專利名稱：維生素d類似物的立體選擇性合成的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及通過(guò)立體選擇性還原來(lái)制備鈣泊三醇{(5Z，7E，22E，24S)-24-環(huán)丙基-9，10-斷膽甾(secochola)-5，7，10(19)，22-四烯-1α-3β-24-三醇}或單水合鈣泊三醇的方法。本發(fā)明進(jìn)一步提供了新的中間體及合成用于制備鈣泊三醇或單水合鈣泊三醇的中間體的方法。
背景技術(shù)：
鈣泊三醇或鈣泊三烯(結(jié)構(gòu)式I)[CAS 112965-21-6]在抑制不期望的表皮角質(zhì)化細(xì)胞增殖方面展示很強(qiáng)的活性[F.A.C.M.Castelijins，M.J.Gerritsen，I.M.J.J.van Vlijmen-Willems，P.J.van Erp，P.C.M.van deKerkhof；Acta Derm.Venereol.79，11，1999]。已在許多臨床試驗(yàn)中證實(shí)了鈣泊三醇和單水合鈣泊三醇(II)在治療牛皮癬方面的功效[D.M.Ashcroft等人，Brit.Med.J.320，963-67，2000]且目前在許多商業(yè)藥物制劑中均使用鈣泊三醇。
在鈣泊三醇的制備中，在C-24處的羥基的特定立體化學(xué)對(duì)于生物學(xué)活性的完全表達(dá)是必需的。在目前的方法中，所需的立體化學(xué)通過(guò)下列方法之一來(lái)引入
(i)C-24酮三烯的非-非對(duì)映體立體選擇性還原，隨后通過(guò)色譜法分離所得到的C-24羥基差向異構(gòu)體的非對(duì)映立體異構(gòu)體混合物(WO 87/00834及M.J.Calverley，Tetrahedron，43(20)，4609-19，1987)，(ii)將帶有C-24羥基的對(duì)映體純的側(cè)鏈連接到維生素D骨架上(M.J.Calverley，Synlett，157-59，1990)，(iii)對(duì)C-24羥基差向異構(gòu)體之一進(jìn)行選擇性酶酯化作用，隨后通過(guò)色譜法分離(WO 03/060094)。
對(duì)C-24酮三烯進(jìn)行非-非對(duì)映體立體選擇性還原然后色譜分離差向異構(gòu)體混合物(i)是獲得所需差向異構(gòu)體的最廣泛應(yīng)用的程序。該還原過(guò)程主要得到不期望的C-24差向異構(gòu)體醇(通常含約60％不想要的24-R差向異構(gòu)體)且在制備規(guī)模上難以通過(guò)色譜法將所要的S-差向異構(gòu)體從該混合物中分離出來(lái)。
由于其多步驟及成本上的原因且由于使用了有毒的中間體，立體選擇性合成(ii)也不適于放大規(guī)模。
酶酯化過(guò)程(iii)除了所用酶的高成本之外，還具有這樣的缺點(diǎn)，即根據(jù)酶的選擇性其會(huì)引入1至2個(gè)額外的反應(yīng)步驟，所述步驟進(jìn)一步增加了該過(guò)程的成本。
直接將C-24酮立體選擇性還原為所需的C-24羥基差向異構(gòu)體已經(jīng)在例如WO 98/24800中以及由M.Ishiguro等人，J.C.S.Chem.Comm.，115-117，1981對(duì)于膽固醇衍生物進(jìn)行了描述。M.J.Calverly等人在Bioorg.Med.Chem.Lett.，1841-1844，3(9)，1993中描述了使用S-高山(alpine)硼烷對(duì)帶有未被保護(hù)的三烯系統(tǒng)的鈣泊三醇的側(cè)鏈三鍵類似物進(jìn)行立體選擇性還原。
使用立體選擇性還原方法合成鈣泊三醇的一個(gè)主要技術(shù)問(wèn)題源于如下事實(shí)，即迄今為止所知的用于合成鈣泊三醇的中間體的不飽和三烯系統(tǒng)是化學(xué)上不穩(wěn)定的，例如對(duì)于路易斯(Lewis)酸性條件是不穩(wěn)定的，它們相對(duì)容易被氧化且它們通常與所用的典型還原反應(yīng)條件不兼容。這導(dǎo)致產(chǎn)量下降、產(chǎn)物不純及冗長(zhǎng)的處理程序，尤其對(duì)于大規(guī)模生產(chǎn)而言。
本發(fā)明的目的之一是提供一種合成鈣泊三醇的替代方法，該方法可克服一種或多種上述的各種問(wèn)題及缺點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種使用包含立體選擇性還原步驟的新的合成路線來(lái)制備鈣泊三醇衍生物的富含非對(duì)映立體異構(gòu)體的C-24羥基差向異構(gòu)體的新方法。本發(fā)明進(jìn)一步提供化學(xué)上更穩(wěn)定的新的中間體，其中不穩(wěn)定的三烯系統(tǒng)以二氧化硫加合物的形式予以保護(hù)。通過(guò)制備鈣泊三醇衍生物的富含非對(duì)映立體異構(gòu)體的C-24羥基差向異構(gòu)體，后續(xù)的分離所期望的C-24 S-羥基差向異構(gòu)體的產(chǎn)量及效率可大大提高。
已經(jīng)出人意料地發(fā)現(xiàn)，通式結(jié)構(gòu)III的化合物， 其中X代表氫或OR2，且其中R1和R2可以相同或不同且代表氫或羥基保護(hù)基團(tuán)，在惰性溶劑中與還原劑一起或在手性助劑存在下與還原劑一起可以得到通式結(jié)構(gòu)IVa和IVb的化合物的混合物，
該混合物富含IVa，其中X、R1和R2如上所定義。
在第一方面，本發(fā)明涉及一種制備鈣泊三醇{(5Z，7E，22E，24S)-24-環(huán)丙基-9，10-斷膽甾-5，7，10(19)，22-四烯-1α-3β-24-三醇}或單水合鈣泊三醇的方法，其包括以下步驟(a)在惰性溶劑中用還原劑或在手性助劑存在下用還原劑還原通式結(jié)構(gòu)III的化合物(其中X代表OR2，且其中R1和R2可以相同或不同且代表氫或羥基保護(hù)基團(tuán))得到通式結(jié)構(gòu)IVa和IVb的化合物的混合物，該混合物富含IVa，且其中X、R1和R2如上所定義；(b)使富含IVa的通式結(jié)構(gòu)IVa和IVb的化合物的混合物在堿存在下反應(yīng)以得到富含Va的通式結(jié)構(gòu)Va和Vb的化合物的混合物 其中X、R1和R2如上所定義；(c)自富含Va的通式結(jié)構(gòu)Va和Vb的化合物的混合物中分離出通式結(jié)構(gòu)Va的化合物，其中X、R1和R2如上所定義；(d)將通式結(jié)構(gòu)Va的化合物異構(gòu)化為通式結(jié)構(gòu)VIa的化合物， 其中X、R1和R2如上所定義；及
(e)當(dāng)R1和/或R2不是氫時(shí)，除去通式結(jié)構(gòu)VIa化合物的羥基保護(hù)基團(tuán)R1和/或R2以生成鈣泊三醇或單水合鈣泊三醇。
在另一方面，本發(fā)明涉及一種制備鈣泊三醇或單水合鈣泊三醇的方法，其包含以上步驟(a)-(b)且進(jìn)一步包括以下步驟(f)將富含Va的通式結(jié)構(gòu)Va和Vb的化合物的混合物(其中X、R1和R2如權(quán)利要求2中所定義)異構(gòu)化為富含VIa的通式結(jié)構(gòu)VIa和VIb的化合物的混合物， 其中X、R1和R2如上所定義；(g)自富含VIa的通式結(jié)構(gòu)VIa和VIb的化合物的混合物中分離出通式結(jié)構(gòu)VIa的化合物，其中X、R1和R2如上所定義；(h)當(dāng)R1和/或R2不是氫時(shí)，除去通式結(jié)構(gòu)VIa化合物的羥基保護(hù)基團(tuán)R1和/或R2以生成鈣泊三醇或單水合鈣泊三醇。
在又一方面，本發(fā)明涉及一種制備鈣泊三醇{(5Z，7E，22E，24S)-24-環(huán)丙基-9，10-斷膽甾-5，7，10(19)，22-四烯-1α-3β-24-三醇}或單水合鈣泊三醇的方法，其包括以下步驟(j)在惰性溶劑中用還原劑或在手性助劑存在下用還原劑還原通式結(jié)構(gòu)III的化合物(其中X代表氫，且其中R1代表氫或羥基保護(hù)基團(tuán))得到富含IVa的通式結(jié)構(gòu)IVa和IVb的化合物的混合物，其中X和R1如上所定義，(k)使富含IVa的通式結(jié)構(gòu)IVa和IVb的化合物的混合物在堿存在下反應(yīng)以得到富含Va的通式結(jié)構(gòu)Va和Vb的化合物的混合物，其中X和R1如上所定義；
(l)自富含Va的通式結(jié)構(gòu)Va和Vb的化合物的混合物中分離出通式結(jié)構(gòu)Va的化合物，其中X和R1如上所定義；(m)用適當(dāng)?shù)牧u基化試劑將通式結(jié)構(gòu)Va的化合物羥基化(其中X和R1如上所定義)以得到通式結(jié)構(gòu)Va的化合物，其中X代表OR2且R2代表氫，R1如上所定義；(o)將通式結(jié)構(gòu)Va的化合物異構(gòu)化為通式結(jié)構(gòu)VIa的化合物，其中X、R1和R2如上所定義；及(p)當(dāng)R1不是氫時(shí)，除去通式結(jié)構(gòu)VIa化合物的羥基保護(hù)基R1以生成鈣泊三醇或單水合鈣泊三醇。
在又一方面，本發(fā)明涉及一種制備鈣泊三醇或單水合鈣泊三醇的方法，其包括權(quán)利要求4的步驟(j)-(l)且進(jìn)一步包括以下步驟(q)用羥基保護(hù)基團(tuán)保護(hù)通式結(jié)構(gòu)Va化合物的C-24羥基，其中X代表氫，且其中R1代表氫或羥基保護(hù)基團(tuán)；(r)用適當(dāng)?shù)牧u基化試劑使C-24羥基被保護(hù)的通式結(jié)構(gòu)Va的化合物(其中X和R1如上所定義)羥基化以得到C-24羥基被保護(hù)的通式結(jié)構(gòu)Va的化合物，其中X代表OR2且R2代表氫，R1如上所定義；(s)除去通式結(jié)構(gòu)Va化合物的C-24羥基保護(hù)基團(tuán)；(t)將通式結(jié)構(gòu)Va的化合物異構(gòu)化為通式結(jié)構(gòu)VIa的化合物，其中X、R1和R2如上所定義；及(u)當(dāng)R1不是氫時(shí)，除去通式結(jié)構(gòu)VIa化合物的羥基保護(hù)基團(tuán)R1以生成鈣泊三醇或單水合鈣泊三醇。
在又一方面，本發(fā)明涉及一種通過(guò)將通式結(jié)構(gòu)VII或VIII的化合物
其中R1和R2如上所定義，與二氧化硫反應(yīng)以制備通式結(jié)構(gòu)III的化合物的方法，其中X代表氫或OR2，且其中R1和R2可以相同或不同且代表氫或羥基保護(hù)基團(tuán)。
在又一方面，本發(fā)明涉及一種在堿存在下使富含IVa的通式結(jié)構(gòu)IVa和IVb的化合物的混合物(其中X代表氫或OR2，且其中R1和R2可以相同或不同且代表氫或羥基保護(hù)基團(tuán))反應(yīng)以得到富含Va的通式結(jié)構(gòu)Va和Vb的化合物的混合物(其中X、R1和R2如上所定義)的方法。
在又一方面，本發(fā)明涉及一種制備鈣泊三醇{(5Z，7E，22E，24S)-24-環(huán)丙基-9，10-斷膽甾-5，7，10(19)，22-四烯-1α-3β-24-三醇}或單水合鈣泊三醇的包含任意一種上述方法的方法。
在又一方面，本發(fā)明涉及通式結(jié)構(gòu)IIIa或IIIb的化合物，或其混合物， 其中X代表氫或OR2，且其中R1和R2可以相同或不同且代表氫或羥基保護(hù)基團(tuán)。
在又一方面，本發(fā)明涉及通式結(jié)構(gòu)IVaa、IVab、IVba、IVbb、IVb的化合物，或其混合物，
其中X代表氫或OR2，且其中R1和R2可以相同或不同且代表氫或羥基保護(hù)基團(tuán)。
在又一方面，本發(fā)明涉及通式結(jié)構(gòu)IIIa、IIb、IVaa、IVba、IVab、IVbb的化合物作為生產(chǎn)鈣泊三醇或單水合鈣泊三醇的中間體的用途。
定義本文所用的″羥基保護(hù)基團(tuán)″是指任何能形成對(duì)于目標(biāo)反應(yīng)穩(wěn)定的衍生物的基團(tuán)，其中所述羥基保護(hù)基團(tuán)可由不攻擊再生的羥基的試劑來(lái)選擇性地除去。可由羥基保護(hù)試劑與羥基的選擇性反應(yīng)得到該衍生物。硅烷基衍生物，諸如形成硅烷基醚的叔丁基二甲基硅烷基，是羥基保護(hù)基的實(shí)例。氯硅烷，例如叔丁基二甲基氯硅烷(TBSCl)、三甲基氯硅烷、三乙基氯硅烷、二苯基甲基氯硅烷、三異丙基氯硅烷及叔丁基二苯基氯硅烷是羥基保護(hù)試劑的實(shí)例。氟化氫，例如在乙腈中的HF水溶液，或氟化四(正丁銨)是可除去硅烷基的試劑的實(shí)例。其它羥基保護(hù)基團(tuán)包括醚(例如，四氫吡喃(THP)醚)，包括烷氧基烷基醚(縮醛)(例如，甲氧基甲基(MOM)醚)或酯(例如，氯乙酸酯、三甲基乙酸酯、乙酸酯或苯甲酸酯)。所有包括于本申請(qǐng)范圍內(nèi)的羥基保護(hù)基團(tuán)及保護(hù)和去保護(hù)方法的非限制性實(shí)例可參見″ProtectiveGroups in Organic Synthesis″，第3版，T.W.Greene和P.G.M.Wuts編，John Wiley 1999，及″Protecting Groups″，第1版，P.J.Kocienski，G.Thieme 2000。
本文所用的″烷基″是指具有一至二十個(gè)碳原子、優(yōu)選一至七個(gè)碳原子的可為環(huán)狀或非環(huán)狀的直鏈或支鏈的烷基。甲基、乙基、正丙基、異丙基、戊基、己基及叔丁基二甲基是烷基的非限制性實(shí)例。
本文所用的″還原劑″是指任何可以還原(包括對(duì)映體選擇性或非對(duì)映體立體選擇性還原)通式結(jié)構(gòu)III化合物的C-24酮基以得到通式結(jié)構(gòu)IV的化合物的試劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，還原劑可不需手性助劑而還原通式結(jié)構(gòu)III化合物的C-24酮基而得到通式結(jié)構(gòu)IV的化合物的混合物，其中該混合物富含所需的差向異構(gòu)體IVa(優(yōu)選得到24-S異構(gòu)體)。在另一實(shí)施方案中，還原劑可在一手性助劑存在下還原通式結(jié)構(gòu)III化合物的C-24酮基而得到通式結(jié)構(gòu)IV的化合物的混合物，其中該混合物富含所需的差向異構(gòu)體IVa(優(yōu)選得到24-S異構(gòu)體)。還原劑可為手性或非手性的。還原劑的例子包括(但不限于)硼烷還原劑、金屬氫化物如氫化鋰鋁、硼氫化鈉或AlH3(任選地在鑭系元素鹽(例如，LaCl3、CeBr3、CeCl3)的存在下)或NaBH3(OAc)、Zn(BH4)2和Et3SiH。其它還原劑包括(但不限于)在催化劑諸如鉑或釕的存在下的氫、在乙醇中的鈉、異丙醇和異丙醇鋁以及在水或醇中的鋅粉末。
本文所用的″硼烷還原劑″包括硼烷或任何硼烷衍生物，例如硼烷與胺或醚的配合物。硼烷還原劑的非限制性實(shí)例包括N，N-二乙基苯胺-硼烷、硼烷-四氫呋喃、9-硼雜二環(huán)壬烷(9-BBN)或硼烷二甲基硫醚。
本文所用的″手性助劑″是指任何手性化合物或光學(xué)活性催化劑，例如，包含不對(duì)稱取代的碳原子的化合物或軸向手性化合物，或手性化合物和/或光學(xué)活性催化劑的混合物，在用所述還原劑還原通式結(jié)構(gòu)III的化合物的過(guò)程中，該手性助劑可使通式結(jié)構(gòu)IVa的化合物的產(chǎn)量相對(duì)于其差向異構(gòu)體的產(chǎn)量有所改良(增加摩爾比率IVa∶IVb)。因此，該手性助劑為在通式結(jié)構(gòu)III化合物的還原反應(yīng)中與不存在或不涉及手性助劑時(shí)的IVa產(chǎn)量或立體選擇性相比能夠增加立體選擇性的任何化合物。手性助劑的非限制性實(shí)例包括手性1，2-氨基醇，例如手性順-1-氨基-2-茚滿醇衍生物，例如(1S，2R)-(-)-順-1-氨基-2-茚滿醇，或順-1-氨基-1，2，3，4-四氫萘-2-醇，例如(1S，2R)-順-1-氨基-1，2，3，4-四氫萘-2-醇。其它實(shí)例為聯(lián)萘衍生物，例如乙酸(R)-2，2′-雙(二苯基膦基)-1，1′-聯(lián)萘-釕，2，2′-二羥基-1，1′聯(lián)萘衍生物。其它實(shí)例包括(但不限于)(R)-(+)-α，α-二苯基-2-吡咯烷甲醇、(R)-(+)-2-氨基-4-甲基-1，1-二苯基-1-戊醇、(R)-(-)-2-氨基-3-甲基-1，1-二苯基-1-丁醇、(R)-(+)-2-氨基-1，1，3-三苯基-1-丙醇及(1R，2S)-(-)-2-氨基-1，2-二苯基乙醇。
本文所用的″惰性溶劑″是指在所用的反應(yīng)條件下與所述還原劑兼容的任何有機(jī)溶劑或所述溶劑的混合物。該溶劑的選擇取決于所用的特定還原劑。惰性溶劑的非限制性實(shí)例包括烴類化合物如甲苯以及醚如叔丁基甲基醚或四氫呋喃。
富含IVa的通式結(jié)構(gòu)IVa和IVb化合物的混合物是指任選地包含其它化合物或溶劑的混合物的IVa/IVb的摩爾比率(非對(duì)映異構(gòu)體比率)為1(50∶50)或大于1，從而該混合物含有至少50％通式結(jié)構(gòu)IVa的化合物(含有50％或更少的通式結(jié)構(gòu)IVb的化合物)。
富含Va的通式結(jié)構(gòu)Va和Vb化合物的混合物是指任選地包含其它化合物或溶劑的混合物的Va/Vb的摩爾比率(非對(duì)映異構(gòu)體比率)為1(50∶50)或大于1，從而該混合物含有至少50％通式結(jié)構(gòu)Va的化合物(含有50％或更少的通式結(jié)構(gòu)Vb的化合物)。
富含VIa的通式結(jié)構(gòu)VIa和VIb化合物的混合物是指任選地包含其它化合物或溶劑的混合物的VIa/VIb的摩爾比率(非對(duì)映異構(gòu)體比率)為1(50∶50)或大于1，從而該混合物含有至少50％通式結(jié)構(gòu)VIa的化合物(含有50％或更少的通式結(jié)構(gòu)VIb的化合物)。
本文所用的″將化合物分離″包括將化合物純化和/或分離至例如至少90％純度，至例如至少95％純度，諸如97％純度、98％純度或99％純度。術(shù)語(yǔ)″將化合物分離″還包括提高化合物在所述化合物的混合物(任選地包含溶劑)中的濃度，從而使混合物在所述分離作用后進(jìn)一步富含所需或優(yōu)選的化合物或異構(gòu)體(例如，差向異構(gòu)體)。
實(shí)施方案在本發(fā)明目前的最佳實(shí)施方案中X代表OR2。在本發(fā)明目前的優(yōu)選實(shí)施方案中R1和/或R2代表烷基硅烷基，例如叔丁基二甲基硅烷基，最優(yōu)選R1和R2相同。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中R1和R2代表氫。
在本發(fā)明目前的優(yōu)選實(shí)施方案中還原劑為硼烷還原劑，例如N，N-二乙基苯胺-硼烷、硼烷-四氫呋喃或硼烷二甲基硫醚。
在本發(fā)明目前的優(yōu)選實(shí)施方案中，還原步驟用手性還原劑或在手性助劑的存在下進(jìn)行。
在本發(fā)明目前的優(yōu)選實(shí)施方案中，手性助劑為手性1，2-氨基-醇，例如手性順-1-氨基-2-茚滿醇衍生物，例如(1S，2R)-(-)-順-1-氨基-2-茚滿醇。
在本發(fā)明目前的優(yōu)選實(shí)施方案中，還原步驟在10-20℃、尤其是15-20℃之間的溫度下進(jìn)行。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，富含IVa的通式結(jié)構(gòu)IVa和IVb化合物的混合物的摩爾比率(非對(duì)映異構(gòu)體比率IVa/IVb)大于55∶45，例如56∶44，例如57∶43，例如59∶41，例如60∶40，例如63∶37，例如65∶35，例如68∶32，例如70∶30，例如72∶28，例如73∶27，例如74∶26，例如75∶25，例如76∶24，例如77∶23，例如78∶22，例如79∶21，例如80∶20。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，富含Va的通式結(jié)構(gòu)Va和Vb化合物的混合物的摩爾比率(非對(duì)映異構(gòu)體比率Va/Vb)大于55∶45，例如56∶44，例如57∶43，例如59∶41，例如60∶40，例如63∶37，例如65∶35，例如68∶32，例如70∶30，例如72∶28，例如73∶27，例如74∶26，例如75∶25，例如76∶24，例如77∶23，例如78∶22，例如79∶21，例如80∶20。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，富含VIa的通式結(jié)構(gòu)VIa和VIb化合物的混合物的摩爾比率(非對(duì)映異構(gòu)體比率VIa/VIb)大于55∶45，例如56∶44，例如57∶43，例如59∶41，例如60∶40，例如63∶37，例如65∶35，例如68∶32，例如70∶30，例如72∶28，例如73∶27，例如74∶26，例如75∶25，例如76∶24，例如77∶23，例如78∶22，例如79∶21，例如80∶20。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，例如通過(guò)色譜法自富含Va的通式結(jié)構(gòu)Va和Vb化合物的混合物中分離通式結(jié)構(gòu)Va的化合物，其中X、R1和R2如上在步驟(c)中所定義。
在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)色譜法自富含VIa的通式結(jié)構(gòu)VIa和VIb化合物的混合物中分離通式結(jié)構(gòu)VIa的化合物，其中X、R1和R2如上在步驟(g)中所定義。
合成方法舉例而言，可經(jīng)Diels-Alder反應(yīng)通過(guò)用二氧化硫處理通式結(jié)構(gòu)VII或VIII的化合物來(lái)合成通式結(jié)構(gòu)III的化合物。所用的二氧化硫可為液體、氣體或溶解于適當(dāng)?shù)娜軇┲?。適用于Diels-Alder反應(yīng)的溶劑為所有與反應(yīng)條件兼容的溶劑，例如，烷烴類如己烷或庚烷，烴類如二甲苯、甲苯，醚類如二乙醚或甲基叔丁基醚(MTBE)醚，乙酸酯類如乙酸乙酯或乙酸2-丙酯，鹵化溶劑類如二氯甲烷，或所述溶劑的混合物。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，溶劑為甲苯。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，溶劑為水非混溶性溶劑與水的混合物，例如甲苯與水的混合物。反應(yīng)亦可在沒(méi)有溶劑的純二氧化硫中進(jìn)行。反應(yīng)過(guò)程的適當(dāng)反應(yīng)溫度為-50℃至60℃，例如-30℃至50℃，例如-15℃至40℃，例如-5℃至30℃，例如0℃至35℃，例如5℃至30℃，最優(yōu)選例如10℃至25℃，例如15℃至20℃。在一個(gè)實(shí)施方案中，過(guò)量使用二氧化硫(摩爾比)，例如過(guò)量5-100摩爾，例如過(guò)量7-30摩爾，例如過(guò)量10-15摩爾。通過(guò)例如用堿的水溶液(例如，氫氧化鈉水溶液)洗滌或通過(guò)將二氧化硫蒸餾除去(任選地與溶劑一起除去，任選地在減壓下)，可自反應(yīng)混合物中除去任何過(guò)量的未反應(yīng)的二氧化硫。通式結(jié)構(gòu)III的化合物通常以其差向異構(gòu)體IIIa和IIIb的混合物的形式得到。
在Diels-Alder反應(yīng)中所得到的差向異構(gòu)體混合物的摩爾比率IIIa/IIIb取決于基團(tuán)X、R1和R2及所用的反應(yīng)條件。本發(fā)明包括所有可能組成(摩爾比率IIIa/IIIb)的混合物，例如1∶99，例如2∶98，例如3∶97，例如4∶96，例如5∶95，例如10∶90，例如85∶15，例如80∶20，例如75∶25，例如30∶70，例如35∶65，例如40∶60，例如45∶55，例如50∶50，例如55∶45，例如60∶40，例如65∶35，例如70∶30，例如75∶25，例如80∶20，例如85∶10，例如90∶10，例如95∶5，例如96∶4，例如97∶3，例如98∶2，例如99∶1。
通式III包括所有如上可能組成(摩爾比率IIIa/IIIb)的混合物。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，如以下還原步驟中通式III所示，化合物IIIa和IIIb以混合物的形式使用?？扇芜x地例如通過(guò)色譜法或結(jié)晶法來(lái)純化或分離IIIa和IIIb的混合物。在另一實(shí)施方案中，將化合物IIIa用于以下的還原步驟中。在又一實(shí)施方案中，將化合物IIIb用于以下的還原步驟中。
舉例而言，可根據(jù)例如M.J.Calverley，Tetrahedron，第43卷，第20期，第4609-4619頁(yè)，1987或在WO 87/00834及其中所引用的參考文獻(xiàn)中所揭示的方法來(lái)合成通式結(jié)構(gòu)VII的化合物。舉例而言，在所述參考文獻(xiàn)中所描述的化合物VII(其中X為OR2且R1和R2均為叔丁基二甲基硅烷基)可用在乙腈中的氫氟酸水溶液來(lái)去保護(hù)，以得到其中X為OR2且R1或R2為氫的化合物的混合物，或得到其中X為OR2且R1和R2均為氫的化合物。如本文所述，所述化合物的混合物可例如通過(guò)色譜法或結(jié)晶法來(lái)分離。通過(guò)將所述通式結(jié)構(gòu)VII的化合物(其中R1和/或R2為氫)與適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)試劑反應(yīng)，可引入新的基團(tuán)R1和/或R2。取決于所用保護(hù)試劑的化學(xué)計(jì)量及反應(yīng)條件，可得到未保護(hù)、單保護(hù)和二保護(hù)的化合物的混合物。然后混合物的任何中間體(其中X為OR2且R1或R2之一為氫)可通過(guò)色譜法加以分離并與不同于第一次所用的保護(hù)試劑的適當(dāng)保護(hù)試劑反應(yīng)，以得到其中X為OR2且R1不同于R2的通式結(jié)構(gòu)VII的化合物。
例如，可從M.J.Calverley，Tetrahedron，第43卷，第20期，第4610頁(yè)，1987中所描述的化合物7a和/或7b開始且后接如上及如以上所引用的參考文獻(xiàn)中所描述的相似程序和一般合成方法而制備通式結(jié)構(gòu)VII的化合物，其中X為氫且R1為氫或羥基保護(hù)基。
本發(fā)明的還原過(guò)程可例如通過(guò)將通式結(jié)構(gòu)III的前手性酮與手性硼烷還原劑或在手性助劑存在下與硼烷還原劑反應(yīng)而進(jìn)行。該過(guò)程導(dǎo)致前手性酮的對(duì)映體選擇性/非對(duì)映體立體選擇性還原，從而使兩種可能的差向異構(gòu)體IVa或IVb之一的形成比相應(yīng)的差向異構(gòu)體占優(yōu)。對(duì)映體選擇性/非對(duì)映體立體選擇性的程度取決于所用的還原劑、手性助劑及反應(yīng)條件。
通式結(jié)構(gòu)III化合物的還原反應(yīng)通常在介于-80℃至70℃，例如-40℃至60℃，例如-15℃至50℃，例如-5℃至40℃，舉例而言0℃至5℃或5℃至35℃之間的溫度間隔內(nèi)進(jìn)行。在一個(gè)實(shí)施方案中，溫度間隔介于10℃至30℃，例如15℃至25℃，例如15℃至20℃之間。最適宜的溫度取決于所用的特定反應(yīng)條件及試劑。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，在反應(yīng)完成后立即將反應(yīng)混合物冷至0-10℃以避免形成副產(chǎn)物。若使用N，N-二乙基苯胺作為還原劑，則可通過(guò)用鹽酸水溶液萃取而容易地將所形成的N，N-二乙基苯胺從反應(yīng)混合物中除去。優(yōu)選用相對(duì)于所萃取的堿而言為一摩爾當(dāng)量的1M的鹽酸進(jìn)行萃取。
例如，在諸如氮?dú)獾亩栊詺夥障拢瑢⑷芜x地溶解于惰性溶劑或與惰性溶劑混合的還原劑添加至任選地溶解于惰性溶劑或與惰性溶劑混合的通式結(jié)構(gòu)III的化合物中?；蛘?，可將任選地溶解于惰性溶劑或與惰性溶劑混合的通式結(jié)構(gòu)III的化合物添加至任選地溶解于惰性溶劑或與惰性溶劑混合之還原劑中(順序相反)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，以與通式結(jié)構(gòu)III的化合物等摩爾的量或過(guò)量摩爾量使用還原劑。在本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案中，還原劑/通式結(jié)構(gòu)III化合物的摩爾比率為1.0-5.0。在一個(gè)目前優(yōu)選的實(shí)施方案中，還原劑/通式結(jié)構(gòu)III的化合物的摩爾比率為1.8-3.0，例如2.3-2.9，例如2.5-2.7。
手性助劑可與還原劑在還原反應(yīng)之前原位反應(yīng)以形成手性還原劑，或者手性助劑可在與還原劑形成的配合物中例如充當(dāng)配體以得到手性還原劑。本發(fā)明包括使用在還原通式結(jié)構(gòu)III的化合物之前分別制備和分離的所述手性還原劑或手性配體-還原劑配合物。
因此，術(shù)語(yǔ)″在手性助劑存在下的還原劑″包括任何手性還原劑。例如，手性助劑可在還原反應(yīng)之前與硼烷還原劑原位反應(yīng)以形成手性硼烷還原劑，或者手性助劑可充當(dāng)硼烷配合物中的手性配體。所述手性硼烷還原劑的實(shí)例為手性氧硼雜環(huán)戊烷或氧氮雜硼雜環(huán)戊烷，例如衍生自(1R，2S)-順-1-氨基-2-茚滿醇、(1S，2R)-順-1-氨基-2-茚滿醇、(S)-脯胺醇、(R)-脯胺醇或B-(3-蒎基)-9-硼雜二環(huán)[3.3.2]壬烷(高山-硼烷)的手性氧氮雜硼雜環(huán)戊烷試劑，或例如5，5-二苯基-2-甲基-3，4-橋亞丙基-1，3，2-氧氮雜硼雜環(huán)戊烷、(S)-2-甲基-CBS-氧氮雜硼雜環(huán)戊烷、(R)-2-甲基-CBS-氧氮雜硼雜環(huán)戊烷。本發(fā)明因此包括使用在還原通式結(jié)構(gòu)III的化合物之前制備和分離的所述手性還原劑(例如手性硼烷還原劑)或手性配體-還原劑配合物(例如手性配體-硼烷配合物)。
手性配體與還原劑所形成的配合物的另一個(gè)實(shí)例為L(zhǎng)iAlH4與2，2′-二羥基-1，1′-聯(lián)萘的配合物。
還原劑/手性助劑的摩爾比率通常在0.1-20.0范圍內(nèi)，例如0.4-10.0，例如0.3-5.0，例如0.5-4.5，例如1.0-4.0，例如1.9-3.1，例如2.1-2.9，例如2.3-2.7，例如10.8、5.4、2.6、2.5或1.6。
手性助劑可以以催化量存在，例如相對(duì)于通式結(jié)構(gòu)III的化合物或還原劑的亞化學(xué)計(jì)量或等摩爾或摩爾過(guò)量。例如，手性助劑/化合物III的比率可為0.25-2.5，例如0.5-2.0，例如0.8-1.3，例如0.9-1.2，例如1.0-1.1。
手性助劑對(duì)特定對(duì)映體的選擇性將決定通式結(jié)構(gòu)IV的化合物中C-24位羥基的立體選擇性定位。優(yōu)選主要在C-24位產(chǎn)生S-構(gòu)型的手性助劑。
Deloux和Srebnik[Chem.Rev.93，763，1993]綜述了經(jīng)硼烷催化的反應(yīng)?；谑中愿男缘呐鹜榈挠行Т呋瘎┑膶?shí)例例如可見于[A.Hirao，J.Chem.Soc.Chem.Commun.315，1981，E.J.Corey，J.Am.Chem.Soc.109，7925，1987]中。
在使用硼烷的立體選擇性還原反應(yīng)中合成和/或使用例如1，2-和1，3-氨基醇的實(shí)例例如可見于[E.Didier等人，Tetrahedron 47，4941-4958，1991、C.H.Senanayake等人，Tetrahedron Letters，36(42)，7615-18，1995、EP0698028、EP 0640089、EP 0305180、WO 93/23408、WO 94/26751]。在硼烷還原反應(yīng)中合成和/或使用手性順-1-氨基-2-茚滿醇衍生物例如可見于[C.H.Senanayake，Aldrichimica Acta，31(1)，1-15，1998、A.K.Ghosh等人，Synthesis，937-961，1998、Y.Hong等人，Tetrahedron Letters，35(36)，6631-34，1994、B.Di Simone，Tetrahedron Asymmetry，6(1)301-06，1995、Y.Hong等人，Tetrahedron Letters，36(36)，6631-34，1994、R.Hett等人，Org.Process Res.& Dev.，2，96-99，1998或EP 0763005]及其中所引用的參考文獻(xiàn)中。
可通過(guò)省略一個(gè)或多個(gè)反應(yīng)步驟或通過(guò)在反應(yīng)序列的任一階段引入額外的純化或反應(yīng)步驟而對(duì)本文所描述的用于制備鈣泊三醇的方法在反應(yīng)步驟的順序方面進(jìn)行修改。本發(fā)明包括所有所述的修改。
如本文所描述的用于制備鈣泊三醇的方法進(jìn)一步包括其中化合物或中間體的羥基保護(hù)基R1和/或R2(其中R1和/或R2不為氫)在反應(yīng)序列的任一階段被除去的所有變化形式。其中R1和/或R2為氫的化合物或中間體可用保護(hù)試劑(包括產(chǎn)生不同于在反應(yīng)序列早期被除去的那些保護(hù)基的保護(hù)基的保護(hù)試劑)在反應(yīng)序列的任一階段加以保護(hù)。
本發(fā)明的化合物及中間體可包含導(dǎo)致產(chǎn)生異構(gòu)體形式如對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體及幾何異構(gòu)體的不對(duì)稱取代的(手性)碳原子及碳-碳雙鍵。
差向異構(gòu)體是指在具有多個(gè)可產(chǎn)生立體對(duì)稱中心(stereogenic centre)的分子(例如，本發(fā)明所涉及的維生素D類似物)的多個(gè)四面體立體對(duì)稱中心中只有一處具有相反構(gòu)型(R或S)的非對(duì)映異構(gòu)體。
因此，將例如C-24指定為一對(duì)對(duì)映異構(gòu)體的差向異構(gòu)體中心是指在該對(duì)對(duì)映異構(gòu)體的其它立體對(duì)稱中心處的構(gòu)型是相同的。
本發(fā)明涉及所有異構(gòu)體形式，例如，差向異構(gòu)體，無(wú)論是純的形式還是其混合物的形式。
在本發(fā)明的化合物或中間體的分子式或名稱中指定具體的構(gòu)象或構(gòu)型表明該具體的構(gòu)象或構(gòu)型是本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案。在本發(fā)明的化合物或中間體的分子式或名稱中指定具體的構(gòu)象或構(gòu)型也包括除具體指定的以外的任何其它異構(gòu)體(以純的形式或其混合物的形式)作為本發(fā)明的另一實(shí)施方案。
在本發(fā)明的化合物或中間體的分子式或名稱中未指定具體的構(gòu)象或構(gòu)型表明這些具體構(gòu)象或構(gòu)型的混合物是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案。例如，通式III的化合物是通式IIIa和IIIb的差向異構(gòu)體的混合物。
在本發(fā)明的化合物或中間體的分子式或名稱或編號(hào)中未指定具體的構(gòu)象或構(gòu)型時(shí)，將包括任何具體的異構(gòu)體(雖然未以純的形式具體指明)作為本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案。
例如，通式IVa的化合物包括以下兩種差向異構(gòu)體IVaa及IVab。
通式III的化合物的含義因此包括差向異構(gòu)體IIIa及IIIb。
本發(fā)明的化合物及中間體的純立體異構(gòu)體形式可通過(guò)應(yīng)用本領(lǐng)域已知的方法例如色譜法或結(jié)晶法，或通過(guò)立體選擇性合成法來(lái)得到。
本發(fā)明的分離、拆分及純化方法包括(但不限于)色譜法，諸如吸附色譜法(包括柱色譜法及模擬移動(dòng)床法(SMB))，結(jié)晶法或蒸餾法。可相繼或組合使用分離、拆分及純化方法。
適用于分離本發(fā)明的維生素D類似物的柱色譜法是藥物化學(xué)領(lǐng)域的技術(shù)人員所熟知的。該技術(shù)使用填充有固定相(例如二氧化硅，諸如經(jīng)預(yù)處理的二氧化硅)的柱子，將待分離的樣品裝于該柱子上。然后用適當(dāng)?shù)南疵搫┫疵摌悠?。洗脫可為等?isocratic)洗脫或所謂的溶劑程序化(梯度)洗脫，其中洗脫劑的組成有規(guī)律地(例如，線性地)或無(wú)規(guī)律地(例如，隨時(shí)間階梯式地)變化。色譜領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的經(jīng)預(yù)處理的硅膠是適宜的固定相。實(shí)現(xiàn)所需分離的洗脫程序的一個(gè)例子是用5％(體積比)乙酸乙酯的己烷或庚烷溶液洗脫，隨后用純乙酸乙酯洗脫。其它適宜的洗脫劑可由技術(shù)人員通過(guò)常規(guī)的開發(fā)方法推導(dǎo)出來(lái)，例如，可使用具有適當(dāng)極性的庚烷和乙酸乙酯的混合物。
對(duì)于色譜法步驟而言，可使用能夠拆分C-24差向異構(gòu)體混合物的任何固定相(填料)和洗脫劑的組合。所述組合可通過(guò)常規(guī)試驗(yàn)由技術(shù)人員容易地加以確定。優(yōu)選的固定相的實(shí)例為二氧化硅，例如經(jīng)處理的二氧化硅。
富含IVa的通式結(jié)構(gòu)IVa和IVb的化合物的混合物在堿的存在下生成富含Va的通式結(jié)構(gòu)Va和Vb的化合物的混合物(其中X、R1和R2如上所定義)的的逆向Diels-Alder反應(yīng)可在所有與反應(yīng)條件兼容的溶劑中進(jìn)行，例如，烷烴類如己烷或庚烷，烴類如二甲苯、甲苯，醚類如二乙醚或甲基叔丁基醚(MTBE)，乙酸酯類如乙酸乙酯或乙酸2-丙酯，鹵化溶劑如二氯甲烷，水或所述溶劑的混合物。
所述逆向Diels-Alder反應(yīng)方法是維生素D合成領(lǐng)域的技術(shù)人員所熟知的(例如參見，M.J.Calverley，Tetrahedron，第43卷，第20期，第4609-4619頁(yè)，1987或WO 87/00834)。
優(yōu)選的溶劑為甲苯、叔丁基甲基醚、水或其混合物。
用于逆向Diels-Alder反應(yīng)中的適當(dāng)?shù)膲A包括(但不限于)NaHCO3、KHCO3、Na2CO3或K2CO3。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，所述的堿為NaHCO3水溶液和/或該逆向Diels-Alder反應(yīng)在60℃以上，例如70℃以上，例如介于70℃和120℃之間，例如介于74℃和79℃之間，例如介于72℃和78℃之間進(jìn)行。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，在逆向Diels-Alder反應(yīng)完成之后，在反應(yīng)后處理的過(guò)程中進(jìn)行的萃取及相分離的溫度范圍在約30℃-40℃之間。
通式結(jié)構(gòu)VIII的化合物可由通式結(jié)構(gòu)VII的化合物的異構(gòu)化作用得到。
將通式Va和/或Vb的化合物異構(gòu)化為VIa和/或VIb，或?qū)II的化合物異構(gòu)化為VIII的化合物的方法是維生素D合成領(lǐng)域的技術(shù)人員所熟知的。反應(yīng)條件例如可見于M.J.Calverley，Tetrahedron，第43卷，第20期，第4609-4619頁(yè)，1987或WO 87/00834及其中所引用的參考文獻(xiàn)。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，異構(gòu)化作用是例如在三重態(tài)(triplet)敏化劑(例如，蒽或9-乙酰基蒽)的存在下用紫外(UV)光進(jìn)行的光異構(gòu)化作用。
舉例而言，可在由Hesse開發(fā)的條件下，例如用SeO2及N-甲基嗎啉N-氧化物在回流的甲醇和/或二氯甲烷中[D.R.Andrews等人，J.Org.Chem.，1986，51，1637]或按照M.J.Calverley，Tetrahedron，第43卷，第20期，第4609-4619頁(yè)，1987或WO 87/00834中的描述，通過(guò)亞硒酸鹽介導(dǎo)的烯丙基型羥基化作用，用適當(dāng)?shù)牧u基化試劑將其中X＝氫的通式III、IV、V、VI或VII的化合物羥基化，以得到其中X＝羥基(X＝OR2且R2＝H)的通式III、IV、V、VI或VII的化合物。起始材料的羥基可通過(guò)諸如以上所描述的方法用諸如以上所定義的適當(dāng)保護(hù)基團(tuán)加以保護(hù)，例如以避免所述羥基的不期望的氧化作用。
可例如通過(guò)WO 94/15912所描述的方法由含水溶劑中結(jié)晶鈣泊三醇而得到水合鈣泊三醇。
實(shí)施例概要
除非另外注釋，否則所有化學(xué)品均來(lái)自商業(yè)來(lái)源。所有熔點(diǎn)均未經(jīng)校正。除非另外說(shuō)明，否則對(duì)于1H核磁共振(NMR)光譜(300MHz)及13C NMR(75.6MHz)而言，氘代氯仿溶液的化學(xué)位移值(δ)(單位以ppm計(jì))是相對(duì)于內(nèi)標(biāo)四甲基硅烷(δ＝0.00)或氯仿(δ＝7.26)或氘代氯仿(對(duì)于13C NMR δ＝76.81)標(biāo)準(zhǔn)物而給出。除非給出一范圍，否則經(jīng)定義(雙重峰(d)、三重峰(t)、四重峰(q))或未經(jīng)定義(m)的多重峰的值為接近中點(diǎn)處的值。所用的所有有機(jī)溶劑均屬于技術(shù)級(jí)。色譜法在硅膠上進(jìn)行，任選地使用快速色譜技術(shù)。涂有硅膠的TLC板來(lái)自Merck KGaA。用于色譜法的二氧化硅優(yōu)選來(lái)自Merck KGaA GermanyLiChroprep Si60(15-25μm)。除非另外注釋，否則用乙酸乙酯、二氯甲烷、己烷、正己烷、庚烷或乙酸乙酯、二氯甲烷、甲醇及石油醚(40-60)、己烷或庚烷的適當(dāng)混合物作為洗脫劑。所有反應(yīng)可在惰性氣氛下，例如，在氮?dú)鈿夥障卤憷剡M(jìn)行。
通式結(jié)構(gòu)III的化合物實(shí)施例1IIIX＝OR2，R1、R2＝叔丁基二甲基硅烷基1(S)，3(R)-雙(叔丁基二甲基硅烷氧基)-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾(secopregna)-5(E)，7(E)，10(19)-三烯SO2-加合物將20(R)，1(S)，3(R)-雙(叔丁基二甲基硅烷氧基)-20-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯(根據(jù)M.J.Calverley，Tetrahedron，第43卷，第20期，第4609-4619頁(yè)，1987中所描述的方法制備)(20.0g)于20℃下溶解于甲苯(210ml)中，接著邊攪拌邊添加水(40ml)及SO2(20ml)。當(dāng)通過(guò)HPLC{出自Merck的柱LiChrosorb Si 60 5μm，250×4mm，2ml/min的流速，在270nm處檢測(cè)及質(zhì)量檢測(cè)，己烷/乙酸乙酯9∶1(體積比)}判斷反應(yīng)已完成之后(通常在2-2.5小時(shí)之后)，在10-18℃下添加氫氧化鈉(27.7％，60ml)與水(80ml)的混合物直至反應(yīng)混合物pH值為6。分離出甲苯相且在真空下不經(jīng)加熱(優(yōu)選低于30℃)除去溶劑，得到固體混合物形式的兩種差向異構(gòu)的SO2加合物IIIa和IIIb，經(jīng)TLC檢測(cè)，其主要含有IIIa。兩種差向異構(gòu)的SO2加合物IIIa和IIIb可通過(guò)色譜法分離。結(jié)晶態(tài)IIIa可通過(guò)將固體混合物與甲醇一起研磨而得到。1H NMR(CDCl3)IIIa/X＝OR2，R1、R2＝叔丁基二甲基硅烷基＝6.73(dd，1H)、6.14(d，1H)、4.69(d，1H)、4.62(d，1H)、4.35(s，1H)、4.17(m，1H)、3.92(d，1H)、3.58(d，1H)、2.61(m，1H)、2.29(m，1H)、2.2-1.2(m，16H)、1.11(d，3H)、1.05(m，2H)、0.90(m，2H)、0.87(s，9H)、0.85(s，9H)、0.68(s，3H)、0.06(s，3H)、0.05(s，3H)、0.04(s，3H)、0.02(s，3H)ppm。
制備例1VIIX＝OR2，R1、R2＝氫1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯將根據(jù)M.J.Calverley，Tetrahedron，第43卷，第20期，第4614-4619頁(yè)，1987所描述的方法得到的20(R)，1(S)，3(R)-雙(叔丁基二甲基硅烷氧基)-20-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯溶解于乙腈中。添加氫氟酸水溶液(40％)并將混合物于室溫下攪拌約1小時(shí)。反應(yīng)的進(jìn)展可通過(guò)使用乙酸乙酯作為洗脫劑的TLC便利地加以檢查。將乙酸乙酯添加至反應(yīng)混合物中并用氫氧化鈉水溶液洗滌混合物。有機(jī)相用MgSO4干燥并濃縮。將形成的結(jié)晶(白色針狀)過(guò)濾出來(lái)，用乙酸乙酯洗滌并在真空中干燥得到標(biāo)題化合物VII(X＝OR2，R1、R2＝氫)。1H NMR(CDCl3)VII/X＝OR2，R1、R2＝氫＝6.77(dd，1H)、6.57(d，1H)、6.15(d，1H)、5.88(dd，1H)、5.13(dd，1H)、4.98(s，1H)、4.50(m，1H)、4.23(m，1H)、2.86(m，2H)、2.29(m，2H)、2.14-1.20(m，16H)、1.14(d，3H)、1.08(m，2H)、0.89(m，2H)、0.61(s，3H)ppm。
實(shí)施例2IIIX＝OR2，R1、R2＝氫1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯SO2-加合物。
方法與實(shí)施例1相同，除了起始材料為制備例1所制得的1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯。1H NMR(CDCl3)III/X＝OR2，R1、R2＝氫δ＝6.80(dd，1H)、6.15(d，1H)、4.75(m，2H)、4.5-3.9(m，4H)、3.70(d，1H)、2.60(m，1H)、2.5-0.8(m，25H)、0.68(s，3H)ppm；13C NMR(CDCl3)III/X＝OR2，R1、R2＝氫δ＝201.0、152.1、151.0、133.7、129.2、128.3、108.8、67.3、65.1、63.6、56.1、55.9、55.5、46.5、40.1、39.9、33.9、29.8、27.4、23.9、22.1、19.5、18.9、12.2、11.2ppm。
制備例2VIIX＝OR2，R1＝氫，R2＝叔丁基二甲基硅烷基1(S)-叔丁基二甲基硅烷基-3(R)-羥基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯。
使用與制備例1中所用相同的去保護(hù)條件使20(R)，1(S)，3(R)-雙(叔丁基二甲基硅烷氧基)-20-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯部分去保護(hù)，得到未反應(yīng)的起始材料、兩種部分去保護(hù)的中間體及制備例1的化合物的混合物。通過(guò)色譜法純化得到純的標(biāo)題化合物。
發(fā)現(xiàn)1H NMR與結(jié)構(gòu)相符。1H NMR(CDCl3)VII/X＝OR2，R1＝氫，R2＝叔丁基二甲基硅烷基δ＝6.75(dd，1H)、6.50(d，1H)、6.14(d，1H)、5.84(d，1H)、5.00(s，1H)、4.92(s，1H)、4.47(t，1H)、4.22(m，1H)、2.85(dd，1H)、2.62(dd，1H)、2.43(dd，1H)、2.29(m，1H)、2.15-1.15(m，15H)、1.11(d，3H)、1.06(m，2H)、0.87(s，9H)、0.86(m，2H)、0.59(s，3H)、0.06(s，3H)、0.04(s，3H)ppm。
實(shí)施例3IIIX＝OR2，R1＝氫，R2＝叔丁基二甲基硅烷基1(S)-叔丁基二甲基硅烷基-3(R)-羥基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯SO2加合物。
方法與實(shí)施例1相同，除了起始材料為制備例2所制得的1(S)-叔丁基二甲基硅烷基-3(R)-羥基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯。13C NMR(CDCl3)III/X＝OR2，R1＝氫，R2＝叔丁基二甲基硅烷基δ＝200.3、151.5、150.4、132.0、129.5、128.0、108.5、66.8、65.5、63.8、56.1、55.9、55.2、46.2、39.8、33.6、29.5、27.2、25.4、23.7、21.8、19.2、18.5、17.7、11.8、10.7、-4.7、-5.2ppm；1H NMR(CDCl3)IIIb/X＝OR2，R1＝氫，R2＝叔丁基二甲基硅烷基δ＝6.75(dd，1H)、6.14(d，1H)、4.80(d，1H)、4.65(d，1H)、4.43(m，1H)、4.25(m，1H)、3.92(d，1H)、3.63(dd，1H)、2.60(d，1H)、2.5-1.2(m，18H)、1.12(d，3H)、1.06(m，2H)、0.88(s，9H)、0.87(m，2H)、0.59(s，3H)、0.09(s，3H)、0.07(s，3H)ppm。
制備例3VIIX＝OR2，R1＝COCMe3，R2＝叔丁基二甲基硅烷基1(S)-叔丁基二甲基硅烷基-3(R)-三甲基乙酰氧基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯。
將來(lái)自制備例2的1(S)-叔丁基二甲基硅烷基-3(R)-羥基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯在三乙胺的存在下在二氯甲烷中與三甲基乙酰氯反應(yīng)。
所得粗產(chǎn)物可通過(guò)色譜法純化以得到純的標(biāo)題化合物。
制備例4VIIX＝OR2，R1＝COCMe3，R2＝氫1(S)-羥基-3(R)-三甲基乙酰氧基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯。
使用與制備例1所用相同的去保護(hù)條件使1(S)-叔丁基二甲基硅烷基-3(R)-三甲基乙酰氧基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯去保護(hù)。所得粗產(chǎn)物可通過(guò)色譜法純化而得到純的標(biāo)題化合物。
實(shí)施例4IIIX＝OR2，R1＝COCMe3，R2＝氫1(S)-羥基-3(R)-三甲基乙酰氧基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯SO2加合物。
方法與實(shí)施例1相同，除了起始材料為制備例4所制得的1(S)-羥基-3(R)-三甲基乙酰氧基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯。13C NMR(CDCl3)IIIa/X＝OR2，R1＝COCMe3，R2＝氫δ＝200.4、177.6、151.6、150.9、132.8、129.3、128.1、108.8、66.9、66.3、64.6、55.8、55.5、55.3、46.3、39.9、38.5、36.3、30.2、29.6、27.2、26.9、23.7、21.8、19.3、18.6、11.9、10.8ppm。
實(shí)施例5IIIX＝OR2，R1＝COCMe3，R2＝叔丁基二甲基硅烷基1(S)-叔丁基二甲基硅烷基-3(R)-三甲基乙酰氧基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯SO2加合物。
方法與實(shí)施例1相同，除了起始材料為例如可由制備例3得到的1(S)-叔丁基二甲基硅烷基-3(R)-三甲基乙酰氧基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯。
制備例5VIIX＝OR2，R1＝COMe，R2＝氫1(S)-羥基-3(R)-乙酰氧基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯。
將來(lái)自制備例1的1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯(VIIX＝OR2，R1、R2＝氫)在三乙胺的存在下與一當(dāng)量乙酰氯反應(yīng)。產(chǎn)物的混合物可通過(guò)二氧化硅色譜法純化得到純的標(biāo)題化合物。
實(shí)施例6IIIX＝OR2，R1＝COMe，R2＝氫1(S)-羥基-3(R)-乙酰氧基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯SO2加合物。
方法與實(shí)施例1相同，除了起始材料為制備例5所制得的1(S)-羥基-3(R)-乙酰氧基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯(VIIX＝OR2，R1＝COMe，R2＝氫)。13C NMR(CDCl3)IIIa/X＝OR2，R1＝COMe，R2＝氫δ＝200.5、170.3、151.6、150.9、132.8、129.2、128.1、108.3、66.8、66.4、64.6、55.9、55.7、55.3、46.3、39.9、36.4、30.4、29.6、27.2、23.7、21.8、21.0、19.3、18.6、11.9、10.8。
實(shí)施例7IIIX＝OR2，R1＝COMe，R2＝叔丁基二甲基硅烷基1(S)-叔丁基二甲基硅烷基-3(R)-乙酰氧基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯SO2加合物。
方法與實(shí)施例1相同，除了起始材料為1(S)-叔丁基二甲基硅烷基-3(R)-乙酰氧基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯。1H NMR(CDCl3)IIIa/X＝OR2，R1＝COMe，R2＝叔丁基二甲基硅烷基δ＝6.75(dd，1H)、6.16(d，1H)、5.20(m，1H)、4.71(s，2H)、4.33(s，1H)、3.95(d，1H)、3.60(d，1H)、2.61(m，1H)、2.31(m，2H)、2.15-1.2(m，15H)、2.03(s，3H)、1.11(d，3H)、1.07(m，2H)、0.89(m，2H)、0.88(s，9H)、0.68(s，3H)、0.08(s，3H)、0.07(s，3H)ppm。
實(shí)施例8IIIX＝氫，R1＝叔丁基二甲基硅烷基3(R)-叔丁基二甲基硅烷氧基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯SO2加合物。
將起始材料VII，X＝氫，R1＝叔丁基二甲基硅烷基(根據(jù)M.J.Calverley，Tetrahedron，第43卷，第20期，第4609-4619頁(yè)，1987所描述的方法制備)(38.5g)在20℃下溶解于甲苯(550ml)中然后邊攪拌邊添加水(105ml)和SO2(53ml)。當(dāng)通過(guò)HPLC{出自Merck的柱LiChrosorb Si 60 5μm，250×4mm，2ml/min的流速，在270nm處檢測(cè)及質(zhì)量檢測(cè)，己烷/乙酸乙酯9∶1(體積比)}判斷反應(yīng)已完成之后(通常在2-2.5小時(shí)之后)，在10-18℃下添加氫氧化鈉(27.7％，150ml)與水(480ml)的混合物直到反應(yīng)混合物的pH值為6。分離出甲苯相且在真空下不經(jīng)加熱(優(yōu)選低于30℃)除去溶劑，得到固體混合物形式的兩種差向異構(gòu)的SO2加合物IIIa和IIIb(X＝氫，R1＝叔丁基二甲基硅烷基)，經(jīng)TLC檢測(cè)，其主要含有IIIa。兩種差向異構(gòu)的SO2加合物可通過(guò)色譜法分離。結(jié)晶態(tài)IIIa可通過(guò)將固體混合物與甲醇一起研磨而得到。13CNMR(CDCl3)(IIIX＝氫，R1＝叔丁基二甲基硅烷基，異構(gòu)體IIIa和IIIb的混合物)200.3、151.6、151.4、149.8、149.2、130.5、130.1、128.3、128.1、126.6、126.3、110.5、110.0、67.4、66.7、66.6、66.3、58.0、57.9、55.8、55.6、55.3、55.2、46.3、45.5、39.9、39.7、34.4、34.1、33.9、31.4、30.8、30.5、29.6、29.1、27.3、27.1、26.7、25.6、25.1、24.4、24.1、23.6、23.2、22.4、21.9、21.9、19.4、19.3、18.6、18.4、17.9、17.9、13.9、12.2、11.9、10.8、-5.0。
通式結(jié)構(gòu)IV的化合物實(shí)施例91(S)，3(R)-雙(叔丁基二甲基硅烷氧基)-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′(S)-羥基丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯的SO2加合物(IVaX＝OR2，R1、R2＝叔丁基二甲基硅烷基)，和
1(S)，3(R)-雙(叔丁基二甲基硅烷氧基)-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3(R)′-羥基丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯的SO2加合物(IVbX＝OR2，R1、R2＝叔丁基二甲基硅烷基)。
將(1S，2R)-(-)-順-1-氨基-2-茚滿醇(5.0g)與MTBE(160ml)在氮?dú)鈿夥占?5-25℃下混合，然后在該溫度下添加N，N-二乙基苯胺-硼烷(16.0ml)。攪拌混合物直至不再觀察到有氫氣溢出。將在實(shí)施例1中得到的1(S)，3(R)-雙(叔丁基二甲基硅烷氧基)-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯的SO2加合物的混合物(IIIX＝OR2，R1、R2＝叔丁基二甲基硅烷基)溶解于甲苯(160ml)及MTBE(80ml)中。將該溶液在15-25℃下滴加至含硼烷的混合物中。在完成添加后將混合物攪拌約30-60分鐘，然后用飽和NaHCO3水溶液(110ml)在10-15℃下終止反應(yīng)。分離出有機(jī)相并在0-10℃下用1M的鹽酸(100ml)洗滌，然后用飽和NaHCO3水溶液(100ml)洗滌。通過(guò)對(duì)逆向Diels-Alder反應(yīng)之后的等分試樣進(jìn)行HPLC分析并根據(jù)實(shí)施例10中所描述的方法進(jìn)行分析來(lái)檢測(cè)，有機(jī)相以72-78∶22-28(IVa∶IVb)的摩爾比含有1(S)，3(R)-雙(叔丁基二甲基硅烷氧基)-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3(S)′-羥基丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯的SO2加合物(IVaX＝OR2，R1、R2＝叔丁基二甲基硅烷基)和1(S)，3(R)-雙(叔丁基二甲基硅烷氧基)-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3(R)′-羥基丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯的SO2加合物(IVbX＝OR2，R1、R2＝叔丁基二甲基硅烷基)。通過(guò)二氧化硅色譜法分離化合物IVaa。13C NMR(CDCl3)IVa/X＝OR2，R1、R2＝叔丁基二甲基硅烷基δ＝150.6、137.6、132.3、129.3、128.8、109.0、76.9、67.3、65.8、64.5、56.2、56.1、55.9、46.0、40.5、40.0、39.6、34.1、29.6、27.4、25.6、25.5、23.8、21.8、20.3、17.8、17.7、17.4、11.8、2.8、1.7、-4.7、-5.0、-5.0、-5.2ppm。
實(shí)施例103(R)-叔丁基二甲基硅烷氧基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′(S)-羥基丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯的SO2加合物
(IVaX＝氫，R1＝叔丁基二甲基硅烷基)，和3(R)-叔丁基二甲基硅烷氧基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′(R)-羥基丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯的SO2加合物(IVbX＝氫，R1＝叔丁基二甲基硅烷基)。
將(1S，2R)-(-)-順-1-氨基-2-茚滿醇(1.22g，1.08當(dāng)量)在氮?dú)鈿夥占?5-25℃下與MTBE(36ml)混合，然后在該溫度下添加N，N-二乙基苯胺-硼烷(3.6ml，2.7當(dāng)量)。攪拌混合物直至不再觀察到有氫氣溢出。將實(shí)施例8制得的3(R)-叔丁基二甲基硅烷氧基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯的SO2加合物的混合物(IIIX＝氫，R1＝叔丁基二甲基硅烷基)(4.32g)在室溫下溶解于MTBE(18ml)和甲苯(36ml)的混合物中，然后在15-25℃下經(jīng)15分鐘逐滴添加至含硼烷的混合物中。完成添加后將混合物攪拌約60分鐘，然后用飽和NaHCO3水溶液(25ml)終止反應(yīng)。分離出有機(jī)相并在0-10℃下用1M的鹽酸(25ml)洗滌，然后在10-20℃下用飽和NaHCO3水溶液(25ml)洗滌。有機(jī)相含有3(R)-叔丁基二甲基硅烷氧基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3(S)′-羥基丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯的SO2加合物(IVaX＝氫，R1＝叔丁基二甲基硅烷基)和3(R)-叔丁基二甲基硅烷氧基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3(R)′-羥基丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯的SO2加合物(IVbX＝氫，R1＝叔丁基二甲基硅烷基)。
通式結(jié)構(gòu)V的化合物實(shí)施例111(S)，3(R)-雙(叔丁基二甲基硅烷氧基)-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3(S)′-羥基丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯(VaX＝OR2，R1、R2＝叔丁基二甲基硅烷基)，和1(S)，3(R)-雙(叔丁基二甲基硅烷氧基)-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3(R)′-羥基丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯(VbX＝OR2，R1、R2＝叔丁基二甲基硅烷基)
將來(lái)自實(shí)施例9的含有IVa(X＝OR2，R1、R2＝叔丁基二甲基硅烷基)和IVb(X＝OR2，R1、R2＝叔丁基二甲基硅烷基)的SO2加合物的有機(jī)相與飽和NaHCO3水溶液(110ml)一起劇烈攪拌然后加熱(浴溫約90℃)以蒸餾出MTBE?？赏ㄟ^(guò)HPLC{出自Merck的柱LiChrosorb Si 60，250×4mm，1ml/min的流速，在270nm處檢測(cè)，己烷/乙酸乙酯9∶1.5(體積比)}便利地監(jiān)測(cè)逆向Diels-Alder反應(yīng)。在反應(yīng)完成(通常2-2.5小時(shí))后，將反應(yīng)混合物冷卻至30-40℃并分離出有機(jī)相，用飽和NaHCO3水溶液(110ml)和水(100ml)洗滌。在真空中除去溶劑并將所得的油(29g)溶解于己烷(200ml)中。將有機(jī)混合物冷卻至約-15℃，用一小段二氧化硅過(guò)濾，用己烷(約100ml)洗滌殘余物。用甲醇與水(1∶2)的混合物洗滌己烷相并在真空中除去有機(jī)溶劑。通過(guò)HPLC{出自Merck的柱LiChrosorb Si 60 5μm，250×4mm，1ml/min的流速，在270nm處檢測(cè)，正庚烷/2-丙醇100∶0.25(體積比)RT Va約14.3分鐘，Vb11.9分鐘；或己烷/乙酸乙酯90∶15(體積比)RT Va約7.6分鐘，Vb6.4分鐘}檢測(cè)，殘余的油以72-78∶22-28(Va∶Vb)的摩爾比含有1(S)，3(R)-雙(叔丁基二甲基硅烷氧基)-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3(S)′-羥基丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯(VaX＝OR2，R1、R2＝叔丁基二甲基硅烷基)和1(S)，3(R)-雙(叔丁基二甲基硅烷氧基)-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3(R)′-羥基丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯(VbX＝OR2，R1、R2＝叔丁基二甲基硅烷基)的混合物，將該油通過(guò)如之前M.J.Calverley，Tetrahedron，第43卷，第20期，第4609-4619頁(yè)，1987或在WO 87/00834中所描述的色譜法純化，在用己烷和甲醇及少量三乙胺的混合物結(jié)晶(通過(guò)緩慢蒸發(fā)己烷然后冷卻至-15℃)之后得到10.9g(98.9％HPLC純度)的Va/X＝OR2，R1、R2＝叔丁基二甲基硅烷基，其與M.J.Calverley在Tetrahedron，第43卷，第20期，第4617頁(yè)，1987中關(guān)于化合物22所描述的資料完全一致。13C NMR(CDCl3)Va/X＝OR2，R1、R2＝叔丁基二甲基硅烷基δ＝153.4、142.9、137.9、135.2、128.7、121.5、116.3、106.4、77.1、70.0、67.0、56.2、55.8、45.7、43.7、40.2、39.8、36.3、28.7、27.5、25.6、25.6、23.3、22.0、20.3、18.0、17.9、17.4、12.1、2.9、1.6、-5.0、-5.0、-5.1，Vb/X＝OR2，R1、R2＝叔丁基二甲基硅烷基，δ＝153.5、142.9、137.6、135.3、128.7、121.5、116.3、106.4、76.8、70.0、67.0、56.2、56.0、45.7、43.8、40.2、39.7、36.4、28.7、27.6、25.7、25.6、23.3、22.0、20.3、18.0、17.9、17.3、12.1、2.8、1.6、-5.0、-5.1、-5.1ppm。
實(shí)施例123(R)-叔丁基二甲基硅烷氧基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3(S)′-羥基丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯(VaX＝氫，R1＝叔丁基二甲基硅烷基)，和3(R)-叔丁基二甲基硅烷氧基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3(R)′-羥基丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯(VbX＝氫，R1＝叔丁基二甲基硅烷基)將來(lái)自實(shí)施例10的含有IVa(X＝氫，R1＝叔丁基二甲基硅烷基)和IVb(X＝氫，R1＝叔丁基二甲基硅烷基)的SO2加合物的有機(jī)溶液與飽和NaHCO3水溶液(25ml)一起劇烈攪拌然后加熱(浴溫約90℃)以蒸餾出MTBE。可通過(guò)HPLC{出自Merck的柱LiChrosorb Si 60，250×4mm，1ml/min的流速，在270nm處檢測(cè)，己烷/乙酸乙酯9∶15(體積比)}便利地監(jiān)測(cè)逆向Diels-Alder反應(yīng)。在反應(yīng)完成(約2小時(shí))后，將反應(yīng)混合物冷卻至15-25℃并分離出有機(jī)相，用水(25ml)洗滌。通過(guò)HPLC{出自Merck的柱LiChrosorb Si 60 5μm，250×4mm，1ml/min的流速，在270nm處檢測(cè)，己烷/乙酸乙酯90∶15(體積比)RT Vb約6.1分鐘，RT Va約7.4分鐘}檢測(cè)，其以(75∶25)的摩爾比含有Va∶Vb(X＝氫，R1＝叔丁基二甲基硅烷基)的混合物。1H NMR(CDCl3)Va/X＝氫，R1＝叔丁基二甲基硅烷基δ＝6.45(d，1H)、5.84(d，1H)、5.46(m，2H)、4.92(s，1H)、4.63(s，1H)、3.84(m，1H)、3.42(m，1H)、2.85(d，1H)、2.64(d，1H)、2.45(m，1H)、2.32-1.18(m，17H)、1.04(d，3H)、0.98(m，1H)、0.87(s，9H)、0.56(s，3H)、0.51(m，2H)、0.32(m，1H)、0.22(m，1H)、0.05(s，3H)、0.04(s，3H)；Vb/X＝氫，R1＝叔丁基二甲基硅烷基δ＝6.45(d，1H)、5.83(d，1H)、5.47(m，2H)、4.90(s，1H)、4.62(s，1H)、3.83(m，1H)、3.45(m，1H)、2.83(d，1H)、2.62(d，1H)、2.44(m，1H)、2.24(m，1H)、2.18-1.17(m，16H)、1.03(d，3H)、0.96(m，1H)、0.86(s，9H)、0.55(s，3H)、0.50(m，2H)、0.30(m，1H)、0.20(m，1H)、0.05(s，3H)、0.04(s，3H)。
通式結(jié)構(gòu)VI的化合物實(shí)施例131(S)，3(R)-雙(叔丁基二甲基硅烷氧基)-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3(S)′-羥基丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(X＝OR2，VIaR1，R2＝叔丁基二甲基硅烷基)。
如之前M.J.Calverley，Tetrahedron，第43卷，第20期，第4609-4619頁(yè)，1987或在WO 87/00834中所描述，除了使用9-乙?；齑孑熘?，在20℃下使用高壓紫外燈將實(shí)施例11制得的1(S)，3(R)-雙(叔丁基二甲基硅烷氧基)-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3(S)′-羥基丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯(VaX＝OR2，R1、R2＝叔丁基二甲基硅烷基)在甲苯中進(jìn)行光異構(gòu)化作用，在色譜法之后得到1(S)，3(R)-雙(叔丁基二甲基硅烷氧基)-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3(S)′-羥基丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(VIaX＝OR2，R1、R2＝叔丁基二甲基硅烷基)，其與M.J.Calverley在Tetrahedron，第43卷，第20期，第4618頁(yè)，1987中關(guān)于化合物28所描述的資料完全一致。
鈣泊三醇實(shí)施例141(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3(S)′-羥基丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯如之前M.J.Calverley，Tetrahedron，第43卷，第20期，第4609-4619頁(yè)，1987或在WO 87/00834中所描述，在60℃下使用在四氫呋喃中的氟化四丁基銨將實(shí)施例13制得的1(S)，3(R)-雙(叔丁基二甲基硅烷氧基)-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3(S)′-羥基丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(VIaX＝OR2，R1、R2＝叔丁基二甲基硅烷基)去保護(hù)，然后進(jìn)行色譜分離。用含有數(shù)滴三乙胺的乙酸乙酯/己烷結(jié)晶得到鈣泊三醇，與M.J.Calverley在Tetrahedron，第43卷，第20期，第4618頁(yè)，1987中關(guān)于化合物4所描述的資料完全一致。
單水合鈣泊三醇實(shí)施例15按照WO 94/15912中的描述在乙酸乙酯/水中將實(shí)施例14中制得的鈣泊三醇結(jié)晶得到單水合鈣泊三醇，其與所述專利中所描述的特征數(shù)據(jù)完全一致。
在各種還原條件下的非對(duì)映體立體選擇性還原作用實(shí)施例16



表1根據(jù)類似于實(shí)施例9的方法非對(duì)映體立體選擇性還原其中X＝OR2且R1和R2＝叔丁基二甲基硅烷基的通式結(jié)構(gòu)III的化合物(來(lái)自實(shí)施例1的1(S)，3(R)-雙(叔丁基二甲基硅烷氧基)-20(R)-(3′-環(huán)丙基-3′-氧代丙-1′(E)-烯基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯的SO2加合物的混合物)，然后根據(jù)類似于實(shí)施例11的方法螯合擠出(cheletropic extrusion)二氧化硫以在各種條件下得到通式結(jié)構(gòu)VaX＝OR2，R1、R2＝叔丁基二甲基硅烷基和VbX＝OR2，R1、R2＝叔丁基二甲基硅烷基的化合物(當(dāng)量＝相對(duì)于III的摩爾當(dāng)量；MTBE＝叔丁基甲基醚；DEANB＝N，N-二乙基苯胺硼烷)。
權(quán)利要求
1.一種在惰性溶劑中用還原劑或在手性助劑存在下用還原劑還原通式結(jié)構(gòu)III的化合物 其中X代表氫或OR2，且其中R1和R2可以相同或不同并且代表氫或羥基保護(hù)基團(tuán)，以得到通式結(jié)構(gòu)IVa和IVb的化合物的混合物的方法， 所述混合物富含IVa，其中X、R1和R2如上所定義。
2.一種制備鈣泊三醇{(5Z，7E，22E，24S)-24-環(huán)丙基-9，10-斷膽甾-5，7，10(19)，22-四烯-1α-3β-24-三醇}或單水合鈣泊三醇的方法，包括下列步驟(a)在惰性溶劑中用還原劑或在手性助劑存在下用還原劑還原通式結(jié)構(gòu)III的化合物， 其中X代表OR2，且其中R1和R2可以相同或不同且代表氫或羥基保護(hù)基團(tuán)，以得到通式結(jié)構(gòu)IVa和IVb的化合物的混合物， 其富含IVa，其中X、R1和R2如上所定義；(b)使富含IVa的通式結(jié)構(gòu)IVa和IVb的化合物的混合物在堿存在下反應(yīng)以得到富含Va的通式結(jié)構(gòu)Va和Vb的化合物的混合物， 其中X、R1和R2如上所定義；(c)自富含Va的通式結(jié)構(gòu)Va和Vb的化合物的混合物中分離出通式結(jié)構(gòu)Va的化合物，其中X、R1和R2如上所定義；(d)將通式結(jié)構(gòu)Va的化合物異構(gòu)化為通式結(jié)構(gòu)VIa的化合物， 其中X、R1和R2如上所定義；及(e)當(dāng)R1和/或R2不為氫時(shí)，除去通式結(jié)構(gòu)VIa化合物的羥基保護(hù)基團(tuán)R1和/或R2以生成鈣泊三醇或單水合鈣泊三醇。
3.一種制備鈣泊三醇或單水合鈣泊三醇的方法，其包括權(quán)利要求2的步驟(a)-(b)且進(jìn)一步包括以下步驟(f)將富含Va的通式結(jié)構(gòu)Va和Vb的化合物的混合物，其中X、R1和R2如權(quán)利要求2中所定義，異構(gòu)化為富含VIa的通式結(jié)構(gòu)VIa和VIb的化合物的混合物， 其中X、R1和R2如上所定義；(g)自富含VIa的通式結(jié)構(gòu)VIa和VIb的化合物的混合物中分離出通式結(jié)構(gòu)VIa的化合物，其中X、R1和R2在如上所定義；(h)當(dāng)R1和/或R2不為氫時(shí)，除去通式結(jié)構(gòu)VIa化合物的羥基保護(hù)基團(tuán)R1和/或R2以生成鈣泊三醇或單水合鈣泊三醇。
4.一種制備鈣泊三醇{(5Z，7E，22E，24S)-24-環(huán)丙基-9，10-斷膽甾-5，7，10(19)，22-四烯-1α-3β-24-三醇}或單水合鈣泊三醇的方法，包括以下步驟(j)在惰性溶劑中用還原劑或在手性助劑存在下用還原劑還原通式結(jié)構(gòu)III的化合物 其中X代表氫，且其中R1代表氫或羥基保護(hù)基團(tuán)，以得到富含IVa的通式結(jié)構(gòu)IVa和IVb的化合物的混合物， 其中X和R1如上所定義；(k)使富含IVa的通式結(jié)構(gòu)IVa和IVb的化合物的混合物在堿存在下反應(yīng)以得到富含Va的通式結(jié)構(gòu)Va和Vb的化合物的混合物， 其中X和R1如上所定義；(l)自富含Va的通式結(jié)構(gòu)Va和Vb的化合物的混合物中分離出通式結(jié)構(gòu)Va的化合物，其中X和R1如上所定義；(m)用適當(dāng)?shù)牧u基化試劑將通式結(jié)構(gòu)Va的化合物羥基化，其中X和R1如上所定義，以得到通式結(jié)構(gòu)Va的化合物，其中X代表OR2且R2代表氫，R1如上所定義；(o)將通式結(jié)構(gòu)Va的化合物異構(gòu)化為通式結(jié)構(gòu)VIa的化合物， 其中X、R1和R2如上所定義；及(p)當(dāng)R1不是氫時(shí)，除去通式結(jié)構(gòu)VIa化合物的羥基保護(hù)基R1以生成鈣泊三醇或單水合鈣泊三醇。
5.一種制備鈣泊三醇或單水合鈣泊三醇的方法，包括權(quán)利要求4的步驟(j)-(l)且進(jìn)一步包括以下步驟(q)用羥基保護(hù)基團(tuán)保護(hù)通式結(jié)構(gòu)Va化合物的C-24羥基， 其中X代表氫，且其中R1代表氫或羥基保護(hù)基團(tuán)；(r)用適當(dāng)?shù)牧u基化試劑使C-24羥基被保護(hù)的通式結(jié)構(gòu)Va的化合物羥基化，其中X和R1如上所定義，以得到C-24羥基被保護(hù)的通式結(jié)構(gòu)Va的化合物，其中X代表OR2且R2代表氫，R1如上所定義；(s)除去通式結(jié)構(gòu)Va化合物的C-24羥基保護(hù)基團(tuán)；(t)將通式結(jié)構(gòu)Va的化合物異構(gòu)化為通式結(jié)構(gòu)VIa的化合物， 其中X、R1和R2如上所定義；及(u)當(dāng)R1不是氫時(shí)，除去通式結(jié)構(gòu)VIa化合物的羥基保護(hù)基團(tuán)R1以生成鈣泊三醇或單水合鈣泊三醇。
6.如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的方法，其中的還原步驟是在手性助劑的存在下進(jìn)行的。
7.如權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的方法，其中的還原劑為硼烷衍生物。
8.如權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的方法，其中的還原劑為N，N-二乙基苯胺-硼烷、硼烷-四氫呋喃或硼烷二甲基硫醚。
9.如權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的方法，其中的手性助劑為手性1，2-氨基醇。
10.如權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的方法，其中的手性助劑為手性順-1-氨基-2-茚滿醇衍生物。
11.如權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的方法，其中的手性助劑為(1S，2R)-(-)-順-1-氨基-2-茚滿醇。
12.如權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)所述的方法，其中的惰性溶劑為甲苯、叔丁基甲基醚、四氫呋喃或其混合物。
13.如權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)所述的方法，其中通過(guò)將通式結(jié)構(gòu)III的化合物還原而得到的通式結(jié)構(gòu)IVa和IVb的化合物的混合物具有至少為56∶44的IVa∶IVb摩爾比率。
14.如權(quán)利要求1-13中任一項(xiàng)所述的方法，其中的還原步驟是在介于10-20℃之間的溫度下進(jìn)行的。
15.一種制備通式結(jié)構(gòu)III的化合物的方法， 其中X代表氫或OR2，且其中R1和R2可以相同或不同且代表氫或羥基保護(hù)基團(tuán)，該方法包括將通式結(jié)構(gòu)VII或VIII的化合物與二氧化硫反應(yīng)， 其中R1和R2如上所定義。
16.如權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)所述的方法，其中通式結(jié)構(gòu)III的化合物為通式結(jié)構(gòu)IIIa的差向異構(gòu)體
17.如權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)所述的方法，其中通式結(jié)構(gòu)III的化合物為通式結(jié)構(gòu)IIIb的差向異構(gòu)體
18.一種在堿的存在下使富含IVa的通式結(jié)構(gòu)IVa和IVb的化合物的混合物進(jìn)行反應(yīng)， 其中X代表氫或OR2，且其中R1和R2可以相同或不同且代表氫或羥基保護(hù)基團(tuán)，以得到富含Va的通式結(jié)構(gòu)Va和Vb的化合物的混合物的方法， 其中X、R1和R2如上所定義。
19.如權(quán)利要求1-3、15或18所述的方法，其中X代表OR2。
20.如權(quán)利要求1-19中任一項(xiàng)所述的方法，其中R1和/或R2代表烷基硅烷基。
21.如權(quán)利要求20所述的方法，其中R1和/或R2代表叔丁基二甲基硅烷基。
22.一種制備鈣泊三醇{(5Z，7E，22E，24S)-24-環(huán)丙基-9，10-斷膽甾-5，7，10(19)，22-四烯-1α-3β-24-三醇}或單水合鈣泊三醇的方法，其包括如權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)所述的方法。
23.一種通式結(jié)構(gòu)IIIa或IIIb的化合物，或其混合物， 其中X代表氫或OR2，且其中R1和R2可以相同或不同且代表氫或羥基保護(hù)基團(tuán)。
24.一種通式結(jié)構(gòu)IVaa、IVab、IVba、IVbb、IVb的化合物，或其混合物， 其中X代表氫或OR2，且其中R1和R2可以相同或不同且代表氫或羥基保護(hù)基團(tuán)。
25.如權(quán)利要求23或24所述的化合物，其中X代表OR2。
26.如權(quán)利要求23-25中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R1和R2代表烷基硅烷基。
27.如權(quán)利要求26所述的化合物，其中R1和R2代表叔丁基二甲基硅烷基。
28.如權(quán)利要求23-25中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R1和R2代表氫。
29.如權(quán)利要求23-28中任一項(xiàng)所述的化合物作為制備鈣泊三醇或單水合鈣泊三醇的中間體的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于合成鈣泊三醇或單水合鈣泊三醇的中間體，制備所述中間體的方法以及立體選擇性還原所述中間體的方法。
文檔編號(hào)C07B31/00GK1934078SQ200580008620
公開日2007年3月21日 申請(qǐng)日期2005年3月10日 優(yōu)先權(quán)日2004年3月18日
發(fā)明者T·P·薩布勒, M·J·卡爾弗利 申請(qǐng)人:利奧制藥有限公司