專利名稱：嘧啶無環(huán)核苷衍生物、其制備方法及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及作為HIV-1的反轉(zhuǎn)錄酶非核苷抑制劑的活性嘧啶無環(huán)核苷衍生物，它們的制備方法與它們的應(yīng)用。
現(xiàn)有技術(shù)在愛滋病的治療過程中，目前的趨勢是利用不再包括抗蛋白酶的多治療法，這種抗蛋白酶的副作用是令人不快的，其用藥方式對患者造成不便。
推薦的多治療法因此包括一種或兩種核苷抑制劑，與其配合的是一種或兩種非核苷抑制劑[G.J.Moyle，Infect.Med.17(6)442-455(2000)]。
因此，重要的是研制反轉(zhuǎn)錄酶的新變構(gòu)抑制劑，這些抑制劑具有高特效活性和低毒性。
例如在專利申請EP-A-O 449 726、WO-A-97/43266、WO-A-97/30979、WO-A-96/16675、WO-A-95/18109、EP-A-0 631 783、EP-A-0 420 763中描述過具有無環(huán)核苷結(jié)構(gòu)的反轉(zhuǎn)錄酶變構(gòu)抑制劑，其中最為熟知的實(shí)例是具有下式A的EMIVIRINE 這些具有無環(huán)核苷結(jié)構(gòu)的反轉(zhuǎn)錄酶變構(gòu)抑制劑在納摩爾濃度下起作用，并且它們的缺陷是非?？斓剡x擇抗性突變體。另外，J.M.J.Tronche，M.Zsély，M.Iznaden，F(xiàn).Barbalat-Rey，M.Geoffroy&G.Bernardinelli，Carbohydr.Lett.2，101-108(1996)曾經(jīng)通過與下式B所示化合物之間的關(guān)系
表明被固定在胸腺嘧啶N-1所攜帶的基團(tuán)上ω位的N-羥基脲基殘基如同在該晶體中與其它分子的核堿基建立兩個(gè)氫鍵(通過其CONH2基團(tuán))的《假-核堿基》發(fā)揮作用，而N-OH基團(tuán)對醇的氧原子起著氫鍵給予體的作用。
因此，N-羥基脲基基團(tuán)可以是與反轉(zhuǎn)錄酶的變構(gòu)位點(diǎn)建立新鍵并且任選地在該位點(diǎn)外與用酶《處理》的核酸的核堿基建立新鍵的令人感興趣的候選者。
另外，從產(chǎn)品的細(xì)胞毒性來看，N-羥基脲基基團(tuán)也顯示是一個(gè)良好的候選者，因?yàn)榛钚詿o環(huán)核苷對HIV-1的結(jié)構(gòu)-活性研究表明，被固定在核堿基上N-1位的親水基團(tuán)應(yīng)降低該化合物的細(xì)胞毒性[J.M.J.Tronchet，M.Grigorov，N.Dolatshahi，F(xiàn).Moriaud&J.Weber，Eur.J.Med.chem.，32，279-299(1997)]。
因此，通過在C-4和C-5位被取代的嘧啶的N-1處固定的鏈的ω位加入N-羥基脲基基團(tuán)，可以期望改善已知類似產(chǎn)品的抗HIV-1活性。
但是，N-羥基脲基基團(tuán)顯得還不足以保證活性，因?yàn)榈谝粋€(gè)制備的化合物，即具有上式B的化合物，顯示出對HIV-1完全無活性，第二個(gè)制備的化合物，即具有下式C的化合物[J.M.J.Tronchet，M.Iznaden，&N.laroze，Carbohydr.Lett.，2，313-320(1997)]非常溫和地顯示出活性(CI5070納摩爾)。

基于這些事實(shí)，本發(fā)明人進(jìn)行研究并且令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，通過將位于核堿基與N-羥基脲基基團(tuán)之間的碳原子鏈從兩個(gè)碳原子鏈延長到三個(gè)碳原子鏈，可以得到一種無毒的、在與迄今為止使用已知類似產(chǎn)品所達(dá)到的濃度相比低得多的濃度下對HIV-1具有活性的無環(huán)核苷，而對具有用于替代N-羥基脲基基團(tuán)的羥基的式C化合物類似物進(jìn)行同樣均化[參見N，Laroze，日內(nèi)瓦大學(xué)，第3212號(hào)論文(2000)]顯著地降低了活性。
基于這些結(jié)果完成了本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及下述通式化合物 式中-n等于3；-R1代表乙基或異丙基；-每個(gè)R2基團(tuán)彼此獨(dú)立地代表氫原子、C1-C3烷基或鹵素原子；-R3和R4基團(tuán)之一代表氫原子，而其中另一個(gè)基團(tuán)代表-OH或-OR5基團(tuán)，其中R5可以是C2-C7?；1-C6烷基氨基羰基、在芳基上任選地取代的芳基C1-C6烷基氨基羰基、任選地被取代的芳基羰基或雜芳基氨基羰基，或該化合物在藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明還涉及-如前面定義的式I化合物作為藥物的應(yīng)用；-如前面定義的式I化合物作為抗病毒劑，特別作為抗HIV-1劑的應(yīng)用；-如前面定義的式I化合物的制備方法；-含有如前面定義的至少一種式I化合物作為活性組分的藥物組合物；
-含有作為抗病毒有效量的如前面定義式I化合物的藥物組合物；以及-如前面定義的式I化合物在制備抗HIV-1藥物方面的用途；條件是“如前面定義的式I化合物”，還應(yīng)該包括該化合物在藥學(xué)上可接受的鹽。


圖表示用兩個(gè)抗病毒標(biāo)記物，即反轉(zhuǎn)錄酶和P24完成的三種無環(huán)核苷抗病毒圖，以便評價(jià)這三種無環(huán)核苷對HIV-1 lai的抗逆轉(zhuǎn)錄病毒活性。
本發(fā)明詳細(xì)描述本發(fā)明的化合物可用下述通式I表示 式中n等于3。
R1基團(tuán)可以是乙基或異丙基，但優(yōu)選地R1基團(tuán)是異丙基。每個(gè)R2基團(tuán)彼此獨(dú)立地可以是氫原子、C1-C3烷基，例如甲基、乙基、正-丙基或異丙基，或鹵素原子，例如氯、溴、碘或氟。
優(yōu)選地，R2基團(tuán)是相同的，它們每個(gè)都代表甲基。
R3和R4基團(tuán)之一代表氫原子，而其中另一個(gè)基團(tuán)代表-OH或-OR5基團(tuán)，其中R5是羥基的保護(hù)基團(tuán)。
因此，當(dāng)R3基團(tuán)是-OH基團(tuán)或-OR5基團(tuán)時(shí)，R4基團(tuán)是氫原子；而當(dāng)R3基團(tuán)是氫原子時(shí)，R4基團(tuán)是-OH基團(tuán)或-OR5基團(tuán)。
但是，優(yōu)選地，R3基團(tuán)是-OH基團(tuán)或-OR5基團(tuán)，R4基團(tuán)是氫原子。
R5基團(tuán)應(yīng)該選自在生物學(xué)介質(zhì)中很容易釋放并且是無毒的羥基保護(hù)基團(tuán)。
因此，R5基團(tuán)選自C2-C7?；?、C1-C6烷基氨基羰基、在芳基上任選取代的芳基C1-C6烷基氨基羰基、任選取代的芳基羰基或雜芳基氨基羰基，其條件是酰基和C1-C6烷基氨基羰基和芳基C1-C6烷基氨基羰基的烷基可以是支化的或非支化的。
C2-C7?；鶎?shí)例包括乙酰基、丙酰基、丁酰基或叔戊?；?，但并非僅限于此。
C1-C6烷基氨基羰基實(shí)例包括甲基氨基羰基、乙基氨基羰基、丙基氨基羰基、異丙基氨基羰基、丁基氨基羰基、戊基氨基羰基或己基氨基羰基，但并非僅限于此。
在芳基上任選取代的芳基C1-C6烷基氨基羰基實(shí)例包括芐基氨基羰基、苯乙基氨基羰基、苯基-3-丙基氨基羰基、苯基-4-丁基氨基羰基、苯基-5-戊基氨基羰基或苯基-6-己基氨基羰基，以及上述芳基C1-C6烷基氨基羰基，其中芳基帶有1或2個(gè)取代基，該取代基選自鹵素如氯、溴、氟或碘；C1-C3烷基如甲基、乙基、丙基或異丙基；C1-C3烷氧基如甲氧基、乙氧基、丙氧基或異丙氧基，但并非僅限于此。
任選取代的芳基羰基實(shí)例包括苯甲?；?、對-氯苯甲酰基、對-甲氧基苯甲?；?qū)?硝基苯甲酰基，但并非僅限于此。
雜芳基氨基羰基實(shí)例包括異噁唑-3-基氨基羰基、異噁唑-4-基氨基羰基、異噁唑-5-基氨基羰基、吡啶-2-基氨基羰基或吡啶-3-基氨基羰基，但并非僅限于此。
本發(fā)明式I的這些化合物可以是其常規(guī)藥學(xué)上可接受鹽的形式。
可以按照下述反應(yīng)流程制備本發(fā)明的化合物，其中n、R1、R2、R3、R4和R5具有與前面相同的意義。
下述反應(yīng)流程1表明了本發(fā)明式I化合物的制備方法步驟，其中R3是-OH基團(tuán)或-OR5基團(tuán)，R4是氫原子
反應(yīng)流程1
用上面式V和VI表示的核堿基是已知的，它們通常采用親電取代反應(yīng)制備[例如參見Y.S.Lee&Y.H.Kim，Synth.Commun.29(9)1503-17(1999)]。
不過，在本發(fā)明的方法中，根據(jù)在S.M.Hannick&Y.Kishi，有機(jī)化學(xué)雜志(J.Org.Chem.)，48，3833-3835(1983)中描述的技術(shù)原理，通過縮合作用制備改性的式V和VI核堿基嘧啶環(huán)，這樣能夠得到許多種R1和R2基團(tuán)性質(zhì)不同的堿基。
因此，該方法的第一個(gè)步驟，即步驟a)，是在適當(dāng)?shù)娜軇?，例如諸如四氫呋喃之類醚中，在適當(dāng)?shù)臏囟热缁亓鳒囟认?，在Zn存在下式II的苯基乙腈與式III化合物進(jìn)行反應(yīng)，然后用酸如鹽酸處理得到的混合物，得到式IV化合物。
其次，在步驟b)中，在堿性醇介質(zhì)如鈉/乙醇(Na/EtOH)介質(zhì)中，在適當(dāng)溫度如回流溫度下，這種式IV化合物與硫脲進(jìn)行反應(yīng)，得到式V的硫脲嘧啶。
然后在步驟c)中，式V的硫脲嘧啶用適當(dāng)?shù)南∮袡C(jī)酸，例如10％氯乙酸處理，可轉(zhuǎn)化成式VI的尿嘧啶。
在步驟d)中，例如在六甲基二硅氮烷(HMDS)、氯三甲基硅烷(TMSCl)和四氯化錫(SnCl4)存在下，通過與其中n等于3的式VII化合物進(jìn)行常規(guī)苷化反應(yīng)，將該鏈固定在式VI所示核堿基的N1上，接著所得到的酯例如在甲醇/三乙胺(MeOH/Et3N)介質(zhì)中進(jìn)行溶劑分解，得到式IX的醇。
然后，式IX所示醇進(jìn)行Mitsunobu反應(yīng)，用隨后可得到N-羥基脲基基團(tuán)的含氮基團(tuán)置換其-OH基團(tuán)。
于是，使用N，O-雙(苯氧基羰基)羥基胺作為親核試劑(步驟e)，在常規(guī)的Mitsunobu反應(yīng)條件下處理式的IX醇，得到式X化合物，該化合物在適當(dāng)?shù)娜軇┲?，例如用氨或氨基化物常?guī)氨解(步驟f)后，得到本發(fā)明的式Ia化合物，該化合物帶有末端N1-羥基脲基基團(tuán)，即其中R3代表-OH基和R4代表氫原子的本發(fā)明式I化合物。
然后，可以通過O-?；饔没騉-氨基甲?；饔?步驟g)將式Ia化合物轉(zhuǎn)化成本發(fā)明的式Ib化合物，即其中R3代表-OR5基團(tuán)和R4代表氫原子的本發(fā)明式I化合物，其轉(zhuǎn)化方法如下。
本發(fā)明的式Ia化合物可以進(jìn)行常規(guī)O-?；磻?yīng)，例如采用通式X-CO-R6(式中R6是支化或非支化的C1-C6烷基，或任選取代的芳基，X例如可以是鹵素原子或R6COO-基團(tuán)，X并非僅限于此)的常規(guī)?；瘎┻M(jìn)行這種反應(yīng)，得到其中R5是C2-C7酰基或任選取代的芳基羰基的本發(fā)明式Ib所示單?；衔铮摶衔锏挠H油性比其前體Ia更強(qiáng)，并且其中N-OH基團(tuán)得到保護(hù)以防止被氧化。
本發(fā)明的式Ia化合物還可以進(jìn)行常規(guī)O-氨基甲?；磻?yīng)，例如利用通式X-CO-NH-R7(式中R7是支化或非支化的C1-C6烷基、在芳基上任選取代的并且其中烷基可以是支鏈或非支鏈的芳基C1-C6烷基、或雜芳基，X例如可以是鹵素原子，但X并非僅限于此)的常規(guī)氨基甲?；瘎┻M(jìn)行這個(gè)反應(yīng)，得到本發(fā)明的式Ib化合物，其中R5是C1-C6烷基氨基羰基，在芳基上任選取代的芳基(C1-C6)烷基氨基羰基，或雜芳基氨基羰基，該化合物的親油性比其前體Ia更強(qiáng)，并且其中N-OH基團(tuán)得到保護(hù)以防止被氧化。
為了得到本發(fā)明的式I化合物，其中R3是氫原子，R4是-OH基團(tuán)或OR5基團(tuán)，可參看下述反應(yīng)流程2
反應(yīng)流程2 參看反應(yīng)流程1，如上述步驟a)-d)得到的式IX所示醇，在步驟h)中通過使用苯鄰二甲酰亞胺作為親核試劑進(jìn)行常規(guī)Mitsunbu反應(yīng)，接著進(jìn)行常規(guī)的肼解反應(yīng)，得到式XI所示胺。
然后，在步驟i)中，這個(gè)式XI所示胺用羰基給體試劑如羰基二咪唑或光氣，和O-叔丁基二甲基甲硅烷基羥基胺進(jìn)行常規(guī)處理，得到式XII所示化合物。
這個(gè)式XII所示化合物然后例如在酸性介質(zhì)中或在SiO2存在下進(jìn)行O-甲硅烷基化反應(yīng)(步驟j)，得到攜帶末端N3-羥基脲基基團(tuán)的本發(fā)明式Ic化合物，即其中R3是氫原子，R4是-OH基團(tuán)的本發(fā)明的式I化合物。
然后，通過O-?；饔没騉-氨基甲?；饔?步驟k)可以將本發(fā)明的式Ic化合物轉(zhuǎn)化成本發(fā)明的式Id化合物，即其中R3代表氫原子和R4代表-OR5基團(tuán)的本發(fā)明式I化合物，其轉(zhuǎn)化方法如下。
本發(fā)明的式Ic化合物然后可以進(jìn)行常規(guī)O-酰基化反應(yīng)，例如用通式X-CO-R6(式中R6是支化或非支化的C1-C6烷基，或任選取代的芳基，X例如可以是鹵素原子或R6COO-基團(tuán)，X并非僅限于此)的常規(guī)?；瘎┻M(jìn)行這種反應(yīng)，得到其中R5是C2-C7?；蛉芜x取代的芳基羰基的本發(fā)明式Id單酰基化化合物。
本發(fā)明的式Ic化合物還可以進(jìn)行常規(guī)O-氨基甲?；磻?yīng)，例如用通式X-CO-NH-R7(式中R7是支化或非支化的Ci-C6烷基、在芳基上任選取代的并且其中烷基可以是支鏈或非支鏈的芳基C1-C6烷基或雜芳基，X例如可以是鹵素原子，但X并非僅限于此)的常規(guī)氨基甲?；瘎┻M(jìn)行這個(gè)反應(yīng)，得到本發(fā)明的式Id化合物，其中R5是C1-C6烷基氨基羰基，在芳基上任選取代的芳基C1-C6烷基氨基羰基，或雜芳基氨基羰基，該化合物的親油性比其前體Ic更強(qiáng)，并且其中N-OH基團(tuán)得到保護(hù)以防止被氧化。
本發(fā)明的化合物還可以按照常規(guī)方式轉(zhuǎn)化成其在藥學(xué)上可接受的鹽。
為了證明本發(fā)明化合物作為抗病毒劑，特別地作為抗HIV-1劑的功效，曾根據(jù)下述原理和操作方式進(jìn)行了活體外試驗(yàn)。
原理篩選的目的是評價(jià)本發(fā)明化合物和對比化合物對在周圍血液單核細(xì)胞(CMSP)上培養(yǎng)的HIV-1 lai菌株的抗逆轉(zhuǎn)錄病毒活性。
為此，待試驗(yàn)化合物與處在指數(shù)生長期的CMSP一起培養(yǎng)七天(抗HIV試驗(yàn)時(shí)間)。
然后，通過用RetroSys TR盒(INNOVAGEN)測定“反轉(zhuǎn)錄酶”(RT)活性，或者通過用Innotest HIV抗原mAb篩選盒(IMMUNOGENETICS)測定蛋白P24，測量在培養(yǎng)上清液中這些化合物抑制病毒復(fù)制的能力。
確定能夠抑制50-90％病毒復(fù)制的測試化合物的濃度。分別涉及抑制濃度IC50和IC90。
與篩選同時(shí)，在同樣的條件下，進(jìn)行待測試化合物的細(xì)胞毒性試驗(yàn)。
在培養(yǎng)7天后，通過MTT(3-[4，5-二甲基噻唑-2-基]-2，5-二苯基四唑溴)證實(shí)這個(gè)試驗(yàn)[J.G.Park等，Cancer Res.47(22)5875-5879(1987)]。
這個(gè)試驗(yàn)?zāi)軌虼_定降低50％CMSP生長與存活的產(chǎn)品濃度(CC50)。
該化合物的治療指數(shù)(IT)計(jì)算如下IT50＝(CC50/IC50)。
操作方式如在Ulmer及其同事，Immunobiology，166(3)，238-250(1984)中所描述的，采用Ficoll梯度(Nicomed PharmaAS)由健康供體分離這些CMSP。
這些CMSP用植物凝集素活化三天，然后在96井板中在補(bǔ)充重組人白細(xì)胞介素-2的基礎(chǔ)介質(zhì)(RPMI)中培養(yǎng)。
在整個(gè)培養(yǎng)期間，這些細(xì)胞保持在37℃、飽和濕度氣氛與5％CO2下。
這些CMSP在不濃度待試驗(yàn)化合物存在下預(yù)處理一小時(shí)，然后用100 TClD50的HIV-1-Lai感染[S.Wain-Hobson及其同事，科學(xué)(Science)，17，252(5008)961-965(1991)]。
在注入HIV-1后三天，更換一半的培養(yǎng)介質(zhì)，在第7天，取出上清液，并在-20℃下凍結(jié)。
然后測量病毒復(fù)制a)使用RetroSys盒(INNOVAGEN)測定培養(yǎng)上清液中的“反轉(zhuǎn)錄酶”(RT)活性。
上清液中的RT在溴脫氧尿苷三磷酸(BrdUTP)存在下，在被固定在96井板的井底的基質(zhì)上合成出補(bǔ)體DNA段。通過固定與堿性磷酸酶共軛的抗BrdU抗體可定量分析BrdU加入量。采用比色法測定的被結(jié)合堿性磷酸酶的活性與培養(yǎng)上清液中的RT活性成比例。
b)用Innotest HIV抗原mAb篩選盒(IMMUNOGENETICS)測定處在培養(yǎng)上清液中的蛋白P24。
上清液的P24與固定在96井板的井底的抗HIV多克隆抗體結(jié)合。抗P24生物素化次生抗體固定在P24上。然后，該生物素固定鏈霉抗生物素，采用比色法測定的鏈霉抗生物素的活性與培養(yǎng)上清液中P24的存在量成比例。
列出的這些結(jié)果是由至少兩個(gè)不同的實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次得到的。
試驗(yàn)的表發(fā)明化合物化合物11-(3-N3-羥基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基-尿嘧啶化合物21-(3-N1-羥基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基-尿嘧啶化合物31-(3-N1-羥基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基-尿嘧啶化合物41-(3-N1-乙酰氧基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基-尿嘧啶化合物51-(3-N1-叔戊酰氧基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基-尿嘧啶試驗(yàn)的對比化合物對比化合物11-(2-N1-羥基脲基乙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基-尿嘧啶對比化合物21-(4-N1-羥基脲基丁氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基-尿嘧啶對比化合物31-(2-N1-羥基脲基乙氧基甲基)-6-芐基-5-乙基尿嘧啶(式C化合物)
對比化合物41-乙氧基甲基-6-芐基-5-異丙基尿嘧啶(式A化合物)。
如在這些實(shí)施例中所指出的，合成本發(fā)明化合物1～5和試驗(yàn)對比化合物1、2、3，如文獻(xiàn)[M.Baba，H.Tanaka，T.Miyasaka，S.Yuseda，M.Ubasawa，R.T.Walker&E.De Clerq.核苷核苷酸(Nucleosides Nucleotides)，14，575-583(1995)]中所述合成對比化合物4。
試驗(yàn)結(jié)果由通過使用本發(fā)明化合物2和3和對比化合物1測定“反轉(zhuǎn)錄酶”活性和蛋白P24得到的試驗(yàn)結(jié)果列在用圖表示的抗病毒圖上。
這些結(jié)果清楚地表明，試驗(yàn)化合物同時(shí)抑制產(chǎn)生兩種不同病毒標(biāo)記物，即反轉(zhuǎn)錄酶和蛋白P24。
因此，這些化合物是HIV-1病毒復(fù)制的抑制劑。
由測定“反轉(zhuǎn)錄酶”(RT)活性得到的試驗(yàn)結(jié)果列于下面表1中，該表給出以納摩爾表示的抗HIV-Lai抑制50％(IC50)和90％(IC90)的濃度，本發(fā)明化合物1～5和對比化合物1～4的以納摩爾表示的50％細(xì)胞毒性濃度(CC50)和治療指數(shù)IT50(CC50/IC50)。

表1

如表1所示，本發(fā)明的化合物顯示出對HIV-1非常強(qiáng)的抗病毒活性，特別是具有式I的化合物3，其中R1＝-CHMe2，R2＝Me，R3＝-OH和R4＝H，即1-(3-N1-羥基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基-尿嘧啶，可以觀察到該化合物的活性比其同屬或其競爭者的活性高100,000倍，非常特別地，具有式I的化合物5，其中R1＝-CHMe2，R2＝Me，R3＝-OOCCMe3和R4＝H，即1-(3-N1-叔戊氧基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基-尿嘧啶，可以觀察到該化合物驚人的不可預(yù)料的活性，即其活性比其同屬或其競爭者的活性高1,000,000倍。
因此，本發(fā)明提供一類新型無環(huán)核苷作為抗病毒劑，尤其作為無毒的HIV-1反轉(zhuǎn)錄酶的非核苷抑制劑起作用，在皮摩爾(pM)，甚至飛摩爾(fM)濃度下，它可能都具有活性。
另外，當(dāng)用本發(fā)明的化合物之一，即化合物2進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，表明這種化合物應(yīng)與AZT(3’-疊氮基-3’-脫氧胸苷)、ddI(2’，3’-二脫氧肌苷)和ddC(2’，3’-二脫氧胞苷)呈現(xiàn)協(xié)同作用，這意味著本發(fā)明的化合物與至少AZT、ddI和/或ddC一起使用一般是有利的。
于是，本發(fā)明化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在藥物組合物中可以用作活性組分，該化合物可以單獨(dú)使用，或者與其它活性組分混合使用，尤其在多治療范圍內(nèi)在用作藥物的藥物組合物中可以用作活性組分。
因此，本發(fā)明還提供一種藥物組合物，該組合物含有至少一種本發(fā)明的化合物或其在藥學(xué)上可接受的鹽作為活性組分。
在該組合物中含有的本發(fā)明化合物或其在藥學(xué)上可接受的鹽的量尤其取決于患者的體重、年齡和癥狀以及這種化合物的功效。
本發(fā)明的藥物組合物可以為口服或全身用藥形式，該組合物可以含有適當(dāng)?shù)脑谒帉W(xué)上可接受的載體或賦形劑。
在該藥物組合物中含有的本發(fā)明化合物有利地是其中R3或R4為-OR5基團(tuán)的化合物。
在這種情況下，本發(fā)明化合物是“前藥”，在用藥后，這種化合物在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成其中R3或R4為-OH基團(tuán)的本發(fā)明化合物。
其中R3或R4為-OR5基團(tuán)的這種化合物可以尤其有利地被用于延遲配方中。
其中R5為?；谋景l(fā)明化合物是特別有利的，因?yàn)樗挠H油性比其前體更強(qiáng)，并且N-OH基團(tuán)得到保護(hù)以便防止其氧化。另外，可以通過酰基性質(zhì)在血液中以可控速度被脫?；?br> 使用支化的R5基團(tuán)，例如像叔戊酰基，也是有利的，因?yàn)樗軌蜓舆t酯基團(tuán)被酯酶水解。
借助本發(fā)明，可以改善在受體上，即HIV-1反轉(zhuǎn)錄酶的變構(gòu)位點(diǎn)上的固定，這可以通過較低的抑制濃度得到體現(xiàn)，這意味著更好的選擇性、更低的生產(chǎn)成本和選擇更低抗性突變體的傾向。
本發(fā)明具有N-羥基脲基基團(tuán)的無環(huán)核苷的另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是，它們在氧化成相應(yīng)的氨氧基(aminoxyle)游離基后可用電子順磁共振(RPE)進(jìn)行檢測。通過任選地借助低紫外光輻射進(jìn)行的空氣氧化，得到非常低的順磁粒子穩(wěn)態(tài)濃度，如果RPE技術(shù)的靈敏度很高，選擇性也很高，這就能夠跟蹤復(fù)雜的生物學(xué)介質(zhì)中的分子。
根據(jù)下面的操作方式用骨髓細(xì)胞進(jìn)行了本發(fā)明化合物3和5的毒性試驗(yàn)。
在補(bǔ)充了1毫摩爾谷氨酸、10％胎牛血清、青霉素和鏈霉素的RPMI 1640介質(zhì)(GIBCO，USA)的1毫升培養(yǎng)物中，按照5×105細(xì)胞/毫升培養(yǎng)Balb/c鼠的骨髓細(xì)胞。
在濃度從1×10-12摩爾增加到1×10-5摩爾的本發(fā)明化合物3和5存在下，通過添加1納克/毫升Srem細(xì)胞因子(c-kit配位體)、IL3和GM-CSF(Pharmingen，USA)刺激這些細(xì)胞。
在37℃、5％CO2下培養(yǎng)5天后，回收這些細(xì)胞。
通過在Trypan藍(lán)存在下計(jì)數(shù)存活細(xì)胞可評價(jià)其增殖情況。
用與藻紅蛋白(PE)偶合的抗體抗CD38，與熒光素5(FI)偶合的抗體抗-Gr1，抗Gri-PE和抗CD11b-FI(Pharmingen，USA)雙細(xì)胞標(biāo)記，用流動(dòng)細(xì)胞計(jì)(Facs-Calibur，BECTON DICKINSON，USA)評價(jià)細(xì)胞分化情況。
在所有的試驗(yàn)濃度下，其細(xì)胞增殖與沒有本發(fā)明化合物3和5時(shí)所觀察的細(xì)胞增殖相同。
同樣地，由細(xì)胞分裂素誘發(fā)的淋巴細(xì)胞B、髓細(xì)胞、中性白細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的比例在有或沒有本發(fā)明化合物3和5時(shí)都是相同的，無論其濃度如何。
這些結(jié)果清楚地表明，本發(fā)明的化合物，特別是本發(fā)明化合物3和5對鼠的骨髓細(xì)胞沒有產(chǎn)生明顯毒性作用，并不約束它們活體外分化，甚至在比活體外人體淋巴細(xì)胞中產(chǎn)生HIV復(fù)制抑制作用的濃度高1×106倍的濃度下也是如此。
下面的實(shí)施例用于說明本發(fā)明。但是，這些實(shí)施例在任何情況下不應(yīng)該被認(rèn)為是限制本發(fā)明保護(hù)范圍。
實(shí)施例在下面合成中使用的原料、試劑和溶劑，除非另外指出，均來自Fluka公司(Buchs，瑞士)、Merck公司(Darmstadt，德國)或Aldrich(Buchs，瑞士)的商品。
實(shí)施例1
1-(3-N1-羥基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基-尿嘧啶(本發(fā)明化合物3)的合成(本發(fā)明的式I化合物，其中n＝3，R1是異丙基，每個(gè)R2是甲基，R3是-OH基團(tuán)，R4是氫原子)。
A.6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基尿嘧啶的合成(根據(jù)反應(yīng)流程1的式VI化合物，其中R1是異丙基，每個(gè)R2是甲基)往2-溴-3-甲基丁酸(3克，16.5毫摩爾)在乙醇(200毫升)中的溶液，添加濃硫酸(4毫升)。在回流沸騰36小時(shí)后，返回到室溫的反應(yīng)介質(zhì)用飽和碳酸鈉水溶液中和。在蒸去乙醇后，反應(yīng)介質(zhì)用二氯甲烷(100毫升)提取。然后，有機(jī)相用硫酸鎂干燥，蒸去溶劑得到2-溴-3-甲基丁酸乙酯(1.91克55％)。
鋅粉(31.5克，0.48摩爾)在四氫呋喃(300毫升)中的懸浮液升溫沸騰回流，然后添加幾滴2-溴-3-甲基丁酸乙酯以便引發(fā)反應(yīng)。在磁力攪拌下回流45分鐘后，添加3，5-二甲基苯基乙腈(13.2克，91毫摩爾)，然后滴加余下的2-溴-3-甲基丁酸乙酯(總共19.1克，91毫摩爾)。保持沸騰15分鐘，然后冷卻該混合物，再往其中添加四氫呋喃(500毫升)和50％碳酸鉀水溶液(100毫升)。在激烈攪拌45分鐘后，采用傾析方法分離有機(jī)相，再用四氫呋喃(2×100毫升)洗滌含水相。合并的有機(jī)相用10％鹽酸水溶液(300毫升)處理45分鐘。在減壓蒸餾除去四氫呋喃后，殘留物用二氯甲烷(300毫升)溶解，有機(jī)相用飽和碳酸氫鈉溶液(100毫升)洗滌，用硫酸鎂干燥與濃縮。蒸餾殘留物(134℃，10-1毫米汞柱)得到3-甲基-2-(3，5-二甲基苯基乙酰基)-丁酸乙酯(13.2克，52％)。
金屬鈉(23.8克，1.034摩爾)與無水乙醇(500毫升)進(jìn)行反應(yīng)。往得到的透明溶液中添加硫脲(54.35克，714毫摩爾)和3-甲基-2-(3，5-二甲基苯基乙?；?-丁酸乙酯(13.14克，47.6摩爾)。反應(yīng)介質(zhì)保持回流6小時(shí)，然后在40.50℃下真空濃縮。往得到的殘留物添加濃鹽酸(100毫升)，然后用醋酸將該溶液調(diào)節(jié)到pH4。得到的6-二甲基芐基-5-異丙基-2-硫脲嘧啶溶于10％氯乙酸水溶液(200毫升)中，該溶液保持回流24小時(shí)，然后冷卻到室溫，所得到的沉淀采用過濾分離，再用冷乙醇洗滌，然后用乙醚洗滌，再在40℃下真空干燥，得到6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基-尿嘧啶(7克，54％)。
熔點(diǎn)213-214℃。
B.1-乙酰氧基-3-乙酰氧基甲氧基丙烷的合成(根據(jù)反應(yīng)流程1的式VII化合物，其中n＝3)往達(dá)到0℃的1，3-二噁烷(3毫升，0.035毫摩爾)和醋酸酐(3.3毫升，0.035毫摩爾)混合物中加入一滴濃硫酸。然后，該混合物在20℃攪拌14小時(shí)，加入醋酸鈉(2克)，再過濾。真空蒸餾(120℃，16毫米汞柱)的殘留物得到1-乙酰氧基-3-乙酰氧基甲氧基丙烷(3.34克，50％)，呈無色油狀。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.90(五重峰，2H，J＝6Hz，CH2-CH2-CH2)，2.04(s，3H，OAc)，2.09(s，3H，OAc)，3.69(t，2H，J＝6Hz，O-CH2-CH2-CH2-OAc)，4.14(t，2H，J＝6Hz，O-CH2CH2CH2OAc)，5.22(s，2H，AcOCH2O)。
IR(KBr)νmax2994(νC-H)，1706和1682(νC＝O)，1225，1074cm-1。
C.1-(3-N1-羥基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基-尿嘧啶(本發(fā)明化合物3)的合成往在前面步驟A得到的6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基-尿嘧啶(1.5克，5.5毫摩爾)和在前面步驟B得到的1-乙酰氧基-3-乙酰氧基甲氧基丙烷(2.1克，11毫摩爾)在乙腈(60毫升)中的溶液，添加六甲基二硅氮烷(1.78克，11毫摩爾)和氯代三甲基硅烷(1.2克，11毫摩爾)。在20℃下15分鐘后，滴加氯化錫(IV)(2.87克，11毫摩爾)在乙腈(15毫升)中的溶液。在20℃攪拌14小時(shí)后，添加二氯甲烷(100毫升)和飽和碳酸氫鈉水溶液(50毫升)。然后，有機(jī)相用飽和碳酸氫鈉水溶液(30毫升)洗滌，再用飽和氯化鈉溶液(30毫升)洗滌，用硫酸鎂干燥，然后濃縮。得到的殘留物進(jìn)行《閃》式柱色譜分離(石油醚/醋酸乙酯1∶1，RF＝0.41)，得到1-(乙酰氧基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基尿嘧啶(1.73克，75％)，呈粘稠油狀。
這種含乙?；苌?1.7克，4.05毫摩爾)溶于甲醇(40毫升)中，往其中添加三乙胺(5毫升)和水(5毫升)。在20℃攪拌48小時(shí)后，停止反應(yīng)(CCM)。濃縮反應(yīng)介質(zhì)，通過與甲苯共蒸發(fā)除去揮發(fā)性產(chǎn)物殘留物，再讓殘留物進(jìn)行《閃》式柱色譜分離(二氯甲烷/甲醇99.5∶0.5)，得到1-(3-羥基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基尿嘧啶(1.43克，93％)。
往這種醇(1.43克，3.96毫摩爾)、N，O-(二苯氧基羰基)-羥基胺(1.2克，4.36毫摩爾)和三苯基膦(1.25克，4.76毫摩爾)在四氫呋喃(30毫升)中的溶液，在0℃滴加偶氮基二甲酸二異丙酯(0.97克，4.76毫摩爾)在四氫呋喃(5毫升)中的溶液。該反應(yīng)介質(zhì)濃縮后進(jìn)行《閃》式柱色譜分離(甲醇/氯仿0.3∶9.7)，得到6-(3，5-二甲基芐基)-1-[3-(N-苯氧基羰基-N-苯氧基羰酰氧基氨基)丙氧基甲基]-5-異丙基尿嘧啶(1.8克，79％)，呈固體狀。
熔點(diǎn)59-61℃。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.23(d，6H，J＝6.5Hz，CH-Me2)，2.03(五重峰.2H，J＝6Hz，CH2-CH2-CH2)，2.29(s，6H，Me2Ph)，2.82(sept.，1H，CH-Me2)，3.75(t，2H，O-CH2-CH2-CH2-N)，3.95(t，2H，NCH2-CH2-CH2-O)，4.09(s，2H，CH2Ar)，5.12(s，2H，NCH2O)，6.70(s，2H，H鄰芐基)，6.90(s，1H，H對芐基)，7.10-7.48(m，10，2PhO)，8.1(s I，1H，NH)。
IR(CH2Cl2)νmax3382(νN-H)，3050-2870(νC-H)，1806，1741，1707和1682(νC＝O)cm-1。
C34H37N3O8的元素分析計(jì)算值C66.33；H6.06；N6.82測定值C66.33；H6.12；N6.83這后一種化合物(1.8克，3.13毫摩爾)在氨飽和的甲醇中的溶液，在20℃下攪拌直到起始物消失為止(采用CCM跟蹤反應(yīng))。其殘留物進(jìn)行《閃》式柱色譜分離(甲醇/醋酸乙酯1∶9)，得到所希望的1-(3-N1-羥基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基尿嘧啶(0.74克，60％)，呈固體狀。
熔點(diǎn)88-90℃。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.29(d，6H，J＝6.5Hz，CH-Me2)，1.89(五重峰2H，J＝6Hz，CH2-CH2-CH2)，2.28(s，6H，Me2Ph)，2.88(七重峰1H，CH-Me2)，3.62(t，2H，O-CH2-CH2-CH2-N)，3.68(t，2H，NCH2-CH2-CH2-O)，4.09(s，2H，CH2Ar)，5.11(s，2H，NCH2O)，6.70(s，2H，H鄰-芐基)，6.90(s，1H，H對-芐基)，9.00和9.87(2s I，3H，NH)。
IR(CH2Cl2)νmax3530(νO-H)，3430、3372和3190(νN-H)，3000-2850(νC-H)，1681.5(νC＝O)cm-1。
C21H30N4O5·1/2H2O的元素分析計(jì)算值C59.00；H7.31；N13.11測定值C58.83；H7.15；N12.82。
實(shí)施例21-(3-N1-乙酰氧基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基-尿嘧啶(本發(fā)明化合物4)的合成(本發(fā)明的式I化合物，其中n＝3，R1是異丙基，每個(gè)R2是甲基，R3是-OR5基團(tuán)，其中R5是-CO-CH3基團(tuán)，R4是氫原子)。
往上述實(shí)施例1-C中得到的1-(3-N1-羥基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基-尿嘧啶(85毫克，0.2毫摩爾)在二氯甲烷(3.5毫升)中的溶液，添加DMAP(4-二甲基氨基吡啶)(5毫克，0.04毫摩爾)、三乙胺(45微升，0.3毫摩爾)和醋酸酐(25微升，0.24毫摩爾)，該混合物在20℃攪拌3小時(shí)。然后，添加二氯甲烷(5毫升)和飽和碳酸氫鈉水溶液(5毫升)。這種反應(yīng)介質(zhì)再用二氯甲烷(50毫升)提取，有機(jī)相用水(10毫升)洗滌，然后用飽和氯化鈉溶液(10毫升)洗滌，再干燥(硫酸鈉)。有機(jī)相隨后進(jìn)行濃縮并且進(jìn)行“閃”式硅膠柱色譜分離(二氯甲烷/甲醇9∶1)，得到70毫克(75％)所希望的1-(3-N1-乙酰氧基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基-尿嘧啶，呈固體狀。
熔點(diǎn)77-79℃。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.31(d，6H，J＝7.0Hz，CH-Me2)，1.84(五重峰2H，J＝6.5Hz，CH2-CH2-CH2)，2.22(s，3H，OAc)，2.31(s，6H，Me2Ph)，2.86(七重峰1H，CH-Me2)，3.67(t，2H，O-CH2-CH2-CH2-N)，3.75(t，2H，NCH2-CH2-CH2-O)，4.10(s，2H，CH2Ar)，5.10(s，2H，NCH2O)，6.72(s，2H，H鄰-芐基)，6.91(s，1H，H對-芐基)，8.65(sI，1H，NH)。
IR(CH2Cl2)νmax3531、3420、3372、3195(νN-H)，3055-2871(νC-H)，1795(νC＝OAc)，1784，1683(νC＝OCON)cm-1。
SM(m/z(％))444(2，M+-NH2)，385(16，M+-NH2-AcO)，302(1，BH+)，301(7，B+)，287(2，BH+-Me)，286(B+-Me)。
C23H32N4O6·1/2H2O(469.61)的元素分析計(jì)算值C58.83；H7.08；N11.93測定值C58.92；H6.98；N11.83。
實(shí)施例31-(3-N1-叔戊酰氧基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基-尿嘧啶(本發(fā)明化合物5)的合成(本發(fā)明的式I化合物，其中n＝3，R1是異丙基，每個(gè)R2是甲基，R3是叔戊酰氧基(Me3CCOO-)，R4是氫原子)。
往上述實(shí)施例1-C中得到的1-(3-N1-羥基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基-尿嘧啶(134毫克，0.32毫摩爾)在吡啶(1.5毫升)中的溶液，添加46毫克(0.38毫摩爾)叔戊?；?。在24℃下攪拌14小時(shí)后，通過與甲苯(2×3毫升)共蒸發(fā)除去吡啶，殘留物用二氯甲烷(10毫升)溶解。然后，有機(jī)相用飽和碳酸氫鈉水溶液(10毫升)洗滌。含水相用二氯甲烷(3×10毫升)提取，合并的有機(jī)相用碳酸氫鈉水溶液(10毫升)，飽和氯化鈉水溶液(10毫升)洗滌，干燥(硫酸鈉)，通過蒸餾溶劑得到180毫克1-(3-N1-叔戊酰氧基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基-尿嘧啶粗品，它然后進(jìn)行“閃”式硅膠柱色譜分離(二氯甲烷/甲醇24∶1)，得到127毫克(78％)所希望的1-(3-N1-叔戊酰氧基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基-尿嘧啶，呈固體狀。
熔點(diǎn)132-133℃。
RF0.22(二氯甲烷/甲醇24∶1)，UV(MeOH)nm(ε)210(17500)和268(9420)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.27(d，6H，J＝6.5Hz，CH-Me2)，1.29(s，9H，CMe3)，1.80(五重峰2H，J＝6Hz，CH2-CH2-CH2)，2.28(s，6H，Me2Ph)，2.86(七重峰1H，CH-Me2)，3.62(t，2H，O-CH2-CH2-CH2-N)，3.72(t，2H，OCH2-CH2-CH2-N)，4.08(s，2H，CH2Ar)，5.09(s，2H，NCH2O)，6.69(s，2H，H鄰-芐基)，6.89(s，1H，H對-芐基)，8.66(s éI，1H，NH)。
13C NMR(50MHz，CDCl3)δ20.4(Me2Ar)，21.3(Me2CH)，26.8(NCH2CH2CH2-O)，27.0(Me3C)， 28.4(Me2CH)，33.3(CH2Ar)，38.5(Me3C)，46.6(NCH2CH2CH2)，66.4(O-CH2-CH2-CH2-N)，73.1(NCH2O)，119.6(C-5)，125.0(C鄰-Ar)，128.8(C對-Ar)，135.1(Cipso-Ar)，138.8(C間-Ar)，148.8(C-2)，151.8(C-6)，158.8(CONH2)，162.3(C-4)和175.7(COCMe3)。
IR(CH2Cl2)νmax3535(νN-H)，3430和3386(νNH2)，3052(非對稱νC-H)，1779(νC＝O酯)，1705，1684(νC＝OCON)cm-1。
SM m/z(％)355(4，B-CH2-OCH2CH2CN+)，301(2，B-CH2O+)，285(3，B-CH2+)，273(13，BH2+)，272(62，BH+)，271(5，B+)，257(100，BH+-Me)。
C26H38N4O6(502.62)的元素分析，0.5CH2Cl2計(jì)算值C58.39；H7.21；N10.28測定值C58.14；H7.20；N10.13。
實(shí)施例4
1-(3-N3-羥基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基尿嘧啶(本發(fā)明化合物1)的合成(本發(fā)明的式I化合物，其中n＝3，R1是乙基，每個(gè)R2是甲基，R3是氫原子，R4是OH基團(tuán))。
A.5-乙基-1-(3-羥基丙氧基甲基)-6-(3，6-二甲基芐基)尿嘧啶的合成(根據(jù)反應(yīng)流程1的式IX化合物，其中R1是乙基，每個(gè)R2是甲基)往5-乙基-6-(3，5-二甲基芐基)尿嘧啶(645毫克，5毫摩爾)(如在前面實(shí)施例1-A中制備6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基尿嘧啶所描述的那樣制備，但用2-溴丁酸代替2-溴-3-甲基丁酸)和1-乙酰氧基-3-乙酰氧基-甲氧基丙烷(如前面實(shí)施例1-B中所描述的那樣制備)(950毫克，5毫摩爾)在乙腈(25毫升)中的懸浮液，添加六甲基二硅氮烷(810毫克，5毫摩爾)和氯代三甲基硅烷(545毫克，5毫摩爾)。在20℃下攪拌10分鐘后，在10分鐘內(nèi)滴加氯化錫(IV)(782毫克，2.4毫摩爾)在乙腈(7毫升)中的溶液。在攪拌14小時(shí)后，再往反應(yīng)介質(zhì)添加二氯甲烷(70毫升)和飽和碳酸氫鈉水溶液(70毫升)。采用傾析方法分離有機(jī)相，含水相用二氯甲烷(3×50毫升)提取。合并的有機(jī)相用飽和碳酸氫鈉溶液(25毫升)、水(25毫升)、飽和氯化鈉水溶液(25毫升)洗滌。有機(jī)相用硫酸鈉干燥，然后濃縮，再進(jìn)行《閃》式硅膠柱色譜分離(醋酸乙酯/石油醚1∶1)，得到0.85克(87％)5-乙基-1-(3-乙酰氧基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)尿嘧啶。
C21H28N2O5(388.47)的元素分析計(jì)算值C44.93；H7.26；N7.21測定值C44.76；H7.39；N7.11。
這后一種化合物然后在三乙胺-甲醇-水混合物1∶8∶1(80毫升)中在20℃下攪拌34小時(shí)，在用《閃》式硅膠柱色譜純化(二氯甲烷/甲醇19∶1)后，得到0.57(76％)5-乙基-1-(3-羥基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)尿嘧啶。
C19H26N2O4(346.43)的元素分析計(jì)算值C65.88；H7.56；N8.09測定值C65.42；H7.46；N7.94。
B.1-(3-N3-羥基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基尿嘧啶(本發(fā)明化合物1)的合成在前面步驟A中得到的5-乙基-1-(3-羥基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)尿嘧啶(210毫克，0.6毫摩爾)、苯鄰二甲酰亞胺(110毫克，0.72毫摩爾)和三苯基膦(0.19毫克，0.72毫摩爾)溶于四氫呋喃，該溶液冷卻到0℃。然后往其中滴加偶氮基二甲酸異丙酯(145毫克，0.72毫摩爾)在四氫呋喃(2毫升)中的溶液。該反應(yīng)介質(zhì)再進(jìn)行濃縮，并進(jìn)行《閃》式硅膠柱色譜純化(二氯甲烷/甲醇49∶1)，得到的產(chǎn)物用新的《閃》式硅膠柱色譜純化(醋酸乙酯/石油醚1∶1)，得到5-乙基-6-(3，5-二甲基芐基)-1-(3-苯鄰二甲酰亞胺基丙氧基甲基)尿嘧啶(0.23克，79％)。
這后一種化合物通過在肼水合物(240毫克)乙醇(5毫升)溶液中在20℃下攪拌2小時(shí)進(jìn)行肼解反應(yīng)，再用硅膠柱色譜純化(二氯甲烷/甲醇/氨飽和的甲醇8∶2∶0.25)，得到1-(3-氨基丙氧基甲基)-5-乙基-6-(3，5-二甲基芐基)尿嘧啶(0.10克，59％)。
這后一種化合物(100毫克，0.29毫摩爾)在二氯甲烷(3毫升)中的溶液被添加到羰基二咪唑(66毫克，0.41毫摩爾)在二氯甲烷(6毫升)中的溶液，其中滴加O-叔-丁基二甲基甲硅烷基羥基胺(60毫克，0.41毫摩爾)在二氯甲烷(1毫升)中的溶液，并且在20℃下攪拌20分鐘。在兩次《閃》式硅膠柱色譜純化(二氯甲烷/甲醇19∶1)后，產(chǎn)物進(jìn)行O-脫甲硅烷基化反應(yīng)，于是得到60毫克(52％)所希望的1-(3-N3-羥基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基尿嘧啶，呈油狀。
1H NMR(200MHz，CDCl3，40℃)δ1.07(t，3H，J＝7.0Hz，CH2-CH3)，1.82(五重峰2H，J＝6Hz，CH2-CH2-CH2)，2.30(s，6H，Me2Ph)，約2.5(s I，3H，NH)，2.51(q，2H，CH2-CH3)，3.40(t，2H，N-CH2-CH2-CH2-O)，3.70(t，2H，OCH2-CH2-CH2-N)，4.09(s，2H，CH2Ar)，5.13(s，2H，NCH2O)，6.72(s，2H，H鄰-芐基)，6.92(s，1H，H對-芐基)。
IR(KBr)νmax3401(νO-H)，3291、3186和3058(νN-H)，1691(νC=O)cm-1。
C20H28N4O5·1/3H2O的元素分析計(jì)算值C58.52；H7.04；N13.65測定值C58.63；H6.99；N13.44。
實(shí)施例51-(3-N1-羥基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基尿嘧啶(本發(fā)明化合物2)的合成(本發(fā)明的式I化合物，其中n＝3，R1是乙基，R2＝甲基，R3＝OH，R4＝H)。
往(如在前面實(shí)施例4-A中所描述的那樣制備的)5-乙基-1-(3-羥基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)尿嘧啶(190毫克，0.548毫摩爾)，N，O-雙(苯氧基羰基)羥基胺(165毫克，0.603毫摩爾)和三苯基膦(288毫克，1.09毫摩爾)在四氫呋喃(5毫升)中的溶液，在0℃滴加DIAD(偶氮基二甲酸二異丙酯)(222毫克，1.09毫摩爾)在四氫呋喃(1毫升)中的溶液。這時(shí)將反應(yīng)介質(zhì)調(diào)到20℃，濃縮，再進(jìn)行硅膠柱色譜純化(醋酸乙酯/乙醚1∶9)，然后用《閃》式硅膠柱色譜純化(甲醇/氯仿3∶97)，得到250毫克中間化合物6-(3，5-二甲基芐基)-1-[3-(N-苯氧基羰基-N-苯氧基羰酰氧基氨基)丙氧基甲基]-5-乙基脲嘧啶。
這種中間化合物立刻溶于氨飽和的甲醇溶液(5毫升)中，該反應(yīng)介質(zhì)在20℃下攪拌24小時(shí)。這時(shí)，中間化合物全部反應(yīng)(薄層色譜)，濃縮的反應(yīng)介質(zhì)進(jìn)行《閃》式硅膠柱色譜純化(甲醇/醋酸乙酯1∶9)，得到所希望的1-(3-N1-羥基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基尿嘧啶(40毫克，24％)，呈粘稠油狀，它在20℃幾小時(shí)內(nèi)自發(fā)地結(jié)晶。
熔點(diǎn)165-167℃；RF0.37(甲醇/醋酸乙酯1∶9)。
1H NMR(200MHz，CD3OD，40℃)δ0.90(t，3H，J＝7.5Hz，CH2-CH3)，1.85(五重峰2H，J＝6.25Hz，NCH2-CH2-CH2O)，2.25(s，6H，Me2Ph)，2.40(q，2H，CH2CH3)，3.50(t，2H，N-CH2-CH2-CH2-O)，3.85(t，2H，NCH2-CH2-CH2-O)，4.05(s，2H，CH2Ph)，5.07(s，2H，OCH2N)，6.65(s él.，2H，H鄰-芐基)，6.85(s él.，1H，H對-芐基)。
IR(KBr)3477，3368和3159(νN-H和νO-H)，1695和1650(νC＝O)cm-1。
SM(m/z(％))359(1，M+-NH2COH)，341(7，M+-NH2COH-H2O)，271(41，M+-NH2CONOH(CH2)3O)，258(78，M+-NH2CONOH(CH2)3OCH)。
C20H28N4O5·1/3H2O的元素分析計(jì)算值C58.52；H7.04；N13.64測定值C58.55；H6.95；N13.49。
實(shí)施例61-(3-N1-苯甲酰氧基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基尿嘧啶(本發(fā)明化合物6)的合成(本發(fā)明的式I化合物，其中n＝3，R1＝異丙基，R2＝甲基，R3＝苯甲酰氧基，R4＝H)。
往在前面實(shí)施例1-C中得到的1-(3-N1-羥基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基尿嘧啶(100毫克，0.24毫摩爾)在吡啶(5毫升)中的溶液，添加30微升(0.26毫摩爾)苯甲酰氯。在24℃下攪拌14小時(shí)后，通過與甲苯(2×10毫升)共蒸發(fā)除去吡啶，殘留物采用硅膠柱色譜純化(石油醚/丙酮3∶2)，得到110毫克(88％)所希望的1-(3-N1-苯甲酰氧基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基尿嘧啶，呈固體狀。
熔點(diǎn)160-161℃；RF0.16(石油醚/丙酮3∶2)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.28(d，6H，J＝7.0Hz，CH-Me2)，1.92(五重峰2H，J＝6.0Hz，CH2-CH2-CH2)，2.30(s，6H，Me2Ph)，2.84(七重峰，1H，Me2CH)，3.70(t，2H，N-CH2-CH2-CH2-O)，3.87(t，2H，OCH2-CH2-CH2-N)，4.08(s，2H，CH2Ar)，5.10(s，2H，NCH2O)，5.22(展寬的s，2H，NH2)，6.70(s，2H，H鄰-芐基)，6.90(s，1H，H對-芐基)，7.52(dt，2H，J鄰＝9.0Hz，J對＝0.5Hz，H間-苯甲?；?，7.70(dt，1H，J間＝3.5Hz，H對-苯甲?；?，8.10(dd，2H，H鄰-苯甲?；?，8.98(展寬的s，1H，NH)。
IR(KBr)νmax3431，3363和3205(νN-H)，3028-2871(νC-H)，1763(νC＝O苯甲?；?，1680(νC＝ONC＝O)cm-1。
SM(m/z(％))398(0.5，M+-OBz)，355(2，M+-OBz-CONH2)，272(60，BH+)，257(100，BH+-Me)，122(86，OBz)，105(95，Bz)。
C28H34N4O6(522.61)的元素分析計(jì)算值C64.35；H6.56；N10.72測定值C64.26；H6.63；N10.56。
實(shí)施例71-(2-N1-羥基脲基乙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基尿嘧啶(對比化合物1)的合成(式I對比化合物，其中n＝2，R1＝乙基，R2＝甲基，R3＝OH，R4＝H)。
A.1-(2-乙酰氧基乙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基尿嘧啶的合成6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基尿嘧啶(參見上述實(shí)施例4-A)(516毫克，2毫摩爾)和1-乙酰氧基-2-乙酰氧基-甲氧基乙烷[A.Rosowski，S.H.Kim.M.Wick，J.Med.Chem.(1981)24，1177-81])(704毫克，4毫摩爾)在氮?dú)鈿夥障略谝译?20毫升)中制成懸浮液。添加HMDS(六甲基二硅氮烷)(646毫克，4毫摩爾)和TMSCl(氯三甲基硅烷)(435毫克，4毫摩爾)，攪拌10分鐘。這時(shí)在10分鐘內(nèi)滴加氯化錫(IV)(625毫克，2.4毫摩爾)在乙腈(5毫升)中的溶液。在攪拌14小時(shí)后，添加二氯甲烷(50毫升)和飽和碳酸氫鈉水溶液(50毫升)。用二氯甲烷(3×50毫升)提取。合并的有機(jī)相用飽和碳酸氫鈉水溶液(25毫升)、水(25毫升)，然后飽和氯化鈉水溶液洗滌。有機(jī)相干燥(硫酸鈉)，濃縮，然后進(jìn)行《閃式》柱色譜純化(石油醚/醋酸乙酯3∶2)，得到1-(2-乙酰氧基乙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基尿嘧啶(690毫克，92％)，呈白色固體狀。
熔點(diǎn)126.0-127.0℃；RF0.28(己烷/醋酸乙酯3∶2)。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.10(t，3H，J＝7.25Hz，CH2-CH3)，2.08(s，3H，Ac)，2.30(s，6H，Me2Ph)，2.69(q，2H，CH2CH3)，3.80(m，2H，AcOCH2-CH2O)，4.08(s，2H，CH2Ph)，4.20(m，2H，AcOCH2)，5.18(s，2H，OCH2N)，6.71(s，2H，H鄰-芐基)，6.90(s，1H，H對-芐基)，8.25(s él，1H，NH)。
IR(KBr)3030(芳族νC-H)，2950(脂族νC-H)，1740和1705(νC＝O)cm-1。
UV(甲醇)νmax(ν)266nm(8180)。
SM(m/z(％))374(4，M+)，255(16，M+-AcOCH2CH2O)，119(11，M+-堿)，87(100，AcOCH2CH2+)。
C20H26N2O5(374.44)的元素分析計(jì)算值C64.16；H7.00；N7.48測定值C63.88；H7.10；N7.37。
B.6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基-1-(2-羥基乙氧基甲基)脲嘧啶的合成1-(2-乙酰氧基乙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基尿嘧啶(690毫克，1.9毫摩爾)在甲醇/三乙胺/水混合物8∶1∶1中的溶液在20℃下攪拌20小時(shí)。先采用真空蒸發(fā)，然后采用與甲苯共蒸發(fā)除去這些溶劑。得到的固體重結(jié)晶(甲醇)得到390毫克6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基-1-(2-羥基乙氧基甲基)脲嘧啶。結(jié)晶母液濃縮后進(jìn)行《閃式》硅膠柱色譜純化(二氯甲烷/甲醇19∶1)，得到80毫克補(bǔ)充試樣。白色固體總產(chǎn)率470毫克(77％)。
熔點(diǎn)178.0-179.0℃；RF0.12(石油醚/醋酸乙酯9∶1)。
1H NMR(CD3OD，200MHz)δ1.01(t，3H，J＝7.5Hz，CH2-CH3)，2.25(s，6H，Me2Ph)，2.42(q，2H，CH2CH3)，3.60(m，4H，CH2-CH2)，4.12(s，2H，CH2Ph)，5.14(s，2H，OCH2N)，6.78(s él，2H，H鄰-芐基)，6.90(s él，1H，H-對-芐基)。
IR(KBr)3380(νO-H)，3020(芳族νC-H)，1708(νC＝O)cm-1。
UV(甲醇)νmax(ν)207(41500)，268(15400)。
SM(m/z(％))332(2，M+)，258(100，B+)。
C18H24N2O4(332.40)的元素分析計(jì)算值C65.04；H7.28；N8.43測定值C64.93；H7.30；N8.36。
C.1-(2-N1-羥基脲基乙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基尿嘧啶的合成(對比化合物1)往6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基-1-(2-羥基乙氧基甲基)脲嘧啶(0.2克，0.6毫摩爾)、N，O-雙(苯氧基羰基)羥基胺(0.18克，0.66毫摩爾)和三苯基膦(0.19克，0.66毫摩爾)在四氫呋喃(6毫升)中的溶液，在0℃滴加DIAD(偶氮二甲酸二異丙酯)(145毫克，0.71毫摩爾)。濃縮的反應(yīng)介質(zhì)相繼進(jìn)行兩次《閃式》硅膠柱色譜純化，第一次使用二氯甲烷/甲醇49∶1混合物作為洗脫劑，第二次使用醋酸乙酯/石油醚2∶3混合物作為洗脫劑。這樣得到6-(2，3-二甲基芐基)-5-乙基-1-(2-N，O-雙(苯氧基羰基)羥基氨基乙氧基甲基)脲嘧啶(0.30克，85％)，其中0.15克(0.25毫摩爾)溶于氨飽和的甲醇溶液(10毫升)中，再在10℃下攪拌24小時(shí)。濃縮的反應(yīng)介質(zhì)進(jìn)行《閃式》硅膠柱色譜純化(二氯甲烷/甲醇19∶1)，得到的油用乙醚處理，這樣得到1-(2-N1-羥基脲基乙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基尿嘧啶(36.6毫克，36％)，呈白色固體狀。
熔點(diǎn)147-148℃；RF0.18(二氯甲烷/甲醇9∶1)。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.09(t，3H，J＝7.5Hz，CH2CH3)，2.29(s，6H，Me2Ph)，2.48(q，2H，CH2CH3)，3.22-3.90(m，4H，CH2CH2)，4.07(s，2H，CH2Ph)，5.10(s，2H，OCH2N)，6.70(s，2H，H-鄰-芐基)，6.90(s，1H，H-時(shí)-芐基)，9.76(s él，1H，NH)。
IR(KBr)3498，3235和3190(νO-H和νN-H)，1703，1699和1688(νC＝O)cm-1。
SM(m/z(％))345(1，M+-NH2CHO)，327(6，M+-NH2COH-H2O)，271(100，M+-NH2CONOHCH2CH2O)，258(73，B+)。
C19H26N4O5·1/2H2O(339.45)的元素分析計(jì)算值C57.13；H6.81；N14.03測定值C56.85；H6.63；N13.57。
實(shí)施例81-(4-N1-羥基脲基丁氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基尿嘧啶(對比化合物2)的合成(式I對比化合物，其中n＝4，R1＝乙基，R2＝甲基，R3＝OH，R4＝H)。
A.苯甲酸-4-羥基丁酯的合成往1，4-丁二醇(18毫升，0.2毫摩爾)在吡啶(16毫升)中的溶液，在0℃，在氮?dú)鈿夥障戮徛砑颖郊柞Ｂ?1毫升，0.1毫摩爾)。在0℃下攪拌4小時(shí)后，濃縮反應(yīng)介質(zhì)，再通過與甲苯共蒸發(fā)除去吡啶。殘留物用乙醚(3×20毫升)提取，有機(jī)相干燥(硫酸鎂)，濃縮，進(jìn)行《閃式》硅膠柱色譜純化(石油醚/醋酸乙酯3∶2)，得到苯甲酸4-羥基丁酯(9.9克，55％)，呈無色油狀。
RF0.36(石油醚/醋酸乙酯1∶1)。
1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.79(m，4H，CH2CH2CH2CH2)，3.60(t，2H，J＝7.0Hz，CH2OH)，4.34(t，2H，J＝8.0Hz，PhCOOCH2)，7.45-8.02(m，5H，Ph)。
B.1-(4-苯甲酰氧基丁氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基尿嘧啶的合成往苯甲酸4-羥基丁酯(1克，5.2毫摩爾)在二氯甲烷(18毫升)中的溶液，添加仲甲醛(100毫克，5.2毫摩爾)?；旌衔餃囟日{(diào)到0℃，鼓泡通入鹽酸兩小時(shí)。此后，關(guān)閉容器，在4℃攪拌16小時(shí)。該反應(yīng)混合物用二氯甲烷(10毫升)稀釋，干燥(硫酸鎂)，然后濃縮。這種溶液添加到6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基尿嘧啶(如實(shí)施例3中描述得到的)(400毫克，1.55毫摩爾)和N，O-雙(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(1.1毫升，4.4毫摩爾)在二氯甲烷(10毫升)中的懸浮液中，在此之前該懸浮液在20℃下攪拌30分鐘，然后添加四丁基碘化銨(20毫克，0.05毫摩爾)。該混合物加熱回流16小時(shí)，然后再調(diào)到20℃。將其倒入保持在0℃的飽和碳酸氫鈉水溶液中，這種混合物攪拌30分鐘。有機(jī)相傾析后，用飽和氯化鈉水溶液(15毫升)洗滌，干燥(硫酸鎂)，濃縮與進(jìn)行《閃式》硅膠柱色譜純化(石油醚/醋酸乙酯7∶3)，得到1-(4-苯甲酰氧基丁氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基尿嘧啶(460毫克，60％)，呈油狀。
RF0.71(二氯甲烷/甲醇19∶1)。
1H NMR(CDCl3，200MHz，)δ1.08(t，3H，J＝8.0Hz，CH2CH3)，1.78(m，4H，CH2CH2CH2CH2)，2.29(s，6H，Me2Ph)，2.48(q，2H，CH2CH3)，3.61(t，2H，J＝5.5Hz，(CH2)3CH2OCH2)，4.09(s，2H，CH2Ph)，4.34(t，2H，J＝6.0Hz，PhCOOCH2)，5.11(s，2H，OCH2N)，6.70(s él，2H，H-鄰-芐基)，6.91(s，1H，H-對-芐基)，7.40-8.09(m，5H，PhCO)，8.38(s él，1H，NH)。
IR(NaCl)3050(芳族νC-H)，2924(脂族νC-H)，1702和706(νC＝O)cm-1。
UV(乙醇)νmax(ν)202(51500)，220(33300)，267(15150)nm。
SM(m/z(％))464(1，M+)，270(58，M+-PhCO2(CH2)4O)，177(15，PhCO2(CH2)4+)，105(100，PhCO+)。
C27H32N2O5(464.57)的元素分析計(jì)算值C69.81；H6.94；N6.03測定值C69.66；H7.02；N5.92。
C.6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基-1-(4-羥基丁氧基甲基)-脲嘧啶的合成1-(4-苯甲酰氧基丁氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基尿嘧啶(500毫克，1.08毫摩爾)被添加到氫氧化鈉(360毫克，9毫摩爾)在甲醇(50毫升)中的溶液，該混合物在20℃攪拌3小時(shí)。在中和(濃鹽酸)與濃縮后，殘留物進(jìn)行《閃式》柱色譜純化(二氯甲烷/甲醇19∶1)，得到6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基-1-(4-羥基丁氧基甲基)-脲嘧啶(1 90毫克，48％)，呈白色固體狀。
熔點(diǎn)101.4-102.8℃；RF0.29(二氯甲烷/甲醇19∶1)。
1H NMR(CD3OD，200MHz)δ1.00(t，3H，J＝7.5Hz，CH2-CH3)，1.54(m，4H，CH2CH2CH2CH2)，2.26(s，6H，Me2Ph)，2.41(q，2H，CH2CH3)，3.52(m，4H，CH2CH2CH2CH2)，4.11(s，2H，CH2Ph)，5.10(s，2H，OCH2N)，6.75(s，2H，H-鄰-芐基)，6.90(s，1H，H-對-芐基)。
IR(KBr)3395(νO-H)，1694和1637(νC＝O)cm-1。
UV(甲醇)νmax(ν)270nm(11174)。
SM(m/z(％))360(1，M+)，271(7，M+-O(CH2)4OH)，258(100，M+-HO(CH2)4OCH2)。
C20H28N2O4(360.45)的元素分析計(jì)算值C66.64；H7.83；N7.77測定值C66.39；H7.87；N7.63。
D.1-(4-N1-羥基脲基丁氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基尿嘧啶(對比化合物2)的合成往6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基-1-(4-羥基丁氧基甲基)-脲嘧啶(180毫克，0.5毫摩爾)、N，O-雙(苯氧基羰基)羥基胺(150毫克，0.55毫摩爾)和三苯基膦(262毫克，1毫摩爾)在四氫呋喃(5毫升)中的溶液，在0℃滴加DIAD(偶氮二甲酸二異丙酯)(202毫克，1毫摩爾)在四氫呋喃(81毫升)中的溶液。這時(shí)將反應(yīng)混合物調(diào)到20℃，濃縮，再進(jìn)行硅膠柱色譜純化(醋酸乙酯/乙醚1∶9)，然后用《閃》式柱色譜純化(甲醇/氯仿3∶97)，得到260毫克中間化合物6-(3，5-二甲基芐基)-1-[4-(N-苯氧基羰基-N-苯氧基羰酰氧基氨基)丁氧基甲基]-5-乙基脲嘧啶。
這種中間化合物立刻溶于氨飽和的甲醇溶液(5毫升)中，該反應(yīng)介質(zhì)在20℃下攪拌24小時(shí)。這時(shí)，中間化合物全部反應(yīng)(薄層色譜)，濃縮的反應(yīng)介質(zhì)進(jìn)行《閃》式硅膠柱色譜純化(甲醇/醋酸乙酯1∶9)，得到1-(4-N1-羥基脲基丁氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-乙基尿嘧啶(45毫克，23％)，呈固體狀。
熔點(diǎn)148-150℃；RF0.40(甲醇/醋酸乙酯1∶9)。
1H NMR(CD3OD，200MHz)δ1.00(t，3H，J＝7.5Hz，CH2CH3)，1.56(m，4H，CH2CH2CH2CH2)，2.25(s，6H，Me2Ph)，2.41(q，2H，CH2CH3)，3.42和3.51(2t，2×2H，J＝6.25Hz，NCH2(CH2)2CH2O和NCH2CH2CH2CH2O)，4.11(s，2H，CH2Ph)，5.10(s，2H，OCH2N)，6.72(s，2H，H鄰-芐基)，6.90(s，1H，H對-芐基)。
IR(KBr)3485，3356和3158(νN-H和νO-H)，1682和1652(νC＝O)cm-1。
SM(m/z(％))373(1.5，M+-NH2COH)，355(20，M+-NH2COH-H2O)，271(40，M+-NH2CONOH(CH2)4O)，258(55，BH+)，257(29，B+)。
C21H30N4O5·H2O(436.51)的元素分析計(jì)算值C59.00；H7.30；N13.10測定值C59.40；H7.28；N13.09。
實(shí)施例91-(2-N1-羥基脲基乙氧基甲基)-6-芐基-5-乙基尿嘧啶(對比化合物3)的合成(式I對比化合物，其中n＝2，R1＝乙基，R2＝H，R3＝OH，R4＝H)。
A.1-(2-乙酰氧基乙氧基甲基)-6-芐基-5-乙基尿嘧啶的合成通過利用2-溴丁酸代替2-溴-3-甲基丁酸以及利用苯基乙腈代替3，5-二甲基苯基乙腈，如實(shí)施例1.A所描述制備的6-芐基-5-乙基尿嘧啶(690毫克，3毫摩爾)在HMDS(六甲基二硅氮烷)(15毫升，75毫摩爾)中的懸浮液，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下添加硫酸銨(15毫克)。該反應(yīng)介質(zhì)保持沸騰回流14小時(shí)，冷卻，然后真空濃縮。殘留物在氮?dú)獗Ｗo(hù)下用無水二氯甲烷(12毫升)溶解。在嚴(yán)格無水條件下往得到的溶液中添加1-乙酰氧基-2-乙酰氧基甲氧基乙烷[A.Rosowski，S.H.Kim.M.Wick，J.Med.Chem.(1981)24，1177-81](1.06克，6毫摩爾)和三氟甲基磺酸三甲基甲硅烷酯(0.57毫升，3.3毫摩爾)。在20℃下攪拌4小時(shí)后，添加二氯甲烷(12毫升)。有機(jī)相先用飽和碳酸氫鈉溶液(10毫升)，然后用飽和氯化鈉溶液(10毫升)洗滌，干燥(硫酸鎂)與濃縮，再相繼地進(jìn)行《閃》式硅膠柱色譜純化(氯仿/乙醇1∶9)，然后進(jìn)行第二次《閃》式柱色譜純化(石油醚/醋酸乙酯1∶1)，得到1-(2-乙酰氧基乙氧基甲基)-6-芐基-5-乙基尿嘧啶(380毫克，69％)，它可立刻用于下述步驟。
B.6-芐基-5-乙基-1-(2-羥基乙氧基甲基)尿嘧啶的合成往1-(2-乙酰氧基乙氧基甲基)-6-芐基-5-乙基尿嘧啶(1.74克，5.02毫摩爾)在甲醇(30毫升)中的溶液，添加1M甲醇鈉的甲醇溶液(7毫升)。在20℃下攪拌14小時(shí)后，該溶液用1M鹽酸水溶液調(diào)到pH 4。濃縮的反應(yīng)介質(zhì)進(jìn)行硅膠柱色譜純化(氯仿/乙醇19∶1)，得到6-芐基-5-乙基-1-(2-羥基乙氧基甲基)尿嘧啶(1克，66％)。
熔點(diǎn)120-122℃；RF0.25(氯仿/乙醇19∶1)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ0.88(t，3H，J＝7.25Hz，CH2CH3)，2.28(q，1H，CH2CH3)，3.42(m，4H，CH2CH2)，4.10(s él，2H，CH2Ph)，4.65(t，1H，JCH2OH＝4.5Hz，CH2OH)，5.01(s，2H，OCH2N)，7.25(s él，5H，Ph)，11.45(s él，1H，NH)。
IR(KBr)3396(νO-H)，3028(芳族νC-H)，2832(脂族νC-H)，1706(νC＝O)cm-1。
C16H20N2O4(304.35)的元素分析
計(jì)算值C63.14；H6.62；N9.20測定值C62.94；H6.77；N9.07。
C.1-(2-N1-羥基脲基乙氧基甲基)-6-芐基-5-乙基尿嘧啶(對比化合物3)的合成往6-芐基-5-乙基-1-(2-羥基乙氧基甲基)尿嘧啶(150毫克，0.4毫摩爾)在四氫呋喃(3毫升)中的溶液，在20℃添加三苯基膦(126毫克，0.48毫摩爾)和N，O-雙(苯氧基羰基)羥基胺(120毫克，0.44毫摩爾)，然后滴加DIAD(偶氮二甲酸二異丙酯)(97毫克，0.48毫摩爾)在四氫呋喃(0.5毫升)中的溶液。濃縮的反應(yīng)混合物進(jìn)行《閃》式硅膠柱色譜純化(氯仿/乙醇19∶1)，得到300毫克中間化合物6-芐基-1-[2-(N-苯氧基羰基-N-苯氧基羰酰氧基氨基)乙氧基甲基]-5-乙基脲嘧啶，它立刻溶于氨飽和的甲醇溶液(5毫升)中。該反應(yīng)介質(zhì)在20℃下攪拌4小時(shí)，濃縮，然后進(jìn)行《閃》式硅膠柱色譜純化(二氯甲烷/乙醇9∶1)，在重結(jié)晶(醋酸乙酯/甲醇)后得到1-(2-N1-羥基脲基乙氧基甲基)-6-芐基-5-乙基尿嘧啶(80毫克，45％)。
熔點(diǎn)276-277℃；RF0.25(二氯甲烷/甲烷9∶1)。
1H NMR(200MHz，(CD3)2SO，80℃)δ0.89(t，3H，J＝7.3Hz，CH2CH3)，2.30(q，2H，CH2CH3)，3.47(t，2H，J＝6.0Hz，NCH2CH2)，3.59(t，2H，CH2CH2O)，4.10(s él，2H，CH2Ph)，5.03(s，2H，OCH2N)，6.00(s，2H，NH2)，7.22(s él，5H，Ph)，9.13(s，1H，NOH)，11.16(s él，1H，NH)。
IR(KBr)3475和3341(νN-H和νO-H)，1706(νC＝O)cm-1。
SM(m/z(％))317(3，M+-NH2COH)，299(6，M+-NH2COH-H2O)，243(94，M+-NH2CONOH(CH2)2O)，230(100，M+-NH2CONOH(CH2)2OCH)。
UV[MeOH，νmax(ν)]205(21210)，269(11200)nm。
C17H22N4O5(362.39)的元素分析計(jì)算值C56.35；H6.12；N15.46測定值C55.89；H6.07；N15.20。
權(quán)利要求
1.具有下述通式I的化合物 式中n等于3；R1代表乙基或異丙基，每個(gè)R2基團(tuán)彼此獨(dú)立地代表氫原子、C1-C3烷基或鹵素原子，R3和R4基團(tuán)之一代表氫原子，而其中另一個(gè)基團(tuán)代表-OH或-OR5基團(tuán)，其中R5是C2-C7酰基、C1-C6烷基氨基羰基、在芳基上任選取代的芳基C1-C6烷基氨基羰基、任選取代的芳基羰基或雜芳基氨基羰基；或它們在藥學(xué)上可接受的鹽。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1代表異丙基。
3.權(quán)利要求1或2的化合物，其中每個(gè)R2代表甲基。
4.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的化合物，其中R3代表-OR5基團(tuán)，R4代表氫原子。
5.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的化合物，其中R3代表-OH基團(tuán)，R4代表氫原子。
6.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的化合物，其中R5代表?；?。
7.權(quán)利要求4的化合物，其中R5代表叔戊?；?。
8.權(quán)利要求1的化合物，它是1-(3-N1-羥基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基-尿嘧啶。
9.權(quán)利要求1的化合物，它是1-(3-N1-乙酰氧基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基-尿嘧啶。
10.權(quán)利要求1的化合物，它是1-(3-N1-叔戊酰氧基脲基丙氧基甲基)-6-(3，5-二甲基芐基)-5-異丙基-尿嘧啶
11.權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)的化合物，其中該化合物被用作藥物。
12.權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)的化合物，其中該化合物被用作抗病毒劑。
13.權(quán)利要求12的化合物，其中該化合物被用作抗HIV-1劑。
14.下述通式I的化合物的制備方法 式中n等于3；R1代表乙基或異丙基，每個(gè)R2基團(tuán)彼此獨(dú)立地代表氫原子、C1-C3烷基或鹵素原子，R3和R4基團(tuán)之一代表氫原子，而其中另一個(gè)基團(tuán)代表-OH或-OR5基團(tuán)，其中R5是C2-C7?；?、C1-C6烷基氨基羰基、在芳基上任選取代的芳基C1-C6烷基氨基羰基、任選取代的芳基羰基或雜芳基氨基羰基；它包括下述步驟a)在Zn存在下，讓下式II化合物與下式III的化合物進(jìn)行反應(yīng)得到下式IV化合物 式中R2如前面所定義，R1CHBrCOOEt (III)式中R1如前面所定義， 式中R1和R2如前面所定義；b)在堿性醇介質(zhì)中，讓前面步驟a)得到的式IV化合物與硫脲進(jìn)行反應(yīng)，得到下式V硫脲嘧啶 式中R1和R2如前面所定義；c)讓前面步驟b)得到的式V的硫脲嘧啶與有機(jī)酸進(jìn)行反應(yīng)，得到下式VI化合物 式中R1和R2如前面所定義；d)讓前面步驟c)得到的式VI化合物與下式VII化合物進(jìn)行苷化反應(yīng)MeCOOCH2O(CH2)nOCOMe (VII)式中n等于3，得到一種酯，然后使該酯溶劑分解得到下式IX的醇 式中n、R1和R2如前面所定義；e)使用N，O-雙(苯氧基羰基)羥基胺作為親核試劑，讓前面步驟d)得到的式IX的醇進(jìn)行Mitsunobu反應(yīng)，得到下式X化合物 式中n、R1和R2如前面所定義；f)讓在前面步驟e)中得到的式X化合物進(jìn)行氨基分解，得到本發(fā)明的下式Ia化合物 式中n、R1和R2如前面所定義；以及9)如果必要，通過O-?；磻?yīng)或通過O-氨基甲?；磻?yīng)，用R5基團(tuán)保護(hù)在前面步驟f)中得到的式Ia化合物的-OH基團(tuán)，得到本發(fā)明的下式Ib化合物 式中n、R1、R2和R5如前面所定義；或h)使用鄰苯二甲酰亞胺作為親核試劑，讓在前面步驟c)得到的式IX醇進(jìn)行Mitsunobu反應(yīng)，得到下式XI胺 式中n、R1和R2如前面所定義；i)用羰基二咪唑和O-叔丁基二甲基甲硅烷基羥基胺處理在前面步驟h)得到的式XI胺，得到下式XII化合物 式中n、R1和R2如前面所定義；j)使在前面步驟i)得到的式XII化合物脫除甲硅烷基，得到下式Ic化合物 式中n、R1和R2如前面所定義；k)如果必要，通過O-?；磻?yīng)或通過O-氨基甲酰基化反應(yīng)，用R5基團(tuán)保護(hù)在前面步驟j)中得到的式Ic化合物的-OH基團(tuán)，得到下式Id化合物 式中n、R1、R2和R5如前面所定義。
15.藥物組合物，它含有至少一種權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)的化合物或它們在藥學(xué)上可接受的鹽作為活性組分。
16.藥物組合物，它含有抗病毒有效量的權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)的化合物或它們在藥學(xué)上可接受的鹽。
17.權(quán)利要求15或16的藥物組合物，其中該組合物被用作抗HIV-1藥物。
18.權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)的化合物或它們在藥學(xué)上可接受的鹽在生產(chǎn)抗-HIV-1藥物中的用途。
全文摘要
具有通式(I)的化合物式中n等于3；R
文檔編號(hào)C07D239/54GK1492859SQ02805458
公開日2004年4月28日 申請日期2002年1月25日 優(yōu)先權(quán)日2001年1月29日
發(fā)明者J·M·J·特龍謝, J M J 特龍謝 申請人:日內(nèi)瓦大學(xué), 馬約利·施平德勒公司