專利名稱：毒蕈堿性乙酰膽堿受體拮抗劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及3-取代的-8-氮鎓二環(huán)[3.2.1]辛烷、藥物組合物、及其在治療毒蕈堿性乙酰膽堿受體介導(dǎo)的呼吸道疾病中的用途。
背景技術(shù)：
從外周和中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的膽堿能神經(jīng)元釋放的乙酰膽堿，通過與兩類主要的乙酰膽堿受體煙堿性和毒蕈堿性乙酰膽堿受體的相互作用，影響很多不同生物學(xué)過程。毒蕈堿性乙酰膽堿受體(mAChRs)屬于具有7個跨膜結(jié)構(gòu)域的G-蛋白偶聯(lián)受體超家族。mAChRs有5個亞型，稱作M1-M5，并且每個是不同基因的產(chǎn)物。這5個亞型的每一個顯示出獨特的藥理學(xué)性質(zhì)。毒蕈堿性乙酰膽堿受體廣泛分布在脊椎動物的器官中，在那里它們介導(dǎo)很多生命機能。毒蕈堿性受體能夠介導(dǎo)抑制性和興奮性作用。例如，在氣道的平滑肌中，M3mAChRs介導(dǎo)收縮反應(yīng)。綜述見Caulfield(1993 Pharmac.Ther.58319-79)，在此引入作為參考。
在肺中，mAChRs位于氣管和支氣管平滑肌、粘膜下層的腺體和副交感神經(jīng)節(jié)中。毒蕈堿性受體密度在副交感神經(jīng)節(jié)中最大，然后密度按粘膜下層的腺體、氣管平滑肌然后是支氣管平滑肌的順序下降。毒蕈堿性受體在肺泡中幾乎沒有。mAChR在肺中的表達(dá)和功能綜述請見Fryer和Jacoby(1998 AmJ Respir Crit CareMed 158(5，pt3)S 154-60)。
已經(jīng)確定mAChRs的三種亞型在肺中是重要的，M1、M2和M3mAChRs。M3mAChRs位于氣道平滑肌，介導(dǎo)肌肉收縮。通過與興奮的G蛋白Gq/11(Gs)結(jié)合M3mAChRs的興奮活化磷脂酶C，引發(fā)磷脂?；〈?4，5-二磷酸酯的釋放，導(dǎo)致收縮蛋白的磷酸化。在肺粘膜下層的腺體上也發(fā)現(xiàn)有M3mAChRs。該M3mAChRs的興奮導(dǎo)致粘液分泌。
M2mAChRs占?xì)獾榔交∩夏憠A能受體總量的大約50-80％。盡管精確的功能還不知道，但它們通過抑制cAMP的產(chǎn)生來抑制氣道平滑肌的兒茶酚胺能舒張。神經(jīng)元M2mAChRs位于節(jié)后副交感神經(jīng)。在正常生理學(xué)條件下，神經(jīng)元M2mAChRs提供對乙酰膽堿從副交感神經(jīng)釋放的緊密控制。已證明在一些物種的肺中交感神經(jīng)上也出現(xiàn)了抑制性M2mAChRs。這些受體抑制去甲腎上腺素的釋放，因此降低對肺的交感功能。
M1mAChRs在肺副交感神經(jīng)節(jié)中被發(fā)現(xiàn)，在那里它們起作用來提高神經(jīng)傳遞。這些受體也位于外周肺實質(zhì)，然而它們在外周肺實質(zhì)中的功能還不知道。
在很多不同的病理生理學(xué)狀態(tài)中可以注意到肺中的毒蕈堿性乙酰膽堿受體功能異常。具體地，在哮喘和慢性阻塞性肺疾病(COPD)中，炎性病癥導(dǎo)致支持肺平滑肌的副交感神經(jīng)上抑制性M2毒蕈堿性乙酰膽堿自身受體功能喪失，隨著迷走神經(jīng)興奮引起乙酰膽堿釋放增加(Fryer等1999 Life Sci 64(6-7)449-55)。該mAChR功能異常導(dǎo)致由增加的M3mAChRs興奮介導(dǎo)的氣道高反應(yīng)性和高應(yīng)答性。因此，有效的mAChR拮抗劑的識別作為這些mAChR介導(dǎo)的疾病的治療將是有用的。
COPD是一個不嚴(yán)密的術(shù)語，包括含慢性支氣管炎、慢性細(xì)支氣管炎和肺氣腫在內(nèi)的多種進(jìn)行性健康問題，并且它是世界上死亡率和發(fā)病率的主要原因。吸煙是COPD進(jìn)展的主要危險因素；只在美國就有將近五千萬人吸煙，并且估計有3,000人每天都有該習(xí)慣。因此，到2020年，COPD將列入世界范圍健康負(fù)擔(dān)的前五名。吸入式抗膽堿能藥治療目前被認(rèn)為是一線治療COPD的“金標(biāo)準(zhǔn)”(Pauwels等2001 Am.J.Respir.Crit.Care Med.1631256-1276)，在此引入作為參考。
盡管有大量的證據(jù)支持使用抗膽堿能藥來治療氣道高反應(yīng)性疾病，但是可的到的臨床上用于肺適應(yīng)癥的抗膽堿能化合物相對較少。更具體地，在美國，異丙托溴胺(Atrovent；和Combivent，與沙丁胺醇聯(lián)用)是當(dāng)前市場上唯一的用于治療氣道高反應(yīng)性疾病的吸入式抗膽堿能藥。盡管該化合物是有效的抗毒蕈堿劑，但它作用時間短，并且因此為了緩解COPD病人，必須每天給藥多達(dá)4次。最近在歐洲和亞洲批準(zhǔn)了長效抗膽堿能藥噻托溴銨(Spirivat)，然而該產(chǎn)品當(dāng)前還不能在美國獲得。因此，仍然存在對新化合物的需求，該化合物能夠在mAChRs引起阻斷，長時間發(fā)揮作用，并且能夠一天一次給藥來治療氣道高反應(yīng)性疾病比如哮喘和COPD。
既然mAChRs廣泛分布在整個身體中，能對呼吸道定位和/或局部地施用抗膽堿能藥是尤其有利的，這將允許應(yīng)用較低的藥物劑量。而且，能設(shè)計具有較長作用時間的局部活性藥物，將會避免在使用全身性抗膽堿能藥時可見到的不想要的副作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供治療由毒蕈堿性乙酰膽堿受體(mAChR)介導(dǎo)的疾病的方法，其中乙酰膽堿連接到M3mAChR上，并且該方法包括給藥有效量的式(I)化合物或其可藥用的鹽。
本發(fā)明也涉及在需要其的哺乳動物中抑制乙酰膽堿與其受體結(jié)合的方法，包括給藥于前述哺乳動物有效量的式(I)化合物。
本發(fā)明也提供新的式(I)化合物，以及包含式(I)化合物和藥用載體或稀釋劑的藥物組合物。
根據(jù)本發(fā)明的化合物具有式(I)所示的結(jié)構(gòu) 其中連接到托烷環(huán)(tropane ring)上的烷基鏈的優(yōu)選取向是向內(nèi)。
R2和R3獨立地選自具有優(yōu)選1～6個碳原子的直鏈或支鏈低級烷基，具有5～6個碳原子的環(huán)烷基，具有6～10個碳原子的環(huán)烷基-烷基，2-噻吩基，2-吡啶基，苯基，被具有不超過4個碳原子的烷基取代的苯基，和被具有不超過4個碳原子的烷氧基取代的苯基。
X-代表與帶正電的N原子相伴隨的陰離子。X-可以是但不限于氯化物、溴化物、碘化物、硫酸鹽、苯磺酸鹽、甲苯磺酸鹽。
本發(fā)明的說明性實施例包括(3-內(nèi))-3-(2，2-二苯基乙基)-8，8-二甲基-8-氮鎓二環(huán)[3.2.1]辛烷溴化物；以及(3-內(nèi))-3-(2，2-二苯基乙基)-8，8-二甲基-8-氮鎓二環(huán)[3.2.1]辛烷4-甲基苯磺酸鹽。
制備方法式(I)化合物可以通過使用如在專利US2800478中說明的本領(lǐng)域熟知的合成方法來獲得，該專利的全部內(nèi)容作為參考在此引入。
合成實施例本發(fā)明中的上述合成實施例，參考在專利US2800478中說明的實施例，該專利的全部內(nèi)容作為參考在此引入。
生物學(xué)實施例本發(fā)明化合物在M3mAChR處的抑制作用是通過下列體外和體內(nèi)的功能分析來測定的以鈣動員(calcium mobilization)來分析受體活性抑制如前面說明的那樣通過監(jiān)測受體活化的鈣動員來分析表達(dá)在CHO細(xì)胞上的mAChRs的興奮(H.M.Sarau等，1999.Mol.Pharmacol.56，657-663)。將穩(wěn)定表達(dá)M3mAChRs的CHO細(xì)胞放在黑壁/透明底的96孔板中。18～24小時后，吸去培養(yǎng)基，重新放入100μl負(fù)載培養(yǎng)基(含Earl′s鹽的EMEM，0.1％RIA-級BSA(Sigma，St.Louis MO)，和4μM氟-3-乙酰甲酯熒光指示劑染料(Fluo-3AM，Molecular Probes，Eugene，OR)并在37℃培養(yǎng)1小時。然后吸去該含有染料的培養(yǎng)基，重新放入新鮮培養(yǎng)基(不含F(xiàn)luo-3AM)，并將細(xì)胞在37℃培養(yǎng)10分鐘。然后將細(xì)胞洗滌3次，并在100μl測定緩沖液(0.1％明膠(Sigma)、120mM NaCl、4.6mM KCl、1mM KH2PO4、25mM NaHCO3、1.0mM CaCl2、1.1mM MgCl2、11mM葡萄糖、20mM HEPES(pH7.4))中于37℃培養(yǎng)10分鐘。加入50μl的化合物(在分析中最終為1×10-11～1×10-5M)并將板于37℃培養(yǎng)10分鐘。然后將板放入熒光強度讀板儀(FLIPR，MolecularProbes)，其中負(fù)載染料的細(xì)胞暴露于6瓦特氬激光器的激發(fā)光(488nm)下。通過以50μl/sec的速度加入在含有0.1％BSA的緩沖液中制備的乙酰膽堿50μl(最終為0.1-10nM)來將細(xì)胞活化。以胞質(zhì)鈣濃度變化來監(jiān)測的鈣動員，通過在566nm發(fā)射強度的變化來測定。發(fā)射強度的變化與胞質(zhì)鈣水平直接相關(guān)。全部96孔中的發(fā)射熒光是通過使用冷卻式CCD相機同時測定的。每秒采集數(shù)據(jù)點。然后將這些數(shù)據(jù)作圖并用GraphPad PRISM軟件進(jìn)行分析。
毒蕈堿性受體放射配體結(jié)合試驗以SPA式使用0.5nM[3H]-N-甲基東莨菪堿(NMS)的放射配體結(jié)合研究被用來評價毒蕈堿性拮抗劑與M1、M2、M3、M4和M5毒蕈堿性乙酰膽堿受體的結(jié)合。在96孔板中，將SPA珠粒用含有受體的膜于4℃預(yù)孵育30分鐘。然后加入50mM HEPES和受試化合物，并在室溫(振蕩)孵育2小時。然后將珠粒離心并用閃爍計數(shù)器計數(shù)。
對在離體的豚鼠氣管中作用的有效性和持續(xù)時間的評價從成年雄性Hartely豚鼠(Charles River，Raleigh，NC；400-600克)分離氣管，并放入改良的Krebs-Henseleit溶液中。溶液的組成(mM)是NaCl 113.0，KCl 4.8，CaCl22.5，KH2PO41.2，MgSO41.2，NaHCO325.0以及右旋糖11.0，通入95％O2∶5％CO2的氣體，并保持在37℃。將每個氣管清理掉附著組織并縱向剖開。用棉簽輕輕摩擦腔表面來除去上皮。剪成單獨的條，寬度是大約2個軟骨環(huán)，并且通過縫合線懸浮在含有Krebs-Henseleit溶液的10-ml水套器官浴槽中，并連接到Grass FT03C壓力換能器上。用Apple G4計算機上運行的MP1OOWS/Acknowledge數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)(BIOPAC Systems，Goleta，CA，www.biopac.com)等大地記錄機械響應(yīng)。該組織在以長度壓力評價來確定的最佳1.5g的靜息壓力(resting tension)下平衡，并用Krebs-Henseleit溶液每15分鐘洗滌1次持續(xù)1小時。平衡期之后，將肺組織與10μM卡巴膽堿接觸直到達(dá)坪，這作為數(shù)據(jù)分析的參比收縮。然后將組織每15分鐘漂洗1次持續(xù)1小時直到達(dá)到基線緊張性。然后在開始實驗之前讓制品靜置(left)至少30分鐘。
通過卡巴膽堿以半對數(shù)增加形式的累積添加，得到濃度-響應(yīng)曲線(VanRossum，1963，Arch.Int.Pharmacodyn.，143299)，最初是1nM。將每個濃度與該制品接觸直到達(dá)到響應(yīng)坪，然后加入后續(xù)的卡巴膽堿濃度。將成對的組織暴露于mAChR拮抗劑化合物或載體中30分鐘，然后產(chǎn)生卡巴膽堿累積濃度-響應(yīng)曲線。所有數(shù)據(jù)都是以平均數(shù)±平均標(biāo)準(zhǔn)差(s.e.m.)給出的，n是不同動物的數(shù)量。
對于表面灌流(作用的持續(xù)時間)研究，在實驗期間將組織用Krebs-Henseleit溶液以2ml/min速度連續(xù)表面灌流。通過插入到表面灌流管內(nèi)的22-線號(guage)針灌流(0.02ml/min)激動劑和拮抗劑的母液進(jìn)行。用連接到Macintosh G4計算機(Apple，Cupertino，CA www.apple.com)上的商業(yè)可獲得的數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)(MPlOOWS/Acknowledge，BIOPAC Systems，Goleta，CA，www.biopac.com)等大地記錄機械響應(yīng)。該組織在1.5g的最佳靜息壓力下平衡。60分鐘的平衡期之后，將該組織與卡巴膽堿(1μM)接觸整個實驗期間。當(dāng)達(dá)到了持續(xù)性收縮時，給藥異丙腎上腺素(10μM)來最大地舒張組織，這個變化用作參比。停止接觸異丙腎上腺素，并使卡巴膽堿-誘導(dǎo)的張力恢復(fù)。以每組織單一濃度來灌流毒蕈堿性受體拮抗劑，直到達(dá)到抑制的持續(xù)水平。然后去除該化合物，再次使卡巴膽堿-誘導(dǎo)的張力恢復(fù)。
對拮抗劑的每個濃度都測定了下列參數(shù)，并以n個動物的平均數(shù)±S.E.M.來表示。對卡巴膽堿-誘導(dǎo)的收縮的抑制是以參比響應(yīng)(異丙腎上腺素)的百分比來表示的，并且測量了達(dá)到該舒張一半所需要的時間(開始響應(yīng))。去除化合物后的張力恢復(fù)是以達(dá)到恢復(fù)該最大張力一半所需要的時間(響應(yīng)抵消(offset))的形式來測定的。在去除拮抗劑的第60和80分鐘，測定了保留的抑制水平并表示為異丙腎上腺素參比的百分比。
通過將在撤出拮抗劑后0、60和180分鐘時的最大舒張數(shù)據(jù)進(jìn)行作圖，得到拮抗劑濃度-響應(yīng)曲線?；謴?fù)，稱作位移，是由0分鐘抑制曲線IC50與在60和180分鐘產(chǎn)生相似張力恢復(fù)的化合物濃度的比例來計算的。
以響應(yīng)開始和抵消的半衰期對相應(yīng)的濃度作圖，并且該數(shù)據(jù)滿足非線性回歸。這些數(shù)值在IC50(由抑制濃度-響應(yīng)曲線測定)和指定的Ot50(在IC50濃度達(dá)到開始響應(yīng)的一半所需的時間)和Rt50(在IC50濃度達(dá)到響應(yīng)恢復(fù)的一半所需的時間)外推的。
乙酰甲基膽堿-誘導(dǎo)的支氣管收縮-效應(yīng)和作用的持續(xù)時間氣道對乙酰甲基膽堿的響應(yīng)性在清醒的不受限制的Balb C小鼠(n＝每組6只)中測定。采用氣壓計體積描記法來測量提高的間歇(Penh)，顯示unitless測量與在支氣管用乙酰甲基膽堿(2)處理時發(fā)生的氣道阻力變化相關(guān)。將小鼠用于50μl載體(10％DMSO)中的50μl化合物(0.003-10μg/小鼠)經(jīng)鼻(i.n.)預(yù)處理，然后在給藥后放入體積描記法室中給定的時間(15min-96h)。為了測定效應(yīng)，進(jìn)行了對給定藥物的劑量響應(yīng)，并且所有的測量在i.n.給藥后15分鐘進(jìn)行。為了測定作用的持續(xù)時間，測量在i.n.給藥后15分鐘～96小時的任何時候進(jìn)行。
當(dāng)在室中時，讓小鼠平衡10分鐘，然后進(jìn)行基線Penh測量5分鐘。然后將小鼠用乙酰甲基膽堿(10mg/ml)氣溶膠處理2分鐘。從接受乙酰甲基膽堿氣溶膠起將Penh連續(xù)記錄7分鐘，然后繼續(xù)5分鐘。采用GraphPad PRISM軟件對每只小鼠的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和作圖。該實驗可以測定所給藥化合物的活性的持續(xù)時間。
本化合物對于治療多種適應(yīng)癥是有用的，包括但不限于呼吸道疾病比如慢性阻塞性肺疾病、慢性支氣管炎、哮喘、慢性呼吸阻塞、肺纖維化、肺氣腫、和變應(yīng)性鼻炎。
制劑給藥據(jù)此，本發(fā)明還提供藥物制劑，包括式(I)化合物或其可藥用的鹽、溶劑合物或藥理學(xué)功能衍生物(例如鹽和酯)，和可藥用的載體或賦形劑，和任選地一種或多種其他治療成分。
此后，術(shù)語“活性成分”是指式(I)化合物，或其可藥用的鹽、溶劑合物或藥理學(xué)功能衍生物。
式(I)化合物將通過以口或鼻吸入來給藥。
用于通過吸入來局部遞送到肺的干粉組合物可以例如存放于在吸入器或吹入器中使用的例如明膠的膠囊、筒(cartridge)中，或例如鋁箔片的泡眼中。粉末混合制劑一般含有用于本發(fā)明化合物的吸入的粉末混合物，和適合的粉末基質(zhì)(載體/稀釋劑/賦形劑物質(zhì))比如單-、二-或多-糖(例如乳糖或淀粉)，有機或無機鹽(例如氯化鈣，磷酸鈣或氯化鈉)，多元醇(例如甘露醇)，或其混合物，選擇性地有一種或多種添加材料或其混合物，這些添加劑被包括在混合制劑中按如以下所述地來改善制劑的化學(xué)和/或物理穩(wěn)定性或性能。優(yōu)選使用乳糖。每個膠囊或筒含有20μg-10mg的式(I)化合物，任選地與另外的治療性活性成分組合?；蛘撸景l(fā)明化合物可以以沒有賦形劑的方式出現(xiàn)，或者可以形成顆粒，顆粒包含該化合物、任選地其他治療性活性材料和賦形劑材料，比如通過協(xié)同沉淀或包衣。
適合地，藥物分配器是選自貯庫干粉吸入器(RDPI)、多劑量干粉吸入器(MDPI)，和計量劑量吸入器(MDI)的類型。
所謂貯庫干粉吸入器(RDPI)是指如下的吸入器，它具有適合于包括多劑量(非計量劑量)的干粉形式的藥物貯庫型包裝，并且包括計量從貯庫到遞送部位的藥物劑量的裝置。該計量裝置可以例如包括計量杯或穿孔板(perforated plate)，它可以從杯被來自貯庫藥物裝滿的第一個位置移動到計量的藥物劑量可以為病人所吸入得到的第二個位置。
所謂多劑量干粉吸入器(MDPI)是指如下的吸入器，它適合于分配干粉形式的藥物，其中該藥物被包含在含有(或者是載有)多、限定劑量(或其部分)藥物的多劑量包裝。在優(yōu)選方面，載體具有泡眼包裝形式，但也能例如包括基于膠囊的包裝形式或載體，在載體上藥物以任何適合的方法應(yīng)用，包括打印(printing)、涂抹和真空閉塞。
制劑能夠進(jìn)行預(yù)先計量(例如在Diskus中，見GB 2242134，或在Diskhaler中，見GB 2178965、2129691和2169265)或者在使用中計量(例如在Turbuhaler中，見EP 69715)。單位-計量裝置的實例是Rotahaler(見GB 2064336)。Diskus吸入裝置包括由具有沿長度方向上隔開的大量凹處(recesses)的基底薄片(base sheet)、和密封的但為可去除密封的蓋薄片(lip sheet)形成的延條狀物(strip)，來限定多個容器，在每個容器中具有含有優(yōu)選與乳糖組合的式(I)化合物的可吸入制劑。優(yōu)選地該條狀物是足夠柔韌到彎曲成卷。蓋薄片和基底薄片優(yōu)選具有互相不密封的前導(dǎo)端部分，并且至少一個所述前導(dǎo)端部分(leading end portions)形成與彎曲裝置(winding means)相連接。也優(yōu)選基底和蓋之間的密封式密閉擴展到它們整個寬度。蓋薄片可以優(yōu)選從所述基底薄片的第一端沿縱向方向從基底薄片剝?nèi)ァ?br> 在一方面，該多劑量包裝是泡眼包裝，包括盛裝干粉形式藥物的多個泡眼。這些泡眼典型地是排列成規(guī)則的式樣以易于藥物從中釋放。
在一方面，該多劑量泡眼包裝包括在盤形式泡眼包裝上一般排列成環(huán)形的多個泡眼。在另一方面，該多劑量泡眼包裝是以例如包括條或帶的形式而延長的。
優(yōu)選地，該多劑量泡眼包裝限定于可去除的互相保護(hù)的(secured)兩層膜之間的。美國專利號5,860,419、5,873,360和5,590,645說明了這種常規(guī)型的藥物包裝。在此方面，該裝置通常是以開放狀態(tài)來提供的，包括剝?nèi)スぞ?peeling means)用來分別地剝開分離膜以取得每個藥物劑量。適合地，該裝置適用于其中該可去除的膜是延長的薄片，它限定在其長度方向間隔的多個藥物容器，該裝置具有按順序標(biāo)記每個容器的標(biāo)記裝置(indexing means)。更優(yōu)選地，該裝置適用于其中一個薄片是其內(nèi)具有多個袋(pocket)的基底薄片，而其他的薄片是蓋薄片，每個袋和蓋薄片的鄰近部分限定分開的一個容器，該裝置包括在開放狀態(tài)時將蓋薄片和基底薄片分開的操縱工具(drivingmeans)。
所謂的計量劑量吸入器(MDI)是指適合于分配氣溶膠形式藥物的藥物分配器，其中藥物包括在適合于包含以推進(jìn)劑為基礎(chǔ)的氣溶膠藥物制劑的氣溶膠容器中。該氣溶膠容器典型地提供有計量閥例如滑閥(slide valve)，來向病人釋放氣溶膠形式的藥物制劑。該氣溶膠容器一般設(shè)計成通過閥在每次驅(qū)動時遞送預(yù)定計量的藥物，該閥能夠通過以下來打開在容器保持靜止時擠壓閥或者在閥保持靜止時擠壓容器。
通過吸入而局部遞送到肺的噴霧組合物可以制備成例如從加壓包裝比如計量劑量吸入器中釋放的水溶液或混懸液或氣溶膠，同時使用適合的液化推進(jìn)劑。適合于吸入的氣溶膠組合物能夠是混懸液或溶液，并且一般含有式(I)化合物，任選與另外的治療性活性成分和適合的推進(jìn)劑組合，推進(jìn)劑比如碳氟化合物或含氫的氯氟烴或其混合物，尤其是氫氟烷類，例如二氯二氟甲烷，三氯氟甲烷，二氯四氟乙烷，尤其是1，1，1，2-四氟乙烷、1，1，1，2，3，3，3-七氟-正-丙烷或其混合物。二氧化碳或其他適合的氣體也可以用作推進(jìn)劑。該氣溶膠組合物可以不含賦形劑或者可以任選地含有本領(lǐng)域熟知的添加制劑賦形劑，比如表面活性劑例如油酸或卵磷脂，和助溶劑比如乙醇。加壓制劑一般保存在用閥(例如計量閥)封閉的罐(例如鋁罐)中，并且被安裝到具有接口管的驅(qū)動器(actuator)中。
通過吸入來給藥的藥物期望具有控制的粒度。吸入到支氣管系統(tǒng)以用于定位(localized)遞送到肺的最優(yōu)氣動粒度通常是1-10μm，優(yōu)選2-5μm。吸入到肺泡區(qū)域以實現(xiàn)系統(tǒng)地遞送到肺的最優(yōu)氣動粒度是大約.5-3μm，優(yōu)選1-3μm。當(dāng)吸入時具有氣動徑大于20μm的顆粒一般來說太大而不能到達(dá)小氣道。制劑的平均氣動粒度可以通過例如階式碰撞(cascade impaction)來測量。平均幾何粒度可以通過例如激光衍射、光學(xué)手段來測量。
為了達(dá)到期望的粒度，生產(chǎn)的活性成分的顆?？梢杂贸Ｒ?guī)方法例如通過控制結(jié)晶、微粉化或納米粉碎來降低尺寸。期望的部分可以通過空氣分級來分離?；蛘撸梢灾苯由a(chǎn)期望大小的顆粒，例如通過噴霧干燥，控制噴霧干燥參數(shù)來產(chǎn)生期望大小范圍的顆粒。盡管如果需要非晶形材料也可以使用，優(yōu)選地，顆?？梢允墙Y(jié)晶的。當(dāng)使用賦形劑比如乳糖時，一般地該賦形劑的粒度將比本發(fā)明中吸入的藥物的大，這樣使這些“粗大的”載體是不可吸收的。當(dāng)賦形劑是乳糖時，它典型地是磨碎的乳糖，其中不超過85％的乳糖顆粒具有60-90μm的MMD，并且不少于15％的具有小于15μm的MMD。載體以外的干粉混合中的添加材料可以是可吸收的，即氣動上小于10微米，或者是不可吸收的，即氣動上大于10微米。
適合使用的添加材料包括氨基酸比如亮氨酸；水溶性或水不溶性、天然或合成表面活性劑比如卵磷脂(例如大豆磷脂)和固態(tài)脂肪酸(例如月桂酸，棕櫚酸和硬脂酸)及其衍生物(比如鹽和酯)；磷脂酰基膽堿；糖酯。添加材料也可以包括著色劑、掩味劑(例如糖精)、抗靜電劑(anti-static-agents)、潤滑劑(見例如公開的PCT專利申請?zhí)朩O 87/905213，該文件的教導(dǎo)作為參考在此引入)、化學(xué)穩(wěn)定劑、緩沖劑，防腐劑，吸收促進(jìn)劑，和普通技術(shù)人員已知的其他材料。
緩釋包衣材料(例如硬脂酸或聚合物，例如聚乙烯吡咯烷酮，聚乳酸)也可以在活性材料或含有顆粒的活性材料上使用(見例如專利號US 3,634,582、GB 1,230,087、GB 1,381,872，該文件的教導(dǎo)作為參考在此引入)。
鼻內(nèi)噴霧可以用水性或非水性載體與添加劑來制備，添加劑比如增稠劑，緩沖鹽或酸或堿來調(diào)節(jié)pH，等滲調(diào)節(jié)劑或抗氧化劑。
通過霧化吸入用的溶液可以用水性載體與添加劑來制備，添加劑比如酸或堿，緩沖鹽，等滲調(diào)節(jié)劑或抗微生物劑。它們可以通過過濾或在高壓滅菌器中加熱滅菌，或者作為無菌產(chǎn)品出現(xiàn)。
優(yōu)選的單位劑量制劑是那些含有如在此之前所述的有效劑量或其適當(dāng)部分的活性成分的制劑。
在整個說明書和以下的權(quán)利要求中，除非上下文另有要求，表述′包括′及其變體比如“包括”和“包括”應(yīng)當(dāng)理解為暗示包括所述的整體或部分或整體組，但不排除任何其他的整體或部分、或整體或部分的組。
本說明書中引用的包括但不限于專利和專利申請的所有公開，在此引入作為參考，如各單獨公開具體地和個別地被指明來引入作為參考，如完全闡述。
上述說明充分公開了包括其優(yōu)選實施方式的本發(fā)明。本文具體公開的實施方式的改良和改善在下列權(quán)利要求的范圍內(nèi)。不用進(jìn)一步的思考，相信本領(lǐng)域的技術(shù)人員通過采用前面的說明能夠?qū)⒈景l(fā)明應(yīng)用到其全部程度。因此本文中的實施例只是作為說明，不以任何方式限制本發(fā)明的范圍。在其中要求保護(hù)專有或特權(quán)的本發(fā)明實施方式，定義如下。
權(quán)利要求
1.根據(jù)下面式(I)的化合物 其中，R1選自具有1～6個碳原子的直鏈或支鏈低級烷基；R2和R3獨立地選自直鏈或支鏈低級烷基(具有1～6個碳原子)，環(huán)烷基(具有5～6個碳原子)，環(huán)烷基-烷基(具有6～10個碳原子)，2-噻吩基，2-吡啶基，苯基，被具有不超過4個碳原子的烷基取代的苯基，和被具有不超過4個碳原子的烷氧基取代的苯基；并且X-代表與帶正電的N原子相結(jié)合的陰離子。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中連接到托烷環(huán)上的烷基鏈的取向是向內(nèi)的。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其選自(3-內(nèi))-3-(2，2-二苯基乙基)-8，8-二甲基-8-氮鎓二環(huán)[3.2.1]辛烷溴化物；以及(3-內(nèi))-3-(2，2-二苯基乙基)-8，8-二甲基-8-氮鎓二環(huán)[3.2.1]辛烷4-甲基苯磺酸鹽。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中X-選自氯化物、溴化物、碘化物、硫酸鹽、苯磺酸鹽和甲苯磺酸鹽。
5.治療由毒蕈堿性乙酰膽堿受體介導(dǎo)的疾病的藥物組合物，包括根據(jù)權(quán)利要求1的化合物和其可藥用的載體。
6.一種在需要其的哺乳動物中抑制乙酰膽堿結(jié)合到其受體上的方法，包括給藥安全并且有效量的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。
7.一種治療毒蕈堿性乙酰膽堿受體介導(dǎo)的疾病的方法，其中乙酰膽堿結(jié)合到所述受體上，該方法包括給藥安全并且有效量的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的方法，其中該疾病選自慢性阻塞性肺疾病、慢性支氣管炎、哮喘、慢性呼吸阻塞、肺纖維化、肺氣腫和變應(yīng)性鼻炎。
9.根據(jù)權(quán)利要求7的方法，其中給藥是通過經(jīng)口或鼻來吸入。
10.根據(jù)權(quán)利要求7的方法，其中給藥是通過選自貯庫干粉吸入器、多劑量干粉吸入器或計量劑量吸入器的藥物分配器來進(jìn)行的。
11.根據(jù)權(quán)利要求7的方法，其中該化合物給藥于人并且對于至多1mg劑量具有12小時或更長的作用時間。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其中該化合物具有24小時或更長的作用時間。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的方法，其中該化合物具有36小時或更長的作用時間。
全文摘要
提供毒蕈堿性乙酰膽堿受體拮抗劑和使用它們的方法。
文檔編號C07D451/02GK1822840SQ200480020653
公開日2006年8月23日 申請日期2004年7月16日 優(yōu)先權(quán)日2003年7月17日
發(fā)明者克里斯滕·E·貝爾蒙特, 雅各布·布希-彼得森, 德雷梅恩·萊恩, 邁克爾·R·帕洛維克 申請人:葛蘭素集團有限公司