專利名稱：锝－99m標(biāo)記的二巰基丁二酸酯類配合物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種99mTc標(biāo)記的放射性配合物及其制備方法和應(yīng)用，其特別是作為腫瘤顯像劑的應(yīng)用。

背景技術(shù)：
目前在99mTc標(biāo)記的放射性藥物化學(xué)領(lǐng)域，近年來對(duì)以99mTc(V)核為中心核的二巰基丁二酸配合物(99mTc(V)-DMSA)的研究十分活躍，其結(jié)構(gòu)式見(圖a)，主要用于腫瘤顯像，它在軟組織腫瘤、甲狀腺髓樣癌、頭頸部腫瘤、骨轉(zhuǎn)移瘤等多種惡性腫瘤的顯像診斷中顯示了較高的靈敏度和特異性，已廣泛應(yīng)用于臨床。
近年來，通常稱為癌癥的惡性腫瘤已成為目前危害人類健康最嚴(yán)重的一類疾病，嚴(yán)重影響著人類的健康，因此對(duì)于腫瘤顯像藥物的研究是當(dāng)今放射性藥物研究的熱點(diǎn)之一。在顯像方面，由于99mTc具有半衰期短(6.02小時(shí))、γ射線能量適中(140千電子伏特)等優(yōu)良核性質(zhì)，使其能與SPECT(Single-Photo Emission Computed Tomography，單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層術(shù))配合用于體內(nèi)顯像，且病人受到輻射劑量很低。醫(yī)用99Mo-99mTc發(fā)生器的研制成功，使99mTc核素獲取方便，價(jià)格低廉，因此99mTc成為放射性標(biāo)記藥物研究的首選核素，并且取得了很大的進(jìn)展。
放射性核素SPECT腫瘤顯像在臨床應(yīng)用中具有無創(chuàng)性、易得、操作相對(duì)簡(jiǎn)單、費(fèi)用相對(duì)低的特點(diǎn)，因此核醫(yī)學(xué)掃描技術(shù)這種無創(chuàng)性的腫瘤診斷技術(shù)具有重要的發(fā)展價(jià)值。
67Ga-檸檬酸鎵(67Ga-cit)作為一種較常用的腫瘤顯像劑。由于它的親瘤廣譜性，且有商品供應(yīng)臨床、使用方便，所以三十多年以來一直在發(fā)達(dá)國家用于腫瘤定位。是一種較常用的軟組織腫瘤顯像劑。對(duì)于何杰金氏和非何杰金氏淋巴瘤的常規(guī)診斷、臨床分期、療效評(píng)價(jià)、預(yù)后評(píng)價(jià)、預(yù)后判斷和監(jiān)測(cè)復(fù)發(fā)等很有價(jià)值，可用于診斷各種軟組織肉瘤如平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、神經(jīng)纖維肉瘤、惡性纖維組織細(xì)胞肉瘤、粒細(xì)胞瘤等。其他如用于肝臟腫瘤、支氣管肺癌以及對(duì)肺部良惡性病變的鑒別診斷也有一定的價(jià)值。它的不足之處是①缺乏特異性(炎癥病變部位亦顯陽性)；②物理特性差，發(fā)射的γ射線的能量范圍(93-394千電子伏特)過寬；③67Ga-檸檬酸鎵由腸道排除，干擾了顯像質(zhì)量；④靜脈注射后顯像需長(zhǎng)時(shí)間等待(48-72小時(shí))。由于上述多種不足，研究發(fā)展了其他親腫瘤的放射性藥物。
99mTc(V)-DMSA是一種較理想的親腫瘤顯像劑。(ohta H，Endo K，F(xiàn)ujita T，et al，Imagingof soft tissue tumors nith 99mTc(V)-Dimercaptosuccinic acid，A new tumer-seeking agent，ClinNucl Med 198419568)，與其它腫瘤顯像劑相比，其具有以下優(yōu)點(diǎn)①在腫瘤和骨組織中的攝取率較高——即靶/非靶器官放射性比高，可以較好的顯示腫瘤和骨組織的病變；②體內(nèi)代謝快，從血中清除迅速，在給藥后2小時(shí)左右即可達(dá)到理想的顯像狀態(tài)，既縮短了檢查時(shí)間又減少了病人受照劑量；③使用目前最常用的99mTc標(biāo)記，核素來源方便，具有適宜的能量(140千電子伏特)和較短的半衰期(6.02小時(shí))；④制備簡(jiǎn)單，目前已有市售的成品藥盒，可實(shí)現(xiàn)簡(jiǎn)單的一步法制備，也可改變99mTc(V)-DMSA藥盒的標(biāo)記條件，較方便的制備出放化純度較高的99mTc(V)-DMSA；⑤圖像質(zhì)量高，顯像時(shí)間短，既能顯示軟組織轉(zhuǎn)移灶又能顯示骨組織轉(zhuǎn)移灶。
99mTc(V)-DMSA在軟組織腫瘤診斷方面的應(yīng)用價(jià)值已得到人們的肯定。99mTc(V)-DMSA可發(fā)現(xiàn)直徑小于0.5cm的腫瘤，與腫瘤顯像劑67Ga-cit(67Ga-檸檬酸鎵)比較，除特異性低于67Ga-cit外，靈敏度、圖像質(zhì)量等均優(yōu)于67Ga-cit。
研究表明99mTc(V)-DMSA可以對(duì)MTC、軟組織腫瘤、頭頸部腫瘤、骨轉(zhuǎn)移瘤等多種腫瘤進(jìn)行高靈敏度、高特異度的顯像診斷；可以較方便的進(jìn)行全身顯像，尋找腫瘤的轉(zhuǎn)移灶；可以判斷腫瘤細(xì)胞的存活情況，觀察腫瘤放化療后的療效。99mTc(V)-DMSA在腫瘤顯像診斷方面具有廣闊地應(yīng)用前景(Ohta H，Komibuchi T，Tomihara M，etal，99mTc(V)-DMSA and67Ga-citrate images in a patient with recurrent extraabdominel fobromatosis[J]，Ann Nucl Med1998，12(4)221-223)。
但是由于99mTc(V)-DMSA在骨中有非常高的攝取，造成干擾，導(dǎo)致靶/非靶比值較低，所以對(duì)腫瘤顯像尤其是軟組織腫瘤顯像結(jié)果造成一定的影響。99mTc(V)-DMSA結(jié)構(gòu)如下
由此可以看出，現(xiàn)有的較為成功的軟組織腫瘤顯像劑99mTc(V)-DMSA，尚存在骨攝取高造成干擾的缺點(diǎn)，若能提供一種能更好的被軟組織腫瘤攝取、敏感性更高，而骨攝取更低、對(duì)比更清晰的腫瘤顯像劑，將具有廣泛的應(yīng)用前景。
基于以上考慮，發(fā)明人提出了一類新型的锝-99m標(biāo)記的腫瘤顯像劑。腫瘤攝取值高，初步研究表明這類新型腫瘤顯像劑具有優(yōu)良的生物性能，且制備方法簡(jiǎn)單、成本低，有望在臨床上得以推廣應(yīng)用。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的首要目的是克服了已有技術(shù)的缺點(diǎn)，提供一類具有優(yōu)良顯像性能的新的放射性锝-99m標(biāo)記的二巰基丁二酸酯類配合物； 本發(fā)明的另一目的在于提供新的锝-99m標(biāo)記、锝氮標(biāo)記、羰基锝標(biāo)記的二巰基丁二酸酯類配合物的制備方法； 本發(fā)明的再一目的是提供一種所述的配合物作為腫瘤顯像劑的應(yīng)用； 本發(fā)明是以99mTc(V)、99mTcN(II)、99mTc(I)(CO)3為中心核，與其配位的是二巰基丁二酸酯類配體，其結(jié)構(gòu)式分別為[99mTcO(DMSR)2]-/[99mTcO(DMSR2)2]-、[99mTcN(DMSR2)2]2-/[99mTcN(DMSR2)2]2-、[99mTc(CO)3(DMSR)2]/[99mTc(CO)3(DMSR2)2]，其中用式DMSR/DMSR2表示的配體中R為C1～C5烷基或環(huán)己基。
本發(fā)明提供的一種以99mTc(V)為配體的放射性锝-99m標(biāo)記的二巰基丁二酸配合物，由下述結(jié)構(gòu)式表示
該配合物[99mTeO(DMSR)2]-/[99mTcO(DMSR2)2]-以99mTc(V)為中心核，與其配位的二巰基丁二酸酯配體，用式DMSR/DMSR2表示 其中 R為C1～C5烷基或環(huán)己基； 所述的C1～C5烷基是指具有1～5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基，包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、叔丁基、戊基在內(nèi)的任一種； 優(yōu)選的本發(fā)明配合物的R為C1～C4烷基或環(huán)己基配合物； 進(jìn)一步優(yōu)選的本發(fā)明配合物是R為甲基或乙基配合物； 最優(yōu)選的配合物是其中R為乙基配合物。
在本研究領(lǐng)域，對(duì)于放射性核素標(biāo)記配合物的結(jié)構(gòu)表征常用該核素的穩(wěn)定同位素或用與該核素化學(xué)性質(zhì)相近的穩(wěn)定核素代替該放射性核素來制備同類配合物，進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征并由此推定放射性核素標(biāo)記配合物的結(jié)構(gòu)，對(duì)于放射性核素锝-99m，常用锝-99或用其同族的錸(Re)代替，從而對(duì)锝-99m標(biāo)記配合物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行推定。本發(fā)明的锝-99m配合物與現(xiàn)有技術(shù)中以99mTc(V)為中心核的二巰基丁二酸配合物[99mTcO(DMSA)2]-屬同類配合物，二者的分別在于配位體的取代基不同，即結(jié)構(gòu)式中的R不同。因此本發(fā)明的锝-99m配合物在結(jié)構(gòu)上與現(xiàn)有的99mTc(V)為中心核的二巰基丁二酸配合物[99mTcO(DMSA)2]-相同?，F(xiàn)有以99mTc(V)為中心核的二巰基丁二酸配合物[99mTcO(DMSA)2]-的結(jié)構(gòu)已有文獻(xiàn)報(bào)道用Tc(V)代替99mTc(V)進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征，結(jié)果認(rèn)為該類配合物帶一個(gè)負(fù)電荷，是由兩個(gè)DMSA配體提供的4個(gè)巰基和1個(gè)锝酸根共價(jià)結(jié)合的正方形錐體結(jié)構(gòu)組成，如前述結(jié)構(gòu)式所示，由此推定，現(xiàn)有以99mTc(V)為中心核的二巰基丁二酸配合物[99mTcO(DMSR)2]-/[99mTcO(DMSR2)2]-的結(jié)構(gòu)與此相同。考慮到本發(fā)明所述配合物與現(xiàn)有配合物屬同類，因此，同樣可以推定本發(fā)明所述配合物具有正方形錐體構(gòu)型，所以本發(fā)明中只對(duì)二巰基丁二酸酯配體DMSR/DMSR2進(jìn)行表征，而不再對(duì)本發(fā)明的配合物結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征。
本發(fā)明提供了一種放射性的锝氮標(biāo)記的二巰基丁二酸酯配合物，其分子式為[99mTcN(DMSR)2]2-/[99mTcN(DMSR2)2]2-。
該配合物[99mTcN(DMSR)2]2-/[99mTcN(DMSR2)2]2-以99mTcN為中心核，與其配位的二巰基丁二酸配體用式DMSR/DMSR2表示 其中 R為C1～C5烷基或環(huán)己基； 所述的C1～C5烷基是指具有1～5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基，包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、叔丁基、戊基在內(nèi)的任一種； 優(yōu)選的本發(fā)明配合物是R為C1～C4烷基或環(huán)己基配合物； 進(jìn)一步優(yōu)選的本發(fā)明配合物是R為甲基或乙基配合物； 最優(yōu)選的配合物是其中R為乙基配合物。
與99mTc(III)為中心核99mTc(III)-DMSA的分子式為[99mTc(III)O(DMSA)2]-，經(jīng)研究表明整個(gè)配體帶一個(gè)負(fù)電荷是由兩個(gè)DMSA配體提供的4個(gè)巰基和1個(gè)锝酸根共價(jià)結(jié)合的正方形錐體結(jié)構(gòu)組成，由于[Tc≡N]2+比[Tc＝O]3+少一個(gè)正電荷，推測(cè)放射性的锝氮標(biāo)記的二巰基丁二酸配合物其分子式為[99mTcN(DMSA)2]2-，整個(gè)配合物帶兩個(gè)負(fù)電荷。
本發(fā)明提供了一類放射性的羰基锝標(biāo)記的二巰基丁二酸酯配合物，其分子式為以99mTc(CO)3為中心核，與其配位的二巰基丁二酸配體用式DMSR/DMSR2表示 其中 R為C1～C5烷基或環(huán)己基； 上述C1～C5烷基是指具有1～5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、叔丁基、戊基在內(nèi)的任一種； 優(yōu)選的本發(fā)明配合物是R為C1～C4烷基或環(huán)己基配合物； 進(jìn)一步優(yōu)選的本發(fā)明配合物是R為甲基或乙基配合物； 最優(yōu)選的配合物是其中R為乙基配合物。
本發(fā)明的配體DMSR/DMSR2可通過以下的方式合成
R為C1～C5烷基或環(huán)己基。
起始反應(yīng)物為二巰基丁二酸與ROH反應(yīng)，所述的ROH為C1～C5烷醇或環(huán)己醇，均可在市場(chǎng)購得。兩種反應(yīng)物在H+存在下強(qiáng)烈攪拌加熱回流。反應(yīng)30分鐘后，即可得到1和2，用三氯甲烷溶解2，與1和原料分離，再將1和原始產(chǎn)物用索式提取器和三氯甲烷/乙腈混合溶劑分離，即可得到2。
本發(fā)明提供了制備所述的锝-99m標(biāo)記的二巰基丁二酸酯類配合物的方法即放射性高锝酸鹽(99mTcO4-)與二巰基丁二酸酯配體(DMSR/DMSR2)在還原劑的存在下反應(yīng)制備得到所述的放射性锝-99m標(biāo)記的二巰基丁二酸酯配合物。優(yōu)選的制備方法為下述的濕法或凍干法 濕法 將高锝酸根99mTcO4-淋洗液(從醫(yī)用99Mo-99mTc發(fā)生器獲得)、還原劑與二巰基丁二酸酯配體DMSR/DMSR2)室溫反應(yīng)20分鐘后，得到產(chǎn)物锝-99m標(biāo)記的二巰基丁二酸酯配合物，該方法中還原劑與二巰基丁二酸酯配體的重量比為(0.1～10)∶(1～20)，因高锝酸根99mTcO4-為放射性示蹤量，其化學(xué)量可以不考慮。
凍干法 將還原劑、賦形劑、穩(wěn)定劑和二巰基丁二酸酯配體，按(0.1～10)∶(20～100)∶(1～20)∶(1～20)的重量比溶于充氮二次水中(充氮量要足以保證還原劑不被氧化)，無菌過濾后分裝于容器中，經(jīng)冷凍干燥后，加塞密封，得到凍干藥盒；如果分裝的溶劑為西林瓶，則每支凍干藥盒還原劑用量為0.05mg～5mg，配體的含量為0.5mg～10mg。
將約18.5～185兆貝可(MBq)99mTcO4-淋洗液(從醫(yī)用99Mo-99mTc發(fā)生器獲得)加入凍干藥盒中，搖勻后室溫反應(yīng)5～20分鐘，得到產(chǎn)物為锝-99m標(biāo)記的二巰基丁二酸酯類配合物。
上述方法中，還原劑為SnCl2.2H2O、Na2S2O4或甲脒亞磺酸(FSA)，是將99mTc7+(99mTcO4-)還原為99mTc5+的常規(guī)化學(xué)試劑；賦形劑為甘露醇、葡萄糖、尿素；穩(wěn)定劑為維生素C，是為保護(hù)凍干藥盒中的還原劑以及決定凍干粉末外觀，且不影響最終配合物制備的化學(xué)物質(zhì)。
本發(fā)明提供的锝-99m標(biāo)記的二巰基丁二酸酯類配合物制法簡(jiǎn)單、成本低。生物試驗(yàn)結(jié)果表明其在小鼠腫瘤模型中有很高的攝取和很好的滯留，具有較高的靶/非靶比值，適合用作腫瘤顯像劑。
本發(fā)明提供了制備所述的锝氮核標(biāo)記的二巰基丁二酸酯類配合物的方法即用SDH(以SnCl2.2H2O為還原劑，丁二酰二酰肼SDH為N3-離子提供體)藥盒與放射性高锝酸鹽(99mTcO4-)室溫制備得到[99mTcN]2+中間體，然后與二巰基丁二酸酯配體發(fā)生配體交換反應(yīng)，即得到所述的放射性锝氮核標(biāo)記的二巰基丁二酸酯配合物。優(yōu)選锝氮配合物制備方法為下述的濕法 將高锝酸根99mTcO4-淋洗液(從醫(yī)用99Mo-99mTc發(fā)生器獲得)與SDH(以SnCl2.2H2O為還原劑，丁二酰二酰肼SDH為N3-離子提供體)藥盒室溫反應(yīng)20分鐘后，制備得到[99mTcN]2+中間體(按CN02156871.5制備)，然后與二巰基丁二酸酯配體溶液發(fā)生配體交換反應(yīng)，即得到所述的放射性锝氮核標(biāo)記的二巰基丁二酸酯配合物，所述的配體二巰基丁二酸酯為0.5-5mg/ml。
本發(fā)明提供的锝氮核標(biāo)記的二巰基丁二酸酯類配合物目前無文獻(xiàn)報(bào)道，該配合物制法簡(jiǎn)單、成本低。生物試驗(yàn)結(jié)果表明其在小鼠腫瘤模型中有一定的攝取和很好的滯留，具有較高的靶/非靶比值，適合用作腫瘤顯像劑。
本發(fā)明提供了制備所述的羰基锝標(biāo)記的二巰基丁二酸酯類配合物的方法即用還原劑、CO和99mTcO4-淋洗液75℃水浴加熱20分鐘后制備得到[99mTc(CO)3(H2O)3]+中間體，然后與二巰基丁二酸酯配體發(fā)生配體交換反應(yīng)，即得到所述的放射性羰基锝核標(biāo)記的二巰基丁二酸酯配合物。
優(yōu)選羰基锝配合物制備方法為下述的濕法 將高锝酸根99mTcO4-淋洗液(從醫(yī)用99Mo-99mTc發(fā)生器獲得)與碳酸鈉、酒石酸鉀鈉、硼氫化鈉、一氧化碳在75℃的水浴中持續(xù)加熱20分鐘，冷卻，然后與二巰基丁二酸酯配體發(fā)生配體交換反應(yīng)，即得到所述的放射性羰基锝核標(biāo)記的二巰基丁二酸酯配合物。
本發(fā)明提供的羰基锝標(biāo)記的二巰基丁二酸酯類配合物目前還無文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)，該配合物制法簡(jiǎn)單、成本低。生物試驗(yàn)結(jié)果表明其在小鼠腫瘤模型中有一定的攝取和很好的滯留，具有較高的靶/非靶比值，適合用作腫瘤顯像劑。



圖1至圖12為實(shí)例9中對(duì)四種中標(biāo)記化合物分別進(jìn)行荷H22型肝癌腹水瘤小鼠和荷Ca761乳腺癌615小鼠全身平面顯像結(jié)果。圖中(a)為H22肝癌腹水瘤小鼠模型；(b)為Ca761乳腺癌615小鼠模型。
圖1為99mTc(V)-DMSA(a)(黑白) 圖2為99mTc(V)-DMSEt(a)(黑白) 圖3為99mTcN-DMSEt(a)(黑白) 圖4為99mTcN-DMSEt2(a)(黑白) 圖5為99mTc(CO)3-DMSA(a)(黑白) 圖6為99mTc(CO)3-DMSEt(a)(黑白) 圖7為99mTc(V)-DMSA(b)(黑白) 圖8為99mTc(V)-DMSEt(b)(黑白) 圖9為99mTcN-DMSEt(b)(黑白) 圖10為99mTcN-DMSEt2(b)(黑白) 圖11為99mTc(CO)3-DMSA(b)(黑白) 圖12為99mTc(CO)3-DMSEt(b)(黑白)
具體實(shí)施例方式 以下通過具體的實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的特點(diǎn)。
實(shí)例1 本實(shí)例為配體二巰基丁二酸酯(DMSR/DMSR2)的制備 1.配制200ml 1mol/L鹽酸/ROH溶液利用乙酰氯與醇劇烈反應(yīng)能產(chǎn)生HCl的原理 CH3COCl+ROH→CH3COOR+HCl 制備濃度約為1mol/L當(dāng)量的鹽酸/ROH溶液。實(shí)踐證明該處理產(chǎn)生的酯類雜質(zhì)不參與反應(yīng)且在反應(yīng)物過濾處理時(shí)除去，不影響實(shí)驗(yàn)。
以鹽酸/甲醇(CH3OH)溶液為例，經(jīng)計(jì)算吸取約16ml經(jīng)重蒸處理的乙酰氯緩慢逐滴加入200ml色譜級(jí)甲醇中，邊滴加邊強(qiáng)烈攪拌混合均勻，用廣泛pH試紙測(cè)量pH值在2～3之間。
2.配體二巰基丁二酸酯(DMSR/DMSR2)的合成 將8.017gmeso-DMSA加入剛配置的200ml 1mol/L當(dāng)量的鹽酸/ROH溶液中，強(qiáng)烈攪拌加熱回流。反應(yīng)一段時(shí)間后，將反應(yīng)溶液冰鹽浴迅速冷卻至室溫，旋蒸除去大量ROH，再加入100ml蒸餾水，將所得懸濁液在0℃下冷凍一小時(shí)抽濾得固體，用4×15ml蒸餾水洗滌，在空氣中自然風(fēng)干，再把風(fēng)干后的固體中加入50ml氯仿中攪拌15分鐘以溶解DMSR2，將剩余懸濁液抽濾，濾液保留，固體濾渣用3×10ml氯仿洗滌自然風(fēng)干，濾液與前濾液合并保留。
將上述反應(yīng)所得濾液旋蒸除去溶劑CHCl3，得到白色固體，用無水甲醇重結(jié)晶，得到白色針狀晶體DMSR2 3.156g。
將反應(yīng)得到的白色固體濾渣用濾紙包裹置于索氏提取器中，配置70ml 20％乙腈和80％氯仿(v/v)混合溶劑用索氏提取器對(duì)該固體提取24小時(shí)。反應(yīng)停止后，將液體溶劑取出旋蒸出去大部分溶劑，剩余約35ml，靜置冷卻加入等量環(huán)己烷確保DMSR的完全沉淀，將所得沉淀過濾用3×20ml氯仿洗滌，風(fēng)干得到白色固體DMSR 1.217g。
以R為Me(甲基)、Et(乙基)為例，以下為二巰基丁二酸甲酯(DMSMe)、二巰基丁二酸雙甲酯(DMSMe2)、二巰基丁二酸乙酯(DMSEt)、二巰基丁二酸雙乙酯(DMSEt2＞的產(chǎn)率、沸點(diǎn)、及相關(guān)光譜確定數(shù)據(jù)。
表1 DMSMe、DMSMe2、DMSEt、DMSEt2的產(chǎn)率，沸點(diǎn)，及相關(guān)光譜確定 實(shí)例2 本實(shí)例為二巰基丁二酸酯凍干藥盒的制備(以制備100支為例) 稱取二巰基丁二酸酯DMSR/DMSR2 200mg溶于40ml pH10.0硼砂-氫氧化鈉緩沖溶液，加入Vc10mg(5mg/ml，2ml)，再加入含20mg SnCl2.2H2O的鹽酸溶液中(10mg/ml，2ml)，用pH10.0硼砂-氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為8.4～8.5之間。經(jīng)無菌過濾后分裝于100支青霉素小瓶中，然后置于冷凍干燥機(jī)中冷凍干燥24小時(shí)，加塞密封，得到凍干藥盒。當(dāng)二巰基丁二酸酯不同時(shí)可得到相應(yīng)的凍干藥盒。根據(jù)藥盒產(chǎn)量以及對(duì)每只藥盒中組分含量要求的不同，可調(diào)節(jié)SnCl2.2H2O、二巰基丁二酸的用量，使他們的重量比落在(0.1～10)∶(1～20)范圍內(nèi)。
實(shí)例3 本實(shí)例為90mTc-DMSMe的制備 1)濕法在0.5ml DMSMe溶液(4.0g/L)加入0.2mg SnCl2.2H2O的鹽酸溶液(10mg/ml，0.1ml)，用pH10.0硼砂-氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為8.4～8.5之間的西林瓶中，將約18.5～185兆貝可(MBq)99mTcO4-淋洗液(從醫(yī)用99Mo-99mTc發(fā)生器獲得)加入該瓶室溫反應(yīng)15分鐘，即得所需的99mTc-DMSMe 2)凍干法將約18.5～185兆貝可(MBq)99mTcO4-淋洗液(從醫(yī)用99Mo-99mTc發(fā)生器獲得)加入到DMSMe藥盒中，混勻后室溫反應(yīng)15分鐘，即得到所需的99mTc-DMSMe配合物。
實(shí)例4 本實(shí)例為99mTc-DMSMe2的制備 1)濕法在0.5ml DMSMe2溶液(4.0g/L)加入0.2mg SnCl2.2H2O的鹽酸溶液(10mg/ml，0.1ml)，用pH10.0硼砂-氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為8.4～8.5之間的西林瓶中，將約18.5～185兆貝可(MBq)99mTcO4-淋洗液(從醫(yī)用99Mo-99mTc發(fā)生器獲得)加入該瓶室溫反應(yīng)15分鐘，即得所需的99mTc-DMSMe2 2)凍干法將約18.5～185兆貝可(MBq)99mTcO4-淋洗液(從醫(yī)用99Mo-99mTc發(fā)生器獲得)加入到DMSMe2藥盒中，混勻后室溫反應(yīng)15分鐘，即得到所需的99mTc-DMSMe2配合物。
實(shí)例5 本實(shí)例為99mTc-DMSEt的制備 1)濕法在0.5ml DMSEt溶液(4.0g/L)加入0.2mg SnCl2.2H2O的鹽酸溶液(10mg/ml，0.1ml)，用pH10.0硼砂-氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為8.4～8.5之間的西林瓶中，將約18.5～185兆貝可(MBq)99mTcO4-淋洗液(從醫(yī)用99Mo-99mTc發(fā)生器獲得)加入該瓶室溫反應(yīng)15分鐘，即得所需的99mTc-DMSEt 2)凍干法將約18.5～185兆貝可(MBq)99mTcO4-淋洗液(從醫(yī)用99Mo-99mTc發(fā)生器獲得)加入到DMSEt藥盒中，混勻后室溫反應(yīng)15分鐘，即得到所需的99mTc-DMSEt配合物。
實(shí)例6 本實(shí)例為99mTc-DMSEt2的制備 1)濕法在0.5ml DMSEt2溶液(4.0g/L)加入0.2mg SnCl2.2H2O的鹽酸溶液(10mg/ml，0.1ml)，用pH10.0硼砂-氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為8.4～8.5之間的西林瓶中，將約18.5～185兆貝可(MBq)99mTcO4-淋洗液(從醫(yī)用99Mo-99mTc發(fā)生器獲得)加入該瓶室溫反應(yīng)15分鐘，即得所需的99mTc-DMSEt2 2)凍干法將約18.5～185兆貝可(MBq)99mTcO4-淋洗液(從醫(yī)用99Mo-99mTc發(fā)生器獲得)加入到DMSEt2藥盒中，混勻后室溫反應(yīng)15分鐘，即得到所需的99mTc-DMSEt2配合物。
實(shí)例7 本實(shí)例為99mTcN-DMSR，99mTcN-DMSR2的制備 1)[99mTcN]int2+中間體的制備。
將1.0mL99mTcO4-(約37MBq)加入到含有5.0mgSDH，5.0mgPDTA(1，2-丙二胺四乙酸)和0.05mg SnCl2.2H2O的凍干藥盒中，充分搖勻，置于室溫下反應(yīng)15min。
2)99mTcN-DMSR，99mTcN-DMSR2的制備 取0.2ml上述中間體溶液，用0.1mol/LHCl調(diào)節(jié)pH在2～3之間，將0.2ml 6mg/mlDMSA衍生物DMSR/DMSR2如DMSMe、DMSMe2、DMSEt、DMSEt2(含配體1mg)的生理鹽水溶液分別加入上述溶液中，室溫下反應(yīng)15min即得。
實(shí)例8 本實(shí)例為99mTc(CO)3-DMSR，99mTc(CO)3-DMSR2的制備 取4毫克碳酸鈉、15毫克酒石酸鉀鈉、10毫克硼氫化鈉裝入10毫升的青霉素小瓶，密封，然后通一氧化碳15分鐘，再注入0.5毫升99mTcO4-洗脫液(約18.5-185MBq)。在75℃的水浴中持續(xù)加熱20分鐘，制備得到羰基锝中間體，然后用1mol/L的稀鹽酸中和至中性，加入2mg/mlDMSR/DMSR2水溶液1ml。調(diào)節(jié)pH值在2-3之間。室溫放置15分鐘左右，即得。
實(shí)例9 本實(shí)例為對(duì)99mTc-DMSR/99mTc-DMSR2、99TcmN-DMSR/99TcmN-DMSR2、99mTc(CO)3-DMSR/99mTc(CO)3-DMSR2的性能測(cè)定。
1.層析鑒定 1)99mTc-DMSR/99mTc-DMSR2的層析鑒定(結(jié)果見表2-5) 99mTc-DMSR用生理鹽水為展開劑，聚酰氨薄片為載體如表由此可將產(chǎn)物99mTc-DMSR與99mTcO4-、99mTcO2.nH2O、99mTc-Sn膠體分開，并以此計(jì)算產(chǎn)物的放射化學(xué)純度。
表2 99mTc-DMSR的層析鑒定 99mTc-DMSR2用乙腈為展開劑，聚酰氨薄片為載體，如表由此可將產(chǎn)物99mTc-DMSR2與99mTcO4-、99mTcO2.XH2O、99mTc-Sn膠體分開，并以次計(jì)算產(chǎn)物的放射化學(xué)純度。
表3 99mTc-DMSR2的層析鑒定 2)對(duì)99TcmN-DMSR/99TcmN-DMSR2的層析鑒定描述如下 表4 99TcmN-DMSR/99TcmN-DMSR2的層析鑒定結(jié)果 3)對(duì)99mTc(CO)3-DMSR/99mTc(CO)3-DMSR2的層析鑒定描述如下用乙腈為展開劑，聚酰氨薄片為載體 表5 99mTc(CO)3-DMSR/99mTc(CO)3-DMSR2的層析鑒定結(jié)果 2.脂水分配系數(shù)的測(cè)定(結(jié)果見表6-7) 配好靜置一天的正辛醇-PBS液中，先取上層正辛醇2ml，再用長(zhǎng)針頭注射器取下層PBS液1.9ml加入同一只離心試管中，最后取0.1ml按實(shí)施例制備好放射化學(xué)純度大于95％的99mTc-DMSR、99mTc-DMSR2；99TcmN-DMSR、99TcmN-DMSR2配合物溶液加入這只離心試管，用渦旋混合器振蕩3～5分鐘，充分混勻，體系達(dá)到平衡，再放入離心沉淀器中離心5分鐘，使水相和有機(jī)相分開，在有機(jī)相和水相中分別平行取3個(gè)樣，每個(gè)樣0.3ml，用井型γ計(jì)數(shù)器測(cè)量其放射性活度，每個(gè)樣品平行做3次脂水分配系數(shù)測(cè)定。
表6 99mTc-DMSR/99mTc-DMSR2(RMe、Et)衍生物脂水分配系數(shù)測(cè)定值 表7 99mTcN-DMSR/99mTcN-DMSR2(RMe、Et)衍生物脂水分配系數(shù)測(cè)定值 3.99mTc-DMSR/99mTc-DMSR2、99mTcN-DMSR/99mTcN-DMSR2、99mTc(CO)3-DMSR/99mTc(CO)3-DMSR2的體外穩(wěn)定性測(cè)定 分別將按實(shí)施例制備好的99mTc-DMSR/99mTc-DMSR2、99mTcN-DMSR/99mTcN-DMSR2、99mTc(CO)3-DMSR/99mTc(CO)3-DMSR2(R＝Me、Et)配合物溶液在室溫下放置不同時(shí)間(1、2、3、4、5和6小時(shí))，然后進(jìn)行點(diǎn)樣層析分析，計(jì)算放射化學(xué)純度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明99mTc-DMSR/99mTc-DMSR2、99mTcN-DMSR/99mTcN-DMSR2、99mTc(CO)3-DMSR/99mTc(CO)3-DMSR2在室溫下可穩(wěn)定存在6小時(shí)以上，其外觀和放射化學(xué)純度均無明顯變化。
4.99mTc-DMSR/99mTc-DMSR2、99mTcN-DMSR/99mTcN-DMSR2、99mTc(CO)3-DMSR/99mTc(CO)3-DMSR2(以R為Me、Et為例)在小鼠體內(nèi)生物分布(結(jié)果見表8-10) 將實(shí)施3-9分別制備好放射化學(xué)純度大于95％的99mTc-DMSR/99mTc-DMSR2、99mTcN-DMSR/99mTcN-DMSR2、99mTc(CO)3-DMSR/99mTc(CO)3-DMSR2(R甲基、乙基)，溶液，從正常昆明小鼠(18～22g)，尾靜脈注射0.1ml(30μCi)的劑量，在注射后兩小時(shí)將其斷頸處死，取血及腦、心、肝、肺、脾、腎、骨、肌肉等臟器和組織，用吸血紙擦靜后稱重，并在γ計(jì)數(shù)儀上測(cè)定放射性技術(shù)，計(jì)算各單位質(zhì)量組織的攝取劑量占總注射劑量的百分?jǐn)?shù)(ID％/g)。百分之一注射劑量的計(jì)算是取0.1ml(注射量)配合物溶液，稀釋至100倍后(加入9.9ml)分別取0.1ml于三只試管中，在測(cè)量組織放射性計(jì)數(shù)的同時(shí)測(cè)量其放射性計(jì)數(shù)，百分之一劑量為3只試管放射性計(jì)數(shù)的平均值。
表8 各標(biāo)記化合物正常小鼠單位質(zhì)量組織劑量分布(

Time＝120min，n＝3) 由上述初步的正常小鼠體內(nèi)代謝實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及圖表分析可以看出，正常小鼠靜脈注射后120min四種新的锝標(biāo)記DMSA衍生物99mTc(V)-DMSMe、99mTc(V)-DMSMe2、99mTc(V)-DMSEt、99mTc(V)-DMSEt2對(duì)比99mTc(V)-DMSA肝攝取及肝/血依次增加，骨攝取及骨/血顯著降低，表明在99mTc(V)-DMSA中引入酯基能顯著降低骨攝取，初步肯定了我們?cè)O(shè)計(jì)這類化合物作為軟組織腫瘤顯像劑與99mTc(V)-DMSA軟組織腫瘤顯像劑相比較骨干擾會(huì)降低的設(shè)計(jì)思路，值得進(jìn)一步研究。
表9 99mTc(V)-DMSA、99mTc-DMSEt、99mTc-DMSEt2、99mTcN-DMSEt(pH＝8～9)各單位質(zhì)量組織劑量分布(

n＝5) 99mTc(V)-DMSA骨攝取和腎攝取較高，并且在靜脈注射后30min-3h骨攝取及骨/血持續(xù)增加，作為軟組織腫瘤顯像劑會(huì)對(duì)其顯像軟組織腫瘤帶來不可避免的骨干擾。按半小時(shí)的ID％/g排列順序?yàn)楣恰⒛I、血、肺、肝、心、肉、脾，可見99mTc(V)-DMSA主要通過腎和泌尿系統(tǒng)排泄； 99mTc(V)-DMSEt2與99mTc(V)-DMSA相比，肝及肝/血顯著增高，血攝取顯著增高，腎攝取顯著增加，腎/血降低，骨攝取及骨/血顯著降低； 99mTc(V)-DMSEt與99mTc(V)-DMSA相比，肝及肝/血顯著增高，血攝取顯著增高，腎攝取增加，腎/血降低；骨攝取及骨/血顯著低于99mTc(V)-DMSA； 與99mTc(V)-DMSA、99mTc(V)-DMSEt、99mTc(V)-DMSEt2相同pH值條件下制備的99mTcN-DMSEt(pH＝8～9)的肝及肝/血均高于99mTc(V)-DMSA，骨攝取及骨/血顯著降低，其他臟器代謝與99mTc(V)-DMSA基本類似。
正常小鼠體內(nèi)生物分布實(shí)驗(yàn)結(jié)果達(dá)到設(shè)計(jì)時(shí)預(yù)想的降低軟組織腫瘤顯像劑99mTc(V)-DMSA骨干擾的目的，為進(jìn)行荷瘤小鼠的生物分布實(shí)驗(yàn)提供了前提和打下了基礎(chǔ)。
表10 99mTcN-DMSEt、99mTcN-DMSEt2正常小鼠體內(nèi)各單位質(zhì)量組織劑量分布 (

Time＝120min，n＝5) 由上述初步的正常小鼠體內(nèi)代謝實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及圖表分析可以看出，正常小鼠靜脈注射120分鐘后99mTcN-DMSEt、99mTcN-DMSEt2的肝攝取和腎攝取較高，99mTcN-DMSEt2肝攝取比99mTcN-DMSEt顯著增高且高于腎攝取。兩種標(biāo)記化合物的骨攝取都較低 5.99mTc-DMSR/99mTc-DMSR2、99mTcN-DMSR/99mTcN-DMSR2、99mTc(CO)3-DMSR/99mTc(CO)3-DMSR2(REt)在荷瘤小鼠模型體內(nèi)生物分布 (1)取標(biāo)記化合物99mTc(V)-DMSA、99mTc(V)-DMSEt從荷H22型肝癌腹水瘤小鼠模型尾靜脈注射0.1ml(50μCi)的劑量，在注射后4小時(shí)，6小時(shí)各處死五只，取血及心、肝、肺、脾、腎、骨、肌肉和腫瘤等主要組織器官，用吸血紙擦靜后稱重，并在γ計(jì)數(shù)儀上測(cè)定放射性技術(shù)，計(jì)算各單位質(zhì)量組織的攝取劑量占總注射劑量的百分?jǐn)?shù)(ID％/g)。百分之一注射劑量的計(jì)算是取0.1ml(注射量)配合物溶液，稀釋至100倍后(加入9.9ml)分別取0.1ml于三只試管中，在測(cè)量組織放射性計(jì)數(shù)的同時(shí)測(cè)量其放射性計(jì)數(shù)，百分之一劑量為3只試管放射性計(jì)數(shù)的平均值。99mTcN-DMSEt由于荷瘤小鼠數(shù)量有限，只于注藥后6小時(shí)處死5只。
(2)取標(biāo)記化合物99mTc(V)-DMSA、99mTc(V)-DMSEt、99mTcN-DMSEt從荷Ca76 1乳腺癌615小鼠模型尾靜脈注射0.1ml(50μCi)的劑量，在注射后4小時(shí)各處死五只，取血及心、肝、肺、脾、腎、骨、肌肉和腫瘤等主要組織器官，用吸血紙擦靜后稱重，并在γ計(jì)數(shù)儀上測(cè)定放射性技術(shù)，計(jì)算各單位質(zhì)量組織的攝取劑量占總注射劑量的百分?jǐn)?shù)(結(jié)果見表11) 表11 99mTc(V)-DMSA、99mTc(V)-DMSEt、99mTcN-DMSEt在荷H22型肝癌腹水瘤小鼠模型體內(nèi)生物分布結(jié)果(

n＝5) 99mTc(V)-DMSA在腎和骨中的攝取較它在其他臟器中的攝取最高，其中骨攝取非常高，這就對(duì)它顯像腫瘤造成了非常重大的干擾。99mTc(V)-DMSEt肝攝取和腎攝取較高，并且較其他臟器而言，肝攝取最高，骨攝取遠(yuǎn)小于99mTc(V)-DMSA，能顯著降低顯像腫瘤時(shí)的骨干擾，同時(shí)99mTc(V)-DMSEt在4h的腫瘤攝取要高于99mTc(V)-DMSA，6小時(shí)與99mTc(V)-DMSA基本一致，說明論文對(duì)DMSA的改進(jìn)并沒有降低腫瘤攝取，是可喜的現(xiàn)象之一。
同時(shí)99mTc(V)-DMSEt血攝取比其他兩個(gè)標(biāo)記化合物99mTc(V)-DMSA、99mTcN-DMSEt都要高，這就使得瘤/骨、瘤/肉雖然都高于其他兩個(gè)標(biāo)記化合物，但瘤/血比卻較低，是值得進(jìn)一步研究和改進(jìn)的方向。
99mTcN-DMSEt在肝和腎中的攝取很高，并且腎的攝取高于99mTc(V)-DMSA，在這三個(gè)標(biāo)記化合物中它的腫瘤攝取值是最低的，但后續(xù)SPECT顯像結(jié)果效果要好于99mTc(V)-DMSA，可能主要是因?yàn)楣歉蓴_降低的原因。
(3)99mTc(V)-DMSA、99mTc(V)-DMSEt、99mTcN-DMSEt在荷Ca761乳腺癌小鼠模型體內(nèi)生物分布結(jié)果如表12所示 表12 99mTc(V)-DMSA、99mTc(V)-DMSEt、99mTcN-DMSEt在荷H22型肝癌腹水瘤小鼠模型體內(nèi)生物分布結(jié)果(

n＝5) 99mTc(V)-DMSA在腎和骨中的攝取較它在其他臟器中的攝取最高，其中骨攝取非常高，導(dǎo)致瘤/腎，瘤/骨均小于1，對(duì)它顯像腫瘤造成了非常重大的干擾。本發(fā)明的99mTc(V)-DMSEt肝攝取和腎攝取較高，并且較其他臟器而言，肝攝取最高，骨攝取遠(yuǎn)小于99mTc(V)-DMSA，能顯著降低顯像腫瘤時(shí)的骨干擾，同時(shí)99mTc(V)-DMSEt在這種腫瘤模型小鼠中的生物分布結(jié)果表明4h的腫瘤攝取要高于99mTc(V)-DMSA同時(shí)99mTc(V)-DMSEt血攝取比其他兩個(gè)標(biāo)記化合物99mTc(V)-DMSA、99mTcN-DMSEt都要高，這就使得瘤/骨雖然較高但瘤/血卻較低，是值得進(jìn)一步研究和改進(jìn)的方向同時(shí)瘤/肝小于1。
99mTcN-DMSEt在肝和腎中的攝取很高，并且腎的攝取高于99mTc(V)-DMSA，在荷Ca761乳腺癌615小鼠模型中它的腫瘤攝取值高于99mTc(V)-DMSA。
6.99mTc(V)-DMSA、99mTc(V)-DMSEt、99mTcN-DMSEt、99mTcN-DMSEt2腫瘤模型顯像 取荷H22肝癌腹水瘤小鼠模型和荷Ca761乳腺癌615小鼠模型各一只四組，分別從尾靜脈注入0.2ml，約1mCi的99mTc(V)-DMSA、99mTc(V)-DMSEt、99mTcN-DMSEt，99mTcN-DMSEt2，將小鼠捆綁，仰臥位固定，于注藥后4.5小時(shí)置SPECT顯像；采集條件能峰140Kev、窗寬20％、矩陣256×256、放大倍數(shù)3.2倍、每只小鼠采集計(jì)數(shù)200萬，顯像后處死，解剖。取心、肝、肺、脾、腎、骨、肌肉和腫瘤等主要組織器官，用吸血紙擦靜后稱重，并在γ計(jì)數(shù)儀上測(cè)定放射性技術(shù)，計(jì)算各單位質(zhì)量組織的攝取劑量占總注射劑量的百分?jǐn)?shù)(ID％/g)。
腫瘤模型顯像結(jié)果 (1)對(duì)四種標(biāo)記化合物99mTc(V)-DMSA、99mTc(V)-DMSEt、99mTcN-DMSEt、99mTcN-DMSEt2分別進(jìn)行了荷H22型肝癌腹水瘤小鼠和荷Ca761乳腺癌615小鼠全身平面顯像。結(jié)果如圖1至圖12所示。
(2)將上述用于SPECT全身平面顯像的荷H22肝癌腹水瘤小鼠模型及荷Ca761乳腺癌615小鼠模型于顯像后處死(注射后4.5h)后解剖，所得生物數(shù)據(jù)如表13-14所示 表1399mTc(V)-DMSA、99mTc(V)-DMSEt、99mTcN-DMSEt、99mTcN-DMSEt2荷H22肝癌腹 水瘤小鼠模型SPECT全身平面顯像后解剖體內(nèi)生物分布數(shù)據(jù)(ID％/g，Time＝4.5h) 結(jié)論 99mTc(V)-DMSA在腫瘤組織中有一定的攝取，在腎和骨中的攝取較它在其他臟器中的攝取最高瘤/腎＜1，瘤/骨＜1，99mTc(V)-DMSEt腫瘤攝取值高于其他三種標(biāo)記化合物，在肝中的攝取最高，腎攝取也較高，瘤/肝＜1，瘤/腎＜1。99mTcN-DMSEt腫瘤攝取低于99mTc(V)-DMSA，在肝和腎中的攝取很高腎攝取高于99mTc(V)-DMSA，瘤/肝＜1，瘤/腎＜1，瘤/肺＜1，99mTcN-DMSEt2腫瘤攝取值最低，在肝和腎中的攝取很高，瘤/肝＜1，瘤/腎＜1，瘤/肺＜1腫瘤顯像結(jié)果表明 99mTc(V)-DMSA在瘤體部位顯影不明顯但解剖數(shù)據(jù)中在腫瘤部位有一定的攝取。由于骨攝取高，導(dǎo)致全身放射性本底較高。
99mTc(V)-DMSEt在瘤體部位放射性濃聚明顯，肝、雙腎及膀胱均有顯影。99mTcN-DMSEt在瘤體部位放射性濃聚明顯，肝、雙腎顯影明顯，其他部位本底較低。
99mTcN-DMSEt2在瘤體部位放射性有一定的放射性濃集。肝、雙腎顯影明顯，其他部位本底很低。
表14 99mTc(V)-DMSA，99mTc(V)-DMSEt，99mTcN-DMSEt，99mTcN-DMSEt2荷Ca761乳腺癌小鼠模型SPECT全身平面顯像后解剖體內(nèi)生物分布數(shù)據(jù)(ID％/g，Time＝4.5h) 99mTc(V)-DMSA在腫瘤組織中有一定的攝取，在腎和骨中的攝取較它在其他臟器中的攝取最高瘤/肝＜1、瘤/腎＜1、瘤/骨＜1，99mTc(V)-DMSEt腫瘤攝取值高于其他三種標(biāo)記化合物，在肝中的攝取最高，腎攝取也較高，瘤/肝＜1。99mTcN-DMSEt腫瘤攝取低于99mTc(V)-DMSA，在肝和腎中的攝取很高腎攝取高于99mTc(V)-DMSA，瘤/肝＜1，瘤/腎＜1，99mTcN-DMSEt2腫瘤攝取值最低，在肝和腎中的攝取很高，瘤/肝＜1，瘤/腎＜1，瘤/肺＜1。解剖結(jié)果與SPECT顯像結(jié)果基本一致，Ca761模型小鼠腫瘤顯像結(jié)果表明 99mTc(V)-DMSA在瘤體部位有一定的放射性濃集，但由于骨攝取高，導(dǎo)致全身放射性本底較高。
99mTc(V)-DMSEt得到了非常好的顯像圖形，放射性絕大部分濃集于瘤體部位和肝，其他部位放射性本底非常低。而解剖數(shù)據(jù)也驗(yàn)證了這一點(diǎn)99mTc(V)-DMSEt腫瘤攝取(％ID/g)為0.71，是99mTc(V)-DMSA0.39的1.87倍，瘤/骨為5.07，是99mTc(V)-DMSA瘤/骨0.23的22.04倍，說明在該種模型小鼠實(shí)驗(yàn)中，DMSA中引入乙基能顯著降低骨攝取，同時(shí)腫瘤攝取不但并沒有受到影響，反而有所增加，得到了非常好的腫瘤顯像圖形。
99mTcN-DMSEt在瘤體部位放射性濃聚明顯，肝、雙腎顯影明顯，其他部位本底較低。
99mTcN-DMSEt2在瘤體部位放射性有一定的放射性濃集。肝、雙腎顯影明顯，其他部位本底較低。
從數(shù)據(jù)可以看出99mTc(V)-DMSEt在腫瘤攝取要高于其他三種標(biāo)記化合物的情況下，其他臟器的攝取值較低，導(dǎo)致放射性本底較低，這使得它得到腫瘤顯像效果圖。
可見在DMSA中引入酯基能顯著降低骨攝取，從而降低了骨攝取對(duì)于腫瘤顯像的干擾，同時(shí)這一改進(jìn)并沒有影響標(biāo)記化合物在腫瘤中的攝取，得到了較好的腫瘤顯像圖形，這一顯像結(jié)果與解剖數(shù)據(jù)相符。
這兩種模型小鼠SPECT全身平面顯像結(jié)果及解剖數(shù)據(jù)對(duì)比亦表明，選擇荷Ca761乳腺癌小鼠模型進(jìn)行DMSA類配體標(biāo)記化合物腫瘤攝取研究效果比荷H22肝癌腹水瘤模型小鼠效果更好。
根據(jù)配合物在腫瘤模型小鼠體內(nèi)的顯像結(jié)果，認(rèn)為其具有發(fā)展為新型腫瘤顯像劑的潛質(zhì)。99mTc-DMSR/99mTc-DMSR2、99mTcN-DMSR/99mTcN-DMSR2、99mTc(CO)3-DMSR/99mTc(CO)3-DMSR2是本發(fā)明人研制出的一類新的99mTc標(biāo)記的二巰基丁二酸酯類配合物，與現(xiàn)有的99mTc-DMSA的化學(xué)組份不同，其中配體DMSR/DMSR2，R為C1～C5烷基或環(huán)己基；特別是當(dāng)R為Et時(shí)，配合物表現(xiàn)出優(yōu)良的生物性能，在腫瘤中有較高的攝取，除放射性絕大部分濃集于瘤體部位和肝臟，其他部位本底很低。與現(xiàn)有的軟組織腫瘤顯像劑99mTc-DMSA的明顯不同之處在于后者的骨攝取非常高造成很大的干擾，而本發(fā)明最突出的優(yōu)點(diǎn)是克服了99mTc-DMSA的不足之處，骨攝取非常低，99mTc(V)-DMSEt在荷Ca761乳腺癌615小鼠模型中得到了非常好的平面顯像效果和生物分布結(jié)果，除放射性絕大部分濃集于瘤體部位和肝臟，其他部位本底很低。DMSR/DMSR2，均為有機(jī)小分子，合成簡(jiǎn)單，標(biāo)記方法成熟且容易得到高放射化學(xué)純度的配合物，存放時(shí)間長(zhǎng)，價(jià)格低廉。
本發(fā)明所述的配合物為新的锝-99m標(biāo)記二巰基丁二酸類配合物。從小鼠的生物分布數(shù)據(jù)來看，本發(fā)明所述的配合物，特別是99mTc(V)-DMSEt、99mTcN-DMSEt的生物性能優(yōu)良，有望發(fā)展為一類具有我國自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的锝-99m標(biāo)記腫瘤顯像劑。
該類配合物能在室溫下穩(wěn)定存在6小時(shí)以上為其臨床上應(yīng)用打下基礎(chǔ)；生物分布實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該類配合物在腫瘤模型小鼠流體組織中有很高的攝取和很好的滯留，而且非靶本底尤其是骨本底的攝取較99mTc-DMSA顯著降低，具有較高的靶/非靶比值。初步的SPECT顯像實(shí)驗(yàn)支持了生物分布實(shí)驗(yàn)結(jié)果，表明該類配合物具有用于腫瘤顯像的潛質(zhì)。
因此，本發(fā)明的放射性锝-99m標(biāo)記二巰基丁二酸類配合物其具有制法簡(jiǎn)單，成本低，效果好的優(yōu)點(diǎn)，可望成為一種具有良好前景的新型腫瘤顯像劑。
權(quán)利要求
1.一類放射性锝-99m標(biāo)記的二巰基丁二酸酯類配合物，其特征在于，以99mTc(V)、99mTcN(II)、99mTc(I)(CO)3為中心核，與其配位的是二巰基丁二酸酯類配體，其結(jié)構(gòu)式分別為[99mTcO(DMSR)2]-/[99mTcO(DMSR2)2]-、[99mTcN(DMSR2)2]2-/[99mTcN(DMSR2)2]2-、[99mTc(CO)3(DMSR)2]/[99mTc(CO)3(DMSR2)2]，其中用式DMSR/DMSR2表示的配體中R為C1～C5烷基或環(huán)己基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的放射性锝-99m標(biāo)記的二巰基丁二酸酯類配合物，其特征在于，所述的C1～C5烷基是指具有1～5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、叔丁基、戊基在內(nèi)的任一種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的放射性锝-99m標(biāo)記的二巰基丁二酸酯類配合物，其特征在于R為甲基或乙基。
4.權(quán)利要求1所述的放射性锝-99m標(biāo)記的二巰基丁二酸酯類配合物的制備方法，其特征在于按下列濕法制備
將高锝酸根99mTcO4-淋洗液、還原劑與二巰基丁二酸酯配體室溫反應(yīng)20分鐘后，得到產(chǎn)物锝-99m標(biāo)記的二巰基丁二酸酯配合物，所述的還原劑與二巰基丁二酸酯配體的重量比為(0.1～10)∶(1～20)。
5.權(quán)利要求1所述的放射性锝-99m標(biāo)記的二巰基丁二酸酯類配合物的制備方法，其特征在于，按下述凍干法制備
(1)將還原劑、賦形劑、穩(wěn)定劑和二巰基丁二酸酯配體DMSR/DMSR2，按(0.1～10)∶(20～100)∶(1～20)∶(1～20)的重量比溶于充氮二次水中，無菌過濾后分裝于容器中，經(jīng)冷凍干燥后，加塞密封，得到凍干藥盒；
(2)將18.5～185兆貝可(MBq)99mTcO4-淋洗液加入到DMSR/DMSR2藥盒中，混勻后室溫反應(yīng)15分鐘，即得到所需的99mTc-DMSR/99mTc-DMSR2配合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述的分裝容器為西林瓶，每只凍干藥盒還原劑用量為0.05mg～5mg，配體的含量為0.5mg～50mg。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述的還原劑為SnCl2.2H2O、Na2S2O4或甲脒亞磺酸，所述的賦形劑為甘露醇、葡萄糖或尿素，所述的穩(wěn)定劑為維生素C。
8.權(quán)利要求1所述配合物的制備方法，其特征在于所述的锝氮標(biāo)記的二巰基丁二酸之類配合物的制備過程如下用SDH(以SnCl2.2H2O為還原劑，丁二酰二酰肼SDH為N3-離子提供體)藥盒與放射性高锝酸鹽(99mTcO4-)室溫制備得到[99mTcN]2+中間體，然后與二巰基丁二酸酯配體發(fā)生配體交換反應(yīng)，即得到所述的放射性锝氮核標(biāo)記的二巰基丁二酸酯配合物。優(yōu)選锝氮制備方法為下述的濕法
將高锝酸根99mTcO4-淋洗液(從醫(yī)用99Mo-99mTc發(fā)生器獲得)、與SDH(以SnCl2.2H2O為還原劑，丁二酰二酰肼SDH為N3-離子提供體)藥盒室溫反應(yīng)20分鐘后，制備得到[99mTcN]2+中間體，然后與二巰基丁二酸酯配體溶液發(fā)生配體交換反應(yīng)，即得到所述的放射性锝氮核標(biāo)記锝二巰基丁二酸酯配合物。
9.權(quán)利要求1所述配合物的制備方法，其特征在于所述的羰基锝標(biāo)記的二巰基丁二酸酯類配合物的制備過程用還原劑、CO和99mTcO4-淋洗液75℃水浴加熱20分鐘后制備得到[99mTc(CO)3(H2O)3]+中間體，然后與二巰基丁二酸酯配體發(fā)生配體交換反應(yīng)，即得到所述的放射性羰基锝核標(biāo)記的二巰基丁二酸酯配合物，優(yōu)選羰基锝制備方法為下述的濕法
將高锝酸根99mTcO4-淋洗液(從醫(yī)用99Mo-99mTc發(fā)生器獲得)、與碳酸鈉、酒石酸鉀鈉、硼氫化鈉，一氧化碳在75℃的水浴中持續(xù)加熱20分鐘，冷卻，然后與二巰基丁二酸酯配體發(fā)生配體交換反應(yīng)，即得到所述的放射性羰基锝核標(biāo)記的二巰基丁二酸酯配合物。
10.權(quán)利要求1所述的放射性锝-99m標(biāo)記的二巰基丁二酸酯類配合物在制備腫瘤顯像劑中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明是一類锝－99m標(biāo)記的二巰基丁二酸酯類配合物及其制備方法和應(yīng)用，其特點(diǎn)是配合物，以99mTc(V)、99mTcN(22)、99mTc(I)(CO)3為中心核，與其配位的二巰基丁二酸酯類配體，用式DMSR/DMSR2表示，其中R為C1～C5烷基或環(huán)己基。本發(fā)明配合物是按濕法或凍干法制備，用作腫瘤顯像劑，具有制備簡(jiǎn)單、價(jià)格便宜以及靶/非靶比值較高的優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)C07C323/00GK101085787SQ200610087330
公開日2007年12月12日 申請(qǐng)日期2006年6月8日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月8日
發(fā)明者王學(xué)斌, 易鵬, 張現(xiàn)忠, 張俊波, 陸潔, 唐志剛, 楊樹業(yè) 申請(qǐng)人:北京師范大學(xué)