專利名稱：抑制TNF－α形成的2－環(huán)戊烯－1－酮肟衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一類體外和體內(nèi)強效抑制TNF-α之形成的化合物。本發(fā)明還涉及此等化合物或其藥物學(xué)可接受的鹽在經(jīng)由TNF-α介導(dǎo)的炎性疾病和免疫學(xué)疾病中的治療性應(yīng)用。
背景技術(shù)：
腫瘤壞死因子-alpha(TNF-α)是一種在數(shù)十年前發(fā)現(xiàn)的前炎性細(xì)胞因子。TNF-α是由多種類型的細(xì)胞在應(yīng)答炎性和免疫刺激時產(chǎn)生的[Trends Cell.Biol.vol 5，392-399(1995)]。例如，用脂多糖(LPS)處理的單核細(xì)胞顯著增加了TNF-α的形成。雖然TNF-α通過凋亡使腫瘤縮小也是已知的，但其在炎癥和免疫學(xué)中扮演著中心角色的作用。
在多種免疫學(xué)疾病中已觀察到存在有大量的TNF-α，所述疾病包括但不限于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、濕疹、Crohn病、慢性阻塞性肺病(COPD)、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、膿毒癥、內(nèi)毒素休克、多發(fā)性硬化、慢性肝炎等[J.Med.Chem.vol 42，2295-2314(1999)；Am.J.Respir.Crit.Care Med.vol 153，633-637(1996)；Lupus vol 11，102-108(2002)；Hepatogastroenterology.vol 47，1675-1679(2000)]。
如使用英夫利昔單抗(RemicadeTM)和阿達木單抗(HumiraTM)時可以看到的，已發(fā)現(xiàn)用TNF-α單克隆抗體阻斷或中和TNF-α活性可有效治療免疫學(xué)疾病，包括但不限于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、關(guān)節(jié)強直性脊椎炎、Crohn病以及牛皮癬關(guān)節(jié)炎[RemicadeTM(英夫利昔單抗)Prescribing Information.Centocor Inc.September 2005；HumiraTM(阿達木單抗)Prescribing Information.Abbott Lab.October 2005]。依那西普(EnbrelTM)是一種融合蛋白，其具有用于TNF-α的誘餌受體部分，并因此可中和TNF-α的生物活性。依那西普在美國可用于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、關(guān)節(jié)強直性脊椎炎、牛皮癬、以及牛皮癬關(guān)節(jié)炎[EnbrelTM(依那西普)Prescribing Information.Immunex Corporation.July2005]。這些蛋白藥物目前僅能夠以注射制劑得到。
到目前為止，已知許多生物目標(biāo)可抑制的TNF-α細(xì)胞形成。Pro-TNF-α被TNF-α轉(zhuǎn)化酶(TACE)斷裂為活性、可溶形式的TNF-α[Nature vol 385，729-733(1997)]。cAMP胞質(zhì)水平的增加可降低TNF-α的形成。因為抑制磷酸二酯酶4(PDE4)可增加cAMP的胞質(zhì)水平，所以諸如咯利普蘭、cilomilast和羅氟司特的PDE4抑制劑減弱TNF-α的形成[Curr.Pharm.Design vol 8，1255-1296(2002)]。腺苷受體A2a與腺苷酸環(huán)化酶偶聯(lián)，而且其激動劑如CGS21680和NECA抑制TNF-α的合成[DrugDevel.Res.vol 45，103-112(1998)]。已知諸如NIK、IKK和PKB的在NF-κB的信號傳遞中涉及的激酶壓抑TNF-α的形成，如果有抑制的話。IKK抑制劑如BMS-345541阻斷IκB上的磷酸化作用并抑制NFκKB依賴性的轉(zhuǎn)錄[J.Biol.Chem.vol 278，1450-1456(2003)]。已知5-氨基水楊酸在對于炎性腸疾病(IBD)而言治療相關(guān)的劑量下抑制IKK。還已知阿司匹林(一種傳統(tǒng)的非甾體抗炎藥)在高劑量水平下抑制IKK[Nature vol396，77-80(1998)]。抑制MAP激酶如p38和c-Jun N-端激酶(JNK)可壓抑TNF-α的形成。p38抑制劑如VX-745和SB203580在用LPS處理的細(xì)胞中抑制TNF-α形成，并且在用于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的動物模型中顯示了治療作用[Curr.Opin.Investig.Drugs vol 5，566-571(2003)]。Thalidomide適用于系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)，但是thalidomide在細(xì)胞水平上較弱地抑制TNF-α的合成。似乎thalidomide使TNF-αmRNA失去穩(wěn)定，降低了TNF-α的形成[Clin.Exp.Immunol.vol 110，151-154(1997)]。甾體也強效地抑制TNF-α的形成[J.Exp.Med.vol 172，391-394(1990)]。
由于認(rèn)為TNF-α在炎癥和免疫學(xué)中扮演著中心角色，所以抑制TNF-α的生物活性或形成的藥物被期望在以下各種疾病中具有治療作用類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、牛皮癬關(guān)節(jié)炎、特應(yīng)性皮炎、包括潰瘍性結(jié)腸炎和Crohn病的炎性腸病、關(guān)節(jié)強直性脊椎炎、膿毒癥、肝炎、多發(fā)性硬化、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、慢性阻塞性肺病(COPD)、內(nèi)毒素休克、I型糖尿病等。發(fā)現(xiàn)一些類型的藥物對于一些疾病比其他的更為有效，這取決于作用模式以及它們的生化性質(zhì)。已廣泛研制PDE4抑制劑如羅氟司特和cilomilast用于COPD中。另一方面，抗-TNF-α生物制品原是適用于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，而且它們的適應(yīng)癥正擴展至包括關(guān)節(jié)強直性脊椎炎、牛皮癬和Crohn病。5-氨基水楊酸以及柳氮磺吡啶用于治療中度至輕度的炎性腸疾病，而甾體和抗-TNF-α生物制劑則適用于嚴(yán)重的情況。已有人試圖通過使用PDE4抑制劑來治療炎性腸病[Ann.Rev.Med.Chem.vol 38，141-152(2003)]。雖然p38抑制劑如VX-702已被評估對人類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的作用，但是它們的治療作用對于MAP激酶抑制劑仍有待確認(rèn)[Curr.Opin.Drug Discov.Devel.vol 8，421-430(2005)]。甾體藥物原來對于各種免疫學(xué)疾病是有效的，然而由于副作用強烈地限制了這些藥物的長期使用。
雖然抗-TNF-α的生物制品如英夫利昔單抗、阿達木單抗和依那西普廣泛用于治療免疫學(xué)疾病如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和牛皮癬，但是這些蛋白藥物由于價格昂貴以及需要注射給藥而前景暗淡。在此方面，由于費用以及避免注射的便利性，強烈需要抑制TNF-α作用和形成的小分子。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供涉及以下技術(shù)方案式I表示的2-環(huán)戊烯-1-酮肟衍生物或其藥物學(xué)可接受的鹽或其組合物，以及它們在由TNF-α或PDE4介導(dǎo)的炎性疾病和免疫學(xué)疾病方面的治療作用。本發(fā)明還提供用于合成該式I化合物的方法。
在本發(fā)明的一個實施方案中，提供以下的式I化合物，其中R1代表直鏈或支鏈C1-C10烷基或C3-C7環(huán)烷基；以及R2代表有或沒有取代基的芳香基團。
在本發(fā)明的另一個實施方案中，式I的化合物被證實可在經(jīng)刺激用于形成TNF-α的細(xì)胞中抑制TNF-α的形成。還證實式I化合物可強效地抑制磷酸二酯酶4的同工酶。
在本發(fā)明的再一個方面中，證實式I化合物抑制TNF-α的體內(nèi)形成，并且抑制動物模型中的炎癥或免疫應(yīng)答。
因此，式I的化合物可用于預(yù)防或治療由TNF-或PDE4介導(dǎo)的炎性或免疫學(xué)疾病。此等疾病的例子包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、牛皮癬關(guān)節(jié)炎、特應(yīng)性皮炎、包括潰瘍性結(jié)腸炎和Crohn病的炎性腸病、關(guān)節(jié)強直性脊椎炎、多法性硬化、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、慢性阻塞性肺病(COPD)、膿毒癥、內(nèi)毒素休克、肝炎、I型糖尿病等。
式I的化合物可用等量的合適的藥物學(xué)可接受的酸或堿通過中和該化合物而被轉(zhuǎn)化為藥物學(xué)可接受的鹽，這取決于該化合物中存在酸性基團或者堿性基團。所述酸或堿例如是氫氧化鉀、氫氧化鈉、鹽酸、甲磺酸、檸檬酸等。式I的化合物或其藥物學(xué)可接受的鹽可與藥物學(xué)可接受的輔助成分一起給藥，該輔助成分包括但不限于檸檬酸、氯化鈉、酒石酸、硬脂酸、淀粉、明膠、滑石、芝麻油、抗壞血酸、甲基纖維素、羧基甲基纖維素鈉、聚乙二醇(PEG)、聚丙二醇、甜味劑、防腐劑、水、乙醇、氧化鈦、碳酸氫鈉、硅化微晶纖維素、大豆卵磷脂等。式I的化合物或其藥物學(xué)可接受的鹽可配制成各種機型，如片劑、粉末、顆粒、硬膠囊、軟膠囊、口服混懸劑、用于吸入給藥的噴霧溶液、注射液、用于局部給藥的乳膏、透皮藥帖等。式I的化合物或其藥物學(xué)可接受的鹽向人和動物個體給藥的日劑量可以是高至100mg/kg體重，但優(yōu)選最高至10mg/kg體重，這取決于適應(yīng)癥、癥狀以及所述個體的情況。
在本發(fā)明的優(yōu)選實施方案中，提供如下有利的式I化合物，其中R1代表直鏈或支鏈C1-C6烷基、環(huán)戊基或環(huán)己基；以及R2代表有或沒有取代基的芳香基團，其中該芳香基團選自苯基、吡啶基、萘基、吲哚基、噻吩基、苯并[b]噻吩基、氧芴基或噻蒽基。
在本發(fā)明的另一個優(yōu)選實施方案中，提供如下更為有利的式I化合物，其中R1代表直鏈或支鏈C1-C6烷基、環(huán)戊基或環(huán)己基；以及R2代表選自以下組中的芳香基團吡啶基、萘基、吲哚基、噻吩基、苯并[b]噻吩基、氧芴基或噻蒽基；或R2代表如下具有一個或多個取代基的苯基 其中，R3-R7獨立地選自氫、直鏈或支鏈C1-C9烷基、烯基、鹵代烷基、芳基、鹵素、硝基、氨基、烷基氨基、烷基氨基烷基、亞甲二氧基、烷氧基、鹵代烷氧基、芐氧基、烷硫基、烷基磺?；?、烷基亞磺酰基、氰基、羧基、烷氧基羰基、烷氧基烷基、羥基、羥基烷基氨甲?；?、N-羥基-亞氨基烷基或N-(N-羥基-亞氨基烷基)氨基。
在本發(fā)明再一個優(yōu)選的實施方案中，有利的具體式I化合物是以下組中的化合物3-環(huán)戊基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；
3-環(huán)戊基-2-(3，4-二氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3-氯-4-氟苯基)-3-環(huán)戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-(3-硝基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-(4-甲基-3-硝基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-(3，4-二甲氧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-(3-甲氧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-{4-甲氧基-3-(甲氧基甲基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-{4-(芐氧基)苯基}-3-環(huán)戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-(3，4-亞甲二氧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-{3-(三氟甲氧基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3-氰基苯基)-3-環(huán)戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3-氰基-4-氟苯基)-3-環(huán)戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-{3-(N，N-二甲基氨基甲基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-{3-(N，N-二甲基氨基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-{5-(1H)-吲哚基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-(6-甲氧基萘基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-(4-乙烯基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-(4-氧芴基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-(2-噻蒽基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-(3-氨甲酰基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-{3-(甲硫基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-{3-(甲基磺?；?苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-(3-羥基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-{3-(羥基甲基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-{4-(羥基甲基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)己基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3-氯-4-氟苯基)-3-環(huán)己基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)己基-2-(3-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)己基-2-(3，4-二氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)己基-2-(3-硝基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)己基-2-(3-甲氧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3，4-二氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；
3-丁基-2-(2-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(2，4-二氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3-溴苯基)-3-丁基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3，4-二氯苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3-硝基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3-氟-4-甲氧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3-氟-4-羥基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3-乙氧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3，4-二甲氧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3-甲氧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3，4-亞甲二氧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-{4-(三氟甲氧基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-{3-(羥基甲基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3，4-二羥基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3-羥基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3-氨基苯基)-3-丁基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-{3-(乙氧基羰基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3-羧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(4-羧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3，4-二甲基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3-甲基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(4-丁基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3-氟-4-苯基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-{3-(三氟甲基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-{4-(甲亞磺酰基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-{4-(甲磺酰基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-{3-(N-羥基亞氨代乙?；?氨基苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-{3-(1-N-羥基亞氨基乙基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-{3-(N-羥基亞氨基甲基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(2-苯并[b]噻吩基)-3-丁基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-戊基-2-苯基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(4-氟苯基)-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3-氟苯基)-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；
2-(3，4-二氟苯基)-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3，5-二氟苯基)-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3-氯-4-氟苯基)-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3-硝基苯基)-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-戊基-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(4-聯(lián)苯基)-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-戊基-2-{4-(三氟甲基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(1-萘基)-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-戊基-2-(3-吡啶基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-戊基-2-(3-噻吩基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(4-氟苯基)-3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3，4-二氟苯基)-3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3-硝基苯基)-3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-乙基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3，4-二氟苯基)-3-乙基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(4-氟苯基)-3-甲基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3，4-二氟苯基)-3-甲基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(4-氟苯基)-3-異丁基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3，4-二氟苯基)-3-異丁基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3，4-亞甲二氧基苯基)-3-異丁基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-異丁基-2-(3-硝基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3-氰基苯基)-3-異丁基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3-氟-4-正壬基苯基)-3-異丁基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；以及2-(3-丁氧基苯基)-3-異丁基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟。
本發(fā)明中所用的術(shù)語和縮寫示于以下表1中。
表1本發(fā)明中所用的術(shù)語和縮寫

式I化合物的合成式I化合物的合成總結(jié)于以下合成路線1中，其中R1和R2如式I中所定義。在某些情況下，在執(zhí)行合成路線1期間有小的改變，而這些改變對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言應(yīng)是顯而易見的并在適用時提供。
合成路線1 在四氯化碳中用三乙胺或吡啶的鹵素復(fù)合物進行處理，由此將2-環(huán)戊烯-1-酮衍生物A鹵化，得到2-鹵代環(huán)戊烯-1-酮B[Tetrahedron Lett.vol 33，917-920(1992)]。該鹵化物與芳香硼酸進行Suzuki偶聯(lián)，得到偶聯(lián)產(chǎn)物C，接著使其與鹽酸羥胺在吡啶中反應(yīng)，由此縮合為式I的化合物[Chem.Rev.vol 95，2457-2483(1995)]。
合成路線2
合成路線1中的2-環(huán)戊烯-1-酮衍生物A是用合成路線2中描述的三種不同方法制備的。在一個方法中，將烷基或環(huán)烷基金屬(M＝Li、MgBr或MgCl)試劑添加至2-環(huán)戊烯-1-酮中，用氯鉻酸吡啶(PCC)使所得的烯丙基醇進行氧化性重排，得到2-環(huán)戊烯-1-酮衍生物A[Tetrahedron Lett.vol 30，1033-1036(1989)]。另一個方法是使3-乙氧基-2-環(huán)戊烯-1-酮或3-甲氧基-2-環(huán)戊烯-1-酮與烷基或環(huán)烷基金屬(M＝Li、MgBr或MgCl)反應(yīng)，然后將所得產(chǎn)物通過用鹽酸處理轉(zhuǎn)化為2-環(huán)戊烯-1-酮衍生物A[J.Am.Chem.Soc.vol 110，4625-4633(1988)]。在第三種方法中，在六甲基磷酰胺(HMPA)存在下，用三甲基甲硅烷基氯(TMSCl)促進烷基或環(huán)烷基銅酸酯在3-烷氧基-2-環(huán)戊烯-1-酮上的1，4-加成，而所得的加成物通過用鹽酸處理被轉(zhuǎn)化為2-環(huán)戊烯-1-酮衍生物A[Tetrahedron vol 45，349-362(1989)]。
或者，式I的化合物也可如合成路線3中所述進行制備，其中主要的中間產(chǎn)物環(huán)戊烯-1-酮衍生物C是通過炔D和乙烯之間的分子間Pauson-Khand反應(yīng)而制得的[Angew.Chem.Int.Ed.vol 39，636-638(2000)以及其中的參考文獻]。炔D是通過鈀催化的炔和芳基鹵化物的偶聯(lián)而合成的[Chem.Rev.vol 103，1979-2017(2003)]。炔D的Pauson-Khand反應(yīng)在高壓一氧化碳和乙烯下在存在非化學(xué)計量量的八羰基二鈷和二甲基亞砜作為促進劑時實現(xiàn)的。環(huán)戊烯酮C接著根據(jù)合成路線1被轉(zhuǎn)化為式1的化合物。
合成路線3 雖然如下制備了式I的化合物，但是本發(fā)明化合物的范圍絕非僅限于以下的化合物中。這些化合物僅是用作實施例。
實施例13-環(huán)戊基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟根據(jù)如下描述的4個步驟的方法制備標(biāo)題化合物。
步驟1(合成3-環(huán)戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮)在惰性氣氛下，向經(jīng)攪拌并平衡至-78℃的800mg溴化銅二甲基硫在100ml四氫呋喃(THF)中的懸浮液內(nèi)順序地添加24ml在乙醚中的2.0M環(huán)戊基氯化鎂和8ml六甲基磷酰胺(HMPA)。向該化合物內(nèi)添加5.4ml三甲基甲硅烷基氯(TMSCl)和4.3g 3-甲氧基-2-環(huán)戊烯-1-酮在20ml THF中的溶液。該反應(yīng)混合物緩慢溫?zé)嶂潦覝夭嚢?小時，接著向其中添加50ml 10％鹽酸。所得的反應(yīng)混合物再攪拌10分鐘，然后用乙酸乙酯萃取。有機層用水和鹽水洗滌，在硫酸鎂上干燥，然后過濾。濾液減壓濃縮并通過柱色譜純制(硅膠，己烷/乙酸乙酯＝3∶1)，得到4.5g油狀的3-環(huán)戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ 5.94(m，1H)，2.82(m，1H)，2.61(m，2H)，2.41(m，2H)，1.96(m，2H)，1.77-1.5(m，6H)。
步驟2(合成3-環(huán)戊基-2-碘-2-環(huán)戊烯-1-酮)在攪拌下向4.35g 3-環(huán)戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮在50ml四氯化碳中的溶液內(nèi)添加15g碘和2.4ml吡啶，而且該反應(yīng)混合物攪拌過夜。該反應(yīng)混合物首先用乙醚稀釋，順序地用飽和硫代硫酸鈉水溶液、碳酸氫鈉水溶液、和鹽水洗滌。有機層在無水硫酸鎂上干燥并過濾。濾液減壓濃縮并通過柱色譜純制(硅膠，己烷/乙酸乙酯＝6∶1)，得到4g油狀的3-環(huán)戊基-2-碘-2-環(huán)戊烯-1-酮。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ 3.23(m，1H)，2.74(m，2H)，2.57(m，2H)，1.98(m，2H)，1.78(m，4H)，1.55(m，2H)。
步驟3(合成3-環(huán)戊基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮)65mg 3-環(huán)戊基環(huán)戊烯-1-酮、40mg 4-氟苯基硼酸、10mg四(三苯基膦)鈀、4ml甲苯、2ml乙醇和1.5ml 2N碳酸氫鈉水溶液的混合物通過在80℃下攪拌過夜進行Suzuki偶聯(lián)。該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用鹽水洗滌，在硫酸鎂上干燥，然后過濾。濾液減壓濃縮并通過柱色譜純制(硅膠，己烷/乙酸乙酯＝4∶1)，得到52mg固體的3-環(huán)戊基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ 7.22(m，2H)，7.09(m，2H)，3.15(m，1H)，2.68(m，2H)，2.55(m，2H)，1.81(m，4H)，1.64(m，4H)。
步驟4 (合成3-環(huán)戊基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟)50mg 3-環(huán)戊基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮和20mg鹽酸羥胺在5ml吡啶中的混合物在60℃下攪拌過夜。減壓除去吡啶，而所得的殘留物用用乙酸乙酯和10％鹽酸萃取。有機層用碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，在硫酸鎂上干燥，然后過濾。濾液減壓濃縮并通過柱色譜純制(硅膠，己烷/乙酸乙酯＝4∶1)，得到40mg固體的3-環(huán)戊基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟。mp＝204-205℃；1H NMR(CDCl3，300MHz)δ 7.24-7.19(m，2H)，7.11-7.04(m，2H)，6.73(bs，1H)，2.89(m，1H)，2.80(m，2H)，2.61(m，2H)，1.70(m，4H)，1.55(m，4H)；APCI MSm/z 260.1(M+1)。
實施例2～22根據(jù)與實施例1類似的方法制備以下表2中所列的化合物。在實施例2～22中的步驟3中使用以下芳基或雜芳基硼酸化合物用于Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)3，4-二氟苯基硼酸用于實施例2；3-氯-4-氟苯基硼酸用于實施例3；3-硝基苯基硼酸用于實施例4；4-甲基-3-硝基苯基硼酸用于實施例5；3，4-二甲氧基苯基硼酸用于實施例6；3-甲氧基苯基硼酸用于實施例7；4-甲氧基-3-甲氧基甲基苯基硼酸用于實施例8；4-芐氧基苯基硼酸用于實施例9；3，4-亞甲二氧基苯基硼酸用于實施例10；3-三氟甲氧基苯基硼酸用于實施例11；3-氰基苯基硼酸用于實施例12；3-氰基-4-氟苯基硼酸用于實施例13；N，N-二甲基氨基甲基苯基-3-硼酸頻那醇酯用于實施例14；3-二甲基氨基苯基硼酸用于實施例15；5-吲哚基硼酸用于實施例16；6-甲氧基-2-萘硼酸用于實施例17；4-乙烯基苯硼酸用于實施例18；氧芴-4-硼酸用于實施例19；噻蒽-1-硼酸用于實施例20；苯甲酰胺-3-硼酸用于實施例21；以及3-甲硫基苯基硼酸用于實施例22。實施例2～22的光譜數(shù)據(jù)以及它們的熔點都列于表2至。
表2實施例2～22的物理表征數(shù)據(jù)


實施例233-環(huán)戊基-2-(3-甲基磺?；交?-2-環(huán)戊烯-1-酮肟 向120mg 3-環(huán)戊基-2-(3-甲硫基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮在12ml1∶1∶1 THF/甲醇/水的混合物中的溶液內(nèi)添加800mg OXONE，然后該反應(yīng)混合物攪拌3小時。該反應(yīng)混合物減壓濃縮并用水/乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，在硫酸鎂上干燥，然后過濾。濾液減壓濃縮并通過柱色譜純制(硅膠，己烷/乙酸乙酯＝3∶1)，得到120mg 3-環(huán)戊基-2-(3-甲基磺?；交?-2-環(huán)戊烯-1-酮。該甲基砜化合物根據(jù)與實施例1之步驟4類似的方法與鹽酸羥胺縮合，得到80mg固體的3-環(huán)戊基-2-(3-甲基磺?；交?-2-環(huán)戊烯-1-酮肟。mp＝164-165℃；1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.90-7.85(m，2H)，7.62-7.52(m，2H)，7.19(bs，1H)，3.08(s，3H)，2.85(m，1H)，2.80(m，2H)，2.64(m，2H)，1.73(m，4H)，1.58(m，4H)；APCI MSm/z 320.1(M+1).
實施例243-環(huán)戊基-2-(3-羥基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟 在攪拌、-78℃和惰性氣氛下向27mg 3-環(huán)戊基-2-(3-甲氧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟(實施例7)在5ml二氯甲烷中的溶液內(nèi)滴加0.5ml 1.0M三溴化硼己烷溶液。該反應(yīng)混合物攪拌2小時，并同時使其溫?zé)嶂潦覝?。接著將該反?yīng)混合物傾倒在飽和的碳酸氫鈉水溶液中，并用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，在硫酸鎂上干燥，然后過濾。濾液減壓濃縮并通過柱色譜純制(硅膠，己烷/乙酸乙酯＝1∶1)，得到12mg固體的3-環(huán)戊基-2-(3-羥基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟。mp＝207-209℃；1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.26-7.21(m，2H)，6.79-6.70(m，3H)，2.93(m，1H)，2.80(m，2H)，2.61(m，2H)，1.70(m，4H)，1.54(m，4H)；APCI MSm/z 258.1(M+1).
實施例253-環(huán)戊基-2-(3-羥基甲基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟 在80℃下攪拌120mg 3-環(huán)戊基-2-碘-2-環(huán)戊烯-1-酮、80mg 3-甲?；交鹚岷?0mg四(三苯基膦)鈀在8ml甲苯、4ml乙醇和4ml 2N碳酸氫鈉水溶液中的混合物過夜。該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用鹽水洗滌，在硫酸鎂上干燥，然后過濾。濾液減壓濃縮并通過柱色譜純制(硅膠，己烷/乙酸乙酯＝2∶1)，得到70mg的3-環(huán)戊基-2-(3-甲?；交?-2-環(huán)戊烯-1-酮。3-環(huán)戊基-2-(3-甲酰基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮在苯中與一滴乙酸和100mg三乙酰氧基硼氫化鈉在70-80℃下攪拌2小時。將該反應(yīng)混合物接著傾倒在飽和氯化鈉水溶液中，然后用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，在硫酸鎂上干燥，然后過濾。濾液減壓濃縮并通過柱色譜純制(硅膠，己烷/乙酸乙酯＝2∶1)，得到40mg的3-環(huán)戊基-2-(3-羥基甲基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮，其根據(jù)與實施例1之步驟4類似的方法與鹽酸羥胺縮合，得到20mg固體的3-環(huán)戊基-2-(3-羥基甲基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ8.75(bs，1H)，7.40-7.29(m，3H)，7.12(d，J＝7.2Hz，1H)，4.66(s，2H)，2.98(m，1H)，2.75(m，2H)，2.61(m，2H)，1.71(m，4H)，1.55(m，4H).
實施例263-環(huán)戊基-2-(4-羥基甲基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟 標(biāo)題化合物是根據(jù)類似于實施例25的方法制得的。應(yīng)注意的是，對于實施例26使用4-甲?；交鹚崽娲鷮嵤├?5所用的3-甲?；交鹚帷p＝187-190℃；1HNMR(CDCl3，300MHz)δ7.39(d，J＝7.5Hz，2H)，7.25(d，J＝7.5Hz，2H)，6.79(bs，1H)，4.70(s，2H)，2.91(m，1H)，2.80(m，2H)，2.61(m，2H)，1.70(m，4H)，1.55(m，4H)；APCIMSm/z 272.2(M+1).
實施例273-環(huán)己基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟標(biāo)題化合物是根據(jù)以下4個步驟的方法制備的。
步驟1(合成3-環(huán)己基-2-環(huán)戊烯-1-酮)在攪拌、0℃和惰性氣氛下向45ml 2.0M環(huán)己基氯化鎂在乙醚中的溶液以及15ml乙醚中滴加4.8g 2-環(huán)戊烯-1-酮在10ml乙醚中的溶液。該反應(yīng)混合物攪拌1小時，并同時溫?zé)嶂潦覝?，傾倒在飽和氯化銨水溶液中，然后用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，在硫酸鎂上干燥，然后過濾。濾液減壓濃縮，所得的殘留物接著與15g氯鉻酸吡啶(PCC)在適量的celite存在下于100ml二氯甲烷中反應(yīng)4小時。該反應(yīng)混合物用100ml乙醚稀釋，然后通過硅膠墊過濾。濾液減壓濃縮并通過柱色譜純制(硅膠，己烷/乙酸乙酯＝5∶1)，得到1.5g油狀的3-環(huán)己基-2-環(huán)戊烯-1-酮。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ5.93(m，1H)，2.61(m，2H)，2.39(m，2H)，2.30(m，1H)，1.91-1.19(m，10H).
步驟2(合成3-環(huán)己基-2-碘-2-環(huán)戊烯-1-酮)在攪拌下向1.05g 3-環(huán)己基-2-環(huán)戊烯-1-酮在20ml四氯化碳中的溶液內(nèi)順序添加5g碘和0.6ml吡啶，然后該混合物攪拌過夜。該反應(yīng)混合物用乙醚稀釋，順序地用飽和硫代硫酸鈉水溶液、碳酸氫鈉水溶液、和鹽水洗滌。有機層接著在無水硫酸鎂上干燥并過濾。濾液減壓濃縮并通過柱色譜純制(硅膠，己烷/乙酸乙酯＝6∶1)，得到850mg油狀的3-環(huán)己基-2-碘-2-環(huán)戊烯-1-酮。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ 2.81(m，1H)，2.72(m，2H)，2.55(m，2H)，1.90-1.20(m，10H).
步驟3(合成3-環(huán)己基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮)160mg 3-環(huán)己基-2-碘-2-環(huán)戊烯-1-酮、100mg 4-氟苯基硼酸、和25mg四(三苯基膦)鈀在5ml甲苯、2.5ml乙醇、和2ml 2N碳酸氫鈉水溶液中于80℃下攪拌過夜。該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用鹽水洗滌，在硫酸鎂上干燥，然后過濾。濾液接著減壓濃縮并通過柱色譜進行純制(硅膠，己烷/乙酸乙酯＝4∶1)，得到120mg油狀的3-環(huán)己基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ 7.18(m，2H)，7.10(m，2H)，2.76(m，1H)，2.66(m，2H)，2.52(m，2H)，1.82-1.20(m，10H).
步驟4(合成3-環(huán)己基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟)120mg 3-環(huán)己基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮和60mg鹽酸羥胺的混合物在10ml吡啶中于60℃下攪拌過夜。減壓除去吡啶，而所得的殘留物溶解在乙酸乙酯中，并用10％鹽酸洗滌。有機層用碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，在硫酸鎂上干燥，然后干燥。濾液接著減壓濃縮并通過重結(jié)晶進行純制(乙酸乙酯-己烷)，得到40mg固體的3-環(huán)己基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟。mp＝173-176℃；1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.20(m，2H)，7.08(m，2H)，6.78(bs，1H)，2.77(m，2H)，2.59(m，2H)，2.47(m，1H)，1.75-1.16(m，10H)；APCI MSm/z 274.2(M+1).
實施例28～32根據(jù)與實施例27類似的方法制備以下表3中所列的化合物。在實施例28～32中的步驟3中使用以下芳基硼酸化合物用于Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)3-氯-4-氟苯基硼酸用于實施例28；3-氟苯基硼酸用于實施例29；3，4-二氟苯基硼酸用于實施例30；3-硝基苯基硼酸用于實施例31；以及3-甲氧基苯基硼酸用于實施例32。實施例28～32的光譜數(shù)據(jù)以及它們的熔點列于表3中。
表3實施例28～32的物理表征數(shù)據(jù)
實施例333-丁基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟標(biāo)題化合物是根據(jù)以下4個步驟的方法制備的。
步驟1(合成3-丁基-2-環(huán)戊烯-1-酮)在攪拌、0℃和惰性氣氛下向690mg 3-乙氧基-2-環(huán)戊烯-1-酮在10ml THF中的溶液內(nèi)滴加3ml 2.5M n-丁基鋰在己烷中的溶液。該反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝兀⒃贁嚢?小時。反應(yīng)通過添加3N鹽酸而被淬滅。該混合物再攪拌10分鐘，接著用萃取乙酸乙酯。有機層用水和鹽水洗滌，在硫酸鎂上干燥，然后過濾。濾液減壓濃縮并通過柱色譜純制(硅膠，己烷/乙酸乙酯＝5∶1)，得到440mg油狀的3-丁基-2-環(huán)戊烯-1-酮。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ5.95(m，1H)，2.58(m，2H)，2.41(m，4H)，1.57(m，2H)，1.38(m，2H)，0.94(t，J＝7.5Hz，3H).
步驟2(合成3-丁基-2-碘-2-環(huán)戊烯-1-酮)在攪拌下向400mg 3-丁基-2-環(huán)戊烯-1-酮在10ml四氯化碳中的溶液內(nèi)添加1g碘和0.3ml吡啶。攪拌過夜后，該反應(yīng)混合物用乙醚稀釋，順序地用飽和硫代硫酸鈉水溶液、碳酸氫鈉水溶液、以及鹽水洗滌。有機層在無水硫酸鎂上干燥并過濾。濾液減壓濃縮并通過柱色譜純制(硅膠，己烷/乙酸乙酯＝5∶1)，得到500mg油狀的3-丁基-2-碘-2-環(huán)戊烯-1-酮。1HNMR(CDCl3，300MHz)δ2.77(m，2H)，2.59(m，4H)，1.58(m，2H)，1.43(m，2H)，0.97(t，J＝7.2Hz，3H).
步驟3(合成3-丁基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮)混合500mg 3-丁基-2-碘-2-環(huán)戊烯-1-酮、320mg 4-氟苯基硼酸、以及90mg四(三苯基膦)鈀，然后在20ml甲苯、10ml乙醇和10ml 2N碳酸氫鈉水溶液中于80℃下攪拌過夜。該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，然后用鹽水洗滌。有機層在無水硫酸鎂上干燥并過濾。濾液減壓濃縮并通過柱色譜純制(硅膠，己烷/乙酸乙酯＝5∶1)，得到420mg油狀的3-丁基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.21(m，2H)，7.10(m，2H)，2.68(m，2H)，2.56(m，2H)，2.51(m，2H)，1.55(m，2H)，1.34(m，2H)，0.89(t，J＝7.2Hz，3H).
步驟4(合成3-丁基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟)使100mg 3-丁基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮和50mg鹽酸羥胺在10ml吡啶中的混合物在60℃下攪拌過夜。減壓除去吡啶，而殘留物用乙酸乙酯和10％鹽酸萃取。有機層用碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，在硫酸鎂上干燥，然后過濾。濾液減壓濃縮并通過重結(jié)晶進行純制(己烷/乙酸乙酯)，得到80mg固體的3-丁基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟。mp＝115-116℃；1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.20(m，2H)，7.07(m，2H)，2.79(m，2H)，2.59(m，2H)，2.26(t，J＝7.8Hz，2H)，1.45(m，2H)，1.26(m，2H)，0.85(t，J＝7.4Hz，3H)；APCI MSm/z248.2(M+1).
實施例34～64，不包括實施例41和47～49這些化合物是根據(jù)類似于實施例33的方法制得的。在實施例34～64中的步驟3中使用以下芳基或雜芳基硼酸化合物用于Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)3，4-二氟苯基硼酸用于實施例34；2-氟苯基硼酸用于實施例35；2，4-二氟苯基硼酸用于實施例36；3-溴苯基硼酸用于實施例37；3，4-二氯苯基硼酸用于實施例38；3-硝基苯基硼酸用于實施例39；3-氟-4-甲氧基苯基硼酸用于實施例40；3-乙氧基苯基硼酸用于實施例42；3，4-二甲氧基苯基硼酸用于實施例43；3-甲氧基苯基硼酸用于實施例44；3，4-亞甲二氧基苯基硼酸用于實施例45；4-三氟甲氧基苯基硼酸用于實施例46；3-氨基苯基硼酸用于實施例50；3-乙氧基羰基苯基硼酸用于實施例51；3-羧基苯基硼酸用于實施例52；4-羧基苯基硼酸用于實施例53；3，4-二甲基苯基硼酸用于實施例54；3-甲基苯硼酸用于實施例55；4-丁基苯基硼酸用于實施例56；3-氟-4-聯(lián)苯基硼酸用于實施例57；3-三氟甲基苯基硼酸用于實施例58；4-甲亞磺酰基苯硼酸用于實施例59；4-甲磺酰基苯硼酸用于實施例60；3-乙酰胺基苯硼酸用于實施例61；3-乙?；脚鹚嵊糜趯嵤├?2；3-甲?；脚鹚嵊糜趯嵤├?3；以及苯并噻吩-2-硼酸用于實施例64。實施例34～64的光譜數(shù)據(jù)以及它們的熔點都列于表4中。
實施例413-丁基-2-(3-氟-4-羥基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟在攪拌、和惰性氣氛下向20mg 3-丁基-2-(3-氟-4-甲氧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟(實施例40)在5ml二氯甲烷中的溶液內(nèi)添加0.5ml 1.0M三溴化硼己烷溶液。該反應(yīng)混合物攪拌20小時，傾倒在飽和碳酸氫鈉水溶液中，并用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，在硫酸鎂上干燥，然后過濾。濾液減壓濃縮并通過柱色譜純制(硅膠，己烷/乙酸乙酯＝2∶1)，得到11mg 3-丁基-2-(3-氟-4-羥基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟。實施例41的光譜數(shù)據(jù)以及其熔點都列于表4中。
實施例473-丁基-2-(3-羥基甲基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟3-丁基-2-(3-羥基甲基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟是根據(jù)類似于實施例25的方法制得的。對于實施例47使用3-丁基-2-碘-2-環(huán)戊烯-1-酮替代用于實施例25的3-環(huán)戊基-2-碘-2-環(huán)戊烯-1-酮。實施例47的光譜數(shù)據(jù)以及其熔點都列于表4中。
實施例483-丁基-2-(3，4-二羥基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟3-丁基-2-(3，4-二甲氧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟(實施例43)根據(jù)類似于實施例41的方法進行脫甲基化反應(yīng)，以得到3-丁基-2-(3，4-二羥基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟。實施例48的光譜數(shù)據(jù)以及其熔點都列于表4中。
實施例493-丁基-2-(3-羥基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟3-丁基-2-(3-甲氧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟(實施例44)根據(jù)類似于實施例41的方法進行脫甲基化反應(yīng)，以得到3-丁基-2-(3-羥基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟。實施例49的光譜數(shù)據(jù)以及其熔點都列于表4中。
表4實施例34～64的物理表征數(shù)據(jù)





實施例652-(4-氟苯基)-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟標(biāo)題化合物是根據(jù)以下4個步驟的方法制備的。

步驟1(合成3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮)在攪拌、室溫和惰性氣氛下向2.5g鎂在100ml乙醚中的懸浮液內(nèi)添加10ml1-溴戊烷。1小時后，向該混合物內(nèi)緩慢添加5ml2-環(huán)戊烯-1-酮。該反應(yīng)混合物再攪拌2小時，傾倒在飽和氯化銨水溶液內(nèi)并用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，在硫酸鎂上干燥，然后干燥。濾液減壓濃縮，而所得的殘留物在適量celite存在下在100ml二氯甲烷中與10g PCC反應(yīng)3小時。該反應(yīng)混合物用100ml乙醚稀釋，然后通過硅膠墊過濾。濾液減壓濃縮并通過柱色譜純制(硅膠，己烷/乙酸乙酯＝10∶1)，得到1.5g油狀的3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ 5.92(m，1H)，2.57(m，2H)，2.39(m，4H)，1.57(m，2H)，1.32(m，4H)，0.88(m，3H).
步驟2(合成2-碘-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮)在攪拌下向10g 3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮在20ml四氯化碳中的溶液內(nèi)順序地添加1.5g碘和1ml吡啶。該混合物攪拌過夜，用乙醚稀釋，順序地用飽和硫代硫酸鈉水溶液、碳酸氫鈉水溶液以及鹽水洗滌，在硫酸鎂上干燥，然后過濾。濾液減壓濃縮并通過柱色譜純制(硅膠，己烷/乙酸乙酯＝7∶1)，得到770mg油狀的2-碘-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ2.76(m，2H)，2.58(m，4H)，1.59(m，2H)，1.37(m，4H)，0.92(m，3H).
步驟3(合成2-(4-氟苯基)-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮)2.45g2-碘-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮、1.5g 4-氟苯基硼酸、和250mg四(三苯基膦)鈀的混合物在50ml甲苯、25ml乙醇、和25ml 2N碳酸氫鈉水溶液中于80℃下攪拌過夜。該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯和鹽水萃取。有機層在無水硫酸鎂上干燥并過濾。濾液減壓濃縮并通過柱色譜純制(硅膠，己烷/乙酸乙酯＝5∶1)，得到2.18g的2-(4-氟苯基)-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮。1HNMR(CDCl3，300MHz)δ7.22(m，2H)，7.10(m，2H)，2.67(m，2H)，2.55(m，2H)，2.50(m，2H)，1.57(m，2H)，1.28(m，4H)，0.87(m，3H).
步驟4(合成2-(4-氟苯基)-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟)2.18g 2-(4-氟苯基)-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮和800mg鹽酸羥胺在100ml吡啶中的混合物在60℃下攪拌過夜。減壓除去吡啶，而所得的殘留物用乙酸乙酯和10％鹽酸萃取。有機層用碳酸氫鈉水溶液以及鹽水洗滌，在硫酸鎂上干燥，然后過濾。濾液減壓濃縮并通過重結(jié)晶進行純制(乙酸乙酯-己烷)，得到2g的2-(4-氟苯基)-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟。mp＝101-102℃；1H NMR(CDCl3，300MHz)δ9.08(bs，1H)，7.19(m，2H)，7.04(m，2H)，2.72(m，2H)，2.54(m，2H)，2.24(t，J＝7.8Hz，2H)，1.45(m，2H)，1.22(m，4H)，0.84(t，J＝6.9Hz，3H)；APCI MSm/z 262.2(M+1).
實施例66～77根據(jù)與實施例65類似的方法制備以下表5中所列的化合物。在實施例66～77中的步驟3中使用以下芳基或雜芳基硼酸化合物用于Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)苯基硼酸用于實施例66；3-氟苯基硼酸用于實施例67；3，4-二氟苯基硼酸用于實施例68；3，5-二氟苯基硼酸用于實施例69；3-氯-4-氟苯基硼酸用于實施例70；3-硝基苯基硼酸用于實施例71；3，4，5-三甲氧基苯基硼酸用于實施例72；4-聯(lián)苯基硼酸用于實施例73；4-三氟甲基苯基硼酸用于實施例74；2-萘硼酸用于實施例75；吡啶-3-硼酸1，3-丙烷二醇環(huán)酯用于實施例76；以及噻吩-3-硼酸用于實施例77。實施例66～77的光譜數(shù)據(jù)以及它們的熔點都列于表5中。
表5實施例66～77的物理表征數(shù)據(jù)

實施例782-(4-氟苯基)-3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟標(biāo)題化合物是根據(jù)以下4個步驟的方法制備的。
步驟1(合成3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮)在攪拌、0℃和惰性氣氛下向1ml 2-環(huán)戊烯-1-酮在20ml乙醚中的溶液內(nèi)滴加10ml 2.0M丙基氯化鎂的乙醚溶液。該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時，傾倒在飽和氯化銨水溶液中，并用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，在硫酸鎂上干燥，然后過濾。濾液減壓濃縮，而所得的殘留物溶解在20ml二氯甲烷中，并與2.7g PCC以及適量的celite一起攪拌3小時。該反應(yīng)混合物用20ml乙醚稀釋，并通過硅膠墊進行過濾。濾液減壓濃縮并通過柱色譜純制(硅膠，己烷/乙酸乙酯＝4∶1)，得到420mg油狀的3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ5.95(m，1H)，2.58(m，2H)，2.41(m，4H)，1.63(m，2H)，0.98(t，J＝7.2Hz，3H).
步驟2(合成2-碘-3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮)向420mg 3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮在10ml四氯化碳中的溶液內(nèi)順序地添加2.5g碘和0.4ml吡啶。攪拌3小時后，該反應(yīng)混合物用乙醚稀釋，順序地用飽和硫代硫酸鈉水溶液、碳酸氫鈉水溶液、以及鹽水洗滌。有機層在無水硫酸鎂上干燥并過濾。濾液減壓濃縮并通過柱色譜純制(硅膠，己烷/乙酸乙酯＝4∶1)，得到690mg油狀的2-碘-3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ2.77(m，2H)，2.60(m，4H)，1.65(m，2H)，0.99(t，J＝7.2Hz，3H).
步驟3(合成2-(4-氟苯基)-3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮)230mg 2-碘-3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮、160mg 4-氟苯基硼酸、以及40mg四(三苯基膦)鈀的混合物在80℃下于5ml甲苯、2.5ml乙醇、和2.5ml 2N碳酸氫鈉水溶液中攪拌過夜。該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯和鹽水萃取。有機層在無水硫酸鎂上干燥并過濾。濾液減壓濃縮并通過柱色譜純制(硅膠，己烷/乙酸乙酯＝5∶1)，得到170mg油狀的2-(4-氟苯基)-3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ 7.21(m，2H)，7.10(m，2H)，2.67(m，2H)，2.55(m，2H)，2.50(m，2H)，1.61(m，2H)，0.94(t，J＝7.2Hz，3H).
步驟4(合成2-(4-氟苯基)-3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟)170mg 2-(4-氟苯基)-3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮和100mg鹽酸羥胺的混合物在20ml吡啶中于60℃下攪拌過夜。減壓除去吡啶，而所得的殘留物用乙酸乙酯和10％鹽酸萃取。有機層用碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，在硫酸鎂上干燥，然后過濾。濾液減壓濃縮并通過重結(jié)晶進行純制(乙酸乙酯-己烷)，得到100mg的2-(4-氟苯基)-3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟。mp＝165-166℃；1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.24-7.17(m，3H)，7.10-7.03(m，2H)，2.79(m，2H)，2.59(m，2H)，2.25(t，J＝7.7Hz，2H)，1.50(m，2H)，0.87(t，J＝7.4Hz，3H)；APCI MSm/z234.1(M+1).
實施例792-(3，4-二氟苯基)-3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟標(biāo)題化合物是根據(jù)類似于實施例78的方法制備的。在制備實施例79的步驟3中使用3，4-二氟苯基硼酸用于Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)。mp＝136-137℃；1H NMR(CDCl3，300MHz)δ 7.83(bs，1H)，7.17(dt，J＝10.5and 8.4Hz，1H)，7.07(ddd，J＝2.1，7.8 and 11.1Hz，1H)，6.96(m，1H)，2.78(m，2H)，2.58(m，2H)，2.25(t，J＝7.8Hz，2H)，1.50(m，2H)，0.87(t，J＝7.5Hz，3H)；APCI MSm/z252.1(M+1).
或者，標(biāo)題化合物是根據(jù)如下的3個步驟的方法制備的。
步驟1(合成1，2-二氟-4-戊-1-炔基苯)向300mg二氯二(三苯基膦)鈀和160mg碘化銅在200ml THF中的混合物內(nèi)順序地添加7ml三乙胺、10g 1，2-二氟-4-碘苯、以及4.5ml戊炔。該反應(yīng)混合物攪拌8小時，然后通過硅膠墊進行過濾。濾液用乙酸乙酯稀釋，然后順序地用10％鹽酸、水以及鹽水洗滌。有機層在無水硫酸鎂上干燥并過濾。濾液減壓濃縮并通過真空蒸餾進行純制，得到7.15g油狀的1，2-二氟-4-戊-1-炔基苯。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.19(ddd，J＝1.8，7.8 and 10.8Hz，1H)，7.14-7.01(m，2H)，2.36(t，J＝7.2Hz，2H)，1.62(qt，J＝7.2 and 7.5Hz，2H)，1.04(t，J＝7.5Hz，3H).
步驟2(合成2-(3，4-二氟苯基)-3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮)裝有1g 1，2-二氟-4-戊-1-炔基苯、385mg Co2(CO)8、0.7ml DMSO、以及5ml甲苯的鋼制壓力反應(yīng)器用一氧化碳清洗3次，在5bar一氧化碳以及45bar乙烯下密封，然后在160℃下攪拌12小時。該反應(yīng)混合物在冷卻并釋放壓力后通過celite墊過濾。濾液減壓濃縮并通過柱色譜純制(硅膠，己烷/乙酸乙酯＝4∶1)，得到1.05g油狀的2-(3，4-二氟苯基)-3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.19(dt，J＝10.5 and 8.4Hz，1H)，7.09(ddd，J＝2.1，7.8 and 11.1Hz，1H)，6.97(m，1H)，2.68(m，2H)，2.55(m，2H)，2.50(m，2H)，1.62(m，2H)，0.95(t，J＝7.5Hz，3H).
步驟3(合成2-(3，4-二氟苯基)-3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟)1.36g 2-(3，4-二氟苯基)-3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮在20ml吡啶中與2.6g鹽酸羥胺縮合，得到980mg的2-(3，4-二氟苯基)-3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟。
實施例802-(3-硝基苯基)-3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟標(biāo)題化合物是根據(jù)類似于實施例78的方法制備的。在制備實施例80的步驟3中使用3-硝基苯基硼酸用于Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)。mp＝128-129℃；1H NMR(CDCl3，300MHz)δ 8.19-8.14(m，2H)，7.63-7.52(m，2H)，7.00(s，1H)，2.84(m，2H)，2.65(m，2H)，2.28(t，J＝7.7Hz，2H)，1.55(m，2H)，0.89(t，J＝7.2Hz，3H).
實施例813-乙基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟3-乙基-2-環(huán)戊烯-1-酮是通過用乙基氯化鎂替代丙基氯化鎂根據(jù)類似于實施例78的步驟1的方法制備的。標(biāo)題化合物接著根據(jù)類似于實施例78所用的方法由3-乙基-2-環(huán)戊烯-1-酮起始進行制備。mp 168-169℃；1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.24(m，2H)，7.08(m，2H)，6.89(s，1H)，2.81(m，2H)，2.61(m，2H)，2.30(q，J＝7.8Hz，2H)，1.08(t，J＝7.7Hz，3H)；APCI MSm/z 220.1(M+1).
實施例822-(3，4-二氟苯基)-3-乙基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟標(biāo)題化合物是根據(jù)類似于實施例81所用的方法制備的。在Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)中，使用3，4-二氟苯基硼酸替代實施例81中所用的4-氟苯基硼酸。mp＝136-137℃；1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.16(m，1H)，7.11(m，1H)，6.99(m，1H)，6.88(s，1H)，2.81(m，2H)，2.62(m，2H)，2.31(q，J＝7.8Hz，2H)，1.08(t，J＝7.8Hz，3H).
實施例832-(4-氟苯基)-3-甲基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟3-甲基-2-環(huán)戊烯-1-酮是通過用甲基溴化鎂替代丙基氯化鎂根據(jù)類似于實施例78的步驟1的方法制備的。標(biāo)題化合物接著根據(jù)類似于實施例78所用的方法由3-甲基-2-環(huán)戊烯-1-酮起始進行制備。mp 170-171℃；1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.26(m，2H)，7.08(m，2H)，6.77(s，1H)，2.81(m，2H)，2.60(m，2H)，1.92(m，3H)；APCI MSm/z 206.1(M+1).

實施例842-(3，4-二氟苯基)-3-甲基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟標(biāo)題化合物是根據(jù)類似于實施例83所用的方法制備的。在Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)中，使用3，4-二氟苯基硼酸替代實施例83中所用的4-氟苯基硼酸。mp＝155-156℃；1H NMR(CDCl3，300MHz)δ 7.19-7.10(m，2H)，7.04(m，1H)，6.75(s，1H)，2.81(m，2H)，2.60(m，2H)，1.94(m，3H).
實施例852-(4-氟苯基)-3-異丁基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟3-異丁基-2-環(huán)戊烯-1-酮是通過用仲丁基鋰替代正丁基鋰根據(jù)類似于實施例33的步驟1的方法制備的。標(biāo)題化合物接著根據(jù)類似于實施例33所用的方法由3-異丁基-2-環(huán)戊烯-1-酮起始進行制備。mp＝154-157℃；1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.22-7.17(m，3H)，7.11-7.04(m，1H)，2.79(m，2H)，2.56(m，2H)，2.16(d，J＝7.5Hz，2H)，1.93-1.81(m，1H)，0.83(d，J＝6.6Hz，6H)；APCI MSm/z 248.1(M+1).
實施例86～91以下表6中的化合物是根據(jù)類似于實施例85中所用的方法而制備的。使用以下芳基硼酸化合物用于實施例86～90制備中的步驟3中的Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)3，4-二氟苯基硼酸用于實施例86；3，4-亞甲二氧基苯基硼酸用于實施例87；3-硝基苯基硼酸用于實施例88；3-氰基苯基硼酸用于實施例89；3-氟-4-n-壬基苯基硼酸用于實施例90；以及3-n-丁氧基苯基硼酸用于實施例91。實施例86～91的光譜數(shù)據(jù)以及它們的熔點列于表6中。
表6實施例86～91的物理表征數(shù)據(jù)
生物學(xué)評估對本發(fā)明化合物在經(jīng)刺激的免疫細(xì)胞中抑制TNF-α形成的能力進行評估。從劑量-應(yīng)答曲線中讀出IC50值(TNF-α形成被抑制50％時的濃度)。該體外抑制測試是用PDE4抑制劑咯利普蘭作為陽性對照來進行的。評估本發(fā)明的化合物在炎性或免疫學(xué)疾病的動物模型中的治療活性。還測試了本發(fā)明化合物在抑制PDE4同工酶上的能力。
抑制TNF-α在大鼠PBMC中的形成如文獻中所述[Exp.Geront.vol 37，235-247(2002)]在大鼠外周單核血細(xì)胞(PBMC)中對本發(fā)明的化合物抑制TNF-α形成的能力進行評估。簡而言之，從用ACD(酸/檸檬酸鹽/葡萄糖)處理的大鼠腹靜脈中抽取6ml血液，并小心地將其添加至包含6ml Ficoll 1077的試管中，然后在室溫下使該試管在1500rpm(415G)離心30分鐘。將細(xì)胞部分(中間部分)懸浮在包含經(jīng)磷酸鹽緩沖的鹽水(PBS)的50ml試管中。該試管在2000rpm(737G)離心5分鐘。所得的沉淀物懸浮在6ml PBS和6ml Ficoll 1077中，然后在室溫下于1500rpm(415G)離心30分鐘，以除去殘留的血漿。將細(xì)胞部分懸浮在PBS中并在2000rpm離心5分鐘。重復(fù)此等洗滌過程2次。將收集到的細(xì)胞懸浮在10ml包含10％FBS的RPMI-1640中，并進一步稀釋至每ml包含4×106個細(xì)胞。將該細(xì)胞懸浮液以每孔100μl的量分配在96孔板中，所述孔已預(yù)先補充有1μl的DMSO(安慰劑)或包含預(yù)定濃度的本發(fā)明化合物的DMSO母液。該板在37℃、5％CO2和95％O2下培養(yǎng)1小時。向每個孔中添加100μl包含0.1μg/ml LPS、5U/ml IFN-γ和10％FBS的RPMI-1640。該板接著在37℃、5％CO2和95％O2下培養(yǎng)18小時。每個孔中的等分上清液進行ELISA測試，以測定每個孔中的TNF-α濃度。在表7中總結(jié)了本發(fā)明的化合物在大鼠PBMC中觀察到的抑制TNF-α形成的體外活性。然而，這些體外抑制數(shù)據(jù)的提供并不是將化合物的范圍限制在表7中。
表7化合物對TNF-α在大鼠PBMC中形成的體外抑制活性

在人PBMC中抑制TNF-α的形成如文獻中所述[J.Med.Chem.vol 39，3238-3240(1996)]在人PBMC中對本發(fā)明的化合物抑制TNF-α形成的能力進行評估。從經(jīng)過ACD處理的健康人受試者中新鮮抽取血液，以根據(jù)用于大鼠PBMC的方法分離人PBMC。對人TNF-α的ELISA所使用的測試方法基本上與用于大鼠TNF-αELISA測試的方法相同。本發(fā)明的化合物在人和大鼠PBMC中顯示出可相互比擬的抑制活性。在表8中總結(jié)了本發(fā)明的某些化合物在人PBMC中的體外抑制活性。
表8化合物對TNF-α在人PBMC中形成的體外抑制活性

體內(nèi)抑制TNF-α形成根據(jù)與文獻[J.Pharmacol.Exp.Therapeut.vol 279，1453-1461(1996)]中類似的方法對本發(fā)明的化合物在用LPS刺激的小鼠中抑制TNF-α體內(nèi)形成的能力進行評估。簡而言之，在第0小時向經(jīng)過整夜禁食的小鼠(Balb/C或ICR，25～30g)通過口服飼藥法給藥本發(fā)明的化合物+載體或者僅給藥載體(5％Tween 80)(10ml/kg體重)。在第0.5小時時這些小鼠中每只小鼠都腹膜注射100mg LPS，用CO2麻醉后2小時時從腹靜脈抽取血液。通過離心從所抽取的血液中分離血漿，并對其進行ELISA測試，以測定TNF-α的濃度。本發(fā)明化合物對TNF-α體內(nèi)形成的％抑制作用是通過對比接受所述化合物的小鼠中觀察到的平均TNF-α濃度和僅接受載體的小鼠中觀察到的平均TNF-α濃度來測定的。如表9中所示，本發(fā)明的化合物強效抑制經(jīng)LPS刺激的小鼠中TNF-α的體內(nèi)形成，與它們對TNF-α形成的體外抑制活性是平行的。
表9在經(jīng)LPS刺激的小鼠中化合物對TNF-α形成的體內(nèi)抑制活性(n＝5-6每組)

在遲發(fā)型過敏反應(yīng)中的治療效果根據(jù)文獻中的方法[J.Immunol.vol 171，3010(2003)]對本發(fā)明的化合物在遲發(fā)型過敏反應(yīng)(DTH)的動物模型中治療炎癥的能力進行評估。簡而言之，于第0天將Balb/c小鼠的腹部剃毛，并在該腹部皮膚上局部給藥溶解在9∶1丙酮/DMSO(載體)中的2％噁唑酮。在第5天，通過在左耳上給藥2％噁唑酮而誘發(fā)DTH。將本發(fā)明的化合物溶解在載體中并局部施用在左耳2次，第一次是在用噁唑酮誘發(fā)之前2小時，而第二次是在用噁唑酮誘發(fā)之后4小時。在用噁唑酮誘發(fā)之后24小時比較經(jīng)穿孔的左耳(發(fā)炎)和右耳(未發(fā)炎)的重量，由此對治療效果進行評分。例如，對于3％的實施例4溶液觀察到37％的耳水腫抑制作用(p＜0.05)，而對于以每劑90mg/kg的量在第5天口服給藥環(huán)孢菌素2次則觀察到76％的抑制作用(p＜0.01)。每組評估5只動物。
在DSS誘發(fā)的結(jié)腸炎中的治療效果根據(jù)文獻中的方法[J.Pharmacol.Exp.Therapeut.vol 292，22-30(2000)]在小鼠中對本發(fā)明的化合物治療由葡聚糖硫酸鈉(DSS)誘發(fā)的結(jié)腸炎的能力進行評估。簡而言之，將重量為16-20g的雌性Balb/c小鼠隨機分組(每組5～6只)，并由第1天起就允許其自由飲用包含5％DSS的水。以10ml/kg的劑量口服給藥在5％Tween 80中的本發(fā)明的化合物或者柳氮磺吡啶，每日二次。評估糞便粘稠度、體重以及直腸出血，由此每日測量每只動物的臨床活動分值。觀察本發(fā)明化合物的治療效果。例如，以1mg/kg BID的量接受實施例4的動物在第11天時在臨床活動分值方面與對照組(僅載體和DDS)相比顯示出43％的改善(p＜0.05)，而在以50mg/kgBID的量接受柳氮磺吡啶的動物中觀察到19％的改善(p＞0.05)。
U937細(xì)胞中對cAMP Degradation的體外抑制作用評估本發(fā)明的化合物在細(xì)胞中抑制由forskolin(一種腺苷酸環(huán)化酶刺激劑)誘發(fā)的cAMP水解上的能力。簡而言之，在96孔板上，每個孔3×105個U937細(xì)胞在200μl包含10％FBS的RPMI-1640中于37℃下溫育10分鐘，該板然后用預(yù)定劑量的DMSO或本發(fā)明化合物的DMSO母液處理。這些細(xì)胞接著在37℃下用10μM forskolin刺激10分鐘。該板在1500rpm離心5分鐘。小心地從每個孔中取出120μl上清液，然后向每個孔中添加200μl的溶胞劑1B。接著分析細(xì)胞溶解物，以通過使用來自Amersham Pharmacia Biotech的cAMP EIA試劑盒(Kit#RPN225)的酶免疫測定(EIA)來測量cAMP濃度。由cAMP濃度的劑量-應(yīng)答曲線測定本發(fā)明化合物的IC50值。本發(fā)明的化合物在U937細(xì)胞中中強效抑制cAMP的細(xì)胞降解。例如，所觀察到的IC50值對于實施例2是0.1μg/ml，對于實施例4是0.13μg/ml，并且對于實施例45是0.87μg/ml，而已知的PDE4抑制劑咯利普蘭的IC50值是0.27μg/ml。
抑制PDE4同工酶根據(jù)文獻中的方法[Biochemistry vol 39，6449-6458(2000)]評估本發(fā)明的化合物在抑制磷酸二酯酶4(PDE4)的同工酶(得自Fab Gennix International Inc.(Frisco，Texas/USA))上的能力。簡而言之，測定預(yù)定劑量的化合物在抑制PDE4同工酶在pH 7.4 Tris緩沖液中對cAMP的水解上的能力。使用來自AmershamBiosciences的SPA試劑盒根據(jù)供貨商的指導(dǎo)手冊(TRKQ7090磷酸二酯酶[3H]cAMPSPA酶測定)通過閃爍親近測定法(SPA)來測定所得的cAMP濃度。如表10中對某些本發(fā)明化合物所示，本發(fā)明的化合物強效地抑制PDE4的同工酶。
表10化合物對人PDE4同工酶的抑制活性

權(quán)利要求
1.以下式I的化合物或其藥物學(xué)可接受的鹽 式I其中R1代表直鏈或支鏈C1-C10烷基或C3-C7環(huán)烷基；以及R2代表有或沒有取代基的芳香基團。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物或其藥物學(xué)可接受的鹽，其中R1代表直鏈或支鏈C1-C6烷基、環(huán)戊基或環(huán)己基；以及R2代表有或沒有取代基的芳香基團，其中該芳香基團選自苯基、吡啶基、萘基、吲哚基、噻吩基、苯并[b]噻吩基、氧芴基或噻蒽基。
3.如權(quán)利要求2所述的化合物或其藥物學(xué)可接受的鹽，其中R1代表直鏈或支鏈C1-C6烷基、環(huán)戊基或環(huán)己基；以及R2代表選自以下組中的芳香基團吡啶基、萘基、吲哚基、噻吩基、苯并[b]噻吩基、氧芴基或噻蒽基；或R2代表如下具有一個或多個取代基的苯基 其中，R3-R7獨立地選自氫、直鏈或支鏈C1-C9烷基、烯基、鹵代烷基、芳基、鹵素、硝基、氨基、烷基氨基、烷基氨基烷基、亞甲二氧基、烷氧基、鹵代烷氧基、芐氧基、烷硫基、烷基磺酰基、烷基亞磺?；?、氰基、羧基、烷氧基羰基、烷氧基烷基、羥基、羥基烷基氨甲?；?、N-羥基-亞氨基烷基或N-(N-羥基-亞氨基烷基)氨基。
4.如權(quán)利要求2所述的化合物或其藥物學(xué)可接受的鹽，其中所述化合物選自以下組中3-環(huán)戊基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-(3，4-二氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3-氯-4-氟苯基)-3-環(huán)戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-(3-硝基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-(4-甲基-3-硝基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-(3，4-二甲氧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-(3-甲氧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-{4-甲氧基-3-(甲氧基甲基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-{4-(芐氧基)苯基}-3-環(huán)戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-(3，4-亞甲二氧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-{3-(三氟甲氧基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3-氰基苯基)-3-環(huán)戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3-氰基-4-氟苯基)-3-環(huán)戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-{3-(N，N-二甲基氨基甲基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-{3-(N，N-二甲基氨基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-{5-(1H)-吲哚基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-(6-甲氧基萘基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-(4-乙烯基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-(4-氧芴基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-(2-噻蒽基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-(3-氨甲?；交?-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-{3-(甲硫基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-{3-(甲基磺?；?苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-(3-羥基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-{3-(羥基甲基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)戊基-2-{4-(羥基甲基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)己基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3-氯-4-氟苯基)-3-環(huán)己基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)己基-2-(3-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)己基-2-(3，4-二氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)己基-2-(3-硝基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-環(huán)己基-2-(3-甲氧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3，4-二氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(2-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(2，4-二氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3-溴苯基)-3-丁基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3，4-二氯苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3-硝基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3-氟-4-甲氧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3-氟-4-羥基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3-乙氧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3，4-二甲氧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3-甲氧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3，4-亞甲二氧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-{4-(三氟甲氧基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-{3-(羥基甲基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3，4-二羥基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3-羥基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3-氨基苯基)-3-丁基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-{3-(乙氧基羰基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3-羧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(4-羧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3，4-二甲基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3-甲基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(4-丁基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-(3-氟-4-苯基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-{3-(三氟甲基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-{4-(甲亞磺?；?苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-{4-(甲磺?；?苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-{3-(N-羥基亞氨代乙?；?氨基苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-{3-(1-N-羥基亞氨基乙基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-丁基-2-{3-(N-羥基亞氨基甲基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(2-苯并[b]噻吩基)-3-丁基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-戊基-2-苯基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(4-氟苯基)-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3-氟苯基)-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3，4-二氟苯基)-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3，5-二氟苯基)-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3-氯-4-氟苯基)-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3-硝基苯基)-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-戊基-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(4-聯(lián)苯基)-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-戊基-2-{4-(三氟甲基)苯基}-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(1-萘基)-3-戊基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-戊基-2-(3-吡啶基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-戊基-2-(3-噻吩基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(4-氟苯基)-3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3，4-二氟苯基)-3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3-硝基苯基)-3-丙基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-乙基-2-(4-氟苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3，4-二氟苯基)-3-乙基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(4-氟苯基)-3-甲基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3，4-二氟苯基)-3-甲基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(4-氟苯基)-3-異丁基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3，4-二氟苯基)-3-異丁基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3，4-亞甲二氧基苯基)-3-異丁基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；3-異丁基-2-(3-硝基苯基)-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3-氰基苯基)-3-異丁基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；2-(3-氟-4-正壬基苯基)-3-異丁基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟；以及2-(3-丁氧基苯基)-3-異丁基-2-環(huán)戊烯-1-酮肟。
5.用于預(yù)防或治療TNF-α介導(dǎo)的疾病的藥物組合物，其包含治療有效量的如權(quán)利要求1-4之一所述的化合物或其藥物學(xué)可接受的鹽作為活性成分。
6.如權(quán)利要求5所述的藥物組合物，其中所述TNF-α介導(dǎo)的疾病是炎性或免疫學(xué)疾病。
7.如權(quán)利要求5所述的藥物組合物，其中所述TNF-α介導(dǎo)的疾病選自以下組中類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、牛皮癬關(guān)節(jié)炎、特應(yīng)性皮炎、包括潰瘍性結(jié)腸炎和Crohn病的炎性腸病、關(guān)節(jié)強直性脊椎炎、多發(fā)性硬化、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、慢性阻塞性肺病(COPD)、膿毒癥、內(nèi)毒素休克、肝炎以及I型糖尿病。
8.如權(quán)利要求5所述的藥物組合物，其中所述TNF-α介導(dǎo)的疾病是包括潰瘍性結(jié)腸炎和Crohn病的炎性腸病、牛皮癬或特應(yīng)性皮炎。
9.用于預(yù)防或治療PDE4介導(dǎo)的疾病的藥物組合物，其包含治療有效量的如權(quán)利要求1-4之一所述的化合物或其藥物學(xué)可接受的鹽作為活性成分。
10.如權(quán)利要求9所述的藥物組合物，其中所述PDE4介導(dǎo)的疾病是氣喘或慢性阻塞性肺病(COPD)。
11.用于預(yù)防或治療TNF-α介導(dǎo)的疾病的方法，其包括向有此需要的個體給藥治療有效量的如權(quán)利要求1-4之一所述的化合物或其藥物學(xué)可接受的鹽。
12.如權(quán)利要求11所述的方法，其中所述TNF-α介導(dǎo)的疾病是炎性或免疫學(xué)疾病。
13.如權(quán)利要求11所述的方法，其中所述TNF-α介導(dǎo)的疾病選自以下組中類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、牛皮癬關(guān)節(jié)炎、特應(yīng)性皮炎、包括潰瘍性結(jié)腸炎和Crohn病的炎性腸病、關(guān)節(jié)強直性脊椎炎、多發(fā)性硬化、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、慢性阻塞性肺病(COPD)、膿毒癥、內(nèi)毒素休克、肝炎以及I型糖尿病。
14.如權(quán)利要求11所述的方法，其中所述TNF-α介導(dǎo)的疾病是包括潰瘍性結(jié)腸炎和Crohn病的炎性腸病、牛皮癬或特應(yīng)性皮炎。
15.用于預(yù)防或治療PDE4介導(dǎo)的疾病的方法，其包括向有此需要的個體給藥治療有效量的如權(quán)利要求1-4之一所述的化合物或其藥物學(xué)可接受的鹽。
16.如權(quán)利要求15所述的方法，其中所述PDE4介導(dǎo)的疾病是氣喘或慢性阻塞性肺病(COPD)。
17.如權(quán)利要求1-4之一所述的化合物或其藥物學(xué)可接受的鹽在預(yù)防或治療TNF-介導(dǎo)的疾病中的應(yīng)用。
18.如權(quán)利要求17所述的應(yīng)用，其中所述TNF-α介導(dǎo)的疾病是炎性或免疫學(xué)疾病。
19.如權(quán)利要求17所述的應(yīng)用，其中所述TNF-α介導(dǎo)的疾病選自以下組中類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、牛皮癬關(guān)節(jié)炎、特應(yīng)性皮炎、包括潰瘍性結(jié)腸炎和Crohn病的炎性腸病、關(guān)節(jié)強直性脊椎炎、多發(fā)性硬化、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、慢性阻塞性肺病(COPD)、膿毒癥、內(nèi)毒素休克、肝炎、和I型糖尿病。
20.如權(quán)利要求17所述的應(yīng)用，其中所述TNF-α介導(dǎo)的疾病是包括潰瘍性結(jié)腸炎和Crohn病的炎性腸病、牛皮癬或特應(yīng)性皮炎。
21.如權(quán)利要求1-4之一所述的化合物或其藥物學(xué)可接受的鹽在預(yù)防或治療PDE4介導(dǎo)的疾病中的應(yīng)用。
22.如權(quán)利要求21所述的應(yīng)用，其中所述PDE4介導(dǎo)的疾病是氣喘或慢性阻塞性肺病(COPD)。
全文摘要
式I表示的2－環(huán)戊烯－1－酮肟衍生物或藥物學(xué)可接受的鹽抑制TNF－α或PDE4的形成，并因此在由TNF－α或PDE4介導(dǎo)的炎性或免疫學(xué)疾病中具有治療作用。
文檔編號C07C251/44GK101068774SQ200580041494
公開日2007年11月7日 申請日期2005年11月30日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月2日
發(fā)明者金淵俊, 金善映, 黃貞善, 林慶珉, 樸美英, 高現(xiàn)珠, 洪思龍, 申松錫, 崔鎮(zhèn)圭, 牟周炫, 鄭信, 禹柄英, 金星日 申請人:株式會社Amorepacific