21:5，6,7-三甲氧基-1'-[3-(111-吡唑-3-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z478(M+H)+，HPLCRT2.1分鐘。ExM22:6-氯-5,7-二甲基-l'-[3-(lH-吡唑-3-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z450(M+H)+,HPLCRT2.85分鐘。Ex.M23:6-甲基-l'-[3-(lH-吡唑-3-基)苯甲酰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z402(M+H)+，HPLCRT[2.4]分鐘。Ex.M24:6-氯-7-氟-1'-[3-(111-吡唑-3-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)w/z440(M+H)+,HPLCRT2.6分鐘，！HNMR(CDC13)57.94-7.97(m,1H),7.84-7.85(m，2H),7.69(d,J=2.1，1H),7.50(t,J=7.8,1H)，7.40(d,J=7.2，1H),6.84(d,J=9.3,IH)，6.69(d,J=2.1,IH),2.77(s,2H)。Ex,M25:7-甲氧基-1'-[3-(111-吡唑-3-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z418.(M+H)+，HPLCRT2.25分鐘。Ex.M26:5-甲氧基-l'-[3-(lH-吡唑-3-基)苯甲酰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z430(M+H)+,HPLCRT2.6分鐘。Ex.M27:5-甲氧基-1'-[3-(111-吡唑-3-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z418(M+H)+，HPLCRT2.0分鐘。Ex.M28:r-(lH』引唑-7-基羰基)-6-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)413(M+H)+,HPLCRT2.3分鐘，巾NMR(CDC13)S7.97(d,J=7.8,IH),7.94(m,IH)，7.89(d,J=7.7，IH),7.81(d,J=2.6,IH),7.53(t,J=7.8，IH)，7.44(d,J=7.8,IH)，7.38(s，IH),7.30(d,J=6.7,IH),6.72(d，J=2.0，1H),2.86(s，2H)。Ex.M29:N,N-二甲基-4-氧代-r-[3-(lH-吡唑-3-基)苯甲?；鵠-3,4-二氫[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-6-碳酰胺，MS(ACPI)m/z459(M+H)+,HPLCRT1.9分鐘。Ex.M30:6-氯-r-[3-(lH-吡唑-3-基)苯甲酰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z422.(M+H)+,HPLCRT2.4分鐘。Ex.M31:6,7-二甲氧基-1'-[3-(111-吡唑-3-基)苯甲酰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z448(M+H)+，HPLCRT2.3分鐘Ex.M32:6-(嗎啉-4-基羰基)-l'-[3-(lH-吡唑-3-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z501(M+H)+,HPLCRT1.9分鐘。Ex.M33:4-氧代-l'-[3-(lH-吡唑-3-基)苯甲酰基]-3,4-二氫[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-6-甲月青，MS(ACPI)m/z413(M+H)+，HPLCRT2.2分鐘，^NMR(CDC13)S8.21(d,J-2.1,1H),7.90(s,1H),7.87(d,J=7.8,1H),7.76(dd,J=8.3,2.0,1H),7.72(d，J=2.6,IH)，7.50(t，J=7.7,IH)，7.40(d，J=7.3，1H),7.15(d,J=8.3,IH)，6.69(d，J=2.0，IH)，2.84(s，2H)。Ex.M34:7-氟-1'-[3-(111-吡唑-3-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z406(M+H)+，HPLCRT2.25分鐘。Ex.M35:6,8-二氯-l'-[3-(lH-吡唑-3-基)苯甲酰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z456.(M+H)+,HPLCRT2.6分鐘。Ex.M36:7-氯-6-氟-r-[3-(lH-吡唑-3-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)w/z440(M+H)+，HPLCRT2.5分鐘，1HNMR(CDC13)<57.86-7.88(m,2H)，7.70(d，J=2.1,1H),7.62(d，J=8.3，1H),7.49(t，J=7.8,IH)，7.39(d，J=7.8，IH)，7.14(d,J=5.7,1H),2.77(s,2H)。實(shí)施例N1-N3Ex.甲R(shí)1R2R3R4ACC1ACC1ACC2ACC2MS(ACPI)HPLC基ic50n承ic50n*w/zRT(nM)(nM)(M+H)+(mirONlCHC(O)OHHH89114321.9N2BH0CH2CH3HH43.2191.714322.5N3BHOCH(CH3)2HH48.3154.814462.6*-11是試驗(yàn)進(jìn)行的次數(shù)。Ex.Nl:4-氧代-l'-[3-(lH-吡唑-3-基)苯甲?；鵠-3，4-二氫[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-6-羧酸三氟乙酸鹽。Ex.N2:6-乙氧基-l'-[3-(lH-吡唑-3-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶〗-4(3H)-酮，^NMR(CDC13)57.87(s,1H),7.85(s,1H)，7.67-7.68(d,1H),997.46-7.49(m,1H),7.37-7.39(d,1H),7.30(m，1H),7.12-7.14(dd,1H),6.94-6.96(d,1H)，6.66-6.67(d,1H),4.01-4.05(q,2H),2.74-2.75(m,2H),1.40-1.43(t,3H)。Ex.N3:6-異丙氧基-1'-[3-(111-吡唑-3-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2,4'-哌啶]-4(3H)-酮，&NMR(CDC13)57.87(s，1H),7.85(s,1H),7.67(m,1H),7.46-7.49(m,1H),7.37-7.39(m，1H),7.31-7.32(d，1H),7.09-7.11(dd,1H),6.93-6.95(d,1H)，6.66-6.67(m,1H),4.49-4.55(q，1H),2.74-2.75(m,2H),1.32-1.33(d,6H)。實(shí)施例01-04<formula>formulaseeoriginaldocumentpage100</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage100</column></row><table>、n是試驗(yàn)進(jìn)行的次數(shù)Ex.01:r-[3-(m-吡唑-5-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮。Ex.02:5-氯-7-甲氧基-1'-[3-(111-吡唑-5-基)苯甲酰基]螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮，&NMR(CDC13)S7.87(s,1H),7.84-7.85(d,1H),7.63-7.64(d,1H),7.44-7.47(m,1H),7.34-7.36(m,1H),6.66-6.67(d,IH)，6.63-6.64(d,IH)，6.53(m,1H),3.91(s,3H),2.71-2.72(m,2H)。Ex.03:7-氯-5-甲氧基-r-[3-(lH-吡唑-5-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]國4(3H)國酮，^NMR(CDC13)S7.88(s，1H)，7.84-7.85(d,1H),7.63-7.64(m,1H),7.44-7.48(m,1H)，7.35-7.36(m,1H),6.63(m,2H),6.42-6.43(m,1H)，3.85(s，3H)，2.72-2.73(m,1H)。Ex.04:7-甲氧基-5-甲基-r-[3-(lH-吡唑-5-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2,4,-哌啶]-4(3H)-酮，力NMR(CDC13)S7.84-7.87(m,2H),7.64-7.65(d,1H),7.45-7.48(m，1H),7.36-7.38(d,1H),6.65(d，1H)，6.35-6.37(d,1H),3.84(s,2H),2.69-2.70(m,1H),2.61(s,3H)。實(shí)施例P1-P150<table>tableseeoriginaldocumentpage101</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage102</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage103</column></row><table>、n是試驗(yàn)進(jìn)行的次數(shù)。Ex.PI:采用方法F，如下制備6,7-二甲基-l'-p-[5-(三氟甲基)-m-吡唑-3-基]苯甲酰基〉螺環(huán)[苯并吡喃-2，4'-哌啶]-4(3H)-酮。向燒瓶中添加3-[5-(三氟甲基)-lH-吡唑-3-基]苯甲酸(84.5mg,0.33mmol)和亞硫酰氯(357mg,3.0rnrno1)，然后將混合物加熱至60°C，耗時(shí)1小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮，并與甲苯共沸(3X)，然后將殘余物在減壓下干燥。將6,7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮(73.6mg，0.3mmol)溶于CH2C12(1mL)和DIEA(85mg，0.12mL，0.66mmol)中。將該溶液加入酰氯在CH2C12中的溶液(加至最終濃度為1M)。將所得混合物在室溫下攪拌過夜。將采用用液相色譜(BiotageFlash40,98:2CH2Cl2/MeOH^^A，從而得到標(biāo)題化合物(96mg,70%)。MS(ACPI)m/z484(M+H)+，HPLCRT2.9分鐘，NMR(CDC13)57.69(s,1H),7.59(s,1H),7.54(d,J=7.4,1H),7.35-7.39(m.,1H),7.29-7.31(m,IH),，6.78(s,1H)，6.70(s,1H),2.68(s，2H),2.26(s,3H),2.20(s，3H)。Ex.P2:6-氯-7-甲基-r-P-[5-(三氟甲基)-lH-吡唑-3-基]苯甲?；德莪h(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮三氟乙酸鹽，MS(ACPI)m/z504(M+H)+，HPLCRT3.0分鐘。Ex.P3:l'-[2-氯-5-(l-甲基-lH-吡唑-3-基)苯甲酰基]-6,7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z464(M+H)+,HPLCRT1.88分鐘。Ex.P4:1'-[2-氟-5-(lH-吡唑-3-基)苯甲酰基]-6，7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮三氟乙酸鹽，MS(ACPI)m/z434(M+H)+,HPLCRT1.71分鐘。Ex.P5:r-[2-氯-5-(lH-吡唑-3-基)苯甲酰基]-6,7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮三氟乙酸鹽，MS(ACPI)m/z450(M+H)+，HPLCRT1.76分鐘。Ex.P6:l'-[2-羥基-5-(lH-吡唑-3-基)苯甲酰基]-6,7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮三氟乙酸鹽，MS(ACPI)/w/z432(M+H)+，HPLCRT1.48分鐘。Ex.P7:r-[2-乙氧基-5-(lH-吡唑-3-基)苯甲?；鵠-6，7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酉同三氟乙酸鹽，MS(ACPI)m/z460(M+H)+,HPLCRT1.73分鐘。Ex.P8:l'-[2-乙氧基-5-(lH-吡唑-3-基)苯甲?；鵠-6,7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酉同，MS(ACPI)m/z460(M+H)+,HPLCRT2.6分鐘。Ex.P9:6-氯-l'-[2-乙氧基-5-(lH-吡唑-3-基)苯甲酰基]-7-甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)w/z480(M+H)+，HPLCRT2.8分鐘。Ex.P10:l'-[2-氯-5-(l-甲基-lH-吡唑-5-基)苯甲酰基]-6,7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z464(M+H)+,HPLCRT1.83分鐘。Ex.Pll:6,7-二甲基-1'-[3-(111-吡唑-1-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z416(M+H)+,HPLCRT1.78分鐘。Ex.P12:r-[3-(lH-咪唑-2-基)苯甲酰基]-6，7-二甲基螺環(huán)[苯并吡喃-2，4，-哌咬]-4(3H)-酮三氟乙酸鹽，MS(ACPI)w/z416(M+H)+416,HPLCRT1.26。Ex.P13:6,7-二甲基-1'-[3-(嘧啶-4-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z428(M+H)+,HPLCRT1.64分鐘。Ex.P14:6,7-二甲基-1'-[3-(5-甲基-1，2，4-噁二唑-3-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z432(M+H)+,HPLCRT1.82分鐘。Ex.P15:6,7-二甲基-1'-[3-(5-乙基-1，2,4-噁二唑-3-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2,4，-哌啶]-4(3H)-酮，MS(ACPI)m/z446(M+H)+,HPLCRT1.95分鐘。生物試驗(yàn)式(1)化合物以及所述化合物的藥學(xué)上可接受鹽在治療動(dòng)物(特別是哺乳動(dòng)物，例如人類)中各類疾病(諸如本文詳細(xì)描述的疾病)中的效用可以在相關(guān)領(lǐng)域普通技術(shù)人員所熟知的常規(guī)試驗(yàn)(包括下述體外試驗(yàn)和體內(nèi)試驗(yàn))中通過其活性來表明。這些試驗(yàn)還提供了一種手段，從而可以將式(1)化合物的活性與其它己知化合物的活性進(jìn)行比較。當(dāng)然以下方案可由本領(lǐng)域技術(shù)人員進(jìn)行調(diào)整。直接抑制ACC1和ACC2的活性通過具有標(biāo)準(zhǔn)程序的方法表明本發(fā)明式(1)化合物以及這種化合物的鹽對(duì)ACC的抑制活性。例如，采用得自大鼠肝臟的ACC1和得自大鼠骨骼肌的ACC2的制劑來確定式(1)化合物對(duì)ACC1和ACC2活性的直接抑制作用。制備ACC1禾QACC2。根據(jù)諸如Thampy禾QWakil(J.Biol.Chem.260:6318-6323;1985)所描述的那些標(biāo)準(zhǔn)程序，采用如下方法由大鼠肝臟得到ACC1，由大鼠骨骼肌得到ACC2。使重150-200g的雄性CD大鼠禁食2天，然后喂養(yǎng)高蔗糖飼料(AIN-10576A嚙齒動(dòng)物飼料Cat#D10001,ResearchDietsInc.，NewBrunswick,N丄)3天，此后用C02使其窒息死亡。取出肝臟組織(為了ACC1制劑)或骨骼肌組織(為了ACC2制劑)，然后用冰冷的磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)對(duì)其進(jìn)行沖洗，并在4X:下，將其在5體積的勻化緩沖液(50mM磷酸鈉，pH7.5，10mMEDTA，10mM2-巰基乙醇，2mM節(jié)脒，0.2mM苯基甲磺酰氟(PMSF)，5mg/L各種抑酶肽(leupeptin、aprotinin和antitrypsin))中，在Waring⑧共混機(jī)中勻化1分鐘。所有隨后的操作在4t:下實(shí)施。通過添加50。/。的聚乙二醇(PEG)溶液制成相對(duì)于PEG為3%的勻槳，然后將其在20,000xg下離心15分鐘。通過添加50。/。PEG溶液，將所得上層清液調(diào)節(jié)至5。/oPEG，然后將其攪拌5分鐘。通過在20,000xg下離心20分鐘收集小球(含有ACC活性)，然后將其用冰冷的二次蒸餾水進(jìn)行沖洗從而除去過量PEG，接著用勻化緩沖液使其再懸浮成初始勻槳體積的1/4。攪拌的同時(shí)緩緩添加硫酸銨(200g/升)。45分鐘后，通過在20,000xg下離心30分鐘收集酶，然后將其再懸浮于10ml的50mMHEPES，pH7.5，O.lmMDTT，1.0mMEDTA和10%丙三醇中，接著在被同種緩沖液平衡的SephadexTMG-25柱(2.5cmx50cm)(Pharmacia,PiscatawayNewJerseynowGEHealthcare)[有13種不同的G25柱，使用哪一種？]上脫鹽。將脫鹽的酶制劑以等分試樣形式儲(chǔ)存在-7(TC下。使用之前，將冷凍的ACC1或ACC2等分試樣解凍，并在含有50mMHEPES，pH7.5、10mMMgCl2、10mM檸檬酸三鉀、2.0mM二硫蘇糖醇(DTT)和0.75mg/ml無脂肪酸牛血清白蛋白(BSA)的緩沖液中稀釋至500/ig/ml，然后在37'C下預(yù)培養(yǎng)30分鐘。測定ACC抑制作用。用于測定ACC1抑制作用和ACC2抑制作用的過程是相同的，不同之處在于同工酶的來源不同。為了測定ACC活性并評(píng)估ACC抑制作用，將測試化合物溶于二甲基亞砜(DMSO)中，然后將1^L等分試樣置于0.5ml聚丙烯試管中。對(duì)照試管僅含有1的DMSO。將各試管在37。C的恒溫水浴中進(jìn)行培養(yǎng)。向所有試驗(yàn)試管中添加139的含有50mMHEPES，pH7.5、2.0mMMgCl2、2.0mM擰檬酸三鉀、2mMDTT、0.75mg/mlBSA、25/iM乙?；?CoA、4.0mMATP和12.5mMKH[14C]03(2x106cpm)的底物緩沖液。然后，通過添加10^L如上所述制備的預(yù)培養(yǎng)ACC片段來引發(fā)反應(yīng)。7分鐘后，通過添加50AtL的6NHC1終止反應(yīng)，然后將150AiL的反應(yīng)混合物等分試樣轉(zhuǎn)移到玻璃閃爍瓶中，并在9(TC下蒸發(fā)至少1小時(shí)，從而蒸發(fā)至干燥。然后將干燥的小瓶冷卻，并添加0.5ml的水和5.5ml的ReadySafe液態(tài)閃爍液(BeckmanCoulterInc.,Fullerton,CA)，接著采用液體閃爍計(jì)數(shù)儀測定放射性。在接收ACC之前接受HCl的試管作為空白。對(duì)ACC1禾卩ACC2抑制作用的特異性?；衔飳?duì)抑制ACC1和ACC2的特異性可以通過如下測定對(duì)抑制ACC1等分試樣中所含50%活性需要的測試化合物的濃度與抑制ACC2等分試樣的50%活性需要同種化合物的濃度進(jìn)行比較。測定在培養(yǎng)細(xì)胞中的ACC抑制作用通過基于標(biāo)準(zhǔn)程序的方法來證實(shí)本發(fā)明的化合物以及這種化合物的鹽在被培養(yǎng)的人細(xì)胞中的ACC抑制活性。例如，因?yàn)锳CC促進(jìn)脂肪酸生物合成中的首要關(guān)鍵步驟，所以某些式(1)化合物的體內(nèi)活性通過如下證實(shí)測量化合物以及這種化合物的鹽防止經(jīng)輻射標(biāo)記的乙酸酯在被培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物肝細(xì)胞中或在被培養(yǎng)的人肝細(xì)胞瘤的Hep-G2細(xì)胞系(ATCCHB8065)中形成經(jīng)輻射標(biāo)記的脂肪酸的能力。還可以直接評(píng)估在由組織(合成脂肪酸的組織(例如肝臟組織和脂肪組織)或不合成脂肪酸的組織(例如骨骼肌))中分離出的細(xì)胞中的丙二酰-CoA生成，從而確定在由這些組織中分離出的細(xì)胞中的ACC抑制作用。測定對(duì)被培養(yǎng)細(xì)胞中脂肪酸合成的抑制作用。通過如下評(píng)價(jià)在被培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物肝細(xì)胞中或在被培養(yǎng)的人肝細(xì)胞瘤的Hep-G2細(xì)胞系中的脂肪酸合成根據(jù)先前所述用于評(píng)估甾醇合成的方法(Harwood等人的Biochem.Pharmacol.53:839-864,1997;Petras等人的J.LipidRes.40:24-38,1999)將[2-"C]乙酸酯插入可皂化脂質(zhì)中，其中進(jìn)行如下修正從而允許評(píng)估脂肪酸的合成。例如，使Hep-G2細(xì)胞在T-75燒瓶中生長，然后如先前所述(Harwood等人的Biochem.Pharmacol.53:839-864,1997;Petras等人的,1999)通過胰蛋白酶處理進(jìn)行釋放，接著將所得Hep-G2細(xì)胞以1.2xl()S細(xì)胞/孔的密度播種到24孔板中，并使其在37°C、5%C02培養(yǎng)皿中在1.0mL的SupplementedDulbecco最低必需培養(yǎng)基(DMEM培養(yǎng)基，含有10%加熱失活的胎牛血清、2mML-谷氨酸鹽和40./xg/mL慶大霉素)中保持7天，其中培養(yǎng)基在第3天和第5天發(fā)生變化。此刻，培養(yǎng)物達(dá)到80-90%融合，并且細(xì)胞的生存能力>90%(臺(tái)盼藍(lán)染色排除法)。第8天，取出培養(yǎng)基，更換為含有1%DMSO土測試化合物的新培養(yǎng)基?；衔锏奶砑油瓿珊螅⒓磳?5/xL含有4^Ci的[2-"C]乙酸酯(56mCi/mmol)的培養(yǎng)基加入各個(gè)培養(yǎng)孔中。然后用Parafilm密封以避免蒸發(fā)，接著在緩緩搖動(dòng)下將細(xì)胞在37'C培養(yǎng)6小時(shí)。培養(yǎng)后，樣品通過如下皂化首先向每個(gè)孔中添加1ml的5NKOH在MeOH中的溶液，然后在70。C下培養(yǎng)2小時(shí)，接著在室溫下培養(yǎng)過夜。將混合物轉(zhuǎn)移到玻璃錐管中，然后用4.5ml己烷萃取三次，從而除去不可皂化脂質(zhì)(例如膽固醇、后角鯊烯膽固醇前驅(qū)體(post-squalenecholesterolprecursors)和其它不可皂化脂質(zhì))。通過添加0.5ml的12MHC1將剩余水相(含有脂肪酸鈉鹽)酸化至pH<2。將所得混合物轉(zhuǎn)移到玻璃錐管中，然后用4.5ml的己烷萃取三次。將合并的有機(jī)級(jí)分(含有質(zhì)子化的脂肪酸)在氮?dú)庀赂稍?，然后再懸浮?0^L的氯仿甲醇l:l(v/v)中，接著涂敷于SilicaGel60CTLC板的lx20cm通道上。所選定的TLC板上包括含有非放射性脂肪酸的通道作為分離標(biāo)記。將TLC板在己垸二乙醚乙酸(70:30:2)中進(jìn)行沖洗，空氣干燥，然后通過使用BertholdLinear放射性分析儀(Berthold,Ga池ersburg，Md.,USA)進(jìn)行分析使放射性脂肪酸顯現(xiàn)，其中所述放射性分析儀報(bào)道放射峰的位置和積分峰面積。測試化合物對(duì)脂肪酸合成的抑制作用表示為在37。C、6小時(shí)培養(yǎng)期間，摻入可皂化脂質(zhì)中的dpm[2-"C]乙酸酯減少50%所需的濃度。測定在培養(yǎng)細(xì)胞中對(duì)丙二酰-CoA生成的抑制作用。還可以根據(jù)先前所述方法(McGarryetal.J.Biol.Chem.253:8291-8293,1978)，通過如下對(duì)丙二酰-CoA在組織(合成脂肪酸的組織(例如肝臟組織和脂肪組織)或不合成脂肪酸的組織(例如骨骼肌))中的生成進(jìn)行直接評(píng)估丙二酰-108CoA在純脂肪酸合成酶和輻射標(biāo)記乙酸酯的存在下化學(xué)計(jì)量轉(zhuǎn)化成經(jīng)輻射標(biāo)記棕櫚酸酯，從而確定在這些組織中的ACC抑制作用。以下概述了涉及全組織的過程，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以將其容易地調(diào)整為適用培養(yǎng)細(xì)胞。急性體內(nèi)評(píng)估對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物的ACC抑制作用可以通過如下證實(shí)本發(fā)明的化合物以及這種化合物的鹽的體內(nèi)ACC抑制活性通過基于標(biāo)準(zhǔn)過程的方法來評(píng)價(jià)所述化合物以及所述化合物的鹽抑制肝臟脂肪酸生成以及刺激全體脂肪酸氧化的能力。例如，因?yàn)锳CC催化脂肪酸生物合成中的首要關(guān)鍵步驟，所以這些化合物的體內(nèi)活性可以通過如下證實(shí)測量本發(fā)明的化合物以及這種化合物的鹽防止經(jīng)輻射標(biāo)記的乙酸酯在被治療哺乳動(dòng)物的肝臟中形成經(jīng)輻射標(biāo)記的脂肪酸的能力。還可以直接評(píng)估經(jīng)輻射標(biāo)記的乙酸酯在組織(合成脂肪酸的組織(例如肝臟組織和脂肪組織)或不合成脂肪酸的組織(例如骨骼肌))中生成經(jīng)輻射標(biāo)記的丙二酰-CoA，從而確定在這些組織中的ACC抑制作用。因?yàn)橛葾CC抑制作用造成的丙二酰-CoA水平降低會(huì)減輕對(duì)以丙二酰-CoA為媒介的肉堿-棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1(CPT1)(該酶會(huì)催化線粒體脂肪酸氧化作用中的限速反應(yīng))的反饋抑制，所以可以通過如下確定本發(fā)明的化合物以及這種化合物的鹽的體內(nèi)活性測量所述化合物以及所述化合物的鹽提高作為能源的脂肪酸的利用率，這通過被治療哺乳動(dòng)物中呼吸商的減少來評(píng)價(jià)。[1]測量對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物中脂肪酸合成的抑制作用?？梢愿鶕?jù)先前所述用于評(píng)估肝甾醇合成的方法(Harwood等人的Biochem.Pharmacol,40:1281-1293，1990;Harwood等人的Biochem.Pharmacol.53:839-864,1997)，向哺乳動(dòng)物(例如CD1小鼠、C57BI/6J-ob/ob小鼠、SpragueDawley大鼠(得自CharlesRiverBoston,Mass.或JacksonLabsBarHarbor,Me.))月干臟中的可皂化脂質(zhì)插入[2-"C]乙酸酯，其中進(jìn)行如下修正從而允許評(píng)估脂肪酸的合成。例如，施與SpragueDawley大鼠每40g體重0.1ml的口服藥丸媒劑(例如水或0.5%甲基纖維素水溶液)土測試化合物。服用化合物后1-4小時(shí)，對(duì)動(dòng)物進(jìn)行腹膜內(nèi)注射0.5ml的[2-14C]乙酸酯(64AtCi/ml;57mCi/mmol)。在進(jìn)行放射性標(biāo)記后1小時(shí)，用(302使動(dòng)物窒息死亡，然后取出2片(0.75g)肝臟，并在1.5ml的2.5MNaOH中以70/xC.皂化120分鐘。皂化后，將2.5ml的純EtOH加入各個(gè)樣品中，然后混合溶液并靜置過夜。然后將石油醚(4.8ml)加入各個(gè)樣品中，然后將混合物劇烈搖動(dòng)2分鐘，然后在臺(tái)式Sorvall⑧中以1000xg離心5分鐘。除去所得石油醚層并丟棄，所述石油醚層含有不可皂化脂質(zhì)(例如膽固醇、后角鯊烯膽固醇前驅(qū)體和其它不可皂化脂質(zhì))。通過添加0.6ml的12MHC1將剩余水層(含有脂肪酸鈉鹽)酸化至pH<2，然后用4.8ml的石油醚萃取兩次。將合并的有機(jī)級(jí)分(含有質(zhì)子化的脂肪酸)轉(zhuǎn)移到液體閃爍管中，在氮?dú)庀赂稍铮⑷苡?ml的水溶膠液態(tài)閃爍流體中，接著采用液體閃爍計(jì)數(shù)儀評(píng)價(jià)放射性。測試化合物對(duì)脂肪酸合成的抑制作用表示為在可輻射標(biāo)記乙酸酯注射和C02窒息的1小時(shí)時(shí)間間隔中，摻入可皂化脂質(zhì)中的dpm[2-14(3]乙酸酯減少50%所需的濃度。如上所述評(píng)估本發(fā)明的一些化合物對(duì)脂肪酸合成的抑制作用。如下所述，觀察到這些化合物會(huì)抑制脂肪酸的體內(nèi)合成?；衔?0mg/kg下的抑制百分率30mg/kg下的抑制百分率A166883A1364A2159.5A1238.7Al35.4A933.5El30.9E230.7[2]測量對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物中丙二酰-CoA生成的抑制作用。還可以根據(jù)先前所述方法(McGarry等人的J.Biol.Chem.253:8291-8293,1978)，通過如下對(duì)丙二酰-CoA在組織(合成脂肪酸的組織(例如肝臟組織和脂肪組織)或不合成脂肪酸的組織(例如骨骼肌))中的生成進(jìn)行直接評(píng)估丙二酰-110CoA在純脂肪酸合成酶和輻射標(biāo)記乙酰基-CoA的存在下化學(xué)計(jì)量轉(zhuǎn)化成經(jīng)輻射標(biāo)記棕櫚酸酯，從而確定在這些組織中的ACC抑制作用。正如上述[l]測量對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物的脂肪酸合成的抑制作用中所述，采用媒劑土測試化合物對(duì)動(dòng)物進(jìn)行治療。簡而言之，在被塞子塞住的玻璃試管中兩次進(jìn)行試驗(yàn)。反應(yīng)混合物包含在1.025ml的200mM磷酸鈉緩沖液(pI^7.0)中的2.5mM二硫蘇糖醇、2.0mMEDTA、0.2mMNADPH、lmg/ml無脂肪酸牛血清白蛋白、4.4/zM[3H]乙?；?CoA(.約.150,000dpm/nmol)和適量的丙二酰-CoA標(biāo)準(zhǔn)物或測試組織提取物。組織提取物由例如肝臟和骨骼肌的組織(所述組織在C02窒息后IO秒內(nèi)冷凍夾緊(freeze-clamp))通過如下制成首先在液氮下將組織研磨成分，然后用5ml的6%(wAOHC104提取lg粉狀組織，接著用KOH將提取物中和至pH為6.0，最終離心除去顆粒狀殘余物。通過添加25毫單位(mU)的純脂肪酸合成酶引發(fā)反應(yīng)。在37°C下培養(yǎng)45分鐘后，通過添加25AtL的70%(w/v)HC104終止反應(yīng)，然后先后向各個(gè)試管中添加1mlEtOH和5ml石油醚萃取新生棕櫚酸酯。在劇烈混合30秒并離心以促進(jìn)相分離后，將石油醚相轉(zhuǎn)移到含有2ml水的另一玻璃試管中，搖動(dòng)，再次離心，然后將2.0ml的石油醚相轉(zhuǎn)移到液體閃爍管中，干燥，并且在添加了10ml水溶膠液態(tài)閃爍流體(PerkinElmer,Shelton,CT)后在液體閃爍計(jì)數(shù)儀上評(píng)價(jià)放射性。每組測定中包含既未添加丙二酰-CoA也未添加肝臟提取物的空白組，從所有數(shù)值中減去空白組數(shù)值。測試化合物對(duì)丙二酰-CoA生成的抑制作用表示為在37'C下培養(yǎng)45分鐘的過程中，插入棕櫚酸酯中的dpm[2-"C]乙酰基-CoA減少50%所需的濃度。[3]測定對(duì)大鼠中脂肪酸氧化的刺激作用。可以通過如下進(jìn)一步證實(shí)本發(fā)明的化合物以及這種化合物的鹽的體內(nèi)ACC抑制活性通過采用基于標(biāo)準(zhǔn)過程的方法評(píng)價(jià)抑制ACC以提高脂肪酸利用率的能力。例如，在由碳水化合物的氧化到脂肪酸的氧化的轉(zhuǎn)變中或者在由脂肪酸合成到氧化的轉(zhuǎn)變中，呼吸商(RQ)減小，RQ二產(chǎn)生的C(V消耗的02的比。因?yàn)橹舅崽幱诒忍妓衔?諸如葡萄糖)更還原的狀態(tài)(reducedstate)，所以產(chǎn)生一個(gè)C02消耗的氧氣量更多，因而RQ更小。如果動(dòng)物僅利用碳水化合物，那么RQ=1.0，如果動(dòng)物僅利用脂肪酸，那么RQ-0.7。因而，動(dòng)物(包括人類和伴侶動(dòng)物)中的RQ是其所利用燃料類型的間接量度。相關(guān)領(lǐng)域中普通技術(shù)人員經(jīng)常在動(dòng)物(包括人類)中使用間接量熱法來測量RQ。本領(lǐng)域技術(shù)人員了解到，減小RQ并且伴隨著對(duì)燃料的利用從氧化碳水化合物轉(zhuǎn)移到氧化脂肪，這些都可以減少體內(nèi)脂肪儲(chǔ)量，因而對(duì)于治療諸如肥胖、代謝綜合征和糖尿病有效。根據(jù)如下方案可以表明本發(fā)明的化合物以及這種化合物的鹽降低RQ響應(yīng)的能力。這個(gè)體內(nèi)篩選方案被設(shè)計(jì)為評(píng)估作為ACC抑制劑的化合物的功效，其使用全身氧氣消耗量、C02生產(chǎn)量和RQ作為功效終點(diǎn)量度。所述方案包括使SpragueDawley大鼠服用單一劑量的化合物。在開始研究之前，將體重在約350-400g范圍內(nèi)的雄性SpragueDawley大鼠安置在標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室條件下。在測試化合物的當(dāng)天，采用開放電路間接量熱儀(Oxymax，ColumbusInstruments,Columbus,Ohio43204)測量氧氣消耗量和RQ。每次試驗(yàn)之前，用N2氣和氣體混合物(約0.5%的C02、約20.5%的02和約79%的N2)校準(zhǔn)Oxymax氣體傳感器。從籠中取出研究大鼠，然后記錄其體重。將大鼠置于密封的Oxymax的室(43x43x10cm)中(每室中一只大鼠)，然后將室置于活動(dòng)監(jiān)測儀中，其中通過各室的空氣流速被設(shè)定為約1.6L/min。Oxymax軟件根據(jù)通過各室的空氣流速以及入口和出口處氧氣含量的差異計(jì)算大鼠的氧氣消耗量(mL/kg/h)?；顒?dòng)監(jiān)測儀具有15條在一個(gè)軸向上彼此間隔約1英寸的紅外光束，當(dāng)兩條連續(xù)光束中斷時(shí)記錄走動(dòng)行為，并將結(jié)果記數(shù)。每10分鐘測量基線氧氣消耗量、RQ和走動(dòng)行為，測量約1-3.5個(gè)小時(shí)。在獲得基線數(shù)據(jù)后，打開各室，通過口服強(qiáng)詞施與單一劑量的測試化合物和媒劑。將測試化合物溶于含有約0.5%的甲基纖維素水溶液的媒劑中或其它媒劑中。給藥體積為約1ml。給藥后，使大鼠返回Oxymax室中，關(guān)閉各室的蓋子，然后每隔10分鐘進(jìn)行測量，測量給藥后約3-6個(gè)小時(shí)。通過如下計(jì)算各個(gè)大鼠響應(yīng)于測試化合物或媒劑的RQ變化將給藥后數(shù)值(不包括在走動(dòng)行為超過100次的時(shí)間段內(nèi)獲得的數(shù)值)的平均值除以給藥前基線數(shù)值(不包括頭5個(gè)數(shù)值以及在走動(dòng)行為超過IOO次的時(shí)間段內(nèi)獲得的數(shù)值)的平均值，然后所得數(shù)據(jù)被表示為RQ的變化％。在試驗(yàn)動(dòng)物中的亞慢性功效和慢性功效本發(fā)明的化合物容易適用于臨床應(yīng)用作為高胰島素血癥逆轉(zhuǎn)劑、胰島素增敏劑、抗肥胖試劑和抗動(dòng)脈粥樣硬化試劑。上述活性可以通過如下測定在例如SpragueDawley大鼠(在施與測試化合物之前以及過程中喂養(yǎng)高葡萄糖詞料或高脂肪詞料3-8周)、雄性ob/ob小鼠或者膽固醇喂養(yǎng)的野兔的哺乳動(dòng)物中，相對(duì)于沒有測試化合物的對(duì)照媒劑，使胰島素水平降低；使響應(yīng)于口服葡萄糖挑戰(zhàn)的胰島素和葡萄糖水平的提高鈍化和/或使響應(yīng)于口服葡萄糖挑戰(zhàn)的胰島素和葡萄糖水平的降低加速；使體重減輕和/或使身體組分減少(例如使身體脂肪的百分率降低)；使血管壁中脂質(zhì)沉積的堆積減少的測試化合物的量。而且，因?yàn)檠褐幸葝u素的濃度與促進(jìn)脈管細(xì)胞生長和高腎鈉潴留相關(guān)(除了例如促進(jìn)葡萄糖利用率的其它作用以外)并且這些作用是高血壓的已知病因，所以本發(fā)明的化合物由于具有降低胰島素的作用(hypoinsulinemicaction)會(huì)預(yù)防、阻止禾口/或逆轉(zhuǎn)高血壓。[l]對(duì)大鼠和小鼠中抗糖尿病功效的亞慢性評(píng)估。通過如下表明本發(fā)明的式(l)化合物、其前藥以及這種化合物和前藥的鹽的抗糖尿病潛力采用基于標(biāo)準(zhǔn)過程的方法評(píng)價(jià)其抗高胰島素血癥的潛力以及其胰島素增敏潛力。例如，可以在施與測試化合物之前3-4周以及過程中隨意喂養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)嚙齒動(dòng)物飼料、高葡萄糖飼料(AIN-76A嚙齒動(dòng)物飼料；Cat#D10001,ResearchDietsInc.,NewBrunswick,NJ.)或高月旨肪飼料(Cat#D12451，ResearchDietsInc.,NewBrunswick,N丄)的SpragueDawley大鼠中，或者在隨意喂養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)嚙齒動(dòng)物飼料的4-8周大的雄性C57BL/6J-ob/ob小鼠(得自JacksonLaboratory,BarHarbor,Me.)中表明這些化合物的抗高胰島素血癥的潛力以及胰島素增敏潛力。通過如下方式施與測試化合物1-8周對(duì)動(dòng)物進(jìn)行治療以S.D.、B丄D.或T丄D的給藥方案口服強(qiáng)飼測試化合物的水溶113液或者在0.25%甲基纖維素水溶液中的溶液；或者喂養(yǎng)粉末形式的上述飼料。對(duì)于評(píng)估式(1)化合物的抗高胰島素血癥潛力的研究，在研究期間的各個(gè)時(shí)刻或者在宰殺(通過C02窒息)時(shí)，從大腦缺血大鼠的尾靜脈、從大腦缺血小鼠的眼眶后竇(retro-orbitalsinus)或者在宰殺時(shí)從大鼠或小鼠的腔靜脈將血液收集到0.5ml血清分離管中。將新收集的樣品在室溫下、在10，000xg下離心2分鐘，然后將血清上層清液儲(chǔ)存在-8(TC下備用。采用購自Binax，SouthPortland,Me的Equate.RIAINSULIN工具包(雙重抗體法，根據(jù)制造商的說明書使用)測定血清胰島素的濃度。各試驗(yàn)間的變化系數(shù)為10%。測試化合物的血清胰島素降低活性通過如下確定統(tǒng)計(jì)學(xué)分析(非成對(duì)的t-測試)測試化合物組和媒劑治療對(duì)照組之間的平均血清胰島素濃度。對(duì)于評(píng)估測試化合物胰島素增敏潛力的研究，在研究期間的各個(gè)時(shí)刻，使禁食動(dòng)物口服或腹膜內(nèi)注射1.0g/(kg體重)的丸形葡萄糖，然后在服用葡萄糖后至多2個(gè)小時(shí)的各個(gè)時(shí)刻從大腦缺血大鼠的尾靜脈、從大腦缺血小鼠的眼眶后竇(retro-orbitalsinus)將血液收集到0.5ml血清分離管中。將新收集的樣品在室溫下、在10,000xg下離心2分鐘，然后將血清上層清液儲(chǔ)存在-8(TC下備用。采用購自上述Equate.RIAINSULIN工具包測定血清胰島素的濃度。采用AbbottVP(AbbottLaboratories,DiagnosticsDivision,Irving,Tex.)以及VPSuperSystem自動(dòng)分析儀(AbbottLaboratories,Irving,Tex.)或者通過AbbottSpectrumCCXTM(AbbottLaboratories,Irving,Tex.)采用A-GentGlucose-UVTest試劑系統(tǒng)(AbbottLaboratories,Irving,Tex.)(Richterich禾口Dauwalder的改進(jìn)方、法,SchweizerischeMedizinischeWochenschrift，101:860(1971))測定血清葡萄糖濃度。測試化合物的胰島素增敏活性通過如下確定統(tǒng)計(jì)學(xué)分析(非成對(duì)的t-測試)測試化合物組和媒劑治療對(duì)照組之間的峰胰島素和葡萄糖濃度的平均差異以及胰島素和葡萄糖在其峰水平之后從血漿中消失速率的平均差異。對(duì)于評(píng)估測試化合物降低脂質(zhì)的潛力的研究，在研究期間的各個(gè)時(shí)刻或者在宰殺(通過C02窒息)時(shí)，從大腦缺血大鼠的尾靜脈、從大腦缺血小鼠的眼眶后竇或者在宰殺時(shí)從大鼠或小鼠的腔靜脈將血液收集到0.5ml血清分離管中。將新收集的樣品在室溫下、在10，000xg下離心2分鐘，然后將血清上層清液儲(chǔ)存在-80。C下備用。采用AbbottVP以及VPSuperSystem自動(dòng)分析儀(AbbottLaboratories,Irving,Tex.)，或者采用AbbottSpectrumCCX(AbbottLaboratories,Irving,Tex.)禾U用A-GentTMTriglyceridesTest試齊U系統(tǒng)(AbbottLaboratories,DiagnosticsDivision,Irving，Tex.)(脂肪酶偶聯(lián)方法，Sampson等人的改進(jìn)方法，ClinicalChemistry21:1983(1975))測定血清甘油三酸酯。采用100禾P300mg/dl標(biāo)準(zhǔn)物，利用AbbottVP以及VPSuperSystem自動(dòng)分析儀(AbbottLaboratories,Irving，Tex.)，以及利用A-GentTMCholesterolTest試劑系統(tǒng)(膽固醇酯酶偶聯(lián)方法；Allain等人的改進(jìn)方法ClinicalChemistry20:470(1974))測定血清總膽固醇含量。利用得自AmanoInternationalEnzymeCo.,Inc.的試劑盒測定血清游離脂肪酸濃度，該試劑盒被改造成適于與AbbottVPTM和VPSuperSystem自動(dòng)分析儀(AbbottLaboratories,Irving,Tex.)或AbbottSpectrumCCXTM(AbbottLaboratories,Irving,Tex.)—起使用。測試化合物降低血清甘油三酸酯、膽固醇和游離脂肪酸的活性通過如下確定統(tǒng)計(jì)學(xué)分析(非成對(duì)的t-測試)測試化合物對(duì)照組和媒劑治療對(duì)照組之間的平均血清甘油三酸酯濃度、膽固醇濃度和游離脂肪酸濃度。對(duì)大鼠和小鼠中抗肥胖功效的亞慢性評(píng)估。通過如下表明本發(fā)明的式(l)化合物、其前藥以及這種化合物和前藥的鹽的抗肥胖潛力評(píng)估其減少體重、減少體脂肪百分率以及降低血漿萊普亭(leptin)水平的潛力。例如，可以在施與測試化合物之前3-4周以及過程中隨意喂養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)嚙齒動(dòng)物飼料、高葡萄糖飼料(AIN-76A嚙齒動(dòng)物飼料；Cat#D10001,ResearchDietsInc.,NewBrunswick,N丄)或高脂肪飼料(Cat#D12451,Research'DietsInc.,NewBrunswick,N丄)白勺SpragueDawley大鼠中，或者在隨意喂養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)嚙齒動(dòng)物飼料的4-8周大的雄性C57BL/6J-ob/ob小鼠(得自JacksonLaboratory,BarHarbor,Me.)中表明測試化合物減少體重、減少體脂肪百分率以及降低血漿萊普亭水平的潛力。通過如下方式施與測試化合物1-8周對(duì)動(dòng)物進(jìn)行治療以S.D.、B丄D.或T丄D的給藥方案口服強(qiáng)飼測試化合物的水溶液或者在0.25%甲基纖維素水溶液中的溶液；或者喂養(yǎng)粉末形式的上述飼料。通過比較采用測試化合物治療前后的總體重可以對(duì)全身體重?fù)p耗進(jìn)行簡單評(píng)估。為了評(píng)估重量損耗和身體組成的變化(例如身體脂肪百分率的變化以及瘦體質(zhì)量與脂肪質(zhì)量比的變化)，將被治療的動(dòng)物和對(duì)照動(dòng)物進(jìn)行輕度麻醉，然后采用安裝有"RegionalHighResolutionScan"軟件的雙能源X射線吸收儀(DEXA,QDR-1000/W，HologicInc.,Waltham,Mass.)進(jìn)行掃描。根據(jù)待評(píng)估樣本的尺寸調(diào)節(jié)掃描尺寸。分辨率為0.0254x0.0127cm，掃描速度為7.25mm/秒。測試化合物降低全身體重、身體脂肪百分率以及瘦體質(zhì)量與脂肪質(zhì)量比的活性通過如下確定統(tǒng)計(jì)學(xué)分析(非成對(duì)的t-測試)測試化合物對(duì)照組和媒劑治療對(duì)照組之間的平均全身體重、身體脂肪百分率以及脂肪質(zhì)量與瘦體質(zhì)量的比值。血漿萊普亭水平的變化幾乎平行于身體脂肪百分率的變化，因而其為評(píng)估抗肥胖潛力的一個(gè)有效標(biāo)記。對(duì)于評(píng)估血漿萊普亭水平響應(yīng)于測試化合物的治療而發(fā)生的變化，在研究期間的各個(gè)時(shí)刻或者在宰殺(通過C02窒息)時(shí)，在宰殺時(shí)從大腦缺血大鼠的尾靜脈、從大腦缺血小鼠的眼眶后竇或者從大鼠或小鼠的腔靜脈將血液收集到0.5mi血清分離管中。將新收集的樣品在室溫下、在10,000xg下離心2分鐘，然后將血清上層清液儲(chǔ)存在-8(TC下備用。采用購自LINCO,StCharles,Mo的LINCO大鼠萊普亭RIA試劑盒(Cat#RL-83K;根據(jù)制造商說明的雙抗體方法)測定血清萊普亭濃度。測試化合物降低血清萊普亭的活性通過如下確定統(tǒng)計(jì)學(xué)分析(非成對(duì)的t-測試)測試化合物對(duì)照組和媒劑治療對(duì)照組之間的平均血清萊普亭濃度。m對(duì)野兔中抗動(dòng)脈粥樣硬化功效的慢性評(píng)估。為了表明本發(fā)明式(1)化合物以及這些化合物的鹽的抗動(dòng)脈粥樣硬化的潛力，這些化合物以及這些化合物的鹽的抗動(dòng)脈粥樣硬化作用可以通過減少野兔動(dòng)脈中脂質(zhì)沉積所需測試化合物的用量來測定。喂養(yǎng)雄性新西蘭白色野兔含有0.2%膽固醇和10%椰子油的飼料4天(每天喂養(yǎng)一次)。從野兔的邊緣耳動(dòng)脈抽血，并測定這些樣品的全血漿膽固醇數(shù)值。然后將該野兔分到治療組，各個(gè)組的全血漿膽固醇濃度、HDL膽固醇濃度和/或甘油三酸酯濃度具有類似的平均值土SD。分組完成后，每天以飼料混合物形式或者以小片凝膠蜜餞形式施與野兔測試化合物。對(duì)照組野兔僅僅獲得伺料形式或凝膠蜜餞形式的載劑。在整個(gè)研究過程中，膽固醇/椰子油與測試化合物一起服用。在研究期間的任意點(diǎn)通過從邊緣耳靜脈獲得的血液確定血漿膽固醇的數(shù)值和/或甘油三酸酯的數(shù)值。3-5個(gè)月后，宰殺野兔，然后取出胸拱(thoracicarch)到髂骨動(dòng)脈的分支(branchoftheiliacarteries)的大動(dòng)脈。將大動(dòng)脈從動(dòng)脈外膜中清除，沿縱向打開，然后根據(jù)Holman等人(Lab.Invest.1958,7，42-47)所述用SudanIV進(jìn)行染色。采用OptimasImageAnalyzingSystem(ImageProcessingSystems)對(duì)被染色表面積的百分率進(jìn)行密度計(jì)量學(xué)定量。減少的脂質(zhì)沉積表現(xiàn)為，接收化合物組中的被染色表面積的百分率與對(duì)照野兔相比減小了。11權(quán)利要求1.一種具有式(1)結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受鹽，其中(a)R1是H、OH、鹵素、氰基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、C1-3鹵代烷基、C1-3鹵代烷氧基、C1-3烷基磺?；?、-CO(O)H、-C(O)OC1-3烷基或苯基，其中，所述苯基可選地被1至5個(gè)R10取代；(b)每個(gè)R10獨(dú)立地是OH、鹵素、氰基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、C1-3鹵代烷基、C1-3鹵代烷氧基；(c)R2和R3各自獨(dú)立地是H、OH、鹵素、氰基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、C1-3鹵代烷基、C1-3鹵代烷氧基、C1-3烷基磺酰基、-CO(O)H、-C(O)OC1-3烷基、-C(O)NR11R12或苯基，其中，所述苯基可選地被1至5個(gè)R10取代；(d)R11和R12是單獨(dú)的且它們各自獨(dú)立地是H或C1-3烷基，或者R11和R12與它們連接的氮連在一起形成4-7元雜環(huán)烷基；(e)R4是H、鹵素、氰基、C1-3烷基或C1-3鹵代烷基；(f)R6是單獨(dú)的，其是H、OH、鹵素、C1-3烷基、C1-3烷氧基、C1-3鹵代烷基或C1-3鹵代烷氧基；(g)R7是單獨(dú)的，其是H、OH、鹵素、C1-3烷基、C1-3烷氧基、C1-3鹵代烷基或C1-3鹵代烷氧基；(h)R5是單獨(dú)的，其是可選地被鹵素、C1-3烷基、C1-3烷氧基、C1-3烷基-OH、C1-3鹵代烷基或C1-3取代的4-7元雜芳基；或者(i)R5與R6或R7連在一起以及與R5和R6或R7所連接的苯基連在一起，從而形成具有含氮環(huán)的多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)，其中至少一個(gè)氮原子鍵合到所述苯基的碳原子上，所述含氮環(huán)可選地與環(huán)己烯、5，6-二氫-吡啶或5，6-二氫-1H-吡啶-2-酮稠合，并且所述含氮環(huán)可選獨(dú)立地被一個(gè)至兩個(gè)氧代基、鹵素、C1-3烷基、C1-3烷氧基、C1-3烷基-OH、C1-3鹵代烷基、C1-3鹵代烷氧基、4-7元雜芳基、4-7元雜環(huán)烷基或苯基取代，其中，所述苯基可選地被1至5個(gè)R10取代，附加條件是R5未與R6連在一起形成苯并三唑基或苯并噁二唑基，R5未與R7連在一起形成苯并噁二唑基；以及(j)R8和R9獨(dú)立地是H、OH、鹵素、C1-3烷基、C1-3烷氧基、C1-3鹵代烷基或C1-3鹵代烷氧基，附加條件是，所述化合物不是1′-(1H-1，2，3-苯并三唑-5-基羰基)-5-甲氧基螺環(huán)[苯并吡喃-2，4′-哌啶]-4(3H)-酮、6-氯-7-甲基-1′-[3-(1H-吡唑-4-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2，4′-哌啶]-4(3H)-酮、6，7-二甲基-1′-[3-(1H-吡唑-4-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2，4’-哌啶]-4(3H)-酮或6，7-二甲基-1′-[3-(1H-吡唑-4-基)苯甲?；鵠螺環(huán)[苯并吡喃-2，4’-哌啶]-4(3H)-酮。2.如權(quán)利要求1所述的化合物或其藥學(xué)上可接受鹽，其中，W和R7連在一起，所述可選地被取代的含氮環(huán)可選含有第二N、O或S雜原子并且所述含氮環(huán)可選地與環(huán)己烯、5，6-二氫-妣啶或5，6-二氫-lH-吡啶-2-酮稠合。3.如權(quán)利要求2所述的化合物或其藥學(xué)上可接受鹽，其中，W和R7連在一起，所述多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)是1H-吲唑基、1H-苯并咪唑基、喹啉基、1，2,3，4-四氫喹啉基、喹喔啉基、1H-吲哚基、2,3-二氫-lH-苯并咪唑基、lH-苯并-[d][l,2,3]三唑基、6,7,8,9-四氫-5H-咔唑基、2,3，4,9-四氫-lH-卩比啶并-[3,4-b]fi引哚基或苯并噁唑基，并且所述多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)的含氮環(huán)可選地被取代。4.如權(quán)利要求3所述的化合物或其藥學(xué)上可接受鹽，其中，所述多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)是可選地被取代的1H-吲唑基、1H-苯并咪唑基1H-吲哚基或2,3,4，9-四氫-lH-吡啶并-[3,4-b]吲哚基。5.如權(quán)利要求4所述的化合物或其藥學(xué)上可接受鹽，其中(a)R/是H、卣素、CHjOCH3;(b)R3是H、卣素、CH3或OCH3;(c)R4是H。6.如權(quán)利要求1所述的化合物或其藥學(xué)上可接受鹽，其中，W和R6連在一起，所述可選地被取代的含氮環(huán)可選含有第二N、O或S雜原子并且所述含氮環(huán)可選地與環(huán)己烯、5,6-二氫_吡啶或5,6-二氫-lH-吡啶-2-酮稠合。7.如權(quán)利要求6所述的化合物或其藥學(xué)上可接受鹽，其中，115和R6連在一起，所述多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)是可選地被取代的1H-吲唑基、1H-苯并咪唑基、1H』引哚基或2,3-二氫-lH-苯并咪唑基，并且所述多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)的含氮環(huán)可選地被取代。8.如權(quán)利要求7所述的化合物或其藥學(xué)上可接受鹽，其中，所述多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)的含氮環(huán)是可選地被取代的1H-吲唑基。9.如權(quán)利要求8所述的化合物或其藥學(xué)上可接受鹽，其中，(a)R^是H、鹵素、CH3或OCH3;(b)R3是H、鹵素、CH3或OCH3;(c)R4是H。10.如權(quán)利要求1所述的化合物或其藥學(xué)上可接受鹽，其中，rs是単獨(dú)的，其是可選地被取代的吡唑基、咪唑基、噁二唑基或嘧啶基。11.如權(quán)利要求10所述的化合物或其藥學(xué)上可接受鹽，其中，rs是單獨(dú)的，其是可選地被取代的吡唑基或咪唑基。12.如權(quán)利要求11所述的化合物或其藥學(xué)上可接受鹽，其中，(a)R/是H、鹵素、CH3或OCH3;(b)r3是H、卣素、CH3或OCH3;(c)R4是H。13.—種藥物組合物，其包含(l)一種具有式(1)的化合物或其藥學(xué)上可接受鹽，其中<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(a)W是H、OH、鹵素、氰基、d—3烷基、Q—3烷氧基、d.3鹵代烷基、d-3鹵代垸氧基、Q-3烷基磺?；?CO(O)H、《(0)0(^-3垸基或苯基，其中，所述苯基可選地被1至5個(gè)R^取代；(b)每個(gè)R"獨(dú)立地是OH、鹵素、氰基、Cw烷基、Cw烷氧基、d.3鹵代垸基、Cw鹵代烷氧基；(C)R2和R3各自獨(dú)立地是H、OH、鹵素、氰基、d.3烷基、d.3烷氧基、鹵代垸基、d.3鹵代烷氧基、CL3烷基磺酰基、-CO(O)H、-C(O)OCw垸基、-C(0)NR11R12或苯基，其中，所述苯基可選地被1至5個(gè)R^取代；(d)RU和R^是單獨(dú)的且它們各自獨(dú)立地是H或d.3烷基，或者R"和R12與它們連接的氮連在一起形成4-7元雜環(huán)烷基；(e)W是H、鹵素、氰基、Cw垸基或d-3鹵代烷基；(f)RS是單獨(dú)的，其是H、OH、鹵素、Q.3烷基、d.3烷氧基、Cw鹵代烷基或Cw鹵代烷氧基；(g)R"是單獨(dú)的，其是H、OH、鹵素、d.3烷基、d.3垸氧基、Cw鹵代烷基或Cw鹵代烷氧基；(h)RS是單獨(dú)的，其是可選地被鹵素、Cw垸基、Cw垸氧基、3烷基-OH、d.3鹵代烷基或Q.3取代的4-7元雜芳基；或者(i)W與RS或R7連在一起以及與RS和RS或R"所連接的苯基連在一起，從而形成具有含氮環(huán)的多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)，其中至少一個(gè)氮原子鍵合到所述苯基的碳原子上，所述含氮環(huán)可選地與環(huán)己烯、5,6-二氫-卩比啶或5,6-二氫-lH-吡啶-2-酮稠合，并且所述含氮環(huán)可選獨(dú)立地被一個(gè)至兩個(gè)氧代基、鹵素、Cw烷基、d.3垸氧基、d.3烷基-OH、d—3鹵代烷基、d—3鹵代垸氧基、4-7元雜芳基、4-7元雜環(huán)垸基或苯基取代，其中，所述苯基可選地被1至5個(gè)rw取代，附加條件是rs未與W連在一起形成苯并三唑基或苯并噁二唑基，rs未與r"連在一起形成苯并噁二唑基；以及(j)RS和W獨(dú)立地是H、OH、鹵素、Ci—3垸基、d—3垸氧基、C,—3鹵代烷基或d.3鹵代烷氧基；和(2)藥學(xué)上可接受載劑、媒劑、稀釋劑或賦形劑。14.如權(quán)利要求13所述的藥物組合物，其中，115和R7連在一起，所述多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)是1H-n引唑基、lH-苯并咪唑基、喹啉基、1,2，3,4-四氫喹琳基、喹喔啉基、1H-吲哚基、2，3-二氫-lH-苯并咪唑基、lH-苯并-[d][l，2，3]三唑基、6，7,8,9-四氫-5H-咔唑基、2,3，4，9-四氫-lH-吡啶并-[3,4-b]吲哚基或苯并噁唑基，并且所述多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)的含氮環(huán)可選地被取代。15.如權(quán)利要求13所述的藥物組合物，其中，W和rs連在一起，所述多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)是1H-吲唑基、1H-苯并咪唑基、1H-b引哚基或2，3-二氫-lH-苯并咪唑基，并且所述多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)的含氮環(huán)可選地被取代。16.如權(quán)利要求13所述的藥物組合物，其中，Rs是單獨(dú)的，其是可選地被取代的吡唑基、咪唑基、噁二唑基或嘧啶基。17.—種治療需要治療的哺乳動(dòng)物的肥胖或超重病癥的方法，所述方法包括施與所述哺乳動(dòng)物治療有效量的具有式(1)的化合物或其藥學(xué)上可接受鹽，其中(1)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>(a)W是H、OH、鹵素、氰基、d—3烷基、d—3烷氧基、C,.3鹵代烷基、Cw鹵代垸氧基、Cw烷基磺?；?、-CO(O)H、-C(0)Od.3烷基或苯基，其中，所述苯基可選地被1至5個(gè)R^取代；(b)每個(gè)R^獨(dú)立地是OH、鹵素、氰基、d-3烷基、d-3烷氧基、Cw鹵代垸基、Q.3鹵代烷氧基；(c)R和W各自獨(dú)立地是H、OH、鹵素、氰基、d.3烷基、Cw垸氧基、a3鹵代烷基、d—3鹵代烷氧基、Cw垸基磺?；?、-CO(O)H、-C(0)Od.3烷基、-(:(0)忖^^12或苯基，其中，所述苯基可選地被i至5個(gè)rw取代；(d)RH和R"是單獨(dú)的且它們各自獨(dú)立地是H或d.3烷基，或者R"和R12與它們連接的氮連在一起形成4-7元雜環(huán)烷基；(e)W是H、鹵素、氰基、Cw烷基或d—3鹵代烷基；(f)R6是單獨(dú)的，其是H、OH、鹵素、3垸基、C,.3烷氧基、d.3鹵代烷基或Q.3鹵代烷氧基；(g)r7是單獨(dú)的，其是H、OH、鹵素、Q.3烷基、d.3垸氧基、Q.3鹵代烷基或Q.3鹵代垸氧基；(h)RS是單獨(dú)的，其是可選地被鹵素、Cw烷基、d.3垸氧基、3烷基-OH、Q-3鹵代烷基或d.3取代的4-7元雜芳基；或者(i)115與rs或W連在一起以及與rs和116或W所連接的苯基連在一起，從而形成具有含氮環(huán)的多環(huán)雜環(huán)基團(tuán)，其中至少一個(gè)氮原子鍵合到所述苯基的碳原子上，所述含氮環(huán)可選地與環(huán)己烯、5,6-二氫-吡啶或5,6-二氫-lH-吡啶-2-酮稠合，并且所述含氮環(huán)可選獨(dú)立地被一個(gè)至兩個(gè)氧代基、鹵素、Cw烷基、d.3垸氧基、d.3垸基-OH、d-3鹵代垸基、Cw鹵代垸氧基、4-7元雜芳基、4-7元雜環(huán)烷基或苯基取代，其中，所述苯基可選地被1至5個(gè)R"取代，附加條件是Rs未與Rs連在一起形成苯并三唑基或苯并噁二唑基，RS未與R"連在一起形成苯并噁二唑基；以及(j)r8和r9獨(dú)立地是H、OH、鹵素、d.3烷基、Cw垸氧基、Q.3鹵代烷基或C^鹵代垸氧基。18.如權(quán)利要求17所述的方法，其中，所述哺乳動(dòng)物是人類。全文摘要本發(fā)明提供了一種具有式(1)的化合物或其藥學(xué)上可接受鹽，其中，R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R⁹如本文所述；本發(fā)明進(jìn)一步提供了所述化合物或其藥學(xué)上可接受鹽的藥物組合物及其在治療患有超重病癥的哺乳動(dòng)物中的用途。文檔編號(hào)C07D491/107GK101541809SQ200780044253公開日2009年9月23日申請日期2007年11月16日優(yōu)先權(quán)日2006年11月29日發(fā)明者安德魯·西蒙·柏爾,杰弗里·維恩·克比特,理查德·路易斯·埃利歐特申請人:輝瑞產(chǎn)品公司