專(zhuān)利名稱(chēng)：藥用化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及全身和非全身使用的新藥，并涉及其組合物，該組合物用于中等強(qiáng)度的氧化應(yīng)激反應(yīng)(oxidative stress)和內(nèi)皮機(jī)能障礙。
氧化應(yīng)激反應(yīng)意味著自由基或自由基化合物的產(chǎn)生，自由基或自由基化合物造成細(xì)胞和周?chē)M織的傷害(病理生理學(xué)成人和兒童疾病的生物學(xué)基礎(chǔ)(Pathophysiologythe biological basis for disease inadults and children)，McCance & Huether 1998，48-54頁(yè))。
內(nèi)皮機(jī)能障礙意味著與血管內(nèi)皮有關(guān)的那些機(jī)能障礙。按照下文描述(病理生理學(xué)成人和兒童疾病的生物學(xué)基礎(chǔ)，McCance &Huether 1998，1025頁(yè))，已知血管內(nèi)皮的損傷是可以引起一系列影響各種器官和身體器官的病理過(guò)程的那些重要事件之一。
正如已知的那樣，氧化應(yīng)激反應(yīng)和/或內(nèi)皮機(jī)能障礙與各種此后報(bào)道的各種病理過(guò)程有關(guān)。許多藥物的毒性也可以引起氧化應(yīng)激反應(yīng)，這極大地影響了它們的性能。
所述病理事件具有慢性的、使虛弱的特征并且往往是十分典型的老年特征。正如已經(jīng)描述的，在所述的病理性疾病中使用的藥物顯示出一種顯著的惡化特性。
由氧化應(yīng)激反應(yīng)和/或內(nèi)皮機(jī)能障礙引起的病理學(xué)狀態(tài)(或存在于老年人中)的實(shí)例如下-對(duì)于心血管系統(tǒng)在一般情況下的心肌和血管局部缺血、高血壓、中風(fēng)、動(dòng)脈硬化等。
-對(duì)于結(jié)締組織類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和結(jié)締組織的炎性疾病等。
-對(duì)于肺部系統(tǒng)哮喘和結(jié)締組織的炎性疾病等。
-對(duì)于胃腸系統(tǒng)潰瘍和非潰瘍消化不良，腸道炎性疾病等。
-對(duì)于中樞神經(jīng)系統(tǒng)阿爾滋海默氏病等。
-對(duì)于泌尿生殖系統(tǒng)陽(yáng)痿、失禁。
-對(duì)于皮膚系統(tǒng)濕疹、神經(jīng)性皮炎、痤瘡。
-一般性的感染性疾病(參閱Schwarz-KB，Brady“在病毒感染期間的氧化應(yīng)激反應(yīng)綜述(Oxidative stress during viral infectionAreview)”Free radical Biol.Med.21/5，641-649 1996)。
另外，可認(rèn)為衰老的過(guò)程是一種真正的病理性癥狀(參閱病理生理學(xué)成人和孩子疾病的生物學(xué)基礎(chǔ)，71-77頁(yè))。
當(dāng)給予患有與氧化應(yīng)激反應(yīng)和/或內(nèi)皮機(jī)能障礙有關(guān)的病變的患者已知的藥物時(shí)，顯示出較低的活性和/或較高的毒性。
例如對(duì)于如抗炎藥物、心血管藥物、呼吸器官藥物、中樞神經(jīng)系統(tǒng)藥物、骨系統(tǒng)藥物、抗生素、泌尿生殖藥物、內(nèi)分泌藥物等，就會(huì)發(fā)生這種情況。
藥物研究涉及尋找對(duì)上述那些病理性癥狀具有改善的治療指數(shù)(功效/毒性比)或較低的風(fēng)險(xiǎn)/利益比的新分子，其中很多藥物的治療指數(shù)降低了。實(shí)際上，在上述氧化應(yīng)激反應(yīng)和/或內(nèi)皮機(jī)能障礙的癥狀中許多藥物顯示較低的活性和/或較高的毒性。
例如抗炎藥，如NSAIDs和anticolitic藥物，如5-氨基水楊酸及其衍生物，顯示出以下缺點(diǎn)。NSAIDs引起中毒，特別是當(dāng)有機(jī)體虛弱或受到與氧化應(yīng)激反應(yīng)有關(guān)的疾病狀態(tài)的影響時(shí)。所述疾病舉例如下年老、已存在的潰瘍、已存在的胃出血、虛弱的慢性疾病，詳細(xì)地說(shuō)如那些影響心血管的疾病、腎臟器官的疾病、出血體質(zhì)(haematic crasis)的疾病等。(“米索前列醇降低接受非甾體抗炎藥的類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者的嚴(yán)重胃腸道并發(fā)癥。一個(gè)隨機(jī)的、雙盲的、安慰劑-對(duì)照試驗(yàn)”F.E.Silverstein等，Ann.Intern.Med.123/4，241-9，1995；Martindale 31a ed.1996，73頁(yè)，當(dāng)代醫(yī)學(xué)診斷和治療(CurrentMedical Diagnosis and Treatment)1998，431和794頁(yè))。
為了避免顯著的毒性現(xiàn)象，在給予上述病理性疾病的患者抗炎藥時(shí)只能使用比治療所用劑量低的藥物。因此，抗炎活性很差。
用于心絞痛、高血壓和心率不齊治療的β-受體阻滯劑顯示對(duì)呼吸器官的副作用(呼吸困難、支氣管縮小)，因而它們可能在受到病變影響的患者中引起所述器官的問(wèn)題(哮喘、支氣管炎)。因此，β-受體阻滯劑進(jìn)一步使呼吸道疾病如哮喘惡化。因此，為了不進(jìn)一步危害呼吸道的功能，在哮喘病人中使用的所述藥物劑量必須降低。因而，使β-受體阻滯劑的效果大大降低。
用于預(yù)防血栓現(xiàn)象的抗血栓形成藥物，如雙嘧達(dá)莫、阿司匹林等，具有同樣的缺點(diǎn)。在受到與氧化應(yīng)激反應(yīng)和/或內(nèi)皮機(jī)能障礙有關(guān)的病變影響的患者中，這些藥物的治療作用或耐受性正如在阿司匹林中的情形一樣被大大降低了。
將支氣管擴(kuò)張藥如沙丁胺醇等用于哮喘和支氣管炎的治療并且將激活膽堿能系統(tǒng)的藥物用于如膽堿能的尿失禁的病變。它們的給予可產(chǎn)生類(lèi)似的影響心血管器官的副作用，引起心臟病患者和高血壓患者的問(wèn)題。如上所述心臟病和高血壓是與氧化應(yīng)激反應(yīng)和/或內(nèi)皮機(jī)能障礙有關(guān)的病變。如上所述這些藥物也顯示了同樣的缺點(diǎn)。
用于治療呼吸器官炎癥的祛痰劑和粘液溶解藥物在受到上述疾病影響的患者中顯示出不足。它們的給予可引起胃灼熱和胃刺激，特別是在老年人中。
骨吸收抑制劑如二膦酸鹽(如阿侖膦酸鹽等)是顯示高胃腸毒性的藥物。因此這些藥物也可顯示如上所述的相同缺點(diǎn)。
用于心血管和呼吸系統(tǒng)疾病的膦酸二酯酶抑制劑，如sildenafil、扎普司特的特征在于，在所述的氧化應(yīng)激反應(yīng)和/或內(nèi)皮機(jī)能障礙的病理性疾病中具有類(lèi)似的耐受性和/或功效性問(wèn)題。
抗過(guò)敏的藥物，如西替利嗪、montelukast等，在所述病理性疾病中顯示了類(lèi)似的問(wèn)題，特別是對(duì)涉及它們的效果的藥物而言。
抗血管緊張素藥物如ACE-抑制劑，如依那普利、卡托普利等和受體抑制劑如氯沙坦等用于心血管疾病的治療。它們的缺點(diǎn)就是在上述病理性疾病中給呼吸器官帶來(lái)副作用(如咳嗽等)。
抗糖尿病藥物，胰島素敏感的和降低血糖的兩種類(lèi)型藥物，如磺酰脲類(lèi)、甲苯磺丁脲、格列吡嗪、格列齊特、格列本脲、煙酰胺等在預(yù)防糖尿病并發(fā)癥中是無(wú)效的。它們的給予會(huì)帶來(lái)副作用如胃的損害。這些現(xiàn)象在上述病理性疾病中變得更加嚴(yán)重。
抗生素如氨芐西林、克拉霉素等和抗病毒的藥物阿昔洛韋等顯示出涉及它們的耐受性的問(wèn)題，例如，它們引起胃腸道過(guò)敏。
抗腫瘤的藥物如多柔比星、柔紅霉素、順鉑等對(duì)于不同的器官具有高毒性，在這些器官之中有胃和腸。所述毒性使上述氧化應(yīng)激反應(yīng)和/或內(nèi)皮機(jī)能障礙的病變進(jìn)一步惡化。
抗癡呆的藥物如煙堿和colinomimetics的特征在于具有差的耐受性，特別是在上述病變中。
用于治療急性疾病(哮喘等)或慢性疾病(腸道疾病、肝病、呼吸系統(tǒng)疾病、女性生殖性器官疾病、激素紊亂、皮膚疾病等)的具有甾體結(jié)構(gòu)的藥物的特征在于其影響各種器官，尤其是上述氧化應(yīng)激反應(yīng)病變的器官的明顯毒性作用。
此類(lèi)甾族藥物對(duì)各種器官具有明顯的藥理(farmaco)-毒理學(xué)作用，因此臨床應(yīng)用及其停藥都引起一系列副作用，其中有些副作用是嚴(yán)重的，在此類(lèi)藥物中有氫化可的松、可的松、潑尼松、潑尼松龍、氟氫可的松、去氧皮質(zhì)酮、甲潑尼龍、曲安西龍、帕拉米松、倍他米松、地塞米松、曲安奈德、氟輕松、倍氯米松、乙酰氧基孕烯諾酮(acetoxy-pregnelone)等。參見(jiàn)例如，Goodman和Gilman，“治療學(xué)的藥物基礎(chǔ)(The pharmaceutical Basis of Therapeutics)”第九版，1459-1465頁(yè)，1996。
在這些毒性作用中，可以提及的有影響骨組織導(dǎo)致細(xì)胞代謝改變和骨質(zhì)疏松高發(fā)生率的毒性作用；影響心血管系統(tǒng)產(chǎn)生高血壓反應(yīng)的毒性作用；影響胃腸道器官造成胃損傷的毒性作用。
參見(jiàn)例如，Martindale“The extrapharmacopoeia”第30)版，712-723頁(yè)，1993。
用于肝病治療和膽絞痛的膽汁酸也屬于甾族藥物。熊去氧膽酸也被用于某些肝病(膽汁性肝硬化等)的治療。它們的耐受性在出現(xiàn)胃腸道并發(fā)癥(慢性肝損傷、消化性潰瘍、腸道炎癥等)時(shí)變得很差。另外，在膽汁酸的情況下，氧化應(yīng)激反應(yīng)明顯影響產(chǎn)品的性能鵝去氧膽酸和熊去氧膽酸的效果和耐受性均顯著降低。特別是，影響肝的不需要的作用得到加強(qiáng)。在甾體結(jié)構(gòu)中，還可以提及用于dislipidaemia、激素疾病、女性器官腫瘤治療的雌激素。這些甾體藥物也顯示出如上所述的副作用，尤其是在肝的水平上。
根據(jù)上述的先有技術(shù)，把治療作用與副作用分開(kāi)似乎是不可能的，見(jiàn)Goodman等，上文已提及，1474頁(yè)。
意識(shí)到需要獲得顯示改善的治療性能的藥物，即具有較低的毒性和/或較高的功效的藥物，以便可以將它們給予患有中等強(qiáng)度的氧化應(yīng)激反應(yīng)和/或內(nèi)皮機(jī)能障礙的病變的患者而不顯示先有技術(shù)藥物的缺點(diǎn)。
令人驚奇地和出乎預(yù)料地發(fā)現(xiàn)，對(duì)當(dāng)受到氧化應(yīng)激反應(yīng)和/或內(nèi)皮機(jī)能障礙影響的病人或通常對(duì)老年人給藥后出現(xiàn)的上述問(wèn)題，可通過(guò)下文所述的一類(lèi)新的藥物來(lái)解決。
本發(fā)明的一個(gè)目的就是具有以下通式(I)的化合物或它們的鹽A-B-N(O)S(I)其中s為一個(gè)等于1或2的整數(shù)，優(yōu)選s＝2；A＝R-T1-，其中R為藥物殘基而T1＝(CO)t或(X)t′，其中X＝O、S、NR1C，R1C為H或直鏈的或支鏈的烷基，所述烷基具有1到6個(gè)碳原子，或?yàn)樽杂蓛r(jià)，t和t′為整數(shù)并等于零或1，前提是當(dāng)t′＝0時(shí)，t＝1；當(dāng)t′＝1時(shí)，t＝0；B＝-TB-X2-O-，其中當(dāng)t＝0時(shí)TB＝(CO)，當(dāng)t′＝0時(shí)TB＝X，X如上定義；X2為這樣的二價(jià)基團(tuán)，它使得B的相應(yīng)的前體不滿(mǎn)足試驗(yàn)5，但滿(mǎn)足試驗(yàn)4A；所述前體具有式-TB-X2-OH，其中TB＝(CO)和t＝0，TB的自由價(jià)由-OZ飽和，其中Z＝H或R1a，可能時(shí)，R1a為直鏈或支鏈的C1-C10烷基，優(yōu)選C1-C5烷基，或者由 飽和，其中ZI和ZII彼此相同或不同，具有Z的定義，當(dāng)TB＝X和t’＝0時(shí)，TB的自由價(jià)由氫飽和；前提是所述藥物A＝R-T1-應(yīng)滿(mǎn)足試驗(yàn)1-3中的至少一個(gè)，其中自由價(jià)如下文所述被飽和- 當(dāng)t’＝0，由- O-Z飽和，其中Z＝H或R1a如上定義，或由 飽和，ZI和ZII如上定義，- 當(dāng)t＝0，由X-Z飽和，其中X和Z如上定義；- 其中試驗(yàn)1(NEM)是一個(gè)體內(nèi)試驗(yàn)，在4組大鼠(每組由10只大鼠組成)中進(jìn)行，對(duì)照組(兩個(gè)組)和處理組(兩個(gè)組)中，一組對(duì)照組和一組治療組分別給予25mg/kg s.c.一個(gè)劑量的N-乙基順丁烯二酰亞胺(NEM)，對(duì)照組用載體處理而治療組用載體+式A＝R-T1-的藥物處理，其中所述自由價(jià)如上所示是飽和的，以相當(dāng)于未接受NEM的大鼠所能耐受的最大劑量的量給予藥物，即給予動(dòng)物的最高劑量應(yīng)是在此劑量下不顯示出毒性，即不顯示例如可觀(guān)察到的癥狀的量；當(dāng)用NEM+載體+藥物處理的大鼠組顯示出胃腸道損害，或在用NEM+載體+藥物處理的大鼠組中觀(guān)察到胃腸道損害大于用載體處理的那些組，或大于用載體+藥物處理的組，或大于用載體+NEM處理的組時(shí)，所述藥物符合試驗(yàn)1，即所述藥物可以用于制備通式(I)的化合物；- 其中試驗(yàn)2(CIP)是一個(gè)體外試驗(yàn)，其中來(lái)自于臍靜脈的人內(nèi)皮細(xì)胞是在標(biāo)準(zhǔn)條件下收獲的，然后將其分為兩組(每組重復(fù)5次)，其中的一組用在培養(yǎng)基中濃度為10-4M的藥物的混合物處理，另外一組用載體處理；然后將在培養(yǎng)基中濃度為5mM的氫過(guò)氧化枯烯(CIP)加入到所述兩組中的每一組中；相對(duì)于用載體和CIP處理的組而言，如果不能獲得對(duì)CIP引起的編程性細(xì)胞死亡(細(xì)胞損害)的統(tǒng)計(jì)學(xué)上p＜0.01的顯著抑制作用，所述藥物滿(mǎn)足試驗(yàn)2，即該藥物可以用于制備通式(I)的化合物；- 其中試驗(yàn)3(L-NAME)為一個(gè)在4組大鼠(每組由10只大鼠組成)中進(jìn)行4周的體內(nèi)試驗(yàn)并且接受飲用水，對(duì)照組(2個(gè)組)和治療組(2個(gè)組)中，一組對(duì)照組和一組治療組分別接受以400mg/升的濃度加有N-ω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)的飲用水4周，在該4周中對(duì)照組給予載體而治療組在這4周中用載體+所述藥物處理，一天給予一次載體或藥物+載體，以未用L-NAME預(yù)處理的大鼠組所能耐受的最大劑量給予藥物，即可以給予動(dòng)物的最高劑量，在此劑量沒(méi)有出現(xiàn)明顯的毒性，即例如可觀(guān)察到的癥狀；在所述的4周后，停止供應(yīng)水24小時(shí)，然后處死大鼠，在處死前1小時(shí)測(cè)量血壓并在處死后測(cè)量處死大鼠血漿谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)，并檢查胃組織；當(dāng)在用L-NAME+載體+藥物處理的大鼠組中，分別與僅用載體處理的組、或用載體+藥物處理的組、或用載體+L-NAME處理的組比較，發(fā)現(xiàn)更大的肝損害(GPT的測(cè)量值更高)和/或胃和/或心血管損害(血壓的測(cè)量值更高)時(shí)，所述藥物滿(mǎn)足試驗(yàn)3，即所述藥物可用于制備通式(I)的化合物；- 其中必須被B的化合物前體滿(mǎn)足的試驗(yàn)4A是一個(gè)體外試驗(yàn)，其中一部分紅細(xì)胞懸浮液(所述紅細(xì)胞通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)方法自Wistar雄性大鼠中分離并懸浮于用磷酸緩沖液緩沖的pH 7.4的生理溶液中)在此之前已于4℃貯存4天，將該懸浮液于1000rpm離心5分鐘，用磷酸鈉緩沖液將0.1ml離心的紅細(xì)胞稀釋至50ml(pH 7.4)；從所述稀釋的懸浮液中取出每份3.5ml的等分試液(5個(gè)樣品)，在270μM氫過(guò)氧化枯烯的存在下，于37℃溫育，于710nm以30分鐘的間隔則定懸浮液的濁度，以確立出現(xiàn)最大濁度的時(shí)間(Tmax)，這與由氫過(guò)氧化枯烯溶解的最大量的細(xì)胞相應(yīng)(溶血假定為100％)；然后將B的化合物前體的醇溶液加入到3.5ml離心的紅細(xì)胞的稀釋?xiě)腋∫旱牡确衷囈褐?對(duì)每個(gè)待分析的B前體按5個(gè)樣品進(jìn)行試驗(yàn))，以使B的前體具有2mM的終濃度，然后將得到的懸浮液預(yù)溫育30分鐘，加入一定量的氫過(guò)氧化枯烯，以便具有與如上指定的相同的終濃度，由分別含有紅細(xì)胞、B的前體和氫過(guò)氧化枯烯的樣品的吸光度與含有紅細(xì)胞和氫過(guò)氧化枯烯的樣品的吸光度之間的比率乘以100來(lái)測(cè)定于Tmax時(shí)樣品中溶血作用的抑制百分率；如果B的前體抑制由氫過(guò)氧化枯烯引起的溶血作用的百分率大于15％，則認(rèn)為所述前體滿(mǎn)足該試驗(yàn)；- 其中必須不被B的前體化合物滿(mǎn)足的試驗(yàn)5是一個(gè)分析測(cè)定，其按照如下步驟進(jìn)行將10-4M濃度的B的前體的甲醇溶液的等分試液加入到由2mM脫氧核糖水溶液與100mM磷酸鹽緩沖液和1mMFeII(NH4)2(SO4)2鹽混合形成的溶液中；將該溶液在37℃(恒溫一小時(shí)后，按照順序等份加入2.8％三氯乙酸水溶液和0.5M硫代巴比土酸水溶液，在100℃加熱15分鐘，并且在532nm讀出該測(cè)試溶液的吸收度；通過(guò)下式計(jì)算在對(duì)抗由FeII引起的自由基產(chǎn)生中由B的前體引起的抑制百分率(1-AS/AC)×100其中AS和AC分別為含有試驗(yàn)化合物和鐵鹽的溶液和僅含有鐵鹽的溶液的吸收度的值，當(dāng)B的前體的如上定義的抑制百分率是高于或等于50％時(shí)，所述化合物滿(mǎn)足試驗(yàn)5；前提是在式(I)化合物中，當(dāng)B的X2為任選取代的直鏈或支鏈C1-C20亞烷基或具有5-7個(gè)碳原子亞環(huán)烷基時(shí)，用于式(I)化合物的具有如上所述的被飽和的自由價(jià)的式A＝R-T1-藥物不屬于以下類(lèi)型用于失禁的藥物、抗血栓形成的藥物(ACE-抑制劑)、前列腺素、抗炎藥(NSAIDS和皮質(zhì)類(lèi)固醇)，但不排除抗炎的NSAIDS的對(duì)乙酰氨基酚和舒林酸。
在滿(mǎn)足試驗(yàn)4A但不滿(mǎn)足試驗(yàn)5的B的式-TB-X2-O-的前體化合物中，可以使用其中X2等于R1B-X-R2B基團(tuán)(其中R1B和R2B，彼此相同或不同，為直鏈或支鏈C1-C6亞烷基)的化合物，或者X2為其中兩個(gè)亞烷基鏈C1-C4(優(yōu)選C1-C2)連接于具有4或6個(gè)原子(優(yōu)選5或6個(gè)原子)的中心環(huán)的非相鄰位置的基團(tuán)，所述環(huán)為不飽和的脂族環(huán)，或?yàn)楹?個(gè)或2個(gè)雜原子的飽和或芳族雜環(huán)(eterocyclic)，所述雜原子可相同或不同，選自O(shè)、S、N。不飽和脂族環(huán)意指不具有根據(jù)Hückel氏規(guī)則的芳族性質(zhì)的環(huán)。B的前體化合物的其他實(shí)例有1，4-丁二醇HO-(CH2)4-OH，6-羥基己酸HO-(CH2)5-COOH，4-羥基丁酸HO-(CH2)3-COOH，N-甲基二乙醇胺HO-(CH2)2-N(CH3)-(CH2)2-OH，二甘醇HO-(CH2)2-O-(CH2)2-OH，硫二甘醇HO-(CH2)2-S-(CH2)2-OH，1，4-二氧六環(huán)-2，6-二甲醇，四氫吡喃-2，6-二甲醇，4H-吡喃-2，6-二甲醇，四氫噻喃-2，6-二甲醇，1，4-二噻烷-2，6-二甲醇，環(huán)己烯-1，5-二甲醇，噻唑-2，5-二甲醇，噻吩-2，5-二甲醇，噁唑-2，5-二甲醇，優(yōu)選N-甲基二乙醇胺、二甘醇、硫二甘醇。
按照先有技術(shù)已知的并且例如描述于通過(guò)引用結(jié)合到本文中的“The Merck Index，12a Ed.(1996)”中的方法制備藥物和B的前體化合物。
鑒定與式(I)的R基團(tuán)相對(duì)應(yīng)的藥物的試驗(yàn)詳述如下試驗(yàn)1(NEM)評(píng)估自由基引起的氧化應(yīng)激反應(yīng)所造成的胃腸道損害，這類(lèi)自由基是通過(guò)給予N-乙基順丁烯二酰亞胺(NEM)形成的(H.G.Utley，F(xiàn).Bernheim，P.Hochstein“Effects of sulphydril reagents onperoxidation in microsomes”Archiv.Biochem.Biophys.118，29-32，1967)。
將動(dòng)物(大鼠)分配成以下幾組(每組10只動(dòng)物)A)對(duì)照組1°組處理只用載體(當(dāng)通過(guò)口服給予所述藥物時(shí)，用羧甲基纖維素的1％w/v水懸浮液，劑量5ml/kg，或當(dāng)胃腸外給藥即通過(guò)皮下、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)或肌內(nèi)等途徑給藥時(shí)用一種生理性的溶液)，2°組處理如上定義的載體+NEM，B)藥物治療組組I處理載體+藥物；組II處理載體+藥物+NEM。
所述藥物的給藥途徑為那些已知的途徑，并且給藥途徑可以為口服或皮下、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)或肌內(nèi)途徑。
NEM的劑量在生理溶液中為25mg/kg(皮下途徑)并在1個(gè)小時(shí)后以在載體中的懸浮液形式給予所述藥物，以相當(dāng)于最大劑量的單劑量給藥，或以未用NEM預(yù)處理的大鼠組動(dòng)物所能耐受的最大劑量給藥，即以在動(dòng)物中沒(méi)有明顯的毒性的最高劑量給予所述組，對(duì)于它的癥狀可明顯地識(shí)別時(shí)定義為毒性。24小時(shí)后處死動(dòng)物，然后對(duì)胃腸道粘液的損害進(jìn)行評(píng)估。
當(dāng)用NEM+載體+藥物處理的大鼠組顯示出胃腸道損害，或在所述組中觀(guān)察到胃腸道損害大于僅用載體處理的那些組顯示的損害，或用載體+藥物處理的組的損害，或用載體+NEM處理的組的損害時(shí)，所述藥物滿(mǎn)足試驗(yàn)1，即所述藥物可以用于制備通式(I)化合物；盡管采用特異試驗(yàn)評(píng)估時(shí)所述藥物的藥物治療功效并沒(méi)有顯著降低。
試驗(yàn)2(CIP)內(nèi)皮細(xì)胞抑制由氫過(guò)氧化枯烯(CIP)引起的氧化應(yīng)激反應(yīng)的保護(hù)參數(shù)。
按照通常的標(biāo)準(zhǔn)程序制備臍靜脈的人內(nèi)皮細(xì)胞。用0.1％(重量)的膠原酶溶液填充新鮮的臍靜脈并在37℃孵育5分鐘。
然后按照實(shí)施例所述用加有其它物質(zhì)的培養(yǎng)基M 199(GIBCO，Grand Island，NY)pH 7.4灌注靜脈。通過(guò)離心從灌注液中收集細(xì)胞并在培養(yǎng)燒瓶T-75中收獲所述細(xì)胞，用人纖連蛋白預(yù)處理。然后在同樣的培養(yǎng)基中收獲所述細(xì)胞，該培養(yǎng)基另外加有10ng/ml的牛下丘腦生長(zhǎng)因子。當(dāng)?shù)谝淮?xì)胞培養(yǎng)物(即直接來(lái)自體內(nèi))的細(xì)胞形成一個(gè)單層融合細(xì)胞(大約8,000,000細(xì)胞/燒瓶)，停止培養(yǎng)并且洗滌該層并將其胰蛋白酶消化。將該細(xì)胞懸浮液轉(zhuǎn)移到具有24孔的細(xì)胞培養(yǎng)板的孔中，然后其中的一半中加入含有10-4M濃度藥物的同樣的培養(yǎng)基并且在37℃、恒定的濕度下，在一個(gè)恒溫器中收獲。只將來(lái)自于所述的第一次傳代培養(yǎng)物的細(xì)胞用于氫過(guò)氧化枯烯(CIP)的試驗(yàn)。通過(guò)形態(tài)學(xué)的檢查以及通過(guò)它們對(duì)因子VIII的特異性免疫反應(yīng)確認(rèn)所述細(xì)胞為內(nèi)皮細(xì)胞；所述培養(yǎng)物未顯示任何來(lái)自于肌細(xì)胞或成纖維細(xì)胞的污染。
在開(kāi)始試驗(yàn)前，移走該細(xì)胞培養(yǎng)基并且用在37℃的生理溶液仔細(xì)地洗滌該細(xì)胞層。然后在該培養(yǎng)基中用濃度為5mM的CIP溫育該培養(yǎng)板的孔一小時(shí)。關(guān)于對(duì)照組(僅用CIP處理)，通過(guò)測(cè)定DNA斷裂變化的百分率進(jìn)行細(xì)胞損害(編程性細(xì)胞死亡)的評(píng)估，在405-450nm波長(zhǎng)評(píng)估熒光變化。每份樣品重復(fù)進(jìn)行5次。
關(guān)于僅用CIP處理的組，當(dāng)統(tǒng)計(jì)學(xué)上不能獲得對(duì)由CIP引起的編程性細(xì)胞死亡(細(xì)胞損害)的顯著抑制p＜0.01時(shí)，所述藥物滿(mǎn)足該試驗(yàn)，即它可以用于制備通式(I)化合物。
試驗(yàn)3(L-NAME)對(duì)給予L-NAME(Nw-硝基-L-精氨酸-甲酯)引起的內(nèi)皮機(jī)能障礙的評(píng)估J.Clin.Investigation 90，278-281，1992。
通過(guò)測(cè)定對(duì)給予L-NAME引起的胃腸道粘液損害，肝損害和高血壓評(píng)估內(nèi)皮機(jī)能障礙。
按照以下所示，將動(dòng)物(大鼠)分組。接受L-NAME的組用所述化合物處理4周，該化合物以400mg/升的濃度溶解在飲用水中。建立以下組(每組10只動(dòng)物)A)對(duì)照組1°組只用載體(當(dāng)通過(guò)口服給予所述藥物時(shí)，用羧甲基纖維素的1％w/v水懸浮液，劑量5ml/kg，當(dāng)胃腸外給藥時(shí)用一種生理溶液)，2°組載體+L-NAME，B)藥物治療組3°組載體+藥物；4°組載體+藥物+L-NAME。
所述藥物的給藥途徑為那些已知的途徑，并且給藥途徑可以為口服或皮下、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)或肌內(nèi)途徑。按照未用L-NAME預(yù)處理的大鼠組所能耐受的最大劑量給予藥物，即可以給予動(dòng)物的最高劑量而在此劑量沒(méi)有出現(xiàn)明顯的毒性，即可觀(guān)察到的癥狀的毒性。每天給藥一次，持續(xù)4周。
在四周處理結(jié)束時(shí)，禁止飲水并在24小時(shí)后處死該動(dòng)物。
在處死前1小時(shí)測(cè)定血壓，并且血壓的增加用于評(píng)估血管內(nèi)皮的損害。按照試驗(yàn)1(見(jiàn)實(shí)施例F1)所述評(píng)估對(duì)胃粘液的損害。在處死后通過(guò)評(píng)估谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT增加)測(cè)定肝損害。
當(dāng)在用L-NAME+藥物+載體處理的大鼠組中，分別與僅用載體處理的組、或用載體+藥物處理的組、或用載體+L-NAME處理的組比較，發(fā)現(xiàn)更大的肝損害(GPT)和/或更高的胃損害和/或更高的心血管損害(血壓)時(shí)，即使所述藥物的藥物治療功效(采用特異試驗(yàn)評(píng)估所述功效)并沒(méi)有顯著降低，所述藥物滿(mǎn)足試驗(yàn)3，即所述藥物可以用于制備通式(I)化合物。
在上述體內(nèi)試驗(yàn)1和3中指出的條件下，因?yàn)橥ǔ？赡苡行У乃幬飫┝坎荒軌蛟偃淌埽鏊幬锏闹委熤笖?shù)被降低。
根據(jù)R.Maffei Facino、M Carini G.Aldini、M.T.Calloni，DrugsExptl.Clin.Res.XXIII(5/8)157-165 1997所述的方法進(jìn)行試驗(yàn)4A。試驗(yàn)4A是一個(gè)體外試驗(yàn)，其中通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)方法自Wister雄性大鼠(Charles River)中分離的紅細(xì)胞于4℃在用磷酸鹽緩沖液緩沖的pH 7.4的生理溶液的懸浮液中貯存4天。在所述貯存期限結(jié)束時(shí)，取出該懸浮液的等分試液，以1000rpm離心5分鐘。用磷酸鈉緩沖液將0.1ml離心的紅細(xì)胞稀釋至50ml(pH 7.4)，獲得0.2％體積的紅細(xì)胞的懸浮液。從所述稀釋的懸浮液中取出5份等分液，每份3.5ml，加入到0.1-0.3ml氫過(guò)氧化枯烯的醇溶液中，以使?jié)舛葹?70μM，然后于37℃溫育。該化合物引起細(xì)胞溶解，所述溶解引起該懸浮液的濁度增加。細(xì)胞溶解的過(guò)程通過(guò)比濁法于710nm測(cè)定。以30分鐘的間隔讀出光密度(或透光度)，確定懸浮液出現(xiàn)最大濁度時(shí)的時(shí)間(Tmax)，其與該懸浮液中細(xì)胞溶解的最大量相應(yīng)。假定Tmax為相應(yīng)于100％紅細(xì)胞溶解的時(shí)間。為測(cè)定B的前體對(duì)由氫過(guò)氧化枯烯引起的溶血作用的抑制效果，將0.1-0.2ml的B的待評(píng)估化合物前體的醇溶液加入到3.5ml離心的紅細(xì)胞懸浮液的等分液中(每個(gè)化合物5個(gè)樣品)，以便具有2mM的終濃度，然后預(yù)溫育30分鐘。然后加入一定量的氫過(guò)氧化枯烯，以便具有與如前指定的相同的最終摩爾濃度，由測(cè)定分別含有紅細(xì)胞、B的前體和氫過(guò)氧化枯烯的待評(píng)估樣品懸浮液給出的吸光度與含有紅細(xì)胞和氫過(guò)氧化枯烯的懸浮液的吸光度之間的比率乘以100來(lái)測(cè)定化合物在Tmax時(shí)抑制溶血作用的百分率；如果B的化合物前體抑制由氫過(guò)氧化枯烯引起的溶血作用的百分率大于15％，則認(rèn)為它滿(mǎn)足試驗(yàn)4A；試驗(yàn)5為一個(gè)比色分析試驗(yàn)，其中將0.1ml等份的10-4M濃度的試驗(yàn)產(chǎn)物的甲醇溶液加入到含有一種溶液的試管中，所述溶液由0.2ml 2mM脫氧核糖、0.4ml pH 7.4的100mM磷酸鹽緩沖液和0.1ml1mM FeII(NH4)2(SO4)2在2mM HCl中形成。然后，在37℃保存該試管1小時(shí)。然后，在每支試管中順序加入0.5ml 2.8％三氯乙酸水溶液和0.5ml 0.1M的硫代巴比土酸水溶液。向一支僅含有上述反應(yīng)劑水溶液的試管中加入0.1ml甲醇形成參比空白。封閉所述試管并在100℃的油浴中加熱15分鐘。出現(xiàn)粉紅色，粉紅色的強(qiáng)度與脫氧核糖經(jīng)歷自由基氧化降解的量是成比例的。在室溫下冷卻該溶液并且相對(duì)于空白在532nm讀取它們的吸收度。通過(guò)下式確定在對(duì)抗由FeII引起的自由基產(chǎn)生中，由B或B1的前體或C＝-TC-Y-H引起的抑制(1-AS/AC)×100其中AS和AC分別為含有試驗(yàn)化合物+鐵鹽的溶液與僅含有鐵鹽的溶液的吸收度值，當(dāng)由B的前體引起的如上定義的自由基產(chǎn)生的抑制百分率大于或等于50％時(shí)，所述化合物滿(mǎn)足試驗(yàn)5。根據(jù)本發(fā)明的B的化合物前體不滿(mǎn)足試驗(yàn)5。
出乎意料地，與所述前體藥物相比，在氧化應(yīng)激狀態(tài)中，式(I)的本發(fā)明產(chǎn)物具有改良的治療指數(shù)。其中B的化合物前體滿(mǎn)足試驗(yàn)4A但不滿(mǎn)足試驗(yàn)5的本發(fā)明的式(I)化合物可以如上所述用作治療中等強(qiáng)度的氧化應(yīng)激狀態(tài)的藥物。從這個(gè)意義上說(shuō)，根據(jù)本發(fā)明，意欲包括中等強(qiáng)度的氧化應(yīng)激狀態(tài)。
為了闡述的目的，上述試驗(yàn)涉及到以下化合物(見(jiàn)表)。試驗(yàn)1前體藥物吲哚美辛- 可以給予大鼠的最大劑量7.5mg/kg p.o.(口服)。由于給予更高的劑量出現(xiàn)毒性，所述毒性表現(xiàn)出腸病、震顫、鎮(zhèn)靜直至死亡(在24小時(shí)內(nèi))的特征。- 用上述劑量的NEM+吲哚美辛處理的大鼠組顯示出胃腸道損害。
因?yàn)椋谟肗EM處理的組中，吲哚美辛引起胃腸道損害，因此它滿(mǎn)足試驗(yàn)1。因而，吲哚美辛可以用作制備本發(fā)明式(I)化合物的藥物。試驗(yàn)2前體藥物吲哚美辛、對(duì)乙酰氨基酚和氨水楊酸吲哚美辛和對(duì)乙酰氨基酚滿(mǎn)足試驗(yàn)2，因?yàn)橛蒀IP引起的細(xì)胞損害(編程性細(xì)胞死亡)抑制與對(duì)照組相比沒(méi)有顯著性差異。
因此，上述藥物可以用作制備本發(fā)明化合物(I)的藥物。
與此相反，氨水楊酸不滿(mǎn)足試驗(yàn)2，因?yàn)樗种朴蒀IP引起的編程性細(xì)胞死亡。因此按照試驗(yàn)2，氨水楊酸不能用作制備本發(fā)明化合物(I)的前體?？墒牵l(fā)現(xiàn)服從試驗(yàn)1的氨水楊酸引起胃腸道損害。
因此，氨水楊酸也可以用作制備本發(fā)明化合物(I)的前體。試驗(yàn)3(L-NAME)前體藥物對(duì)乙酰氨基酚、辛伐他汀、奧美拉唑?qū)σ阴０被雍托练ニM(mǎn)足試驗(yàn)3，因?yàn)樗鼈円鹞负透蔚膿p害大于由L-NAME+載體引起的損害和該藥物+載體引起的損害。
因此，它們可以用作制備本發(fā)明化合物(I)的前體。
與此相反，發(fā)現(xiàn)奧美拉唑既不引起胃損害又不引起肝損害，也不影響血壓。按照試驗(yàn)3，奧美拉唑不能用作制備本發(fā)明化合物(I)的前體。試驗(yàn)4A(用于B前體的試驗(yàn))N-甲基二乙醇胺顯示對(duì)由氫過(guò)氧化枯烯引起的溶血作用的抑制達(dá)54.4％(表V)。因此，它滿(mǎn)足試驗(yàn)4A，并且如果它不滿(mǎn)足試驗(yàn)5，則可用作B的前體。
二乙醇胺不抑制由氫過(guò)氧化枯烯引起的溶血作用，且它不滿(mǎn)足試驗(yàn)4A。因此，該化合物不能用作B的前體。試驗(yàn)5(用于B前體的試驗(yàn))涉及所述試驗(yàn)的表III顯示N-甲基二乙醇胺不滿(mǎn)足試驗(yàn)5，因?yàn)樗灰种朴蒄eII引起的自由基的產(chǎn)生。因此它可以用作B的前體。
按照本發(fā)明的式(I)化合物可以轉(zhuǎn)化成為相應(yīng)的鹽。例如形成鹽的一個(gè)方法如下當(dāng)在式(I)化合物的分子中的一個(gè)氮原子具有足夠的堿性以成鹽時(shí)，通過(guò)與等摩爾量的相應(yīng)的有機(jī)或無(wú)機(jī)酸在有機(jī)溶劑如乙腈、四氫呋喃中反應(yīng)可獲得所述化合物的相應(yīng)的鹽。
有機(jī)酸的實(shí)例有草酸、灑石酸、馬來(lái)酸、琥珀酸、檸檬酸。
無(wú)機(jī)酸的實(shí)例為硝酸、鹽酸、硫酸、磷酸。
按照本發(fā)明的衍生物可以用于治療所述前體藥物的適應(yīng)癥，以獲得對(duì)于下文例舉的一些藥物組的其他益處- 抗炎藥物NSAIDs本發(fā)明化合物產(chǎn)生非常好的耐受性和有效性，甚至當(dāng)有機(jī)體衰弱和在氧化應(yīng)激狀態(tài)下的時(shí)候。所述藥物也可以用在那些其中炎癥起一個(gè)重要的致病作用的病變中，例如但不限于癌癥、哮喘、心肌梗塞。- 腎上腺素能阻滯劑，α-或β-型受體阻滯劑式(I)化合物的作用譜比起始的藥物更廣伴隨直接作用于平滑肌肉系統(tǒng)抑制支配血管收縮的神經(jīng)β-腎上腺素能信號(hào)。影響呼吸器官的副作用(呼吸困難、支氣管縮小)較低。- 抗血栓形成的藥物加強(qiáng)了抗血小板的活性并且在阿司匹林衍生物的情況中胃的耐受性得到改善。- 支氣管擴(kuò)張藥和激活膽堿能系統(tǒng)的藥物影響心血管器官的副作用(心動(dòng)過(guò)速、高血壓)較低。- 祛痰藥和粘液溶解藥胃腸道耐受性得到改善。- 二膦酸鹽涉及胃腸道的毒性大大地降低。- 磷酸二酯酶(PDE)抑制劑(支氣管擴(kuò)張藥)所用劑量相等，治療功效得到改善；因此，使用本發(fā)明的化合物可以給予較低劑量的藥物并且降低所述副作用。- 抗白三烯類(lèi)藥物更好的功效。- ACE抑制劑更好的治療功效且影響呼吸器官的副作用(呼吸困難、咳嗽)更低。- 抗糖尿病的藥物(胰島素敏感藥和降血糖藥物)、抗生素、抗病毒藥、抗腫瘤藥、anticolitic藥物、治療癡呆癥的藥物更好的功效和/或耐受性。
可以用作本發(fā)明化合物通式中的前體的藥物均為滿(mǎn)足上述試驗(yàn)1、2、3中至少一個(gè)的藥物?？梢允褂玫那绑w藥物的實(shí)例如下例如，對(duì)于抗炎藥/止痛藥可以提及到以下藥物抗炎藥醋氯芬酸、阿西美辛、阿司匹林、5-氨基乙酰水楊酸、阿氯芬酸、阿明洛芬、氨芬酸、芐達(dá)酸、柏莫洛芬、α-沒(méi)藥醇、溴芬酸、溴水楊醇、布氯酸、異丁苯丁酸、卡洛芬、桂美辛、環(huán)氯茚酸、氯吡酸、雙氯芬酸鈉、二氟尼柳、地他唑、苯乙氨茴酸、依托度酸、依托芬那酯、聯(lián)苯乙酸、芬布芬、芬克洛酸、芬度柳、非諾洛芬、芬替酸、非普地醇、氟芬那酸、氟尼辛、氟諾洛芬、氟比洛芬、葡美辛、水楊酸乙二醇酯、布洛芬、異丁普生、吲哚美辛、吲哚洛芬、三苯唑酸、伊索克酸、伊索昔康、酮洛芬、酮咯酸、氯諾昔康、洛索洛芬、甲氯芬那酸、甲芬那酸、美洛昔康、氨水楊酸、甲嗪酸、莫苯唑酸、萘普生、尼氟酸、奧沙西羅、奧沙普秦、羥布宗、帕沙米特、哌立索唑、乙酰水楊酸苯酯、奧沙拉秦、pyrazolac、吡羅昔康、吡洛芬、普拉洛芬、丙替嗪酸、醋水楊胺、水楊酰胺(O-乙酸、水楊基硫酸(salicylsulphuric acid)、雙水楊酯、舒林酸、舒洛芬、琥布宗、替諾昔康、噻洛芬酸、噻拉米特、替諾立定、托芬那酸、托美丁、tropesin、聯(lián)苯丁酸、希莫洛芬、扎托洛芬、佐美酸、托莫普羅；舒林酸不同于其他的抗炎化合物FANS，故不是COX-抑制劑；鎮(zhèn)痛藥對(duì)乙酰氨基酚、醋氨沙洛、氨基氯西諾嗪、乙酰水楊酸2-氨基-4-吡啶甲酸、乙酰水楊酰水楊酸、阿尼利定、苯噁洛芬芐基嗎啡、5-溴水楊酸乙酸酯、布西丁、丁丙諾啡、布托啡諾、辣椒堿、辛可芬、西拉馬朵、氯美辛、氯尼辛、可待因、地索嗎啡、地佐辛、雙氫可待因、雙氫嗎啡、地美庚醇、地匹乙酯、依他佐辛、依托沙秦、乙基嗎啡、丁香酚、夫洛非寧、磷柳酸、格拉非寧、氫可酮、氫嗎啡酮、羥哌替啶、異丁芬酸、p-lactophenetide、左啡諾、美普他酚、美他佐辛、美托酮、嗎啡、納布啡、尼可嗎啡、去甲左啡諾、去甲嗎啡、羥考酮、羥嗎啡酮、噴他佐辛、非那佐辛、phenocoll、苯哌利定、保泰松、水楊酸苯酯、非尼拉朵、水楊苷、水楊酰胺、醋托啡烷、曲馬朵、雙醋瑞因、阿克他利；對(duì)乙酰氨基酚不是COX-抑制劑；對(duì)于呼吸器官和泌尿生殖器官的藥物(支氣管擴(kuò)張藥和激活膽堿能系統(tǒng)的藥物、祛痰藥/粘液溶解藥、鎮(zhèn)喘藥/抗過(guò)敏抗組胺藥)，可以提及以下藥物支氣管擴(kuò)張藥和激活膽堿能系統(tǒng)的藥物醋茶堿(acefylline)、沙丁胺醇、班布特羅、巴米茶堿、甲硫貝弗寧、比托特羅、卡布特羅、克侖特羅、氯喘通、二羥西君、白屈菜堿、麻黃堿、腎上腺素、依普羅醇、乙非君(etafredine)、乙基去甲腎上腺素、乙羥茶堿、非諾特羅、氟托溴銨(flutoprium bromide)、海索那林、異丙托溴銨、異他林(isoetharine)、異丙腎上腺素、馬布特羅、奧西那林、奧昔布寧、氧托溴銨、吡布特羅、丙卡特羅、普羅托醇、丙羥茶堿、瑞普特羅、利米特羅、沙美特羅、索特瑞醇、特布他林、1-teobromineacetic acid、噻托溴銨、曲托喹酚、妥洛特羅、扎普司特、環(huán)戊君、NS-21、2-羥基-2，2-二苯基-N-(1，2，3，6-四氫吡啶-4-基甲基)乙酰胺；祛痰藥/粘液溶解藥乙酰半胱氨酸(acetil cysteine)、氨溴索、溴己新、羧甲司坦(carbocysteine)、多米奧醇、厄多司坦、阿魏酸、愈創(chuàng)木酚、愈創(chuàng)甘油醚、碘化甘油、來(lái)托司坦、美司坦鹽酸鹽、美司鈉、索布瑞醇、司替羅寧、萜品醇、硫普羅寧；鎮(zhèn)喘藥/抗過(guò)敏抗組胺藥阿伐斯汀、阿洛拉胺、氨來(lái)咕諾、西替利嗪、氯苯西泮、chromoglycate、chromolyn、依匹斯汀、fexofenadine、福莫特羅、組胺、羥嗪、左卡巴斯汀、洛度沙胺、馬布特羅、異丙辛胺、montelukast、奈多羅米、瑞吡司特、塞曲司特、甲磺司特、特非那定、噻拉米特、漆酚、溴己新；對(duì)于心血管藥物(ACE抑制劑、β-受體阻滯劑、抗血栓形成劑和血管舒張藥、抗糖尿病藥和降血糖藥)可以提及以下藥物ACE抑制劑阿拉普利、貝那普利、卡托普利、西羅普利、西拉普利、地拉普利、依那普利、依那普利拉、福辛普利、咪達(dá)普利、賴(lài)諾普利、氯沙坦、莫維普利、naphthopidil、培哚普利、喹那普利、雷米普利、螺普利、替莫普利、群多普利、烏拉地爾；β-受體阻滯劑醋丁洛爾、阿普洛爾、氨磺洛爾、阿羅洛爾、阿替洛爾、倍他洛爾、貝凡洛爾、布庫(kù)洛爾、布非洛爾、丁呋洛爾、布尼洛爾、布拉洛爾、丁非洛爾、卡拉洛爾、卡替洛爾、卡維地洛、塞利洛爾、塞他洛爾、地來(lái)洛爾、依泮洛爾、艾司洛爾、茚諾洛爾、拉貝洛爾、甲吲洛爾、美替洛爾、美托洛爾、莫普洛爾、納多洛爾、萘肟洛爾、奈必洛爾、硝苯洛爾、尼普地洛(nipridalol)、氧烯洛爾、噴布洛爾、吲哚洛爾、普拉洛爾、丙萘洛爾、普萘洛爾、索他洛爾、硫氧洛爾、他林洛爾、特他洛爾、替利洛爾、噻嗎洛爾、托利洛爾、希苯洛爾；抗血栓形成藥和作用于血管藥物醋托啡烷、阿司匹林、阿加曲班、巴美生、琥珀苯呋地爾、苯碘達(dá)隆、倍他司汀、溴長(zhǎng)春胺、丁苯碘胺、胞磷膽堿、氯苯呋醇、氯吡格雷、環(huán)扁桃酯、達(dá)肝素、雙嘧達(dá)莫、氫普拉明、依諾肝素、芬地林、艾芬地爾、依洛前列素、吲哚布芬、伊波格雷、異克舒令、肝素、lamifiban、米多君(midrodine)、那屈肝素、煙醇、布酚寧、奧扎格雷、哌克昔林、苯丙醇胺、普尼拉明、paraveroline、瑞肝素鹽、利多格雷、舒洛地爾、替諾非君、亭扎肝素、三氟柳(trifusal)、煙酸占噻噸酯；抗糖尿病藥阿卡波糖、氨磺丁脲、格列波脲、格列噻唑、米格列醇、瑞格列奈、曲格列酮、間氨磺丁脲、托瑞司他、煙酰胺；對(duì)于抗腫瘤的藥物，涉及到以下藥物安西他濱、安曲霉素、阿扎胞苷、偶氮絲氨酸、6-氮雜尿苷、比爾魯胺、卡柔比星、嗜癌霉素、苯丁酸氮芥、氯脲菌素、阿糖胞苷、柔紅霉素、地磷酰胺、秋水仙胺、二甲葉酸、6-二偶氮-5-氧代-L-正亮氨酸、docetaxel、去氧氟尿苷、多柔比星、屈洛昔芬、依達(dá)曲沙、依氟鳥(niǎo)氨酸、依諾他濱、表柔比星、環(huán)硫雄醇、依他硝唑、依托泊苷、芬維A胺、氟達(dá)拉濱、氟尿嘧啶、吉西他濱、己烷雌酚、伊達(dá)比星、氯尼達(dá)明、甘露莫司汀、美法侖、美諾立爾、6-巰基嘌呤、甲氨蝶呤、二溴甘露醇、二溴衛(wèi)矛醇、絲裂霉素、米托蒽醌、莫哌達(dá)醇、麥考酚酸、9-甲葉酸、諾拉霉素、紫杉醇、噴司他丁、吡柔比星、吡曲克辛、普卡霉素、鬼臼酸、卟吩姆鈉、泊非霉素、丙帕鍺、嘌羅霉素、雷莫司汀、維生素A酸、羅喹美克、鏈黑霉素、鏈佐星、替尼泊苷、細(xì)格孢氮雜酸、硫咪嘌呤、硫鳥(niǎo)嘌呤、tomudex、托泊替堪、三甲曲沙、殺結(jié)核菌素、烏苯美司、長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春地辛、長(zhǎng)春瑞賓、佐柔比星；對(duì)于抗?jié)兯?，可以提及以下藥?-乙酰氨基己酸、阿巴前列素、西曲酸酯、西咪替丁、依卡倍特、恩前列素、艾沙拉唑、伊索拉定、米索前列醇、奧美拉唑、奧諾前列素、泮托拉唑、普勞諾托、利奧前列素、羅沙前列醇、羅曲酸、索法酮、曲莫前列素；在抗高血脂的藥物中，可以提及以下藥物(他丁類(lèi))atorvastatin、西司他丁、制皮菌素、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、制霉菌素、噴司他丁、胃酶抑素、普伐他汀鈉鹽(privastatin sodium)、辛伐他?。辉诳股?抗病毒的藥物中，可以提及到以下藥物抗生素美西林、阿莫西林、氨芐西林、阿帕西林、阿哌環(huán)素、阿撲西林、疊氮氯霉酸、阿度西林、阿洛西林、氨曲南、苯沙酸、芐基青霉烷酸、比阿培南、二環(huán)霉素、卷曲霉素、羧芐西林、卡茚西林、卡蘆莫南、頭孢克洛、頭孢羥氨芐、頭孢孟多、頭孢曲秦、頭孢西酮、頭孢唑林、頭孢拉宗、頭孢克定、頭孢地尼、頭孢托侖、頭孢吡肟、頭孢他美、頭孢克肟、頭孢甲肟、頭孢美唑、頭孢米諾、頭孢地秦、頭孢尼西、頭孢哌酮、頭孢雷特、頭孢噻肟、頭孢替坦、頭孢替安、頭孢西丁、頭孢唑蘭、頭孢咪唑、頭孢匹胺、頭孢匹羅、頭孢丙烯、頭孢沙定、頭孢磺啶、頭孢他啶、頭孢特侖、頭孢替唑、頭孢布烯、頭孢噻呋、頭孢唑肟、頭孢曲松、頭孢呋辛、頭孢唑南、頭孢乙氰鈉、頭孢氨芐、頭孢來(lái)星、頭孢噻啶、頭孢菌素C、頭孢噻吩、頭孢匹林鈉、頭孢拉定、氯霉素、金霉素、西諾沙星、克拉維酸、氯甲西林、氯唑西林、環(huán)青霉素、環(huán)絲氨酸、地美環(huán)素、雙氯西林、依匹西林、芬貝西林(fenbecillin)、氟氧頭孢、氟氯西林、海他西林、亞胺培南、侖氨西林、氯碳頭孢、賴(lài)甲環(huán)素、磺胺米隆、甲氯環(huán)素、美羅培南、美坦西林、美他環(huán)素、甲氧西林鈉、美洛西林、米諾環(huán)素、拉氧頭孢、莫匹羅星、堆囊粘菌素、負(fù)霉素、新生霉素、苯唑西林、帕尼培南、青霉素G鉀鹽、阿地西林、阿美西林、青霉素V、非奈西林鉀鹽、匹哌環(huán)素、哌拉西林、吡利霉素、泊非霉素、丙匹西林、喹那西林、利替培南、羅利環(huán)素、山環(huán)素、西地霉素、大觀(guān)霉素、舒巴坦、磺芐西林、替莫西林、四環(huán)素、替卡西林、替吉莫南、殺結(jié)核菌素、阿奇霉素、克拉霉素、地紅霉素、恩維霉素、紅霉素、交沙霉素、麥迪霉素、麥白霉素、竹桃霉素、利福布汀、利福米特、利福霉素、利福昔明、羅他霉素、螺旋霉素、醋竹桃霉素、紫霉素、維吉霉素；阿米卡星、安普霉素、阿貝卡星、地貝卡星、雙氫鏈霉素、阿司米星、慶大霉素、小諾米星、新霉素、奈替米星、巴龍霉素、核糖霉素、西索米星、大觀(guān)霉素、鏈霉素、妥布霉素、丙大觀(guān)霉素；巴氨西林、頭孢卡品、頭孢特侖新戊酯、頭孢泊肟、proxetil、帕尼培南、匹氨丁林、匹夫頭孢氨芐、舒他西林、酞氨西林；卡波霉素、克林霉素、林可霉素、米卡霉素、羅沙米星、環(huán)丙沙星、克林沙星、二氟沙星、依諾沙星、恩氟沙星、氟羅沙星、氟甲喹、格帕沙星、洛美沙星、那氟沙星、萘啶酸、諾氟沙星、氧氟沙星、pazufloxacin、培氟沙星、吡哌酸、吡咯米酸、蘆氟沙星、司氟沙星、托氟沙星、trovafloxacin、氯莫環(huán)素、胍甲環(huán)素、土霉素、硝呋吡醇、硝呋拉嗪、對(duì)氨基水楊酸、對(duì)氨基水楊酸酰肼、氯法齊明、脫氧雙氫鏈霉素、乙胺丁醇、葡煙腙、異煙肼、奧匹煙肼、氨基水楊酸苯酯、利福平、利福噴汀、水楊煙肼、4，4′-sulfynyldianiline、醋地砜、氨苯砜、琥珀氨苯砜、對(duì)磺胺酰基芐胺、噻唑砜、醋磺胺林、磺胺米隆、4′-(甲基氨磺?；?磺胺酰苯胺、柳氮磺嘧啶、磺胺苯酰、磺胺醋酰、磺胺氯達(dá)嗪、磺胺柯定、磺胺西汀、磺胺嘧啶、磺胺戊烯、磺胺地索辛、磺胺多辛、磺胺乙二唑、磺胺脒、磺胺胍諾、磺胺林、磺胺甲嘧啶、磺胺對(duì)甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲二唑、磺胺甲氧甲嘧啶(sulfamethomidine)、磺胺甲噁唑、磺胺甲氧嗪、磺胺甲噻唑、磺胺美曲、磺胺米柯定、磺胺噁唑、磺胺、2-對(duì)-磺胺?；桨坊掖?、N4-磺胺?；前?、磺胺?；?、N-磺胺?；?3，4-二甲苯胺、磺胺培林、磺胺苯吡唑、磺胺普羅林、磺胺吡嗪、磺胺吡啶、磺胺異噻唑、磺胺均三嗪、磺胺噻唑、磺胺硫脲、磺胺索嘧啶、磺胺異噁唑、4-磺胺基水楊酸；負(fù)霉素、卡蘆莫南、氯羥喹、硝羥喹啉、精氨酸、甲硝唑；抗病毒的藥物阿昔洛韋、金剛烷胺、cidofovir、阿糖胞苷、去羥肌苷、雙去氧腺苷、依度尿苷、泛昔洛韋、氟尿苷、更昔洛韋、碘苷、indanavir、乙氧丁酮醛、拉米夫定、MADU、噴昔洛韋、鬼臼毒素、利巴韋林、金剛乙烷、沙奎那韋、索立夫定、stavudine、曲氟尿苷、伐昔洛韋、阿糖腺苷、珍那佐酸、扎西他賓、齊多夫定；在骨吸收抑制劑(二膦酸鹽)中，可以提及以下藥物阿侖膦酸、布替膦酸、依替膦酸、奧昔膦酸、帕米膦酸、利塞膦酸；在抗癡呆的藥物中，可以提及以下藥物amiridine、拉扎貝胺、莫非吉蘭、salbeluzol、奧拉西坦、ipidacrine、奈拉西坦、他克林、維吖啶；優(yōu)選的物質(zhì)如下在抗炎藥中阿司匹林、5-氨基乙酰水楊酸、卡洛芬、雙氯芬酸鈉、二氟尼柳、依托度酸、氟芬那酸、氟尼辛、氟比洛芬、布洛芬、吲哚美辛、吲哚布洛芬、酮洛芬、酮咯酸、氯諾昔康、洛索洛芬、甲氯芬那酸、甲芬那酸、美洛昔康、氨水楊酸、萘普生、尼氟酸、奧沙拉秦、吡羅昔康、雙水楊酯、舒林酸、舒洛芬、替諾昔康、噻洛芬酸、托芬那酸、托美丁、佐美酸、托莫普羅；在止痛藥中對(duì)乙酰氨基酚、乙酰水楊酰水楊酸、苯噁洛芬、丁丙諾啡、布托啡諾、辣椒堿、雙醋瑞因、雙氫可待因、乙基嗎啡、丁香酚、保泰松、美普他酚、嗎啡、納布非、噴他佐辛、thiorphan、曲馬朵、阿克他寧；在呼吸器官和泌尿生殖器官藥物(支氣管擴(kuò)張藥和激活膽堿能系統(tǒng)的藥物、祛痰藥/粘液溶解藥、鎮(zhèn)喘藥/抗過(guò)敏抗組胺藥)中支氣管擴(kuò)張藥和激活膽堿能系統(tǒng)的藥物沙丁胺醇、卡布特羅、克侖特羅、白屈菜堿、羥乙茶堿、非諾特羅、異丙托溴銨、奧西那林、奧昔布寧、吡布特羅、沙美特羅、特布他林、噻托溴銨、扎普司特、環(huán)戊君、NS-21、2-羥基-2，2-二苯基-N-(1，2，3，6-四氫吡啶-4-基甲基)乙酰胺；祛痰藥/粘液溶解藥乙?；腚装彼?、氨溴索、溴己新、羧甲司坦、愈創(chuàng)木酚、阿魏酸、美司坦鹽酸鹽、索布瑞醇；鎮(zhèn)喘藥/抗過(guò)敏抗組胺藥西替利嗪、chromoglycate、組胺、左卡巴斯汀、洛度沙胺、montelukast、特非那定、溴己新；在心血管藥物中ACE抑制劑卡托普利、依那普利、賴(lài)諾普利、氯沙坦、雷米普利；β-受體阻滯劑阿普洛爾、阿替洛爾、布拉洛爾、拉貝洛爾、美替洛爾、美托洛爾、吲哚洛爾、普萘洛爾、噻嗎洛爾；抗血栓形成藥和作用于血管藥物阿司匹林、醋托啡烷、阿加曲班、氯吡格雷、達(dá)肝素、雙嘧達(dá)莫、依諾肝素、肝素、依洛前列素、米多君、奧扎格雷、苯丙醇胺、三氟柳；抗糖尿病藥托瑞司他、煙酰胺；抗腫瘤藥安曲霉素、柔紅霉素、多柔比星、表柔比星、氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、長(zhǎng)春堿；抗?jié)兊乃幬鬟涮娑?、奧美拉唑、泮托拉唑；抗高血脂藥洛伐他汀、普伐他汀鈉鹽、辛伐他汀；抗生素/抗病毒的藥物抗生素阿莫西林、氨芐西林、氨曲南、比阿培南、羧芐西林、頭孢克洛、頭孢羥氨芐、頭孢孟多、頭孢曲秦、頭孢西丁、克拉維酸、雙氯西林、亞胺培南、甲氯環(huán)素、美他環(huán)素、拉氧頭孢、帕尼培南、舒巴坦、阿奇霉素、紅霉素、交沙霉素、麥白霉素、利福布丁、利福米特、利福霉素、慶大霉素、巴龍霉素、西索米星、巴氨西林、卡波霉素、克林霉素、環(huán)丙沙星、克林沙星、二氟沙星、恩氟沙星、洛美沙星、那氟沙星、諾氟沙星、氧氟沙星、吡哌酸，阿哌環(huán)素、氯莫環(huán)素、土霉素、硝呋吡醇、硝呋拉嗪、異煙肼、利福平、利福噴汀、氨苯砜、噻唑砜、磺胺甲噁唑、磺胺噁唑、甲硝唑、精氨酸；抗病毒的藥物阿昔洛韋、泛昔洛韋、更昔洛韋、噴昔洛韋、利巴韋林、阿糖腺苷、齊多夫定；在骨吸收抑制劑中阿侖膦酸、依替膦酸、帕米膦酸。
在抗癡呆的藥物中奧拉西坦、他克林、維吖啶。
按照先有技術(shù)熟知的方法制備上述物質(zhì)，R前體。例如，見(jiàn)通過(guò)引用結(jié)合到本文中的“The Merck Index，12a Ed.(1996)”。當(dāng)可獲得時(shí)，可以使用相應(yīng)的異構(gòu)物，包括光學(xué)異構(gòu)物。
按照描述于EP 12，866中的方法獲得托莫普羅。
當(dāng)在式(I)化合物中藥物前體為甾族化合物時(shí)，A＝R-具有下面的結(jié)構(gòu) 其中在通式中提及的CH基團(tuán)的氫的取代或CH2基團(tuán)的兩個(gè)氫的取代中，可以存在以下的取代基在1-2位可以有雙鍵；在2-3位可以是下面的取代基； (S-II)在2位可以是Cl、Br；在3位可以是CO、-O-CH2-CH2-Cl、OH；在3-4位可以有雙鍵；在4-5位可以有雙鍵；在5-6位可以有雙鍵；在5-10位可以有雙鍵；在6位可以是Cl、F、CH3、-CHO；在7位可以是Cl、OH；在9位可以是Cl、F；在11位可以是OH、CO、Cl、CH3；在16位可以是CH3、HO、＝CH2；在17位可以是OH、CH3、OCO(O)ua(CH2)vaCH3、C≡CH或 (S-III)其中ua是等于0或1的整數(shù)，va是0-4的整數(shù)；在16-17位可以有以下基團(tuán) (S-IVa) (S-IVb)(S-IVc)R和R’，彼此相同或不同，可以為氫或1-4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，優(yōu)選R＝R’＝CH3；R”為-(CO-L)t-(L)t2-(XOI)t1-其中t、t1和t2為彼此相同或不同的整數(shù)，等于0或1，前提是當(dāng)t＝0時(shí)t2＝1和當(dāng)t＝1時(shí)t2＝0，并且當(dāng)A不含-OH基團(tuán)時(shí)，t和t1，或t2和t1不能同時(shí)等于0；二價(jià)橋連基L選自
(CR4R5)na(O)nb(CR4R5)n’a(CO)n’b(O)n”b(CO)n”’b(CR4R5)n”a其中na、n’a和n”a，彼此相同或不同，為0-6的整數(shù)，優(yōu)選為1-3；nb、n’b、n”b和n”’b，彼此相同或不同，為等于0或1的整數(shù)；R4、R5，彼此相同或不同，選自H、1-5個(gè)碳原子，優(yōu)選1-3個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基；XOI為如上定義的X，或等于X2I，其中X2I等于OH、CH3、Cl、N(-CH2-CH3)2、SCH2F、SH，或 (s-v)優(yōu)選式(S-I)中的R”為-CO-CH2OH或-CH(CH3)-CH2-CH2-COOH。
在前體甾族化合物中，優(yōu)選在3位和/或11位具有羥基官能團(tuán)，和/或在R”的末端位具有羥基或羧基官能團(tuán)的那些甾族化合物。
可以提及的并且優(yōu)選的A的前體甾族化合物為下面所列的、可根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)已知的方法可獲得的那些甾族化合物。
作為前體及各自的制備方法，可以提及如在Merck Index，1996第12版(通過(guò)引用結(jié)合到本文中)中所述的那些前體和制備方法。下面列出這些前體(根據(jù)Merck命名法)，其中H2、H、R、R’、R”具有在此所列化合物中提及的意義布地奈德、氫化可的松、阿氯米松、阿爾孕酮、倍氯米松、倍他米松、氯潑尼松、氯倍他索、氯倍他松、氯可托龍、氯潑尼醇、可的松、皮質(zhì)酮、地夫可特、地奈德、去羥米松、地塞米松、二氟拉松、二氟可龍、二氟潑尼酯、氟扎可特、氟氯奈德、二氟美松、氟尼縮松、氟輕松、醋酸氟輕松、丁基氟可丁、氟可龍、氟米龍、醋酸氟培龍、醋酸氟潑尼定、氟潑尼龍、氟氫縮松、氟莫可他、哈西奈德、丙酸鹵倍他索、鹵米松、醋酸鹵潑尼松、氫可他酯、氯替潑諾Etabonate、甲羥松、甲潑尼松、甲潑尼龍、糠酸莫米松、帕拉米松、潑尼卡酯、潑尼松龍、潑尼松龍25-二乙基氨基醋酸酯、潑尼松龍磷酸鈉、潑尼松、強(qiáng)的松龍戊酸酯、潑尼立定、利美索龍、曲安西龍、曲安奈德、21-乙酰氧基孕烯醇酮、可的伐唑、安西奈德、丙酸氟替卡松、馬潑尼酮、替可的松、己曲安奈德、熊去氧膽酸、鵝去氧膽酸、Mitatrienediol、莫克雌醇、乙炔基雌二醇、雌二醇、美雌醇。
根據(jù)本發(fā)明的化合物，作為用于中等強(qiáng)度的氧化應(yīng)激反應(yīng)的疾病的藥物的效果還在藥理學(xué)試驗(yàn)中得到證明，其中所述化合物能夠抑制過(guò)氧化氫對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞誘導(dǎo)的cytolesive作用。內(nèi)皮細(xì)胞為在病理過(guò)程首先被擊中的細(xì)胞中的一種(McCance & Huether，病理生理學(xué)成人和兒童疾病的生物學(xué)基礎(chǔ)，1998，1025頁(yè))，而過(guò)氧化氫是溫和的氧化劑并被認(rèn)為是與氧化應(yīng)激反應(yīng)有關(guān)的病理學(xué)的主要介導(dǎo)物質(zhì)(B.Halliwell，J.Gutteridge“生物學(xué)和醫(yī)學(xué)中的自由基”，第416頁(yè)，1993)。對(duì)將用于處于氧化應(yīng)激反應(yīng)狀態(tài)下的化合物的藥理活性來(lái)說(shuō)，中和它們的cytolesive作用的有效性被認(rèn)為是重要的(B.Halliwell，J.Gutteridge“生物學(xué)和醫(yī)學(xué)中的自由基”，第416頁(yè)，1993)。
通過(guò)下述反應(yīng)制備式(I)化合物。
如果所述藥物的反應(yīng)官能團(tuán)(如-COOH，-OH)參與共價(jià)鍵(如酯、酰胺、醚型)時(shí)，所述官能團(tuán)可以在制備所述化合物之前，用先有技術(shù)所熟知的方法恢復(fù)。
用于獲得式(I)化合物的反應(yīng)為導(dǎo)致形成本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的如酯、酰胺、硫酯型的鍵的反應(yīng)。
當(dāng)在兩個(gè)反應(yīng)化合物中存在其他的官能基團(tuán)COOH和/或HX時(shí)，其中X如上定義，它們必須在反應(yīng)前根據(jù)先有技術(shù)已知的方法加以保護(hù)；例如，如Th.W.Greene的出版物“有機(jī)合成中的保護(hù)基團(tuán)”，Harward University Press，1980中所述。
如下所述制備其中s＝2的式I化合物。IA)-所述藥物具有通式R-COOH并且B的前體化合物的官能團(tuán)(其自身連接到該藥物羧基官能團(tuán)上)具有式XZ，X如前定義和Z＝H，OH官能團(tuán)或鹵原子也同時(shí)存在于B的前體化合物中作為硝化反應(yīng)的反應(yīng)性基團(tuán)。
如果在B的前體化合物中還存在OH官能團(tuán)時(shí)，通用合成方案顯示首先形成R-COHal酰鹵(Hal＝Cl，Br)，接著與B的前體化合物的HX基團(tuán)反應(yīng)
(IA.1)其中X2、T1、TB如上定義。
按照先有技術(shù)已知的方法制備RCOHal酰鹵，例如在所述反應(yīng)條件下，由亞硫酰氯或草酰氯，或由PIII或PV的鹵化物在惰性溶劑如甲苯、氯仿、DMF等中制備。然后通過(guò)在所述反應(yīng)條件下，使用惰性溶劑如甲苯、四氫呋喃、氯仿等，在0-25℃的溫度范圍內(nèi)，使酰鹵與B的前體的HX基團(tuán)反應(yīng)。
作為前述合成的一種選擇，在所述反應(yīng)條件下，在諸如甲苯、四氫呋喃、氯仿等的惰性溶劑中、在-5℃至+50℃的溫度范圍內(nèi)，可以用一種激活羧基基團(tuán)的試劑處理式R-COOH的前體藥物，所述試劑選自N，N′-羰基二咪唑(CDI)、N，N’-二環(huán)己基碳化二亞胺。在存在于B的前體中的OH官能團(tuán)被保護(hù)后，例如通過(guò)形成乙?；鶃?lái)保護(hù)，使獲得的化合物與B的前體就地反應(yīng)，再在合成結(jié)束時(shí)，通過(guò)先有技術(shù)熟知的方法恢復(fù)最初的官能團(tuán)。該反應(yīng)方案如下(IA.1)其中X2、T1、TB如前定義而G為OH官能團(tuán)的保護(hù)基團(tuán)。
然后，在所述反應(yīng)條件下，在-5℃至+50℃的溫度范圍內(nèi)，使式(IA.1)的化合物在諸如甲苯、四氫呋喃、氯仿等惰性溶劑中，經(jīng)歷如PBr3、PCl5、SOCl2、PPh3和I2的鹵化反應(yīng)。在25℃-80℃的溫度范圍內(nèi)，在諸如乙腈、四氫呋喃的有機(jī)溶劑中，所述鹵素衍生物與AgNO3反應(yīng)。該反應(yīng)方案如下或者，當(dāng)X2為線(xiàn)性C4烷基時(shí)，使R-COOH酸在鹵化試劑如CBr4或N-溴代琥珀酰亞胺的存在下、在四氫呋喃中與三苯基膦反應(yīng)，使生成的其中X2為亞丁基的化合物(IA.2)如上所述硝化。
或者，有可能通過(guò)先有技術(shù)已知的方法，將R-COOH酸轉(zhuǎn)化為其鈉鹽，并在所述反應(yīng)條件下，在-5℃至+25℃的溫度范圍內(nèi)，在諸如四氫呋喃、氯仿等惰性溶劑中，使其與式Hal-X2-R3的鹵素衍生物反應(yīng)，其中R3為OH、Hal。如果R3＝Hal，則使獲得的衍生物如上所述被硝化。該反應(yīng)方案如下IIA)-所述藥物具有通式R-XH并且B的前體化合物的官能團(tuán)(其自身連接到該藥物的官能團(tuán)HX上)為羧基，X如前定義，OH官能團(tuán)或鹵原子也同時(shí)存在于B的前體化合物中作為硝化反應(yīng)的反應(yīng)性基團(tuán)。
通用合成方案顯示所述酸HOOC-X2-R4(其中R4為Hal、OG，其中G為合適的保護(hù)基團(tuán))與如在IA)中所述的活化劑反應(yīng)，隨后與所述藥物的HX基團(tuán)反應(yīng)。
(IIA.1)其中X2、T1、TB、R4如上定義。
將獲得的化合物(IIA.1)轉(zhuǎn)化為如在IA)中所述的相應(yīng)的硝基衍生物。如果存在取代基OG，則通過(guò)已知的方法首先除去保護(hù)基團(tuán)。
作為上述合成的一種替代方法，根據(jù)在IA)中提及的條件，使藥物R-OH與式Hal-X2-COHal的酰鹵反應(yīng)，然后如上所述使得到的鹵素衍生物硝化其中X2、T1、TB如上定義。
如下所述制備其中s＝1的式(I)化合物。IB)-所述藥物具有通式R-COOH并且B的前體化合物的官能團(tuán)(其自身連接到該藥物羧基官能團(tuán)上)具有式XZ，X如前定義和Z＝H，B的前體化合物還含有羥基官能團(tuán)或鹵原子作為硝化反應(yīng)的反應(yīng)性基團(tuán)。
根據(jù)先有技術(shù)已知的方法，在鹽酸的存在下，通過(guò)與亞硝酸鈉在水中反應(yīng)，將如在IA)中所述獲得的式R-T1-TB-X2-OH化合物(IA.1)轉(zhuǎn)化為亞硝基衍生物。
所述藥物具有通式R-XH并且B的前體化合物的官能團(tuán)(其自身連接到該藥物的官能團(tuán)HX上)為羧基，X如上定義。合成方案與在IIA)中所述的方案類(lèi)似。
將如在IIA)中所述獲得的式R-T1-TB-X2-R4化合物(IIA.1)轉(zhuǎn)化為如在IB)中所述的亞硝基衍生物。
按照先有技術(shù)熟知的方法，將本發(fā)明的化合物與常規(guī)的賦形劑一起配制成用于胃腸外、口服和局部使用的相應(yīng)的藥用組合物；例如見(jiàn)出版物“Remington’s Pharmaceutical Sciences 15a Ed”。
在這些制劑中，與使用的相應(yīng)的前體藥物相比，以摩爾計(jì)的所述活性成分的量是相同的，或更低。
每日給予的劑量為所述前體藥物的劑量，或在較低的劑量下?？梢栽诒绢I(lǐng)域的出版物中發(fā)現(xiàn)所述日劑量，例如在“Physician’s Deskreference”中。
下列實(shí)施例的目的是闡述本發(fā)明，而不應(yīng)認(rèn)為是限制本發(fā)明。實(shí)施例14-硝酰氧基(nitroxy)丁酸4’-乙酰基氨基苯酯的制備 (E-1)該藥物為下式的對(duì)乙?；被?(E-1a)B的前體化合物為4-羥基丁酸。a)4-溴代丁酸4’-乙?；被锦サ闹苽湎?-溴代丁酸(4.6g，27.6mmol)的氯仿(45ml)和N，N-二甲基甲酰胺(20ml)的溶液中加入對(duì)乙酰基氨基酚(4.17g，27.6mmol)、N，N’-二環(huán)己基碳化二亞胺(8.42g，40.8mmol)和4-二甲基氨基吡啶(0.15g，1.25mmol)。于室溫、攪拌下，將該反應(yīng)混合物維持72小時(shí)，過(guò)濾并在真空下蒸發(fā)。用乙酸乙酯處理粗品反應(yīng)物，用鹽水和水先后洗滌。用硫酸鈉使有機(jī)相脫水，然后在真空下蒸發(fā)。殘留物經(jīng)硅膠層析純化，用正己烷/乙酸乙酯4/6(v/v比)洗脫。獲得5.33g為白色固體的產(chǎn)物。M.p.＝108℃-110℃。b)4-硝酰氧基丁酸4’-乙?；被锦サ闹苽湎?-溴代丁酸4’-乙?；被锦?5.33g，17.8mmol)的乙腈(80ml)溶液中加入硝酸銀(4.56g，26.9mmol)。在避光的情況下，將該反應(yīng)混合物于80℃加熱16小時(shí)，然后冷卻至室溫，過(guò)濾除去銀鹽，減壓蒸發(fā)。殘留物經(jīng)硅膠層析純化，用正己烷/乙酸乙酯4/6洗脫。獲得4.1g為白色固體的產(chǎn)物。M.P.＝80-83℃。元素分析 C H N計(jì)算值51.07％4.99％9.92％實(shí)測(cè)值51.06％5.00％9.90％
根據(jù)實(shí)施例1描述的方法，合成化合物(E-2)。收率21％。元素分析 C H N計(jì)算值55.13％7.07％7.56％實(shí)測(cè)值55.10％7.09％7.57％實(shí)施例34-(硝酰氧基)丁酸4-[(2-氨基-3，5-二溴苯基)甲基氨基]反式環(huán)己基酯的制備 (E-3)前體藥物為氨溴索 (E-3a)A的前體化合物為4-羥基丁酸。a)4-[(2-叔丁氧基羰基氨基-3，5-二溴苯基)甲基氨基]反式環(huán)己醇的制備向氨溴索(5g，13.22mmol)的二氧六環(huán)(35ml)和水(50ml)溶液中加入三乙胺(3.31ml，23.7mmol)和二碳酸二叔丁酯(3.46g，15.86mmol)。于室溫、攪拌下，將該反應(yīng)混合物放置24小時(shí)，然后減壓濃縮。通過(guò)分次加入1％HCl溶液處理殘留物，直至pH 7，然后用乙酸乙酯提取該溶液。在真空下蒸發(fā)用硫酸鈉脫水的有機(jī)相。得到4-[(2-叔丁氧基羰基氨基-3，5-二溴苯基)甲基氨基]反式環(huán)己醇，其可無(wú)需進(jìn)一步純化而用于隨后的步驟。b)4-(硝酰氧基)丁酸4-[(2-叔丁氧基羰基氨基-3，5-二溴苯基)甲基氨基]反式環(huán)己基酯的制備根據(jù)實(shí)施例1描述的方法，合成化合物。收率57％。c)4-(硝酰氧基)丁酸4-[(2-氨基-3，5-二溴苯基)甲基氨基]反式環(huán)己基酯的制備向冷卻至0℃的4-(硝酰氧基)丁酸4-[(2-叔丁氧基羰基氨基-3，5-二溴苯基)甲基氨基]反式環(huán)己基酯(3.5g，5.74mmol)的乙酸乙酯(100ml)溶液中加入5N HCl的乙酸乙酯(5.95ml)溶液。于0℃、攪拌下，將該溶液維持5小時(shí)，然后過(guò)濾。使獲得的固體懸浮于乙酸乙酯中，用5％的碳酸鈉溶液洗滌有機(jī)層。用水洗滌有機(jī)相，用硫酸鈉脫水并減壓蒸發(fā)。殘留物經(jīng)硅膠層析純化，用正己烷/乙酸乙酯1/1(體積比)洗脫。獲得4-(硝酰氧基)丁酸4-[(2-氨基-3，5-二溴苯基)甲基氨基]反式環(huán)己基酯，收率31％。元素分析C H N Br計(jì)算值 40.10％ 4.55％ 8.25％ 31.38％實(shí)測(cè)值 40.07％ 4.54％ 8.26％ 31.39％
根據(jù)實(shí)施例1描述的方法，合成化合物。收率11％。元素分析 C H N計(jì)算值25.27％4.77％7.37％實(shí)測(cè)值25.26％4.79％7.37％
根據(jù)實(shí)施例3描述的方法，合成化合物(E-6)。收率14％。元素分析 C H N計(jì)算值42.36％4.74％24.70％實(shí)測(cè)值42.38％4.77％24.68％實(shí)施例8(8S-順式)-10-[(3-氨基-2，3，6-三脫氧-α-L-來(lái)蘇-吡喃己糖基)氧基]-7，8，9，10-四氫-6，8，11-三羥基-8-[(4-硝酰氧基丁?；趸?乙?；鵠-1-甲氧基-5，12-并四苯二酮的制備 (E-8)前體藥物為下式(E-8a)的多柔比星 B的前體化合物為4-羥基丁酸。
根據(jù)實(shí)施例1描述的方法，合成化合物。收率7％。元素分析 C HN計(jì)算值56.53％5.20％4.25％實(shí)測(cè)值56.55％5.22％4.23％實(shí)施例9二[1S-[1α，3α，7β，8β(2S*，4S*)，8αβ]]2-2-二甲基丁酸1，2，3，7，8，8α-六氫-3，7-二甲基-8-[2-[四氫-4-(6-硝酰氧基己酰氧基)-6-氧代-2H-吡喃-2-基]乙基]-1-萘酯的制備 (E-9)該前體藥物為具有下式的辛伐他汀 (E-9a)橋聯(lián)鍵B的前體為6-羥基己酸。a) [1S-[1α，3α，7β，8β(2S*，4S*)，8αβ]]2-2-二甲基丁酸1，2，3，7，8，8α-六氫-3，7-二甲基-8-[2-[四氫-4-(6-溴代己酰氧基)-6-氧代-2H-吡喃-2-基]乙基]-1-萘酯的制備向辛伐他汀(4g，9.56mmol)的氯仿(50ml)和N，N-二甲基甲酰胺(20ml)溶液中加入6-溴代己酸(1.86g，9.56mmol)、N，N’二環(huán)己基碳二亞胺(1.97g，9.56mmol)和4-二甲基氨基吡啶(52mg，0.43mmol)。于室溫、攪拌下，將該反應(yīng)混合物維持24小時(shí)，然后用氯仿稀釋?zhuān)盟礈?。減壓蒸發(fā)經(jīng)硫酸鈉脫水的有機(jī)相。粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠層析純化，用正己烷/乙酸乙酯1/1(體積比)洗脫。得到[1S-[1α，3α，7β，8β(2S*，4S*)，8αβ]]2-2-二甲基丁酸1，2，3，7，8，8α-六氫-3，7-二甲基-8-[2-[四氫-4-(6-溴代己酰氧基)-6-氧代-2H-吡喃-2-基]乙基]-1-萘酯。b) [1S-[1α，3α，7β，8β(2S*，4S*)，8αβ]]2-2-二甲基丁酸1，2，3，7，8，8α-六氫-3，7-二甲基-8-[2-[四氫-4-(6-硝酰氧基己酰氧基)-6-氧代-2H-吡喃-2-基]乙基]-1-萘酯的制備向[1S-[1α，3α，7β，8β(2S*，4S*)，8αβ]]2-2-二甲基丁酸1，2，3，7，8，8α-六氫-3，7-二甲基-8-[2-[四氫-4-(6-溴代己酰氧基)-6-氧代-2H-吡喃-2-基]乙基]-1-萘酯(1g，1.67mmol)的乙腈(60ml)溶液中加入硝酸銀(0.57g，3.35mmol)。在避光的情況下，將該反應(yīng)混合物于80℃加熱6小時(shí)，然后冷卻至室溫，過(guò)濾除去銀鹽，減壓蒸發(fā)有機(jī)相。殘留物經(jīng)硅膠層析純化，用正己烷/乙酸乙酯1/1(體積比)洗脫。獲得[1S-[1α，3α，7β，8β(2S*，4S*)，8αβ]]2-2-二甲基丁酸1，2，3，7，8，8α-六氫-3，7-二甲基-8-[2-[四氫-4-(6-硝酰氧基己酰氧基)-6-氧代-2H-吡喃-2-基]乙基]-1-萘酯。收率13％。元素分析 C H N計(jì)算值62.71％ 7.97％ 2.35％實(shí)測(cè)值62.74％ 7.99％ 2.33％實(shí)施例106-(硝酰氧基)-己酸茶堿酯的制備 (E-10)前體藥物為具有下式的白屈菜堿 (E-10a)B的前體化合物為6-羥基己酸。
根據(jù)實(shí)施例9描述的方法，合成式(E-10)的化合物。收率23％。元素分析 C H N計(jì)算值44.76％5.39％16.31％實(shí)測(cè)值44.77％5.41％16.33％實(shí)施例119-[(4-硝酰氧基)丁酰基氨基]-1，2，3，4-四氫吖啶的制備 (E-11)該前體藥物為下式的他克林 (E-11a)B的前體化合物為4-羥基丁酸。a) 9-[(4-溴代)丁酰基氨基]-1，2，3，4-四氫吖啶的制備向他克林(4g，20.17mmol)的氯仿(50ml)和N，N-二甲基甲酰胺(15ml)溶液中加入4-溴代丁酰氯(3.5ml，30.25mmol)。于室溫、攪拌下，將該反應(yīng)混合物維持6小時(shí)，然后用氯仿稀釋?zhuān)盟礈?。減壓蒸發(fā)經(jīng)硫酸鈉脫水的有機(jī)相。粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠層析純化，用正己烷/乙酸乙酯8/2(體積比)洗脫。得到9-[(4-溴代)丁?；被鵠-1，2，3，4-四氫吖啶。b) 9-[(4-硝酰氧基)丁?；被鵠-1，2，3，4-四氫吖啶的制備向9-[(4-溴代)丁?；被鵠-1，2，3，4-四氫吖啶(3.5g，10.56mmol)的乙腈(150ml)溶液中加入硝酸銀(2.08g，12.68mmol)。在避光的情況下，將該反應(yīng)混合物于80℃加熱6小時(shí)。將其冷卻至室溫，過(guò)濾除去銀鹽并減壓蒸發(fā)。殘留物經(jīng)硅膠層析純化，用正己烷/乙酸乙酯8/2(體積比)洗脫。獲得9-[(4-硝酰氧基)丁?；被鵠-1，2，3，4-四氫吖啶。收率33％。元素分析 C HN計(jì)算值62.00％5.81％12.76％實(shí)測(cè)值62.02％5.83％12.77％
根據(jù)實(shí)施例5描述的方法，用硫代二甘醇替代二甘醇，合成式(E-12)的化合物。收率56％。元素分析 C HN Cl S計(jì)算值49.94％ 4.63％ 6.13％ 7.76％ 14.03％實(shí)測(cè)值49.93％ 4.63％ 6.10％ 7.75％ 14.01％實(shí)施例135-甲氧基-2-[[4-(4-硝酰氧基丁酰氧基)-3，5-二甲基-2-吡啶基)甲基]亞硫?；鵠-1H-苯并咪唑的制備 (E-13)前體藥物為下式的去甲基奧美拉唑 (E-13a)B的前體化合物為4-羥基丁酸。
根據(jù)實(shí)施例1描述的方法，合成式(E-13)化合物。收率22％。元素分析 C H NS計(jì)算值51.94％ 4.79％12.12％6.93％實(shí)測(cè)值51.93％ 4.77％12.11％6.94％實(shí)施例142-[(2，6-二氯苯基)氨基]苯乙酸[N-甲基-N-(2-羥乙基)]-2-氨基乙酯(E-14)的制備 前體藥物為下式的雙氯芬酸 (E-14a)B的前體化合物為式HO-(CH2)2-N(CH3)-(CH2)2-OH的N-甲基二乙醇胺。
根據(jù)實(shí)施例5描述的方法合成該化合物。收率52％。元素分析C H H Cl計(jì)算值 51.60％ 4.78％ 9.50％ 16.03％實(shí)測(cè)值 51.60％ 4.77％ 9.53％ 16.04％實(shí)施例153-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-2-丙烯酸4-(硝酰氧基)丁酯的制備 (E-15)前體藥物為下式(E-15a)的阿魏酸 (E-15a)B的前體化合物為1，4-丁二醇。a) 3-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-2-丙烯酸4-溴代丁酯的制備向阿魏酸(10g，51.51mmol)的四氫呋喃(400ml)溶液中加入三苯膦(27g，103mmol)和四溴化碳(34.1g，103mmol)。于室溫、攪拌下，將該反應(yīng)混合物維持4小時(shí)，然后過(guò)濾并減壓蒸發(fā)。反應(yīng)的粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠層析純化，用正己烷/乙酸乙酯7/3(體積比)洗脫。得到3-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-2-丙烯酸4-溴代丁酯。b) 3-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-2-丙烯酸4-(硝酰氧基)丁酯的制備向3-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-2-丙烯酸4-溴代丁酯(2.72g，6.89mmol)的乙腈(25ml)溶液中加入硝酸銀(1.48g，8.71mmol)。在攪拌下維持將該反應(yīng)混合物，在避光的情況下，于80℃加熱7小時(shí)，然后冷卻至室溫，過(guò)濾以除去銀鹽并減壓蒸發(fā)。殘留物經(jīng)硅膠層析純化，用正己烷/乙酸乙酯7/3(體積比)洗脫。獲得3-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-2-丙烯酸4-(硝酰氧基)丁酯。收率56％。元素分析 C H N計(jì)算值54.02％5.50％4.50％實(shí)測(cè)值54.00％5.52％4.49％藥理學(xué)試驗(yàn)保持觀(guān)察所述動(dòng)物14天。即使在給予100mg/kg的劑量之后，該組動(dòng)物沒(méi)有一只出現(xiàn)毒性癥狀。
將動(dòng)物(大鼠，體重大約200g)分配到以下幾組中(每組10只動(dòng)物)A)對(duì)照組1°組處理只用載體(當(dāng)通過(guò)口服給予所述藥物時(shí)，用羧甲基纖維素的1％w/v水懸浮液，劑量5ml/kg，當(dāng)胃腸外途徑給藥時(shí)用生理溶液)，2°組處理載體+NEM，B)給予每種藥物的組組I處理載體+藥物；組II處理載體+藥物+NEM。
在該試驗(yàn)中所測(cè)定的藥物如下(表I)吲哚美辛、氨溴索、氨水楊酸、阿侖膦酸鈉、他克林、奧美拉唑、米索前列醇。
通過(guò)口服給予吲哚美辛、氨溴索和阿侖膦酸鹽，通過(guò)結(jié)腸(直腸)內(nèi)途徑給予氨水楊酸，通過(guò)皮下途徑給予他克林、奧美拉唑、米索前列醇。
通過(guò)上述途徑給予未用NEM處理的動(dòng)物每種物質(zhì)從而測(cè)定最大耐受劑量，結(jié)果見(jiàn)表I。用比表上更高的劑量，在動(dòng)物中出現(xiàn)腸病、腹瀉、抑郁、震顫和鎮(zhèn)靜作用。
在該試驗(yàn)?zāi)Ｐ椭?，首先以在生理溶液?5mg/kg的劑量通過(guò)皮下注射N(xiāo)EM處理動(dòng)物。一個(gè)小時(shí)后以在載體中的懸浮液給予所述藥物。24小時(shí)后處死動(dòng)物并且通過(guò)計(jì)算在每組內(nèi)根據(jù)視覺(jué)觀(guān)察胃受到損害的大鼠的數(shù)目對(duì)胃腸道粘膜的損害進(jìn)行評(píng)估。然后所述大鼠的總數(shù)除以該組大鼠的總數(shù)并乘上100。在表I中報(bào)告了如此獲得的百分率。該表顯示在用所述藥物處理而未用NEM處理的大鼠組中，未檢測(cè)到胃損害。
在給予以下藥物后組II的所有大鼠(用NEM處理)顯示胃損害吲哚美辛、氨溴索、氨水楊酸、阿侖膦酸鈉、他克林。因此所述藥物可以用于合成本發(fā)明的產(chǎn)物。
根據(jù)試驗(yàn)1提供的結(jié)果，奧美拉唑和米索前列醇不能用于制備本發(fā)明的產(chǎn)物。
以下前體藥物已被試驗(yàn)(表II)吲哚美辛、對(duì)乙酰氨基酚、氯吡格雷、沙丁胺醇、氨溴索、阿侖膦酸鈉、白屈菜堿、西替利嗪、依那普利、煙酰胺、氨芐西林、阿昔洛韋、氨水楊酸、他克林、辛伐他汀、奧美拉唑。
按照標(biāo)準(zhǔn)方法制備人臍靜脈的內(nèi)皮細(xì)胞。用0.1％(重量)的膠原酶溶液填充新鮮的臍靜脈并在37℃孵育5分鐘。
接著用含有0.1％(重量/體積)膠原酶的pH 7.4的培養(yǎng)基M 199(GIBCO，Grand Island，NY)灌注所述靜脈，所述培養(yǎng)基加有10％胎牛血清(10mcg/ml)、肝素鈉(50mcg/ml)、thimidine(2.4mcg/ml)、谷氨酰胺(230mcg/ml)、青霉素(100UI/ml)、鏈霉素(100mcg/ml)和鏈霉素B(0.125mcg/ml)。通過(guò)以800rpm離心從灌注液中收集所述細(xì)胞并在培養(yǎng)燒瓶T-75中收獲所述細(xì)胞，用人纖連蛋白預(yù)處理。然后在同樣的培養(yǎng)基中收獲細(xì)胞，該培養(yǎng)基另外加有牛下丘腦生長(zhǎng)因子(100ng/ml)。當(dāng)原代細(xì)胞培養(yǎng)的細(xì)胞(直接從離體的臍靜脈移出的細(xì)胞)形成一層融合細(xì)胞(大約8,000,000個(gè)細(xì)胞/燒瓶)，停止收獲并且洗滌該層并使其胰蛋白酶消化。將該細(xì)胞懸浮液轉(zhuǎn)移到具有24孔的細(xì)胞培養(yǎng)板的孔中，所述孔的一半中加入含有10-4M濃度藥物的同樣培養(yǎng)基并且在37℃、恒定的濕度(90％)、CO2＝5％中，在一個(gè)自動(dòng)恒溫器中收獲。當(dāng)藥物不溶于該培養(yǎng)基中時(shí)，將其預(yù)先溶解于少量的二甲基亞砜中?？梢约拥脚囵B(yǎng)基中的二甲基亞砜的最大量為0.5％。只將來(lái)自于這些第一次傳代培養(yǎng)物的細(xì)胞用于氫過(guò)氧化枯烯(CIP)的試驗(yàn)。通過(guò)形態(tài)學(xué)的檢查以及通過(guò)它們對(duì)因子VIII的特異性免疫反應(yīng)鑒定所述細(xì)胞為內(nèi)皮細(xì)胞；所述培養(yǎng)物未顯示來(lái)自于肌細(xì)胞或成纖維細(xì)胞的污染。
在開(kāi)始試驗(yàn)前，移走該細(xì)胞培養(yǎng)基并且在37℃下用含0.1M(pH7.0)的標(biāo)準(zhǔn)磷酸鹽緩沖的生理溶液仔細(xì)地洗滌該細(xì)胞層。然后用在該培養(yǎng)基中濃度為5mM的CIP懸浮液孵育每個(gè)孔的內(nèi)容物一小時(shí)。相對(duì)于僅用CIP處理的對(duì)照組而言，通過(guò)測(cè)定在含有藥物+CIP的培養(yǎng)物中DNA斷裂變化的百分率進(jìn)行細(xì)胞損害(編程性細(xì)胞死亡)的評(píng)估。通過(guò)用一個(gè)BX60 Olympus顯微鏡(Olympus Co.，Roma)在設(shè)定的405-450nm波長(zhǎng)內(nèi)評(píng)估試驗(yàn)樣品相對(duì)于對(duì)照品的光密度的熒光改變來(lái)測(cè)定所述DNA斷裂變化的百分率。每份樣品的熒光重復(fù)測(cè)定5次。用t Student檢驗(yàn)(p＜0.01)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)評(píng)估。
結(jié)果見(jiàn)表II并顯示吲哚美辛、對(duì)乙酰氨基酚、氯吡格雷、沙丁胺醇、阿侖膦酸鈉、白屈菜堿、西替利嗪、依那普利、煙酰胺、氨芐西林、阿昔洛韋、他克林、奧美拉唑不能顯著抑制編程性細(xì)胞死亡；因此，這些藥物可以用于制備本發(fā)明的產(chǎn)物。
相反，氨溴索、氨水楊酸和辛伐他汀抑制編程性細(xì)胞死亡。因此，基于試驗(yàn)2的結(jié)果，這些化合物不能用于制備本發(fā)明的產(chǎn)物。
該試驗(yàn)采用的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ桶凑認(rèn).Clin.Investigation 90，278-281，1992進(jìn)行。
通過(guò)測(cè)定由于給予L-NAME對(duì)胃腸道粘膜所造成的損害、肝損害(GPT增加)和血管內(nèi)皮或心血管損害如高血壓評(píng)估內(nèi)皮功能障礙。
按照以下所述將動(dòng)物(大鼠，平均重量200g)分組。接受L-NAME的動(dòng)物組用以400mg/升的濃度溶解于飲用水中的所述化合物處理4周。建立以下各組(每組10只動(dòng)物)A)對(duì)照組1°組處理只用載體(當(dāng)通過(guò)口服給予所述藥物時(shí)，用1％w/v羧甲基纖維素的水懸浮液，劑量5ml/kg，當(dāng)胃腸外途徑給藥時(shí)用生理溶液)，2°組處理載體+L-NAME，B)藥物處理組3°組處理載體+藥物；4°組處理載體+藥物+L-NAME。
用于該試驗(yàn)的藥物為對(duì)乙酰氨基酚、多柔比星、辛伐他汀、奧美拉唑和米索前列醇。每種藥物每天給藥一次，給藥4周。
在對(duì)未處理的動(dòng)物的單獨(dú)劑量的放大實(shí)驗(yàn)中，通過(guò)評(píng)估動(dòng)物中如腸病、腹瀉、抑郁、震顫、鎮(zhèn)靜的癥狀的出現(xiàn)測(cè)定給予動(dòng)物的藥物的最大耐受劑量。
在四周末，禁水并在24小時(shí)后處死動(dòng)物。
在處死前1小時(shí)測(cè)定血壓，并且血壓的增加用作血管內(nèi)皮發(fā)生損害的指標(biāo)。
按照前面的試驗(yàn)1(見(jiàn)實(shí)施例F1)所述評(píng)估對(duì)胃粘膜的損害。在處死后通過(guò)評(píng)估谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT增加)測(cè)定肝損害。
當(dāng)在用L-NAME+藥物+載體處理的大鼠組，與僅用載體處理的組、或用載體+藥物處理的組、或用載體+L-NAME處理的組比較，發(fā)現(xiàn)更高的肝損害(較高的GPT值)和/或更高的胃損害和/或更高的心血管損害(較高的血壓)時(shí)，所述藥物滿(mǎn)足試驗(yàn)3并因此可以用于制備本發(fā)明的化合物。
該試驗(yàn)結(jié)果在表IV中報(bào)告。按照試驗(yàn)1測(cè)定胃損害的百分率％。％GPT和％血壓值參照在對(duì)照組的第一組動(dòng)物中所發(fā)現(xiàn)的對(duì)應(yīng)值。在該組中血壓的平均值為105±8mmHg。
獲得的結(jié)果顯示對(duì)乙酰氨基酚、多柔比星和辛伐他汀引起肝損害和胃腸病(與在缺少L-NAME的情況下用藥物處理的對(duì)應(yīng)的組以及用L-NAME處理的對(duì)照組相比GPT值和胃損害的百分比更高)。
因此這些藥物可以用于制備本發(fā)明的產(chǎn)物。
根據(jù)該試驗(yàn)，奧美拉唑和米索前列醇不能用于制備本發(fā)明的產(chǎn)物。
根據(jù)R.Maffei Facino、M.Carini G.Aldini、M.T.Calloni，DrugsExptl.Clin.Res.XXIII(5/8)157-165 1997所述的方法進(jìn)行試驗(yàn)4a。
將通過(guò)采用標(biāo)準(zhǔn)方法自Wistar雄性大鼠(Charles River)中分離的紅細(xì)胞懸浮于用磷酸鹽緩沖液緩沖至pH 7.4的生理溶液中，并于4℃平衡4天，然后將所述懸浮液的等分液，以1000rpm離心5分鐘，用上述相同的摩爾濃度的磷酸鈉緩沖液將0.1ml離心的紅細(xì)胞稀釋至50ml，如此獲得含0.2％體積的紅細(xì)胞的懸浮液。從所述稀釋的懸浮液中取出3.5ml的等分液，加入0.1ml氫過(guò)氧化枯烯的醇溶液(9.72mM)，這引起細(xì)胞的溶解。然后使得到的懸浮液于37℃溫育。在懸浮液中可觀(guān)察到濁度增加。細(xì)胞溶解的過(guò)程通過(guò)比濁法于710nm，以30分鐘的間隔測(cè)定光密度(或透光率)來(lái)跟蹤。細(xì)胞溶解的最大量的時(shí)間(與懸浮液出現(xiàn)最大濁度相應(yīng))作為T(mén)max，并假定它相應(yīng)于100％的細(xì)胞溶解。將用作B的前體的0.2ml試驗(yàn)化合物的38mM乙醇溶液加入到上面制備的3.5ml紅細(xì)胞的稀釋?xiě)腋∫旱牡确忠褐?，使得到的懸浮液預(yù)溫育30分鐘。然后加入0.1ml氫過(guò)氧化枯烯的醇溶液(10.26mM)，由分別含有紅細(xì)胞、B的前體和氫過(guò)氧化枯烯的樣品的懸浮液的吸光度與含有紅細(xì)胞和氫過(guò)氧化枯烯的懸浮液的吸光度之間的比率乘以100來(lái)確定此時(shí)Tmax抑制樣品溶血作用的百分率；如果它們抑制由氫過(guò)氧化枯烯引起的溶血作用的百分率大于15％，則認(rèn)為B的前體滿(mǎn)足該試驗(yàn)；在表V中報(bào)告以下物質(zhì)所獲得的結(jié)果N-甲基二乙醇胺、二甘醇、硫代-二甘醇、1，4-丁二醇、丁醇和二乙醇胺。
表V顯示- N-甲基二乙醇胺、二甘醇、硫代-二甘醇、1，4-丁二醇滿(mǎn)足試驗(yàn)4，因?yàn)樗鼈円种朴蓺溥^(guò)氧化枯烯誘導(dǎo)的紅細(xì)胞溶血至高于15％的程度。- 丁醇和二乙醇胺反而是無(wú)效的，因?yàn)樗鼈円种朴蓺溥^(guò)氧化枯烯誘導(dǎo)的紅細(xì)胞溶血至低于15％的程度，因此它們不能在根據(jù)本發(fā)明的化合物的合成中用作B的前體。實(shí)施例F5試驗(yàn)5用作B的前體的化合物在抑制由FeII化合物引起的自由基產(chǎn)生的活性。
將0.1ml等份的10-4M濃度的1，4-丁二醇、N-甲基二乙醇胺、二甘醇、硫代-二甘醇在甲醇中的溶液加入到含有一種水溶液的試管中，所述水溶液由0.2ml 2mM脫氧核糖、0.4ml pH 7.4的磷酸鹽緩沖液100mM和0.1ml 1mM FeII(NH4)2(SO4)2在2mM HCl中混合獲得。然后在37℃保存該試管1小時(shí)。然后，在每支試管中順序加入0.5ml 2.8％三氯乙酸水溶液和0.5ml 0.1M的硫代巴比土酸水溶液。用0.1ml甲醇代替0.1ml等份上述試驗(yàn)化合物的甲醇溶液形成參比空白。封閉所述試管并在100℃的油浴中加熱15分鐘。出現(xiàn)粉紅色，粉紅色的強(qiáng)度與脫氧核糖經(jīng)歷自由基氧化降解的量是成比例的。在室溫下冷卻該溶液并且在532nm讀取它們相對(duì)于空白的吸收度。
通過(guò)下式測(cè)定在對(duì)抗由FeII引起的自由基產(chǎn)生中，由B的前體所引起的抑制百分率(1-AS/AC)×100其中AS和AC分別為含有試驗(yàn)化合物+鐵鹽的溶液與僅含有鐵鹽的溶液的吸收度值。
在附表III中報(bào)告該結(jié)果，其中結(jié)果顯示試驗(yàn)的化合物對(duì)抑制由鐵離子引起的自由基產(chǎn)生無(wú)效。
因此，為了獲得本發(fā)明的化合物，這些化合物可以用作B的化合物前體。
過(guò)氧化氫是一種溫和的氧化劑并被認(rèn)為是與氧化應(yīng)激反應(yīng)有關(guān)的病理過(guò)程的主要介導(dǎo)物質(zhì)(B.Halliwell，J.Gutteridge“生物學(xué)和醫(yī)學(xué)中的自由基”，第416頁(yè)，1993)。因此，在氧化應(yīng)激反應(yīng)狀態(tài)下使用的化合物的藥理學(xué)活性通過(guò)它們中和過(guò)氧化氫的cytolesive作用的能力來(lái)評(píng)價(jià)(B.Halliwell，J.Gutteridge“生物學(xué)和醫(yī)學(xué)中的自由基”，第416頁(yè)，1993)。
Herman等(Herman C.，Zeiner M.A.，Dimmeler S.，Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.17(12)，3588-82，1997)描述了這種方去。
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方法制備人臍靜脈的內(nèi)皮細(xì)胞。用0.1％的膠原酶溶液灌充剛剛移出的新鮮臍靜脈并于37℃溫育5分鐘。
隨后，用含20％人血清的培養(yǎng)基M 199(GIBCO，Grand，Island，NY)灌注該靜脈。以800rpm經(jīng)離心從灌注液中收集細(xì)胞，并收獲到用人纖連蛋白預(yù)處理的培養(yǎng)燒瓶T-75中。然后，在含20％人血清、低分子量肝素鈉(30mcg/ml)、青霉素(100000UI/ml)和牛下丘腦生長(zhǎng)因子(100ng/ml)的培養(yǎng)基(pH 7.4)中收獲細(xì)胞。洗滌原代融合單細(xì)胞層(約8000000個(gè)細(xì)胞/燒瓶)并經(jīng)受胰蛋白酶消化作用。將細(xì)胞懸浮液轉(zhuǎn)移至一24孔培養(yǎng)板的各孔中，于37℃恒溫箱、恒濕(90％)、5％二氧化碳下收獲。僅使用來(lái)自這些第一次傳代的培養(yǎng)物的細(xì)胞用于HP的試驗(yàn)。通過(guò)形態(tài)學(xué)檢查和特異性染色反應(yīng)鑒定細(xì)胞為內(nèi)皮細(xì)胞。該培養(yǎng)物未顯示有來(lái)自肌細(xì)胞或成纖維細(xì)胞的污染。
為了進(jìn)行使用HP的試驗(yàn)，除去細(xì)胞的培養(yǎng)基，于37℃下，以用0.1M磷酸鹽(pH 7.0)緩沖的生理溶液小心洗滌細(xì)胞層。然后將該細(xì)胞與200μmol/L濃度的HP一起溫育18小時(shí)。
細(xì)胞損傷(編程性細(xì)胞死亡)的評(píng)價(jià)是通過(guò)測(cè)定相對(duì)于僅加入HP的對(duì)照組，樣品的DNA斷裂的變化百分率來(lái)進(jìn)行的。以100μmol/L的濃度測(cè)試待測(cè)的產(chǎn)物。如果發(fā)現(xiàn)所述產(chǎn)物不溶于培養(yǎng)基，則使它們?nèi)苡谏倭慷讈嗧?DMSO)中，應(yīng)考慮到可加入到培養(yǎng)基中的DMSO的最大量為0.5％v/v。每個(gè)樣品按一式三份進(jìn)行。
結(jié)果報(bào)告于表VI中，結(jié)果顯示，在那些用本發(fā)明化合物處理的細(xì)胞培養(yǎng)物的樣品中，DNA斷裂(或更普通的術(shù)語(yǔ)細(xì)胞損傷)的抑制為至少兩倍于用相應(yīng)的前體處理樣品所發(fā)生的抑制。
通過(guò)導(dǎo)管將加有下列化合物之一的2％羧甲基纖維素在水(載體)中的懸浮液口服喂飼給已禁食17小時(shí)的體重180-200g的雄性Wistar大鼠組(每組10只大鼠)- 雙氯芬酸，劑量20mg/kg，口服，- 根據(jù)實(shí)施例14的雙氯芬酸硝酰氧基酯，劑量同上，口服，- 氨溴索，100mg/kg，口服，- 按照實(shí)施例3的氨溴索硝酰氧基酯，劑量同上，口服，- 阿侖膦酸鹽，劑量100mg/kg，口服，- 按照實(shí)施例4的阿侖膦酸的硝酰氧基酯，劑量同上，口服。
通過(guò)皮下途徑，以10mg/kg的劑量，給予大鼠他克林和按照實(shí)施例11獲得的對(duì)應(yīng)的硝酰氧基酯的生理溶液。
給藥后6小時(shí)處死動(dòng)物。移出胃腸粘膜并檢查。如試驗(yàn)F1中所述評(píng)價(jià)胃腸道損傷的發(fā)生率。
該結(jié)果在表VII中報(bào)告并且該結(jié)果顯示，本發(fā)明化合物不引起胃的損害，或即使在有損害的情況下，所述損傷的發(fā)生率也遠(yuǎn)比使用前體藥物時(shí)發(fā)現(xiàn)的損傷低。實(shí)施例16下式的(S)-1-[N-[1-(乙氧基羰基)-3-苯基丙基]-L-丙氨酰]-L-脯氨酸[2-(N-甲基，N’-(2-硝酰氧基)乙基)-氨基]乙酯的合成 (E-16)前體為具有下式的依那普利 (E-16a)和B的前體為下式的N-甲基-二乙醇胺 根據(jù)實(shí)施例5描述的方法，合成式(E-16)的化合物。收率19％。元素分析 C HN計(jì)算值％ 58.19 7.51 10.44實(shí)測(cè)值％ 58.22 7.53 10.42實(shí)施例17下式的(4-硝酰氧基)-丁酸1-[(1-甲基乙基)氨基]-3-(1-萘氧基)-2-丙酯的合成 (E-17)前體為具有下式的普萘洛爾 (E-17a)和B的前體為4-羥基丁酸。
根據(jù)實(shí)施例1的方法合成化合物(E-17)。收率25％。元素分析 C H N計(jì)算值％ 61.53 6.71 7.17實(shí)測(cè)值％ 61.58 6.74 7.15實(shí)施例18下式的丁二酸[1-[5-(2，5-二氫-5-氧代-3-呋喃基)-3-甲基-2-苯并呋喃基]乙基[(2-硝酰氧基)乙氧基]乙基二酯的合成 (E-18)前體藥物為具有下式的琥珀苯呋地爾 (E-18a)和B的化合物前體為下式的二甘醇。 根據(jù)實(shí)施例6合成化合物(E-18)。收率16％。元素分析 C HN計(jì)算值％ 56.21 5.13 2.85實(shí)測(cè)值％ 56.26 5.10 2.90實(shí)施例19下式的N-[[6-甲氧基-5-(三氟甲基)-1-萘基[硫代甲基]-N-甲基甘氨酸[2-(N-甲基，N’-(2-硝酰氧基)乙基)氨基]乙酯的合成 (E-19)前體藥物為下式的托瑞司他 (E-19a)和B的前體為下式的N-甲基-二乙醇胺 根據(jù)實(shí)施例5描述的方法，合成式(E-19)的化合物。收率12％。元素分析C H N S F計(jì)算值％ 50.10 4.808.35 6.30 11.32實(shí)測(cè)值％ 50.15 4.828.30 6.25 11.34實(shí)施例20(8S-順式)-10-[(3-氨基，2，3，6-三脫氧-α-L-來(lái)蘇-吡喃己糖基)氧基]-7，8，9，10-四氫，6，8，11-三羥基-8-[[3-甲氧基-4-(4-硝酰氧基丁酰氧基)甲基-氧代]-1-甲氧基-5，12-并四苯二酮的合成 (E-20)前體藥物為下式的多柔比星 (E-20a)B的化合物前體為4-羥基丁酸。
根據(jù)實(shí)施例1的方法，合成化合物(E-20)。收率12％。元素分析 C H N計(jì)算值％ 55.19 5.0828.01實(shí)測(cè)值％ 55.21 5.0928.08實(shí)施例21下式的(Z)-5-氟-2-甲基-1-[[4-(甲基亞硫酰基)苯基]亞甲基]-1H-茚-3-乙酸(4-硝酰氧基)丁酯的合成 (E-21)前體藥物為下式的舒林酸 (E-21a)和B的前體為1，4-丁二醇a) 順式-5-氟-2-甲基-1-[對(duì)-(甲基亞硫?；?亞芐基]茚-3-乙酸4-溴代丁酯的制備向舒林酸(5.17g，14.5mmol)的二甲基甲酰胺(50ml)溶液中加入EtONa(1.18g，16.4mmol)。攪拌下，將該反應(yīng)混合物維持1小時(shí)，然后加入1，4-二溴丁烷的二甲基甲酰胺(20ml)的溶液。
于室溫下攪拌該反應(yīng)混合物8小時(shí)，然后用乙醚稀釋?zhuān)盟礈?。有機(jī)相經(jīng)硫酸鈉脫水，然后減壓蒸發(fā)。使如此獲得的粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析純化，用正己烷/乙酸乙酯3/7(體積比)洗脫。得到順式-5-氟-2-甲基-1-[對(duì)-(甲基亞硫?；?亞芐基]茚-3-乙酸4-溴代丁酯。b) 順式-5-氟-2-甲基-1-[對(duì)-(甲基亞硫?；?亞芐基]茚-3-乙酸4-(硝酰氧基)丁酯的制備向順式-5-氟-2-甲基-1-[對(duì)-(甲基亞硫?；?亞芐基]茚-3-乙酸4-溴代丁酯(5.01g，10.18mmol)的乙腈(60ml)溶液中加入硝酸銀(3.5g，20.6mmol)。在避光的情況下，將該反應(yīng)混合物于80℃的溫度下攪拌48小時(shí)。然后冷卻至室溫，過(guò)濾除去形成的不溶性銀鹽并減壓蒸發(fā)。殘留物經(jīng)硅柱膠層析純化，用正己烷/乙酸乙酯3/7(體積比)洗脫。蒸發(fā)溶劑后獲得(Z)-5-氟-2-甲基-1-[[4-(甲基亞硫酰基)苯基]亞甲基]-1H-茚-3-乙酸(4-硝酰氧基)丁酯(m.p.93-97)。收率40％。元素分析 C H F N S計(jì)算值60.87％ 5.11％4.01 2.96 6.77％實(shí)測(cè)值60.85％ 5.13％3.93 2.94 6.75％
在表VIII中報(bào)道該結(jié)果并且顯示給予b組(比較組)的混合物比用本發(fā)明的衍生物處理的組(c組)在降低胃損害方面的效果低得多。實(shí)施例F94-(硝酰氧基)丁酸4-(N-乙?；被?苯酯(非-對(duì)乙酰氨基酚)和對(duì)乙酰氨基酚前體的抗炎和鎮(zhèn)痛活性。前言NSAIDs的主要治療作用源于其抑制前列腺素產(chǎn)生的能力(“Goodman & Gilman’s，治療學(xué)的藥理學(xué)基礎(chǔ)(The pharmacologicalBasis of Therapeutics)”McGraw Hill，第九版，620頁(yè)，1996)，并且所述藥物根據(jù)所述原理分類(lèi)。根據(jù)舒林酸和對(duì)乙酰氨基酚抑制前列腺素產(chǎn)生的可以忽略的能力，它們具有與目前最新使用的NSAIDs不同的作用機(jī)理。它們兩者與氧自由基相互作用。
根據(jù)角叉菜膠大鼠足跖腫脹和乙酸小鼠扭體方法，測(cè)定抗炎和鎮(zhèn)痛活性。使用大鼠(雄性，wistar 100-150g)和小鼠(雄性，LACA，22-35g)。以1mg/kg的量給予作為羧甲基纖維素懸浮液(0.5％w/v)的非-對(duì)乙酰氨基酚、對(duì)乙酰氨基酚或溶媒。角叉菜膠足跖腫脹如Al-Swayeh等在Brit.J.Pharmacol.129，343-350 2000中所述進(jìn)行試驗(yàn)。在足底間注射角叉菜膠(100微升，2％w/v)前3小時(shí)和注射后3小時(shí)，通過(guò)體積描記器測(cè)量后足的體積。在注射角叉菜膠前經(jīng)腹膜內(nèi)給予15ml的該化合物。在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，通過(guò)頸部脫位和驅(qū)血法處死動(dòng)物。表IX中所示結(jié)果表示為足腫脹抑制的％，即用處理組的足體積減去對(duì)照組(溶媒)的足體積，得到的差除以對(duì)照組的足體積。乙酸扭體試驗(yàn)如Moore等(Br.J.Pharmacol.102，198-202 1990)所述進(jìn)行試驗(yàn)。在腹膜內(nèi)給予乙酸(2％w/v，在鹽水(pH 2.7)中，10ml/kg)前15分鐘口服給予該化合物。將小鼠立即轉(zhuǎn)移至個(gè)體觀(guān)察籠中，在隨后的30分鐘內(nèi)監(jiān)測(cè)腹部收縮的次數(shù)。觀(guān)察期結(jié)束時(shí)，通過(guò)頸部脫位和驅(qū)血法處死動(dòng)物。結(jié)果表示為每30分鐘腹部收縮(扭體)的次數(shù)，表示為相對(duì)于在對(duì)照組中觀(guān)察到的次數(shù)的百分比，并在表IX中報(bào)告。
該表的結(jié)果表明，非-對(duì)乙酰氨基酚在兩種試驗(yàn)中比對(duì)乙酰氨基酚有效得多。
由對(duì)乙酰氨基酚誘導(dǎo)的谷胱甘肽減少被認(rèn)為是氧化應(yīng)激反應(yīng)的一種征候(B.Halliwell，J.Gutterbridge“生物學(xué)和醫(yī)學(xué)中的自由基”，1993，Clarendon Press，第334-335頁(yè))。
結(jié)果報(bào)告于表X中并表示為基于溶媒組(100％)的相應(yīng)值計(jì)算的百分率。
結(jié)果表明，給予對(duì)乙酰氨基酚引起肝的損傷(如相對(duì)于對(duì)照組的轉(zhuǎn)氨酶AST和ALT值和膽紅素的值所示)。
給予非-對(duì)乙酰氨基酚引起AST和ALT的增加要低得多，同時(shí)膽紅素濃度低于對(duì)照組的膽紅素濃度。
因此，與對(duì)乙酰氨基酚不同，非-對(duì)乙酰氨基酚能夠不傷害肝，即使在氧化應(yīng)激反應(yīng)(即肝谷胱甘肽被對(duì)乙酰氨基酚和非-對(duì)乙酰氨基酚類(lèi)似地減少)的狀態(tài)下亦是如此。
表I
p.o.＝口服；i.c.＝結(jié)腸內(nèi)的途徑；s.c.＝皮下途徑。表II
表III
表IV
表V
表VI
表VII
表VIII
表IX
表X
權(quán)利要求
1.具有以下通式(I)的化合物或它們的鹽A-B-N(O)S(I)其中s為一個(gè)等于1或2的整數(shù)，優(yōu)選s＝2；A＝R-T1-，其中R為藥物殘基而T1＝(CO)t或(X)t′，其中X＝O、S、NR1C，R1C為H或直鏈的或支鏈的烷基，所述烷基具有1到6個(gè)碳原子，或?yàn)樽杂蓛r(jià)，t和t′為整數(shù)并等于零或1，前提是當(dāng)t′＝0時(shí)，t＝1；當(dāng)t′＝1時(shí)，t＝0；B＝-TB-X2-O-，其中當(dāng)t＝0時(shí)TB＝(CO)，當(dāng)t′＝0時(shí)TB＝X，X如上定義；X2為這樣的二價(jià)基團(tuán)，它使得B的相應(yīng)的前體不滿(mǎn)足試驗(yàn)5，但滿(mǎn)足試驗(yàn)4A；所述前體具有式-TB-X2-OH，其中TB＝(CO)和t＝0，TB的自由價(jià)由-OZ飽和，其中Z＝H或R1a，可能時(shí)，R1a為直鏈或支鏈的C1-C10烷基，優(yōu)選C1-C5烷基，或者由 飽和，其中ZI和ZII彼此相同或不同，具有Z的定義，當(dāng)TB＝X和t’＝0時(shí)，TB的自由價(jià)由氫飽和；前提是所述藥物A＝R-T1-應(yīng)滿(mǎn)足試驗(yàn)1-3中的至少一個(gè)，其中自由價(jià)如下文所述被飽和-當(dāng)t’＝0，由-O-Z飽和，其中Z＝H或R1a如上定義，或由 飽和，ZI和ZII如上定義，-當(dāng)t＝0，由X-Z飽和，其中X和Z如上定義；- 其中試驗(yàn)1(NEM)是一個(gè)體內(nèi)試驗(yàn)，在4組大鼠(每組由10只大鼠組成)中進(jìn)行，對(duì)照組(兩個(gè)組)和處理組(兩個(gè)組)中，一組對(duì)照組和一組治療組分別給予25mg/kg s.c一個(gè)劑量的N-乙基順丁烯二酰亞胺(NEM)，對(duì)照組用載體處理而治療組用載體+式A＝R-T1-的藥物處理，其中所述自由價(jià)如上所示是飽和的，以相當(dāng)于未接受NEM的大鼠所能耐受的最大劑量的量給予藥物，即給予動(dòng)物的最高劑量應(yīng)是在此劑量下不顯示出毒性，即不顯示例如可觀(guān)察到的癥狀的量；當(dāng)用NEM+載體+藥物處理的大鼠組顯示出胃腸道損害，或在用NEM+載體+藥物處理的大鼠組中觀(guān)察到胃腸道損害大于用載體處理的那些組，或大于用載體+藥物處理的組，或大于用載體+NEM處理的組時(shí)，所述藥物符合試驗(yàn)1，即所述藥物可以用于制備通式(I)的化合物；- 其中試驗(yàn)2(CIP)是一個(gè)體外試驗(yàn)，其中來(lái)自于臍靜脈的人內(nèi)皮細(xì)胞是在標(biāo)準(zhǔn)條件下收獲的，然后將其分為兩組(每組重復(fù)5次)，其中的一組用在培養(yǎng)基中濃度為10-4M的藥物的混合物處理，另外一組用載體處理；然后將在培養(yǎng)基中濃度為5mM的氫過(guò)氧化枯烯(CIP)加入到所述兩組中的每一組中；相對(duì)于用載體和CIP處理的組而言，當(dāng)不能獲得對(duì)CIP引起的編程性細(xì)胞死亡(細(xì)胞損害)的統(tǒng)計(jì)學(xué)上p＜0.01的顯著抑制作用時(shí)，所述藥物滿(mǎn)足試驗(yàn)2，即該藥物可以用于制備通式(I)的化合物；- 其中試驗(yàn)3(L-NAME)為一個(gè)在4組大鼠(每組由10只大鼠組成)中進(jìn)行4周的體內(nèi)試驗(yàn)并且接受飲用水，對(duì)照組(2個(gè)組)和治療組(2個(gè)組)中，一組對(duì)照組和一組治療組分別接受以400mg/升的濃度加有N-ω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)的飲用水4周，在該4周中對(duì)照組給予載體而治療組在這4周中用載體+所述藥物處理，一天給予一次載體或藥物+載體，以未用L-NAME預(yù)處理的大鼠組所能耐受的最大劑量給予藥物，即可以給予動(dòng)物的最高劑量，在此劑量沒(méi)有出現(xiàn)明顯的毒性，即例如可觀(guān)察到的癥狀；在所述的4周后，停止供應(yīng)水24小時(shí)，然后處死大鼠，在處死前1小時(shí)測(cè)量血壓并在處死后測(cè)量處死大鼠血漿谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)，并檢查胃組織；當(dāng)在用L-NAME+載體+藥物處理的大鼠組中，分別與僅用載體處理的組、或用載體+藥物處理的組、或用載體+L-NAME處理的組比較，發(fā)現(xiàn)更大的肝損害(GPT的測(cè)量值更高)和/或胃和/或心血管損害(血壓的測(cè)量值更高)時(shí)，所述藥物滿(mǎn)足試驗(yàn)3，即所述藥物可用于制備通式(I)的化合物；- 其中必須被B的化合物前體滿(mǎn)足的試驗(yàn)4A是一個(gè)體外試驗(yàn)，其中一部分紅細(xì)胞懸浮液(所述紅細(xì)胞通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)方法自Wistar雄性大鼠中分離并懸浮于用磷酸緩沖液緩沖的pH 7.4的生理溶液中)在此之前已于4℃貯存4天，將該懸浮液以1000rpm離心5分鐘，用磷酸鈉緩沖液將0.1ml離心的紅細(xì)胞稀釋至50ml(pH 7.4)；從所述稀釋的懸浮液中取出每份3.5ml的等分試液(5個(gè)樣品)，在270μM氫過(guò)氧化枯烯的存在下，于37℃溫育，于710nm以30分鐘的間隔測(cè)定懸浮液的濁度，以確立出現(xiàn)最大濁度的時(shí)間(Tmax)，這與由氫過(guò)氧化枯烯溶解的最大量的細(xì)胞相應(yīng)(溶血假定為100％)；然后將B的化合物前體的醇溶液加入到3.5ml離心的紅細(xì)胞的稀釋?xiě)腋∫旱牡确衷囈褐?對(duì)每個(gè)待分析的B前體按5個(gè)樣品進(jìn)行試驗(yàn))，以使B的前體具有2mM的終濃度，然后將得到的懸浮液預(yù)溫育30分鐘，加入一定量的氫過(guò)氧化枯烯，以便具有與如上指定的相同的終濃度，由分別含有紅細(xì)胞、B的前體和氫過(guò)氧化枯烯的樣品的吸光度與含有紅細(xì)胞和氫過(guò)氧化枯烯的樣品的吸光度之間的比率乘以100來(lái)測(cè)定于Tmax時(shí)樣品中溶血作用的抑制百分率；如果B的前體抑制由氫過(guò)氧化枯烯引起的溶血作用的百分率大于15％，則認(rèn)為所述前體滿(mǎn)足該試驗(yàn)；-其中必須不被B的前體化合物滿(mǎn)足的試驗(yàn)5是一個(gè)分析測(cè)定，其按照如下步驟進(jìn)行將10-4M濃度的具有如上定義的飽和自由價(jià)的B或B1或C＝-TC-Y-H的前體的甲醇的等分試液加入到由2mM脫氧核糖水溶液與100mM磷酸鹽緩沖液和1mM FeII(NH4)2(SO4)2鹽混合形成的溶液中；將該溶液在37℃恒溫一小時(shí)后，按照順序等份加入2.8％三氯乙酸水溶液和0.5M硫代巴比土酸水溶液，在100℃加熱15分鐘，并且在532nm讀出該測(cè)試溶液的吸收度；通過(guò)下式計(jì)算在對(duì)抗由FeII引起的自由基產(chǎn)生中由B或B1或C＝-TC-Y-H的前體引起的抑制百分率(1-AS/AC)×100其中AS和AC分別為含有試驗(yàn)化合物和鐵鹽的溶液和僅含有鐵鹽的溶液的吸收度的值，當(dāng)B的前體的如上定義的抑制百分率高于或等于50％時(shí)，則滿(mǎn)足試驗(yàn)5；前提是在式(I)化合物中，當(dāng)B的X2為任選取代的直鏈或支鏈C1-C20亞烷基或具有5-7個(gè)碳原子亞環(huán)烷基時(shí)，具有如上所述的被飽和的自由價(jià)的式A＝R-T1藥物不屬于以下類(lèi)型用于失禁的藥物、抗血栓形成的藥物(ACE-x抑制劑)、前列腺素、抗炎藥(NSAIDS和皮質(zhì)類(lèi)固醇)，但不排除抗炎的NSAIDS的對(duì)乙酰氨基酚和舒林酸。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中在滿(mǎn)足試驗(yàn)4A但不滿(mǎn)足試驗(yàn)5的B的式-TB-X2-O-的前體化合物中，X2等于R1B-X-R2B基團(tuán)，其中R1B和R2B，彼此相同或不同，為直鏈或支鏈C1-C6亞烷基，或者X2為其中兩個(gè)亞烷基鏈C1-C4，優(yōu)選C1-C2，連接于具有4或6個(gè)原子，優(yōu)選5或6個(gè)原子的中心環(huán)的非相鄰位置的基團(tuán)，所述環(huán)為不飽和的脂族環(huán)，或?yàn)楹?個(gè)或2個(gè)雜原子的飽和或芳族雜環(huán)，所述雜原子可相同或不同，選自O(shè)、S、N；不飽和脂族環(huán)意指不具有根據(jù)Hückel氏規(guī)則的芳族性質(zhì)的環(huán)。
3.權(quán)利要求1和2的化合物，其中B的前體化合物為1，4-丁二醇HO-(CH2)4-OH，6-羥基己酸HO-(CH2)5-COOH，4-羥基丁酸HO-(CH2)3-COOH，N-甲基二乙醇胺HO-(CH2)2-N(CH3)-(CH2)2-OH，二甘醇HO-(CH2)2-O-(CH2)2-OH，硫代二甘醇HO-(CH2)2-S-(CH2)2-OH，1，4-二氧六環(huán)-2，6-二甲醇、四氫吡喃-2，6-二甲醇、4H-吡喃-2，6-二甲醇、四氫噻喃-2，6-二甲醇、1，4-二噻烷-2，6-二甲醇、環(huán)己烯-1，5-二甲醇、噻唑-2，5-二甲醇、噻吩-2，5-二甲醇、噁唑-2，5-二甲醇，優(yōu)選N-甲基二乙醇胺、二甘醇、硫代二甘醇。
4.權(quán)利要求1-3的化合物，其中式(I)化合物的前體藥物選自以下藥物抗炎藥、止痛藥、支氣管擴(kuò)張藥和激活膽堿能系統(tǒng)的藥物、祛痰藥-粘液溶解藥、鎮(zhèn)喘藥-抗過(guò)敏藥、抗組胺藥、ACE抑制劑、β-受體阻滯劑、抗血栓形成藥、血管舒張藥、抗糖尿病藥、抗腫瘤藥、抗?jié)兯?、抗高血脂藥、抗生素、抗病毒藥、骨吸收抑制劑、抗癡呆藥。
5.權(quán)利要求4的化合物，其中所述前體藥物選自以下藥物抗炎藥醋氯芬酸、阿西美辛、阿司匹林、5-氨基乙酰水楊酸、阿氯芬酸、阿明洛芬、氨芬酸、芐達(dá)酸、柏莫洛芬、α-沒(méi)藥醇、溴芬酸、溴水楊醇、布氯酸、異丁苯丁酸、卡洛芬、桂美辛、環(huán)氯茚酸、氯吡酸、雙氯芬酸鈉、二氟尼柳、地他唑、苯乙氨茴酸、依托度酸、依托芬那酯、聯(lián)苯乙酸、芬布芬、芬克洛酸、芬度柳、非諾洛芬、芬替酸、非普地醇、氟芬那酸、氟尼辛、氟諾洛芬、氟比洛芬、葡美辛、水楊酸乙二醇酯、布洛芬、異丁普生、吲哚美辛、吲哚洛芬、三苯唑酸、伊索克酸、伊索昔康、酮洛芬、酮咯酸、氯諾昔康、洛索洛芬、甲氯芬那酸、甲芬那酸、美洛昔康、氨水楊酸、甲嗪酸、莫苯唑酸、萘普生、尼氟酸、奧沙西羅、奧沙普秦、羥布宗、帕沙米特、哌立索唑、乙酰水楊酸苯酯、奧沙拉秦、pyrazolac、吡羅昔康、吡洛芬、普拉洛芬、丙替嗪酸、醋水楊胺、水楊酰胺O-乙酸、水楊基硫酸(salicylsulphuric acid)、雙水楊酯、舒林酸、舒洛芬、琥布宗、替諾昔康、噻洛芬酸、噻拉米特、替諾立定、托芬那酸、托美丁、tropesin、聯(lián)苯丁酸、希莫洛芬、扎托洛芬、佐美酸、托莫普羅；鎮(zhèn)痛藥對(duì)乙酰氨基酚、醋氨沙洛、氨基氯西諾嗪、乙酰水楊酸2-氨基-4-吡啶甲酸、乙酰水楊酰水楊酸、阿尼利定、苯噁洛芬 芐基嗎啡、5-溴水楊酸乙酸酯、布西丁、丁丙諾啡、布托啡諾、辣椒堿、辛可芬、西拉馬朵、氯美辛、氯尼辛、可待因、地索嗎啡、地佐辛、雙氫可待因、雙氫嗎啡、地美庚醇、地匹乙酯、依他佐辛、依托沙秦、乙基嗎啡、丁香酚、夫洛非寧、磷柳酸、格拉非寧、氫可酮、氫嗎啡酮、羥哌替啶、異丁芬酸、p-lactophenetide、左啡諾、美普他酚、美他佐辛、美托酮、嗎啡、納布啡、尼可嗎啡、去甲左啡諾、去甲嗎啡、羥考酮、羥嗎啡酮、噴他佐辛、非那佐辛、phenocoll、苯哌利定、保泰松、水楊酸苯酯、非尼拉朵、水楊苷、水楊酰胺、醋托啡烷、曲馬朵、雙醋瑞因、阿克他利；支氣管擴(kuò)張藥和激活膽堿能系統(tǒng)的藥物醋茶堿(acefylline)、沙丁胺醇、班布特羅、巴米茶堿、甲硫貝弗寧、比托特羅、卡布特羅、克侖特羅、氯喘通、二羥西君、白屈菜堿、麻黃堿、腎上腺素、依普羅醇、乙非君(etafredine)、乙基去甲腎上腺素、乙羥茶堿、非諾特羅、氟托溴銨(flutoprium bromide)、海索那林、異丙托溴銨、異他林(isoetharine)、異丙腎上腺素、馬布特羅、奧西那林、奧昔布寧、氧托溴銨、吡布特羅、丙卡特羅、普羅托醇、丙羥茶堿、瑞普特羅、利米特羅、沙美特羅、索特瑞醇、特布他林、1-teobromineacetic acid、噻托溴銨、曲托喹酚、妥洛特羅、扎普司特、環(huán)戊君、NS-21、2-羥基-2，2-二苯基-N-(1，2，3，6-四氫吡啶-4-基甲基)乙酰胺；祛痰藥/粘液溶解藥乙酰半胱氨酸(acetil cysteine)、氨溴索、溴己新、羧甲司坦(carbocysteine)、多米奧醇、厄多司坦、阿魏酸、愈創(chuàng)木酚、愈創(chuàng)甘油醚、碘化甘油、來(lái)托司坦、美司坦鹽酸鹽、美司鈉、索布瑞醇、司替羅寧、萜品醇、硫普羅寧；鎮(zhèn)喘藥/抗過(guò)敏抗組胺藥阿伐斯汀、阿洛拉胺、氨來(lái)咕諾、西替利嗪、氯苯西泮、chromoglycate、chromolyn、依匹斯汀、fexofenadine、福莫特羅、組胺、羥嗪、左卡巴斯汀、洛度沙胺、馬布特羅、異丙辛胺、montelukast、奈多羅米、瑞吡司特、塞曲司特、甲磺司特、特非那定、噻拉米特、漆酚、溴己新；ACE抑制劑阿拉普利、貝那普利、卡托普利、西羅普利、西拉普利、地拉普利、依那普利、依那普利拉、福辛普利、咪達(dá)普利、賴(lài)諾普利、氯沙坦、莫維普利、naphthopidil、培哚普利、喹那普利、雷米普利、螺普利、替莫普利、群多普利、烏拉地爾；β-受體阻滯劑醋丁洛爾、阿普洛爾、氨磺洛爾、阿羅洛爾、阿替洛爾、倍他洛爾、貝凡洛爾、布庫(kù)洛爾、布非洛爾、丁呋洛爾、布尼洛爾、布拉洛爾、丁非洛爾、卡拉洛爾、卡替洛爾、卡維地洛、塞利洛爾、塞他洛爾、地來(lái)洛爾、依泮洛爾、艾司洛爾、茚諾洛爾、拉貝洛爾、甲吲洛爾、美替洛爾、美托洛爾、莫普洛爾、納多洛爾、萘肟洛爾、奈必洛爾、硝苯洛爾、尼普地洛(nipridalol)、氧烯洛爾、噴布洛爾、吲哚洛爾、普拉洛爾、丙萘洛爾、普萘洛爾、索他洛爾、硫氧洛爾、他林洛爾、特他洛爾、替利洛爾、噻嗎洛爾、托利洛爾、希苯洛爾；抗血栓形成藥和作用于血管藥物醋托啡烷、阿司匹林、阿加曲班、巴美生、琥珀苯呋地爾、苯碘達(dá)隆、倍他司汀、溴長(zhǎng)春胺、丁苯碘胺、胞磷膽堿、氯苯呋醇、氯吡格雷、環(huán)扁桃酯、達(dá)肝素、雙嘧達(dá)莫、氫普拉明、依諾肝素、芬地林、艾芬地爾、依洛前列素、吲哚布芬、伊波格雷、異克舒令、肝素、lamifiban、米多君、那屈肝素、煙醇、布酚寧、奧扎格雷、哌克昔林、苯丙醇胺、普尼拉明、paraveroline、瑞肝素鹽、利多格雷、舒洛地爾、替諾非君、亭扎肝素、三氟柳、煙酸占噻噸酯；抗糖尿病藥阿卡波糖、氨磺丁脲、格列波脲、格列噻唑、米格列醇、瑞格列奈、曲格列酮、間氨磺丁脲、托瑞司他、煙酰胺；抗腫瘤藥物安西他濱、安曲霉素、阿扎胞苷、偶氮絲氨酸、6-氮雜尿苷、比爾魯胺、卡柔比星、嗜癌霉素、苯丁酸氮芥、氯脲菌素、阿糖胞苷、柔紅霉素、地磷酰胺、秋水仙胺、二甲葉酸、6-二偶氮-5-氧代-L-正亮氨酸、docetaxel、去氧氟尿苷、多柔比星、屈洛昔芬、依達(dá)曲沙、依氟鳥(niǎo)氨酸、依諾他濱、表柔比星、環(huán)硫雄醇、依他硝唑、依托泊苷、芬維A胺、氟達(dá)拉濱、氟尿嘧啶、吉西他濱、己烷雌酚、伊達(dá)比星、氯尼達(dá)明、甘露莫司汀、美法侖、美諾立爾、6-巰基嘌呤、甲氨蝶呤、二溴甘露醇、二溴衛(wèi)矛醇、絲裂霉素、米托蒽醌、莫哌達(dá)醇、麥考酚酸、9-甲葉酸、諾拉霉素、紫杉醇、噴司他丁、吡柔比星、吡曲克辛、普卡霉素、鬼臼酸、卟吩姆鈉、泊非霉素、丙帕鍺、嘌羅霉素、雷莫司汀、維生素A酸、羅喹美克、鏈黑霉素、鏈佐星、替尼泊苷、細(xì)格孢氮雜酸、硫咪嘌呤、硫鳥(niǎo)嘌呤、tomudex、托泊替堪、三甲曲沙、殺結(jié)核菌素、烏苯美司、長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春地辛、長(zhǎng)春瑞賓、佐柔比星；抗?jié)兯?-乙酰氨基己酸、阿巴前列素、西曲酸酯、西咪替丁、依卡倍特、恩前列素、艾沙拉唑、伊索拉定、米索前列醇、奧美拉唑、奧諾前列素、泮托拉唑、普勞諾托、利奧前列素、羅沙前列醇、羅曲酸、索法酮、曲莫前列素；抗高血脂藥物atorvastatin、西司他丁、制皮菌素、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、制霉菌素、噴司他丁、胃酶抑素、普伐他汀鈉、辛伐他??；抗生素美西林、阿莫西林、氨芐西林、阿帕西林、阿哌環(huán)素、阿撲西林、疊氮氯霉酸、阿度西林、阿洛西林、氨曲南、苯沙酸、芐基青霉酸、比阿培南、二環(huán)霉素、卷曲霉素、羧芐西林、卡茚西林、卡蘆莫南、頭孢克洛、頭孢羥氨芐、頭孢孟多、頭孢曲秦、頭孢西酮、頭孢唑林、頭孢拉宗、頭孢克定、頭孢地尼、頭孢托侖、頭孢吡肟、頭孢他美、頭孢克肟、頭孢甲肟、頭孢美唑、頭孢米諾、頭孢地秦、頭孢尼西、頭孢哌酮、頭孢雷特、頭孢噻肟、頭孢替坦、頭孢替安、頭孢西丁、頭孢唑蘭、頭孢咪唑、頭孢匹胺、頭孢匹羅、頭孢丙烯、頭孢沙定、頭孢磺啶、頭孢他啶、頭孢特侖、頭孢替唑、頭孢布烯、頭孢噻呋、頭孢唑肟、頭孢曲松、頭孢呋辛、頭孢唑南、頭孢乙氰鈉、頭孢氨芐、頭孢來(lái)星、頭孢噻啶、頭孢菌素C、頭孢噻吩、頭孢匹林鈉、頭孢拉定、氯霉素、金霉素、西諾沙星、cyprofloxacin、克拉維酸、氯甲西林、氯唑西林、環(huán)青霉素、環(huán)絲氨酸、地美環(huán)素、雙氯西林、依匹西林、芬貝西林(fenbecillin)、氟氧頭孢、氟氯西林、海他西林、亞胺培南、侖氨西林、氯碳頭孢、賴(lài)甲環(huán)素、磺胺米隆、甲氯環(huán)素、美羅培南、美坦西林、美他環(huán)素、甲氧西林鈉、美洛西林、米諾環(huán)素、拉氧頭孢、莫匹羅星、堆囊粘菌素、負(fù)霉素、新生霉素、苯唑西林、帕尼培南、青霉素G鉀鹽、阿地西林、阿美西林、青霉素V、非奈西林鉀鹽、匹哌環(huán)素、哌拉西林、吡利霉素、泊非霉素、丙匹西林、喹那西林、利替培南、羅利環(huán)素、山環(huán)素、西地霉素、大觀(guān)霉素、舒巴坦、磺芐西林、替莫西林、四環(huán)素、替卡西林、替吉莫南、殺結(jié)核菌素、阿奇霉素、克拉霉素、地紅霉素、恩維霉素、紅霉素、交沙霉素、麥迪霉素、麥白霉素、竹桃霉素、利福布汀、利福米特、利福霉素、利福昔明、羅他霉素、螺旋霉素、醋竹桃霉素、紫霉素、維吉霉素；阿米卡星、安普霉素、阿貝卡星、地貝卡星、雙氫鏈霉素、阿司米星、慶大霉素、小諾米星、新霉素、奈替米星、巴龍霉素、核糖霉素、西索米星、大觀(guān)霉素、鏈霉素、妥布霉素、丙大觀(guān)霉素；巴氨西林、頭孢卡品、頭孢特侖新戊酯、頭孢泊肟、proxetil、帕尼培南、匹氨西林、匹夫頭孢氨芐、舒他西林、酞氨西林；卡波霉素、克林霉素、林可霉素、米卡霉素、羅沙米星、環(huán)丙沙星、克林沙星、二氟沙星、依諾沙星、恩氟沙星、氟羅沙星、氟甲喹、格帕沙星、洛美沙星、那氟沙星、萘啶酸、諾氟沙星、氧氟沙星、pazufloxacin、培氟沙星、吡哌酸、吡咯米酸、蘆氟沙星、司氟沙星、托氟沙星、trovafloxacin、氯莫環(huán)素、胍甲環(huán)素、土霉素、硝呋吡醇、硝呋拉嗪、對(duì)氨基水楊酸、對(duì)氨基水楊酸酰肼、氯法齊明、脫氧雙氫鏈霉素、乙胺丁醇、葡煙腙、異煙肼、奧匹煙肼、氨基水楊酸苯酯、利福平、利福噴汀、水楊煙肼、4，4′-sulfynyldianiline、醋地砜、氨苯砜、琥珀氨苯砜、對(duì)磺胺?；S胺、噻唑砜、醋磺胺林、磺胺米隆、4′-(甲基氨磺?；?磺胺酰苯胺、柳氮磺嘧啶、磺胺苯酰、磺胺醋酰、磺胺氯達(dá)嗪、磺胺柯定、磺胺西汀、磺胺嘧啶、磺胺戊烯、磺胺地索辛、磺胺多辛、磺胺乙二唑、磺胺脒、磺胺胍諾、磺胺林、磺胺甲嘧啶、磺胺對(duì)甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲二唑、磺胺甲氧甲嘧啶(sulfamethomidine)、磺胺甲噁唑、磺胺甲氧嗪、磺胺甲噻唑、磺胺美曲、磺胺米柯定、磺胺噁唑、磺胺、2-對(duì)-磺胺?；桨坊掖肌4-磺胺?；前?、磺胺?；?、N-磺胺?；?3，4-二甲苯胺、磺胺培林、磺胺苯吡唑、磺胺普羅林、磺胺吡嗪、磺胺吡啶、磺胺異噻唑、磺胺均三嗪、磺胺噻唑、磺胺硫脲、磺胺索嘧啶、磺胺異噁唑、4-磺胺基水楊酸；負(fù)霉素、卡蘆莫南、氯羥喹、硝羥喹啉、精氨酸、甲硝唑；抗病毒藥物阿昔洛韋、金剛烷胺、cidofovir、阿糖胞苷、去羥肌苷、雙去氧腺苷、依度尿苷、泛昔洛韋、氟尿苷、更昔洛韋、碘苷、indanavir、乙氧丁酮醛、拉米夫定、MADU、噴昔洛韋、鬼臼毒素、利巴韋林、金剛乙烷、沙奎那韋、索立夫定、stavudine、曲氟尿苷、伐昔洛韋、阿糖腺苷、珍那佐酸、扎西他賓、齊多夫定；骨吸收抑制劑阿侖膦酸、布替膦酸、依替膦酸、奧昔膦酸、帕米膦酸、利塞膦酸；抗癡呆藥物amiridine、拉扎貝胺、莫非吉蘭、salbeluzol、奧拉西坦、ipidacrine、奈拉西坦、他克林、維吖啶。
6.權(quán)利要求4和5的化合物，其中所述前體藥物選自以下藥物抗炎藥阿司匹林、5-氨基乙酰水楊酸、卡洛芬、雙氯芬酸鈉、二氟尼柳、依托度酸、氟芬那酸、氟尼辛、氟比洛芬、布洛芬、吲哚美辛、吲哚布洛芬、酮洛芬、酮咯酸、氯諾昔康、洛索洛芬、甲氯芬那酸、甲芬那酸、美洛昔康、氨水楊酸、萘普生、尼氟酸、奧沙拉秦、吡羅昔康、雙水楊酯、舒林酸、舒洛芬、替諾昔康、噻洛芬酸、托芬那酸、托美丁、佐美酸、托莫普羅；止痛藥對(duì)乙酰氨基酚、乙酰水楊酰水楊酸、苯嘧洛芬、丁丙諾啡、布托啡諾、辣椒堿、雙醋瑞因、雙氫可待因、乙基嗎啡、丁香酚、保泰松、美普他酚、嗎啡、納布非、噴他佐辛、thiorphan、曲馬朵、阿克他寧；支氣管擴(kuò)張藥和激活膽堿能系統(tǒng)的藥物沙丁胺醇、卡布特羅、克侖特羅、白屈菜堿、羥乙茶堿、非諾特羅、異丙托溴銨、奧西那林、奧昔布寧、吡布特羅、沙美特羅、特布他林、噻托溴銨、扎普司特、環(huán)戊君、NS-21、2-羥基-2，2-二苯基-N-(1，2，3，6-四氫吡啶-4-基甲基)乙酰胺；祛痰藥/粘液溶解藥乙?；腚装彼?、氨溴索、溴己新、羧甲司坦、愈創(chuàng)木酚、阿魏酸、美司坦鹽酸鹽、索布瑞醇；鎮(zhèn)喘藥/抗過(guò)敏抗組胺藥西替利嗪、chromoglycate、組胺、左卡巴斯汀、洛度沙胺、montelukast、特非那定、溴己新；ACE抑制劑卡托普利、依那普利、賴(lài)諾普利、氯沙坦、雷米普利；β-受體阻滯劑阿普洛爾、阿替洛爾、布拉洛爾、拉貝洛爾、美替洛爾、美托洛爾、吲哚洛爾、普萘洛爾、噻嗎洛爾；抗血栓形成藥和作用于血管藥物阿司匹林、醋托啡烷、阿加曲班、氯吡格雷、達(dá)肝素、雙嘧達(dá)莫、依諾肝素、肝素、依洛前列素、米多君、奧扎格雷、苯丙醇胺、三氟柳；抗糖尿病藥托瑞司他、煙酰胺；抗腫瘤藥物安曲霉素、柔紅霉素、多柔比星、表柔比星、氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、長(zhǎng)春堿；抗?jié)兯幬鬟涮娑?、奧美拉唑、泮托拉唑；抗高血脂藥物洛伐他汀、普伐他汀鈉鹽、辛伐他??；抗生素阿莫西林、氨芐西林、氨曲南、比阿培南、羧芐西林、頭孢克洛、頭孢羥氨芐、頭孢孟多、頭孢曲秦、頭孢西丁、克拉維酸、雙氯西林、亞胺培南、甲氯環(huán)素、美他環(huán)素、拉氧頭孢、帕尼培南、舒巴坦、阿奇霉素、紅霉素、交沙霉素、麥白霉素、利福布丁、利福米特、利福霉素、慶大霉素、巴龍霉素、西索米星、巴氨西林、卡波霉素、克林霉素、環(huán)丙沙星、克林沙星、二氟沙星、恩氟沙星、洛美沙星、那氟沙星、諾氟沙星、氧氟沙星、吡哌酸、阿哌環(huán)素、氯莫環(huán)素、土霉素、硝呋吡醇、硝呋拉嗪、異煙肼、利福平、利福噴汀、氨苯砜、噻唑砜、磺胺甲噁唑、磺胺噁唑、甲硝唑、精氨酸；抗病毒藥物阿昔洛韋、泛昔洛韋、更昔洛韋、噴昔洛韋、利巴韋林、阿糖腺苷、齊多夫定；骨吸收抑制劑阿侖膦酸、依替膦酸、帕米膦酸；抗癡呆藥物奧拉西坦、他克林、維吖啶。
7.權(quán)利要求1-3的化合物，其中所述藥物前體為甾族化合物，其中A＝R-具有下面的結(jié)構(gòu) (S-I)其中在通式中提及的CH基團(tuán)的氫或CH2基團(tuán)的兩個(gè)氫的取代中，可以存在以下的取代基在1-2位可以有雙鍵；在2-3位可以是下面的取代基； (S-II)在2位可以是Cl、Br；在3位可以是CO、-O-CH2-CH2-Cl、OH；在3-4位可以有雙鍵；在4-5位可以有雙鍵；在5-6位可以有雙鍵；在5-10位可以有雙鍵；在6位可以是Cl、F、CH3、-CHO；在7位可以是Cl、OH；在9位可以是Cl、F；在11位可以是OH、CO、Cl、CH3；在16位可以是CH3、OH、＝CH2；在17位可以是OH、CH3、OCO(O)ua(CH2)vaCH3、C≡CH或 (S-III)其中ua是等于0或1的整數(shù)，va是0-4的整數(shù)；在16-17位可以有以下基團(tuán) (S-IVa)(S-IVb)(S-IVc)R和R’，彼此相同或不同，可以為氫或1-4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，優(yōu)選R＝R’＝CH3；R”為-(CO-L)t-(L)t2-(XOI)t1-其中t、t1和t2為彼此相同或不同的整數(shù)，等于0或1，前提是當(dāng)t＝0時(shí)t2＝1和當(dāng)t＝1時(shí)t2＝0，并且當(dāng)A不含-OH基團(tuán)時(shí)，t和t1，或t2和t1不能同時(shí)等于0；二價(jià)橋連基L選自(CR4R5)na(O)nb(CR4R5)n’a(CO)n’b(O)n”b(CO)n”’b(CR4R5)n”a其中na、n’a和n”a，彼此相同或不同，為0-6的整數(shù)，優(yōu)選為1-3；nb、n’b、n”b和n”’b，彼此相同或不同，為等于0或1的整數(shù)；R4、R5，彼此相同或不同，選自H、1-5個(gè)碳原子，優(yōu)選1-3個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基；XOI為如上定義的X，或等于X2I，其中X2I等于OH、CH3、Cl、N(-CH2-CH3)2、SCH2F、SH，或 (s-v)
8.權(quán)利要求7的化合物，其中式(S-I)中的R”為-CO-CH2OH或-CH(CH3)-CH2-CH2-COOH。
9.權(quán)利要求7和8的化合物，其中所述前體甾族化合物為在3位和/或11位具有羥基官能團(tuán)，和/或在R”的末端位具有羥基或羧基官能團(tuán)的那些甾族化合物。
10.權(quán)利要求7-9的化合物，其中所述前體甾族化合物選自以下化合物布地奈德、氫化可的松、阿氯米松、阿爾孕酮、倍氯米松、倍他米松、氯潑尼松、氯倍他索、氯倍他松、氯可托龍、氯潑尼醇、可的松、皮質(zhì)酮、地夫可特、地奈德、去羥米松、地塞米松、二氟拉松、二氟可龍、二氟潑尼酯、氟扎可特、氟氯奈德、二氟美松、氟尼縮松、氟輕松、醋酸氟輕松、丁基氟可丁、氟可龍、氟米龍、醋酸氟培龍、醋酸氟潑尼定、氟潑尼龍、氟氫縮松、氟莫可他、哈西奈德、丙酸鹵倍他索、鹵米松、醋酸鹵潑尼松、氫可他酯、氯替潑諾Etabonate、甲羥松、甲潑尼松、甲潑尼龍、糠酸莫米松、帕拉米松、潑尼卡酯、潑尼松龍、潑尼松龍25-二乙基氨基醋酸酯、潑尼松龍磷酸鈉、潑尼松、強(qiáng)的松龍戊酸酯、潑尼立定、利美索龍、曲安西龍、曲安奈德、21-乙酰氧基孕烯醇酮、可的伐唑、安西奈德、丙酸氟替卡松、馬潑尼酮、替可的松、己曲安奈德、熊去氧膽酸、鵝去氧膽酸、Mitatrienediol、莫克雌醇、乙炔基雌二醇、雌二醇、美雌醇。
11.用作藥物的權(quán)利要求1-10的化合物或其鹽，或它們的組合物；前提是在式(I)化合物中，當(dāng)B的X2為任選取代的直鏈或支鏈C1-C20亞烷基或具有5-7個(gè)碳原子的亞環(huán)烷基時(shí)，用于式(I)化合物的具有如上所述的被飽和的自由價(jià)的式A＝R-T1-藥物不屬于以下類(lèi)型用于失禁的藥物、抗血栓形成的藥物(ACE-抑制劑)、前列腺素、抗炎藥(NSAIDS和皮質(zhì)類(lèi)固醇)，但不排除抗炎的NSAIDS的對(duì)乙酰氨基酚和舒林酸。
12.權(quán)利要求1-10的化合物或鹽，或它們的組合物在制備用于治療氧化應(yīng)激反應(yīng)的藥物中的用途；包括，當(dāng)B的X2為直鏈或支鏈C1-C20亞烷基或具有5-7個(gè)碳原子的亞環(huán)烷基時(shí)，具有如權(quán)利要求1中所述的被飽和自由價(jià)的式A＝R-T1-藥物屬于以下類(lèi)型用于失禁的藥物、抗血栓形成的藥物(ACE-抑制劑)、前列腺素、抗炎藥。
13.含有作為活性成分的權(quán)利要求1-10的化合物或其鹽的藥用制劑。
全文摘要
具有通式(I)A－B－N(O)
文檔編號(hào)C07C69/708GK1433396SQ00814049
公開(kāi)日2003年7月30日 申請(qǐng)日期2000年7月27日 優(yōu)先權(quán)日1999年8月12日
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