本發(fā)明屬于肥料
技術領域：
，具體涉及一種誘導瓜類蔬菜白粉病抗性的葉面肥及其制備方法。
背景技術：
：瓜類蔬菜是世界蔬菜產業(yè)重要種類之一，主要包括黃瓜、苦瓜、冬瓜、絲瓜、南瓜等葫蘆科作物，在中國蔬菜生產中占有極其重要的地位。隨著瓜類蔬菜種植面積的不斷擴大，各種病蟲危害日趨嚴重，其中白粉病是瓜類蔬菜生產中普遍發(fā)生的真菌性病害之一，該病從苗期到收獲期均可發(fā)生。由于白粉病為多循環(huán)的真菌性病害，潛育期短，一個生長季節(jié)可繁殖多代，且繁殖率高，產生的孢子可借助空氣大范圍傳播，并多次重復侵染寄主，使葉片、葉柄、莖蔓和果實受到感染，嚴重影響瓜類蔬菜的正常生長發(fā)育，降低了瓜類蔬菜的產量和品質。長期以來，生產上對瓜類蔬菜白粉病的防治主要采取化學藥劑防治與選育抗病品種的方法，前者易造成殘毒和環(huán)境污染，而抗病品種的抗性往往在使用過程中易發(fā)生不同程度的退化。因此，研究開發(fā)高效實用的瓜類白粉病防治方法具有重要的現實意義。技術實現要素：針對現有技術的不足，本發(fā)明的目的是提供一種誘導瓜類蔬菜白粉病抗性的葉面肥。本發(fā)明葉面肥通過誘導瓜類蔬菜對白粉病的抗性，不僅可以顯著減輕化學藥劑造成的污染，提高食品安全，還能夠作為抗病品種應用的重要補充，并且可顯著促進瓜類蔬菜生長，改善品質，提高產量，是一種有效的白粉病防治途徑。本發(fā)明通過以下技術方案來實現：一種誘導瓜類蔬菜白粉病抗性的葉面肥，包括下述重量份的原材料：水楊酸1～4份、茉莉酸甲酯2～8份、殼寡糖2～5份、豆甾醇1～3份、蚯蚓水解液10～30份、新高脂膜1～13份、甜菜堿1～3份、潤濕劑1～5份、分散劑1～5份、水20～50份。優(yōu)選地，一種誘導瓜類蔬菜白粉病抗性的葉面肥，包括下述重量份的原材料：水楊酸2份、茉莉酸甲酯5份、殼寡糖3份、豆甾醇3份、蚯蚓水解液23份、新高脂膜9份、甜菜堿2份、潤濕劑3份、分散劑3份、水35份。優(yōu)選地，所述蚯蚓水解液制備方法為：(1)取鮮活的蚯蚓用去離子水洗凈后，放入高速組織搗碎機中搗碎；(2)按蚯蚓與水的質量比例為1：1～1：3加入去離子水，混勻后放入反應釜中，用濃度為0.02mol/l的稀鹽酸調節(jié)溶液ph至6～8，并在53～58℃溫度下進行自溶水解，水解時間為49～53h；(3)將自水解反應完的混合物放入離心機中，在離心轉速為4000～5000r/min的條件下離心22～28min，取上清液，即為蚯蚓水解液。優(yōu)選地，一種誘導瓜類蔬菜白粉病抗性的葉面肥，所述潤濕劑為月桂酰二乙醇胺、椰油酸二乙醇胺或脂肪醇聚氧乙烯醚的一種或幾種。優(yōu)選地，一種誘導瓜類蔬菜白粉病抗性的葉面肥，所述分散劑為脫糖木質素磺酸鈉、脫糖縮合木質素磺酸鈉或苯乙烯丙烯酸的一種或幾種。本發(fā)明所述各成分作用機理如下：水楊酸：水楊酸又稱鄰羥基苯甲酸，是植物體內存在的一種簡單的酚類化合物，能夠調控植物體內一些重要的代謝過程，激活植物抗病反應機制，是植物抗病反應的信號分子和誘導植物產生系統獲得抗性的信號分子，直接誘導多種植物病程相關蛋白基因的表達，從而提高植物對病原物，如病毒、細菌、真菌等的系統抗性。茉莉酸甲酯：茉莉酸甲酯是廣泛存在于植物中的內源激素，同時也是一種信號分子，在植物抗逆方面(如干旱、高溫、高鹽、重金屬脅迫等)具有重要意義。茉莉酸甲酯可誘導植物防御相關基因的表達及植物體內多酚氧化酶(ppo)、苯丙氨酸解氨酶(pal)和蛋白酶抑制劑(pi、ci)活性的變化，重新構建植物的代謝體系，從而促進植物化學防御和物理防御的形成，使得植物給自身提供更多的保護。其次，茉莉酸甲酯還可通過誘導植物降低營養(yǎng)價值和產生有毒次生代謝產物降低植物發(fā)病率。殼寡糖：殼寡糖是一類由n-乙酰氨基葡萄糖或氨基葡萄糖通過β-(1,4)-糖苷鍵連接起來的低聚合度水溶性的糖類。殼寡糖資源豐富，開發(fā)成本較低，廣泛存在于海洋節(jié)肢動物的甲殼中，也存在于低等動物菌類、昆蟲、藻類細胞膜和高等植物的細胞壁中，是地球上僅次于植物纖維的第二大生物資源。殼寡糖能夠穿過白粉病菌的細胞膜，進入到其細胞核內與dna相結合，從而破壞mrna和蛋白質的合成，最終導致白粉病菌死亡；其次，殼寡糖還能夠選擇性地螯合金屬離子和微量元素，對白粉病菌的正常生理功能造成影響，從而抑制白粉病菌的生長繁殖。豆甾醇：豆甾醇又稱豆固醇，是植物甾醇的一種，存在于各種植物油、植物種子、花粉中，大豆中含量豐富。豆甾醇獨特的分子結構是保持細胞膜穩(wěn)定性的基礎。其次，豆甾醇具有生理活性強、營養(yǎng)價值高等特征，同時還具有抗炎癥、抗腫瘤和抗氧化等作用。蚯蚓水解液：蚯蚓體的干物質蛋白質含量高達70％左右，且蚯蚓消化道內有10多種蛋白水解酶，利用這些蛋白酶類可對蚯蚓本體的蛋白質進行有效水解，獲得蚯蚓水解溶液，其營養(yǎng)成分主要由18種氨基酸和豐富的短肽組成，且水解液中的抗菌肽相對分子質量低于10000，具有強的抑菌活性、廣泛的抗菌譜和熱穩(wěn)定性，能以分子狀態(tài)穿過細胞膜進入植物細胞內，易被植物吸收。研究表明，蚯蚓水解液能有效抑制白粉病菌的菌絲生長和孢子萌發(fā)，從而抑制病菌生長繁殖。其次，蚯蚓水解液中還富含鉀、鋅、鐵、錳等營養(yǎng)元素以及維生素a、維生素b1、維生素b2、維生素e、維生素c等營養(yǎng)物質，可為植物提供豐富的營養(yǎng)物質，顯著促進植物生長。新高脂膜：新高脂膜常作為蒸騰抑制劑，能在作物表面形成一層肉眼看不見的高分子保護膜，優(yōu)化植物吸水、透氣、透光質量，屏蔽病蟲撲食信號和削弱傳播媒介，抵抗和防御自然環(huán)境災害。新高脂膜與本發(fā)明功效成分復配，可有效減少功效成分的流失，提高葉面肥吸收利用率，從而顯著增強植物抗病抗逆性，促進植物生長。甜菜堿：甜菜堿是一類季胺類化合物，也是一種非毒性的滲透調節(jié)物質，能夠提高細胞的滲透調節(jié)能力，降低因滲透失水造成對細胞膜、酶及蛋白質結構與功能的傷害，在調節(jié)植物對環(huán)境脅迫的適應性，提高植物對各種脅迫因子抗性等方面具有重要的生理作用。潤濕劑：潤濕劑可有效降低肥液的表面張力，改善肥液在葉面表面的潤濕性，使之均勻展布、防止珠落，延長肥液在葉片表面的停留時間以保證蔬菜對養(yǎng)分的充分吸收。分散劑：分散劑是一種兩親性化學品，可以增加油性及水性組分在同一體系中的相容性，并降低分散體系中固體或液體粒子的聚集，從而保持分散體系的相對穩(wěn)定。一種誘導瓜類蔬菜白粉病抗性的葉面肥的制備方法，包括以下步驟：(1)制備蚯蚓水解液；(2)將水加入反應釜中，加熱至40～50℃時，向反應釜中加入水楊酸和潤濕劑，攪拌反應0.5～1h，得溶液a；(3)待溶液a冷卻至30～40℃時，向其中加入豆甾醇、殼寡糖和分散劑，攪拌反應0.5～1h，得溶液b；(4)將步驟(1)所得蚯蚓水解液、步驟(2)所得溶液a、步驟(3)所得溶液b與新高脂膜、茉莉酸甲酯及甜菜堿混合均勻，滅菌，灌裝，即得本發(fā)明的葉面肥。本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明將抑菌成分與誘導瓜類蔬菜對白粉病抗性的功效成分按一定比例復配，使各成分不僅可在體系中穩(wěn)定共存，而且成分之間具有協同增效作用。定期使用本發(fā)明的葉面肥，不僅可顯著提高瓜類蔬菜對白粉病的抗性，降低白粉病菌侵染率，還可殺滅蔬菜表面及內部感染的白粉病菌，阻止其對蔬菜的進一步損壞。其次，本發(fā)明的葉面肥含有豐富的營養(yǎng)成分，定期噴施本產品，可顯著促進瓜類蔬菜的生長，改善品質，提高產量。具體實施方式為了使本發(fā)明的目的、技術方案及優(yōu)點更加清楚明白，以下結合實施例，對本發(fā)明進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。實施例1一種誘導瓜類蔬菜白粉病抗性的葉面肥，包括下述重量份的原材料：水楊酸4份、茉莉酸甲酯2份、殼寡糖5份、豆甾醇1份、蚯蚓水解液30份、新高脂膜1份、甜菜堿1份、月桂酰二乙醇胺1份、脫糖木質素磺酸鈉5份、水20份。上述一種誘導瓜類蔬菜白粉病抗性的葉面肥的制備方法，包括以下步驟：(1)制備蚯蚓水解液：取鮮活的蚯蚓用去離子水洗凈后，放入高速組織搗碎機中搗碎；按蚯蚓與水的質量比例為1：3加入去離子水，混勻后放入反應釜中，用濃度為0.02mol/l的稀鹽酸調節(jié)溶液ph至6，并在53℃溫度下進行自溶水解，水解時間為53h；將自水解反應完的混合物放入離心機中，在離心轉速為4000r/min的條件下離心28min，取上清液，即為蚯蚓水解液。(2)將水加入反應釜中，加熱至40℃時，向反應釜中加入水楊酸和月桂酰二乙醇胺，攪拌反應1h，得溶液a；(3)待溶液a冷卻至40℃時，向其中加入豆甾醇、殼寡糖和脫糖木質素磺酸鈉，攪拌反應0.5h，得溶液b；(4)將步驟(1)所得蚯蚓水解液、步驟(2)所得溶液a、步驟(3)所得溶液b與新高脂膜、茉莉酸甲酯及甜菜堿混合均勻，滅菌，灌裝，即得本發(fā)明的葉面肥。實施例2一種誘導瓜類蔬菜白粉病抗性的葉面肥，包括下述重量份的原材料：水楊酸2份、茉莉酸甲酯5份、殼寡糖3份、豆甾醇3份、蚯蚓水解液23份、新高脂膜9份、甜菜堿2份、椰油酸二乙醇胺3份、脫糖縮合木質素磺酸鈉3份、水35份。上述一種誘導瓜類蔬菜白粉病抗性的葉面肥的制備方法，包括以下步驟：(1)制備蚯蚓水解液：取鮮活的蚯蚓用去離子水洗凈后，放入高速組織搗碎機中搗碎；按蚯蚓與水的質量比例為1：2加入去離子水，混勻后放入反應釜中，用濃度為0.02mol/l的稀鹽酸調節(jié)溶液ph至7，并在55℃溫度下進行自溶水解，水解時間為51h；將自水解反應完的混合物放入離心機中，在離心轉速為4800r/min的條件下離心25min，取上清液，即為蚯蚓水解液。(2)將水加入反應釜中，加熱至45℃時，向反應釜中加入水楊酸和椰油酸二乙醇胺，攪拌反應0.7h，得溶液a；(3)待溶液a冷卻至35℃時，向其中加入豆甾醇、殼寡糖和脫糖縮合木質素磺酸鈉，攪拌反應0.7h，得溶液b；(4)將步驟(1)所得蚯蚓水解液、步驟(2)所得溶液a、步驟(3)所得溶液b與新高脂膜、茉莉酸甲酯及甜菜堿混合均勻，滅菌，灌裝，即得本發(fā)明的葉面肥。實施例3一種誘導瓜類蔬菜白粉病抗性的葉面肥，包括下述重量份的原材料：水楊酸1份、茉莉酸甲酯8份、殼寡糖2份、豆甾醇2份、蚯蚓水解液10份、新高脂膜13份、甜菜堿3份、脂肪醇聚氧乙烯醚5份、苯乙烯丙烯酸1份、水50份。上述一種誘導瓜類蔬菜白粉病抗性的葉面肥的制備方法，包括以下步驟：(1)制備蚯蚓水解液：取鮮活的蚯蚓用去離子水洗凈后，放入高速組織搗碎機中搗碎；按蚯蚓與水的質量比例為1：1加入去離子水，混勻后放入反應釜中，用濃度為0.02mol/l的稀鹽酸調節(jié)溶液ph至8，并在58℃溫度下進行自溶水解，水解時間為49h；將自水解反應完的混合物放入離心機中，在離心轉速為5000r/min的條件下離心22min，取上清液，即為蚯蚓水解液。(2)將水加入反應釜中，加熱至50℃時，向反應釜中加入水楊酸和脂肪醇聚氧乙烯醚，攪拌反應0.5h，得溶液a；(3)待溶液a冷卻至30℃時，向其中加入豆甾醇、殼寡糖和苯乙烯丙烯酸，攪拌反應1h，得溶液b；(4)將步驟(1)所得蚯蚓水解液、步驟(2)所得溶液a、步驟(3)所得溶液b與新高脂膜、茉莉酸甲酯及甜菜堿混合均勻，滅菌，灌裝，即得本發(fā)明的葉面肥。對比例1葉面肥中不添加水楊酸、茉莉酸甲酯、殼寡糖、豆甾醇，包括下述重量份的原材料：蚯蚓水解液23份、新高脂膜9份、甜菜堿2份、椰油酸二乙醇胺3份、脫糖縮合木質素磺酸鈉3份、水35份。上述葉面肥的制備方法，包括以下步驟：(1)制備蚯蚓水解液：取鮮活的蚯蚓用去離子水洗凈后，放入高速組織搗碎機中搗碎；按蚯蚓與水的質量比例為1：2加入去離子水，混勻后放入反應釜中，用濃度為0.02mol/l的稀鹽酸調節(jié)溶液ph至7，并在55℃溫度下進行自溶水解，水解時間為51h；將自水解反應完的混合物放入離心機中，在離心轉速為4800r/min的條件下離心25min，取上清液，即為蚯蚓水解液。(2)將水加入反應釜中，加熱至45℃時，向反應釜中加入椰油酸二乙醇胺，攪拌反應0.7h，得溶液a；(3)待溶液a冷卻至35℃時，向其中加入脫糖縮合木質素磺酸鈉，攪拌反應0.7h，得溶液b；(4)將步驟(1)所得蚯蚓水解液、步驟(2)所得溶液a、步驟(3)所得溶液b與新高脂膜和甜菜堿混合均勻，滅菌，灌裝，即得本發(fā)明的葉面肥。試驗例1本發(fā)明的一種誘導瓜類蔬菜白粉病抗性的葉面肥對瓜類蔬菜白粉病菌的抑制作用試驗對象：黃瓜白粉病菌、南瓜白粉病菌、甜瓜白粉病菌。試驗樣品：試驗組：本發(fā)明實施例1～3和對比例1所制備的葉面肥；空白對照組：清水；參考對照組：25％三唑酮可濕性粉劑。試驗方法：將試驗樣品用無菌去離子水稀釋成50、150、300、600倍，加入到定量的滅菌后冷卻至50℃左右的pda培養(yǎng)基中，充分搖勻，制成含藥平板，每處理重復3次。用直徑5mm的打孔器打取生長良好的菌柄，將菌柄菌絲面向下接種于含藥平板中央，置于28℃恒溫培養(yǎng)，每天觀察菌絲生長情況，待空白對照長滿皿后測量菌落直徑，計算菌絲生長抑制率。計算公式如下：抑菌率(％)＝[(空白對照菌落直徑-處理菌落直徑)/(空白對照菌落直徑-5)]×100％測定結果：檢測結果如下表1所示。表1對瓜類蔬菜白粉病菌的抑制作用由表1可知，本發(fā)明實施例1～3制備的一種誘導瓜類蔬菜白粉病抗性的葉面肥稀釋至50倍、150倍時，對黃瓜白粉病菌、南瓜白粉病菌和甜瓜白粉病菌的抑菌率均達到100％。當稀釋至300倍時，本發(fā)明實施例1～3制備的葉面肥對三種白粉病菌的抑菌率均達到95.3％以上；當稀釋至600倍時，本發(fā)明實施例1～3制備的葉面肥對三種白粉病菌的抑菌率均達到86.7％以上，其抑制效果由強到弱依次為黃瓜白粉病菌>甜瓜白粉病菌>南瓜白粉病菌。上述測定結果表明，與25％三唑酮相比，本發(fā)明的葉面肥對瓜類蔬菜白粉病菌具有極強的體外抑制作用，抑菌效果顯著，且安全無副作用，應用前景廣闊。試驗例2本發(fā)明的一種誘導瓜類蔬菜白粉病抗性的葉面肥對黃瓜田間種植的影響試驗品種：新泰密刺。試驗樣品：試驗組：本發(fā)明對比例1和實施例1～3所制備的葉面肥；對照組：清水。試驗方法：試驗在日光溫室進行，采用完全隨機區(qū)組設計，每塊試驗小區(qū)面積為3.5m2。小區(qū)四周設誘發(fā)行，第一次噴施葉面肥后5d，在誘發(fā)行中放入發(fā)病的盆栽黃瓜幼苗使誘發(fā)行感病，每0.8m放一盆。試驗共設5個處理，處理1為清水對照，處理2為本發(fā)明對比例1所制備的葉面肥，處理3～5分別為本發(fā)明實施例1～3所制備的葉面肥，每個處理重復3次。于黃瓜定植后5d、初花期、初果期、盛果期各噴施一次，黃瓜定植后5d噴施量為1kg/畝，初花期噴施量為3kg/畝，初果期和盛果期噴施量均為10kg/畝；處理1噴施等量清水。下午4點以后噴施，噴灑于上、中部葉片，尤其是葉片背面。試驗田其他的基肥、追肥、灌溉、及其他田間管理等條件均一致。樣品采集及指標測定：(1)病情指數及防效的測定：對照發(fā)病較充分后調查病情，按五點取樣法取樣，每點調查5株。(2)單瓜重、瓜條數和單株產量的測定：按五點取樣法，于黃瓜盛果期采收取樣，每點調查5株。(3)黃瓜葉片中與抗病相關的酶活性測定：分別于黃瓜定植后5d、初花期、初果期噴施葉面肥后第2d取第2葉測過氧化物酶(pod)、超氧化物歧化酶(sod)、苯丙氨酸解氨酶(pal)及過氧化氫酶(cat)活性。1、對黃瓜白粉病病情指數及防效的影響表2對黃瓜白粉病病情指數及防效的影響處理病情指數(％)防效(％)清水98.70對比例159.339.9實施例118.581.3實施例215.184.7實施例317.682.2由表2可知，與對照清水相比，本發(fā)明實施例1～3所制備的葉面肥病情指數均在18.5％以下，防治效果均在81.3％以上。上述測定結果表明，本發(fā)明實施例1～3所制備的葉面肥均能有效防治黃瓜白粉病的發(fā)生。2、對黃瓜單瓜重、瓜條數和單株產量的影響表3對黃瓜單瓜重、瓜條數和單株產量的影響由表3可知，與對照清水相比，本發(fā)明實施例1～3制備的葉面肥可以有效提高黃瓜產量，其中，實施例2效果最佳，與對照清水相比，黃瓜單瓜重、瓜條數和單株產量分別提高40.16％、82.25％、89.76％。3、對黃瓜葉片中與抗病相關的酶活性的影響過氧化物酶(pod)是植物體內普遍存在的一種氧化還原酶，可以催化過氧化氫與多種有機、無機氫供體發(fā)生氧化還原反應，當植物受到病菌侵染后，體內酶活性會發(fā)生某些變化。研究表明，pod能夠產生對入侵微生物有致死性的毒性物質(氧化酚等)，或者誘導植物細胞壁發(fā)生改變，形成物理屏障，引起細胞死亡和抑制病原菌的侵染，從而參與植物的抗病作用。超氧化物歧化酶(sod)是細胞抵御活性氧傷害的保護酶系統的主要組成部分，它可以歧化o2-生成h2o2，細胞中的h2o2又被pod和cat氧化分解，所以只有通過sod、pod、cat協同作用，才能使細胞中的自由基維持在一個低水平。因此，sod、pod及cat在清除自由基、阻止自由基的形成和延緩植物衰老等方面起著重要作用。苯丙氨酸解氨酶(pal)參與了植物抗病次生物質的合成與積累，與植物抗病性有著密切的關系。pal是莽草酸途徑的關鍵性酶，也是植物次生代謝產物，特別是植物保衛(wèi)素和木質素合成途徑中的定速酶。表4對黃瓜葉片中與抗病相關的酶活性的影響(平均值u/g)由表4可知，與清水相比，噴施本發(fā)明對比例1和實施例1～3所制備的葉面肥可顯著提高黃瓜葉片中與抗病相關的酶活性，其中實施例2作用效果最佳，在定植后5d，實施例2黃瓜pod、sod、pal、cat酶活性分別較清水提高87.10％、43.07％、16.45％、23.16％；在初花期，實施例2黃瓜pod、sod、pal、cat酶活性分別較清水提高115.2％、99.76％、83.96％、23.30％；在初果期，實施例2黃瓜pod、sod、pal、cat酶活性分別較清水提高112.9％、97.02％、103.3％、39.71％。上述測定結果表明，本發(fā)明實施例1～3所制備的葉面肥均具有誘導黃瓜體內產生防御酶的能力，從而增強黃瓜對白粉病的抗病能力。由于瓜類蔬菜對白粉病的抗病機理相似，因此，由本發(fā)明實施例試驗結果可知本發(fā)明葉面肥可顯著增強瓜類蔬菜對白粉病的抗病能力，促進瓜類蔬菜生長，并提高產量。當前第1頁12